专利名称：新二氮杂螺烷和它们治疗ccr8介导的疾病的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新二氮杂螺环化合物，制备它们的方法，含有它们的药物组合物以及它们在治疗中的用途。
背景技术：
疾病的初期阶段以及长期的组织再造和肌肉退化依赖于白细胞至炎性损害的募集。白细胞募集涉及白细胞由血管向病变组织中的迁移以及它们的活化，从而导致疾病的进展。这种募集的潜在机理(趋化性)与典型定义的免疫介导的病理性疾病(即过敏性和自身免疫性疾病)以及其它疾病(即动脉粥样硬化和帕金森病)是相似的。因此，白细胞至炎性靶组织募集的介入构成了吸引人的新治疗原理。
趋化因子是小的8-至15-kDa分泌性肝素结合多肽的大家族(＞50成员)，所述肝素结合多肽的基本功能是控制白细胞的运输和活化。根据所享有的结构相似性，它们不同于典型的化学引诱物(即，细菌衍生的N-甲酰基肽、补体成分、脂质分子和血小板活化因子)。所有趋化因子均具有形成二硫键的四个保守的半胱氨酸残基，它们对于3-D结构是至关重要的。根据前两个半胱氨酸的位置可对趋化因子进一步分成亚类。两个主要的亚类为CC-趋化因子(其中半胱氨酸相邻)和CXC-细胞因子(其中半胱氨酸被一个氨基酸隔开)。另外的两个家族，C和CX3C趋化因子，要小得多并且只包括一个或几个成员。
趋化因子的特异性生物效应包括白细胞募集，这种特异性生物效应是通过与七-跨膜G-蛋白偶联受体(GPCRs)的家族相互作用而介导的。这些趋化因子受体的长度约为350个氨基酸，由短的细胞外N-端、七跨膜片段以及细胞内C-端构成。该七跨膜结构域为α-螺旋状，以及在这些结构域之间存在3个细胞内环(intracellular loop)和3个细胞外环(extracellular loop)。
到目前为止，已鉴定出18种人趋化因子受体。其中，有11种CC趋化因子受体，5种CXC受体，1种CX3C受体和1种C受体。通常，CC趋化因子是单核细胞和淋巴细胞的强效化学引诱物，但是为嗜中性白细胞的弱活化剂。一些受体结合多种趋化因子，例如CCR1结合CCL3、CCL5、CCL7和CCL8，然而其它趋化因子受体具有更受限的结合模式。这种配体特异性以及趋化因子受体在特定白细胞亚类上的表达模式，解释了细胞至炎性损害的调节的、受限且特异性的运输。炎症细胞朝向趋化因子梯度的趋化性是通过趋化因子受体的胞质内尾部介导的信号来引发的。下游信号尤其涉及PI3Kγ、MAPK和PKC途径。
免疫细胞在过敏性炎症位置上的集聚发生在变应原刺激后的6-48小时内，这种聚集是变应性疾病的标志。研究显示，在暴露于变应原后的哮喘患者的肺组织中检测到抗原-特异性CD4+T细胞。尽管与嗜酸性细胞相比，浸润性T细胞在数量上相对很少，但令人信服的证据已证明T细胞在发展人哮喘的炎症性过程中起重要的作用。人类中由T细胞所产生的TH2细胞因子水平、IgE的血清水平和哮喘患病率之间存在密切的关系。
已显示人CCR8受体与人趋化因子CCL1(I-309)相互作用。该趋化因子是强效的嗜酸性细胞、T细胞和内皮细胞化学引诱物。在共刺激信号(即CD28)的存在下，最佳TCR交联后，该受体已经显示出在极化的TH2细胞上的瞬时正调节。CCR8在抗原刺激后于活化T细胞上的协同正调节，表明其有助于活化的T细胞至表达CCL1的炎症组织中的炎性病灶的重新分布。事实上，过敏性气道炎症的体内模型已经显示出效应T细胞至炎性肺组织的募集以及TH2细胞因子产生的深阻断，所述过敏性气道炎症的体内模型使用CCR8表达不足的小鼠。此外，在变应原刺激过程中浸润人气道上皮的T细胞已经显示为CCR8阳性。重要的是，变应原刺激之后迁移至气道粘膜下层的CCR8阳性细胞的数目已经显示出与FEV1的减少相关。
考虑到CCR8在TH2细胞趋化性中所起的重要作用，以及TH2细胞在过敏性病症如哮喘中的重要性，CCR8表示用于治疗呼吸系统疾病(包括哮喘、慢性阻塞性肺病和鼻炎)的药物开发的良好靶向。
国际专利申请WO2005/040167描述了对CCR8受体具有活性的二氮杂螺环化合物。
对CCR8受体起作用的药物的期望性质是，它具有高效能，例如由它抑制CCR8受体活性的能力所确定的效能。还期望这种药物的代谢稳定性好，从而提高药效。对体外人微粒体代谢的稳定性是体内代谢稳定性的指示。
本发明的发明人确定了一组化合物，其显示出对CCR8的高效能(由抑制CCL1与CCR8的结合而确定的)和对体外人微粒体代谢的良好稳定性的意料不到组合。
发明内容
本发明提供式(II)化合物或其药学上可接受的盐
式(II)中R表示吡啶N-氧化物(pyridine N-oxide)； R1表示以下基团
或
R3为甲氧基或乙氧基； R4为氢、甲氧基或乙氧基。
不受任何特定的理论限制，认为吡啶N-氧化物可有助于提高代谢稳定性，并且分子右侧的苯氧基-苄基可有助于提高CCR8效能。
式(II)中，吡啶N-氧化物中的氮可位于吡啶N-氧化物所连接的羰基的邻位、间位或对位。
在本发明的实施方式中，吡啶N-氧化物中的氮位于邻接的羰基的邻位或对位，即
或
具有高CCR8效能和对体外人微粒体代谢稳定性的特别有利组合的化合物被发现是R3和R4为烷氧基(尤其是甲氧基)的化合物。因此，在本发明的具体实施方式
中，R3和R4为甲氧基。
在本发明的一个实施方式中，R表示吡啶N-氧化物；R1表示以下基团
；以及 R4为H、乙氧基或甲氧基。
在本发明的另一实施方式中，R表示吡啶N-氧化物；R1表示以下基团
；以及 R3为甲氧基或乙氧基。
应该理解的是，对能够以立体异构体形式存在的式(II)化合物，本发明包括式(II)化合物的所有几何和光学异构体，以及其混合物，包括外消旋化合物。互变异构体及其混合物也构成本发明的一个方面。
本发明优选的化合物包括 3-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-(1-氧化异烟酰基)-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、 3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷 或其药学上可接受的盐。
本发明也提供制备式(II)化合物及其盐的方法，该方法包括 (a)使式(III)化合物与式(IV)化合物反应，
式(III)中，R1如式(II)中所定义，
式(IV)中，R如式(II)中所定义，并且LG为合适的离去基团，或者 (b)使式(V)化合物与式(VI)醛化合物反应，
式(V)中，R如式(II)中所定义，
式(VI)中，R1如式(II)中所定义， 或者 (c)使以上定义的式(V)化合物与式(VII)化合物反应，
式(VII)中，R1如式(II)中所定义，并且LG为离去基团。
式(III)化合物可通过如下方法(d)制备使式(VIII)化合物(式中，P为保护基团)与以上所定义的式(VI)化合物反应，接着除去保护基团P
式(III)化合物也可通过如下方法(e)制备使式(VIII)化合物与以上所定义的式(VII)化合物反应，接着除去保护基团P。
式(V)化合物可通过如下方法(f)制备使式(IX)化合物(式中，P为合适的保护基团)与以上所定义的式(IV)化合物反应，接着除去保护基团P
可使用本领域已知的标准偶联反应进行方法(a)。合适的离去基团LG为例如OH或氯，优选为OH。通常可使用活化试剂进行偶联反应，所述活化试剂例如N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲基铵六氟磷酸盐(HBTU)、N-[(二甲基氨基)(3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-N-甲基甲基铵六氟磷酸盐(HATU)或(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基六氟磷酸盐(PYBOP)。通常，在合适的碱(例如三乙胺)和有机溶剂(例如二氯甲烷)存在下，在合适的温度(例如室温)进行该反应。
可使用本领域已知的标准还原胺化方法进行方法(b)。通常，在三乙酰氧基硼氢化钠[NaBH(OAc)3]存在下进行该反应。通常，在合适的碱(例如三乙胺)和有机溶剂(例如二氯甲烷)存在下，在合适的温度(例如室温)进行该反应。
可在合适的有机溶剂(例如DMF)存在下，在合适的温度(例如室温)进行方法(c)。对于该类型的反应，使用离去基团是本领域已知的。通常的离去基团的例子是卤素、烷氧基、三氟甲磺酰氧基、甲磺酰氧基或对甲苯磺酰氧基。通常，该离去基团为卤素例如氯或溴。
可根据以上所述的方法(b)的条件进行方法(d)的偶联步骤。可根据以上所述的方法(c)的条件进行方法(e)的偶联步骤。可根据以上所述的方法(a)的条件进行方法(f)的偶联步骤。方法(d)、(e)和(f)中使用的典型保护基团P的例子是叔丁氧基羰基(t-boc)。但是，也可使用其它合适的保护基团。在这方面，J.W.F.McOmie编辑的‘Protective Groups in Organic Chemistry’，PlenumPress(1973)和‘Protective Groups in Organic Synthesis’，2nd edition，T.W.Greene&P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1991)中全面地描述了官能团的保护和脱保护。偶联之后，可除去保护基团P。
式(IV)、(VI)、(VII)、(VIII)和(IX)的化合物或者是可购得的，在文献中已知的，或者可通过已知的技术容易地制备，所述已知的技术例如所附实施例中所示。美国专利US5451578(Claremon等)在该专利的实施例1中描述了合成3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(对应于P为叔丁氧基羰基的化合物(IX))的方法。
只要本发明的方法中所提及的中间体能够形成盐，那么以上所述的本发明的方法就包括使用盐形式或游离形式的中间体。
可将上式(II)化合物转化成其药学上可接受的盐，优选为酸加成盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、醋酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。
式(II)化合物及其药学上可接受的盐可以溶剂化的形式例如水合的形式，以及未溶剂化的形式存在，本发明包括所有这些溶剂化的形式。
式(II)化合物具有作为药物的活性，特别是具有作为趋化因子受体(尤其是CCR8)活性的调节剂，因而可用于处理(治疗或预防)人类或非人类动物中由趋化因子生成的过量或失调所恶化或导致的病症/疾病。这些病症/疾病的实例包括 (1)(呼吸道)气道阻塞性疾病，包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)；哮喘如支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘和粉尘性哮喘，特别是慢性哮喘或顽固性哮喘(例如晚期哮喘和气道高反应性)；支气管炎；急性鼻炎、过敏性鼻炎、萎缩性鼻炎或慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、脓性鼻炎、干燥性鼻炎和药物性鼻炎；膜性鼻炎，包括格鲁布性(croupous)鼻炎、纤维蛋白性鼻炎和伪膜性鼻炎或腺病性鼻炎(scrofoulousrhinitis)；季节性鼻炎，包括神经性鼻炎(枯草热)和血管运动性鼻炎；结节病；农夫肺和相关的疾病；纤维化肺和特发性间质性肺炎； (2)(骨和关节)痛风、类风湿性关节炎、血清阴性脊柱关节病(包括强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎和莱特氏病)、贝切特病(Behcet’s disease)、斯耶格伦氏综合征(Sjogren’s syndrome)和全身性硬化症； (3)(皮肤)搔痒症、硬皮病、中耳炎(otitus)、牛皮癣、特异性皮炎、接触性皮炎和其他湿疹性皮肤病(eczematous dermitides)、脂溢性皮炎、扁平苔癣(Lichen planus)、天疱疮、大疱性天疱疮(bullous Pemphigus)、大疱性表皮松解(Epidermolysis bullosa)、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、红斑、皮肤嗜曙红细胞过多、色素层炎、斑秃以及春季结膜炎、狼疮； (4)(胃肠道)腹部疾病、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎(eosinopilicgastro-enteritis)、肥大细胞增多症、炎症性肠病如克罗恩病、溃疡性结肠炎、回肠炎和肠炎，可以具有远离肠作用的食物相关变态反应如偏头痛、鼻炎以及湿疹； (5)(中枢和外周神经系统)神经变性疾病和痴呆症(例如阿尔茨海默病、肌萎缩性侧索硬化和其它运动神经元病、克罗伊茨费尔特-雅各布氏病(Creutzfeldt-Jacob’s disease)和其它蛋白酶感染性疾病(prion disease)、HIV脑病(AIDS痴呆复合征)、亨廷顿氏舞蹈病、额颞痴呆、路易体痴呆和血管性痴呆；多神经症，如Guillain-Barré综合征、慢性炎性脱髓鞘多胚神经病、多病灶运动神经病，神经丛病变；CNS脱髓鞘，如多发性硬化、急性播散性/出血性脑脊髓炎，以及亚急性硬化性全脑炎；神经肌肉障碍，如重症肌无力和兰伯特-伊顿综合征(Lambert-Eaton syndrome)；脊椎障碍，如热带痉挛下肢轻瘫和强直人综合征；类肿瘤综合征，如小脑退化和脑脊髓炎；CNS创伤，偏头痛、中风和矫正疾病(correctum diseases)如脑(脊)膜炎。
(6)(其它组织和全身性疾病)肝炎、血管炎、脊椎关节炎、阴道炎、肾小球肾炎、肌炎、动脉粥样硬化、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、红斑狼疮、系统性狼疮、全身性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、I型糖尿病、肾病综合征、嗜酸细胞性筋膜炎、高IgE综合征、瘤型麻风病、以及先天性血小板减少紫癜；术后粘着、以及脓毒症。
(7)(同种异体移植物和异种移植物的排斥)急性和慢性同种异体移植物和异种移植物的排斥，例如在肾、心脏、肝、肺、骨髓、皮肤和角膜移植后的排斥；和慢性移植物抗宿主病； (8)癌、癌瘤和肿瘤转移，包括膀胱、乳腺、结肠、肾、肝、肺、卵巢、胰腺、胃、子宫颈、甲状腺和皮肤肿瘤，特别是非小细胞肺癌(NSCLC)、恶性黑色素瘤、前列腺癌和鳞状肉瘤的转移。淋巴系的造血肿瘤，包括急性淋巴细胞性白血病、B细胞淋巴瘤和Burketts淋巴瘤、霍杰金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)、急性成淋巴细胞白血病。髓细胞系的造血肿瘤，包括急性和慢性的髓细胞性白血病和前髓细胞性白血病。间充质源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤，以及其它肿瘤，包括黑素瘤、精原细胞瘤、畸形瘤(tetratocarcinoma)、成神经细胞瘤和神经胶质瘤。
(9)由免疫系统的一般性失衡所导致并造成特应性炎性反应增加的所有疾病。
(10)囊性纤维化病、心脏、脑、外周四肢和其它器官中的再灌注损伤。
(11)烧伤和慢性皮肤溃疡。
(12)生殖性疾病(如排卵、月经和植入障碍、早产(Pre-term labour)、子宫内膜异位) (13)血栓症 (14)感染性疾病如HIV感染和其它病毒感染、细菌感染。
因此，本发明提供用于治疗的上文中定义的式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
另一方面本发明提供了如上定义的式(II)化合物或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗其中趋化因子受体活性特别是CCR8活性的调节是有益的人疾病或病症的药物中的用途。
本说明书文中，除非有特殊说明与此不同，术语″治疗″也包括″预防″。术语″治疗的″和″在治疗上″也应作相应的解释。
本发明还提供治疗趋化因子介导的疾病的方法，其中该趋化因子与趋化因子(特别是CCR8)受体结合，所述方法包括对患者给药治疗有效量的式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供对患有呼吸系统疾病如哮喘、COPD或鼻炎，或处于上述疾病危险的患者治疗该疾病的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的如上的式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
对于上述提到的治疗应用，给药剂量当然会随所用化合物、给药方式、所期望的治疗和适应的病症而变化。
式(II)化合物及其药学上可接受的盐可以单独使用，但是通常以药物组合物的形式进行给药，在所述的药物组合物中，式(II)化合物或其盐(活性成分)与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体结合。根据给药方式，药物组合物优选地包括0.05～99％w(重量百分比)，更优选地0.05～80％w，还更优选地0.10～70％w，并甚至更优选地0.10～50％w的活性成分，所有的重量百分比基于全部组合物。
本发明还提供了一种药物组合物，包括如前定义的式(II)化合物或其药学上可接受的盐，以及结合有药学上可接受的助剂、稀释剂或载体。
本发明还提供了一种制备本发明的药物组合物的方法，包括将如前定义的式(II)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体进行混合。
药物组合物可以以溶液、悬混剂、七氟烷烃气溶胶及干粉制剂的形式局部给药(例如给药于肺部和/或气道或者皮肤)；或者以片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂的形式经口给药，或者以溶液剂或悬混剂的形式胃肠外给药，或者经皮下给药，或者以栓剂的形式直肠给药或经皮给药。优选地，本发明的化合物经口服给药。
本发明还涉及联合疗法，其中同时或连续给药本发明化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或包含式(II)化合物或其盐的药物组合物或制剂，以及其它治疗哮喘、过敏性鼻炎、癌症、COPD、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎症性肠病、骨性关节炎或骨质疏松症中任意一种疾病的疗法和/或药剂。
特别是，为了治疗炎性疾病、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎症性肠病、COPD、哮喘和过敏性鼻炎，本发明化合物可与诸如下述的药剂联合例如TNF-α抑制剂如抗-TNF单克隆抗体(如Remicade、CDP-870和D2E7)以及TNF受体免疫球蛋白分子(如Enbrel)；非选择性COX-1/COX-2抑制剂(例如吡罗昔康、双氯芬酸，丙酸类如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬和布洛芬，芬那酸类如甲芬那酸、消炎痛(Indomethacin)、舒林酸、阿扎丙酮，吡唑酮如保泰松，水杨酸类如阿司匹林)；COX-2抑制剂(例如美洛昔康、塞来考昔、罗非考昔、伐地考昔和依托考昔)；低剂量的甲氨喋呤、来氟米特(lefunomide)、环索奈德、羟氯喹、d-青霉胺、金诺芬或肠胃外或口服金制剂。
本发明还涉及本发明化合物与以下药剂的组合白细胞三烯生物合成抑制剂、5-脂肪氧化酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪氧化酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂，例如弃留通(zileuton)；ABT-761；芬留顿(fenleuton)；替泊沙林(tepoxalin)；Abbott-79175；Abbott-85761；N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺胺；2，6-二叔丁基苯酚腙；甲氧基四氢吡喃如Zeneca ZD-2138；化合物SB-210661；吡啶基取代的2-氰基萘化合物如L-739，010；2-氰基喹啉化合物如L-746，530；吲哚和喹啉化合物如MK-591、MK-886和BAY x 1005。
本发明还涉及本发明化合物与白细胞三烯LTB4、LTC4、LTD4和LTE4的受体拮抗剂的组合，该受体拮抗剂选自吩噻嗪-3-酮如L-651，392；脒基化合物如CGS-25019c；苯并胺如昂唑司特；苯甲脒(benzenecarboximidamides)如BIIL 284/260；和化合物例如扎鲁司特、阿鲁司特、孟鲁司特、普仑司特、维鲁司特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、伊拉司特(CGP 45715A)和BAYx7195。
本发明还涉及本发明化合物与PDE4抑制剂的组合，所述PDE4抑制剂包括同工型PDE4D的抑制剂。
本发明还涉及本发明化合物与抗组织胺药H2受体拮抗剂的组合，所述拮抗剂例如西替立嗪、氯雷他定、地氯雷他定、非索非那定、阿司咪唑、氮卓斯汀和扑尔敏(chlorpheniramine)。
本发明还涉及本发明化合物与胃保护性H2受体拮抗剂的组合。
本发明还涉及本发明化合物与α1-和α2-肾上腺素受体激动剂、血管收缩剂、拟交感神经药的组合，所述药剂例如丙己君(propylhexedrine)、去氧肾上腺素、苯丙醇胺、伪麻黄碱、盐酸萘甲唑啉、盐酸氧甲唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸木甲唑啉和盐酸乙基去甲肾上腺素。
本发明还涉及本发明化合物与抗胆碱能药物的组合，所述抗胆碱能药物例如异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、哌仑西平和替仑西平。
本发明还涉及本发明化合物与β1-至β4-肾上腺素受体激动剂的组合，所述β-肾上腺素受体激动剂例如奥西那林、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素(isoprenaline)、沙丁胺醇、柳丁氨醇、福莫特罗、沙美特罗、特布他林、奥西那林(orciprenaline)、甲磺酸比托特罗和吡布特罗、或甲基黄嘌呤包括茶碱和氨茶碱、色甘酸钠，或毒蕈碱性受体(M1、M2和M3)拮抗剂。
本发明还进一步涉及本发明的化合物与胰岛素类生长因子I型(IGF-1)模拟物的组合。
本发明还进一步涉及本发明化合物与具有减少的全身性副作用的吸入糖皮质激素的组合，所述糖皮质激素例如泼尼松、泼尼松龙、氟尼缩松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松和糠酸莫米松。
本发明还进一步涉及本发明化合物与基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂的组合，该基质金属蛋白酶是溶基质蛋白酶(stromelysins)、胶原酶和明胶酶，以及蛋白聚糖酶(aggrecanase；尤其是胶原酶-1(MMP-1)、胶原酶-2(MMP-8)、胶原酶-3(MMP-13)、溶基质蛋白酶-1(MMP-3)、溶基质蛋白酶-2(MMP-10)和溶基质蛋白酶-3(MMP-11)和MMP-12。
本发明进一步还涉及本发明化合物与趋化因子受体功能的其它调节剂的组合使用，例如CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(对C-C家族而言)，CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(对C-X-C家族而言)和CX3CR1(对C-X3-C家族而言)。
本发明还进一步涉及本发明化合物与抗病毒用药如奈非那韦(Viracept)、AZT、阿昔洛韦(aciclovir)以及泛昔洛韦(famciclovir)，以及抗菌化合物如Valant的组合。
本发明还进一步涉及本发明化合物与心血管药物如钙通道阻滞剂、降脂药物如他汀类、贝特类(fibrates)、β-受体阻滞剂、ACE抑制剂、血管紧张素-2受体拮抗剂，以及血小板聚集抑制剂的组合。
本发明还进一步涉及本发明化合物与CNS药物如抗抑郁药(例如舍曲林)、抗帕金森症药(如丙炔苯丙胺、左旋多巴、罗匹尼罗(Requip)、普拉克索、MAOB抑制剂如司兰吉兰(selegine)和雷沙吉兰、comP抑制剂如托卡朋(tasmar)、A-2抑制剂、多巴胺再摄取抑制剂、NMDA拮抗剂、烟碱激动剂、多巴胺激动剂和神经元一氧化氮合酶抑制剂)，以及抗阿尔茨海默病药如多奈哌齐、他克林、COX-2抑制剂、丙戊茶碱或美曲膦酯(metryfonate)的组合。
本发明还进一步涉及本发明化合物与以下药物的组合(i)类胰蛋白酶抑制剂；(ii)血小板活化因子(PAF)拮抗剂；(iii)白介素转换酶(ICE)抑制剂；(iv)IMPDH抑制剂；(v)粘附分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；(vi)组织蛋白酶；(vii)MAP激酶抑制剂；(viii)葡萄糖-6磷酸脱氢酶抑制剂；(ix)激肽-B1-和B2-受体拮抗剂；(x)抗痛风剂，如秋水仙碱；(xi)黄嘌呤氧化酶抑制剂，如别嘌呤醇；(xii)排尿酸剂，如丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆；(xiii)生长激素促分泌剂；(xiv)转化生长因子(TGFβ)；(xv)血小板衍生生长因子(PDGF)；(xvi)成纤维细胞生长因子，如基本成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor，bFGF)；(xvii)粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)；(xviii)辣椒素油(capsaicin cream)；(xix)速激肽NK1和NK3受体拮抗剂，选自NKP-608C、SB-233412(他奈坦)和D-4418；(xx)弹性蛋白酶抑制剂，选自UT-77和ZD-0892；(xxi)TNFα转化酶抑制剂(TACE)；(xxii)诱导的一氧化氮合成酶(iNOS)抑制剂或(xxiii)TH2细胞上表达的化学引诱物受体同源分子(CRTH2拮抗剂)。
本发明化合物也可以与骨质疏松症药物，例如雷洛昔芬(roloxifene)、屈洛昔芬、拉索昔芬或fosomax以及免疫抑制剂例如FK-506、雷帕霉素、环孢灵(cyclosporine)、硫唑嘌呤和甲氨蝶呤联用。
本发明化合物还可以与用于治疗骨关节炎的现有治疗药物联用。可联用的适宜药物包括标准的非甾类抗炎药(后文称作NSAID)例如吡罗昔康、双氯芬酸，丙酸类例如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬和布洛芬，芬那酸类如甲芬那酸、消炎痛、舒林酸、阿扎丙酮，吡唑酮如保泰松、水杨酸酯如阿司匹林；COX-2抑制剂例如塞来考昔、伐地考昔、罗非考昔和依托考昔，止痛剂以及关节内治疗药如皮质甾类和透明质酸类如海尔根以及synvisc和P2X7受体拮抗剂。
本发明的化合物也可以与用于治疗癌症现有药物组合使用。可组合使用的合适药物包括 (i)如用于医学肿瘤学的抗增殖/抗肿瘤药及其组合，例如烷基化剂(如顺铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仓、苯丁酸氮芥、白消安或亚硝基脲)；抗代谢物(例如抗叶酸剂，如氟代嘧啶如5-氟尿嘧啶和替加氟、雷替曲塞、甲氨喋呤、阿糖胞苷、羟基脲、吉西他滨或紫杉醇(Taxol)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类抗生素，如阿霉素、博来霉素、多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素-C、更生霉素或光辉霉素)；抗有丝分裂剂(例如长春花属生物碱类，如长春新碱、长春花碱、长春地辛和长春瑞滨，以及紫杉烷类，如紫杉醇或多西他赛)；和拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素类，如依托泊苷和替尼泊苷、安沙可林、拓扑替康或喜树碱类)； (ii)细胞生长抑制剂如抗雌激素药(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬或iodoxyfene)、雌激素受体负调节剂(如氟维司群)、抗雄激素药(例如比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特或醋酸环丙氯地孕酮)、LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林或布舍瑞林)、孕激素类(如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制剂(例如阿纳托唑、来曲唑、伏氯唑(vorazole)或依西美坦)或5α-还原酶抑制剂如非那雄胺； (iii)抑制癌细胞入侵的药物(例如金属蛋白酶抑制剂如马立马司他或尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体功能的抑制剂)； (iv)生长因子功能抑制剂，例如诸如下述的抑制剂生长因子抗体、生长因子受体抗体(例如抗-erbb2抗体曲妥单抗[HerceptinTM]和抗-erbb1抗体西妥昔单抗[C225])、法尼基转移酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂，表皮生长因子家族的抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，AZD 1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(erlotinib，OSI-774)和6-丙烯酰基氨基-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(CI 1033))，例如血小板衍生的生长因子家族的抑制剂和例如肝细胞生长因子家族的抑制剂； (v)抗血管生成剂，例如那些抑制血管内皮生长因子作用的药物，(例如抗-血管内皮生长因子抗体贝伐单抗[AvastinTM]，例如在国际专利申请WO97/22596、WO 97/30035、WO 97/32856或WO 98/13354中公开的那些化合物)和以其它机制起作用的化合物(例如利诺胺、整联蛋白αvβ3功能的抑制剂或血管生长抑素)； (vi)脉管损坏剂如考布他汀A4或国际专利申请WO 99/02166、WO00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434或WO 02/08213中公开的化合物； (vii)反义治疗剂，例如定向于上面列出靶点的那些物质如ISIS 2503、抗-ras反义物； (viii)基因治疗方法，包括例如代替异常基因如异常p53或异常BRCA1或BRCA2的方法、GDEPT(基因定向的酶前药治疗)方法例如那些使用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的方法和增加患者对化学治疗或放射治疗耐受性的方法例如多元抗药性基因治疗；和 (ix)免疫治疗方法，包括例如在体外和体内增加患者肿瘤细胞免疫原性的方法，如用细胞因子如白介素2、白介素4或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转染、减少T-细胞无反应性的方法、使用转染的免疫细胞如转染了细胞因子的树突细胞的方法、使用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法和使用抗独特型抗体的方法。
现将参考以下示例性实施例，进一步说明本发明。
一般方法 HPLC条件 a.方法A HPLC方法A利用Agilent 1100系列机器在KromassilC185μm3.0×100mm柱上进行。水相为水/TFA(99.8/0.1)，有机相为乙腈/TFA(99.92/0.08)。流速为1mL/min，梯度设置为10至100％有机相，历时20分钟。在220、254和280nm进行检测。
b.方法B HPLC方法B利用Agilent 1100系列机器在XTerraRP8 5μm3.0×100mm柱上进行。水相为15nM NH3的水溶液，有机相为乙腈。流速为1mL/min，梯度设置为10至100％有机相，历时20分钟。在220、254和280nm进行检测。
实施例1至8的原料 中间体B3-[3-苯氧基苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐
a)9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯
将3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯盐酸盐(1.0g，3.4mmol)、3-苯氧基苯甲醛(0.75g，3.8mmol)、三乙胺(0.72mL，5.2mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(1.02g，4.8mmol)、二氯乙烷(35mL)和二甲基甲酰胺(5mL)的混合物，加热回流过夜。将该反应混合物在乙酸乙酯和饱和的碳酸氢钠溶液之间分配。分离有机层，并将其蒸发至干。通过硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物(0.71g，47％)。
APCI-MS m/z437.3[MH+] b)3-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐
向9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(0.71g，1.6mmol)的50mL THF溶液中加入5mL浓HCl。在室温搅拌2h之后，对反应混合物进行蒸发，并将其与甲醇和甲苯共蒸发三次。得到标题化合物，为白色固体。
APCI-MS m/z337.2[MH+] 中间体C3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐
a)9-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯 将3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯盐酸盐(1.50g，5.2mmol)、2-(2-甲氧基苯氧基)苯甲醛(1.24g，5.4mmol)、三乙胺(1.08mL，7.74mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.23g，5.8mmol)溶解于二氯甲烷(40mL)和无水DMF(15mL)中。用AcOH将pH调节至4，并将混合物在室温搅拌过夜。加入另一批三乙酰氧基硼氢化钠(1.0g，4.72mmol)，并将该混合物在40℃搅拌2h。用EtOAc(150mL)稀释该混合物，用碳酸氢钠溶液、H2O和盐水洗涤，并经Na2SO4干燥并蒸发。用庚烷∶EtOAc 4∶1+2体积％NEt3洗脱，通过硅胶柱色谱纯化该粗产物，得到标题化合物，为无色油状物1.27g(53％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ7.42(dd，J＝7.5，1.5Hz，1H)，7.17-7.10(m，3H)，7.04(td，J＝7.4，0.9Hz，1H)，6.95-6.88(m，2H)，6.84(d，J＝7.6Hz，1H)，6.58(d，J＝8.0Hz，1H)，3.74(s，3H)，3.54(s，2H)，3.30-3.23(m，6H)，2.40-2.34(m，4H)，1.46-1.40(m，12H)，1.38(s，11H)，1.34-1.29(m，14H) APCI-MS m/z467.3[MH+] b)3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐 将该油状物溶解于THF(100mL)中，加入浓HCl(20mL)，并将该混合物在室温搅拌1h。蒸发溶剂，并将粗产物与甲苯和乙醇蒸发两次，以除去痕量的水，得到1.59g(定量)标题化合物，为浅紫色油。一些甲苯(12wt％)仍然留在该化合物中，其即使在真空下24h后也没有消失。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.57(dd，J＝7.6，1.6Hz，1H)，7.38-7.27(m，2H)，7.24-7.08(m，7H(+甲苯))，7.05(td，J＝7.7，1.4Hz，1H)，6.60(d，J＝8.3Hz，1H)，4.55(s，2H)，3.75(s，3H)，3.64-3.49(m，4H)，3.25-3.19(m，4H)，2.32(s，2H(甲苯))，2.06(d，J＝14.7Hz，2H)，1.95(t，J＝5.9Hz，2H)，1.89-1.62(m，6H) APCI-MS m/z367.5[MH+] 中间体D3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐
a)3-(2-甲氧基苯氧基)苯甲醛
将(3-甲酰基苯基)硼酸(5.0g，33mmol)和愈创木酚(2.8g，22mmol)与Cu(OAc)2(4.0g，22mmol)、4分子筛和吡啶(9mL)的无水二氯甲烷(150mL)溶液混合，在室温将得到的混合物搅拌过夜。过滤并浓缩反应混合物。通过硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物，为油状物(1.7g，23％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.95(s，1H)，7.58-7.54(m，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，1H)，7.38-7.34(m，1H)，7.26-7.19(m，2H)，7.08-7.02(m，2H)，7.01-6.95(m，1H)，3.82(s，3H) GC-MS m/z228.0[M] b)9-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯
将3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯盐酸盐(1.4g，5.0mmol)、3-(2-甲氧基苯氧基)苯甲醛(1.7g，7.5mmol)、三乙胺(1mL，7.5mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(1.6g，7.5mmol)和乙腈加热回流过夜。将反应混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠溶液之间分配。分离有机层，并将其蒸发至干。通过硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物(1.5g，64％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ7.26-7.14(m，3H)，7.04-6.90(m，3H)，6.76(s，1H)，6.71-6.66(m，1H)，3.39(s，2H)，3.31(s，5H)，3.29-3.23(m，4H)，2.33-2.25(m，4H)，1.43-1.36(m，11H)，1.35-1.27(m，4H) APCI-MS m/z467.3[MH+] c)3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐
向9-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-羧酸叔丁酯(1.6g，3.4mmol)在50mL THF中的溶液中，加入7mL浓HCl。在室温搅拌2h之后，蒸发反应混合物，并与甲醇和甲苯共蒸发三次。得到标题化合物，为白色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ7.37(t，J＝7.9Hz，1H)，7.29(d，J＝7.7Hz，1H)，7.26-7.16(m，2H)，7.14(s，1H)，7.10-7.05(m，1H)，7.02-6.96(m，1H)，6.88-6.81(m，1H)，4.25(d，J＝5.4Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.13-2.94(m，8H)，1.88-1.64(m，6H)，1.56-1.47(m，2H) APCI-MS m/z367.2[MH+] 实施例1 3-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
将中间体B(90mg，0.22mmol)、N-[(二甲基氨基)(3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-N-甲基甲基铵六氟磷酸盐(HATU，100mg，0.26mmol)、吡啶-2-羧酸1-氧化物(37mg，0.26mmol)、三乙胺(123μl，0.88mmol)和二氯甲烷(2mL)的混合物在室温搅拌5h。用二氯甲烷稀释该反应混合物，并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。分离有机层，并将其蒸发至干。用制备型HPLC(RP-18)纯化产物，得到产物，为白色固体(5mg，5％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.27(d，2H)，7.52-7.37(m，5H)，7.28-7.17(m，3H)，7.12-7.06(m，3H)，4.32-4.24(m，2H)，3.68-3.48(m，2H)，3.27-2.98(m，6H)，1.88(d，2H)，1.71-1.28(m，6H) APCI-MS m/z458,6[MH+] HPLC(方法A)RT6.37分钟 HPLC(方法B)RT8.27分钟 实施例23-(1-氧化异烟酰基)-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
使用实施例1的方法，所不同的是使用异烟酸1-氧化物作为原料，制备得到标题化合物，为白色固体(38mg，38％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.31-8.23(m，1H)，7.52-7.36(m，6H)，7.24-7.14(m，3H)，7.12-7.06(m，3H)，4.35-4.24(m，2H)，3.27-2.98(m，7H)，1.95-1.23(m，9H) APCI-MS m/z458,6[MH+] HPLC(方法A)RT6.48分钟 HPLC(方法B)RT8.37分钟 实施例33-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
根据实施例1，所不同的是使用2-吡啶甲酸N-氧化物(33mg，0.20mmol)和中间体C(90mg，0.20mmol)，合成标题化合物。用制备型HPLC(RP-18，梯度乙腈/水/TFA 15/85/0.1至65/35/0.1和20/80/0.1至55/45/0.1)纯化该粗产物两次，得到30mg(21％)标题化合物，为白色固体。
1HNMR(400MHz，DMSO-D6)δ9.16(d，J＝21.3Hz，1H)，8.26(d，J＝6.4Hz，1H)，7.57(d，J＝7.7Hz，1H)，7.51-7.44(m，2H)，7.43-7.26(m，3H)，7.25-7.09(m，3H)，7.08-7.01(m，1H)，6.51(t，J＝7.6Hz，1H)，4.46(dd，J＝12.1，4.7Hz，2H)，3.70(d，J＝8.0Hz，3H)，3.68-3.63(m，1H)，3.60-3.51(m，1H)，3.39-3.32(m，2H)，3.28-3.08(m，3H)，3.06-2.98(m，1H)，2.02-1.92(m，1H)，1.91-1.82(m，1H)，1.79-1.69(m，1H)，1.67-1.38(m，5H) APCI-MS m/z488.3[MH+] HPLC(方法A)RT6.38分钟 HPLC(方法B)RT7.97分钟 实施例43-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
向0.1M 3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷二盐酸盐(中间体C)(90mg，0.20mmol)的二氯甲烷溶液中，加入异烟酸N-氧化物(33mg，0.24mmol)、HATU(91mg，0.24mmol)和三乙胺(111μl，0.80mmol)。用二氯甲烷(1mL)稀释该混合物，并在室温搅拌过夜。然后用二氯甲烷(25mL)稀释该混合物，并用碳酸氢钠溶液洗涤。对有机层进行蒸发，用制备型HPLC(RP-18，梯度乙腈/水/NH4OAc 10/90/0.1至70/30/0.1和乙腈/水/TFA20/80/0.1至55/45/0.1)纯化该粗产物两次，得到40mg(28％)标题化合物，为白色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ9.24(s，1H)，8.25(d，J＝7.1Hz，2H)，7.57(d，J＝6.2Hz，1H)，7.42(d，J＝7.0Hz，2H)，7.37-7.26(m，2H)，7.25-7.16(m，2H)，7.12(t，J＝7.4Hz，1H)，7.04(t，J＝7.6Hz，1H)，6.52(d，J＝8.2Hz，1H)，4.47(d，J＝3.9Hz，2H)，3.71(s，3H)，3.65-3.50(m，2H)，3.42-3.28(m，4H)，3.26-3.12(m，4H)，1.92(d，J＝14.4Hz，2H)，1.71-1.53(m，4H)，1.46-1.33(m，2H) APCI-MS m/z488.3[MH+] HPLC(方法A)RT5.99分钟 HPLC(方法B)RT7.85分钟 实施例53-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
使用实施例1的方法，所不同的是使用中间体C和烟酸N-氧化物作为反应物，制备标题化合物，得到产物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.45(m，2H)，7.61(m，2H)，7.29(m，3H)，7.06(m，4H)，6.63(m，1H)，4.05(m，7H)，3.73(m，6H)，3.59(m，4H)，3.39(m，2H)，3.00(m，2H)，2.11(m，2H)，1.85(m，2H)，1.59(m，4H) APCI-MS m/z488[MH+] HPLC(方法A)RT7.67分钟， HPLC(方法B)RT6.28分钟 实施例63-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷双(三氟乙酸盐)
将中间体D(90mg，0.20mmol)、N-[(二甲基氨基)(3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-N-甲基甲基铵六氟磷酸盐(HATU，90mg，0.24mmol)、吡啶-2-羧酸1-氧化物(34mg，0.24mmol)、三乙胺(111μl，0.8mmol)和二氯甲烷(2mL)的混合物在室温搅拌过夜。用EtOAc稀释反应混合物，并用碳酸氢钠溶液洗涤。分离有机层，并将其蒸发至干。用制备型HPLC(RP-18)纯化产物，得到白色固体(35mg，25％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.27(t，J＝6.6Hz，1H)，7.52-7.37(m，4H)，7.27-7.17(m，2H)，7.16-7.06(m，2H)，7.03-6.97(m，2H)，6.89(d，J＝8.2Hz，1H)，4.32-4.24(m，2H)，3.72(d，J＝3.1Hz，3H)，3.70-3.61(m，1H)，3.60-3.48(m，1H)，3.21-2.94(m，6H)，1.98-1.79(m，2H)，1.75-1.38(m，5H)，1.33-1.23(m，1H) APCI-MS m/z488.6[MH+] HPLC(方法A)RT6.17分钟 实施例73-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷双(三氟乙酸盐)
使用实施例1的方法，所不同的是使用异烟酸1-氧化物和中间体D作为原料，制备得到标题化合物，为白色固体(65mg，45％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ8.26(d，J＝6.8Hz，2H)，7.46-7.37(m，3H)，7.27-7.17(m，2H)，7.14(d，J＝7.5Hz，1H)，7.10-7.07(m，1H)，7.03-6.97(m，2H)，6.92-6.87(m，1H)，4.28(d，J＝4.5Hz，2H)，3.72(s，3H)，3.65-3.51(m，2H)，3.40-3.27(m，2H)，3.21-3.13(m，2H)，3.12-2.95(m，2H)，1.89(d，J＝14.5Hz，2H)，1.71-1.31(m，6H) APCI-MS m/z488.6[MH+] HPLC(方法A)RT6.08分钟 HPLC(方法b)RT7.76分钟 实施例83-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
使用实施例1的方法，所不同的是使用烟酸N-氧化物和中间体D作为反应物，制备得到标题化合物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.44(m，2H)，7.62(m，2H)，7.37(m，1H)，7.19(m，3H)，7.00(m，4H)，3.84(s，3H)，3.41(m，4H)，2.74(m，2H)，2.12(m，2H)，1.55(m，2H) APCI-MS m/z488[MH+] HPLC(方法A)RT5.99分钟 HPLC(方法B)RT7.38分钟 药理学数据 CCL1 SPA结合测定 来自人重组趋化因子CCR8受体转染的CHO-K1细胞的膜(ES-136-M)购自Euroscreen。将该膜制剂在-70℃，于7.5mM Tris-Cl pH 7.5，12.5mMMgCl2，0.3mM EDTA，1mM EGTA，250mM蔗糖中贮存直至使用。
将CCR8膜(50.6mg/ml)在pH为＝7.4的测定缓冲液(50mM HEPES，1mM CaCl2×2H2O，5mM MgCl2×6H2O，75mM NaCl，0.1％BSA)中，在冰上用麦胚凝集素SPA珠(4.05mg/ml)预培育2小时。在DMSO中以1∶3连续稀释化合物，制备10-点剂量-响应曲线(最终浓度50μM，16.7μM，5.6μM，1.9μM，0.62μM，0.21μM，0.069μM，0.023μM)。在筛选板(聚苯乙烯NBS板，Costar Corning 3604)中，将1μl化合物的DMSO溶液转移到每个孔中。将1μl的DMSO加入到空白对照孔中，并将1μl未标记的CCL1(300nM)加入到背景对照孔中。将50μl的SPA珠-膜混合物加入到每个孔中。最后，将50μl(30pM)125I CCL1(2000Ci/mM)加入到每个孔中。然后将该板一边振荡(700rpm)一边在室温培育90分钟，随后在室温而没有振荡的情况下培育30分钟。在Wallac MicroBeta计数器中以2分钟/孔对将该板读数。
人微粒体稳定性测定 测定以96-深孔板格式在磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中进行，微粒体蛋白质(Xenotech)浓度为1mg/mL、化合物浓度为2.5μM、NADPH浓度为2mM。取出在四个时间点(0、5、15和30分钟)的样品，用1％乙酸/乙腈进行蛋白质沉淀来终止酶促反应。在置于Tecan工作台上的恒温板(37℃)上进行培育，并且所有的液体操作用机器进行。样品离心之后，将上清液汇集成一组4份，接着以使用多反应检测(MRM)的液相色谱串联质谱检测法(LC/MS/MS)分析。由化合物消失曲线的初始线性部分计算得到数据，表示为固有清除率(CLint)，μl/min/mg蛋白质。
表1和2示出在上述CCL1 SPA结合测定(以IC50值表示)和人微粒体稳定性测定中对以上实施例1至8的化合物进行试验的结果。也示出四个对比化合物(A、B、X和Y)的数据。
对比例A，B，X和Y如下 A3-(2-异丁氧基苄基)-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
B3-(2-异丁氧基苄基)-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
X3-异烟酰基-9-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
Y3-异烟酰基-9-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷
表1 表2
权利要求
1.式(II)化合物或其药学上可接受的盐
其中R表示吡啶N-氧化物；
R1表示以下基团
或
R3为甲氧基或乙氧基；
R4为氢、甲氧基或乙氧基。
2.权利要求1的化合物，其中R3为甲氧基，R4为氢或甲氧基。
3.权利要求1或2的化合物，其中R3和R4独立地为甲氧基。
4.权利要求1的式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自
3-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-(1-氧化异烟酰基)-9-(3-苯氧基苄基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-[2-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-2-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷、
3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-(1-氧化异烟酰基)-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷，或
3-[3-(2-甲氧基苯氧基)苄基]-9-[(1-氧化吡啶-3-基)羰基]-3，9-二氮杂螺[5.5]十一烷。
5.药物组合物，其包括权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的以及，以及结合有药学上可接受的助剂、稀释剂或载体。
6.制备权利要求5所述的药物组合物的方法，其包括将权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐，与药学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合。
7.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。
8.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗的药物中的用途。
9.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗哮喘的药物中的用途。
10.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗慢性阻塞性肺病的药物中的用途。
11.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗鼻炎的药物中的用途。
12.权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗趋化因子介导的疾病的药物中的用途。
13.治疗趋化因子介导的疾病的方法，其中所述趋化因子与一种或多种趋化因子受体结合，该方法包括对患者给药治疗有效量的权利要求1至4中任一项所述的式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
14.权利要求13的方法，其中趋化因子受体是CCR8受体。
15.治疗呼吸系统疾病的方法，该方法包括对患者给药治疗有效量的权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
16.权利要求15的方法，其中呼吸系统疾病选自哮喘和慢性阻塞性肺病。
17.制备权利要求1的式(II)化合物或其盐的方法，其包括
(a)使式(III)化合物与式(IV)化合物反应，
式(III)中，R1如权利要求1的式(II)中所定义，
式(IV)中，R如权利要求1的式(II)中所定义，并且LG为合适的离去基团，或者
(b)使式(V)的化合物与式(VI)的醛化合物反应，
式(V)中，R如权利要求1的式(II)中所定义，
式(VI)中，R1如权利要求1的式(II)中所定义，或者
(c)使(b)中所定义的式(V)的化合物与式(VII)的化合物反应，
式(VII)中，R1如权利要求1的式(II)中所定义，并且LG为离去基团。
全文摘要
本发明提供式(II)化合物，其中R和R1如说明书中所定义，制备它们的方法，包含它们的药物组合物和它们在治疗中的用途。
文档编号C07D471/10GK101155810SQ200680011327
公开日2008年4月2日 申请日期2006年3月30日 优先权日2005年4月4日
发明者斯蒂芬·康诺利, 马科·斯克林贾 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司