纯化型的他那普戈特的制作方法

专利名称：纯化型的他那普戈特的制作方法
专利说明纯化型的他那普戈特
背景技术：
细胞内受体(IR)形成一类称为“配体依赖性转录因子”的结构相关基因调节剂。甾族化合物受体家族是IR家族的亚群，包括黄体酮受体(PR)、雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)、糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)。
天然的激素或配体，如PR是甾族化合物黄体酮，但是合成化合物例如醋酸甲羟黄体酮或左炔诺孕酮已被制备，它们也用作配体。一旦配体存在于细胞周围的液体中，它经由被动扩散穿过胞膜，并与IR结合产生受体/配体复合物。该复合物与存在于细胞的DNA中的特异性基因启动子结合。一旦与DNA结合，该复合物调节mRNA和经由该基因编码的蛋白的生成。
与IR结合并模拟天然激素的作用的化合物被称为激动剂，而抑制激素的作用的化合物为拮抗剂。
已知PR激动剂(天然的和合成的)对妇女健康起重要作用。PR激动剂被用于控制生育组合物中，通常存在ER激动剂的情况下，或者它们可以用于与PR拮抗剂组合。ER激动剂被用于治疗绝经期症状，但是伴有对子宫的增生作用，这会造成子宫癌的风险增加。联合施用PR激动剂则减少/消除该风险。
他那普戈特(tanaproget)，即5-(4，4-二甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1H-吡咯-2-甲腈，是一种黄体酮受体调节剂，并且在避孕，激素代替疗法，以及治疗癌和腺癌、机能障碍性出血、子宫平滑肌瘤、子宫内膜异位和多囊性卵巢综合征中是有效的。
本领域需要其它形式的用于药物组合物的他那普戈特。
发明概述 一方面，提供微粉化的I型他那普戈特。
另一方面，提供纯化的I型他那普戈特。
再一方面，提供一种试剂盒，其含有纯化的I型他那普戈特；和适合施用于哺乳动物受试者的载体。
再另一方面，提供一种纯化的I型他那普戈特的参比标准品。
仍然另一方面，提供一种制备包含纯化的I型他那普戈特的药物组合物的方法。
其它的方面和优点在以下优选实施方案的详细说明中作进一步的描述。
附图简述

图1提供了纯化的I型他那普戈特样品的质子核磁共振图谱。
图2提供了纯化的I型他那普戈特样品的质谱图。
图3提供了纯化的I型他那普戈特样品的傅里叶变换红外光谱图。
图4提供了纯化的I型他那普戈特样品的高效液相色谱图。
图5提供了纯化的I型他那普戈特样品的X-射线衍射图。
图6提供了纯化的I型他那普戈特样品的差示扫描量热法热分析图。
发明详述 本文提供和详述了含有微粉化的I型他那普戈特、纯化的I型他那普戈特以及微粉化和纯化的I型他那普戈特的药物组合物。
如本文使用的，术语“他那普戈特”是指5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈。
如本文使用的，术语“纯化的”优选是指含有低于约1％的杂质的他那普戈特。在一个实施例中，纯化的他那普戈特含有低于约0.5％的杂质。在另一个实施例中，纯化的他那普戈特含有低于或等于约0.36％的杂质。期望的，纯化的他那普戈特为约99.5％的纯度。
如本文使用的，术语“溶剂”是指一种溶剂，在该溶剂中他那普戈特具有可接受的、适中的、良好的或完全的溶解性。类似地，如本文使用的，术语“抗溶剂”是指一种溶剂，在该溶剂中他那普戈特具有有限的、低的溶解度或不溶解。
A.微粉化的他那普戈特 应用非微粉化的他那普戈特，在氮气和常规微粉技术例如用Trost或喷射磨的条件下可以将I型他那普戈特微粉化。一种制备非微粉化的他那普戈特的方法描述于美国专利第6,436,929号中，并且一般性地描述于美国专利申请公开第US-2005-0272702-A1号中，通过引用将其并入本文。然而，生产非微粉化的I型他那普戈特并不限于所述的方法。
微粉化的I型他那普戈特通常具有小于约20μm的中值粒度，期望的小于约15μm，并且更期望的小于约10μm。特别地，通过Malvern方法测定，90％的颗粒小于或等于约20μm，并且50％的颗粒小于或等于约15μm，这是本领域技术人员容易理解的。
在一个实施方案中，所述组合物是通过将基于单元剂量总重量计的微粉化的他那普戈特与该组合物的其它组分干混合而制备的。
如下文提到的，术语“wt/wt”是指一种组分基于所述组合物总重量计的重量。通常，如果使用的话，该比率不包括胶囊的重量、用于胶囊中的任何填料的重量以及密封包衣的重量。
在一个实施方案中，提供了微粉化的具有粒度小于约20μm的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈。
B.他那普戈特的纯化 还提供了更加适用于以药物组合物给药的纯化的I型他那普戈特。通常，未纯化的他那普戈特在纯化之前被微粉化。
本发明人发现，本文提供的纯化的I型他那普戈特是稳定的，并且纯化的I型他那普戈特单独地或与其它药物/赋形剂组合在贮存期间转变成另一多晶型的可能性低。
在一个实施方案中，如在美国专利申请公开第US-2005-0272702-A1号中描述的，I型他那普戈特被纯化，其通过引用并入本文。然而，生产非微粉化的I型他那普戈特并不限于所述的方法。
在另一个实施方案中，I型他那普戈特是通过重结晶纯化的。可以使用一种溶剂或溶剂系统进行该重结晶。多种溶剂可用于纯化I型他那普戈特，并且包括乙酸乙酯、丙酮或其组合。另选的，可以使用溶剂系统，在该溶剂系统中，所述系统的一种试剂是能够溶解I型他那普戈特的溶剂，该溶剂系统的第二试剂是抗溶剂。期望的，有用的溶剂/抗溶剂系统包括但不限于丙酮/四氢呋喃、丙酮/甲醇、丙酮/甲苯和丙酮/水。期望的，I型他那普戈特是通过从丙酮/水中重结晶纯化。
通常，I型他那普戈特是通过将未纯化的他那普戈特溶解于热丙酮中形成一溶液，将该丙酮溶液浓缩，将水与该浓缩的丙酮溶液混合，再将该浓缩的丙酮/水溶液冷却至室温而纯化。
在进一步的实施方案中，将I型他那普戈特溶于丙酮，再将该溶液加热至约45至约51℃。在将该加热的溶液通过碳滤器循环至少约4小时之后，使用本领域已知的方法将该过滤的溶液浓缩。在向该浓缩的溶液中添加水之后，期望的，以不致使该回流的丙酮溶液冷却的速度，将该丙酮/水溶液冷却至约-6至约0℃。期望的，该丙酮/水溶液是以低于约0.5℃/分钟的速度冷却。以低温维持该冷却的溶液至少约3小时之后，使用过滤收集沉淀的纯化的I型他那普戈特。将收集的固体用水/丙酮混合物洗涤，期望的，用1∶1水/丙酮混合物将该固体洗涤2次，然后将洗涤纯化的I型他那普戈特在低于35℃下干燥约4小时。在低于约50℃下进行进一步干燥以除去残余的由分光法测定的丙酮/水。
通常，仍然存在于纯化的I型他那普戈特中的杂质包括残余的丙酮、异丙醇或水。在一个实施例中，纯化的I型他那普戈特含有低于约0.1％的水。在另一个实施例中，纯化的I型他那普戈特含有低于或等于约0.07％的水。
在一个实施方案中，提供了差示扫描量热法热分析图具有T起始约230℃的吸热，并且X-射线衍射峰图包含2θ约6.6°、10.3°、14.4°、19.8°、23.8°、26.3°和29.1°的峰的纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈。
C.表征纯化的他那普戈特 纯化的I型他那普戈特可以使用多种光谱技术表征，这些光谱技术包括核磁共振法(质子谱和碳谱)、质谱法、红外光谱法、色谱法如高效液相色谱法、X-射线衍射法和差示扫描量热法等。期望的，使用这些技术由纯化的I型他那普戈特获得的图谱提供的证据表明，纯化的I型他那普戈特含有低于1％的杂质。
在一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了图1A的质子(1H)核磁共振(NMR)图谱和图1B的碳(13C)NMR图谱。期望的，该1H-NMR图谱(d6-二甲基亚砜)含有约δ3.7，7.0，6.4，7.5，7.15，7.5，1.7和12.3的峰。更加期望的，该1H-NMR图谱(d6-二甲基亚砜)含有δ3.72(s)，7.04(d，J＝4.0Hz)，6.38(d，J＝4.0Hz)，7.48(m)，7.15(d，J＝8.4Hz)，7.47(m)，1.69(s)和12.31(s)的峰。期望的，该13C-NMR图谱(d6-二甲基亚砜)含有δ33.8，104.8，114.1，119.5，109.8，139.0，127.0，124.0，127.0，131.7，114.6，129.3，83.3，27.2和182.8的峰。更加期望的，该13C-NMR图谱(d6-二甲基亚砜)含有δ33.79，104.79，114.12，119.46，109.75，139.07，126.97，123.98，127.00，131.65，114.57，129.33，83.26，27.24和182.84的峰。
在另一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了具有图2图谱的质谱(MS)。纯化的I型他那普戈特的MS由此包括[M-H]-在296.0处的峰。
在进一步的实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了图3的傅里叶变换红外光谱(IR)图。
在再另一实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了图4的高效液相色谱(HPLC)图。该HPLC图谱由此提供了在t＝0.56min(0.10％wt/wt)，t＝0.67min(0.227％wt/wt)和t＝1.13min(0.025％wt/wt)处的小的杂质峰。
在仍然进一步的实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了具有图5图谱的X-射线衍射图。该XRD包括X-射线衍射峰图，其中包括2θ约6.6°，10.3°，14.4°，19.8°，23.8°，26.3°和29.1°的峰。
在另一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了具有图6热分析图的差示扫描量热法(DSC)热分析图。该DSC热分析图具有T起始约230℃的吸热。
在再进一步的实施方案中，纯化的I型他那普戈特提供了约228至约231℃的熔点。期望的，该熔点为约229至约230℃。更加期望的，该熔点为约230℃。
D.含有纯化的他那普戈特的组合物 还提供了组合物，优选药物组合物，其含有单独纯化的I型他那普戈特或与未纯化的他那普戈特的组合。该组合物通常包含药学可接受的载体，但是还可包含其它适合的组分。通常，添加的组分是惰性的，并且不会干扰组合物的必需组分的功能。该组合物由此可以进一步包括其它的佐剂、糖浆剂、酏剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、表面活性剂、成粒剂、崩解剂、软化剂、金属螯合剂、pH调节剂、表面活性剂、填料、崩解剂以及它们的组合等。
佐剂可包括但不限于调味剂、着色剂、防腐剂和补充抗氧剂，该补充抗氧剂可包括维生素E、抗坏血酸、丁基化羟基甲苯(BHT)和丁羟基茴香醚(BHA)。
粘合剂可包括但不限于聚维酮、纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、非结晶纤维素、聚丙烯吡咯烷酮(polypropylpyrrolidone)、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮，PVP)、明胶、阿拉伯胶和金合欢胶、聚乙二醇类、淀粉、糖类例如蔗糖、高岭土、葡萄糖和乳糖、胆固醇、西黄蓍胶、硬脂酸、明胶、酪蛋白、卵磷脂(磷脂)、十八醇十六醇混合物、鲸蜡醇、十六烷基酯蜡、葡萄糖结合剂、糊精、单油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、棕榈酸硬脂酸甘油酯、聚氧乙烯烷基醚类、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯类、聚乙烯醇和明胶等。在一个实施方案中，所述粘合剂为聚维酮。
润滑剂可包括轻质无水硅酸、滑石粉、硬脂酸、十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁和硬酯酰富马酸钠(sodium stearyl furamate)等。在一个实施方案中，该润滑剂是硬脂酸镁。
成粒剂可包括但不限于二氧化硅、淀粉、碳酸钙、果胶、交联聚维酮和polyplasdone等。
崩解剂可包括淀粉、羧甲基纤维素、取代羟丙基纤维素、碳酸氢钠、磷酸钙、枸橼酸钙、淀粉羟乙酸钠、预糊化淀粉或交联聚维酮等。
软化剂可包括但不限于硬脂醇、貂油、鲸蜡醇、油醇、月桂酸异丙酯、聚乙二醇、橄榄油、石油膏、棕榈酸、油酸和肉豆蔻酸肉豆蔻酯。
表面活性剂可包括聚山梨酯类、脱水山梨糖醇酯类、泊洛沙姆或十二烷基硫酸钠。在一个实施方案中，所述的表面活性剂是十二烷基硫酸钠。
金属螯合剂可包括生理上可接受的螯合剂，包括依地酸、苹果酸或富马酸。在一个实施方案中，该金属螯合剂是依地酸。
还可以使用pH调节剂以调节含有纯化的I型他那普戈特的溶液的pH值至约4到约6。在一个实施方案中，含有纯化的I型他那普戈特的溶液的pH值被调节至约4.6的pH值。pH调节剂可包括生理上可接受的物质，包括枸橼酸、抗坏血酸、富马酸或苹果酸以及它们的盐。在一个实施方案中，该pH调节剂是枸橼酸。
可以使用的添加的填料包括甘露醇、磷酸钙、预糊化淀粉或蔗糖。
E.使用纯化的他那普戈特的方法 进一步提供的是向患者给予纯化的I型他那普戈特的方法，该方法包括施用纯化的I型他那普戈特。
纯化的I型他那普戈特的需要剂量可根据存在症状的严重程度和具体被治疗的受试者而改变。治疗可以用低于纯化的I型他那普戈特的最佳剂量的小剂量开始。然后将剂量增加直至在所述情况下达到最佳效果。精确的剂量可以以单个治疗受试者通过给药医生根据经验确定。通常，纯化的I型他那普戈特最期望地以通常得到有效结果而不造成任何不可接受的有害或有毒副作用的浓度施用。例如，纯化的I型他那普戈特的有效量通常为，例如约0.05mg至约1mg、约0.05mg至约0.3mg、约0.05mg、约0.075mg、约0.1mg、约0.15mg、约0.2mg或约0.3mg。
纯化的I型他那普戈特由此可用于避孕和激素代替疗法。纯化的I型他那普戈特还可用于避孕以及治疗和/或预防子宫肌层纤维瘤(uterine myometrial fibroids)，良性前列腺肥大，良性或恶性肿瘤病，机能障碍性出血，子宫平滑肌瘤，子宫内膜异位，多囊性卵巢综合征，以及脑垂体、子宫内膜、肾、卵巢、乳腺、结肠和前列腺的癌和腺癌，以及其它激素依赖性肿瘤。纯化的I型他那普戈特的其它用途包括刺激食物摄取。
使用药学有效量的纯化的I型他那普戈特，纯化的I型他那普戈特可以配制成任何适合期望的给药途径的形式。例如，纯化的I型他那普戈特可以通过例如口服、皮肤、经皮、支气管内、鼻内、静脉内、肌内、皮下、胃肠外、腹膜内、鼻内、阴道、直肠、舌下、颅内、硬膜外、气管内的途径给药，或通过缓释给药。优选的，给药为口服。
例如，纯化的I型他那普戈特可以被配制成例如以下的形式供口服施用片剂、胶囊剂、微囊剂、可分散粉末剂、颗粒剂，或者含有例如约0.05至5％助悬剂的混悬剂、含有例如约10至50％糖的糖浆剂和含有例如约20至50％乙醇的酏剂等。根据容易制备和施用的观点，优选的药物组合物为固体组合物，尤其是片剂和硬填充胶囊或液体填充胶囊。
纯化的I型他那普戈特也可以胃肠外或腹膜内施用。纯化的I型他那普戈特的游离碱或药学可接受的盐的溶液或混悬液可以在水中适当地与表面活性剂例如羟丙基纤维素混合而制备。还可以在油中的甘油、液体、聚乙二醇类及其混合物中制备分散体系。在常规的贮藏和使用条件下，这些制品中含有防腐剂以防止微生物生长。通常，该无菌可注射的溶液或混悬液在等渗介质中含有约0.05至5％的助悬剂。该药学制品可以含有与所述载体组合的例如约25至约90％的活性成分，更通常为约5％～60％wt。
在另一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特是以无菌可注射的溶液或混悬液、分散体系和粉剂的形式经静脉内、肌内、皮下、胃肠外和腹膜内给药，所述粉剂流动程度达到易于从注射器中流出。该可注射组合物是无菌的、在制造和贮藏条件下是稳定的，并且没有微生物例如细菌和真菌污染。
所述载体可以是一种溶剂或者含有例如水、醇类(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、油类及其混合物的分散介质。优选的，该液体载体是水。在一个实施方案中，所述的油是植物油。任选地，该液体载体含有助悬剂。在另一个实施方案中，该液体载体是等渗介质并且含有0.05至约5％的助悬剂。
在进一步的实施方案中，纯化的I型他那普戈特是以常规的栓剂形式经直肠给药。
在另一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特是以常规的栓剂、乳膏剂、凝胶剂、药环或涂渍的子宫内装置(IUD)的形式经阴道给药。
在再另一个实施方案中，纯化的I型他那普戈特是以气雾剂的形式经鼻内或支气管内给药。
在进一步的实施方案中，纯化的I型他那普戈特是经皮给药或通过使用透皮贴片缓释给药，该透皮贴片含有纯化的I型他那普戈特和任选的载体，该载体对纯化的I型他那普戈特呈惰性、对皮肤无毒性、并递送纯化的I型他那普戈特以全身性吸收至血流中。该载体可以是乳膏、软膏、糊剂、凝胶或包埋装置(occlusive device)。所述的乳膏和软膏可以是粘性液体或半固体乳液。糊剂包括分散于凡士林(petroleum)或亲水性矿脂(hydrophilic petroleum)中的可吸收的粉末。进一步的，多种包埋装置可用于将纯化的I型他那普戈特释放到血流中，并且包括半透膜，该半透膜将含有活性剂的贮库或者含有活性剂的基质覆盖。
为了避免让患者每日用药，使用缓释给药装置也是期望的。术语“缓释给药”用于本文是指延迟活性成分即纯化的I型他那普戈特的释放，直至在给药环境中配置(placement)之后，接着在以后的时间内缓慢释放药剂。多种缓释给药装置是本领域已知的，并且包括亲水凝胶(美国专利第5,266,325；4,959,217；5,292,515号)，渗透泵(美国专利第4,295,987和5,273,752号以及欧洲专利第314,206等)；疏水膜材料例如乙烯甲基丙烯酸酯(EMA)和乙烯乙酸乙烯酯(EVA)；生物可吸收聚合物系统(国际专利公开第WO 98/44964号以及美国专利第5,756,127和5,854,388号)；以及其它由例如聚酯类、聚酐类或乳酸/羟基乙酸共聚物组成的生物可吸收植入装置(美国专利第5,817,343号)。对于在这些缓释给药装置中应用，纯化的I型他那普戈特可以如本文所述配制。见美国专利第3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123和4,008,719号。
优选的，纯化的I型他那普戈特形成适合的给药单元用于给药至患者。适合的给药单元包括口服给药单元，例如直接压制片、胶囊剂、粉末剂、混悬剂、微囊剂、可分散粉末剂、颗粒剂、混悬剂、糖浆剂、酏剂和气雾剂。优选的，纯化的I型他那普戈特被压制成片剂，其任选地被加至胶囊中，或者纯化的I型他那普戈特被直接加至胶囊中。纯化的I型他那普戈特也可配制成供其它适合的途径给药。使用本文描述的方法和本领域技术人员已知的方法，这些给药单元是容易制备的。
含有纯化的I型他那普戈特的固体剂型，包括片剂、胶囊形片剂和胶囊剂，它们可以通过将纯化的I型他那普戈特与上述组分通过干混合而形成。在一个实施方案中，所述胶囊包括羟丙基甲基纤维素胶囊、羟丙甲纤维素胶囊或硬壳胶囊。含有他那普戈特的片剂或胶囊形片剂任选地被包薄膜衣。适合的薄膜衣材是本领域技术人员已知的。例如，该薄膜衣材可以选自聚合物例如羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯醇及其组合。
纯化的I型他那普戈特的药学有效量可以根据被给予组合物中的其它组分、给药方式、治疗病症的严重度、患者年龄和体重，以及在该组合物中使用的其它活性成分而改变。给药方案也可以调节以产生最佳的治疗反应。每天也可以给予数个分剂量，例如，每天分2～4次给药，或者可给予单次剂量。然而所述剂量可以根据紧急治疗情况所指明的，按比例地减少或增加。在一个实施方案中，所述给药是以每天、每周或每月为基准的。在另一个实施方案中，所述给药是每天给药。然而，根据给药周期，每天剂量可以降低或增加。
考虑到当纯化的I型他那普戈特用于避孕或激素代替疗法时，它可以与一种或多种其它的黄体酮受体激动剂、雌激素受体激动剂、黄体酮受体拮抗剂和选择性雌激素受体调节剂等联合施用。
当用于治疗瘤性疾病、癌和腺癌时，纯化的I型他那普戈特可以与一种或多种本领域技术人员容易选择的化疗剂联合施用。
F.含有纯化的他那普戈特的试剂盒 还提供了含有纯化的I型他那普戈特的试剂盒或包装。试剂盒可包括纯化的I型他那普戈特或以较低纯净形式的组合以及如上述的适合施用于哺乳动物受试者的载体。通常，片剂或胶囊剂被包装在泡眼包装中，并且优选UltrxTM 2000泡眼包装。
含有纯化的I型他那普戈特的试剂盒或包装被设计成供本文所述给药方案使用。优选将这些试剂盒设计成在21-天、28-天、30-天或31-天等的周期内每天口服给药，更优选设计成每天口服给药一次。当持续给予纯化的I型他那普戈特时，一种包装或试剂盒可以在每片中包括纯化的I型他那普戈特。当周期性间断给予纯化的I型他那普戈特时，一种包装或试剂盒可以包括在不给予纯化的I型他那普戈特那些天中的安慰剂。
其它成分可以与纯化的I型他那普戈特同时施用，并且包括促孕剂、雌激素和选择性雌激素受体调节剂。
该试剂盒还优选这样组织，以便指出在所述周期的每一天服用的单一口服制剂或联合口服制剂，优选包括在指定的每一天服用的口服片剂，更优选一个口服片剂中含有所述每一联合日剂量。
在一个实施方案中，试剂盒可以包括在21-天、28-天、30-天或31-天的周期内的一种单一阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特。另选的，试剂盒可以包括在28-天、30-天或31-天的周期的最初21天内的一种单一阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特。试剂盒还可以包括在30-天或31-天的周期的最初28天内的一种单一阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特。
在进一步的实施方案中，试剂盒可以包括在21-天、28-天、30-天或31-天的周期内的一种单一联合阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特和促孕剂。另选的，试剂盒可以包括在28-天、30-天或31-天的周期的最初21天内的一种单一联合阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特和促孕剂。试剂盒还可以包括在30-天或31-天的周期的最初28天内的一种单一联合阶段的日剂量的纯化的I型他那普戈特和促孕剂。
在另一个实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段14到28个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；第二阶段1到11个日剂量单元的促孕剂；以及，任选地，第三阶段在所述周期的剩余天数内口服给予的药学上可接受的安慰剂。
在仍然进一步的实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段14到21个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；第二阶段1到11个日剂量单元的促孕剂；以及，任选地，第三阶段在所述周期的剩余天数内口服给予的药学上可接受的安慰剂。
在另一个实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段18到21个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；第二阶段1到7个日剂量单元的促孕剂；以及，任选地，在28-天周期的剩余0到9天内每天口服给予的药学上可接受的安慰剂。
在仍然进一步的实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段21个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；第二阶段从第22至第24天3个日剂量单元的促孕剂；以及，任选地，第三阶段从第25至第28天4个日剂量单元的口服给予的药学上可接受的安慰剂。
在另一个实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段14-21个日剂量单元的相当于约35至约150μg左炔诺孕酮促孕活性的促孕剂；第二阶段1至11个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；以及任选地，第三阶段在所述周期的剩余天数内的口服给予的药学上可接受的安慰剂，在所述周期未施用抗孕激素、黄体酮或雌激素。
在进一步的实施方案中，一个28-天试剂盒可以包括第一阶段14-21个日剂量单元的相当于约35至约100μg左炔诺孕酮促孕活性的促孕剂，第二阶段1至11个日剂量单元的纯化的I型他那普戈特；以及任选地，第三阶段在所述周期的剩余天数内的口服给予的药学上可接受的安慰剂，在所述周期未施用抗孕激素、黄体酮或雌激素。
优选的，在其给药的每个具体阶段，纯化的I型他那普戈特的日剂量保持不变。进一步优选的，所述的日剂量单元以在此所示的顺序给药，首先为第一阶段，按顺序接着为第二阶段和第三阶段。为了促进每个给药方案的顺应性，该试剂盒还优选含有在所述周期的最后天数中的所述安慰剂。
用于分配口服药剂的许多包装或试剂盒在本领域中是已知的。优选的，该包装具有针对28-天周期的每一天的指示，更优选该包装是一种贴标签的泡眼包装、刻度分配器包装或瓶子。
所述试剂盒可以进一步含有施用纯化的I型他那普戈特的说明书。G.参比标准品 进一步提供了纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈的参比标准品。期望的，在制备和贮藏条件下该参比标准品是稳定的，并且没有微生物例如细菌和真菌污染。该参比标准品还任选含有一种溶剂，如上所述，在该溶剂中所述纯化的I型他那普戈特是可溶的。期望的，在该溶剂中I型他那普戈特具有可接受的、适中的、良好的或完全的溶解性。
该参比标准品由此可用于多种目的。具体的，使用本领域技术人员已知的分析技术，该参比标准品可用于验证I型他那普戈特样品、测定I型他那普戈特样品的纯度、标定I型他那普戈特样品、I型他那普戈特样品的质量控制和校准用于I型他那普戈特样品表征的仪器等。可利用该参比标准品的分析技术包括但不限于核磁共振法(质子谱和碳谱)、质谱法、红外光谱法、色谱法如高效液相色谱法、X-射线衍射法和差示扫描量热法等。
还提供了含有如前述的纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈的参比标准品的试剂盒。含有参比标准品的所述试剂盒任选地含有一种溶剂和/或使用所述试剂盒的说明书等。
以下实施例用于说明本发明，而不是限制本发明的范围。尽管特定的试剂和条件已经在下面的实施例中列出，但是本领域熟练技术人员可以理解，在本发明的精神和范围内，可以对这些实施例进行改变。
实施例 实施例1——制备微粉化的他那普戈特 使用U-10 Comil磨，将根据美国临时专利申请公开第60/647,656号和美国专利申请公开第US-2005-0272702-A1号制备的他那普戈特研磨，然后使用JetmillMC50 Jetpharma Micronizer以E-ZTM FH-1.4Feeder进行微粉化。定期测定粒度达到全部样品50％分布的粒度小于约15μm，期望的小于约10μm。将该微粉化的他那普戈特装入三联poly-bagged纤维圆筒中。在最外层的各袋之间插入干燥剂，袋中的大气用氮气替换。
实施例2——使用溶剂纯化他那普戈特 在高温下将含有残余的钯的他那普戈特溶于一份表1所述的溶剂中，然后冷却至低温。在低温下维持所述批料至少约3小时，使用过滤收集沉淀的、纯化的他那普戈特并干燥之。
表1 实施例3——叫吏用溶剂系统纯化他那普戈特 在高温下将含有残余的钯的他那普戈特溶于一份丙酮中。然后向该丙酮中加入表2的抗溶剂。观察到浊化点之后，将所述批料加热至高温以达到完全溶解。用冷却浴替换加热套，使该丙酮/抗溶剂溶液冷却。在低温下维持所述批量至少约3小时之后，使用过滤收集沉淀的、纯化的他那普戈特并干燥之。
表2 实施例4——不进行浓缩的大规模纯化他那普戈特 在46-50℃下将含有残余的钯(21ppm)的他那普戈特(250g)溶于丙酮(2.3L)中。在将加热的溶液通过碳滤器循环至少约4小时之后，将冲洗泵和转运管线的丙酮(400mL)冲入反应器中。将该合并的丙酮溶液加热至约55(±2℃)，再以90mL/min的速度泵入水(850mL)。观察到浊化点之后，将所述批量加热至回流(57-60℃)以达到完全溶解。用冷却浴替换加热套，再以低于约0.5℃/分钟的速度使该丙酮/水溶液冷却至约-6至约0℃。在低温下维持所述批料至少约3小时之后，使用过滤收集沉淀的、纯化的他那普戈特。将该纯化的他那普戈特用1∶1水/丙酮混合物(2×150mL)洗涤2次，然后在低于35℃下干燥约4小时。进一步在低于约50℃(5托真空度)下进行干燥以除去残余的丙酮/水(0.02％)。称重纯化的他那普戈特为192g(产率76.8％，以HPLC面积％计的纯度99.42％，mp228-229℃，Pd＜1ppm)。
实施例5——进行浓缩的大规模纯化他那普戈特 在55℃下将他那普戈特(83g)溶于丙酮(820mL)中。将该溶液冷却至45℃，加入DarcoG66炭(4g)，将该混合物再次加热至回流并在回流下维持15min。将该批料通过在烧结玻璃漏斗上的Celite试剂层过滤。用丙酮(100mL)清洗烧瓶，并转移到漏斗上。滤饼用丙酮(3×150mL)洗涤。将合并的滤液转移至蒸馏装置中，收集部分溶剂(800mL)。将该浓缩物冷却至55℃，滴加水(120mL)并维持该温度直至观察到明显的混浊。将该批料再次加热至回流以完全溶解。使溶液冷却到环境温度。在约40℃开始观察到结晶。将该批料进一步冷却至-5℃，再在该温度下搅拌1小时。将该固体通过烧结玻璃过滤，再用体积比1∶1的丙酮∶水(2×50mL)洗涤。将滤饼风干达6小时，再进一步在真空烘箱中在45℃下干燥到恒重(67.2g，产率81％，以HPLC面积％计的纯度99.4％，mp229.2-230.5℃，未检出Pd)。
在本说明书中引用的所有出版物通过在此引用并入本文。虽然本发明是参照特别优选的实施方案进行描述的，但是可以理解，在不脱离本发明精神的基础上，可以对本发明进行改变。这些改变落入所附的权利要求书的范围内。
权利要求
1.化合物的微粉化形式，所述化合物为I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈，该微粉化形式具有小于约20μm的中值粒度。
2.根据权利要求1所述的微粉化形式，其具有小于约15μm的中值粒度。
3.根据权利要求1所述的微粉化形式，其具有小于约10μm的中值粒度。
4.根据权利要求1至3任意一项所述的微粉化形式，其差示扫描量热法热分析图具有T起始约230℃的吸热。
5.根据权利要求1至3任意一项所述的微粉化形式，其X-射线衍射峰图包含2θ约6.6°、10.3°、14.4°、19.8°、23.8°、26.3°和29.1°的峰。
6.5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈的纯化的I型，其
(i)差示扫描量热法热分析图具有T起始约230℃的吸热；和
(ii)X-射线衍射峰图包含2θ约6.6°、10.3°、14.4°、19.8°、23.8°、26.3°和29.1°的峰。
7.根据权利要求6所述的纯化的I型，其通过从丙酮和水中重结晶非纯化的5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈而获得。
8.根据权利要求7所述的纯化的I型，其中非纯化的5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈是微粉化的。
9.根据权利要求7或8所述的纯化的I型，其中非纯化的5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈被溶于热丙酮中形成溶液，将该丙酮溶液浓缩，将水与该浓缩的丙酮溶液混合，再将该浓缩的丙酮/水溶液冷却至室温。
10.根据权利要求6至9任意一项所述的纯化的I型，其含有低于约1％的杂质。
11.根据权利要求10所述的纯化的I型，其含有低于约0.5％的杂质。
12.根据权利要求10或11所述的纯化的I型，其中所述的杂质包含丙酮、异丙醇或水。
13.根据权利要求12所述的纯化的I型，其含有低于约0.1％的水。
14.根据权利要求6至13任意一项所述的纯化的I型，其中所述的质子核磁共振谱包含图1所述的图谱。
15.根据权利要求6至14任意一项所述的纯化的I型，其中所述质谱包含图2所述的图谱。
16.根据权利要求6至15任意一项所述的纯化的I型，其中所述傅里叶变换红外光谱包含图3所述的图谱。
17.根据权利要求6至16任意一项所述的纯化的I型，其中所述高效液相色谱包含图4所述的图谱。
18.根据权利要求6至17任意一项所述的纯化的I型，其中所述X-射线衍射图包含图5所述的图谱。
19.根据权利要求6至18任意一项所述的纯化的I型，其中所述差示扫描量热法热分析图包含图6所述的热分析图。
20.一种试剂盒，其包含(i)纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈；和(ii)适合施用于哺乳动物受试者的载体。
21.根据权利要求20所述的试剂盒，其中所述的5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈是微粉化的。
22.一种纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈的参比标准品。
23.根据权利要求22所述的参比标准品，进一步包含溶剂。
24.一种试剂盒，其包含权利要求22或23所述的参比标准品。
25.根据权利要求24所述的试剂盒，其进一步包含使用所述参比标准品的说明书。
26.一种制备包含纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈的药物组合物的方法，其包括将纯化的I型5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈与以下的一种或多种物质组合
(i)金属螯合剂；
(ii)pH值调节剂；
(iii)表面活性剂；
(iv)至少一种填料；
(v)粘合剂；
(vi)崩解剂；和
(vii)润滑剂。
27.根据权利要求26所述的方法，其中5-(4，4-二甲基-2-硫代-1，4-二氢-2H-3，1-苯并嗪-6-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲腈是微粉化的。
全文摘要
提供了微粉化的他那普戈特、纯化的I型他那普戈特以及微粉化的纯化Ⅰ型他那普戈特。还提供了含有一种或多种所制他那普戈特形式的组合物、使用一种或多种所制他那普戈特形式的方法以及含有一种或多种所制他那普戈特形式的试剂盒。
文档编号C07D265/14GK101184738SQ200680014232
公开日2008年5月21日 申请日期2006年4月26日 优先权日2005年4月28日
发明者R·查特拉帕利, A·纳吉, J·波托斯基, J·L·赫伦, B·K·威尔克, A·Z·鲁贝兹霍夫, V·德拉根 申请人:惠氏公司