抗-igf1r抗体制剂的制作方法

专利名称：抗-igf1r抗体制剂的制作方法
本申请要求2005年6月15日提交的美国临时专利申请第60/690,810号的权利，该申请通过引用整体结合本文中。
发明领域 本发明尤其提供一种包含呈现高度稳定性的抗体的药物制剂。

背景技术：
与大多数蛋白质一样，抗体必须保持其高级结构以保持其活性。出售抗体(包括治疗性抗体)的公司所面临的一个问题，是确定抗体可长期存在而又不会发生变性从而丧失生物活性的条件。一般来说，市售的治疗性抗体较不稳定，因此需要小心操作并于低温下储存。例如，治疗性抗体AvastinTM、Herceptin

和ErbituxTM需要在2℃至8℃下储存。业内许多公司(例如Pfizer、Imclone、Pierre Fabre、Roche和Immunogen)所拥有的抗IGF1R抗体很可能同样会呈现不稳定性。
现有的治疗性抗体所呈现出的低水平稳定性是一不利因素，原因在于所需特殊储存条件会带来较高成本和不方便，还在于存在着抗体在给予之前出现意外失活和可能因降解/聚集而出现毒性/免疫原性的危险。因此，本领域需要一种在宽范围条件下储存时也能使治疗性抗体(例如抗IGF1R治疗性抗体)保持稳定的药物制剂。
发明概述 本发明通过提供这样一种药物制剂来满足上述的本领域需求，该药物制剂包含呈现极佳稳定性并因此可在室温下储存的分离的抗IGF1R抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段。
本发明提供这样一种药物制剂，其包含治疗有效量(或在本发明的一个实施方案中为任何数量)的能特异性结合IGF1R的分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段、缓冲液如乙酸盐(例如乙酸钠、乙酸钾、乙酸镁)和乙酸(例如浓度为约1mM至约20mM)和蔗糖(例如浓度为约5mg/ml至约70mg/ml)，其pH任选为约5.5至约6.0(例如5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0)。在一个实施方案中，所述抗体或片段包含一个或多个选自SEQ ID NO1-3的轻链互补决定区；和一个或多个选自SEQ ID NO4-7的重链互补决定区。
本发明也提供一种包含分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段、乙酸盐、乙酸和蔗糖，pH为约5.5的冻干药物制剂，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区。
本发明提供一种包含分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段、乙酸盐、乙酸和蔗糖，pH为约5.5的药物制剂，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区。在本发明的一个实施方案中，该制剂是无菌的。在本发明的一个实施方案中，该抗体包含选自γ1、γ2、γ3和γ4的重链恒定区或κ轻链区。在本发明的一个实施方案中，该制剂是水溶液。在本发明的一个实施方案中，抗体浓度为约20mg/ml。在本发明的一个实施方案中，乙酸盐的浓度为约2.3mg/ml，乙酸的浓度为约0.18mg/ml，蔗糖的浓度为约70mg/ml。在本发明的一个实施方案中，将该制剂与另外的治疗药物(例如选自以下的成员)联合使用

(紫杉醇)；

(吉非替尼(gefitinib))； (多西他赛)； (长春新碱)；

(长春碱)；

(罗那法米(lonafarnib))；


(替莫唑胺)；(多柔比星)；

(柔红霉素)；

(他莫昔芬)；

(4-羟基他莫昔芬和下文在“另外的治疗药物和程序”中所述的任何其它药剂)。
在一个实施方案中，该制剂在单一组合物中包含分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段、乙酸盐、乙酸和蔗糖，pH为约5.5，以及另一治疗药物，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区。
本发明提供这样一种pH为5.5的药物制剂，其包含(a)20mg/ml(或在本发明的一个实施方案中为任何浓度)的分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠(USP)；(c)0.18mg/ml的冰乙酸(USP/Ph.Eur)；(d)70mg/ml的蔗糖(NF、Ph.Eur、BP)；和(e)水。
本发明提供这样一种pH为5.5的冻干药物制剂，其当复溶时包含(a)20mg/ml(或在本发明的一个实施方案中为任何浓度)的分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠(USP)；(c)0.18mg/ml的冰乙酸(USP/Ph.Eur)；和(d)70mg/ml的蔗糖(NF、Ph.Eur、BP)。
本发明提供一种包含任何本文所述制剂的容器(例如玻璃小瓶)。
本发明提供一种包含任何本文所述制剂的注射装置(例如皮下注射针和注射器)。
本发明提供这样一种药盒，其包含(a)盛于容器或注射装置中的任何本发明制剂；和(b)包装插页，其包括一项或多项选自以下的关于该制剂的信息药代动力学、药效动力学、临床研究、功效参数、适应症和使用指导、禁忌、告诫事项、预防措施、不良反应、过剂量、适宜剂量和给药方式、供应方式、适宜储存条件、参考文献和专利信息。
本发明还提供一种治疗或预防受试者(例如人)的由IGF1R、IGF-1和/或IGF-2介导的医学病症的方法，所述方法包括给予该受试者治疗有效量的任何本文所述制剂。在本发明的一个实施方案中，该医学病症选自以下神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、任何儿科癌症、肢端肥大症、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、良性前列腺增生症、乳腺癌、前列腺癌、骨癌、肺癌、结肠直肠癌、子宫颈癌、滑膜肉瘤、膀胱癌、维尔姆斯氏(Wilm′s)癌症、卵巢癌、良性前列腺增生症(BPH)、与转移性类癌瘤和血管活性肠肽分泌瘤相关的腹泻、血管活性肠肽肿瘤(VIPoma)、Werner-Morrison综合征、肾癌、肾细胞癌、移行细胞癌、尤文氏肉瘤(EwingSarcoma)、白血病、急性淋巴母细胞性白血病、脑癌、胶质细胞瘤、非胶质细胞瘤性脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原发性神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、巨大症、牛皮癣、动脉粥样硬化、血管平滑肌再狭窄、不适当的微血管增生、肢端肥大症、巨大症、牛皮癣、动脉粥样硬化、血管平滑肌再狭窄或不适当的微血管增生、格雷夫斯氏病(Grave′sdisease)、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto′s Thyroiditis)、重症肌无力、自身免疫性甲状腺炎和白塞病(Bechet′s disease)。在本发明的一个实施方案中，将另一治疗药物与该制剂联合给予受试者。在本发明的一个实施方案中，该另一治疗药物选自以下

(紫杉醇)；

(吉非替尼)；

(多西他赛)；

(长春新碱)；

(长春碱)；

(罗那法米)；


(替莫唑胺)；
(多柔比星)；

(柔红霉素)；

(他莫昔芬)；

(4-羟基他莫昔芬；及一种或多种下文在“另外的治疗药物和程序”中所述的其它药剂)。
在一个实施方案中，该制剂以胃肠外方式(例如静脉内、肌肉内、肿瘤内、鞘内、动脉内、皮下)给予受试者。在本发明的一个实施方案中，该制剂为pH 5.5，包含(a)20mg/ml的分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠(USP)；(c)0.18mg/ml的冰乙酸(USP/Ph.Eur)；(d)70mg/ml的蔗糖(NF、Ph.Eur、BP)；和(e)水。
本发明提供一种使分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段稳定的方法，该分离的抗体(例如单克隆抗体)或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区，所述方法包括将该抗体与乙酸盐、乙酸和蔗糖组合，任选pH为约5.5。在本发明的一个实施方案中，抗体浓度为约20mg/ml。在本发明的一个实施方案中，乙酸盐的浓度为约2.3mg/ml，乙酸的浓度为约0.18mg/ml，蔗糖的浓度为约70mg/ml。
附图简述

图1.(a)pH 5的乙酸盐缓冲液中的抗IGF1R抗体的代表性FUV CD扫描图；(b)pH 5的乙酸盐缓冲液中的抗IGF1R抗体的代表性NUV CD扫描图。
图2.(a)不同缓冲液中的抗IGF1R抗体的FUV CD谱图；(b)217nm下椭圆率随pH的变化；(c)235nm下椭圆率随pH的变化；(d)202nm下椭圆率随pH的变化。
图3.不同缓冲液中的抗IGF1R抗体的NUV CD谱图。
图4.(a)抗IGF1R抗体的FUV CD热熔数据；(b)T开始(源自FUV CD数据)随pH的变化。
图5.(a)抗IGF1R抗体的NUV CD热熔数据；(b)T开始(源自NUV CD数据)随pH的变化。
图6.(a)抗IGF1R抗体的DSC温度记录图；(b)T开始(源自DSC数据)随pH的变化；(c)Tml(源自DSC数据)随pH的变化。
图7.(a)抗IGF1R抗体的粒径分布；(b)抗IGF1R抗体(pH7的磷酸盐缓冲液中)在不同温度下的粒径分布变化。
图8.(a)抗IGF1R抗体的聚集作用T开始数据；(b)聚集作用的T开始随pH的变化。
图9.(T开始源自FUV CD数据)氯化钠对T开始的影响。
图10.(T开始源自FUV CD数据)蔗糖对T开始的影响。
图11.乙酸盐缓冲液(pH 5.5)加7％w/v蔗糖中的抗IGF1R抗体的稳定性。
发明详述 本发明制剂中的抗体呈现极佳稳定性。本发明的制剂能让其中所含的抗体即使在室温下(例如25℃)保藏数月后也保持完好。这种高稳定性使本发明的制剂特别有用，例如因为制剂能让拥有它的临床医生、患者或药房方便地选择是在室温下还是在冷冻下进行保藏。此外，高稳定性确保抗体随时间推移能保持其生物活性，而这又确保抗体例如当用来治疗癌症时能保持其功效。即使不在室温下保藏(例如在4℃下冷藏)，也能实现本发明制剂的独特好处。当在4℃下保藏时，制剂显示出更大一点的稳定性。
本发明尤其提供这样一种药物制剂，其包含任何抗IGF1R抗体、缓冲液如乙酸盐/乙酸缓冲液和蔗糖，其pH为约5.5至约6.0(例如5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0；在本发明的一个实施方案中，pH为约5.3或5.4)。本发明制剂可用于例如给药于患者以治疗或预防由IGF1R表达或活性的升高介导的，或者由其配体(例如IGF-I或IGF-II)表达的升高介导的，可通过对IGF1R配体结合、活性或表达的调节来进行治疗或预防的任何医学病症。在本发明的一个实施方案中，该疾病或病况由IGF1R、IGF-I或IGF-II的水平升高介导，可通过降低IGF1R配体结合、活性(例如自身磷酸化活性)或表达来进行治疗或预防。
在本发明的一个实施方案中，本发明制剂处方如下所示 在本发明的一个实施方案中，本发明制剂处方如下所示 成分mg/ml 抗IGF1R抗体(API)20.0 三水合乙酸钠USP 2.30 冰乙酸USP/Ph.Eur0.18 蔗糖NF，Ph.Eur，BP 70.0 注射用水USP，Ph.Eur.适量加至1ml 有关制剂的一般信息参见例如Gilman等(编辑)(1990)，ThePharmacological Bases of Therapeutics，第8版，Pergamon Press；A.Gennaro(编辑)，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania.；Avis等(编辑)(1993)Pharmaceutical Dosage FormsParenteral Medications Dekker，New York；Lieberman等(编辑)(1990)Pharmaceutical Dosage FormsTablets Dekker，New York；Lieberman等(编辑)(1990)，Pharmaceutical Dosage FormsDisperse Systems Dekker，New York；Kenneth A.Walters(编辑)(2002)Dermatological and Transdermal Formulations(Drugs and thePharmaceutical Sciences)，第119卷，Marcel Dekker。
术语“受试者”或“患者”包括任何生物体，例如，哺乳动物(例如大鼠、小鼠、猫、狗、马、兔、猴、猿、灵长类动物、黑猩猩、鸟或母牛)，比如人，包括少年受试者(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18周岁)和老年受试者(例如60、65、70、75、80、85、90周岁或以上)。
抗体 本发明包括包含有抗IGF1R抗体或其抗原结合片段的药物组合物。术语“抗IGF1R”抗体包括任何包含例如15H12/19D12HC(重链)、HCA或HCB和/或15H12/19D12LC(轻链)、LCA、LCB、LCC、LCD、LCE或LCF(或其任何成熟片段)(例如LCF和HCA)的抗体。在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包括能特异性结合IGF1R或其任何片段(例如sIGF1R)的抗体和片段。在本发明的一个实施方案中，抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体、人源化抗体、嵌合抗体、抗独特型抗体和双特异性抗，片段包括Fab抗体片段、F(ab)2抗体片段、Fv抗体片段(例如VH或VL)、单链Fv抗体片段和dsFv抗体片段。此外，在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体是完全人抗体。在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体是单克隆完全人抗体。在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体包含一个或多个其氨基酸和核苷酸序列如本文所述的可变区和/或CDR RASQSIGSSLH(SEQ ID NO1)； YASQSLS(SEQ ID NO2)； HQSSRLPHT(SEQ ID NO3)； SFAMH(SEQ ID NO4) GFTFSSFAMH(SEQ ID NO5)； VIDTRGATYYADSVKG(SEQ ID NO6)； LGNFYYGMDV(SEQ ID NO7)； 本发明的范围涵盖一种包含抗IGF1R抗体的药物制剂，该抗IGF1R抗体包含连接到恒定区(例如κ链)的轻链可变区和/或连接到恒定区(例如γ1、γ2、γ3或γ4恒定区)的重链可变区。
在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体能识别人IGF1R和/或sIGF1R(IGF1R的任何可溶性片段)；然而，本发明包括能识别源自别的物种例如哺乳动物(如小鼠、大鼠、兔子、羊或狗)的IGF1R的抗体。
在本发明的一个实施方案中，能“特异性”结合IGF1R(例如人IGF1R)的抗体或其抗原结合片段以约10-8M或10-7M或更低数值的Kd进行结合；或者在本发明的一个实施方案中，以约1.28×10-10M或更低数值的Kd(Biacore测量法)进行结合或以约2.05×10-12或更低数值的Kd(KinExA测量法)进行结合。在本发明的另一个实施方案中，能“特异性”结合人IGF1R的抗体或其抗原结合片段专门结合人IGF1R而不会以显著水平结合其它蛋白质。
在一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体，具体的说能“特异性”结合IGF1R的抗IGF1R抗体，包含一个或多个下列特征 (a)以约86×10-11或更低数值的Kd结合IGF1R； (b)对IGF1R的离解率(Koff)为约6.50×10-5或更低数值； (c)对IGF1R的结合率(Kon)为约0.7×105或更高数值； (d)与IGF1竞争结合IGF1R； (e)抑制IGF1R的自身磷酸化；和 (f)抑制表达IGF1R细胞的不依赖于贴壁的生长。
“Koff”是指抗体从抗体/抗原复合物解离的离解率常数。
“Kon”是指抗体与抗原的结合速率。
“Kd”是指特定抗体/抗原相互作用的解离常数。Kd＝Koff/Kon。
本文所用术语“单克隆抗体”包括从实质上均质的抗体群体获得的抗体，所述实质上均匀即是指构成群体的各个抗体除了可能少量存在的天然发生的突变外是完全相同的。单克隆抗体具有高度特异性，能靶向单一抗原位点。单克隆抗体的有利之处在于它们可通过杂交瘤培养物来合成，基本上不受其它免疫球蛋白的污染。修饰语“单克隆”表明该抗体的特征为实质上均质的抗体群体所共有，而不应理解为要求通过任何具体方法来产生该抗体。如上所述，按本发明使用的单克隆抗体可通过最先由Kohler等，(1975)Nature 256495阐述的杂交瘤方法或本领域公知的其它方法来制备。
多克隆抗体是在一种或多种其它的非完全相同抗体当中或存在下所产生的抗体。一般来说，多克隆抗体是由某种B淋巴细胞在几种能产生非完全相同抗体的其它B淋巴细胞的存在下产生的。通常，多克隆抗体直接从经免疫动物获得。
双特异性或双功能性抗体是具有两个不同重链/轻链对和两个不同结合位点的人工杂合抗体。双特异性抗体可通过多种方法来产生，包括杂交瘤的融合或Fab′片段的连接。参见例如Songsivilai等，(1990)Clin.Exp.Immunol.79315-321，Kostelny等，(1992)J Immunol.1481547-1553。另外，双特异抗体可作为“双抗体”(Holliger等，(1993)PNAS USA906444-6448)或作为“Janusins”(Traunecker等，(1991)EMBO J.103655-3659和Traunecker等，(1992)Int.J.Cancer Suppl.751-52)来形成。
术语“完全人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白氨基酸序列的抗体。完全人抗体如果是在小鼠中、在小鼠细胞中或在源自小鼠细胞的杂交瘤中产生，则该抗体可含有鼠糖链。同样，“小鼠抗体”是指仅包含小鼠免疫球蛋白序列的抗体。
本发明包括“嵌合抗体”，即包含一种物种的可变区和与之融合或嵌合的另一物种(例如小鼠、马、兔、狗、母牛和鸡)的抗体区域(例如恒定区)的抗体。这些抗体可用于调节非人物种中的IGF1R表达或活性。
“单链Fv”或“sFv”抗体片段具有抗体的VH和VL域，其中这些域存在于单一多肽链中。一般来说，sFv多肽还包含位于VH与VL域之间的多肽接头，其使sFv能够形成抗原结合所需的结构。已公开的用于产生单链抗体的技术(美国专利第5,476,786号、第5,132,405号和第4,946,778号)可作适应性改动以生产抗IGF1R特异性单链抗体。关于sFv的综述参见Pluckthun在The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，第113卷，Rosenburg和Moore(编辑)，Springer-Verlag，N.Y.，第269-315页(1994)所述。
“经二硫键稳定的Fv片段”和“dsFv”是指其所包含的可变重链(VH)和可变轻链(VL)通过二硫键连接的抗体分子。
本发明范围内的制剂中所用的抗体片段也包括F(ab)2片段，其可通过例如胃蛋白酶对IgG的酶法切割来产生。Fab片段可通过例如用二硫苏糖醇或巯乙胺还原F(ab)2来产生。Fab片段是VL-CL链通过二硫键附接到VH-CH1链而成。F(ab)2片段则是两个Fab片段通过两个二硫键附接而成。F(ab)2分子的Fab部分包括其间具有二硫键的Fc区部分。
Fv片段是VL或VH区。
免疫球蛋白可按其重链恒定域的氨基酸序列分成不同的类别。免疫球蛋白至少有5大类IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，这五种中有些还可分成亚类(同种型)，例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。
本发明制剂的抗IGF1R抗体也可缀合到化学部分(moiety)。该化学部分尤其可为聚合物、放射性核素或细胞毒性因子。在本发明的一个实施方案中，该化学部分是能延长抗体分子在受试者体内的半寿期的聚合物。适宜的聚合物包括但不限于聚乙二醇(PEG)(例如分子量为2kDa、5kDa、10kDa、12kDa、20kDa、30kDa或40kDa的PEG)、葡聚糖和单甲氧基聚乙二醇(mPEG)。Lee等，(1999)(Bioconj.Chem.10973-981)公开了PEG缀合的单链抗体。Wen等，(2001)(Bioconj.Chem.12545-553)公开了用附接到射电金属螯合剂(二乙烯三胺五乙酸(DTPA))的PEG来缀合抗体。
本发明制剂的抗体和抗体片段也可缀合上标记，如99Tc、90Y、111In、32P、14C、125I、3H、131I、11C、15O、13N、18F、35S、51Cr、57To、226Ra、60Co、59Fe、57Se、152Eu、67CU、217Ci、211At、212Pb、47Sc、109Pd、234Th、和40K、157Gd、55Mn、52Tr和56Fe。
本发明制剂的抗体和抗体片段也可缀合上荧光或化学发光标记，包括荧光团(例如稀土螯合物)、荧光素及其衍生物、罗丹明及其衍生物、异硫氰酸盐、藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、邻苯二甲醛、荧光胺、152Eu、丹磺酰、伞形酮、萤光素、鲁米那(luminal)标记、异鲁米那标记、芳族吖啶鎓酯(aromatic acridinium ester)标记、咪唑标记、吖啶鎓盐标记、草酸酯标记、水母发光蛋白标记、2，3-二氢化二氮杂萘二酮、生物素/抗生物素蛋白、自旋标记和稳定自由基。
本发明制剂的抗体和抗体片段也可缀合到以下细胞毒性因子白喉毒素、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A链、蓖麻毒素A链、相思豆毒素A链、蒴莲根毒素(modeccin)A链、α-帚曲菌素、油桐(Aleurites fordii)蛋白质和化合物(例如脂肪酸)、香石竹毒蛋白、美洲商陆(Phytoiacca americana)蛋白质PAPI、PAPII、和PAP-S、苦瓜(momordica charantia)抑制剂、麻风树毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草(saponaria officinalis)抑制剂、米托洁林(mitogellin)、局限曲菌素、酚霉素和伊诺霉素。
可采用任何本领域公知的用以将本发明制剂的抗体和抗体片段缀合到各种化学部分的方法，包括以下文献所描述的方法Hunter等，(1962)Nature 144945；David等，(1974)Biochemistry 131014；Pain等，(1981)J.Immunol.Meth.40219；和Nygren，J.，(1982)Histochem.和Cytochem.30407。缀合抗体的方法是常规方法，为本领域所熟知。
在一个实施方案中，将15H12/19D12LC、LCA、LCB、LCC、LCD、LCE或LCF与任何其它免疫球蛋白重链例如本文所述的任何免疫球蛋白重链二聚化。同样，在一个实施方案中，将15H12/19D12 HC、HCA或HCB与任何轻链例如本文所述之任何轻链二聚化。例如，可将115H12/19D12HCA或HCB与5H12/19D12LCC、LCD、LCE或LCF二聚化。在一个实施方案中，本发明抗IGF1R抗体的免疫球蛋白轻链和/或免疫球蛋白重链是成熟链。
各抗体链在下文显示。下划虚线的字码编码信号肽。下划实线的字码编码CDR。无下划线的字码编码构架区。各抗体链是缺乏信号肽的成熟片段。
19D12/15H12轻链(SEQ ID NO8)


Glu Ile Val Leu Thr Gln Val Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 19D12/15H12轻链-A(SEQ ID NO9)


Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 19D12/15H12轻链-B(SEQ ID NO10)


Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 19D12/15H12轻链-C(SEQ ID NO11)


E IVLTQSPDSLSVTP GERVTITCRASQSIGSS LHWYQQKPGQSPKLLIK YASQSLSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLEAEDA AAYYCHQSSRLPHTFGQ GTKVEIKRT 经修饰的19D12/15H12轻链-D(SEQ ID NO12)


E IVLTQSPDSLSVTP GERVTITCRASQSIGSS LHWYQQKPGQSPKLLIK YASQSLSGVPSRFSGSG SGTDFTLTISSLEAEDF AVYYCHQSSRLPHTFGQ GTKVEIKRT 经修饰的19D12/15H12轻链-E(SEQ ID NO13)


E IVLTQSPGTLSVSP GERATLSCRASQSIGSS LHWYQQKPGQAPRLLIK YASQSLSGIPDRFSGSG SGTDFTLTISRLEPEDA AAYYCHQSSRLPHTFGQ GTKVEIKRT 19D12/15H12轻链-F(SEQ ID NO14)


E IVLTQSPGTLSVSP GERATLSCRASQSIGSS LHWYQQKPGQAPRLLIK YASQSLSGIPDRFSGSG SGTDFTLTISRLEPEDF AVYYCHQSSRLPHTFGQ GTKVEIKRT 19D12/15H12重链(SEQ ID NO15)


Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 19D12/15H12重链-A(SEQ ID NO16)


Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 经修饰的19D12/15H12重链-B(SEQ ID NO17)


Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 含有编码上述抗体链的质粒的细胞系在美国模式培养物保藏所(ATCC)中保藏如下 (i)CMV启动子-15H12/19D12 HCA(γ4)- 保藏名称“15H12/19D12 HCA(γ4)”； ATCC登录号PTA-5214； (ii)CMV启动子-15H12/19D12 HCB(γ4)- 保藏名称“15H12/19D12HCB(γ4)”； ATCC登录号PTA-5215； (iii)CMV启动子-15H12/19D12 HCA(γ1)- 保藏名称“15H12/19D12 HCA(γ1)”； ATCC登录号PTA-5216； (iv)CMV启动子-15H12/19D12 LCC(κ)- 保藏名称“15H12/19D12 LCC(κ)”； ATCC登录号PTA-5217； (v)CMV启动子-15H12/19D12 LCD(κ)- 保藏名称“15H12/19D12 LCD(κ)”； ATCC登录号PTA-5218； (vi)CMV启动子-15H12/19D12 LCE(κ)- 保藏名称“15H12/19D12 LCE(κ)”； ATCC登录号PTA-5219；和 (vii)CMV启动子-15H12/19D12 LCF(κ)- 保藏名称“15H12/19D12 LCF(κ)”； ATCC登录号PTA-5220； HCA为重链A；HCB为重链B，LCC为轻链C；LCD为轻链D；LCE为轻链E，LCF为轻链F。
上述质粒根据布达佩斯条约于2003年5月21日保藏在美国模式培养物保藏所(ATCC)(10801 University Boulevard；Manassas，Virginia 20110-2209)。所有对获取保藏在ATCC的质粒的限制在授予专利(参见已公布的美国专利公布号US2004/0018191)时将解除。
本申请包括本文所述的包含抗体和抗原结合片段的制剂及其使用方法，所述抗体或其抗原结合片段的免疫球蛋白链(如其成熟的链)例如重链或轻链由如上所述在ATCC保藏的细胞系中的质粒中的插入序列所编码。包含由该质粒编码的、含有与上述恒定区不同的恒定区的免疫球蛋白的制剂，与其使用方法如本文所提出的使用方法一起，也落入本发明的范围内。
另外的治疗剂和程序 在本发明的一个实施方案中，将另外的化学治疗剂与本发明的抗IGF 1R制剂联合提供和/或给予。在一个实施方案中，该另外的化学治疗剂是铂基化合物、信号转导抑制剂、细胞周期抑制剂、IGF/IGF1R系统调节剂(例如抑制剂或激活剂)、法尼基(farnesyl)蛋白转移酶(FPT)抑制剂、表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、HER2抑制剂、血管表皮生长因子(VEGF)受体抑制剂、促分裂原活化蛋白(MAP)激酶抑制剂、MEK抑制剂、AKT抑制剂、mTOR抑制剂、pI3激酶抑制剂、Raf抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂、微管稳定剂、微管抑制剂、SERMs/抗雌激素、芳香酶抑制剂、蒽环类抗生素、蛋白酶体抑制剂或能抑制胰岛素样生长因子(IGF)生成的药剂。
本发明的组合物和方法包括抗IGF1R制剂与一种或多种另外的治疗药物或程序的“联合”。术语“联合”表示各组分(例如抗IGF1R抗体以及紫杉醇)可调配成同时递送用的单一组合物或者分开调配成两种或多种组合物(例如药盒)。此外，每一组分可在与另一组分的给予时间不同的时间给予受试者；例如，可在给定的时间段分若干时间间隔以不同时方式(例如分开或依序)进行每次给药。再且，可将各组分通过相同途径或不同途径(例如其中抗IGF1R抗体制剂胃肠外给予，吉非替尼经口给予)给予受试者。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与法尼基蛋白转移酶(FPT)抑制剂联合提供和/或给予，该抑制剂包括三环酰胺化合物，如在美国专利第5,719,148号或第5,874,442号中公开的任何三环酰胺化合物。在一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与任何由下式表示的化合物或其药物可接受的盐或溶剂合物联合提供
其中a、b、c和d中的一个表示N或NR9，其中R9为O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n为1-3，余下的a、b、c和d基团表示CR1或CR2；或a、b、c和d各自独立选自CR1或CR2；每一R1和每一R2独立选自H、卤素、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t为0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、-SR11C(O)OR11、
-SR11N(R75)2(其中每一R75独立选自H和-C(O)OR11)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基，或取代的四唑-5-基硫基、炔基、烯基或烷基，该烷基或烯基任选被卤素、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4可相同或不同，各自独立表示H，任何取代基R1和R2或R3和R4一起表示稠合到苯环的饱和或不饱和C5-C7稠环；R5、R6、R7和R8各自独立表示H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任选被-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、OPO3R10取代；或R5、R6、R7和R8中的一个可与下文定义的R40一起表示-(CH2)r-，其中r为1-4，-(CH2)r-可被低级烷基、低级烷氧基、-CF3或芳基取代；或R5和R6组合在一起表示＝O或＝S和/或R7和R8组合在一起表示＝O或＝S；R10表示H、烷基、芳基或芳烷基；R11表示烷基或芳基；X表示N、CH或C，该C可含有虚线所表示的与碳原子11连接的任选的双键；碳原子5和6之间的虚线表示任选的双键，这样当存在双键时，A和B独立表示-R10、卤素、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，当碳原子5和6之间无双键时，A和B各自独立表示H2、-(OR11)2；H和卤素、二卤素、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、＝O、芳基和H、＝NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p为2、3或4；R表示下文定义的R40、R42、R44或R54；R40表示H、芳基、烷基、环烷基、烯基、炔基或-D，其中-D表示
其中R3和R4如前文所定义，W为O、S或NR10，其中R10如上文所定义；所述R40环烷基、烯基和炔基任选被1-3个选自卤素、-CON(R10)2、芳基、-CO2R10、-OR12、-SR12、-N(R10)2、-N(R10)CO2R11、-COR12、-NO2或D的基团取代，其中-D、R10和R11如上文所定义，R12表示R10、-(CH2)mOR10或-(CH2)qCO2R10，其中R10如前文所定义，m为1-4，q为0-4；所述烯基和炔基R40基团分别在含有双键或三键的碳原子上不含-OH、-SH或-N(R10)2；或R40表示被选自-SO2NH2、-NHSO2CH3、-SO2NHCH3、-SO2CH3、-SOCH3、-SCH3、或-NHSO2CF3的基团取代的苯基，优选所述基团位于苯环的对位；或R40表示选自以下的基团

R42表示
其中R20、R21和R46各自独立选自 (1)H； (2)-(CH2)qSC(O)CH3，其中q为1-3； (3)-(CH2)qOSO2CH3，其中q为1-3； (4)-OH； (5)-CS(CH2)w(被取代苯基)，其中w为1-3，所述被取代苯基上的取代基与下文对所述被取代苯基所定义的取代基相同； (6)-NH2； (7)-NHCBZ； (8)-NHC(O)OR22，其中R22为具有1-5个碳原子的烷基，或R22表示被1-3个烷基取代的苯基； (9)烷基； (10)-(CH2)k苯基，其中k为1-6； (11)苯基； (12)被取代苯基，其中各取代基选自卤素、NO2、-OH、-OCH3、-NH2、-NHR22、-N(R22)2、烷基、-O(CH2)t苯基(其中t为1-3)和-O(CH2)t被取代苯基(其中t为1-3)； (13)萘基； (14)被取代萘基，其中各取代基如上文对被取代苯基所定义； (15)具有5-10个碳原子的桥接多环烃； (16)具有5-7个碳原子的环烷基； (17)杂芳基； (18)羟基烷基； (19)被取代吡啶基或被取代吡啶基N-氧化物，其中各取代基选自甲基吡啶基、吗啉基、咪唑基、1-哌啶基、1-(4-甲基哌嗪基)、-S(O)tR11或任何上文对所述被取代苯基定义的取代基，且所述各取代基通过置换键合到环碳的氢而键合到所述碳；
(23)-NHC(O)-(CH2)k-苯基或-NH(O)-(CH2)k-被取代苯基，其中所述k如上文所定义； (24)哌啶环V
其中R50表示H、烷基、烷基羰基、烷基氧基羰基、卤代烷基、或-C(O)NH(R10)，其中R10为H或烷基；环V包括
环V的实例包括
(25)-NHC(O)CH2C6H5或-NHC(O)CH2-被取代C6H5； (26)-NHC(O)OC6H5；
(30)-OC(O)-杂芳基，例如
(31)-O-烷基(例如-OCH3)；和 (32)-CF3； (33)-CN； (34)下式的杂环烷基
(35)下式的哌啶基
其中R85为H、烷基、或被-OH或-SCH3取代的烷基；或R20和R21一起形成＝O基团，余下的R46如上文所定义；或 R20、R21和R46中的2个一起可形成哌啶环V
其中R50表示H、烷基(例如甲基)、烷基羰基(例如CH3C(O)-)、烷基氧基羰基(例如-C(O)O-t-C4H9、-C(O)OC2H5和-C(O)OCH3)、卤代烷基(例如三氟甲基)、或-C(O)NH(R10)(其中R10为H或烷基)；环V包括
环V的实例包括
条件是要对R46、R20和R21进行选择，使得与其键合的碳原子不会含有1个以上的杂原子(即对R46、R20和R21进行选择，使得与其键合的碳原子含有0或1个杂原子)；R44表示
其中R25表示杂芳基、N-甲基哌啶基或芳基；R48表示H或烷基；R54表示式(i)、(ii)、(iii)或(iv)的N-氧化物杂环基团
其中R56、R58和R60可相同或不同，各自独立选自H、卤素、-CF3、-OR10、-C(O)R10、-SR10、-S(O)eR11(其中e为1或2)、-N(R10)2、-NO2、-CO2R10、-OCO2R11、-OCOR10、烷基、芳基、烯基或炔基，该烷基可被-OR10、-SR10或-N(R10)2取代，该烯基可被OR11或SR11取代；或R54表示式(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)的N-氧化物杂环基团
其中Y表示N+-O-，E表示N；或 R54表示被所述N-氧化物杂环基(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(ia)、(iia)、(iiia)或(iva)中的一个取代的烷基；Z表示O或S，使得R可与上文定义的R5、R6、R7或R8组合，或R表示R40、R42、R44或R54。以上各式的R20、R21和R46的实例包括

R25基团的实例包括
其中Y表示N或NO，R28选自C1-C4烷基、卤素、羟基、NO2、氨基(-NH2)、-NHR30和-N(R30)2，其中R30表示C1-C6烷基。
在一个实施方案中，将以下三环酰胺与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予

(罗那法米；SarasarTM；Schering-Plough；Kenilworth，NJ)。在另一个实施方案中，将下列FPT抑制剂中的一个与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予

在一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予的FPT抑制剂，包括BMS-214662(

Hunt等，J.Med.Chem.43(20)3587-95(2000)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.82259-2267(2002)；(R)-7-氰基-2，3，4，5-四氢-1-(1H-咪唑-4-基甲基)-3-(苯基甲基)-4-(2-噻吩基磺酰基)-1H-1，4-苯并二氮杂

))和R155777(体皮法米(tipifarnib)；Garner等，Drug Metab.Dispos.30(7)823-30(2002)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.82259-2267(2002)；(B)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮)；
以商标ZarnestraTM出售；Johnson & Johnson；New Brunswick，NJ)。
在一个实施方案中，将能拮抗EGF受体或HER2的作用的抑制剂与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予例如，HuMax-CD20(由Genmab出售；Copenhagen，Denmark)；Campath-1H

(Riechmann等，Nature 332323(1988))；HuMax-EGFr(由Genmab出售；Copenhagen，Denmark)；帕妥珠单抗(OmnitargTM，2C4；Genentech；San Francisco，CA)；贝伐单抗(bevacizumab)(Presta等，Cancer Res 574593-9(1997)；由Genentech以商标Avastin

出售；San Francisco，CA)；替坦异贝莫单抗(Ibritumomab tiuxetan)(由Biogen Idec以商标Zevalin

出售；Cambridge，MA)；托西奠单抗(Tositumomab)和碘I131(由Corixa Corp.以商标Bexxar

出售；Seattle，WA和Glaxosmithkline；Philadelphia，PA出售)；吉妥单抗(gemtuzumab ozogamicin)(由Wyeth Ayerst以商标Mylotarg

出售；Madison，NJ)或MDX-010(Medarex；Princeton，NJ)；曲司佐单抗(trastuzumab)(以商标Herceptin

出售；Genentech公司；S.San Francisco，CA)；CP-724714(

)；TAK-165(

)；HKI- 272 (

)；吉非替尼(Baselga等，Drugs 60Suppl 133-40(2000)；ZD-1893；4-(3-氯-4-氟苯氨基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉；以商标IressaTM出售；AstraZeneca；Wilmington，DE；

)；OSI-774(

；埃罗替尼(erlotinib)，Hidalgo等，J.Clin.Oncol.19(13)3267-3279(2001))、拉帕替尼(Lapatanib)(

GW2016；Rusnak等，Molecular Cancer Therapeutics 185-94(2001)；N-{3-氯-4-[(3-氟苄基)氧基]苯基}-6-[5-({[2-(甲基磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺；PCT中请第WO99/35146号)、卡纳替尼(Canertinib)(CI-1033；

；Erlichman等，Cancer Res.61(2)739-48(2001)；Smaill等，J.Med.Chem.43(7)1380-97(2000))、ABX-EGF抗体(Abgenix公司；Freemont，CA；Yang等，Cancer Res.59(6)1236-43(1999)；Yang等，Crit Rev Oncol Hematol.38(1)17-23(2001))、艾比特克斯(erbitux)(美国专利第6,217,866号；IMC-C225，西土西单抗(cetuximab)；Imclone；New York，NY)、EKB-569(

；Wissner等，J.Med.Chem.46(1)49-63(2003))、PKI-166(

；CGP-75166)、GW-572016、任何抗EGFR抗体和任何抗HER2抗体。
在本发明的一个实施方案中，将已被阐述为可用于抑制EGFR的许多其它小分子中的一种或多种，与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。例如，美国专利第5,656,655号公开了能抑制EGFR的苯乙烯基取代的杂芳基化合物。美国专利第5,646,153号公开了能抑制EGFR和/或PDGFR的双单环和/或二环芳基杂芳基碳环和杂碳环化合物(bis monoand/or bicyclic aryl heteroaryl carbocyclic and heterocarbocycliccompounds)。美国专利第5,679,683号公开了能抑制EGFR的三环嘧啶化合物。美国专利第5,616,582号公开了具有受体酪氨酸激酶抑制活性的喹唑啉衍生物。Fry等，Science 265 1093-1095(1994)公开了具有能抑制EGFR的结构的化合物(参见Fry等的图1)。美国专利第5,196,446号公开了能抑制EGFR的杂芳基亚乙烯基(heteroarylethenediyl)或杂芳基亚乙烯基芳基(heteroarylethenediylaryl)化合物。Panek等，Journal of Pharmacologyand Experimental Therapeutics 283，1433-1444(1997)公开了称为PD166285的化合物，其能抑制EGFR、PDGFR和FGFR家族的受体。PD166285被鉴定为6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(2-二乙基氨基乙氧基)苯基氨基)-8-甲基-8H-吡啶并(2，3-d)嘧啶-7-酮。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与如下的LHRH(黄体生成素释放激素)激动剂联合提供和/或给予[D-Ser(Bu t)6，Azgly 10]的乙酸盐(pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu t)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2乙酸盐[C59H84N18O14·(C2H4O2)x其中x＝1-2.4]；

(乙酸戈舍瑞林；由AstraZenecaUK Limited以商标Zoladex

出售；Macclesfield，英国)，

(乙酸亮丙瑞林；由Sanofi-Synthelabo公司以商标Eligard

出售；New York，NY)或

(双羟萘酸曲普瑞林；由Pharmacia公司以商标Trelstar

出售，Kalamazoo，MI)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与FOLFOX方案(奥沙利铂(

)以及输注氟尿嘧啶(

)和亚叶酸(

))(Chaouche等，Am.J.Clin.Oncol.23(3)288-289(2000)；de Gramont等，J.Clin.Oncol.18(16)2938-2947(2000))联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与5′-脱氧-5-氟尿苷(

)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与天冬酰胺酶、芽孢杆菌卡介疫苗(Garrido等，Cytobios.90(360)47-65(1997))；

(博来霉素)；

(布舍瑞林)；或

(白消安；1，4-丁二醇、二甲磺酸盐；由ESPPharma公司以商标Busulfex

出售；Edison，New Jersey)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将铂基抗癌化合物如奥沙利铂(

；由Sanofi-Synthelabo公司以商标EloxatinTM出售；New York，NY)、

(JM118)、

(JM383)、

(JM559)、

(JM518)、


(沙铂)或

(卡铂)与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与DES(二乙基己烯雌酚；

)、

(雌二醇；由Warner Chilcott，Inc.以商标Estrol

出售；Rockaway，NJ)或共轭雌激素(由Wyeth Pharmaceuticals，Inc.以商标Premarin

出售；Philadelphia，PA)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与下列药剂联合提供和/或给予

(克拉屈滨)；

(氯膦酸盐)；

(环磷酰胺)；

(环丙孕酮)；

(阿糖胞苷)；

(达卡巴嗪)； 或

(放线菌素)。
在本发明的一个实施方案中，将VEGF受体抑制剂例如PTK787/ZK222584(Thomas等，Semin Oncol.30(3Suppl 6)32-8(2003))或人源化抗VEGF抗体贝伐单抗(以商标AvastinTM出售；Genentech，Inc.；South SanFrancisco，CA))与本发明的抗IGF 1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将MAP激酶抑制剂如VX-745(Haddad，Curr Opin.Investig.Drugs 2(8)1070-6(2001))与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将MAP激酶激酶(MEK)抑制剂如PD184352(Sebolt-Leopold等，Nature Med.5810-816(1999))与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将mTOR抑制剂如雷帕霉素或CCI-779(Sehgal等，Med.Res.Rev.，141-22(1994)；Elit，Curr.Opin.Investig.Drugs 3(8)1249-53(2002))与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将pI3激酶抑制剂如LY294002、LY292223、LY292696、LY293684、LY293646(Vlahos等，J.Biol.Chem.269(7)5241-5248(1994))或渥曼青霉素与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将Raf抑制剂如BAY-43-9006(

；Wilhelm等，Curr.Pharm.Des.82255-2257(2002))、ZM336372、L-779，450或任何其它在Lowinger等，Curr.Pharm Des.82269-2278(2002)中公开的Raf抑制剂与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂如flavopiridol(L86-8275/HMR 1275；Senderowicz，Oncogene 19(56)6600-6606(2000))或UCN-01(7-羟基星形孢菌素；Senderowicz，Oncogene19(56)6600-6606(2000))与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将IGF/IGFR抑制剂如IGF抑制性肽(参见例如美国公开专利申请第20030092631A1号；PCT公开申请第WO03/27246A2号、第WO 02/72780号)或任何4-氨基-5-苯基-7-环丁基-吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物(例如公开于PCT申请出版物第WO 02/92599号中的那些衍生物(例如

))或任何类黄酮糖苷配糖体如槲皮素(参见例如PCT申请出版物第WO 03/39538号)与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与以下药剂联合提供和/或给予

(氨磷汀)；

(NVP-LAQ824；Atadja等，Cancer Research 64689-695(2004))、

(N-辛二酰基苯胺异羟肟酸(suberoyl analide hydroxamic acid))、

(丙戊酸；Michaelis等，Mol.Pharmacol.65520-527(2004))、

(曲古抑菌素A)、

(FK-228；Furumai等，Cancer Research 624916-4921(2002))或

(SU11248；Mendel等，Clin.Cancer Res.9(1)327-37(2003))。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与促孕剂如

(乙酸甲羟孕酮；由Pharmacia &Upjohn Co.以商标Provera

出售；Kalamazoo，MI)或

(己酸羟孕酮；17-((1-氧代己基)氧基)孕-4-烯-3，20-二酮)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与

(卡莫司汀)或

(苯丁酸氮芥)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予的能抑制IGF生成的药剂，包括奥曲肽(L-半胱氨酸酰胺，D-苯基丙氨酰-L-半胱氨酰-L-苯基丙氨酰-D-色氨酰-L-赖氨酰-L-苏氨酰-N-[2-羟基-1-(羟甲基)丙基]-，环(2_7)-二硫化物；[RR*，R*)]；
Katz等，Clin Pharm.8(4)255-73(1989)；以商标Sandostatin LAR

Depot出售；Novartis Pharm.Corp.；E.Hanover，NJ)。
在本发明的一个实施方案中，将蛋白酶体抑制剂如波替单抗(bortezomib)(
；[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸；以商标VelcadeTM出售；Millennium Pharm.，Inc.；Cambridge，MA)与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将微管稳定剂或微管解聚剂/抑制剂如紫杉醇(

；以商标Taxol

出售；Bristol-Myers Squibb；New York，NY)、多西他赛(

；以商标Taxotere

出售；AventisPharm，Inc.；Bridgewater，NJ)；长春新碱(

)、长春碱(

)、埃坡霉素(epothilone)B和BMS-247550(

Lee等，Clin.Cancer Res.7(5)1429-37(2001))、任何鬼臼毒素或其衍生物(包括依托泊苷(Etoposide)(VP-16；

)或BMS-310705(

)与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与美国专利第5,260,291号中所述的任何一种或多种化合物联合提供。例如，在本发明的一个实施方案中，该化合物是以下结构式表示的[3H-咪唑并-5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮衍生物
其中R1表示氢原子或含有至多6个碳原子的直链或支链烷基(例如-CH3)、烯基或炔基，每个这种基团未被取代或被1-3个选自以下的取代基所取代卤素(即溴、碘或者优选地氯或氟)原子、含有至多4个碳原子的直链或支链烷氧基(例如甲氧基)、烷基硫基、烷基亚磺酰基和烷基磺酰基及任选被取代的苯基，或R1表示环烷基，R2表示可在氮原子上携带一个或两个选自直链和支链烷基和烯基(各自含有至多4个碳原子)及环烷基的基团的氨基甲酰基，例如，甲基氨基甲酰基或二甲基氨基甲酰基。
当符号R1表示被2或3个卤素原子取代的烷基、烯基或炔基时，上述卤素原子可相同或不同。当符号R1表示被1、2或3个任选被取代的苯基所取代的烷基、烯基或炔基时，该苯基基团上的任选取代基可选自例如含有至多4个碳原子的烷氧基和烷基(例如甲氧基和/或甲基)及硝基；符号R1可表示例如苄基或对甲氧基苄基。符号R1和R2的定义范围内的环烷基可含有3-8个、优选6个碳原子。
在一个实施方案中，具有结构式

的四嗪衍生物是这样的衍生物其中R1表示含有1-6个碳原子的直链或支链烷基，其任选被1或2个卤素(优选氯、氟或溴)原子或含有1-4个碳原子的烷氧基(优选甲氧基)或苯基(任选被1或2个含有1-4个碳原子的烷氧基、优选甲氧基取代)所取代；或R1表示含有2-6个碳原子d烯基(优选烯丙基)或环己基。
在一个实施方案中，四嗪衍生物是这样的具有结构式

的衍生物其中R1表示含有1-6个碳原子、特别是含有1-3个碳原子的直链或支链烷基，其未被取代或被卤素(优选氯或氟)原子取代。在一个实施方案中，R1表示甲基或2-卤代烷基，例如2-氟乙基或优选2-氯乙基。
在一个实施方案中，R2表示氨基甲酰基或一烷基氨基甲酰基(例如甲基氨基甲酰基)或一烯基氨基甲酰基。
在本发明的一个实施方案中，将替莫唑胺(

；由Schering Corp.以商标Temodar

出售； Kenilworth，NJ)； 8-氨基甲酰基-3-甲基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-正丙基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-(2-氯乙基)-[3H]-咪唑并-[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 3-(2-氯乙基)-8-甲基氨基甲酰基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-(3-氯丙基)-[3H]-咪唑并-[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-(2，3-二氯丙基)-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 3-烯丙基-8-氨基甲酰基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 3-(2-氯乙基)-8-二甲基氨基甲酰基-[3H]-咪唑并[5，1-d1-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 3-(2-溴乙基)-8-氨基甲酰基-[3H]-咪唑并-[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 3-苄基-8-氨基甲酰基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-(2-甲氧基乙基)-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 8-氨基甲酰基-3-环己基-[3H]-咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮； 或8-氨基甲酰基-3-(W甲氧基苄基)-[3H]咪唑并[5，1-d]-1，2，3，5-四嗪-4-酮与 本发明的抗IGF1R制剂联合给予和/或提供。
在本发明的一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予的蒽环霉素，包括多柔比星(

，以商标Doxil

出售；Ortho Biotech Products L.P.；Raritan，NJ)；柔红霉素(

；以商标Cerubidine

出售；Ben VenueLaboratories，Inc.；Bedford，OH)和表柔比星(

；以商标Ellence

出售；Pharmacia & UpjohnCo；Kalamazoo，MI)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与抗雄激素联合提供和/或给予，该抗雄激素包括但不限于

(比卡鲁胺；以商标CASODEX

由AstraZeneca Pharmaceuticals LP出售；Wilmington，DE)；

(氟他胺；2-甲基-N-[4-硝基-3(三氟甲基)苯基]丙酰胺；以商标Eulexin

由Schering Corporation出售；Kenilworth，NJ)；

(尼鲁米特；以商标Nilandron

由AventisPharmaceuticals Inc.出售；Kansas City，MO)和

(乙酸甲地孕酮；以商标Megace

由Bristol-Myers Squibb出售)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与

(羟基脲)；

(伊达比星)；

(异环磷酰胺)；

(伊马替尼；以商标Gleevec

由Novartis Pharmaceuticals Corporation出售；East Hanover；NJ)；

(亚叶酸)；

(亮丙立得)；

(左旋咪唑)；

(洛莫司汀)；

(氮芥(Mechlorethamine))；

(美法仑；由Celgene公司以商标Alkeran

出售；Warren，NJ)；

(巯嘌呤)；

(美司钠(Mesna))；

(甲氨喋呤)；

(丝裂霉素)；

Cl(米托坦)；或

(米托蒽醌)联合提供。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与

(氟达拉滨)；

(氟氢可的松) 或

(氟甲睾酮)联合提供和/或给予。
在一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与
(KRN951)，

(氨鲁米特)；

(安吖啶)；

(阿那格雷)联合提供和/或给予。
在本发明的一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合给予和/或提供的抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，包括屈洛昔芬(3-羟基他莫昔芬)、4-羟基他莫昔芬(

)、他莫昔芬(

；以商标Nolvadex

出售；Astra Zeneca；Wilmington，DE)；哌喷昔芬(pipendoxifene)(

；ERA-923；Greenberger等，Clin.Cancer Res.7(10)3166-77(2001))；阿佐昔芬(

；LY353381；Sato等，J.Pharmacol.Exp.Ther.287(1)1-7(1998))；雷洛昔芬(

；以商标Evista

出售；Eli Lilly & Co.；Indianapolis，IN)；氟维司群(

；ICI-182780；以商标Faslodex出售；AstraZeneca；Wilmington，DE)；阿可比西芬(acolbifene)(EM-652；

)；托瑞米芬(toremifine)(

)；拉索昔芬(CP-336，156；

；Ke等，Endocrinology 139(4)2068-76(1998))；艾多昔芬(吡咯烷基-4-碘他莫昔芬；

；Nuttall等，Endocrinology 139(12)5224-34(1998))；TSE-424(

；Bazedoxifene；WAY-140424)；HMR-3339和ZK-186619。
可包含于本发明抗IGF1R制剂中的芳香酶抑制剂，包括阿那曲唑(anastrazole)(

；Dukes等，J.Steroid.Biochem.Mol.Biol.58(4)439-45(1996))、来曲唑(

；以商标Femara

出售；Novartis Pharmaceuticals Corp.；E.Hanover，NJ)和依西美坦(

；以商标Aromasin

出售；Pharmacia Corp.；Kalamazoo，MI)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与盐酸吉西他滨(

)和13-顺-视黄酸(

)或与以下任何文献中所述的任何IGFR抑制剂联合提供和/或给予Mitsiades等，Cancer Cell 5221-230(2004)；Garcia-Echeverria等，Cancer Cell 5231-239，2004；WO 2004/030627或WO2004/030625。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与下列药剂联合提供和/或给予

(帕米膦酸盐；由Novartis PharmaceuticalsCorporation以商标Aredia

出售；East Hanover，NJ)；

(喷司他丁；由Supergen出售以商标Nipent

；Dublin，CA)；

(普卡霉素)；

(卟吩姆钠；由AxcanScandipharm Inc.以商标Photofrin

出售；Birmingham，AL)；

(丙卡巴肼)；

(雷替曲塞)；利妥昔单抗(由Genentech，Inc.以商标Rituxan

出售；South San Francisco，CA)；

CxII(链佐星)；

(替尼泊苷)；

(睾酮)；

(沙立度胺)；

(硫鸟嘌呤)；

(塞替派)；

(维A酸)；或

(长春地辛)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与一种或多种任何下列药剂联合提供和/或给予聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干扰素α-2a、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干扰素α-2b、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干扰素α-2c、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干扰素αn-1、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干扰素αn-3及聚乙二醇化、未聚乙二醇化的共有干扰素(consensus interferon)或白蛋白-干扰素α。
在本发明的一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予的拓扑异构酶抑制剂，包括喜树碱(

；Stork等，J.Am.Chem.Soc.93(16)4074-4075(1971)；Beisler等，J.Med.Chem.14(11)1116-1117(1962))、托泊替康(

；以商标Hycamtin

出售；GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC；Rowinski等，J.Clin.Oncol.10(4)647-656(1992))、依托泊苷(

)和伊立替康(

；以商标Camptosar

出售；Pharmacia&Upjohn Co.；Kalamazoo，MI)。
在一个实施方案中与本发明的抗IGF1R制剂联合提供和/或给予的IGF1R1抑制剂，包括AEW-541(NVP-AEW-541；NVP-AEW-541-NX-7)

(Novartis；East Hanover，NJ；参见WO 2002/92599)；或

(WO 2003/39538)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与国际公开申请WO 2004/030627或WO 2004/30625中所述的任何激酶抑制剂化合物联合提供和/或给予。在一个实施方案中，激酶抑制剂是(±)-4-[2-(3-氯-4-氟-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-3-[6-(咪唑-1-基)-4-甲基-1H-苯并咪唑-2-基]-1H-吡啶-2-酮
可制备与IGF1R、IGF-1或IGF-2基因的mRNA互补的反义寡核苷酸，并可将其用于抑制这些基因的转录或翻译。可有效用于治疗应用的反义寡核苷酸的生产是本领域公知的。通常使用衍生化的或修饰的核苷酸来制备反义寡核苷酸，以延长半寿期或提高生物利用度。IGF1R、IGF-1或IGF-2基因的一级序列也可用于设计核酶。大多数合成核酶通常为锤头状核酶、四膜虫核酶和发夹型核酶。设计和使用核酶来切割特异性RNA物质的方法是本领域公知的。在本发明的一个实施方案中，将本发明的抗IGF1R制剂与反义IGF1R核酸ATL-1101(Antisense TherapeuticsLtd；Australia)联合提供和/或给予。在一个实施方案中，IGF1R反义核酸包含任何以下核苷酸序列5′-ATCTCTCCGCTTCCTTTC-3′(SEQ IDNO18)、5′-ATCTCTCCGCTTCCTTTC-3′(SEQ ID NO19)、5′-ATCTCTCCGCTTCCTTTC-3′(SEQ ID NO20)或任何以下文献中所述的任何IGFR反义核酸美国公开专利申请US20030096769；国际公开申请WO 2003/100059；Fogarty等，Antisense Nucleic Acid Drug Dev.2002年12月；12(6)369-77；White等，J Invest Dermatol.2002年6月；118(6)1003-7；White等，Antisense Nucleic Acid Drug Dev.2000年6月；10(3)195-203；或Wraight等，Nat Biotechnol.2000年5月；18(5)521-6。
有关许多上述药剂的化学结构及其它有用信息可参见Physicians′Desk Reference，第57版，2003；Thompson PDR；Montvale，NJ。
将某一特定药剂归入特定类别(例如FPT抑制剂或微管稳定剂)是仅出于说明目的，而非意欲以任何方式限制本发明。
本发明的范围也涵括这样的组合物，其包含本发明抗IGF1R制剂与一种或多种其它化学治疗药物(例如本文所述)的联合和与一种或多种止吐药的联合，所述止吐药包括但不限于帕洛诺司琼(由MGI Pharma以商标Aloxi出售)、阿瑞匹坦(由Merck and Co.以商标Emend出售；Rahway，NJ)、苯海拉明(由Pfizer以商标Benadryl

出售；New York，NY)、羟嗪(由Pfizer以商标Atarax

出售；New York，NY)、甲氧氯普胺(由AHRobins Co.以商标Reglan

出售；Richmond，VA)、劳拉西泮(由Wyeth以商标Ativan

出售；Madison，NJ)、阿普唑仑(由Pfizer以商标Xanax

出售；New York，NY)、氟哌啶醇(由Ortho-McNeil以商标Haldol

出售；Raritan，NJ)、氟哌利多(Inapsine

)、屈大麻酚(由Solvay Pharmaceuticals，Inc.以商标Marinol

出售；Marietta，GA)、地塞米松(由Merck and Co.出售以商标Decadron

；Rahway，NJ)、甲基泼尼松龙(由Pfizer以商标Medrol

出售；New York，NY)、丙氯拉嗪(由Glaxosmithkline以商标Compazine

出售；Research Triangle Park，NC)、格拉司琼(由Hoffmann-La Roche Inc.以商标Kytril

出售；Nutley，NJ)、昂丹司琼(由Glaxosmithkline以商标Zofran

出售；Research Triangle Park，NC)、多拉司琼(由Sanofi-Aventis以商标Anzemet

出售；New York，NY)或托烷司琼(由Novartis以商标Navoban

出售；East Hanover，NJ)。
本发明的范围涵盖包含本发明的抗IGF1R制剂以及一种或多种上述化学治疗剂或其任何盐、水合物、异构体、制剂、溶剂合物或前药的组合物和方法。
本发明的范围也涵盖将本发明的抗IGF1R制剂与任何抗癌程序，包括但不限于外科肿瘤切除术或抗癌放射治疗进行联合给予。
剂量和给药 本发明的方法包括将IGF 1R抗体以本文所述的药物制剂的形式，任选联合另外的治疗药物或其药物组合物进行提供和/或给予，以治疗或预防由IGF1R、IGF-1和/或IGF-2介导的癌症或任何医学病症。通常，当可能时，根据被批准药剂(在Physicians′Desk Reference 2003(Physicians′Desk Reference，第57版)；Medical Economics公司；ISBN1563634457；第57版(2002年11月)中)的产品信息表(product informationsheet)中所列示的方案以及本领域公知的治疗方案，来进行所述另外的药剂的给予和剂量确定。
在一个实施方案中，通过胃肠外方式(例如静脉内、鞘内、皮下、肌肉内、肿瘤内或动脉内注射)将本发明的制剂给予受试者。在一个实施方案中，经口或通过吸入给予制剂。在本发明的一个实施方案中，通过肺部吸入给予包含本发明单链抗IGF1R抗体的本发明制剂。
术语“癌症”包括但不限于神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、任何儿科癌症、肢端肥大症、卵巢癌、胰脏癌、良性前列腺增生症、乳腺癌、前列腺癌、骨癌、肺癌、胃癌、结肠直肠癌、子宫颈癌、滑膜肉瘤、膀胱癌、维尔姆斯氏癌(Wilm′s cancer)、卵巢癌、良性前列腺增生症(BPH)、与转移性类癌瘤和血管活性肠肽分泌瘤(例如血管活性肠肽肿瘤(VIPoma)或Werner-Morrison综合征)相关的腹泻、肾癌(例如肾细胞癌或移行细胞癌)、尤文氏肉瘤(Ewing Sarcoma)、白血病(例如急性淋巴母细胞性白血病)或脑癌(例如成胶质细胞瘤或非成胶质细胞瘤，包括脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原发性神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤及其任何转移性肿瘤)。也可使用本发明的组合物治疗肢端肥大症。IGF-I的拮抗作用已被报道用于治疗肢端肥大症(Drake等，(2001)Trends Endocrin.Metab.12408-413)。其它也可通过给予本发明制剂在受试者的进行治疗的非恶性医学病况，包括巨大症、牛皮癣、动脉粥样硬化、血管平滑肌再狭窄症或不适当的微血管增生(例如作为糖尿病并发症出现的微血管增生，尤其是眼睛的微血管增生)、类风湿性关节炎、葛雷夫斯氏病、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis)、重症肌无力、自身免疫性甲状腺炎和白塞病(Bechet′s disease)。
术语“治疗有效量”或“治疗有效剂量”意指可引发给药者(例如研究者、医生或兽医)所寻求的，组织、系统、受试者或宿主的生物学或医学反应的本发明组合物(例如本发明制剂中之抗IGF1R抗体)的数量或剂量，该生物学或医学反应包括医学病症如癌症的迹象、症状和/或临床征象(例如肿瘤生长和/或转移)的任何可测量的减轻，所述减轻包括该医学病症的进展的任何程度的预防、减慢或暂停。例如，在一个实施方案中，任何抗IGF1R抗体(例如包含成熟LCC、LCD、LCE或LCF轻链和/或成熟HCA或HCB重链的抗IGF1R抗体)的“治疗有效剂量”，为约0.3-20mg/kg体重(例如约0.3mg/kg体重、约0.6mg/kg体重、约0.9mg/kg体重、约1mg/kg体重、约2mg/kg体重、约3mg/kg体重、约4mg/kg体重、约5mg/kg体重、约6mg/kg体重、约7mg/kg体重、约8mg/kg体重、约9mg/kg体重、约10mg/kg体重、约11mg/kg体重、约12mg/kg体重、约13mg/kg体重、约14mg/kg体重、约15mg/kg体重、约16mg/kg体重、约17mg/kg体重、约18mg/kg体重、约19mg/kg体重、约20mg/kg体重)，约每周一次至约每3周一次(例如约每1周一次或每2周一次或每3周一次)。如上文所述，当可能时，另外的治疗剂的治疗有效剂量如在Physicians′Desk Reference中所述。
可调整剂量方案以提供最佳的所期望反应(例如治疗反应)。例如，可给予单一剂量或可在一段时间内给予若干分开剂量或可根据治疗状况的紧急性所要求按比例减少或增加剂量。例如，本领域一般技术从业者(例如内科医师或兽医)可根据患者年龄、体重、身高、既往病史、目前药物治疗和交叉反应、过敏症、敏感性和不良副作用的可能性来确定或调整剂量。特别优选的是以单位剂型来调配胃肠外组合物，以使给药方便和剂量一致。
具有本领域一般技术的内科医师或兽医可容易地确定和开出所需的药物组合物的有效量。例如，内科医师或兽医可以将药物组合物中所采用的本发明抗体或抗原结合片段的剂量，从比为达到期望的治疗效果所需要的水平低的水平开始，逐渐增加剂量，直至达到期望的效果。本发明抗体或组合的给定剂量或治疗方案的有效性，可例如通过测定受试者的的受治疗肿瘤是否缩小或停止生长来确定。肿瘤的大小和进展可容易地例如通过X-射线、核磁共振成像(MRI)或在手术程序中目测进行确定。一般来说，肿瘤大小和增殖可通过使用胸苷PET扫描来测量(参见例如，Wells等，Clin.Oncol.87-14(1996))。通常，胸苷PET扫描包括注射放射性示踪剂如[2-11C]-胸苷，然后PET扫描患者身体(Vander Borght等，Gastroenterology 101794-799，1991；Vander Borght等，J.Radiat.Appl.Instrum.Part A，42103-104(1991))。其它可使用的示踪剂包括[18F]-FDG(18-氟脱氧葡萄糖)、[124I]IUdR(5-[124I]碘代-2′-脱氧尿苷)、[76Br]BrdUrd(溴脱氧尿苷)、[18F]FLT(3′-脱氧-3′氟胸苷)或[11C]FMAU(2′-氟-5-甲基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基尿嘧啶)。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测神经母细胞瘤进展，并相应地改变剂量方案。用以监测神经母细胞瘤的方法包括例如CT扫描(例如以监测肿瘤大小)、MRI扫描(例如以监测肿瘤大小)、胸部X-射线检查(例如以监测肿瘤大小)、骨扫描、骨髓活组织检查(例如以检查是否转移至骨髓)、激素测试(如肾上腺素等的激素的水平)、全血测试(CBC)(例如以测试是否贫血或有其它异常)、测试尿或血中儿茶酚胺(神经母细胞瘤标记)、24小时尿测试以检查高香草酸(HMA)或香草扁桃酸(VMA)水平(神经母细胞瘤标记)和MIBG扫描(扫描已注射的I123-标记间碘-β-胍；例如以监测肾上腺肿瘤)。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测横纹肌肉瘤进展，并相应地改变剂量方案。用以监测横纹肌肉瘤的方法包括例如肿瘤活组织检查、CT扫描(例如以监测肿瘤大小)、MRI扫描(例如以监测肿瘤大小)、胸部CT扫描(例如以监测转移)、骨扫描(例如以监测转移)、骨髓活组织检查(例如以监测转移)、腰椎穿刺(例如以检查是否转移入脑中)和全面体检。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测骨肉瘤进展，并相应地改变剂量方案。用以监测骨肉瘤的方法包括例如感染区域或胸部的X-射线检查(例如以检查是否扩散至肺部)、感染区域的CT扫描、血测试(例如以测量碱性磷酸酶水平)、胸部CT扫描以观察癌症是否已扩散至肺部、切开活组织检查或骨扫描以观察癌症是否已扩散至其它骨骼。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测胰腺癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测胰腺癌的方法包括血液测试以检查肿瘤标记CA 19-9和/或癌胚抗原(CEA)、上胃肠道检查(例如钡吞咽)、内窥镜超音波检查法、内窥镜逆行胰胆管造影术(X-射线检查胰管和胆管)；经皮肝穿刺胆道造影术(x-射线检查胆管)、腹部超音成像或腹部CT扫描。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测膀胱癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测膀胱癌的方法包括尿液分析以测定尿液中肿瘤标记(例如核基质蛋白(NMP22))的升高水平、尿液分析以测定显微镜性血尿、尿细胞学分析即通过检查排尿时从膀胱排出的细胞来检测癌细胞、膀胱镜检查、静脉注射肾盂造影图(IVP)、逆行肾盂造影术、胸部X射线检查以检测转移情况、计算机断层摄影术(CT)、骨扫描、MRI扫描、PET扫描或活组织检查。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测乳腺癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测乳腺癌的方法包括乳房造影法、抽吸或针吸活组织检查或触诊。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测肺癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测肺癌的方法包括胸部X-射线检查、CT扫描、低剂量螺旋CT扫描(helical CT scan，spiral CT scan)、MRI扫描、PET扫描、骨扫描、痰细胞学分析、支气管镜检查法、纵隔镜检查、活组织检查(例如针刺或外科手术)、胸腔穿刺术或血测试以检测PTH(甲状旁腺激素)、CEA(致癌抗原)或CYFRA21-1(细胞角蛋白片段19)。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测前列腺癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测前列腺癌的方法包括直肠指检、经直肠超音检查、取血测试以检查前列腺特异性抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)的水平、活组织检查、骨扫描和CT扫描。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测结肠直肠癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测结肠直肠癌的方法包括CT扫描、MRI扫描、胸部X-射线检查、PET扫描、大便潜血检测(FOBT)、挠性直肠乙状结肠检查、全结肠镜检查和钡餐灌肠。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测子宫颈癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测子宫颈癌的方法包括宫颈抹片、骨盆检查、阴道镜检查、锥形活组织检查、子宫颈内刮除术、X-射线、CT扫描、膀胱镜检查和直肠镜检查。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测胃癌进展，并相应地改变剂量方案。用以监测胃癌的方法包括食管胃十二指肠镜(EGD)、双对比钡餐、内镜活检、计算机断层(CT)扫描、核磁共振造影(MRI)或内镜超声检查(EUS)。
例如，内科医师或兽医可通过多种方法监测维尔姆斯氏(Wilm′s)癌症进展，并相应地改变剂量方案。用以监测维尔姆斯氏(Wilm′s)癌症的方法包括腹部计算机断层(CT)扫描、腹部超声检查、血液和尿液测试以评估肝肾功能、胸部X射线检查是否有转移、核磁共振造影(MRI)、血液检查和尿分析以测定肾功能及活组织检查。
在本发明的一个实施方案中，选择其肿瘤细胞表达IGF1R的任何癌症患者来用本发明制剂进行治疗。在本发明的一个实施方案中，选择其肿瘤呈现任何下列特性的患者来用本发明制剂进行治疗(i)对酪氨酸896的IRS-1磷酸化作用；(ii)对酪氨酸612的IRS-1磷酸化作用；(iii)对任何酪氨酸的IRS-1磷酸化作用；(iv)IGF-II；和/或(v)对任何酪氨酸的IGF1R磷酸化作用。可通过本领域公知的若干方法的任一种(例如ELISA或蛋白质印迹分析)在肿瘤细胞中鉴定这些特性。
药盒 本发明的药盒也包括本发明抗IGF1R抗体制剂以及例如以包装插页形式提供的信息，所述信息包括关于该药盒中的药物组合物和剂型的信息。通常，这些信息有助于患者和内科医师有效且安全地使用所封装药物组合物和剂型。例如，在插页中可提供下列关于制剂的信息药代动力学、药效动力学、临床研究、功效参数、适应症和用途、禁忌症、告诫事项、预防措施、不良反应、超剂量、适当剂量和给药方式、供应方式、适宜储存条件、参考文献和专利信息。在其中制剂以干燥/冻干形式提供的本发明一个实施方案中，药盒包括用于将制剂复溶液体形式的无菌水或盐水。
在本发明的一个药盒实施方案中，将本发明抗IGF1R抗体在容器(例如内部无菌的容器)中供应。在本发明的一个实施方案中，制剂为液体形式，在本发明的另一个实施方案中，制剂为干燥/冻干形式。容器可呈任何形式，包括但不限于玻璃(例如烧结玻璃)或塑料小瓶或安瓿。例如，在本发明的一个实施方案中，玻璃是透明的，在本发明的另一个实施方案中，玻璃是有色的(例如琥珀色)，以阻止光接触到制剂。在一个实施方案中，给制剂充上氮气或惰性气体(例如氩气)。在一个实施方案中，将制剂包装在处于氮气氛或某种惰性气体气氛下的密封、气密容器中。在一个实施方案中，将制剂包装在处于真空下的气密容器中。在一个实施方案中，含有制剂的容器包括针头可插入其中以抽取制剂的可重密封塞子(例如橡胶塞)。
在本发明的一个实施方案中，将本发明制剂与可注射装置(例如注射器/皮下注射针)一起提供。在一个实施方案中，给注射器预充上本发明制剂(例如为液体或干燥/冻干形式)。
在一个实施方案中，本发明制剂存于拟用来将其静脉输注到受试者体内的容器中。例如，在本发明的一个实施方案中，该容器是塑料输注袋(例如聚氯乙烯或聚乙烯)。
实施例 以下提供的信息是用来更清楚地阐述本发明，而不应将其解释为限制本发明。下文述及的任何和全部组合物和方法都落入本发明的范围内。
实施例1抗IGF1R抗体的调配和分析 在本实施例中，按照本文所述调配包含成熟轻链LCF(SEQ IDNO14氨基酸20-128)、成熟重链HCA(SEQ ID NO16氨基酸20-137)和恒定区(重链γ1、轻链κ)的抗体，其经测定发现呈现极佳的稳定性特性(例如在室温下呈现稳定性达数月)。
制备方法 材料 1.三水合乙酸钠(USP)2.30g/lL批料 2.冰乙酸(USP/Ph.Eur)0.18g/lL批料 3.超纯级蔗糖(NF、Ph.Eur、BP)70.0g/lL批料 4.抗体20.0g/lL批料 5.注射用水(USP/Ph.Eur)数量足够调配1L体积 注意抗IGF1R抗体易因起泡或震摇发生聚集。在制备、过滤和充入过程中避免出现过量泡沫。
方法 混合 室温，将三水合乙酸钠、乙酸和蔗糖加入并溶解于配备有搅拌器的不锈钢罐中的约70％批料体积的注射用水中。向该不锈钢容器中的所述溶液中添加所需数量的药物(抗体)并搅拌至少20分钟。搅拌20分钟后，用注射用水使该批料达最终体积并再搅拌20分钟。检查溶液的pH。通过灭过菌的过滤器(0.22μm)将该溶液无菌过滤到灭过菌的不锈钢容器中。以无菌方式充入经洗涤和灭菌的小瓶中。用铝封片塞住和卷边密封该小瓶。
稳定性测试 按照混合章节中所述方法制备两批批料。
将取自原型批料(批料A)的密封小瓶置于下列条件下的稳定性测台上达3个月4(4±2℃；60％±5％RH)、25H(25±2℃；60％±5％RH)和40(40±2℃，环境RH)。在分析之前，先将初始样品和在每个时间点结束时取出的样品置于4℃下储存。
将取自第二批料(批料B)的密封小瓶置于与批料A相同的稳定性测台上达6个月，这些小瓶处于直立和倒置两种位置。在分析之前，先将初始样品和在每个时间点结束时取出的样品置于4℃下储存。
表1A抗IGF1R抗体稳定性(批料A)测定结果的总结
表1B抗IGF1R抗体稳定性(批料B)测定结果的总结 数据分析和报告 批料A 性状 该性状涵盖含有微粒的澄清溶液(直到4周时的样品)至含有微粒的乳白色溶液(3周样品)。
pH pH在5.3-5.4之间。
UV浓度 所获得的初始UV浓度是22.34mg/ml。由UV测定测得的其它时间点的浓度恒定保持在初始值的90-110％之内。所观测到的差异在此测定的正常变化范围内。
HPSEC 由HPSEC测定评定的纯度表明，对于原型制剂，在4℃和25℃下，单体含量百分比保持高于99％达12周，在40℃下，单体含量百分比在2周和4周后分别降至98.93％和98.47％。
SDS-PAGE SDS PAGE结果表明，对于所有时间点，在非还原条件下有与典型非还原抗体谱图相配的典型谱带图，在还原条件下报道检测到重链和轻链。
生物测定 生物测定显示4周的结果与12周的结果之间存在显著变化。与21.4mg/ml的初始浓度相比，本测定在4℃下2周后获得的浓度降至14.0mg/ml。另一方面，在4℃下12周后，所获得的原型制剂1的浓度是23.3mg/ml。所观测到的差异在本测定的正常变化范围内。
HIAC 所有样品的微粒数据符合USP<788>规范(遮光测试微粒计数≥10μm-6000个/容器，≥25μm-600个/容器)。
微粒大小 对于所有样品，样品粒径在11.05nm-14.92nm的范围内。所观测到的粒径差异在本测定的正常变化范围内。
批料B 性状 该性状涵盖初始时的含有微粒的澄清溶液至后续样品的含有微粒的乳白色溶液。
pH pH在5.3-5.5之间。
UV浓度 所获得初始UV浓度是19.72mg/ml。由UV测定测得的其它时间点的浓度恒定保持下初始值非90-110％之内。所观测到的差异在本测定的正常变化范围内。
HPSEC 由HPSEC测定评定的纯度表明，对于原型制剂，单体含量百分比在4℃和25℃下保持高于98％达6个月。在40℃下在6个月后单体含量百分比降至约95％。
SDS-PAGE 还原条件和非还原条件二者的定量SDS PAGE结果显示，在4℃和25℃下杂质总量水平保持相对恒定(在本测定的变化范围内)达6个月，在40℃下经过6个月该水平增加。
生物测定 生物测定显示，经过3个月出现显著变化，但没有随温度或时间的明显趋势。所观测到的差异在本测定的正常变化范围内。
HIAC 全部样品的微粒数据符合USP<788>规范(遮光测试微粒计数≥10μm-6000个/容器，≥25μm-600个/容器)。
等电聚焦(IEF) 等电聚焦测量的是抗体分子的电荷变化。初始时和1个月时所报告的谱带图性状与3个月时和6个月时所报告的性状相同，因此在所有温度下经过6个月各结果保持恒定。
实施例2抗IGF1R制剂的稳定性研究 这些研究中所用的抗IGF1R抗体与实施例1中所用的相同。根据这些研究，测定到下列情况 ·抗IGF1R抗体在所有待测缓冲液中主要呈现β-折叠二级结构。
·抗IGF1R抗体在pH5-6时显示高的T开始温度。
·抗IGF1R抗体在pH为5.5的乙酸盐缓冲液中显示最高的开始温度。
·对于所有待测缓冲液，氯化钠的加入降低了热变性的开始温度。
·对于所有待测缓冲液，蔗糖的加入提高了热变性的开始温度。
·存于20mM乙酸盐缓冲液(pH 5.5)和7％w/v蔗糖的配方中的抗IGF1R 抗体在4℃和25℃下保持稳定28天。
材料 使用存于5mM乙酸盐缓冲液(pH 5.2)中的抗IGF1R抗体储备溶液(28.36mg/ml)制备存于pH 4-9的不同缓冲液中的稀释液。
表2.用于调配抗IGF1R抗体的缓冲液和pH条件的总结 方法 结构研究 用圆二色谱(CD)进行结构研究。分别用远紫外圆二色谱(FUV)和近紫外圆二色谱(NUV)研究二级结构和三级结构。
热变性研究 在以恒定速率加热样品时，使用差示扫描量热法(DSC)、远紫外圆二色谱光谱术(FUV CD)、近紫外圆二色谱光谱术(NUV CD)、色氨酸荧光光谱术(TRP FL)监测蛋白质结构变化，并通过光散射(PS)测量粒径。
短期稳定性研究 在20mM乙酸盐缓冲液(pH 5.5)加蔗糖中研究抗体的实时稳定性。所用的稳定性条件是4、25和40℃，将样品保持1个月。用HPSEC测定来分析单体含量百分比。
结果和讨论 在乙酸盐缓冲液(pH5)中的远紫外(FUV)圆二色谱扫描。217nm的最小值和235nm处的肩峰表明主要存在β-折叠二级结构。202nm处之最大值是由于存在β-转角二级结构所致(参见图1(a))。
在乙酸盐缓冲液(pH5)中的近紫外(NUV)圆二色谱扫描。近紫外CD频谱显示3个不同的区域 250-270nm苯丙氨酸残基， 270-290nm酪氨酸残基， 280-300nm色氨酸残基(参见图1(b))。
在不同缓冲液中的远紫外(FUV)圆二色谱扫描。如图2(a)所示，在217nm、235nm和202nm处观测到椭圆率随pH的变化。在pH 5-6之间观测到与β-折叠二级结构对应的椭圆率最小值。
椭圆率随pH的变化。对于6以上的pH，椭圆率增加，这意味着β-折叠二级结构发生结构变化(图2(b))。在235nm处观测到类似趋势(图2(c))。pH 6以上时202nm处的椭圆率增加，这表明β-转角二级结构增加(图2(d))。
不同缓冲液中的近紫外(NUV)圆二色谱扫描。未观测到三级结构的明显变化(参见图3)。
热研究。当将样品从20℃加热至63℃时，未观测到抗IGF1R抗体的CD信号出现变化，这意味着在任一缓冲液中二级结构没有发生变化。在T开始(64.1℃，pH 4)处，观测到CD信号减弱，这是由二级结构的解折叠和变化所致。椭圆率随温度升高进一步增加，这可能是由于在聚集体中形成分子间β-折叠二级结构之故。磷酸盐缓冲液(pH 7)中的抗IGF1R抗体显示T开始为68.3℃。在80℃时，观测到椭圆率减小，这可能是由于抗IGF1R抗体在溶液中沉淀和损失之故。与其它缓冲液相比，乙酸盐缓冲液(pH 5.5)显示最高的开始温度。参见图4。
当将抗IGF1R抗体样品从20℃加热至60℃时，由NUV CD测得的294nm下的椭圆率保持恒定(图5(a))。在61℃时观测到椭圆率增加，此后椭圆率降低，这表明由于蛋白质解折叠而使色氨酸环境出现局部变化。乙酸盐缓冲液(pH 5.5和6)的T开始温度高于其它缓冲液所观测到的T开始温度(图5(b))。
DSC温度记录图显示有2个转变温度，即Tm1和Tm2(图6(a)。这是由于蛋白质结构变化出现最大焓变时的温度。在乙酸盐缓冲液(pH 5.5)中观测到最高的T开始温度(图6(b))。pH 6的乙酸盐缓冲液显示最高Tm1为69.9℃(图6(c))，pH 5.5和6.0的乙酸盐缓冲液显示最高Tm2分别为82.2和82.3℃(未示出)。
粒径/聚集作用研究。图7(a)显示所获得的抗IGF1R抗体的粒径分布。所有待测缓冲液中的抗IGF1R抗体的平均粒径是11.05nm。图7(b)显示抗IGF1R抗体在不同温度下的大小分布变化。随着温度的增加，可观测到粒径增加，此乃由聚集体形成所致。
pH 5的磷酸盐缓冲液显示聚集作用的最高T开始是76℃。pH 5、5.5和6的乙酸盐缓冲液显示聚集作用的T开始是74℃，而其余的缓冲液显示聚集作用的T开始是70℃(参见图8(a))。在pH 4的乙酸盐缓冲液中未观测到聚集作用的T开始(参见图8(b))。
表3通过不同技术获得的热熔数据的总结
抗IGF1R抗体在pH 5-6时呈现较高T开始和Tm。大多数技术在pH 5.5的乙酸盐缓冲液中显示较高T开始和Tm。
NaCl或蔗糖对T开始的影响。氯化钠的加入降低了FUV CD T开始温度，这表明蛋白质解折叠在较低温度下发生。当使用NUV CD、TRPFL、PS和DSC研究氯化钠对抗IGF1R抗体的作用时，观测到类似趋势。参见图9。
蔗糖的加入提高了FUV CD T开始温度，这表明蛋白质解折叠在较高温度下发生。当使用NUV CD、TRP FL、PS和DSC研究蔗糖对抗IGF1R抗体的作用时，观测到类似趋势。参见图10。
这些实验证明蔗糖对抗IGF1R抗体具有稳定作用。
抗IGF1R抗体在乙酸盐缓冲液加7％蔗糖(pH 5.5)中的稳定性研究。在4C、25C和40C下，对20mM乙酸盐缓冲液(pH 5.5)加7％w/v蔗糖中的抗IGF1R抗体(15mg/ml)进行稳定性研究。12天后，在40C下的单体含量减少至99％。4℃和25℃下的单体含量与初始时相当。在21天和28天后，40℃下的单体含量分别减少至98.7％和98.5％。4和25℃下的单体含量与初始时相比稍微有所下降(约0.2％)。参见图11。
*************************** 本发明的范围并不限于本文所述的具体实施方案。实际上，本领域技术人员由以上描述可以显而易见地想到本文所述的实施方案之外的本发明各种修改方案。这些修改方案也意味着落入随附的权利要求的范围内。
本说明书通篇引述了专利、专利申请、出版物、产品说明和方案，出于所有目的将这些文献的公开内容通过引用整体结合到本文中。
序列表
<110>Schering Corporation
<120>STABLE ANTIBODY FORMULATION
<130>PD06362
<150>60/690,810
<151>2005-06-15
<160>20
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>11
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>1
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Ser Ser Leu His
1 5 10
<210>2
<211>7
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>2
Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser
1 5
<210>3
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>3
His Gln Ser Ser Arg Leu Pro His Thr
1 5
<210>4
<211>5
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>4
Ser Phe Ala Met His
1 5
<210>5
<211>10
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>5
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His
1 5 10
<210>6
<211>16
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR\
<400>6
Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210>7
<211>10
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>7
Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10
<210>8
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12轻链
<400>8
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Val Pro Asp Phe Gln Ser Val
20 25 30
Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>9
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12轻链-A
<400>9
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>10
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12轻链-B
<400>10
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser ProGly Thr Leu Ser Val
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>11
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12轻链-C
<400>11
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>12
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>经修饰的19D12/15H12轻链-D
<400>12
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>13
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>经修饰的19D12/15H12轻链-E
<400>13
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>14
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12轻链-F
<400>14
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>15
<211>137
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12重链
<400>15
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210>16
<211>137
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>19D12/15H12重链-A
<400>16
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210>17
<211>137
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>经修饰的19D12/15H12重链-B
<400>17
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu TrpIle Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130135
<210>18
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>IGF1R反义核酸
<400>18
atctctccgc ttcctttc18
<210>19
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>IGF1R反义核酸
<400>19
atctctccgc ttcctttc18
<210>20
<211>18
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>IGF1R反义核酸
<400>20
atctctccgc ttcctttc18
权利要求
1.一种药物制剂，所述药物制剂包含能特异性结合IGF1R的分离的抗体或其抗原结合片段、缓冲液和蔗糖。
2.权利要求1的制剂，其中所述缓冲液是磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、组氨酸缓冲液、甘氨酸缓冲液或乙酸盐缓冲液。
3.权利要求1的药物制剂，所述药物制剂包含能特异性结合IGF1R的抗体或其抗原结合片段、缓冲液和蔗糖，pH为约5.5至约6.0。
4.权利要求1的制剂，其中所述缓冲液是磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、组氨酸缓冲液、甘氨酸缓冲液或乙酸盐缓冲液。
5.权利要求1的制剂，其中所述抗体或片段包含一个或多个选自SEQID NO1-3的轻链互补决定区；和/或一个或多个选自SEQ ID NO4-7的重链互补决定区。
6.权利要求1的药物制剂，所述药物制剂包含抗体或其抗原结合片段、缓冲液和蔗糖，pH为约5.5至约6.0，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区。
7.权利要求1的制剂，所述制剂是冻干的。
8.权利要求1的制剂，所述制剂是无菌的。
9.权利要求1的制剂，其中所述抗体或片段包含选自γ1、γ2、γ3和γ4的重链恒定区或к轻链恒定区。
10.权利要求1的制剂，所述制剂呈水溶液形式。
11.权利要求1的制剂，其中所述抗体或片段浓度为约20mg/ml。
12.权利要求1的制剂，其中所述缓冲液浓度为约1至约20mM。
13.权利要求1的制剂，其中所述蔗糖浓度为约5至约70mg/ml。
14.权利要求1的制剂，所述制剂与另外的治疗药物联用。
15.权利要求1的制剂，其中所述另外的治疗药物是一种或多种选自以下的成员
16.权利要求1的制剂，所述制剂在单一组合物中包含抗体或片段、乙酸盐、乙酸和蔗糖，pH为约5.5，以及另外的治疗药物，所述抗体或片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区。
17.权利要求1的药物制剂，所述药物制剂的pH为5.5，包含
(a)20mg/ml的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ IDNO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；
(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠；
(c)0.18mg/ml的冰乙酸；
(d)70mg/ml的蔗糖；和
(e)水。
18.一种pH为5.5的冻干药物制剂，所述药物制剂当复溶时包含
(a)20mg/ml的治疗有效量的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含选自氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；
(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠；
(c)0.18mg/ml的冰乙酸；和
(d)70mg/ml的蔗糖；和
(e)水。
19.一种容器，所述容器含有权利要求1的制剂。
20.权利要求19的容器，所述容器是玻璃小瓶。
21.一种注射装置，所述注射装置含有权利要求1的制剂。
22.权利要求21的注射装置，所述注射装置是皮下注射针和注射器。
23.一种药盒，所述药盒包括
(a)盛于容器或注射装置中的权利要求1的制剂；
(b)包装插页，其包括一项或多项选自以下的关于所述制剂的信息药代动力学、药效动力学、临床研究、功效参数、适应症和用法、禁忌、告诫事项、预防措施、不良反应、过剂量、适宜剂量和给药方式、供应方式、适宜储存条件、参考文献和专利信息。
24.一种治疗或预防受试者的由IGF1R、IGF-1和/或IGF-2介导的医学病症的方法，所述方法包括给予该受试者治疗有效量的权利要求1的制剂。
25.权利要求24的方法，其中所述医学病症选自以下神经母细胞瘤、横纹肌肉瘤、骨肉瘤、儿科癌症、肢端肥大症、卵巢癌、胰脏癌、良性前列腺增生症、乳腺癌、前列腺癌、骨癌、肺癌、结肠直肠癌、子宫颈癌、滑膜肉瘤、膀胱癌、胃癌、维尔姆斯氏癌、卵巢癌、良性前列腺增生症(BPH)、与转移性类癌瘤和血管活性肠肽分泌瘤相关的腹泻、血管活性肠肽肿瘤、Werner-Morrison综合征、肾癌、肾细胞癌、移行细胞癌、尤文氏肉瘤、白血病、急性淋巴母细胞性白血病、脑癌、胶质细胞瘤、非胶质细胞瘤型脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原发性神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、巨大症、牛皮癣、动脉粥样硬化、血管平滑肌再狭窄症、不适当的微血管增生、肢端肥大症、巨大症、牛皮癣、动脉粥样硬化、血管平滑肌再狭窄症或不适当的微血管增生、葛雷夫斯氏病、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎、重症肌无力、自身免疫甲状腺炎和白塞病。
26.权利要求24的方法，其中将所述药物与另外的治疗药物联合给予受试者。
27.权利要求26的方法，其中所述另外的治疗药物选自以下
28.权利要求24的方法，其中所述受试者是人。
29.权利要求24的方法，其中所述制剂以胃肠外方式给予受试者。
30.权利要求24的方法，其中所述制剂pH值为约5.5，包含
(a)20mg/ml的治疗有效量的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO8-14的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；
(b)2.3mg/ml的三水合乙酸钠；
(c)0.18mg/ml的冰乙酸；
(d)70mg/ml的蔗糖；和
(e)水。
31. 一种用于使抗体或其抗原结合片段稳定的方法，所述抗体或其抗原结合片段包含选自SEQ ID NO20-128的氨基酸20-128的轻链可变区和/或选自SEQ ID NO15-17的氨基酸20-137的重链可变区；所述方法包括使所述抗体或片段与乙酸盐、乙酸和蔗糖相组合，任选pH为约5.5。
32. 权利要求31的方法，其中所述抗体或片段浓度为约20mg/ml。
33. 权利要求31的方法，其中所述乙酸盐的浓度为约2.3mg/ml，所述乙酸的浓度为约0.18mg/ml，所述蔗糖的浓度为约70mg/ml。
全文摘要
本发明提供一种包含呈现高度稳定性的抗体或其抗原结合片段的药物制剂以及该药物制剂的使用方法。
文档编号C07K16/10GK101287761SQ200680028567
公开日2008年10月15日 申请日期2006年6月13日 优先权日2005年6月15日
发明者P·科西, V·瑞哈克里南, L·威其-赖克马纳 申请人:先灵公司