用作pi-3激酶抑制剂的嘧啶衍生物的制作方法

专利名称：用作pi-3激酶抑制剂的嘧啶衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的磷脂酰肌醇(PI)3-激酶抑制剂化合物、其药学上可接受的盐及其前药；该新化合物的组合物，该组合物单独含有该化合物或者还含有至少一种其它治疗成分以及药学上可接受的载体；新化合物的用途，单独使用或者与至少一种其它治疗成分组合使用，用于预防或治疗多种疾病，所述疾病特征在于生长因子、受体酪氨酸激酶、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶、G蛋白偶联受体和磷脂激酶及磷酸酶的异常活性。

背景技术：
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)包括脂类激酶和丝氨酸/苏氨酸激酶家族，它们能够催化肌醇脂类的磷酸酯向D-3’位置的转化，从而产生磷酸肌醇-3-磷酸酯(PIP)、磷酸肌醇-3，4-二磷酸酯(PIP2)和磷酸肌醇-3，4，5-三磷酸酯(PIP3)，然后它们通过含有血小板-白细胞C激酶底物同系、FYVE、Phox及其它磷脂-结合域的停靠蛋白在信号级联中作为第二信使，进入通常位于浆膜的各种信号复合体中(Vanhaesebroeck等，Annu.Rev.Biochem70535(2001)；Katso等，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17615(2001))。在两种1类PI3Ks中，1A类PI3Ks是由具有催化性的p110亚基(α、β、γ同种型)组成的杂二聚体，所述亚基在结构上与调节亚基(可以是p85α、p55α，p50α，p85β或p55γ)有关。1B类亚基具有一个家族成员，它是由具有催化性的p110γ亚基组成的杂二聚体，该亚基与两个调节亚基(p101或p84)之一有关(Fruman等，Annu Rev.Biochem.67481(1998)；Suire等，Curr.Biol.15566(2005))。p85/55/50亚基的调节域包括Src同源性(SH2)域，它与激活的受体和细胞质酪氨酸激酶上特殊序列中的磷酸酪氨酸残基结合，导致1A类PI3Ks的激活和定位。1B类PI3K通过G蛋白-偶联受体直接激活，它可以与肽和非肽配体的不同组成部分结合(Stephens等，Cell89105(1997))；Katso等，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17615-675(2001))。因此，得到的I类PI3K的磷脂产物与具有下游细胞活性的上游受体连接，所述活性包括增殖、存活、趋化性、细胞运输(cellular trafficking)、运动性、代谢、炎性和过敏反应、转录以及转译(Cantley等，Cell64281(1991)；Escobedo和Williams，Nature 33585(1988)；Fantl等，Cell69413(1992))。
在许多情况下，PIP2和PIP3能够使得Akt募集，它是病毒致癌基因v-Akt的人类同源物的产物，对于血浆膜而言，它是多种细胞内信号通路(对于生长和存活非常重要)的节点(Fantl等，Cell 69413-423(1992)；Bader等，Nat Rev.Cancer 5921(2005)；Vivanco和Sawyer，Nat.Rev.Cancer2489(2002))。PI3K的异常调节(通常通过Akt的激活而增加存活)是在人类癌症中最普遍的事件之一，已经在多种水平上显示其存在。肿瘤抑制因子基因PTEN能够在肌醇环的3’位置上将磷酸肌醇磷脂脱磷酸化，并且籍此拮抗PI3K的活性，但在各种肿瘤中它被除去功能。在其它肿瘤中，p110α同种型的基因(PIK3CA)以及Akt的基因被扩增，它们的基因产物的蛋白表达的增加在各种人类癌症中已经得到证明。另外，用于上调p85-p110复合体的p85α的突变和易位在少数人类癌症中已有报道。最后，在PIK3CA中的能够激活下游信号通路的体细胞错义突变在多种人类癌症中都有广泛的报道(Kang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102802(2005)；Samuels等，Science 304554(2004)；Samuels等，Cancer Cell 7561-573(2005))。这些报道显示磷酸肌醇-3激酶以及该信号通路的上游和下游成分的失调是与人类癌症和增生性疾病有关的最常见的失调之一(Parsons等，Nature436792(2005)；Hennessey等，Nature Rev.Drug Dis.4988-1004(2005))。


发明内容
本发明提供新的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物、包含该化合物的药物制剂、抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的方法以及治疗增生性疾病的方法。
在本发明的一个方面中提供了新的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物，它们是嘧啶类化合物、其药学上可接受的盐及其前药。该嘧啶化合物、其药学上可接受的盐及其前药为PI3K抑制剂，可以用于治疗细胞增生性疾病。
本发明的一个实施方案提供了式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐
其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基， (6) 亚磺酰氨基(sulfonamido)； R1选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR1a， (13) -CO2R1a， (14) -CONR1aR1b， (15) -NR1aR1b， (16) -NR1aCOR1b， (17) -NR1aSO2R1b， (18) -OCOR1a， (19) -OR1a， (20) -SR1a， (21) -SOR1a， (22) -SO2R1a，和 (23) -SO2NR1aR1b， 其中R1a和R1b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基；并且 R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素。
在其另一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基、取代的或未取代的环烷基烷基或者取代的或未取代的杂环基烷基。
在更特殊的实施方案中，W为CH。
在另一个实施方案中，W为N。在其更特殊的实施方案中，R3为＝O。
在另一个实施方案中，R1选自下列基团 (1) 取代的和未取代的烷基， (2) 取代的和未取代的芳基， (3) 取代的和未取代的杂芳基， (4) 取代的和未取代的杂环基， (5) 取代的和未取代的环烷基， (6) -OR1a，和 (7) -NR1aR1b， 其中R1a和R1b独立选自下列基团 (a) 取代的和未取代的杂芳基，和 (b) 取代的和未取代的杂环基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的杂环基，或为取代的或未取代的-O-杂环基。在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的吗啉基；更特别的是，R1为未取代的N-连接的吗啉基。
在其另一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的杂环基烷基或者取代的或未取代的杂芳基烷基。在另一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的吗啉基；更特别的是，吗啉基包括N-连接的吗啉基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的四氢吡喃或取代的或未取代的四氢吡喃基氧基。更特别的是，R1为未取代的4-四氢吡喃基氧基。
在其另一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的四氢吡喃。在更特别的实施方案中，四氢吡喃包括4-四氢吡喃基氧基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的四氢呋喃或取代的或未取代的四氢呋喃基氧基。更特别的是，R1为未取代的3-四氢呋喃基氧基。
在另一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的四氢呋喃。在其另一个实施方案中，四氢呋喃包括3-四氢呋喃基氧基。
在另一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 卤素， (5) 氨基， (6) 甲基，和 (7) 三氟甲基。
在另一个实施方案中，R2为氢或卤素。在更特殊的实施方案中，R2为氢。
在另一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氰基， (2) 硝基， (3) 卤素， (4) 羟基， (5) 氨基，和 (6) 三氟甲基。
在另一个实施方案中，R3为三氟甲基。在另一个实施方案中，R3为氰基。
本发明的另一个实施方案提供了式II化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐
其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基，和 (6) 亚磺酰氨基； X为O、S、NH或键(a direct bond)； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素；并且 R5选自下列基团 (1) 取代的和未取代的环烷基， (2) 取代的和未取代的杂环基， (3) 取代的和未取代的芳基，和 (4) 取代的和未取代的杂芳基。
在式II的另一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 氨基， (5) 卤素，和 (6) 取代的和未取代的C1-3烷基。
在式II的另一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硫代， (4) 卤素， (5) 硝基， (6) 取代的和未取代的烷基， (7) 取代的和未取代的链烯基， (8) 取代的和未取代的炔基， (9) -OR3a， (10) -NR3aR3b， (11) -COR3a，和 (12) -NR3aCOR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基。
在式II的另一个实施方案中，R3为三氟甲基。在另一个实施方案中，W为CH。在另一个实施方案中，R2为H。
在式II的另一个实施方案中，R5选自下列基团 (1) 取代的或未取代的吗啉基， (2) 取代的或未取代的四氢吡喃基，和 (3) 取代的或未取代的四氢呋喃基。
在其更特殊的实施方案中，R5为N-连接的吗啉基；更特别的是，X为键。在另一个更特殊的实施方案中，R5为4-四氢吡喃基；更特别的是，X为O。在另一个实施方案中，R5为3-四氢呋喃基；更特别的是，X为O。
在另一个实施方案中，W为N。在其更特殊的实施方案中，R3为＝O。
本发明的另一个实施方案提供了式III化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐
其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基，和 (6) 亚磺酰氨基； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素；并且 R6选自下列基团 (1) 氢， (2) 取代的和未取代的烷基，和 (3) 取代的和未取代的环烷基。
在式III的另一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 卤素， (5) 氨基， (6) 甲基，和 (7) 三氟甲基。
在式III的另一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氰基， (2) 硝基， (3) 卤素， (4) 羟基， (5) 氨基，和 (6) 三氟甲基。
在式III的另一个实施方案中，R6选自下列基团 (1) 氢， (2) 甲基，和 (3) 乙基。
另一个实施方案提供了在人类或动物宿主中抑制Akt磷酸化的方法，它包括给予人类或动物宿主有效量的本文任一个实施方案中的化合物。
另一个实施方案提供了组合物，所述组合物包括药学上可接受的载体和当给予时在人类和动物宿主中能够有效抑制PI3-K活性的一定量的本文任一个实施方案中的化合物。在其更特殊的实施方案中，当给予时该组合物在人类和动物宿主中能够有效抑制PI3-Kα活性。
另一个实施方案提供了组合物，该组合物包括药学上可接受的载体、当给予时在人类和动物宿主中能够有效抑制PI3-K活性的一定量的本文任一个实施方案中的化合物以及至少一种另外的用于治疗癌症的药物。在其更特殊的实施方案中，至少一种另外的用于治疗癌症的药物为瓦他拉尼(PTK-787)、伊马替尼或吉非替尼。或者，至少一种另外的用于治疗癌症的药物选自激酶抑制剂、抗雌激素药物、抗雄激素药物、其它抑制剂、癌症化疗药物、烷化剂、螯合剂、生物响应调节剂、癌症疫苗或列于下面的反义治疗(组A-J)。另外，至少一种另外的用于治疗癌症的药物选自放射疗法、核苷类似物或抗有丝分裂药物。
另一个实施方案提供了治疗由PI3 K活性调节的疾病的方法，它包括给予需要此类治疗的人类或动物宿主有效量的本文任一个实施方案中的化合物。在更特殊的实施方案中，所述化合物对PI3 K抑制的IC50值低于约1μM。在另一个更特殊的实施方案中，所述疾病为癌症。
另一个实施方案提供了在人类或动物宿主中抑制PI3-K活性的方法，它包括给予人类或动物宿主组合物，该组合物含有能够有效抑制人类或动物宿主PI3-K活性的一定量的本文任一个实施方案中的化合物。
另一个实施方案提供了在人类或动物宿主中治疗癌症的方法，它包括给予人类或动物宿主组合物，该组合物含有能够有效抑制人类或动物宿主PI3-K活性的一定量的本文任一个实施方案中的化合物。更特别的实施方案还包括给予人类或动物宿主至少一种另外的用于治疗癌症的药物。在另一个实施方案中，所述至少一种另外的用于治疗癌症的药物为瓦他拉尼，伊马替尼或吉非替尼。或者，所述至少一种另外的用于治疗癌症的药物选自激酶抑制剂、抗雌激素药物、抗雄激素药物、其它抑制剂、癌症化疗药物、烷化剂、螯合剂、生物响应调节剂、癌症疫苗或下面列出的反义治疗(组A-J)。
在任何前述的另一个实施方案中，所述癌症为乳癌、膀胱癌、结肠癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、肺癌、肝细胞癌、胃癌、黑素瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、肾癌、子宫颈癌、胰腺癌、食道癌、前列腺癌、脑癌或卵巢癌。
另一个实施方案提供了调节Akt磷酸化的方法，它包括使得本文任一个实施方案中的化合物与细胞接触。另一个实施方案提供了调节Akt磷酸化的方法，它包括使得细胞与本文任一个实施方案中的化合物接触。在其更特殊的实施方案中，所述调节为抑制。在更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约1μM。在更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约0.5μM。在甚至更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约0.1μM。
另一个实施方案提供了本文任一个实施方案中的化合物在癌症治疗中的用途。
另一个实施方案提供了本文任一个实施方案中的化合物在生产用于治疗癌症的药物中的用途。
另一个实施方案提供了调节Akt磷酸化的方法，它包括使得本发明化合物与细胞接触。在其更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约1μM。
另一个实施方案提供了本文任一个实施方案中的化合物以及包装说明书或其它标签，包括通过给予PI3-K抑制量的该化合物治疗细胞增生性疾病的说明。
本发明还提供了组合物、试剂盒、使用的方法以及本发明详细的说明书中所述的生产方法。



结合附图，通过参考下列详述，前述方面以及本发明的多种优点可以更容易地评价和更好地理解，其中 图1描述了与对照赋形剂相比两种剂量的本发明的代表性化合物对肿瘤生长的抑制； 图2描述了与对照赋形剂相比三种剂量的本发明的代表性化合物对肿瘤生长的抑制； 图3描述了与对照赋形剂相比两种剂量的本发明的代表性化合物对肿瘤生长的抑制； 图4描述了与对照赋形剂相比两种剂量的本发明的代表性化合物对肿瘤生长的抑制；和 图5描述了与对照赋形剂相比本发明的代表性化合物对肿瘤生长的抑制。
优选实施方案详述 磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)调节各种生长因子的信号从而调节细胞增殖和存活。丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr，或S/T)蛋白激酶(也称为Akt)被确定为PI3-激酶的下游靶目标。通过其血小板-白细胞C激酶底物同源性域与PI3K产物磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸酯(PIP3)和磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸酯(PIP2)的相互作用，该蛋白激酶被募集到细胞膜上，然后通过3-磷酸肌醇-依赖性激酶-1(PDK-1)使其催化域磷酸化而将其活化。通过另一种候补激酶(PDK-2)使得丝氨酸C-末端疏水性基序磷酸化从而也可以激活Akt。激活的Akt作用于下游以调节其它激酶，这些激酶中的许多参与了控制存活、增殖、代谢以及生长转译的细胞过程。PI3K也可以通过没有Akt参与的平行通路驱动影响转化、细胞增殖、细胞结构重排以及存活的细胞过程(Hennessy等，Nat.Rev.Drug Disc.4988-1004(2005))。其中两个通路为小GTP-结合蛋白Cdc42和Rac1的激活以及血清和糖皮质激素-可诱导激酶(SGK)的激活。Cdc42和Rac1能够调节细胞结构运动和细胞运动性，并且当过度表达时可能有致癌基因的功能，它们也与RAS通路有关。因此，PI3K活性产生了3’-磷脂酰肌醇脂类，它们作为节点促进下游信号通路的多样性。
这些通路能够影响细胞性能包括细胞增殖、存活、运动性和形态学，这些性能在癌症、增生性疾病、血栓性疾病和炎症等中被干扰，因此，抑制PI3K(及其同种型)的化合物在这些疾病的治疗中具有实用价值，可以作为单一药物使用或者在组合产品中使用。在癌症中，PI3K/Akt通路的失调被广为报道，包括PIK3CA基因的过度表达、PIK3CA基因的突变被激活、Akt的过度表达、PDK-1的突变以及PTEN的缺失和失活(Parsons等，Nature 436792(2005)；Hennessy等，Nat.Rev.Drug Disc.4988(2005)；Stephens等，Curr.Opin.Pharmacol.51(2005)；Bonneau和Longy，HumanMutation 16109(2000)和Ali等，J.Natl.Can.Inst.911922(1999))。最近的发现显示PIK3CA在人类各种实体瘤中经常产生突变(>30％)(Samuels和Ericson，Curr.Opin.Oncology 1877(2005))，这些突变通常促进细胞生长和侵入(Samuels等，Cancer Cell 7561(2005))以及转化(Kang等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102802(2005)，Zhao等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA10218443(2005))。因此，PI3K特别是由PIK3CA及其突变编码的p110同种型抑制剂可以用于治疗由这些突变和失调导致的癌症。
本发明提供了作为丝氨酸苏氨酸激酶、脂类激酶抑制剂的新化合物，特别是作为磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)功能的抑制剂的新化合物。本文中提供的化合物可以制成药物制剂，用于治疗需要PI3K抑制剂的患者，特别是，在特别的实施方案中，提供了在癌症的治疗中降低细胞增殖和提高细胞死亡的组合物以及方法。
在本发明的一个方面中提供了新的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物、其药学上可接受的盐及其前药。该PI3K抑制剂化合物为嘧啶化合物。该嘧啶化合物、其药学上可接受的盐及其前药为PI3K抑制剂，因此可以用于治疗细胞增生性疾病。
在一个实施方案中，本发明的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物具有下面式(I)结构
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基，和 (6) 亚磺酰氨基； R1选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR1a， (13) -CO2R1a， (14) -CONR1aR1b， (15) -NR1aR1b， (16) -NR1aCOR1b， (17) -NR1aSO2R1b， (18) -OCOR1a， (19) -OR1a， (20) -SR1a， (21) -SOR1a， (22) -SO2R1a，和 (23) -SO2NR1aR1b， 其中R1a和R1b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基；并且 R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素。
取代的R1包括取代的或未取代的芳基烷基、取代的或未取代的杂芳基烷基、取代的或未取代的环烷基烷基或取代的或未取代的杂环基烷基。
在一个实施方案中，W为CH。
在另一个实施方案中，W为N。在其更特殊的实施方案中，R3为＝O。
在一个实施方案中，R1选自下列基团 (1) 取代的和未取代的烷基， (2) 取代的和未取代的芳基， (3) 取代的和未取代的杂芳基， (4) 取代的和未取代的杂环基， (5) 取代的和未取代的环烷基， (6) -OR1a，和 (7) -NR1aR1b， 其中R1a和R1b独立选自下列基团 (a) 取代的和未取代的杂芳基，和 (b) 取代的和未取代的杂环基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的杂环基或取代的或未取代的-O-杂环基。在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的吗啉基；更特别的是，R1为未取代的N-连接的吗啉基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的四氢吡喃或取代的或未取代的四氢吡喃基氧基。更特别的是，R1为未取代的4-四氢吡喃基氧基。
在另一个实施方案中，R1为取代的或未取代的四氢呋喃或取代的或未取代的四氢呋喃基氧基。更特别的是，R1为未取代的3-四氢呋喃基氧基。
在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的杂环基烷基或取代的或未取代的杂芳基烷基。在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的吗啉基。在一个实施方案中，吗啉基包括N-连接的吗啉基。在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的四氢吡喃。在一个实施方案中，四氢吡喃包括4-四氢吡喃基氧基。在一个实施方案中，四氢吡喃包括3-四氢吡喃基氧基。在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的四氢呋喃。在一个实施方案中，四氢呋喃包括3-四氢呋喃基氧基。在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的哌啶。在一个实施方案中，哌啶包括4-哌啶基氧基。在另一个实施方案中，哌啶包括3-哌啶基氧基。在一个实施方案中，R1包括取代的或未取代的吡咯烷。在一个实施方案中，吡咯烷包括3-吡咯烷基氧基。
在一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 卤素， (5) 氨基， (6) 甲基，和 (7) 三氟甲基。
在一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氰基， (2) 硝基， (3) 卤素， (4) 羟基， (5) 氨基，和 (6) 三氟甲基。
在一个实施方案中，R3为三氟甲基。在一个实施方案中，R3为氰基。
在一个实施方案中，本发明的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物具有下列式(II)结构
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基，和 (6) 亚磺酰氨基； X为O、S、NH或键； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素；并且 R5选自下列基团 (1) 取代的和未取代的环烷基， (2) 取代的和未取代的杂环基， (3) 取代的和未取代的芳基，和 (4) 取代的和未取代的杂芳基。
在一个实施方案中，W为CH。
在一个实施方案中，W为N。在其更特殊的实施方案中，R3为＝O。
在一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 氨基， (5) 卤素，和 (6) 取代的和未取代的C1-3烷基。
在一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) -SR3a (4) 卤素， (5) 硝基， (6) 取代的和未取代的烷基， (7) 取代的和未取代的链烯基， (8) 取代的和未取代的炔基， (9) -OR3a， (10) -NR3aR3b， (11) -COR3a，和 (12)-NR3aCOR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基。
在一个实施方案中，R3为三氟甲基。
在一个实施方案中，R5选自下列基团 (1) 取代的或未取代的吗啉基， (2) 取代的或未取代的四氢吡喃基，和 (3) 取代的或未取代的四氢呋喃基。
在其更特殊的实施方案中，R5为N-连接的吗啉基；更特别的是，X为键。在另一个更特殊的实施方案中，R5为4-四氢吡喃基；更特别的是，X为O。在另一个实施方案中，R5为3-四氢呋喃基；更特别的是，X为O。
在一个实施方案中，本发明的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物具有下列式(III)结构
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中 W为CRw或N，其中Rw选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 卤素， (4) 甲基， (5) 三氟甲基，和 (6) 亚磺酰氢基； R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 羟基， (6) 氨基， (7) 取代的和未取代的烷基， (8) -COR2a，和 (9) -NR2aCOR2b， 其中R2a和R2b独立选自下列基团 (a) 氢，和 (b) 取代的或未取代的烷基； R3选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 硝基， (4) 卤素， (5) 取代的和未取代的烷基， (6) 取代的和未取代的链烯基， (7) 取代的和未取代的炔基， (8) 取代的和未取代的芳基， (9) 取代的和未取代的杂芳基， (10) 取代的和未取代的杂环基， (11) 取代的和未取代的环烷基， (12) -COR3a， (13) -NR3aR3b， (14) -NR3aCOR3b， (15) -NR3aSO2R3b， (16) -OR3a， (17) -SR3a， (18) -SOR3a， (19) -SO2R3a，和 (20) -SO2NR3aR3b， 其中R3a和R3b独立选自下列基团 (a) 氢， (b) 取代的或未取代的烷基， (c) 取代的和未取代的芳基， (d) 取代的和未取代的杂芳基， (e) 取代的和未取代的杂环基，和 (f) 取代的和未取代的环烷基； R4选自下列基团 (1) 氢，和 (2) 卤素；并且 R6选自下列基团 (1) 氢， (2) 取代的和未取代的烷基，和 (3) 取代的和未取代的环烷基。
在一个实施方案中，R2选自下列基团 (1) 氢， (2) 氰基， (3) 羟基， (4) 卤素， (5) 氨基， (6) 甲基，和 (7) 三氟甲基。
在一个实施方案中，R3选自下列基团 (1) 氰基， (2) 硝基， (3) 卤素， (4) 羟基， (5) 氨基，和 (6) 三氟甲基。
在一个实施方案中，R5选自下列基团 (1) 氢， (2) 甲基，和 (3) 乙基。
可以理解，本发明的抑制剂化合物可能存在互变异构现象。因为本说明书中的化学结构只能代表可能的互变异构形式的一种，所以，可以理解本发明包含所绘制的结构的所有的互变异构形式。
对于式(I)-(III)化合物，具有代表性的取代的烷基包括芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基和亚磺酰氨基烷基。具有代表性的取代的芳基包括亚磺酰氨基芳基。具有代表性的取代的杂芳基包括烷基杂芳基。
本发明的具有代表性的PI3K抑制剂化合物的合成描述于下面实施例章节中所述方法中，具有代表性的化合物的制备描述于实施例1-31。
本发明的具有代表性的PI3K抑制剂化合物列于表1。
另一方面，本发明提供了PI3K抑制剂化合物的生产方法。也可以理解，除了式(I)-(III)化合物外，合成的中间体及相应的方法也包含在本发明的范围内。
另一个实施方案提供了抑制Akt磷酸化的方法，它包括给予需要的人类式I、II或III化合物。另一个实施方案提供了治疗对Akt磷酸化的抑制有响应的癌症的方法，它包括给予式I、II或III化合物。另一个实施方案提供了抑制Akt磷酸化的方法，它包括使得细胞与式I、II或III化合物接触。
另一个实施方案提供了抑制Akt磷酸化的方法，它包括口服给予需要的人类式I、II或III化合物。在更特殊的实施方案中，所述人类患有癌症。在更特殊的实施方案中，所述癌症对能够抑制Akt磷酸化的化合物的治疗有响应。在另一个实施方案中，所述化合物为口服可生物利用的。
另一个实施方案提供了治疗癌症的方法，它包括口服给予式I、II或III化合物，其中所述化合物能够抑制pAkt的活性。
在采用本发明的PI3K抑制剂化合物抑制PI3K的方法的某些实施方案中，所述化合物对PI3K的IC50值小于或等于1mM。在另一个此类实施方案中，IC50值小于或等于100μM，小于或等于25μM，小于或等于10μM，小于或等于1μM，小于或等于0.1μM，小于或等于0.050μM或者小于或等于0.010μM。
本发明化合物也可以用于评价PI3激酶抑制的相对活性的分析中。在此类分析中，本发明化合物可以用于测定与第二种化合物相比的化合物的相对抑制活性。当如此应用时，本发明化合物使用的量应足以使得技术人员能够检测PI3激酶的抑制。所述量在本文中有时也称为“有效抑制量”。在优选的实施方案中，该抑制量为能够使得PI3激酶的活性与化合物不存在时的活性相比降低约50％的量。然后，根据其它化合物在相同的浓度下能够提供较大或较小的抑制可以对其进行评价，从而得到相对活性的顺序排列。此类信息可以用于确定结构改变及对实验化合物进行其它修饰以改善其活性。因此本发明提供抑制PI3激酶活性的方法，该方法包括使得所述PI3激酶与有效抑制量的本文所公开的本发明化合物接触。也提供在细胞中抑制PI3激酶活性的方法，该方法包括使得所述细胞与有效抑制量的本文所要求的本发明化合物接触。
某些实施方案提供采用本发明化合物抑制Akt磷酸化的方法，所述化合物对pAKT抑制的EC50小于约10μM。在另一个更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约1μM。在更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约0.5μM。在甚至更特殊的实施方案中，所述化合物对pAKT抑制的EC50值小于约0.1μM。
在某些实施方案中，本发明成分能够抑制Akt磷酸化。在某些实施方案中，本发明成分能够在人类或动物宿主(即在体内)中抑制Akt磷酸化。
在一个实施方案中，提供了在人类或动物宿主中降低pAkt活性的方法。在该方法中，本发明化合物给药的量能够有效地降低pAkt活性。
在采用本发明的PI3K抑制剂化合物抑制PI3K的方法的某些实施方案中，化合物的EC50值在1nM至10nM之间。在另一个此类实施方案中，化合物的EC50值在10nM至50nM之间、50nM至100nM之间、100nM至1μM之间、1μM至25μM之间或者在25μM至100μM之间。
本发明化合物也可以用于评价AKT磷酸化抑制的相对活性的分析中。在此类分析中，本发明化合物可以用于测定与第二种化合物相比的化合物的相对抑制活性。当如此应用时，本发明化合物使用的量应足以使得技术人员能够检测AKT磷酸化的抑制。所述量在本文中有时也称为“有效抑制量”。在优选的实施方案中，该抑制量为能够使得AKT活性的磷酸化与化合物不存在时的活性相比降低约50％的量。然后，根据其它化合物在相同的浓度下能够提供较大或较小的抑制可以对其进行评价，从而得到相对活性的顺序排列。此类信息可以用于确定结构改变及对实验化合物进行其它修饰以改善其活性。因此本发明提供抑制AKT磷酸化的方法，该方法包括使得细胞与有效抑制量的本文中所述的本发明化合物接触。也提供在细胞中抑制PI3激酶活性的方法，该方法包括使得所述细胞与有效抑制量的本文所要求的本发明化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明提供了治疗PI3K介导的疾病的方法。在一个方法中，将有效量的PI3K抑制剂化合物给予需要的患者(例如，人类或动物宿主)以介导(或调节)PI3K活性。
本发明化合物用于人用或兽用的药用组合物中，其中例如在细胞增生性疾病例如肿瘤和/或由PI3K介导的癌细胞生长的治疗中需要对PI3K抑制。更特别的是，该化合物用于人类或动物(例如，鼠类)癌症的治疗中，包括例如肺癌和支气管癌、前列腺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌和直肠癌、甲状腺癌、肝癌和肝内胆管癌、肝细胞癌、胃癌、神经胶质瘤/成胶质细胞瘤、子宫内膜癌、黑素瘤、肾癌和肾盂癌、膀胱癌、宫体癌、子宫颈癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤、食道癌、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴细胞白血病、骨髓白血病、脑癌、口腔癌和咽癌、喉癌、小肠癌、非霍奇金淋巴瘤、黑素瘤和大肠绒毛腺瘤(villous colon adenoma)。
本发明成分，特别是那些对PI3激酶γ具有选择性抑制作用的成分，特别用于治疗炎性或阻塞性呼吸道疾病，使得例如组织损伤降低、呼吸道炎症减轻、支气管反应过度降低、重塑或疾病进程延缓。本发明所适用的炎性或阻塞性呼吸道疾病包括各种起源类型的哮喘，包括内源性(非过敏性)和外源性(过敏性)哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支气管哮喘、运动诱发性哮喘、职业性哮喘以及细菌感染后诱发的哮喘。哮喘的治疗也可以理解为包括对例如年龄小于4或5岁、存在喘息症状被被诊断为或可诊断为“喘鸣儿童”的患者的治疗，此类患者是一种已确定的主要医疗关注中的患者分类，现在通常鉴定为初期或早期哮喘。(“喘鸣儿童综合征”)。
对一种PI3激酶同种型(α、β、γ、δ)的选择性超过对其它不同同种型的选择性的本发明化合物为那些能够优先抑制一种同种型的化合物。例如，化合物对α同种型的优先抑制超过对γ同种型的抑制。或者，化合物对γ同种型的优先抑制超过对α同种型的抑制。为了确定化合物的选择性，根据本文中所述的生物学方法测定化合物的活性。例如，分别根据生物学方法1和2，测定化合物对两种或多种PI3激酶同种型(例如α和γ)的IC50值或EC50值。然后将得到的值进行比较以确定实验化合物的选择性。优选，本发明化合物对一种同种型的选择性超过对第二种同种型至少2倍、5倍或10倍。甚至更优选，本发明化合物对一种同种型的选择性超过对第二种同种型至少50倍或100倍。甚至更优选，本发明化合物对一种同种型的选择性超过对第二种同种型至少1000倍。
本发明适用的其它炎性或阻塞性呼吸道疾病和病症包括急性肺损伤(ALI)、成人型呼吸窘迫综合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病、呼吸道或肺疾病(COPD、COAD或COLD)，包括肺纤维化、慢性支气管炎或与之有关的呼吸困难、肺气肿，以及由其它药物治疗(特别是其它吸入药物治疗)导致的呼吸道过度活动恶化。本发明还适于治疗任何类型或起因的支气管炎，包括例如急性支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎、纤维蛋白性支气管炎、慢性支气管炎或结核性支气管炎。本发明适用的其它炎性或阻塞性呼吸道疾病包括任何类型或起因的尘肺(一种炎性、通常为职业性的肺病，无论是慢性还是急性的，经常伴有呼吸道阻塞，且由重复吸入粉尘引起)，包括例如铝尘肺、炭肺、石棉肺、石末肺、驼鸟毛尘肺、铁尘肺、矽肺、烟尘肺和棉尘肺。
由于它们的抗炎活性，特别是与抑制嗜酸粒细胞活化相关的抗炎活性，本发明成分还可用于治疗与嗜酸粒细胞相关的疾病，例如嗜酸粒细胞增多，特别是与嗜酸粒细胞相关的呼吸道疾病(例如涉及病态嗜酸粒细胞浸润的肺组织)，包括嗜酸细胞过多，因为其影响呼吸道和/或肺，以及例如由勒夫勒综合征、嗜酸细胞性肺炎、寄生虫(特别是后生动物)感染(包括热带嗜酸粒细胞增多症)、支气管肺曲霉病、结节性多动脉炎(包括丘-斯综合征)、嗜酸细胞肉芽肿引起的或与其相伴发的与嗜酸粒细胞相关的呼吸道疾病，以及药物反应导致的影响呼吸道的与嗜酸粒细胞相关的疾病。
本发明的物质还可用于治疗皮肤的炎性或变应性病症，例如银屑病、接触性皮炎、特应性皮炎、斑秃、多形红斑、疱疹样皮炎、硬皮病、白癜风、变应性血管炎、荨麻疹、大疱性类天疱疮、红斑狼疮、天疱疮(pemphisus)、获得性大疱性表皮松解症及其它皮肤的炎性或变应性病症。
本发明的物质还可用于治疗其它疾病或病症，特别是具有炎性成份的疾病或病症，例如治疗眼部疾病和病症，如结膜炎、干燥性角膜结膜炎和春季结膜炎；影响鼻腔的疾病，包括过敏性鼻炎；以及其中涉及自身免疫反应或具有自身免疫性成份或病因学的炎性疾病，包括自身免疫性血液学疾病(例如溶血性贫血、再生障碍性贫血、纯红细胞贫血和特发性血小板减少)、系统性红斑狼疮、多软骨炎、硬皮病、韦格纳肉芽肿病、皮肌炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、斯-约综合征、特发性口炎性腹泻、自身免疫性炎性肠病(例如溃疡性结肠炎和局限性回肠炎)、内分泌性眼病、格雷夫斯病、结节病、肺泡炎、慢性过敏性肺炎、多重硬化症、原发性胆汁性肝硬化、眼色素层炎(前眼色素层炎和后眼色素层炎)、间质性肺纤维化、银屑病关节炎和肾小球肾炎(伴有和不伴有肾病综合征，例如包括特发性肾病综合征或微小病变肾病)。
在另一个实施方案中，本发明为抑制白细胞(特别是嗜中性粒细胞)以及B和T囊依赖性淋巴细胞的方法。可以被治疗的典型医学疾病包括那些特征为嗜中性粒细胞功能异常的疾病，所述功能异常包括受刺激的过氧化物释放、受刺激的胞吐以及趋化性迁移，优选不存在抑制吞噬活性或嗜中性粒细胞对细菌的杀灭。
在另一个实施方案中，本发明为干扰破骨细胞功能并改善骨吸收疾病(例如骨质疏松症)的方法。
在另一个实施方案中，可以用本发明的物质治疗的疾病或病症包括败血症性休克、移植术后同种异体移植物的排斥反应、骨病例如但不限于类风湿性关节炎、关节强硬性脊椎炎、骨关节炎、肥胖症、再狭窄、糖尿病例如I型糖尿病(幼年型糖尿病)和II型糖尿病、腹泻疾病。
在另一个实施方案中，PI3K介导的疾病或病症选自心血管疾病、动脉粥样硬化、高血压、深层静脉血栓形成、中风、心肌梗塞、不稳定性绞痛、血栓栓塞、肺栓塞、血栓溶解疾病(thrombolytic disease)、急性动脉局部缺血、外周血栓性阻塞和冠状动脉疾病、再灌注损伤、视网膜病变例如糖尿病性视网膜病或高压氧诱导的视网膜病以及特征为眼内压升高或眼房水分泌的疾病，例如青光眼。
如上所述，因为PI3K作为整合平行信号通路的第二信使节点，证据显示PI3K抑制剂与其它通路的抑制剂的组合产品可以用于治疗人类癌症和增生性疾病。
约20-30％的人类乳癌过度表达Her-2/neu-ErbB2，它是药物曲妥珠单抗的靶目标。尽管已经证实曲妥珠单抗在某些能够表达Her2/neu-ErbB2的患者中具有持久的响应，但这些患者中只是一部分有响应。最近的研究显示该有限的响应率可以通过曲妥珠单抗与PI3K抑制剂或PI3K/AKT通路抑制剂的联合应用而得以实质的提高(Chan等，Breast Can.Res.Treat.91187(2005)，Woods Ignatoski等，Brit.J.Cancer 82666(2000)，Nagata等，Cancer Cell 6117(2004))。
多种人类恶性疾病表现为Her1/EGFR激活突变或水平升高，据此开发了多种针对该受体酪氨酸激酶的抗体和小分子抑制剂，包括特罗凯(tarceva)、吉非替尼和爱必妥(erbitux)。然而，尽管EGFR抑制剂在某些人类肿瘤(例如，NSCLC)中证明具有抗肿瘤活性，但是它们不能在表达EGFR的所有肿瘤患者中提高总患者存活率。这可以通过下列理论解释Her1/EGFR的许多下游靶目标在各种恶性肿瘤中以较高的频率突变或失调，包括PI3K/Akt通路。例如，吉非替尼在体外分析中能够抑制腺癌细胞系的生长。但是，这些细胞系的亚克隆可以被选择用于对抗吉非替尼，它证明PI3/Akt通路的激活被增强了。该通路的下调或抑制使得有抗性的亚克隆对吉非替尼敏感(Kokubo等，Brit.J.Cancer 921711(2005))。另外，在具有PTEN突变和过度表达EGFR的细胞系的乳癌的体外模型中，PI3K/Akt通路和EGFR两者的抑制产生了协同作用(She等，Cancer Cell8287-297(2005))。这些结果表明吉非替尼和PI3K/Akt通路抑制剂的联合应用可能是有吸引力的癌症治疗策略。
AEE778(Her-2/neu/ErbB2、VEGFR和EGFR的抑制剂)和RAD001(mTOR(Akt的下游靶目标)的抑制剂)的联合应用较单一成分在成胶质细胞瘤异种移植模型中产生了更强的相加效果(Goudar等，Mol.Cancer.Ther.4101-112(2005))。
抗雌激素药物例如他莫西芬通过诱发细胞循环中止(它需要细胞循环抑制剂p27Kip的作用)而抑制乳癌生长。最近显示Ras-Raf-MAP激酶通路的激活改变了p27Kip的磷酸化状态，从而使得其在中止细胞循环中的抑制活性减弱，因此有助于抗雌激素的抗性(Donovan等，J.Biol.Chem.27640888，2001)。根据Donovan等的报道，通过采用MEK抑制剂对MAPK信号的抑制在激素不应(hormone refractory)的乳癌细胞系中逆转了p27的异常磷酸化状态，因此恢复了激素的敏感性。同样，通过Akt对p27Kip的磷酸化也使其失去了中止细胞循环的作用(Viglietto等，Nat Med.81145(2002))。因此，一方面，式(I)化合物可以用于治疗激素依赖性癌症，例如乳癌和前列腺癌，逆转采用传统抗癌药物时在这些癌症中常见的激素抗性。
在血液性癌症中，例如慢性骨髓性白血病(CML)，染色体易位负责构成性激活的BCR-Ab1酪氨酸激酶。由于Ab1激酶活性被抑制，患病的患者对伊马替尼(一种小分子酪氨酸激酶抑制剂)有响应。然而，处于疾病后期阶段的许多患者起初时对伊马替尼有响应，但是由于Ab1激酶域的抗性突变在后期却会复发。体外研究表明，BCR-Ab1通过Ras-Raf激酶通路以发挥其作用。另外，在相同的通路中抑制一种以上的激酶提供了对抗抗性突变的其它保护作用。因此，在本发明另一方面中，式(I)化合物可以与至少一种另外的成分(例如

)联合使用，用于治疗血液癌症，例如慢性骨髓性白血病(CML)，从而逆转或防止对至少一种另外的成分的抗性。
因为PI3K/Akt通路的激活使得细胞能够存活，在使得癌症细胞凋亡的联合治疗(包括放疗和化疗)中对该通路的抑制能够提高响应(Ghobrial等，CA Cancer J.Clin 55178-194(2005))。例如，PI3激酶抑制剂与卡铂的联合应用在体外增殖和细胞凋亡分析中以及在卵巢癌异种移植模型中的体内肿瘤疗效中显示协同作用(Westfall和Skinner，Mol.Cancer Ther41764-1771(2005))。
除了癌症和增生性疾病外，有越来越多的证据显示1A类和1B类PI3激酶抑制剂在其它疾病中具有治疗用途。已经显示p110(PIK3CB基因的PI3K同种型产物)的抑制与剪切应力诱导血小板激活有关(Jackson等，Nature Medicine 11507-514(2005))。因此，能够抑制p110的PI3K抑制剂可以作为单一药物或者在组合产品中用于抗血栓形成治疗。该同种型p110(PIK3CD基因的产物)在B细胞功能和分化(Clayton等，J.Exp.Med.196753-763(2002))、T-细胞依赖性和非依赖性抗原反应(Jou等，Mol.Cell.Biol.228580-8590(2002))和肥大细胞分化(Ali等，Nature4311007-1011(2004))中非常重要。因此，希望p110-抑制剂可以用于治疗B-细胞诱导的自身免疫性疾病和哮喘。最后，p110(PI3KCG基因的同种型产物)的抑制产生T细胞而非B细胞减少的响应(Reif等，J.Immunol.1732236-2240(2004))，其抑制在自身免疫性疾病动物模型中显示疗效(Camps等，Nature Medicine 11936-943(2005)，Barber等，Nature Medicine11933-935(2005))。
本发明提供了药用组合物，它包括至少一种PI3K抑制剂化合物(例如，式(I)-(III)化合物)和适合给予人类或动物宿主的药学上可接受的载体，可以单独给予或者与其它抗癌药物一起给予。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗患有细胞增生性疾病例如癌症的人类或动物宿主的方法。本发明提供了治疗需要此类治疗的人类或动物宿主的方法，包括给予宿主治疗有效量的PI3K抑制剂化合物(例如，式(I)-(III)化合物)，可以单独给予或者与其它抗癌药物一起给予。
特别的是，组合物可以调配到一起作为联合治疗或者分别给药。本发明使用的抗癌药包括但不限于下面列出的一或多种 A.激酶抑制剂 与本发明组合物联合使用的作为抗癌药物的激酶抑制剂包括表皮生长因子受体(EGFR)激酶抑制剂，例如小分子喹唑啉类，例如吉非替尼(US5457105、US 5616582和US 5770599)、ZD-6474(WO 01/32651)、厄洛替尼(

US 5,747,498和WO 96/30347)和拉帕替尼(US 6,727,256和WO02/02552)；血管内皮生长因子受体(VEGFR)激酶抑制剂，包括SU-11248(WO 01/60814)、SU 5416(US 5,883,113和WO 99/61422)、SU6668(US 5,883,113和WO 99/61422)、CHIR-258(U S6,605,617和US6,774,237)、瓦他拉尼或PTK-787(US 6,258,812)、VEGF-Trap(WO02/57423)、B43-染料木素(Genistein)(WO-09606116)、芬维A胺(fenretinide)(维A酸对-羟基苯胺)(US 4,323,581)、IM-862(WO 02/62826)、贝伐单抗或

(WO 94/10202)、KRN-951、3-[5-(甲基磺酰基piperadine甲基)-吲哚基]-喹诺酮、AG-13736和AG-13925、吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪类、ZK-304709、

VMDA-3601、EG-004、CEP-701(US 5,621,100)、Cand5(WO 04/09769)；Erb2酪氨酸激酶抑制剂，例如帕妥珠单抗(WO 01/00245)、曲妥珠单抗和利妥昔单抗；Akt蛋白激酶抑制剂，例如RX-0201；蛋白激酶C(PKC)抑制剂，例如LY-317615(WO95/17182)和哌立福新(US 2003171303)；Raf/Map/MEK/Ras激酶抑制剂，包括索拉非尼(BAY 43-9006)、ARQ-350RP、LErafAON、BMS-354825AMG-548和其它公开于WO 03/82272的抑制剂；成纤维细胞生长因子受体(FGFR)激酶抑制剂；细胞依赖性激酶(CDK)抑制剂，包括CYC-202或roscovitine(WO 97/20842和WO99/02162)；血小板衍生生长因子受体(PGFR)激酶抑制剂，例如CHIR-258、3G3mAb、AG-13736、SU-11248和SU6668；和Bcr-Abl激酶抑制剂和融合蛋白，例如STI-571或

(伊马替尼)。
B.抗雌激素药物 在抗癌治疗中与本发明组合物联合应用的雌激素靶向药物包括选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，包括他莫西芬、托瑞米芬、雷洛西芬；芳香酶抑制剂，包括

或阿那曲唑；雌激素受体下调剂(ERDs)，包括

或氟维司群。
C.抗雄激素药物 在抗癌治疗中与本发明组合物联合应用的雄激素靶向药物包括氟他胺、比卡鲁胺、非那甾胺、氨鲁米特、酮康唑和皮质激素类。
D.其它抑制剂 作为抗癌药物与本发明组合物联合应用的其它抑制剂包括蛋白法呢基转移酶抑制剂，包括tipifarnib或R-115777(US 2003134846和WO97/21701)、BMS-214662、AZD-3409和FTI-277；拓扑异构酶抑制剂，包括美巴龙(merbarone)和二氟替康(diflomotecan)(BN-80915)；有丝分裂驱动蛋白纺锤体蛋白(KSP)抑制剂，包括SB-743921和MKI-833；蛋白酶调节剂，例如硼替佐米(bortezomib)或

(US 5,780,454)、XL-784；和环氧酶2(COX-2)抑制剂，包括非甾体抗炎药I(NSAIDs)。
E.癌症化疗药物 与本发明组合物联合应用的作为抗癌药物的特殊的癌症化疗药物包括阿那曲唑

必卡他胺

硫酸争光霉素

白消安

白消安注射剂

卡培他滨

N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂

卡氮芥

苯丁酸氮芥

顺铂

克拉屈滨

环磷酰胺(

或

阿糖胞苷(cytarabine)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)

阿糖胞苷脂质体注射液

氮烯唑胺

放线菌素D(Actinomycin D、Cosmegan)、柔红霉素盐酸盐

柔红霉素柠檬酸盐脂质体注射液

地塞米松、多烯紫杉醇(

US 2004073044)、多柔比星盐酸盐(


)、足叶乙甙

氟达拉滨磷酸盐

5-氟尿嘧啶(


)、氟他胺

替扎他滨(tezacitibine)、吉西他滨(二氟去氧胞苷)、羟基脲

依达比星

异环磷酰胺

依立替康

L-天门冬酰胺酶

甲酰四氢叶酸钙、美法仑

6-巯基嘌呤

甲氨蝶呤

米托蒽醌

吉妥单抗(mylotarg)、紫杉醇

phoenix(Yttrium90/MX-DTPA)、喷司他丁、卡莫司汀植入膜剂20(polifeprosan 20)

他莫西芬柠檬酸盐

替尼泊甙

6-硫鸟嘌呤、噻替派、替拉扎明

注射用拓扑替康盐酸盐

长春碱

长春新碱

和长春瑞宾
F.烷化剂 与本发明组合物联合用于抗癌治疗的烷化剂包括VNP-40101M或cloretizine、奥沙利铂(US 4,169,846、WO 03/24978和WO 03/04505)、葡磷酰胺、马磷酰胺、依托泊苷(US 5,041,424)、泼尼莫司汀、曲奥舒凡、白消安、伊洛福芬(irofluven)(acylfulvene)、五氯甲定(penclomedine)、吡唑并吖啶(PD-115934)、O6-苄基鸟嘌呤、地西他滨(5-氮杂-2-去氧胞苷)、brostallicin、丝裂毒素C(MitoExtra)、TLK-286

替莫唑胺、trabectedin(US 5,478,932)、AP-5280(顺铂的铂酸盐制剂)、甲基丝裂霉素和clearazide(meclorethamine)。
G.螯合剂 与本发明组合物联合用于抗癌治疗的螯合剂包括四硫钼酸铵(WO01/60814)、RP-697、Chimeric T84.66(cT84.66)、钆磷维塞(gadofosveset)

去铁胺以及任选与electorporation(EPT)联合应用的博来霉素。
H.生物响应调节剂 与本发明组合物联合用于抗癌治疗的生物响应调节剂例如免疫调节剂包括星孢菌素(staurosprine)及其大环类似物，包括UCN-01、CEP-701和midostaurin(参见WO 02/30941、WO 97/07081、WO 89/07105、US5,621,100、WO 93/07153、WO 01/04125、WO 02/30941、WO93/08809、WO 94/06799、WO 00/27422、WO 96/13506和WO88/07045)；角鲨胺(WO 01/79255)；DA-9601(WO 98/04541和US6,025,387)；阿来组单抗；干扰素类(例如IFN-a、IFN-b等)；白细胞介素，特别是IL-2或阿地白介素以及IL-1、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12及其活性生物学变体(其氨基酸序列大于70％的天然人类序列)；六甲蜜胺

SU 101或来氟米特(WO04/06834和US 6,331,555)；咪唑并喹啉类，例如雷西莫特和咪喹莫特(US4,689,338、5,389,640、5,268,376、4,929,624、5,266,575、5,352,784、5,494,916、5,482,936、5,346,905、5,395,937、5,238,944和5,525,612)；和SMIPs，包括吲哚类、蒽醌类、缩氨基硫脲类和色胺酮类(WO 04/87153、WO 04/64759和WO 04/60308)。
I.癌症疫苗 与本发明组合物联合应用的癌症疫苗包括

(TetrahedronLetters 26，1974 2269-70)、oregovomab


(STn-KLH)、黑素瘤疫苗、GI-4000系列(GI-4014、GI-4015和GI-4016)(它们在Ras蛋白中具有5种变异)、GlioVax-1、MelaVax、

或INGN-201(WO 95/12660)、Sig/E7/LAMP-1、编码HPV-16E7、MAGE-3疫苗或M3TK(WO 94/05304)、HER-2VAX、ACTIVE(它刺激针对肿瘤特异的T-细胞)、GM-CSF癌症疫苗和Listeria单核细胞疫苗(Listeria monocytogenes-based vaccines)。
J.反义治疗 与本发明组合物联合应用的抗癌药物也包括反义组合物，例如AEG-35156(GEM-640)、AP-12009和AP-11014(TGF-β2-特殊反义寡核苷酸)；AVI-4126、AVI-4557、AVI-4472、oblimersen

JFS2、aprinocarsen(WO 97/29780)、GTI-2040(R2核糖核苷酸还原酶mRNA反义oligo)(WO 98/05769)；GTI-2501(WO 98/05769)、脂质体包囊的c-Raf反义脱氧核苷酸(LErafAON)(WO 98/43095)和Sirna-027(基于RNAi的治疗靶向VEGFR-1mRNA)。
本发明化合物也可以与支气管扩张药或抗组胺药物在药用组合物中联合应用。此类支气管扩张药包括抗胆碱能药或抗毒蕈碱药物，特别是异丙托溴铵、氧托溴铵和噻托溴铵；以及

-2-肾上腺素受体激动剂，例如沙丁胺醇、特布他林、沙美特罗，特别是福莫特罗。联合治疗的抗组胺药物包括西替利嗪盐酸盐、富马酸氯马斯汀、异丙嗪、氯雷他定、地氯雷他定、苯海拉明和非索芬那定盐酸盐。
本发明成分在抑制炎性疾病(例如炎性呼吸道疾病)中的有效性可以在呼吸道炎性或其它炎性疾病的动物模型(例如小鼠或大鼠模型)中得到证明，例如下列文献中所述Szarka等，J.Immunol.Methods(1997)20249-57；Renzi等，Am.Rev.Respir.Dis.(1993)148932-939；Tsuyuki等，J.Clin.Invest.(1995)962924-2931；和Cernadas等(1999)Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.201-8。
本发明成分也可以作为联合治疗药物与其它药物(例如抗炎药物、支气管扩张药或抗组胺药物)联合使用，特别是用于治疗阻塞性或炎性呼吸道疾病(例如上文中所述的那些疾病)，例如作为此类药物治疗活性的增效剂或者作为降低此类药物所必需的剂量或潜在副作用的手段。本发明成分可以与其它药物在固定的药用组合物中混合，或者它可以与其它药物分别给药，在其它药物之前、同时或之后给药。因此本发明包括上文中所述的本发明成分与抗炎药物、支气管扩张药物或抗组胺药物的组合产品，所述本发明成分和所述药物可以在相同或不同的药用组合物中。此类抗炎药物包括甾体类，特别是糖皮质激素类，例如布地奈德、倍氯米松、氟替卡松、环索奈德或莫米松；LTB4拮抗剂，例如描述于US5451700中的拮抗剂；LTD4拮抗剂，例如孟鲁司特和扎鲁司特；多巴胺受体激动剂，例如卡麦角林、溴麦角隐亭、罗匹尼罗和4-羟基-7-[2-[[2-[[3-(2-苯基乙氧基)丙基]-磺酰基]乙基]-氨基]乙基]-2(3H)-苯并噻唑酮及其药学上可接受的盐(其盐酸盐为

-AstraZeneca)；和PDE4抑制剂，例如

(GlaxoSmithKline)、罗氟司特(Byk Gulden)、V-11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、阿罗茶碱(Almirall Prodesfarma)和PD189659(Parke-Davis)。此类支气管扩张药物包括抗胆碱能药物或抗毒蕈碱药物，特别是异丙托溴铵、异丙托溴铵、氧托溴铵和噻托溴铵；β-2肾上腺素受体激动剂，例如沙丁胺醇、特布他林、沙美特罗，特别是福莫特罗，及其药学上可接受的盐以及PCT国际专利申请号WO 00/75114的式I化合物(游离形式或盐或溶剂化物形式)，该文献在此引入作为参考，优选其实施例化合物，特别是下式化合物及其药学上可接受的盐

联合治疗的抗组胺药物包括西替利嗪盐酸盐、对乙酰氨基酚、富马酸氯马斯汀、异丙嗪、氯雷他定、地氯雷他定、苯海拉明和非索芬那定盐酸盐。在例如COPD或者特别是哮喘的治疗中，可以采用本发明成分与甾体类、β-2激动剂、PDE4抑制剂或LTD4拮抗剂的联合应用。在例如哮喘或者特别是COPD的治疗中，可以采用本发明成分与抗胆碱能药物或抗毒蕈碱药物、PDE4抑制剂、多巴胺受体激动剂或LTB4拮抗剂的联合应用。
本发明成分与抗炎药物的其它有用的联合应用为与下列成分的联合应用趋化因子受体拮抗剂，所述趋化因子受体例如CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5，特别是CCR-5拮抗剂，例如Schering-Plough拮抗剂SC-351125、SCH-55700和SCH-D；Takeda拮抗剂，例如N-[[4-[[[6，7-二氢-2-(4-甲基苯基)-5H-苯并环庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]四氢-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-氯化铵(TAK-770)；和描述于下列专利中的CCR-5拮抗剂US 6166037(特别是权利要求18和19)、WO00/66558(特别是权利要求8)和WO 00/66559(特别是权利要求9)。
本发明化合物也可以在药用组合物与下列药物联合应用用于治疗溶解血栓疾病、心脏病、中风等的化合物(例如，阿司匹林、链激酶、组织纤溶酶原激活剂、尿激酶)、抗凝血药物、抗血小板药物(例如PLAVIX；氯吡格雷硫酸氢盐)、他汀类(例如LIPITOR或阿伐他汀钙、ZOCOR(新伐他汀)、CRESTOR(罗伐他汀)等)、β-阻断剂(例如阿替洛尔)、NORVASC(苯磺酸氨氯地平)和ACE抑制剂(例如赖诺普利)。
本发明化合物也可以在药用组合物中与抗高血压药物化合物联合应用，所述药物例如ACE抑制剂；降脂药，例如他汀类，LIPITOR(阿伐他汀钙)；钙通道阻断剂，例如NORVASC(苯磺酸氨氯地平)。本发明化合物也可以与贝特类、β-阻断剂、NEPI抑制剂、血管紧张素-2受体拮抗剂以及血小板聚集抑制剂联合应用。
对于炎性疾病(包括类风湿性关节炎)的治疗，本发明化合物可以与下列药物联合应用例如，TNF-

抑制剂，例如抗-TNF-

单克隆抗体(例如REMICADE、CDP-870)和D2E7(HUMIRA)以及TNF受体免疫球蛋白融合分子(例如ENBREL)；IL-1抑制剂、受体拮抗剂或可溶性IL-1R□(例如KINERET或ICE抑制剂)；非甾体类抗炎药(NSAIDS)，例如吡罗昔康、双氯芬酸、萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬、布洛芬、芬那酸类、甲灭酸、消炎痛、舒林酸、阿扎丙宗、吡唑酮类、保泰松、阿司匹林；COX-2抑制剂(例如CELEBREX(塞来昔布)、PREXIGE(罗美昔布))；金属蛋白酶抑制剂(优选MMP-13选择性抑制剂)；p2x7抑制剂；



抑制剂；NEUROTIN；普瑞巴林；低剂量甲氨蝶呤；来氟米特；羟氯喹；d-青霉胺；金诺芬或肠胃外的或口服使用的金。
本发明化合物也可以与现有的用于治疗骨关节炎的治疗药物联合应用。联合应用的适当的药物包括标准非甾体抗炎药(在下文中称为NSAID’s)，例如吡罗昔康、双氯芬酸、丙酸例如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬和布洛芬、芬那酸类例如甲灭酸、消炎痛、舒林酸、阿扎丙宗、吡唑酮类例如保泰松、水杨酸酯类例如阿司匹林；COX-2抑制剂，例如塞来昔布、戊地昔布、罗美昔布和依托考昔；镇痛药和关节腔内治疗，例如皮质激素类和透明质酸(例如hyalgan和synvisc)。
本发明化合物也可以与抗病毒药物(例如Viracept、AZT、阿昔洛韦和泛昔洛韦)以及防腐化合物(例如Valant)联合应用。
本发明化合物也可以与CNS药物联合应用，所述药物例如抗抑郁药(舍曲林)、抗帕金森病药物(例如丙炔苯丙胺(deprenyl)、L-多巴、Requip、Mirapex、MAOB抑制剂例如selegine和雷沙吉兰、comp抑制剂例如Tasmar、A-2抑制剂、多巴胺再摄取抑制剂、NMDA拮抗剂、烟碱激动剂、多巴胺激动剂和神经元一氧化氮合酶抑制剂)和抗阿尔茨海默氏病药物，例如多奈哌齐、他克林、



抑制剂、NEUROTIN、普瑞巴林、COX-2抑制剂、丙戊茶碱或metryfonate。
本发明化合物也可以与抗骨质疏松症药物(例如EVISTA(雷洛昔芬盐酸盐)、屈洛昔芬、拉索昔芬或福善美)以及免疫抑制剂(例如FK-506和雷帕霉素)联合应用。
本发明另一方面提供了包含一或多个本发明化合物的试剂盒。具有代表性的试剂盒包含本发明PI3K抑制剂化合物(例如，式(I)-(III)化合物)和药品说明书以及其它标签，包括通过给予PI3K抑制量的化合物用于治疗细胞增生性疾病的说明。
下列定义用于更好地理解本发明。
“烷基”是指不含有杂原子的烷基。因此，本术语包括直链烷基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。该术语也包括直链烷基的支链异构体，包括但不限于例如下列烷基-CH(CH3)2、-CH(CH3)(CH2CH3)、-CH(CH2CH3)2、-C(CH3)3、-C(CH2CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH(CH2CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH2CH3)3、-CH(CH3)-CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH2CH3)2、-CH2CH2C(CH3)3、-CH2CH2C(CH2CH3)3、-CH(CH3)CH2-CH(CH3)2、-CH(CH3)CH(CH3)CH(CH3)2、-CH(CH2CH3)CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3)等。因此，术语“烷基”包括伯烷基、仲烷基和叔烷基。优选的烷基包括具有1-12个碳原子或1-6个碳原子的直链和支链烷基。
“亚烷基”是指如上面“烷基”所述的相同基团，但具有两个连接点。典型的亚烷基包括亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)、二甲基亚丙基(-CH2C(CH3)2CH2-)和环己基亚丙基(-CH2CH2CH(C6H13)-)。
“链烯基”是指具有2至约20个碳原子的直链、支链或环状基团，例如如上文所定义的烷基所述的那些基团，但是含有一或多个碳-碳双键。实例包括但不限于乙烯基、-CH＝C(H)(CH3)、-CH＝C(CH3)2、-C(CH3)＝C(H)2、-C(CH3)＝C(H)(CH3)、-C(CH2CH3)＝CH2、环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁间二烯基、戊二烯基和己二烯基。优选的链烯基包括具有2-12个碳原子或2-6个碳原子的直链和支链链烯基以及环链烯基。
“炔基”是指具有2至约20个碳原子的直链、支链或环状基团，例如如上文所定义的烷基所述的那些基团，但是含有一或多个碳-碳三键。实例包括但不限于-C≡C(H)、-C≡C(CH3)、-C≡C(CH2CH3)、-C(H2)C≡C(H)、-C(H)2C≡C(CH3)和-C(H)2C≡C(CH2CH3)。优选的炔基包括具有2-12个碳原子或2-6个碳原子的直链和支链炔基。
烷基、链烯基和炔基可以是取代的。“取代的烷基”是指如上文所定义的烷基中一或多个连接碳或氢的键被连接非氢和非碳的键所取代，例如但不限于卤素原子，例如F、Cl、Br、和I；含氧原子的基团，例如羟基、烷氧基、芳氧基和酯基；含硫原子的基团，例如硫羟基、烷硫基和芳硫基、砜基团、磺酰基和亚砜基团；含氮原子的基团，例如胺、酰胺、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、N-氧化物、酰亚胺和烯胺；含硅原子的基团，例如三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基和三芳基甲硅烷基；含有其它杂原子的各种其它基团。取代的烷基也包括其中一或多个连接碳或氢的键被连接杂原子的更高级别(higher-order)的键(例如双键或三键)所取代的烷基，所述杂原子例如氧代、羰基、羧基和酯基中的氧；例如亚胺、肟、腙和腈中的氮。取代的烷基还包括这样的烷基，即其中一或多个连接碳或氢原子的键被连接芳基、杂芳基、杂环基或环烷基的键所取代。优选的取代的烷基包括其中一或多个连接碳或氢原子的键被一或多个连接氟、氯或溴的键所取代的烷基。其它优选的取代的烷基为三氟甲基以及其它含有三氟甲基的烷基。其它优选的取代的烷基包括其中一或多个连接碳或氢原子的键被连接氧的键所取代的烷基，因此该取代的烷基含有羟基、烷氧基或芳基氧基。其它优选的取代的烷基包括含有下列基团的烷基胺或取代的或未取代的烷基胺、二烷基胺、芳基胺、(烷基)(芳基)胺、二芳基胺、杂环基胺、二杂环基胺、(烷基)(杂环基)胺或(芳基)(杂环基)胺。其它优选的取代的烷基包括其中一或多个连接碳或氢原子的键被连接芳基、杂芳基、杂环基或环烷基的键取代的烷基。取代的烷基的实例为-(CH2)3NH2、-(CH2)3NH(CH3)、-(CH2)3NH(CH3)2、-CH2C(＝CH2)CH2NH2、-CH2C(＝O)CH2NH2、-CH2S(＝O)2CH3、-CH2OCH2NH2、-CO2H。取代的烷基的取代基的实例为-CH3、-C2H5、-CH2OH、-OH、-OCH3、-OC2H5、-OCF3、-OC(＝O)CH3、-OC(＝O)NH2、-OC(＝O)N(CH3)2、-CN、-NO2、-C(＝O)CH3、-CO2H、-CO2CH3、-CONH2、-NH2、-N(CH3)2、-NHSO2CH3、-NHCOCH3、-NHC(＝O)OCH3、-NHSO-2CH3、-SO2CH3、-SO2NH2、卤素。
“取代的链烯基”具有与链烯基相同的定义，如同取代的烷基可以参考未取代的烷基一样。取代的链烯基包括如下定义的链烯基非碳或非氢原子键接碳上，而该碳与另一个碳以双键连接；以及其中一个非碳或非氢原子键接至碳上，而该碳与另一个碳以非双键连接。
“取代的炔基”具有与炔基相同的定义，如同取代的烷基可以参考未取代的烷基一样。取代的炔基包括包括如下定义的炔基非碳或非氢原子键接碳上，而该碳与另一个碳以三键连接；以及其中一个非碳或非氢原子键接至碳上，而该碳与另一个碳以非三键连接。
“烷氧基”是指基团RO-，其中R为烷基。烷氧基的具有代表性的实例包括甲氧基、乙氧基、叔-丁氧基、三氟甲氧基等。
“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟和碘基团。术语“卤代烷基”是指被一或多个卤素原子取代的烷基。术语“卤代烷氧基”是指被一或多个卤素原子取代的烷氧基。
“氨基”是指基团-NH2。术语“烷基氨基”是指基团-NRR′，其中R为烷基并且R′为氢或烷基。术语“芳基氨基”是指基团-NRR′，其中R为芳基并且R′为氢、烷基或芳基。术语“芳烷基氨基”是指基团-NRR′，其中R为芳烷基并且R′为氢、烷基、芳基或芳烷基。
“烷氧基烷基”是指基团-alk1-O-alk2，其中alk1为烷基或链烯基并且alk2为烷基或链烯基。术语“芳氧基烷基”是指基团-烷基O-芳基。术语“芳烷氧基烷基”是指基团-亚烷基-O-芳烷基。
本文中“烷氧基烷基氨基”是指基团-NR-(烷氧基烷基)，其中R通常为氢、芳烷基或烷基。
本文中“氨基羰基”是指基团-C(O)-NH2。“取代的氨基羰基”在本文中是指基团-C(O)-NRR′，其中R为烷基并且R′为氢或烷基。术语“芳基氨基羰基”在本文中是指基团-C(O)-NRR′，其中R为芳基并且R′为氢、烷基或芳基。本文中“芳烷基氨基羰基”是指基团-C(O)-NRR′，其中R为芳烷基并且R′为氢、烷基、芳基或芳烷基。
本文中“氨基磺酰基”是指基团-S(O)2-NH2。“取代的氨基磺酰基”是指基团-S(O)2-NRR’，其中R为烷基并且R′为氢或烷基。术语“芳烷基氨基磺酰基芳基”是指基团-芳基-S(O)2-NH-芳烷基。
“羰基”是指二价基团-C(O)-。
“羰基氧基”通常是指基团-C(O)-O。此类基团包括酯-C(O)-O-R，其中R为烷基、环烷基、芳基或芳烷基。术语“羰基氧基环烷基”在本文中通常是指“羰基氧基碳环烷基”和“羰基氧基杂环烷基”，即其中R分别为碳环烷基或杂环烷基。术语“芳基羰基氧基”是指基团-C(O)-O-芳基，其中芳基为单-或多环碳环芳基或杂环芳基。术语“芳烷基羰基氧基”是指基团-C(O)-O-芳烷基。
“磺酰基”是指基团-SO2-。“烷基磺酰基”是指结构为-SO2R-的取代的磺酰基，其中R为烷基。本发明化合物中采用的烷基磺酰基通常为在其主链结构中含有1-6个碳原子的烷基磺酰基。因此，本发明化合物中采用的典型的烷基磺酰基包括例如甲磺酰基(即其中R为甲基)、乙磺酰基(即其中R为乙基)、丙磺酰基(即其中R为丙基)等。术语“芳基磺酰基”是指基团-SO2-芳基。术语“芳烷基磺酰基”是指基团-SO2-芳烷基。术语“亚磺酰氨基”在本文中是指-SO2NH2。
“羰基氨基”是指二价基团-NH-C(O)-，其中羰基氨基中的酰胺氮上的氢原子可以被烷基、芳基或芳烷基取代。此类基团包括例如氨基甲酸酯(-NH-C(O)-O-R)和酰胺-NH-C(O)-R，其中R为直链或支链烷基、环烷基或芳基或芳烷基。术语“烷基羰基氨基”是指烷基羰基氨基，其中R为在其主链结构中含有1-6个碳原子的烷基。术语“芳基羰基氨基”是指基团-NH-C(O)-R，其中R为芳基。同样，术语“芳烷基羰基氨基”是指羰基氨基，其中R为芳烷基。
“胍基”是指衍生自胍H2N-C(＝NH)-NH2的基团。此类基团包括那些与携有双键的氮原子结合的基团(在胍的“2”位，例如二氨基亚甲基氨基，(H2N)2C＝NH-))，还包括那些与携有单键的氮原子结合的基团(在胍的“1”和/或“3”位，例如H2N-C(＝NH)-NH-))。位于任何氮上的氢原子均可以被适当的取代基取代，例如烷基、芳基或芳烷基。
“脒基”是指基团R-C(＝N)-NR′-(该基团为“N1”氮)和R(NR′)C＝N-(该基团为“N2”氮)，其中R和R′可以是氢、烷基、芳基或芳烷基。
“环烷基”是指单-或多杂环或碳环烷基取代基。具有代表性的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基，该环可以被如上所定义的直链和支链烷基取代。典型的环烷基取代基具有3-8个骨架(即环)原子，其中每一个骨架原子为碳或杂原子。术语“杂环烷基”在本文中是指在环结构中具有1-5个(更通常为1-4个)杂原子的环烷基取代基。本发明化合物所采用的适当的杂原子为氮、氧和硫。具有代表性的杂环烷基包括例如吗啉代、哌嗪基、哌啶基(piperadinyl)等。碳环烷基为其中所有的环原子均为碳的环烷基。当在环烷基取代基中使用时，术语“多环”在本文中是指稠合和非稠合烷基环状结构。
本文中所使用的“取代的杂环”、“杂环基团”、“杂环”或“杂环基”是指任何含有选自氮、氧和硫的杂原子的3-或4-元环或含有1-3个选自氮、氧和硫的杂原子的5-或6-元环；其中所述5-元环含有0-2个双键，所述6-元环含有0-3个双键；其中所述氮和硫原子可以任选被氧化；其中所述氮和硫杂原子可以任选为四价的；并且包括任何双环基团，其中所有上述杂环可以与苯环或其它上述独立定义的5-或6-元杂环稠合。杂环基团的实例包括但不限于含有1-4个氮原子的不饱和的3-至8-元环，例如但不限于吡咯基、二氢吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基)；含有1-4个氮原子的稠合的不饱和的杂环基团，例如但不限于异吲哚、二氢吲哚基、中氮茚基、喹啉基、吲唑基；含有1-2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和的3至8-元环，例如但不限于噁二唑基(例如1，2，4-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基)；含有1-2个氧原子和1-3个氮原子的饱和的3-至8-元环，例如但不限于吗啉基；含有1-2个氧原子和1-3个氮原子的不饱和的稠合杂环基团，例如苯并噁二唑基、苯并噁嗪基(例如2H-1，4-苯并噁嗪基)；含有1-3个硫原子和1-3个氮原子的不饱和的3至8-元环，例如但不限于噻二唑基(例如1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，-噻二唑基)；含有1-2个硫原子和1-3个氮原子的饱和的3至8-元环，例如但不限于噻唑基(thiazolodinyl)；含有1-2个硫原子的饱和的和不饱和的3至8-元环，例如但不限于二氢二噻吩基、二氢dithionyl、四氢噻吩、四氢噻喃基；含有1-2个硫原子和1-3个氮原子的不饱和的稠合杂环，例如但不限于苯并噻二唑基、苯并噻嗪基(例如2H-1，4-苯并噻嗪基)、二氢苯并噻嗪基(例如2H-3，4-二氢苯并噻嗪基)；含有氧的不饱和的3至8-元环，例如但不限于呋喃基；含有1-2个氧原子的不饱和的稠合杂环，例如苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxoyl)(例如1，3-苯并间二氧杂环戊烯基)；含有氧和1-2个硫原子的不饱和的3至8-元环，例如但不限于二氢氧杂噻吩基；含有1-2个氧原子和1-2个硫原子的饱和的3至8-元环，例如1，4-氧硫杂环己烷；含有1-2个硫原子的不饱和的稠合环，例如苯并二噻吩基；含有氧和1-2个氧的不饱和的稠合杂环，例如苯并氧杂噻吩基。优选的杂环包括例如二氮杂

基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、哌啶基、吡嗪基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、氮杂环丁基、N-甲基氮杂环丁基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、噻吩基、三唑基和苯并噻吩基。杂环基还包括那些上面所述的其中环中的一或多个S原子与1或2个氧以双键结合的基团(亚砜和砜)。例如杂环基包括四氢噻吩、四氢噻吩氧化物和四氢噻吩1，1-二氧化物。优选的杂环基包括5或6元。更优选的杂环基包括哌嗪、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、四唑、硫代吗啉、高哌嗪、噁唑烷-2-酮、吡咯烷-2-酮、奎宁环和四氢呋喃。
杂环基团可以是未取代的或被选自下列的各种取代基单取代或双取代羟基、卤素、氧代(C＝O)、烷基亚氨基(RN＝，其中R为烷基或烷氧基)、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基烷基、烷氧基、硫代烷氧基、多烷氧基、烷基、环烷基或卤代烷基。“未取代的杂环基”包括稠合杂环，例如苯并咪唑基，不包括携有与环成员之一结合的其它基团(例如烷基或卤素基团)的杂环基，因为例如2-甲基苯并咪唑基被认为是取代的杂环基。
对有机化学和药物化学领域中技术人员显而易见的是，本公开中的杂环基团可以在各种位置连接。

其中R为H或本文中所述的杂环取代基。
具有代表性的杂环包括例如咪唑基、吡啶基、哌嗪基、氮杂环丁基、噻唑基、呋喃基、三唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、2，3-二氮杂萘基、吲哚基、萘啶基(naphthpyridinyl)、吲唑基和喹嗪基。
“芳基”是指具有3-14个骨架碳原子或杂原子的任选取代的单环和多环芳族基团，包括碳环芳基和杂环芳基。该术语是指但不限于例如苯基、联苯基、蒽基、萘基。碳环芳基为其中在所有的芳族环中的所有的环原子为碳的芳基。术语“杂芳基”在本文中是指其中在芳族环中具有1-4个作为环原子的杂原子而剩余的环原子为碳原子的芳基。
“未取代的芳基”包括含有稠合环的基团，例如萘。它不包括携有与环成员之一结合的其它基团(例如烷基或卤素基团)的芳基，因为芳基例如甲苯基在本文中被认为是下面所述的取代的芳基。优选的未取代的芳基为苯基。然而，未取代的芳基可以与母体化合物的一或多个碳原子、氧原子、氮原子和/或硫原子结合。
“取代的芳基”具有与未取代的芳基相同的意义，如同取代的烷基可以参考未取代的烷基一样。然而，取代的芳基也包括其中芳族碳与上述非碳或非氢原子之一结合的芳基，也包括其中芳基的一或多个芳族碳与本文中所定义的取代的和/或未取代的烷基、链烯基或炔基结合的芳基。这包括其中芳基的两个碳原子与烷基、链烯基或炔基的两个原子结合从而形成稠合环系(例如二氢萘基或四氢萘基)。因此，“取代的芳基”包括但不限于甲苯基和羟基苯基等。
本文中所使用的“取代的杂芳基”是指其中1、2或3个氢原子被下列基团独立取代的本文中所定义的杂芳基Cl、Br、F、I、-OH、-CN、C1-C3-烷基、C1-C6-烷氧基、芳基取代的C1-C6-烷氧基、卤代烷基、硫代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、巯基、硝基、甲醛、羧基、烷氧基羰基和甲酰胺基团。另外，任何一个取代基可以是芳基、杂芳基或杂环烷基。
当与芳基取代基一起使用时，术语“多环芳基”在本文中是指稠合的和非稠合的环结构，其中至少一种环结构为芳族，例如苯并间二氧杂环戊烯(它具有与苯基稠合的杂环结构，即

)、萘基等。本发明化合物中作为取代基的典型的芳基或杂芳基包括苯基、吡啶基、嘧啶基、噻唑基、吲哚基、咪唑基、噁二唑基、四唑基、吡嗪基、三唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、嘌呤基、萘基、苯并噻唑基、苯并吡啶基和苯并咪唑基等。
“芳烷基”或“芳基烷基”是指被芳基取代的烷基。通常，本发明化合物中采用的芳烷基在芳烷基的烷基部分具有1-6个碳原子。本发明化合物采用的适当的芳烷基包括例如苄基、吡啶甲基等。
具有代表性的杂芳基包括例如下面所示的那些基团。对有机化学和药物化学领域中技术人员显而易见的是，本公开中的这些杂芳基可以另外被取代并且可以在各种位置连接。


具有代表性的杂芳基包括例如咪唑基、吡啶基、噻唑基、三唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基和苯并噁唑基。
“联芳基”是指两个芳基互相结合但没有彼此稠合的基团或取代基。典型的联芳基化合物包括例如苯基苯、二苯基二氮烯、4-甲硫基-1-苯基苯、苯氧基苯、(2-苯基乙炔基)苯、二苯基酮、(4-苯基丁-1，3-二炔基)苯、苯基苄基胺、(苯基甲氧基)苯等。优选的任选取代的联芳基包括2-(苯基氨基)-N-[4-(2-苯基乙炔基)-苯基]乙酰胺、1，4-二苯基苯、N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]-2-[苄基-氨基]-乙酰胺、2-氨基-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]丙酰胺、2-氨基-N-[4-(2-苯基-乙炔基)苯基]乙酰胺、2-(环丙基氨基)-N-[4-(2-苯基乙炔基)-苯基]-乙酰胺、2-(乙基氨基)-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、2-[(2-甲基-丙基)氨基]-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、5-苯基-2H-苯并-[d]1，3-间二氧杂环戊烯、2-氯代-1-甲氧基-4-苯基苯、2-[(咪唑基甲基)-氨基]-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、4-苯基-1-苯氧基苯、N-(2-氨基-乙基)-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]甲酰胺、2-{[(4-氟苯基)甲基]-氨基}-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、2-{[(4-甲基苯基)甲基]氨基}-N-[4-(2-苯基-乙炔基)苯基]乙酰胺、4-苯基-1-(三氟甲基)苯、1-丁基-4-苯基-苯、2-(环己基氨基)-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、2-(乙基-甲基-氨基)-N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]乙酰胺、2-(丁基氨基)-N-[4-(2-苯基-乙炔基)-苯基]乙酰胺、N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]-2-(4-吡啶基氨基)-乙酰胺、N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]-2-(奎宁-3-基氨基)乙酰胺、N-[4-(2-苯基-乙炔基)苯基]吡咯烷-2-基甲酰胺、2-氨基-3-甲基-N-[4-(2-苯基-乙炔基)-苯基]丁酰胺、4-(4-苯基丁-1，3-二炔基)苯基胺、2-(二甲基-氨基)-N-[4-(4-苯基丁-1，3-二炔基)苯基]乙酰胺、2-(乙基氨基)-N-[4-(4-苯基丁-1，3-二炔基)-苯基]乙酰胺、4-乙基-1-苯基苯、1-[4-(2-苯基-乙炔基)-苯基]乙-1-酮、N-(1-氨基甲酰基-2-羟基丙基)[4-(4-苯基丁-1，3-二炔基)-苯基]-甲酰胺、N-[4-(2-苯基乙炔基)苯基]丙酰胺、4-甲氧基-苯基苯基酮、苯基-N-苯甲酰胺、(叔-丁氧基)-N-[(4-苯基苯基)-甲基]-甲酰胺、2-(3-苯基-苯氧基)乙烷异羟肟酸、3-苯基苯基丙酸酯、1-(4-乙氧基苯基)-4-甲氧基苯和[4-(2-苯基乙炔基)苯基]吡咯。
“杂芳基芳基”是指芳基之一为杂芳基的联芳基。典型的杂芳基芳基包括例如2-苯基吡啶、苯基吡咯、3-(2-苯基乙炔基)吡啶、苯基吡唑、5-(2-苯基-乙炔基)-1，3-二氢嘧啶-2，4-二酮、4-苯基-1，2，3-噻二唑、2-(2-苯基乙炔基)吡嗪、2-苯基噻吩、苯基咪唑、3-(2-哌嗪基-苯基)-呋喃、3-(2，4-二氯代苯基)-4-甲基吡咯等。优选的任选取代的杂芳基芳基包括5-(2-苯基乙炔基)嘧啶-2-基胺、1-甲氧基-4-(2-噻吩基)苯、1-甲氧基-3-(2-噻吩基)苯、5-甲基-2-苯基-吡啶、5-甲基-3-苯基异噁唑、2-[3-(三氟甲基)苯基]呋喃、3-氟-5-(2-呋喃基)-2-甲氧基-1-丙-2-烯基苯、(羟基亚氨基)(5-苯基(2-噻吩基))-甲烷、5-[(4-甲基哌嗪基)甲基]-2-苯基噻吩、2-(4-乙基苯基)-噻吩、4-甲基-硫代-1-(2-噻吩基)苯、2-(3-硝基苯基)噻吩、(叔-丁氧基)-N-[(5-苯基-(3-吡啶基))甲基]甲酰胺、羟基-N-[(5-苯基(3-吡啶基))甲基]-酰胺、2-(苯基-甲硫基)吡啶和苄基咪唑。
“杂芳基杂芳基”是指其中两个芳基均为杂芳基的联芳基。典型的杂芳基杂芳基包括例如3-吡啶基咪唑、2-咪唑基吡嗪等。优选的任选取代的杂芳基杂芳基包括2-(4-哌嗪基-3-吡啶基)呋喃、二乙基-(3-吡嗪-2-基(4-吡啶基))胺和二甲基{2-[2-(5-甲基吡嗪-2-基)乙炔基](4-吡啶基)}胺。
“任选取代的”或“取代的”是指氢被一或多个单价或二价基团取代。适当的取代基团包括例如羟基、硝基、氨基、亚氨基、氰基、卤素、硫代、磺酰基、硫代酰氨基(thioamido)、脒基、亚胺基(imidino)、氧代、氨肟基(oxamidino)、甲草脒基(methoxamidino)、亚胺基、胍基、亚磺酰氨基、羧基、甲酰基、烷基、取代的烷基、卤代烷基、烷基氨基、卤代烷基氨基、烷氧基、卤代烷氧基、烷氧基-烷基、烷基羰基、氨基羰基、芳基羰基、芳烷基羰基、杂芳基羰基、杂芳烷基-羰基、烷硫基、氨基烷基、氰基烷基、芳基、苄基、吡啶基、吡唑基、吡咯、噻吩、咪唑基等。
取代基基团自身也可以是取代的。在取代基基团上取代的基团可以是羧基、卤素、氨基、氰基、羟基、烷基、烷氧基、氨基羰基、-SR、硫代酰氨基、-SO3H、-SO2R或环烷基，其中R通常为氢、羟基或烷基。
当取代的取代基含有直链基团时，该取代可以存在于链中(例如2-羟基丙基、2-氨基丁基等)或者存在于链的末端(例如2-羟基乙基、3-氰基丙基等)。取代的取代基可以是共价键结合的碳原子或杂原子的直链、支链或环状排列。
具有代表性的取代的氨基羰基包括例如那些下面所示的基团。对有机化学和药物化学领域中技术人员显而易见的是，本公开中的这些基团可以另外被杂环基和杂芳基取代。优选的氨基羰基包括N-(2-氰基乙基)甲酰胺、N-(3-甲氧基丙基)甲酰胺、N-环丙基甲酰胺、N-(2-羟基-异丙基)甲酰胺、2-羰基氨基-3-羟基丙酸甲酯、N-(2-羟基丙基)甲酰胺、N-(2-羟基-异丙基)甲酰胺、N-[2-羟基-1-(羟基甲基)乙基]甲酰胺、N-(2-羰基氨基乙基)乙酰胺、N-(2-(2-吡啶基)乙基)甲酰胺、N-(2-吡啶基甲基)甲酰胺、N-(氧杂环戊烷-2-基甲基)甲酰胺、N-(4-羟基吡咯烷-2-基)甲酰胺、N-[2-(2-羟基乙氧基)乙基]-甲酰胺、N-(4-羟基环己基)甲酰胺、N-[2-(2-氧代-4-咪唑啉基)乙基]甲酰胺、N-(羰基氨基甲基)乙酰胺、N-(3-吡咯烷基丙基)甲酰胺、N-[1-(羰基氨基甲基)吡咯烷-3-基]乙酰胺、N-(2-吗啉-4-基乙基)甲酰胺、N-[3-(2-氧代吡咯烷基)丙基]甲酰胺、4-甲基-2-氧代哌嗪甲醛、N-(2-羟基-3-吡咯烷基丙基)甲酰胺、N-(2-羟基-3-吗啉-4-基丙基)甲酰胺、N-{2-[(5-氰基-2-吡啶基)氨基]乙基}甲酰胺、3-(二甲基氨基)吡咯烷甲醛、N-[(5-甲基吡嗪-2-基)甲基]甲酰胺、2，2，2-三氟-N-(1-甲酰基吡咯烷-3-基)乙酰胺、


和
具有代表性的取代的烷氧基羰基包括例如下面所示的那些基团。对有机化学和药物化学领域中技术人员显而易见的是，本公开中的这些烷氧基羰基可以另外被取代。
具有代表性的取代的烷氧基羰基包括例如下面所示的那些基团。对有机化学和药物化学领域中技术人员显而易见的是，本公开中的这些烷氧基羰基可以另外被取代。

与羟基、胺基和巯基有关的术语“被保护的”是指这些官能团的形式，这些官能团采用本领域技术人员已知的保护基团进行保护以避免不需要的反应的发生，所述保护基团如例如下面文献所示Protective Groups inOrganic Synthesis(有机合成中的保护基团)，Greene，T.W.；Wuts，P.G.M.，John Wiley & Sons，New York，NY，(第三版，1999)，它们可以采用本文中所述方法引入或除去。保护的羟基的实例包括但不限于甲硅烷基醚，例如通过羟基与下列试剂反应而获得的例如但不限于叔-丁基二甲基-氯代硅烷、三甲基氯代硅烷、三异丙基氯代硅烷、三乙基氯代硅烷；取代的甲醚和乙醚，例如但不限于甲氧基甲醚、甲硫基甲醚、苄氧基甲醚、叔-丁氧基甲醚、2-甲氧基乙氧基甲醚、四氢吡喃基醚、1-乙氧基乙醚、烯丙基醚、苄基醚；酯类，例如但不限于苯甲酰基甲酸酯、甲酸酯、乙酸酯、三氯代乙酸酯和三氟乙酸酯。保护的胺基的实例包括但不限于酰胺，例如甲酰胺、乙酰胺、三氟乙酰胺和苯甲酰胺；酰亚胺，例如邻苯二甲酰亚胺和二硫代琥珀酰亚胺等。保护的巯基的实例包括但不限于硫醚，例如S-苄基硫醚和S-4-吡啶甲基硫醚；取代的S-甲基衍生物，例如半硫代、二硫代和氨基硫代缩醛等。
“羧基保护基团”是指采用常用的能够阻断或保护羧酸官能团的羧酸保护酯基团之一酯化的羰基，从而可以在化合物的其它官能团位置上进行反应。另外，羧基保护基团可以连接到固体载体上，同时该化合物也保持连接到作为羧酸酯的固体载体上直到通过水解方法被裂解释放出相应的游离酸。具有代表性的羧基保护基团包括例如烷基酯、仲酰胺等。
某些本发明化合物含有不对称取代的碳原子。这种不对称取代的碳原子可以产生含有不对称取代的碳原子的立体异构体混合物或单一立体异构体的本发明化合物。因此，本发明化合物也包括本发明化合物的外消旋混合物、非对映异构体混合物以及单一非对映异构体。本文中所使用的术语“S”和“R”构型由IUPAC 1974＂

E，

，＂Pure Appl.Chem.4513-30，1976所定义。术语α和β用于说明环状化合物的环位置。参考平面的α-面是指位于较低数字编号位置的优选取代基所在的那一面。位于参考平面相反面的那些取代基被指定为β。需要注意该用法不同于环状立体母核，其中“α”是指“平面下面”并且表示绝对构型。本文中所使用的术语α和β构型根据“Chemical Abstracts Index Guide＂附录IV，段落203，1987确定。
本文中所使用的术语“药学上可接受的盐”是指本发明嘧啶化合物的无毒酸或碱土金属盐。这些盐可以在嘧啶化合物的最终分离和纯化过程中在位制备，或者通过使得碱或酸官能团分别与适当的有机或无机酸或碱反应而制备。具有代表性的盐包括但不限于下列乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷硫酸盐、乙磺酸盐、葡糖庚酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘-磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对-甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同样，碱性含氮基团可以采用例如烷基卤化物试剂季铵盐化，所述试剂例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸酯，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯；长链卤化物，例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂酰基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物等。从而获得水溶性或油溶性或可分散产物。
可以用于形成药学上可接受的酸加成盐的酸的实例包括例如无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸和磷酸；有机酸，例如甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、酒石酸、草酸、马来酸、甲烷磺酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸和对-甲苯磺酸、柠檬酸和酸性氨基酸，例如天冬氨酸和谷氨酸。
碱性加成盐可以在嘧啶化合物最终的分离和纯化过程中在位制备，或者通过使得羧酸基团与适当的碱反应制备，所述碱例如药学上可接受的金属离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，或者采用氨，或者采用有机伯、仲或叔胺。药学上可接受的盐包括但不限于碱金属和碱土金属阳离子，例如钠、锂、钾、钙、镁、铝盐等以及无毒铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、三乙胺、乙基胺等。用于形成碱加成盐的其它具有代表性的有机胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、吡啶、甲基吡啶、三乙醇胺等，以及碱性氨基酸，例如精氨酸、赖氨酸和鸟氨酸。
本文中所使用的术语“药学上可接受的酯”是指在体内可以水解的酯，包括那些在人体内容易分解以释放出母体化合物或其盐的酯。适当的酯基团包括例如那些衍生自药学上可接受的脂肪酸(特别是链烷羧酸、链烯酸、环烷酸和烷二酸)的基团，其中每一个烷基或烯基最好不多于6个碳原子。具有代表性的特别的酯的实例包括但不限于甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和乙基琥珀酸酯。
本文中所使用的术语“药学上可接受的前药”是指本发明化合物的前药，在合理的医学判断范围内，所述前药适用于与人类以及低级动物的组织接触并且不会产生过度的毒性、刺激性、过敏反应等，具有合理的效果/风险比并且对于预期的用途而言是有效的，如果存在的话，还包括本发明化合物的两性离子形式。术语“前药”是指在体内能够迅速转化得到上式母体化合物的化合物，例如通过在血液中水解而转化。详细的讨论可以参见Higuchi.和V.Stella，“作为新传递系统的前药(Pro-drugs as Novel DeliverySystems)”，A.C.S.Symposium Series 14和“药物设计中的生物可逆性载体(Bioreversible Carriers in Drug Design)”，Edward B.Roche(ed.)，AmericanPharmaceutical Association，Pergamon Press，1987，这两篇文章在此引入作为参考。
本发明上下文中的“治疗”是指减轻与疾病或病症相关的症状，或者使这些症状的发展或恶化停止，或者是指预防疾病或病症。例如，在上下文中对需要PI3K抑制剂的患者的治疗中，成功的治疗包括使得供给肿瘤或疾病组织的毛细血管的增生减少、减轻与癌症生长或肿瘤有关的症状、减少毛细血管或疾病组织的增生、中止毛细血管增生或中止疾病(例如癌症)的进程或中止癌症细胞的生长。所述治疗也可以包括给予本发明的药物制剂以及其它治疗。例如，本发明化合物和药物制剂可以在外科手术和/或放疗之前、期间或之后给药。本发明化合物也可以与其它抗癌药物一起联合给药，所述抗癌药物包括那些在反义治疗和基因治疗中使用的药物。
本文中所使用的“限定”、“治疗”等可以交互使用，并且在本文中也包括预防和预防治疗和姑息疗法或提供预防或姑息疗法的行动的交互使用。
术语“PI3K介导的疾病”是指通过抑制PI3K可以获得有益治疗的疾病。
术语“细胞增生性疾病”是指包括例如癌症、肿瘤、增生、再狭窄、心脏肥大、免疫疾病和炎症在内的疾病。
术语“癌症”是指通过抑制PI3K可以获得有益治疗的癌症疾病，包括例如肺癌和支气管癌、前列腺癌、乳癌、胰腺癌、结肠和直肠癌、甲状腺癌、肝癌和肝内胆管癌、肝细胞癌、胃癌、神经胶质瘤/成胶质细胞瘤、子宫内膜癌、黑素瘤、肾癌和肾盂癌、膀胱癌、宫体癌、子宫颈癌、卵巢癌、多发性骨髓瘤、食道癌、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、淋巴细胞白血病、骨髓白血病、脑癌、口腔癌和咽癌、喉癌、小肠癌、非霍奇金淋巴瘤、黑素瘤和大肠绒毛腺瘤(villous colon adenoma)。
如本文中所述，本发明的PI3K抑制剂可以以酸加成盐的形式给药。所述盐可以通过使化合物(如果位碱性时)与适当的酸(例如上述酸)反应而方便地形成。所述盐可以在适度的温度下以较高的收率快速形成，通常在合成的最后步骤采用适当的酸性洗涤液分离化合物即可制备。将盐形成酸溶于适当的有机溶剂或含水有机溶剂中，例如烷醇、酮或酯。另外，如果需要游离碱形成的本发明化合物，则可以根据常规方法在碱性最终洗涤步骤中将其分离。制备盐酸盐的优选的工艺是将游离碱溶于适当的溶剂中并将该溶液在分子筛上充分干燥，然后向其吹入氯化氢气体。也可以理解，有可能得到无定形的PI3K抑制剂。
本发明也提供同位素标记的PI3K抑制剂，其结构与上述公开相同，但是其一或多个原子被具有不同于天然中发现的原子质量或原子质量数的原子所代替。可以引入本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，分别例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。包含前述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物、其前药以及所述化合物和所述前药的药学上可接受的盐均包含在本发明的范围内。某些同位素标记的本发明化合物，例如那些引入放射性同位素例如3H和14C的化合物，可以用于药物和/或底物组织分布分析。含有氚(即3H)和碳-14(即14C)的同位素特别优选用于使其制备和检测更为容易。另外，由于较好的代谢稳定性，采用较重同位素(例如氘，即2H)的取代可以提供某些治疗优势，例如增加体内半衰期和降低剂量，并且因此可以优选用于某些情况。本发明的同位素标记的化合物及其前药通常可以采用已知的或参考的方法并通过使用容易获得的同位素标记试剂代替非同位素标记试剂进行制备。
本发明化合物可以在体外或体内用于抑制癌细胞生长。所述化合物可以单独使用或者与药学上可接受的载体或赋形剂一起使用。本发明的药用组合物含有治疗有效量的与一或多种药学上可接受的载体一起配制的本文所述的磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物。本文中所述的术语“药学上可接受的载体”是指无毒惰性固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、包囊材料或任何种类的制剂助剂。可以用作药学上可接受的载体的某些实例为糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；黄芪胶粉末；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二元醇类，例如丙二醇；酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；藻酸；无热源水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇和磷酸盐缓冲液以及其它无毒可配伍使用的润滑剂，例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂，根据配方制订者的判断，在组合物中也可以存在防腐剂和抗氧剂。其它适当的药学上可接受的赋形剂描述于＂Remington′s Pharmaceutical Sciences，＂Mack Pub.Co.，New Jersey，1991，在此引入作为参考。
本发明化合物以单位剂量制剂通过下列途径给药于人类和其它动物，口服、胃肠外、舌下、雾化或吸入喷雾剂、直肠、脑池内、阴道内、腹膜内、口内或局部，所述制剂根据需要含有常规无毒的药学上可接受的载体、辅助剂和载体。局部给药也可以包括透皮给药，例如透皮贴剂或离子电渗装置。本文所使用的术语胃肠外包括皮下注射、静脉内注射、肌肉注射、胸骨内注射或输液技术。
制剂的方法在本领域中是已知的并公开于例如RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy(药学科学与实践)，Mack PublishingCompany，Easton，Pa.，第19版(1995)。本发明中使用的药用组合物可以为无菌、无热原的液体溶液或悬浮液、包衣胶囊、栓剂、冻干粉末、透皮贴剂或其它本领域已知的剂型。
注射制剂例如无菌注射水溶液或油混悬液可以采用适当的分散剂或润湿剂和混悬剂根据已知的工艺制备。无菌注射制剂也可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液、混悬液或乳浊液，例如，1，3-丙烷二醇或1，3-丁烷二醇中的溶液。在可接受的赋形剂和溶剂中，可以采用水、林格氏溶液(U.S.P.)和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发油类通常也可以用作溶剂或悬浮介质。为此，任何品牌的不挥发油类均可采用，包括合成的单-或二-甘油酯。另外，脂肪酸例如油酸也可以用于制备注射液。注射制剂可以是无菌的，例如通过截留细菌的滤器过滤，或者在无菌固体组合物中加入灭菌剂，在使用前将其溶解或分散在无菌水中或其它无菌注射溶媒中。
为了延长药物的作用时间，通常需要使得皮下或肌肉注射的药物吸收减慢。可以通过采用水溶性较差的结晶或无定形物质的液体混悬液来达到上述目的。药物的吸收速度取决于其溶出速度，而溶出速度又取决于结晶大小和结晶形状。或者，通过将药物溶解或悬浮于油载体中也可以延缓胃肠外给药的药物剂型的吸收。通过在生物可降解聚合物(例如聚交酯-聚乙交酯(polylactide-polyglycolide))中形成药物的微囊基质可以制备注射用储库剂型。药物的释放速度可以被控制，这取决于药物穿透聚合物的速度和采用的特定聚合物的性质。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储库注射制剂也可以通过将药物包封在脂质体或微乳中制备，它们与人体组织是可相容的。
用于直肠或阴道给药的组合物优选栓剂，通过将本发明化合物与适当的无刺激性的赋形剂或载体(例如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡)混合可以制备所述栓剂，所述载体在室温下是固体的但在人体温度下为液体，所以可以在直肠或阴道内熔融并释放出活性化合物。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物与至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或下列成分混合a)填充剂或扩充剂，例如淀粉类、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)润湿剂，例如甘油，d)崩解剂，例如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂，例如石蜡，f)吸收促进剂，例如季铵化合物，g)润湿剂例如，acetyl alcohol和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，例如白陶土和膨润土，和i)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型中也可以含有缓冲剂。
采用此类赋形剂如乳糖或奶糖(milk sugar)以及高分子量的聚乙二醇等，也可以将相似类型的固体组合物作为填充物填充到软和硬明胶胶囊中。
片剂、糖衣剂、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以采用包衣的方法制备为含有包衣和囊壳，例如药物制剂领域中已知的肠溶包衣材料和其它包衣材料。它们可以任选含有遮光剂，也可以是能够只在(或者优选在)肠道的某些部位释放(以延迟的方式释放)活性成分的组合物。可以采用的包埋组合物的物质的实例包括聚合物和蜡类。
活性化合物也可以与一或多种上述赋形剂形成微囊化形式。片剂、糖衣剂、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以采用包衣的方法制备为含有包衣和囊壳，例如药物制剂领域中已知的肠溶包衣材料、控释包衣材料和其它包衣材料。在此类固体剂型中，活性化合物可以与至少一种惰性稀释剂例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。在常规操作中，此类剂型也可以含有除惰性稀释剂外的其它物质，例如，压片润滑剂和其它压片辅助剂，例如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，该剂型也可以含有缓冲剂。它们可以任选含有遮光剂，也可以是能够只在(或者优选在)肠道的某些部位释放(以延迟的方式释放)活性成分的组合物。可以采用的包埋组合物的物质的实例包括聚合物和蜡类。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆和酏剂。除了活性化合物外，所述液体剂型可以含有本领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、EtOAc、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是棉籽油、落花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯及其混合物。除惰性赋形剂外，口服组合物也可以含有辅助剂，例如润湿剂、乳化剂和混悬剂、甜味剂、矫味剂和香料。
本发明化合物局部或透皮给药的剂型包括软膏、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶剂、散剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂。活性成分在无菌条件下与药学上可接受的载体混合，如果需要还包括任何防腐剂或缓冲剂。眼用制剂、滴耳剂等也包含在本发明的范围内。
除本发明活性化合物外，软膏、糊剂、霜剂和凝胶剂可以含有赋形剂，例如动物和植物脂肪、油类、蜡类、石蜡类、淀粉类、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇类、硅酮类、膨润土类、硅酸类、滑石粉和氧化锌或其混合物。
本发明组合物也可以制成供给药用的液体气雾剂或吸入干粉。液体气雾剂可以通过喷雾形成大小适合于传递到呼吸道末端和细支气管的颗粒。
本发明的雾化制剂可以采用气雾剂形成装置传递，例如喷嘴、振动多孔板或超声雾化器，优选使得形成的气溶胶颗粒的平均粒径绝大部分在1-5μm之间。另外，该制剂优选具有平衡的摩尔渗透压离子强度和氯化物浓度以及最小的可雾化体积，它能够将有效剂量的本发明化合物传递到作用部位。另外，优选所述雾化制剂不会对呼吸道的功能造成负面损害并且不会产生不需要的副作用。
适合于本发明气雾剂给药的雾化装置包括例如喷嘴、振动多孔板、超声雾化器和具有可激发的(energized)干粉吸入器，它们能够将本发明制剂雾化为绝大多数粒径范围在1-5μm之间的气溶胶颗粒。在本申请中绝大多数是指至少70％但优选多于90％的产生的气溶胶颗粒的粒径在1-5μm的范围内。喷雾器通过空气压力而将液体溶液分裂为气雾剂微小液滴。振动多孔板雾化器通过快速振动的多孔板产生的声波真空而将溶剂微小液滴挤压通过多孔板。超声雾化器通过压电晶体将液体剪切为微小的气雾剂液滴。可以采用各种适当的装置，包括，例如，AERONEB和AERODOSE振动多孔板雾化器(AeroGen，Inc.，Sunnyvale，California)、SIDESTREAM雾化器(Medic-Aid Ltd.，West Sussex，England)、PARI LC和PARI LCSTAR喷雾剂(Pari Respiratory Equipment，Inc.，Richmond，Virginia)和AEROSONIC(DeVilbiss Medizinische Produkte(Deutschland)GmbH，Heiden，德国)以及ULTRAAIRE(Omron Healthcare，Inc.，Vernon Hills，Illinois)超声雾化器。
本发明化合物也可以制成局部使用的散剂和喷雾剂，除了本发明化合物外，它们可以含有赋形剂，例如乳糖、滑石粉、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂可以另外含有常规的抛射剂，例如氯氟烃类。
透皮贴剂具有更好的优点，它能够将化合物控释传递到机体。此类剂型可以通过将化合物溶解或分散在适当的介质中制备。吸收促进剂也可以用于增加化合物通过皮肤的通量。通过控释膜或者通过将化合物分散在聚合物基质或凝胶中可以控制速度。本发明化合物也可以以脂质体的形式给药。如本领域所已知，脂质体通常衍生自磷脂或其它脂类物质。脂质体是由分散在水介质中的单或多层水合的液体晶体形成的。可以采用能够形成脂质体的任何无毒、生理学上可接受的以及可代谢的脂类。除了本发明化合物外，脂质体形式的本发明组合物还可以含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类为磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，天然和合成的均可。制备脂质体的方法在本领域中是已知的。参见，例如，Prescott(ed.)，＂Methodsin Cell Biology(细胞生物学方法)，＂第XIV卷，Academic Press(学术出版社)，New York(纽约)，1976，p.33等。
本发明化合物的有效量通常包括任何足以可检测地抑制PI3K活性的量，它可以通过本文中所述的任何分析方法进行测定，或者通过本领域普通技术人员已知的其它PI3K活性分析方法进行测定，或者通过测定癌症症状的抑制或缓解而测定。可以与载体物质结合而制备单位制剂的活性成分的量取决于待治疗的宿主和特定的给药模式。然而，可以理解，任何具体患者的特定的剂量水平取决于多种因素，包括使用的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速度、联合用药以及治疗中的具体疾病的严重程度。给定情况下的治疗有效量可以通过常规实验容易地确定，普通临床医师可以根据其技能进行判断。
根据本发明的治疗方法，通过给予患者治疗有效量的本发明化合物可以在患者(例如人类或低级哺乳动物)中减少或预防肿瘤生长，需要给予一定的量并且给予一定的时间以获得满意的效果。本发明化合物的“治疗有效量”是指该化合物以适合于任何医学治疗的合理的效益/风险比治疗肿瘤生长的足够的量。然而，可以理解，本发明化合物和组合物的总日剂量由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任何具体患者的特定的治疗有效水平取决于多种因素，包括待治疗的疾病和该疾病的严重程度；使用的特定化合物的活性；使用的特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康情况、性别和饮食习惯；使用的特定化合物的给药时间、给药途径和排泄速度；治疗的周期；与使用的特定化合物联合或共同给药的药物；以及在医学领域中众所周知的其他因素。
为实施本发明，治疗有效量通常为以单剂量或多剂量给予宿主总日剂量，例如，总日剂量的范围为0.001-1000mg/kg体重，更优选为每日1.0-30mg/kg体重。单位剂量组合物可以含有该剂量的亚剂量，它构成日剂量。通常，本发明的治疗方案包括每天给予需要此类治疗的患者约10mg至约2000mg的本发明化合物，可以以单一剂量给予或者以多剂量给予。
在本发明的另一方面，提供了包括一或多种本发明化合物的试剂盒。具有代表性的试剂盒包括本发明的PI3K抑制剂化合物(例如，式(I)-(III)化合物)和包装说明书或其它标签，包括通过给予PI3-K抑制量的化合物治疗细胞增生性疾病的说明。
本文中所使用的术语“试剂盒”包括用于盛放药用组合物的容器，也可以包括多个容器，例如多个小瓶或多个铝萡包装。所述容器可以为任何本领域中已知的形状或形式，由药学上可接受的物质制成，例如纸盒或纸板盒、玻璃瓶或塑料瓶或罐，可重新封口的袋子(例如，可盛放“再填充(refill)”片剂，将其置于不同的包装容器中)，或者含有多个剂量的泡罩包装，根据治疗时间将其自包装中压出。采用的容器取决于有关的精确剂型，例如传统的纸板盒通常用于盛放液体悬浮液。在单一包装中可以合理地采用多种容器以出售单一剂型。例如，片剂可以包装在瓶子中，而瓶子又包装在盒子中。
此类试剂盒的实例也称为泡罩包装。泡罩包装在包装工业中是众所周知的，广泛地应用于药物单位剂型(片剂、胶囊等)的包装。泡罩包装通常由相对硬的其上覆盖有优选透明塑料材料的箔的材料薄板组成。在包装过程中，在塑料箔中形成凹槽。该凹槽大小和形状与待包装的单个片剂或胶囊相同，或者其大小和形状可以容纳多个待包装的片剂和/或胶囊。然后将片剂或胶囊置于该凹槽中，将相对较硬的材料薄板密封到塑料箔相对凹槽形成的一面。结果，片剂或胶囊可以根据需要一个一个密封或者共同密封在塑料箔和薄板之间的凹槽中。优选薄板的硬度应使得通过人工施压在薄板的凹槽处形成一个开口，由此片剂或胶囊即可自泡罩包装中取出。然后片剂或胶囊可以通过所述开口处取出。
有可能需要提供书写的记忆辅助物，该记忆辅助物包含提供给医师、药剂师或其它健康管理提供者或者患者的信息和/或使用说明书，例如片剂或胶囊旁的数字编码形式，该数字编码相应于在指定的片剂或胶囊服用方案中的日期，或者包含相同类型信息的卡片。此类记忆辅助物的另一个实例为印制在卡片上的日程表，例如，“第一周，星期一，星期二”，“第二周，星期一，星期二”等。记忆辅助物的其它变通也是显而易见的。“日剂量”可以是在指定日内服用的单一的片剂或胶囊或多个片剂或胶囊。当试剂盒含有不同的组合物时，试剂盒中的一或多种组合物的日剂量可以由一个片剂或胶囊组成，而试剂盒中另外的一或多种组合物的日剂量可以由多个片剂或胶囊组成。
试剂盒的另一个特殊的实施方案为能够发放日剂量的分配器，根据它们预计使用的顺序每次发放一种。优选该分配器装配有记忆辅助物，以便于使得治疗方案顺应性更好。此类记忆辅助物的实例为机械计数器，它可以显示已经发放的日剂量的数目编号。此类记忆辅助物的另一个实例为配有液晶面板的电池动力微芯片记忆器，或者配有可听到声音的信号提醒器，例如，可以读出已经服用的上次日剂量的日期和/或提醒下次剂量何时服用。
除了PI3K抑制剂外，本发明试剂盒还可以包括一或多种其它药物活性化合物。优选所述其它化合物为其它PI3K抑制剂或用于治疗癌症、血管生成或肿瘤生长的其它化合物。其它化合物可以采用与PI3K抑制剂相同的剂型或不同的剂型给药。同样，其它化合物可以与PI3K抑制剂在相同的时间或不同的时间给药。
本发明可以参考下列实施例得到更好地理解，所述实施例只是用于说明而非限定本发明。
实施例 参考下列实施例，采用本文中所述方法或本领域中已知的其它方法合成本发明化合物。
化合物和/或中间体通过高效液相色谱(HPLC)采用配备2695Separation Module的Waters Millenium色谱系统(Milford，MA)定性。分析柱为Alltima C-18反相柱，4.6×50mm，流速2.5mL/min，购自Alltech(Deerfield，IL)。采用梯度洗脱，通常自5％乙腈/95％水开始，40分钟内逐渐梯度至100％乙腈。所有的溶剂含有0.1％三氟乙酸(TFA)。通过紫外(UV)吸收于220或254nm检测化合物。HPLC溶剂购自Burdickand Jackson(Muskegan，MI)，或购自Fisher Scientific(Pittsburgh，PA)。在某些情况下，采用玻璃或塑料作衬的硅胶板通过薄层层析(TLC)测定纯度，例如，Baker-Flex Silica Gel 1B2-F软板。在紫外光下可以容易地目测薄层层析的结果，或者通过采用已知的碘蒸发及其它各种染色技术测定。
质谱分析在两种LCMS设备之一中进行Waters System(Alliance HTHPLC和Micromass ZQ质谱仪；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统含有0.05％TFA的5-95％(或35-95％，或65-95％或95-95％)乙腈水溶液；流速0.8mL/min；分子量范围200-1500；锥孔电压20V；柱温40℃)或者Hewlett Packard System(Series 1100 HPLC；柱EclipseXDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统含有0.05％TFA的1-95％乙腈水溶液；流速0.8mL/min；分子量范围150-850；锥孔电压50V；柱温30℃)。所有的质量均以质子化的母体离子的质量报告。
在Hewlett Packard设备(HP6890系列气相色谱，配备Mass SelectiveDetector(质量选择性检测器)5973；注射体积1μL；初始柱温50℃；最终柱温250℃；斜坡时间(ramp time)20分钟；气体流速1mL/min；柱5％苯甲基硅氧烷，Model No.HP 190915-443，规格30.0m×25m×0.25m)上进行GCMS分析。
采用Varian 300MHz NMR(Palo Alto，CA)在某些化合物上进行核磁共振(NMR)分析。光谱基准(spectral reference)为TMS或该溶剂的已知的化学位移。某些化合物样品在升高的温度下(例如75℃)进行实验以提高样品的溶解度。
某些本发明化合物的纯度通过元素分析(Desert Analytics，Tucson，AZ)进行测定。
在Laboratory Devices Mel-Temp仪器(Holliston，MA)上测定熔点。
制备性分离采用Flash40色谱系统和KP-Sil，60A(Biotage，Charlottesville，VA)进行，或者通过快速柱色谱采用硅胶(230-400目)填料进行，或者通过HPLC采用Waters 2767Sample Manager、C-18反相柱30×50mm、流速75mL/min进行。Flash 40 Biotage系统和快速柱色谱采用的典型溶剂为二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、丙酮、氨水(或氢氧化铵)和三乙胺。反相HPLC采用的典型溶剂为含有0.1％三氟乙酸的各种浓度的乙腈水溶液。
可以理解的是，本发明的有机化合物可能具有互变异构现象。因为本说明书中的化学结构只代表可能的互变异构形式中的一种，应该理解本发明包含所描绘的结构的任何互变异构形式。
应该理解，本发明并不限于本文中给出的用于说明的实施方案，而是也包括上述公开范围内的所有其他形式。
缩写 ACN 乙腈 BINAP 2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘 DIEA 二异丙基乙胺 DME 1，2-二甲氧基乙烷 DMF N，N-二甲基甲酰胺 DPPF 1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 MCPBA 间-氯过苯甲酸 NBS N-溴代琥珀酰亚胺 NMP N-甲基-2-吡咯烷酮 RT室温 THF 四氢呋喃 合成PI3K抑制剂化合物的通用方法 提供了制备式I和/或II化合物的方法。该方法包括在钯催化剂存在下，使得4-卤代-2-吗啉代嘧啶与含有反应性硼酸酯(boronic ester)取代基的取代的吡啶基或嘧啶基反应。在一个实施方案中，所述含有反应性硼酸酯取代基的取代的吡啶基或嘧啶基含有位于硼酸酯对位的-NH2-基团。在另一个实施方案中，所述含有反应性硼酸酯取代基的取代的吡啶基或嘧啶基含有位于硼酸酯对位的-NH2-基团和位于硼酸酯邻位的另一个非氢取代基。在某些实施方案中，所述非氢取代基为-CF3、-CN、-NH2、卤素或取代的或未取代的C1-3烷基。
在另一个实施方案中，所述4-卤代-2-吗啉代嘧啶基团为4-卤代-6-杂环基-2-吗啉代嘧啶基团。在另一个实施方案中，所述4-卤代-2-吗啉代嘧啶基团为4-卤代-6-杂环基氧基-2-吗啉代嘧啶基团。在另一个实施方案中，所述4-卤代-2-吗啉代嘧啶基团为4-卤代-6-杂芳基氨基-2-吗啉代嘧啶基团。在另一个实施方案中，所述4-卤代-2-吗啉代嘧啶基团为4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶基团。
在另一个实施方案中，所述吡啶基硼酸酯为4-(三氟甲基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺。在另一个实施方案中，所述钯催化剂为Pd(dppf)Cl2二氯甲烷加合物。
在另一个实施方案中，4-卤代-6-杂环基-2-吗啉代嘧啶基团通过使得杂环基基团与4，6-二卤代-2-吗啉代嘧啶基团反应而制备。在另一个实施方案中，4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶通过使得4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶与吗啉反应而制备。在另一个实施方案中，4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶基团通过使得2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇与POCl3反应而制备。在另一个实施方案中，2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇通过在碱(例如乙醇钠)存在下使得吗啉-4-甲脒与丙二酸二乙酯反应而制备。
在另一个实施方案中，含有反应性硼酸酯取代基的取代的吡啶基或嘧啶基通过使得含有溴取代基的取代的吡啶基或嘧啶基基团与二硼酸酯(例如4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷)反应而制备。在另一个实施方案中，含有溴取代基的取代的吡啶基或嘧啶通过使得取代的吡啶基或嘧啶基与N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)反应而制备。
本发明的另一个实施方案提供了制备4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶的方法，该方法包括在适当的溶剂中使得吗啉与2，4，6-三氯代嘧啶反应。在更特殊的实施方案中，所述溶剂为极性非质子溶剂。更特别的是溶剂为THF。在另一个更特殊的实施方案中，将4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶在至少10分钟或至少20分钟或30分钟的时间内加至含有吗啉的溶液中。或者，将吗啉加至含有4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶的溶液中。更特别的是，将所述溶液冷却至低于20℃或低于10℃或低于5℃或低于0℃。更特别的是，在4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶加入期间或加入之后，将溶液温热至高于20℃或高于25℃或高于30℃。在另一个实施方案中，将吗啉和4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶混合后，将溶液通过加入水溶液淬灭。更特别的是，将吗啉和4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶混合后至少10小时，或至少20小时，或至少30小时，或至少40小时，或至少50小时，或约64小时，将溶液通过加入水溶液淬灭。更特别的是，淬灭后，将溶液经柱色谱纯化。更特别的是，所述柱为硅胶柱。在另一个实施方案中，使得4-氯代-2，6-二吗啉代嘧啶与2-氨基吡啶基或2-氨基嘧啶基反应形成式III化合物。
含有嘧啶母核的本发明化合物(例如式I化合物)可以采用本领域技术人员所熟知的多种方法制备。在一个方法中，通过亲核芳族取代反应或者通过Buchwald-Hartwig交联-偶合反应，可以使得适当官能化的胺与4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶偶合(Hartwig等，Tetrahedron Letters 36，(1995)3609)，其中Ar代表芳基或杂芳基。随后，在已知的反应条件下，例如通过采用官能化的硼酸酯处理，可以进行Suzuki偶合(Suzuki等，Chem.Commun.(1979)866)形成终产物，如下面流程所示
自2，4，6-三溴嘧啶，使得官能化的芳基胺与2，4，6-三溴嘧啶进行SNAr(或Buchwald)反应可以优选得到4-取代的产物。Suzuki反应后在2-位上进行吗啉取代反应得到最终的嘧啶类似物
或者，可以采用多次Suzuki偶合反应以获得在4和6位上直接与嘧啶母核连接的芳基或杂芳基；或者在Suzuki偶合反应进行后，再进行亲核芳族取代反应或Buchwald-Hartwig交联-偶合反应，如下面流程所示
在下列方法和实施例中提供了本发明化合物(特别是式I、II和III化合物)的更具体的合成方法 方法1 5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-基胺的合成
向干燥的500-mL烧瓶中加入2-氨基-5-溴代嘧啶(10g，57.5mmol)、乙酸钾(16.9g，172mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(16.1g，63.0mmol)和二氧六环(300mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(Pd(dppf)Cl2CH2Cl2)(2.34g，2.87mmol)。在氩气环境中将反应混合物在115℃油浴中回流4小时。冷却至室温后，加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。合并的有机萃取物用H2O(2×300mL)、NaCl(sat.)(300mL)洗涤，经硫酸钠干燥并通过5cm硅胶垫过滤。采用另外的EtOAc冲洗产物。浓缩溶剂后，将粗品采用13二氯甲烷和己烷(40mL)的混合物处理，过滤并用己烷洗涤得到浅黄色固体(8.5g，75％)。LCMS(m/z)140(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的水解)。1HNMR(CDCl3)δ8.58(s，2H)，5.74(s，2H)，1.32(s，12H)。
方法2 2-氨基甲基-5-溴代嘧啶的合成
在密封的反应容器中，将甲基胺(2.0M的甲醇溶液，40mL，80mmol)加至5-溴-2-氯代嘧啶(5.6g，29.0mmol)中。使其通风数分钟后，将容器密封，置于安全挡板后面，在115℃的油浴中加热48小时。冷却后真空除去挥发物。将产物溶于CH2Cl2(200mL)并用1M NaOH(40mL)洗涤。水层再用CH2Cl2(2×50mL)萃取。合并的有机相经硫酸镁干燥，过滤并浓缩得到米色固体(5.1g，93％)。LCMS(m/z)188.0/190.0(MH+)。
甲基[5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))嘧啶-2-基]胺的合成
向干燥的500mL烧瓶中加入2-甲基氨基-5-溴代嘧啶(9.5g，50.5mmol)、乙酸钾(15.1g，154.4mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(14.1g，55.5mmol)和二氧六环(280mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(2.05g，2.51mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流4小时。冷却至室温后，加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。合并的有机相用H2O(2×300mL)、NaCl(sat.)(300mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空除去溶剂。经SiO2色谱纯化(50％EtOAc/己烷)得到米色固体(7.66g，64％)。LCMS(m/z)154(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1HNMR(CDCl3)δ8.58(s，2H)，5.56(s，1H)，3.02(d，3H)，1.32(s，12H)。
方法3 5-溴-4-甲基嘧啶-2-基胺的合成
向4-甲基嘧啶-2-基胺(10.9g，100mmol)的氯仿(400mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(17.8g，100mmol)。将溶液于黑暗中搅拌15小时，此时将其加至CH2Cl2(1400mL)中，用1N NaOH(3×200mL)和NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到5-溴-4-甲基嘧啶-2-基胺(18.8g，99％)。LCMS(m/z)188.0/190.0(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ 8.22(s，1H)，5.02(bs，2H)，2.44(s，3H)。
4-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))嘧啶-2-基胺的合成
向干燥的1L烧瓶中加入5-溴-4-甲基嘧啶-2-基胺(18.8g，100mmol)、乙酸钾(29.45g，300mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(26.7g，105mmol)和二氧六环(500mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(4.07g，5mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流18小时。冷却至室温后，加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。加入另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。合并的有机萃取物用H2O(2×300mL)、NaCl(sat.)(300mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩并经二氧化硅色谱纯化(EtOAc洗脱)得到18.1g米色固体。通过1H NMR测定，产物为硼酸酯和副产物4-甲基嘧啶-2-基胺的51混合物。该产物用于随后进行的Suzuki反应。LCMS(m/z)154(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1H NMR(CDCl3)δ 8.52(s，1H)，5.14(bs，2H)，2.56(d，3H)，1.32(s，12H)。
方法4 5-溴-4-(三氟甲基)-2-吡啶基胺的合成
向2-氨基-4-三氟甲基吡啶(10.0g，62.1mmol)的氯仿(200mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(12.0g，67.4mmol)。将溶液于黑暗中搅拌2小时，此时加入CH2Cl2(200mL)和1N NaOH(200mL)。混合后，分离各层，有机层用NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗品产物经SiO2色谱纯化(0-5％EtOAc/CH2Cl2)得到12.0g(80％)5-溴-4-(三氟甲基)-2-吡啶基胺LCMS(m/z)241/243(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ 8.28(s，1H)，6.77(s，1H)，4.78(bs，2H)。
5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))-4-(三氟甲基)-2-吡啶基胺的合成
向干燥的500mL烧瓶中加入5-溴-4-(三氟甲基)-2-吡啶基胺(11.8g，49.0mmol)、乙酸钾(14.4g，146.9mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(13.6g，53.9mmol)和二氧六环(300mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(2.0g，2.45mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流8小时。冷却至室温后，真空除去二氧六环。加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。浓缩合并的有机萃取物，粗品产物经二氧化硅色谱部分纯化(30-40％ EtOAc/己烷)。除去溶剂后，加入己烷(75mL)；超声后，过滤得到的固体，高真空干燥3天得到2.4g米色固体。1H NMR测定产物为硼酸酯和副产物2-氨基-4-三氟甲基吡啶的51的混合物。该产物可以用于随后进行的Suzuki反应。LCMS(m/z)207(衍生自LC上的产物水解的硼酸的MH+)。1H NMR(CDCl3)δ 8.50(s，1H)，6.72(s，1H)，4.80(bs，2H)，1.34(s，12H)。
方法5 5-溴-4-(三氟甲基)嘧啶-2-胺的合成
向2-氨基-4-三氟甲基嘧啶(8.0g，49.1mmol)的氯仿(300mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(8.9g，50mmol)。将溶液于黑暗中搅拌16小时，此时加入另外的N-溴代琥珀酰亚胺(4.0g，22.5mmol)。再搅拌4小时后，将溶液加至CH2Cl2(200mL)和1N NaOH(200mL)中。混合后，分离各层，有机层用NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到10.9g(82％)5-溴-4-(三氟甲基)-2-嘧啶基胺。LCMS(m/z)242/244(MH+)。1HNMR(CDCl3)δ8.52(s，1H)，5.38(bs，2H)。
5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺的合成
向干燥的500mL烧瓶中加入5-溴-4-(三氟甲基)-2-嘧啶基胺(10.1g，41.7mmol)、乙酸钾(12.3g，125.2mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(11.6g，45.9mmol)和二氧六环(150mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(1.7g，2.1mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流6小时。冷却至室温后，真空除去二氧六环。加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。将合并的有机萃取物浓缩，粗品产物经二氧化硅色谱纯化(30-40％ EtOAc/己烷)得到4.40g米色固体。1H NMR测定产物为硼酸酯和副产物2-氨基-4-三氟甲基嘧啶的11混合物。该产物可以用于随后进行的Suzuki反应。LCMS(m/z)208(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1H NMR(CDCl3)δ 8.72(s，1H)，5.50(bs，2H)，1.34(s，12H)。
方法6 5-溴-4-氯代-2-吡啶基胺的合成
向4-氯代-2-吡啶基胺(6.0g，46.7mmol)的氯仿(180mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(8.3g，46.7mmol)。将溶液于黑暗中搅拌2小时，此时加入CH2Cl2(800mL)和1N NaOH(100mL)。混合后，分离各层，有机层用NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗品产物经二氧化硅色谱纯化(25-35％EtOAc/己烷)得到3.63g(38％)5-溴-4-氯代-2-吡啶基胺。LCMS(m/z)206.9/208.9(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ 8.18(s，1H)，6.62(s，1H)，4.52(bs，2H)。
4-氯代-5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))-2-吡啶基胺的合成
向干燥的500-mL烧瓶中加入5-溴-4-氯代2-吡啶基胺(7.3g，35.8mmol)、乙酸钾(10.3g，105mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(10.1g，39.8mmol)和二氧六环(150mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(0.85g，1.04mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流6小时。冷却至室温后，真空除去二氧六环。然后加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。浓缩合并的有机萃取物，粗品产物经二氧化硅色谱纯化(EtOAc洗脱)。除去溶剂后，加入3∶1己烷/CH2Cl2(100mL)。超声处理后，将得到的固体过滤并真空浓缩得到2.8g白色固体。1H NMR测定产物为硼酸酯和副产物2-氨基-4-氯代吡啶的10∶1混合物。该产物可以用于随后进行的Suzuki反应。LCMS(m/z)173(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1H NMR(CDCl3)δ 8.36(s，1H)，6.46(s，1H)，4.70(bs，2H)，1.38(s，12H)。
方法7 5-溴代嘧啶-2，4-二胺的合成
向2，4-二氨基嘧啶(1.0g，9.1mmol)的氯仿(30mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(1.62g，9.08mmol)。将溶液于黑暗中搅拌12小时，此时加入CH2Cl2(150mL)和1N NaOH(50mL)。将形成的固体过滤，用水冲洗并真空浓缩，得到1.4g(74％)5-溴代嘧啶-2，4-二胺。LCMS(m/z)189/191(MH+)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.78(s，1H)，6.58(bs，2H)，6.08(bs，2H)。
5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2，4-二胺的合成
向干燥的1L烧瓶中加入5-溴代嘧啶-2，4-二胺(30.0g，158.7mmol)、乙酸钾(45.8g，466.7mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(51.2g，202.2mmol)和二氧六环(500mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(2.5g，3.11mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流16小时。冷却至室温后，过滤固体无机物，用EtOAc(1L)冲洗。有机萃取物真空干燥，向得到的固体中加入二氯甲烷(1L)。超声处理后，过滤固体。该固体为脱溴的2，4-二氨基嘧啶。将含有需要的硼酸酯的滤液真空浓缩。向该残留物中加入乙醚(100mL)。超声处理后，过滤溶液，用另外的乙醚(50mL)冲洗，将获得的固体高真空干燥得到需要的2，4-二氨基嘧啶基-5-硼酸酯(10.13g，27％)。1H NMR测定产物为2，4-二氨基嘧啶基-5-硼酸酯和副产物2，4-二氨基嘧啶的4∶1混合物。该产物可以用于随后的Suzuki反应。LCMS(m/z)155(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1H NMR(CDCl3+CD3OD)δ8.16(s，1H)，1.34(s，12H)。
方法8 4-甲氧基嘧啶-2-基胺的合成
向4，6-二氯代-2-氨基嘧啶(5.0g，30.5mmol)的甲醇(100mL)溶液中加入25％甲醇钠(6.59g，30.5mmol)。将溶液回流20小时，此时真空除去甲醇。将残留物溶于EtOAc(350mL)，用H2O(100mL)和NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到4.4g(90％)4-氯代-6-甲氧基嘧啶-2-基胺。
向4-氯代-6-甲氧基嘧啶-2-基胺(4.4g，27.7mmol)的EtOAc(200mL)和乙醇(150mL)溶液中加入二异丙基乙胺(9.6mL，55.3mmol)和10％披钯炭(2.9g，2.77mmol)。将该不均匀的溶液在气囊氢气环境中搅拌14小时，此时将溶液通过硅藻土垫过滤，真空除去挥发物。将残留物溶于EtOAc(200mL)，用Na2CO3(sat.)(100mL)和NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到3.1g(90％)4-甲氧基嘧啶-2-基胺。LCMS(m/z)126(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ8.00(d，J＝5.7Hz，1H)，6.08(d，J＝5.7Hz，1H)，4.98(bs，2H)，3.84(s，3H)。
5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基胺的合成
向4-甲氧基嘧啶-2-基胺(1.84g，14.7mmol)的氯仿(600mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(2.62g，14.7mmol)。在黑暗中搅拌5小时后，向溶液中加入CH2Cl2(200mL)和1N NaOH(100mL)。混合后，分离各层，有机层用NaCl(sat.)(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到2.88g(96％)5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基胺。LCMS(m/z)204/206(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ8.10(s，1H)，4.93(bs，2H)，3.96(s，3H)。
4-甲氧基-5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))嘧啶-2-基胺的合成
向干燥的200mL烧瓶中加入5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基胺(2.88g，14.1mmol)、乙酸钾(4.16g，42.4mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(3.76g，14.8mmol)和二氧六环(75mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(0.58g，0.71mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流21小时。冷却至室温后，真空除去二氧六环。加入EtOAc(500mL)，将得到的浆状物超声并过滤。采用另外的EtOAc(500mL)洗涤固体。浓缩合并的有机相，粗品产物经二氧化硅色谱纯化(EtOAc洗脱)得到2.4g米色固体。1H NMR测定产物为硼酸酯和4-甲氧基嘧啶-2-基胺的1∶1混合物。该产物可以用于随后进行的Suzuki反应。LCMS(m/z)170(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)。1HNMR(CDCl3)δ8.42(s，1H)，5.22(bs，2H)，3.90(s，3H)，1.34(s，12H)。
方法9 5-溴-6-氟-2-吡啶基胺的合成
向6-氟-2-吡啶基胺(1.0g，8.93mmol)的氯仿(55mL)溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(1.59g，8.93mmol)。将溶液于黑暗中搅拌15小时，此时加入CH2Cl2(200mL)和1N NaOH(50mL)。混合后，分离各层，有机层用NaCl(sat.)(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗品产物经二氧化硅色谱纯化(25％EtOAc/己烷)得到5-溴-6-氟-2-吡啶基胺(386mg，22％)。LCMS(m/z)190.9/192.9(MH+)；1H NMR(CDCl3)δ 7.59(t，J＝8.7Hz，1H)，6.25(dd，J＝8.1，1.2Hz，1H)，4.58(bs，1H)。
6-氟-5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))-2-吡啶基胺的合成
向干燥的50mL烧瓶中加入5-溴-6-氟-2-吡啶基胺(370mg，1.93mmol)、乙酸钾(569mg，5.8mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(538mg，2.12mmol)和二氧六环(15mL)。向溶液中通入氩气15分钟，此时加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)二氯甲烷加合物(79mg，0.09mmol)。在氩气环境中将反应物在115℃的油浴中回流4小时。真空除去挥发物后，加入EtOAc(150mL)，将溶液用H2O(3×40mL)、NaCl(sat.)(300mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经二氧化硅色谱纯化(30％EtOAc/己烷)得到硼酸酯(161mg，35％)。LCMS(m/z)157(硼酸的MH+，衍生自LC上的产物的在位水解)1HNMR(CDCl3)δ7.86(t，J＝8.4Hz，1H)，6.29(dd，J＝8.1，2.7Hz，1H)，4.70(bs，1H)，1.32(s，12H)。
方法10 5-溴-4-氟吡啶-2-胺的合成
在黑色遮光板下在铝箔包裹的烧瓶中，将N-溴代琥珀酰亚胺(126mg，0.71mmol)加至4-氟吡啶-2-胺TFA盐(162mg，0.72mmol)的乙腈(4mL)溶液中。将反应溶液于室温下在黑暗中搅拌2小时。除去溶剂后，粗品产物经硅胶柱纯化，采用乙酸乙酯洗脱得到为象牙色固体的5-溴-4-氟吡啶-2-胺(92mg，67％)。LC/MS(m/z)190.9/192.9(MH+)，Rt1.02分钟。
4-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺的合成
在密封的Pyrex压力容器中，在氩气环境中将5-溴-4-氟吡啶-2-胺(25mg，0.13mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(40mg，0.16mmol)、乙酸钾(51mg，0.52mmol)和二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)-二氯甲烷加合物(16mg，0.019mmol)的混合物悬浮于二氧六环(1.7mL)中。将压力容器密封，将反应混合物于110℃搅拌2小时。LCMS测定显示反应完成后，将反应混合物冷却至室温，4-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺无需进一步纯化可以用于随后的反应，假定定量收率(0.13mmol)。LC/MS(m/z)157.0(在LC上产物水解形成的硼酸的MH+)，Rt0.34分。
方法11 2-氨基-5-溴-异烟腈的合成
在黑色遮光板下在铝箔包裹的烧瓶中，将2-氨基-异烟腈TFA盐(125mg，0.54mmol)溶于乙腈(3.5mL)。于室温下，向该搅拌的溶液中一次性加入固体N-溴代琥珀酰亚胺(89.2mg，0.501mmol)。反应溶液于室温下在黑暗中搅拌90分钟。蒸发溶剂后，粗品产物经硅胶色谱纯化得到2-氨基-5-溴-异烟腈(53mg，49％)。LC/MS(m/z)197.9(MH+)，Rt2.92分钟。
2-氨基-5-硼酸酯-异烟腈的合成
在玻璃压力容器中，将2-氨基-5-溴-异烟腈(25mg，0.126mmol)、4，4，5，5-四甲基-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷(38mg，0.151mmol)和乙酸钾(49mg，0.504mmol)的混合物悬浮于二氧六环(1.8mL)。向混合物中吹入氩气1-2分钟，一次性加入二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(16mg，0.019mmol)。将反应容器密封，于120℃加热搅拌2小时。将粗品反应溶液冷却至室温，无需进一步纯化可以直接使用，假定硼酸酯为定量收率(0.126mmol)。LC/MS(m/z)164.0(在LC上的产物的水解形成的硼酸的MH+)，Rt0.37分钟。
方法12 3-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺的合成N-烯丙基-3-氟吡啶-2-胺的合成
向预先制备的Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(41mg，0.05mmol)、dppf(83mg，0.15mmol)和NaOt-Bu(1.4g，15mmol)在THF(20mL)中的鲜黄色复合物中加入2-氯代-3-氟吡啶(1.32g，10mmol)和烯丙基胺(1.2mL，15mmol)。向混合物中通入氮气，将压力容器上盖并密封。将反应物于65-70℃加热16小时。将冷却的反应物通过硅藻土垫过滤，滤垫用EtOAc(30mL)洗涤。减压除去溶剂得到棕色粘稠的油状物。粗品产物经硅胶色谱纯化，采用5％MeOH的EtOAc溶液洗脱。含有各种组分的产物用EtOAc(100mL)稀释，用1M HCl(2×50mL)萃取。含水的酸性产物经冷冻干燥得到浅棕色固体N-烯丙基-3-氟吡啶-2-胺，为HCl盐(1.6g，85％)。LC/MS(m/z)153.1(MH+)，Rt0.5分钟。
3-氟吡啶-2-胺的合成
于室温下、氮气环境中，将10％Pd/C(1.23g)一次性加至N-烯丙基-3-氟吡啶-2-胺(1.62g，7.18mmol)和BF3·Et2O(900uL，7.18mmol)的EtOH(20mL)溶液中。于80℃搅拌2天后，反应混合物通过硅藻土垫过滤，滤垫用EtOH(20mL)洗涤。向浅黄色滤液中加入6N HCl直到溶液呈酸性。3-氟吡啶-2-胺的盐酸盐较游离碱更不易挥发。将滤液减压浓缩。盐残留物经真空干燥得到为浅黄色玻璃状固体的3-氟吡啶-2-胺(1.66g，定量收率)。LC/MS(m/z)113.0(MH+)，Rt0.41分钟。
5-溴-3-氟吡啶-2-胺和3-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺的合成
于室温、搅拌下，将固体NBS(750mg，4.2mmol)加至3-氟吡啶-2-胺HCI盐(1.66g，7.18mmol)的ACN(30mL)溶液中。将反应物避光并在氮气环境中搅拌。1小时后，向反应物中再加入NBS(250mg，1.4mmol)。1小时后，减压除去溶剂，残留物经硅胶快速色谱纯化，采用70％EtOAc/己烷洗脱，随后采用100％EtOAc洗脱，得到为黄-棕色固体的5-溴-3-氟吡啶-2-胺(1.26g，收率92％)。LC/MS(m/z)191.0/193.0(MH+)，Rt1.18分钟。
在方法1中所述条件下，将该溴化物转化为频那醇硼烷酯。LC/MS(m/z)157.0(MH+)，Rt0.36分钟。
方法13 4-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺的合成N-烯丙基-4-氟吡啶-2-胺的合成
向预先制备的Pd(dppf)Cl2(817mg，1.0mmol)、dppf(1.66g，3.0mmol)和NaOtBu(2.9g，30mmol)在甲苯(30mL)中的红棕色复合物中加入2-氯代-4-氟吡啶(2.16g，20mmol)和烯丙基胺(1.2mL，15mmol)。向混合物中通入氮气，将压力容器上盖并密封。将反应物于120-125℃加热18小时。将冷却的暗褐色反应物通过硅藻土垫过滤，滤垫用EtOAc(60mL)洗涤。缓慢减压除去溶剂得到棕色粘稠的油状物，在真空中使其升华。粗品混合物采用6N HCl(10mL)酸化并冷冻干燥得到棕色粉末，为HCl盐。将粗品产物在EtOAc(100mL)和sat.NaHCO3(80mL)之间分配。分离各层，水层再次用EtOAc(100mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到棕色固体N-烯丙基-4-氟吡啶-2-胺(690mg，25％)。LC/MS(m/z)153.0(MH+)，Rt1.13分钟。
N-烯丙基-4-氟吡啶-2-胺的合成
于室温、氮气环境下，将10％Pd/C(552mg)一次性加入N-烯丙基-4-氟吡啶-2-胺(690mg，3.07mmol)和BF3·Et2O(0.386mL，3.07mmol)的无水EtOH(12mL)溶液中。于80℃搅拌24小时后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤，滤垫用MeOH(100mL)洗涤。向深色滤液中加入6N HCl(2mL)直到溶液酸化。该4-氟吡啶-2-胺的盐酸盐较游离碱更不易挥发。滤液减压浓缩并真空干燥。粗品产物经制备性HPLC纯化得到为棕色粉末的4-氟吡啶-2-胺TFA盐(162mg，23％)。LC/MS(m/z)113.0(MH+)，Rt0.40分钟。
5-溴-4-氟吡啶-2-胺和4-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺的合成
于室温、搅拌下，将固体NBS(78mg，0.43mmol)加至3-氟吡啶-2-胺HCl盐(162mg，0.72mmol)的ACN(4mL)溶液中。将反应物避光并在氮气环境中搅拌。1.5小时后，向反应物中加入另外量的NBS(15mg，0.084mmol)。1.5小时后再次检查反应，向反应物中加入另外量的NBS(15mg，0.084mmol)直到LCMS检测显示原料消耗完毕。1小时后，减压除去溶剂，残留物经硅胶快速色谱纯化，采用50％乙酸乙酯/己烷洗脱得到5-溴-4-氟吡啶-2-胺，为象牙色固体(92mg，68％)。LC/MS(m/z)190.9/192.9(MH+)，Rt1.02分。
在方法1中所述条件下，将该溴化物转化为频那醇硼烷酯。LC/MS(m/z)157.0(MH+)，Rt0.34分钟。
方法14 2-(5-硝基吡啶-2-基氧基)-N，N-二甲基乙胺的合成
微波加热。向2-(二甲基氨基)乙醇(339mg，3.80mmol)的DMF(5mL)溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)酰胺(4.75mL，1M的THF溶液，4.75mmol)。将混合物于室温下搅拌15分钟。然后加入2-氯代-5-硝基吡啶(500mg，3.16mmol)。将管形瓶盖紧，将其经微波照射(150℃，10分钟)。将混合物用水(250mL)和EtOAc(250mL)稀释。分离两层，水层用乙酸乙酯萃取2次以上。合并有机萃取物，用水和盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到粗品产物，为棕色油状物。经硅胶柱色谱纯化，采用5％甲醇/二氯甲烷洗脱得到2-(5-硝基吡啶-2-基氧基)-N，N-二甲基乙胺，为浅黄色固体(295mg，44％)。
氢化钠和油浴加热。于0℃向氢化钠(189mg，4.73mmol)的无水四氢呋喃(2mL)中滴加2-氯代-5-硝基吡啶(500mg，3.16mmol)和2-(二甲基氨基)乙醇(353mg，3.96mmol)的无水四氢呋喃(4mL)溶液。将反应物温热至室温并搅拌16小时。蒸发THF，加入水(100mL)和EtOAc(200mL)。水层用EtOAc(200mL)萃取，合并有机相，盐水洗涤，硫酸钠干燥并浓缩得到棕色油状物。经硅胶柱色谱纯化，采用5％甲醇/二氯甲烷洗脱得到2-(5-硝基吡啶-2-基氧基)-N，N-二甲基乙胺，为浅黄色固体(233mg，35％)。LC/MS(m/z)212.2(MH+)，Rt1.28分钟。
6-(2-(二甲基氨基)乙氧基)吡啶-3-胺的合成
将2-(5-硝基吡啶-2-基氧基)-N，N-二甲基乙胺(295mg，1.40mmol)溶于5mL甲醇并将其置于氮气环境中。加入催化量的10％披钯炭，将氢气囊连接至反应烧瓶。向该烧瓶中充入5次氢气，于氢气环境中于室温下搅拌16小时。过滤固体，用甲醇洗涤。滤液减压蒸发得到6-[2-(二甲基氨基)乙氧基]吡啶-3-胺，为棕色油状物(250mg，99％)。LC/MS(m/z)182.1(MH+)，Rt0.36分钟。
方法15 2-(1-甲基哌啶-4-基氧基)-5-硝基吡啶的合成
于0℃，向氢化钠(189mg，4.73mmol)的无水四氢呋喃(2mL)混合物中滴加2-氯代-5-硝基吡啶(500mg，3.16mmol)和1-甲基哌啶-4-醇(455mg，3.96mmol)的无水四氢呋喃(4mL)溶液。将反应物加热回流16小时。蒸发THF，加入水(100mL)和EtOAc(200mL)。水层用EtOAc(200mL)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩得到棕色油状物。经硅胶柱色谱纯化，采用3％甲醇/二氯甲烷洗脱得到2-(1-甲基哌啶-4-基氧基)-5-硝基吡啶，为黄色固体(367mg，49％)。LC/MS(m/z)238.0(MH+)，Rt1.59分钟。
6-(1-甲基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-胺的合成
2-(1-甲基哌啶-4-基氧基)-5-硝基吡啶(100mg，0.42mmol)溶于5mL甲醇并将其置于氮气环境中。加入催化量的10％披钯炭，将氢气囊连接至反应烧瓶。向该烧瓶中充入5次氢气，于氢气环境中于室温下搅拌。过滤固体，用甲醇洗涤。滤液减压蒸发得到6-(1-甲基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-胺，为棕色固体(85mg，98％)。LC/MS(m/z)208.2(MH+)，Rt0.34分钟。
方法16 4-(5-硝基吡啶-2-基氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯的合成
向4-羟基哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1eq)的DMF溶液中加入二-三甲基甲硅烷基氨化钾(1.5eq，1M的四氢呋喃溶液)。将溶液于室温下搅拌10分钟，加入2-氯代-5-硝基吡啶(1.2eq)。反应混合物于145℃经微波照射600秒。向反应物中加入EtOAc和水，分离各层。有机层用水、盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到棕色粗品产物。经硅胶柱色谱纯化，采用10％EtOAc/己烷洗脱得到为浅黄色固体的产物。LC/MS(m/z)324.3(MH+)，Rt3.33分钟。
5-硝基-2-(哌啶-4-基氧基)吡啶的合成
将三氟乙酸(5eq)加至4-(5-硝基吡啶-2-基氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(1eq)的二氯甲烷溶液中，于室温下搅拌1小时。蒸发溶剂，残留物采用饱和的碳酸钠水溶液调节至pH＝10，用乙酸乙酯萃取。有机层采用盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到为浅黄色结晶固体的产物。LC/MS(m/z)224.3(MH+)，Rt1.64分钟。
2-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-5-硝基吡啶的合成
向10％乙酸的甲醇溶液中加入5-硝基-2-(哌啶-4-基氧基)吡啶(1eq)和无水丙酮(5eq)。将溶液于室温下搅拌1小时。将反应混合物在冰浴中冷却至0℃，加入氰基硼氢化钠(1.5eq)。然后将反应混合物温热至室温并搅拌5小时。蒸发溶剂，残留物采用碳酸钠调节至pH＝10，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到粗品产物。经硅胶柱色谱纯化，采用2％甲醇/二氯甲烷洗脱得到为黄色固体的产物。LC/MS(m/z)266.3(MH+)，Rt1.85分钟。
6-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-胺的合成
将2-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-5-硝基吡啶(1eq)溶于甲醇并置于氮气环境中。加入催化量的10％披钯炭，将氢气囊连接至反应烧瓶。向该烧瓶中充入5次氢气，于氢气环境中于室温下搅拌4小时。过滤固体，用甲醇洗涤。滤液减压蒸发得到为棕色油状物的产物。LC/MS(m/z)236.3(MH+)，Rt0.38分钟。
方法17 7-甲硫基-3-硝基喹啉的合成
向3-[(3-甲硫基苯基)氨基]-2-硝基丙-2-烯醛(2.3g，9.6mmol)和3-甲硫基苯基胺盐酸盐(2.7g，19.3mmol)在乙酸(25mL)中的回流混合物中加入苯硫酚(thiophenol)(0.2g，1.9mmol)。回流18小时后，将混合物冷却至室温，减压除去乙酸。在搅拌下向得到的深色固体中加入EtOAc(50mL)。过滤得到黄/绿色固体和深色滤液。放置后产物自EtOAc溶液中结晶出来。过滤并采用冷的EtOAc冲洗得到330mg结晶产物。黄/绿色固体采用3×250mL二氯甲烷分次洗涤。将二氯甲烷洗涤液浓缩得到另外150mg产物(23％)。LC/MS(m/z)221.1(MH+)，Rt2.54分钟。
7-(甲基磺酰基)-3-硝基喹啉的合成
向在冰浴中冷却的7-甲硫基-3-硝基喹啉(141mg，0.6mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入MCPBA(221mg，1.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液。温热至室温后，过滤形成的白色沉淀物，用另外的10mL二氯甲烷洗涤，得到纯的产物(85mg，53％)。LC/MS(m/z)252.9(MH+)，Rt1.82分钟。
7-(甲基磺酰基)-3-喹啉基胺的合成
在氩气环境中，向7-(甲基磺酰基)-3-硝基喹啉(85mg，0.4mmol)的EtOAc(6mL)悬浮液中加入10％Pd/C(22mg，0.04mmol)。将氢气囊连接至反应烧瓶上，向烧瓶中充入氢气3次，将反应混合物在氢气环境中搅拌18小时。未反应的原料与催化剂一起沉淀到烧瓶底部。通过过滤自乙酸乙酯溶液中除去固体。减压蒸发乙酸乙酯得到7-(甲基磺酰基)-3-喹啉基胺(22mg，30％)。LC/MS(m/z)223.0(MH+)，Rt1.10分钟。
方法18 6-甲氧基喹啉-3-胺的合成
将6-甲氧基-3-硝基喹啉(Magnus，P.等，J.Am.Chem.Soc.119，5591，1997；0.17g，0.83mmol)和Pd/C(10％，80mg)在EtOAc(15mL)中的混合物采用氢气囊氢化，以定量收率得到6-甲氧基喹啉-3-胺。LC/MS(m/z)175.1(MH+)，Rt1.54分钟。
方法19 6-羟基-3-硝基喹啉的合成
将6-甲氧基-3-硝基喹啉(Magnus，P.等，J.Am.Chem.Soc.119，5591，1997；100mg，0.49mmol)溶于溴化氢溶液(47％aq，2.5mL，0.2M)，于120℃加热并搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用6N NaOH中和，然后用EtOAc(150mL)萃取。有机层经硫酸钠干燥，经快速层析纯化(SiO2，40-50％EtOAc/己烷)，得到73mg(78％)6-羟基-3-硝基喹啉。LC/MS(m/z)190.9(MH+)，Rt1.97分钟。
3-硝基-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)喹啉的合成
将6-羟基-3-硝基喹啉(148mg，0.78mmol)溶于THF(18mL)。加入2-(吡咯烷-1-基)乙醇(0.091mL，0.78mmol)和三苯膦(306mg，1.17mmol)。最后，加入偶氮二甲酸二乙酯(0.184mL，1.17mmol)，将反应混合物于室温下搅拌2小时。真空浓缩溶剂，残留物经快速层析纯化(SiO2)得到134mg(60％)3-硝基-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)喹啉。LC/MS(m/z)288.1(MH+)，Rt1.80分钟。
3-氨基-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)喹啉的合成
将3-硝基-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)喹啉(134mg，0.46mmol)溶于EtOAc(10mL)，向溶液中充入氮气数分钟。然后加入三乙胺(0.065mL，0.46mmol)，随后加入催化量的10％Pd/C。每次加入后均重复充入氮气。将氢气囊连接至反应烧瓶上，将反应混合物于室温下、氮气环境中搅拌48小时。然后将混合物通过硅藻土垫过滤，浓缩得到粗品3-氨基-6-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)喹啉，将其直接用于下一步反应。LC/MS(m/z)258.1(MH+)，Rt0.33分钟。
方法20 5-甲氧基-3-硝基-喹啉的合成
3-(3-甲氧基-苯基氨基)-2-硝基-丙烯醛的合成 向3-甲氧基-苯基胺盐酸盐(4.6g，28.9mmol)的1N HCl(300mL)溶液中加入2-硝基-丙二醛(2.7g，19.3mmol)的150mL水溶液中。30分钟后，过滤沉淀物，用0.1N HCl洗涤。在布式漏斗中空气干燥18小时得到3.36g(78％)浅黄/绿色粉末。LC/MS(m/z)245.1(MH++Na)，Rt2.21分钟。
5-甲氧基-3-硝基喹啉和7-甲氧基-3-硝基喹啉的合成 向3-甲氧基-苯胺盐酸盐(4.7g，29.7mmol)的30mL乙酸溶液中加入3-(3-甲氧基-苯基氨基)-2-硝基-丙烯醛(3.3g，14.9mmol)。将反应混合物加热至回流，加入苯硫酚(0.3mL，2.98mmol)。22小时后，将反应混合物冷却至室温，真空除去溶剂。加入70mL EtOAc，过滤得到固体副产物7-甲氧基-3-硝基-喹啉和含有不纯的5-甲氧基-3-硝基-喹啉的滤液。将滤液置于硅胶柱上，采用5％-25％EtOAc的己烷溶液以85mL/min的速度洗脱30分钟。将富含产物的组分浓缩，作为5-和7-甲氧基取代的3-硝基喹啉的混合物用于下一步骤。LC/MS(m/z)205.1(MH+)，Rt2.26分钟。
5-甲氧基喹啉-3-胺的合成
将5-和7-甲氧基取代的3-硝基喹啉(780mg，3.82mmol)混合物溶于EtOAc(75mL)，向反应混合物中充入氮气数分钟。然后加入10％Pd/C(54mg)，将氢气囊连接至反应烧瓶上。向反应混合物中充入氢气并在氢气环境中于室温下搅拌过夜。真空除去溶剂并经硅胶柱色谱纯化(100％ EtOAc)，得到两种不同的异构体5-甲氧基喹啉-3-胺和7-甲氧基喹啉-3-胺。获得需要的产物5-甲氧基喹啉-3-胺(80mg，12％)，为黄色粉末。经1H NMR(CD3OD)测定结构δ 8.40(d，1H)，7.69(d，1H)，7.40(d，1H)，7.30(t，1H)，6.85(d，1H)。LC/MS(需要的异构体)(m/z)175.0(MH+)，Rt1.54分钟；LC/MS(不需要的异构体)(m/z)175.0(MH+)，Rt1.53分钟。
方法21 2-(甲基磺酰基)吡啶-4-胺的合成
2-(甲硫基)吡啶-4-胺的合成 在压力容器中，将硫代甲醇钠(140mg，1.98mmol)加至2-氯代吡啶-4-胺(150mg，1.17mmol)的NMP(0.65mL)溶液中。将容器密封，于200℃在微波中加热800秒。经硅胶快速色谱纯化，采用8％ MeOH/DCM洗脱得到2-(甲硫基)吡啶-4-胺(435mg，收率50％)。LC/MS(m/z)140.9(MH+)，Rt0.59分钟。
于室温、搅拌下，将固体MCPBA(780mg，2-3mmol)以每次小量缓慢加至2-(甲硫基)吡啶-4-胺(435mg，1.17mmol)的THF(7mL)溶液中。通过LCMS检测反应进行，通过MCPBA滴定消耗原料。将硅胶加至反应混合物中，然后将其减压浓缩至干。硅胶负载的粗品经硅胶快速色谱纯化，采用5％MeOH/DCM洗脱得到2-(甲基磺酰基)吡啶-4-胺(220mg，定量收率)。LC/MS(m/z)173.0(MH+)，Rt0.34分钟。
方法22 2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇的合成
将钠(17.25g，150mmol)切成小块，在氮气环境中缓慢加至1L圆底烧瓶中的EtOH(500mL)中，用水冷却。所有的钠溶解后，加入吗啉代甲脒氢溴酸盐(52.5g，50mmol)和丙二酸二乙酯(40g，50mmol)。将混合物加热至回流3小时。反应混合物冷却至室温，真空除去乙醇。于室温下向白色固体中加入HCl水溶液(1N，800mL)。固体开始溶解，得到澄清的溶液，然后将产物粉碎为白色固体。于室温下1小时后，将固体过滤，用水洗涤(3×)，干燥(先空气，然后用P2O5)得到2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇(42.5g，86％)。LC/MS(m/z)198.1(MH+)，Rt0.51分钟。
4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶的合成
将2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇(30g，0.15mol)和POCl3(150mL，1.61mol)的混合物于120℃加热16小时，然后冷却至室温。除去过量的POCl3得到半固体。将固体缓慢转移至搅拌的水(700mL)和EtOH(100mL)的溶液中，偶尔用水冷却。形成白色固体，随后过滤，用水、10％EtOH水溶液洗涤，经P2O5干燥得到4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶(17.82g，50％)。LC/MS(m/z)233.9(MH+)，Rt2.95分钟。
方法23 4，6-二氯代-5-甲基-2-吗啉代嘧啶的合成
根据4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶(方法22)的相似方法，采用2-乙基丙二酸二甲酯代替丙二酸二乙酯，制备4，6-二氯代-5-甲基-2-吗啉代嘧啶。LC/MS(m/z)248.1(MH+)。
方法24 4，6-二氯代-5-乙基-2-吗啉代嘧啶的合成
根据4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶(方法22)的相似方法，采用2-甲基丙二酸2-乙基酯代替丙二酸二乙酯，制备4，6-二氯代-5-乙基-2-吗啉代嘧啶。LC/MS(m/z)262.1(MH+)，Rt3.59分钟。
方法25 5-氟-2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇的合成
在氩气环境中，在圆底烧瓶中将氢化钠(60％的油溶液，3.9g，96.5mmol)用己烷洗涤，用冰水浴冷却。缓慢加入EtOH(100mL)。将得到的混合物温热至室温，搅拌30分钟。向该碱性混合物中加入2-氟丙二酸二乙酯(5.7g，32.2mmol)，随后加入吗啉代甲脒氢溴酸盐(6.8g，32.2mmol)。在氩气环境中将混合物搅拌加热至90-95℃。12小时后，将反应物冷却至室温，真空除去EtOH。将得到的白色固体溶于水(25mL)，采用浓HCl酸化至pH＝3-4。在布式漏斗上收集形成的白色沉淀物，用水洗涤(2×50mL)，在滤器上空气干燥，真空干燥得到5-氟-2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇(0.87g，12％)。LC/MS(m/z)216.0(MH+)，Rt0.63分钟。
4-(4，6-二氯代-5-氟嘧啶-2-基)吗啉的合成
将5-氟-2-吗啉代嘧啶-4，6-二醇(0.87g，4.0mmol)和POCl3(10mL)的混合物于120℃加热16小时，然后冷却至RT。减压除去POCl3得到半固体，进一步真空干燥。真空干燥12小时后，固体用EtOAc(150mL)稀释，用sat.NaHCO3(60mL)洗涤。在洗涤期间形成固体，与水层一起弃去。有机层再次用sat.NaHCO3(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发得到粗品产物。该产物经快速色谱纯化，采用25％EtOAc/己烷洗脱得到4-(4，6-二氯代-5-氟嘧啶-2-基)吗啉(418mg，42％)。LC/MS(m/z)251.9(MH+)，Rt3.22分钟。
方法26 2，4，6-三溴嘧啶的合成
在200mL烧瓶中，向嘧啶-2，4，6(1H，3H，5H)-三酮(2.66g，20.87mmol)和POBr3(25g，87.2mmol)在甲苯(35mL)的混合物中加入N，N-二甲基苯胺(4.52mL，35.7mmol)。将砖红色浆状物加热至回流3小时。在此过程期间，形成两相溶液，红色胶状物位于烧瓶底部，澄清的黄色液体在烧瓶上面。将反应混合物冷却至室温，弃去黄色有机层。红色胶状物用EtOAc洗涤一次。合并的有机萃取物用饱和的NaHCO3(3×，或直到CO2气体消失)、H2O(3×)、盐水(2×)洗涤，经硫酸钠干燥。然后将溶液浓缩，高真空干燥得到2，4，6-三溴嘧啶(5.40g，82％)，可以无需纯化直接使用。LC/MS(m/z)316.8/318.7(MH+)，Rt2.78分钟。
方法27
将吗啉(100g；1.15摩尔；5.3当量)的THF(450mL)溶液在冰浴中冷却。在30分钟内加入2，4，6-三氯代嘧啶(39.9g；217摩尔；1.0当量)的THF(100mL)溶液。当加入2，4，6-三氯代嘧啶时形成大量的白色沉淀物，反应混合物快速变稠。将混合物温热至室温，机械搅拌64小时(加入2，4，6-三氯代嘧啶后回流加热反应混合物使得反应在60分钟内完成，a与b的比例不变)。然后将混合物过滤，滤饼用另外的THF(2×100mL)洗涤。滤液在旋转蒸发仪上浓缩。加入水(600mL)，将得到的浆状物搅拌30分钟。过滤分离固体，用另外的水(2×100mL)洗涤并真空干燥过夜。得到a+b61.3g(99％)。通过HPLC面积百分比计算产物中87％为a；其余为b。
将31g粗品固体溶于200mL CH2Cl2，置于烧结玻璃漏斗中的600g干燥硅胶上。将硅胶用1∶1己烷EtOAc洗涤，收集300mL的组分。薄层色谱分析显示a存在于组分1-7中，4，6-二吗啉代-2-氯代嘧啶存在于组分6-10中。收集组分1-5，浓缩得到白色固体。收率28.2g(通过HPLC面积百分比计算产物中98％为a)。
方法28 4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯胺的合成 4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯的合成
在氮气环境中，向三苯膦(3.10g，11.8mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(2.06g，11.8mmol)的THF(40mL)溶液中加入4-羟基哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(2.00g，9.94mmol)。搅拌10分钟后，加入2-甲氧基-4-硝基苯酚(1.00g，5.91mmol)。将反应物搅拌16小时，减压蒸发溶剂得到橙色油状物。粗品产物经硅胶色谱纯化，采用25％EtOAc/己烷洗脱得到4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为米色固体(1.70g，82％)。LC/MS(m/z)353.2(MH+)，Rt3.23分钟。
4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶的合成
将三氟乙酸(5eq)加至4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(200mg，0.57mmol，1eq)的二氯甲烷溶液中，于室温下搅拌1小时。蒸发溶剂，用饱和的碳酸钠水溶液将残留物调节至pH10，用EtOAc萃取。有机层采用盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到产物4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶，为浅黄色固体(137.3mg，96％)。LC/MS(m/z)253.2(MH+)，Rt1.81分钟。
1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶的合成
向10％乙酸的甲醇溶液中加入4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶(148mg，0.59mmol，1eq)、无水丙酮(5eq)和氰基硼氢化钠(1.5eq)。将溶液于室温下搅拌24小时。加入另外的无水丙酮(5eq)和氰基硼氢化钠(1.5eq)，将反应物搅拌24小时。蒸发溶剂，残留物用碳酸钠水溶液调节至pH10，用EtOAc萃取。有机层用水、盐水洗涤，硫酸镁干燥并蒸发得到1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶，为黄色油状物(163mg，97％)。LC/MS(m/z)295.2(MH+)，Rt1.96分钟。
4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯胺的合成
将1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶(167mg，0.57mmol)溶于甲醇(20mL)并置于氮气环境下。加入催化量的20％氢氧化钯碳，将氢气囊连接到反应烧瓶上。向烧瓶中充入5次氢气，在氢气环境中、于室温下搅拌16小时。过滤反应混合物，用甲醇洗涤。减压蒸发滤液。向残留物中加入乙腈(10mL)，涡旋10分钟，弃去白色薄膜。乙腈层减压蒸发得到4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯胺，为棕色油状物(131mg，87％)。LC/MS(m/z)265.2(MH+)，Rt0.33分钟。
方法29 4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯胺的合成 4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯的合成
在氮气环境下，向三苯膦(3.10g，11.825mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(2.06g，11.825mmol)在THF(40mL)的混合物中加入4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.00g，9.937mmol)。搅拌10分钟后，加入2-甲氧基-4-硝基苯酚(1.00g，5.912mmol)。将反应物搅拌16小时，减压蒸发得到橙色油状物。粗品产物经硅胶柱色谱纯化，采用25％EtOAc/己烷洗脱得到4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为米色固体(1.70g，82％)。LC/MS(m/z)353.2(MH+)，Rt3.23分钟。
4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶的合成
将三氟乙酸(5eq)加至4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(200mg，0.5676mmol，1eq)的二氯甲烷溶液中，于室温下搅拌1小时。蒸发溶剂，残留物采用饱和的碳酸钠水溶液调节至pH＝10，用乙酸乙酯萃取。有机层采用盐水洗涤，硫酸钠干燥并蒸发得到产物4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶，为浅黄色固体(137.3mg，96％)。LC/MS(m/z)253.2(MH+)，Rt1.81分钟。
1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶的合成
向10％乙酸的甲醇溶液中加入4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶(148mg，0.59mmol，1eq)、无水丙酮(5eq)和氰基硼氢化钠(1.5eq)。将溶液于室温下搅拌24小时。反应完成85％。加入另外的无水丙酮(5eq)和氰基硼氢化钠(1.5eq)并搅拌24小时。蒸发溶剂，残留物采用碳酸钠调节至pH＝10，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、盐水洗涤，硫酸镁干燥并蒸发得到1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶，为黄色油状物(163mg，97％)。LC/MS(m/z)295.2(MH+)，Rt1.96分钟。
4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯胺的合成
将1-异丙基-4-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基)哌啶(167mg，0.57mmol)溶于20mL甲醇并置于氮气环境中。加入催化量的20％氢氧化钯碳，将氢气囊连接到反应烧瓶上。向烧瓶中充入5次氢气，在氢气环境中、于室温下搅拌16小时。过滤反应混合物，用甲醇洗涤。减压蒸发滤液。向残留物中加入乙腈(10mL)，涡旋10分钟，弃去白色薄膜。乙腈层减压蒸发得到4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯胺，为棕色油状物(131mg，87％)。LC/MS(m/z)265.2(MH+)，Rt0.33分钟。
方法30 N-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺
于室温下，向4-苯基噻唑-2-胺(374mg，2.1mmol)的10mL N，N-二甲基乙酰胺溶液中加入氢化钠(50mg，2.1mmol)。将混合物于室温下搅拌10分钟后，向反应混合物中加入二氯化物(470mg，2.0mmol)。于室温下搅拌1小时后，向反应混合物中加入另外的氢化钠(50mg，2.1mmol)。将混合物搅拌1小时，用5mL的氯化铵水溶液淬灭。将得到的混合物用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，然后经硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发得到粗品产物，将其经硅胶柱色谱纯化，采用乙酸乙酯和己烷洗脱得到N-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺。LC/MS(m/z)374和376(MH+)，Rt3.40分钟。
实施例1 N-(6-(2-氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺的制备
将4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶(根据方法22制备；3.0g，12.9mmol)和5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-胺(3.43g，15.5mmol)溶于DME(130mL)。然后加入Na2CO3水溶液(2M，32mL，64mmol)，向反应混合物充入氮气数分钟。然后加入Pd(OAc)2(145mg，0.65mmol)和PPh3(339mg，1.29mmol)，将反应混合物于95℃加热1小时。将反应混合物冷却至室温，自固体残留物上慢慢倒出溶液并浓缩。自水相中分离如此形成的固体。该水层用EtOAc萃取，将该有机层与沉淀物合并。真空除去溶剂得到固体残留物，将其用约20mL EtOAc研磨，过滤并减压蒸发得到目标产物。将母液浓缩得到另外的产物，采用乙酸乙酯研磨粉碎纯化固体。合并两批产物得到1.98g(52％)目标产物。LC/MS(m/z)293.1(MH+)，Rt1.92分钟。
N-(6-(2-氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺
将Pd(OAc)2、BINAP、碳酸铯、THF(0.8mL)与5-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺(1eq)和喹啉-3-胺(2eq)混合。将混合物于110℃微波照射10分钟。将溶液过滤并减压浓缩。LC/MS(m/z)401.4(MH+)。
实施例2 N-(6-(6-氨基吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺的制备 5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)吡啶-2-基胺
将THF(130mL)和aq.Na2CO3(2M，40mL，80mmol)加至含有4，6-二氯代-2-吗啉代嘧啶(根据方法22制备；4.5g，19.2mmol)和5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(4.7g，21.2mmol)的玻璃压力容器中。将得到的混合物搅拌并吹入氩气1-2分钟。然后一次性加入催化剂二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(1.26g，1.54mmol)。将反应容器密封后，将反应物于85℃搅拌加热1小时。冷却至室温后，减压除去THF得到粘稠的残留物。加入EtOAc(450mL)和水(50mL)。剧烈搅拌1-2分钟后，过滤固体并用EtOAc(100mL)洗涤。分离有机层，水层用EtOAc(100mL)萃取。合并的有机层用饱和的NaCl溶液洗涤(1×50mL)，硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。粗品产物经硅胶色谱进一步纯化得到5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-吡啶-2-基胺(2.48g，44％)。LC/MS(m/z)292.1(MH+)，Rt2.06分钟。
[6-(6-氨基-吡啶-3-基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基]-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-胺
在玻璃压力容器中，将Pd(OAc)2(2.0mg，0.0082mmol)、BINAP(6.4mg，0.0102mmol)、碳酸铯(20.0mg，0.0615mmol)和THF(0.8mL)一起混合，于室温下搅拌1-3分钟。向得到的混合物中加入5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-吡啶-2-基胺(12.0mg，0.041mmol)，随后加入6-甲氧基吡啶-3-基胺(10.2mg，0.082mmol)。密封玻璃压力容器，于95℃搅拌90分钟。将反应混合物过滤并减压浓缩。将产物经制备性反相HPLC纯化得到[6-(6-氨基-吡啶-3-基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基]-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-胺(5.0mg，32％)。LC/MS(m/z)380.1(MH+)，Rt1.82分钟。
实施例3 5-(6-[2-(甲基磺酰胺)吡啶]-3-基)-2-吗啉代-嘧啶-4-基)吡啶-2-胺的制备 5-[6-(2-氟-吡啶-3-基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基]-吡啶-2-基胺
向5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)吡啶-2-基胺(在实施例2中制备)(252mg，0.87mmol)和2-氟-3-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(183mg，1.30mmol)的DME(4mL)加入Na2CO3水溶液(2M，1mL)，随后加入二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)-二氯甲烷(71mg，0.087mmol)。将混合物于120℃在微波中加热20分钟。自DME分离水相，用EtOAc萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥，过滤并浓缩得到粗品目标产物，无需进一步纯化可以直接用于下一步骤。LC/MS(m/z)353.3(MH+)，1.84分钟。
N-{3-[6-(6-氨基-吡啶-3-基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基]吡啶-2-基}-甲磺酰胺
向5-[6-(2-氟-吡啶-3-基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基]-吡啶-2-基胺(200mg，0.57mmol)和甲磺酰胺(216mg，2.3mmol)的NMP(8mL)溶液中加入Cs2CO3(372mg，1.1mmol)。将溶液于125℃加热4小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并经反相制备性HPLC纯化得到目标化合物。LC/MS(m/z)428.3(MH+)，Rt1.80分钟。
实施例4 N-(6-(6-氨基-4-氟吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺的制备 N-(6-溴-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺
向2，4，6-三溴嘧啶(5.40g，17.2mmol)的乙腈(60mL)溶液中加入喹啉-3-胺，随后加入DIEA(8.99mL，51.6mmol)。将反应混合物加热至45℃过夜。然后加入吗啉(1.50mL，17.2mmol)，将反应混合物继续加热4小时。然后将反应混合物冷却至室温，浓缩并溶于EtOAc(约500mL)，有机溶液用饱和的NaHCO3(3×)、H2O(2×)、盐水(1×)洗涤，硫酸钠干燥。然后在硅胶存在下蒸发，经柱色谱纯化(SiO2，15-25％EtOAc/己烷)得到N-(6-溴-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺。LC/MS(m/z)386.1(MH+)。
N-(6-(6-氨基-4-氟吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺
在氩气环境中，向4-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(根据方法10所述制备)的二氧六环(1.7mL，0.13mmol)溶液中加入N-(6-溴-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺(20mg，0.052mmol)、二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)-二氯甲烷加合物(11mg，0.013mmol)和2M碳酸钠水溶液(0.6mL，1.2mmol)。将压力容器密封，将反应混合物于120℃在微波中加热15分钟。将粗品产物在EtOAc(30mL)和饱和的碳酸氢钠(10mL)之间分配。分离有机层，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。产物经反相制备性HPLC纯化得到N-(6-(6-氨基-4-氟吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)喹啉-3-胺，为黄色粉末(14mg，26％)。LC/MS(m/z)418.0(MH+)，Rt2.31分钟。
实施例5 2-氨基-5-[2-吗啉-4-基-6-(喹啉-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-异烟腈的制备
在压力容器中，向粗品2-氨基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-4-甲腈(根据方法11所述制备)(25mg，0.13mmol)的二氧六环(1.8mL)溶液中加入(6-溴-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-喹啉-3-基-胺(19.4mg，0.05mmol)和aq.Na2CO3(2M，0.6mL，1.2mmol)。向反应混合物中充入氩气后，一次性加入二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(10.3mg，0.01mmol)。将压力容器密封，将混合物于120℃在微波中加热900秒。将粗品混合物过滤并减压浓缩。粗品产物经反相制备性HPLC纯化得到2-氨基-5-[2-吗啉-4-基-6-(喹啉-3-基氨基)-嘧啶-4-基]-异烟腈(4.4mg，20％)。LC/MS(m/z)425.0(MH+)，Rt2.03分钟。
实施例6 N6-甲基-2-吗啉代-N6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺的制备
N-甲基四氢-2H-吡喃-4-胺 将四氢-2H-吡喃-4-胺(90mg，0.9mmol)加至甲醛(37％的水溶液，0.091mL，1.13mmol)和乙酸(0.162mL)的ACN(0.8mL)溶液中。搅拌5分钟后，于室温下一次性加入Na(CN)BH3(60mg，1.13mmol)。1小时后，向反应物中加入过量的Cs2CO3直到其呈碱性。搅拌15分钟后，过滤反应物以除去固体并减压蒸发溶剂。粗品产物N-甲基四氢-2H-吡喃-4-胺无需纯化可以用于下面的置换反应。LC/MS(m/z)116.1(MH+)，Rt0.34分钟。
6-氯代-N-甲基-2-吗啉代-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-4-胺 将粗品N-甲基四氢-2H-吡喃-4-胺(104mg，0.9mmol)溶于NMP(0.8mL)。于室温下向该溶液中加入Cs2CO3(366mg，1.13mmol)和4-(4，6-二氯代嘧啶-2-基)吗啉(根据方法22制备)(80mg，0.34mmol)。将反应混合物加热至95℃。90分钟后，将反应混合物冷却至室温，过滤并经反相制备性HPLC纯化得到24mg(23％)纯的6-氯代-N-甲基-2-吗啉代-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-4-胺。LC/MS(m/z)313.2(MH+)，Rt2.61分钟。
N6-甲基-2-吗啉代-N6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺 在压力容器中，向5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2-胺(42mg，0.19mmol)、6-氯代-N-甲基-2-吗啉代-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)嘧啶-4-胺(12mg，0.038mmol)的THF(0.8mL)溶液和aq.Na2CO3(2M，0.27mL)的混合物中充入氩气，一次性加入二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(8mg，0.0095mmol)。将压力容器密封，将混合物于120℃在微波中加热600秒。将粗品产物过滤、减压浓缩并经反相制备性HPLC纯化得到N6-甲基-2-吗啉代-N6-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺(4.6mg，32％)。LC/MS(m/z)372.2(MH+)，Rt1.76分钟。
实施例7 N-(6-(2-氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-5-甲氧基喹啉-3-胺的制备
根据实施例2所述方法制备目标化合物将Pd(OAc)2、BINAP、碳酸铯、THF(0.8mL)与5-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺(1eq.)和5-甲氧基喹啉-3-胺(2eq)(其制备如方法20所述)混合。将混合物于110℃在微波照射中加热10分钟。将溶液过滤并减压浓缩。粗品产物经制备性反相HPLC纯化。LC/MS(m/z)431.2(MH+)，Rt2.03分钟。
实施例8 5-(2-吗啉代-6-(吡啶-3-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺的制备
将5-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺(10mg，0.034mmol，如实施例1所述制备)、叔丁醇钾(6mg，0.051mmol)、吡啶-3-醇(5mg，0.051mmol)和DMSO(0.5mL)混合到一起，于110℃加热2天。粗品产物直接采用制备性反相HPLC纯化得到5-(2-吗啉代-6-(吡啶-3-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺(5.1mg，32％)。LC/MS(m/z)352.1(MH+)，Rt1.83分钟。
实施例9 6-(2-氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代-N-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)嘧啶-4-胺的制备
向4-(5-(6-(2-氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氨基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(根据实施例1所述，采用5-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺和得自商业的4-(5-氨基吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁基酯制备，30mg，0.06mmol)中加入5mL的4N HCl的二氧六环溶液。搅拌1小时后，将溶液真空浓缩。残留物溶于3∶1的乙腈和水中，冷冻干燥得到目标产物。LC/MS(m/z)435.2(MH+)，Rt1.52分钟。
实施例10 4-(三氟甲基)-5-(2，6-二吗啉代嘧啶-4-基)吡啶-2-胺的制备
向2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶(根据方法22制备，2.0g，8.54mmol)的NMP(14mL)浆状物中加入三乙胺(1.43mL，10.25mmol)。将该不均匀的混合物搅拌15分钟，然后采用吗啉(0.75mL，8.54mmol)处理。在氩气环境中于85℃回流2小时后，将溶液冷却，然后加入EtOAc(160mL)。有机溶液采用25mL的NaHCO3(sat.)(2×)、水(2×)和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗品产物溶于200mL EtOAc，通过二氧化硅垫过滤，再用EtOAc洗涤，得到2.2g(93％)2，4-二吗啉代-6-氯代嘧啶，为灰白色固体LCMS(m/z)285.0(MH+)，1H NMR(CDCl3)δ 5.86(s，1H)，3.71-3.76(m，12H)，3.52-3.56(m，4H)。
4-(三氟甲基)-5-(2，6-二吗啉代嘧啶-4-基)吡啶-2-胺
向2，4-二吗啉代-6-氯代嘧啶(4.1g，14.3mmol)和4-(三氟甲基)-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(16.5g，57.3mmol)在1，2-二甲氧基乙烷和2M Na2CO3(3∶1)中的不均匀混合物中通氩气20分钟。加入1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(292mg，0.36mmol)，将含有该混合物的压力玻璃容器密封。然后将反应混合物于90℃加热15小时，冷却并用EtOAc(300mL)稀释。有机溶液采用300mL的水Na2CO3(sat.)NH4OH(conc.)＝5∶4∶1的混合物洗涤，然后再用NH4Cl(sat.)和盐水(2×)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗品产物经二氧化硅色谱纯化(含有0.1％TEA的50-90％EtOAc/己烷)得到5.62g(95％)4-(三氟甲基)-5-(2，6-二吗啉代嘧啶-4-基)吡啶-2-胺，为灰白色固体。LCMS(m/z)411.3(MH+)；1H NMR(CDCl3)δ 8.27(s，1H)，6.78(s，1H)，5.97(s，1H)，4.77(bs，2H)，3.59-3.80(m，12H)，3.58-3.61(m，4H)。
实施例11 N-(6-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-基)-6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺的制备
根据实施例2中的Buchwald反应的通用方法，使6-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-胺(根据方法16制备)与5-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺反应，合成N-(6-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)吡啶-3-基)-6-(6-氨基-4-(三氟甲基)-吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺。LC/MS(m/z)559.2(MH+)，Rt1.92分钟.1H NMR(DMSO)δ10.27(1H，bs，NH)；8.41(1H，bs)；8.17(1H，s)；7.98和7.94(1H，2b双峰，J＝9.0Hz，2个构像异构体)；6.97(1H，s)；6.90和6.84(1H，2双峰，J＝9.0Hz，2个构像异构体)；6.23(1H，bs)；5.25和5.15(1H，2多峰，2个构像异构体)；3.66(8H，bs)；3.44(1H，m)；3.35(2H，m)；3.10(2H，m)；2.22(2H，m)；2.03(2H，m)；1.27(6H，由于构像异构体而存在重叠的双峰，app.三峰，J＝5.7Hz)。
实施例12 N-(5-((二乙基氨基)甲基)噻唑-2-基)-6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺的制备 5-((二乙基氨基)甲基)噻唑-2-胺
于0℃，将2-氨基噻唑-5-甲醛(1eq)加至搅拌的二乙胺(4eq)的无水MeOH溶液中。然后于0℃分次加入氰基硼氢化钠(1.5eq)。将反应混合物于70℃搅拌10小时。完成后，将溶液用水淬灭，用EtOAc萃取。合并的有机萃取物经硫酸钠干燥并浓缩得到粘稠棕色油状物。LC/MS(m/z)186.2(MH+)，Rt0.33分钟。

目标化合物根据实施例2中所述的通用方法合成。LC/MS(m/z)509.2(MH+)，Rt1.98分钟。1H NMR(DMSO)δ 11.0，(2H，bs，NH2)，8.17(1H，s)；7.63(1H，s)；7.08(1H，bs)，6.40(1H，s)；4.48(2H，bd，J＝4.2Hz)；3.80(4H，m)；3.68(4H，m)；3.03(4H，bq，J＝6.9Hz)；1.30(6H，t，J＝6.9Hz)。
实施例13 6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-N-(4-(2-(二乙基氨基)乙基)噻唑-2-基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺的合成 2-(2-氨基噻唑-4-基)-N，N-二乙基乙酰胺
将2-(2-氨基噻唑-4-基)乙酸(1eq)、HOAT(1eq)、EDC(1.1eq)、TEA(1eq)和HNEt2(1eq)在DMA中的混合物于室温下搅拌6小时。然后将反应混合物用水淬灭并浓缩。将残留物溶于搅拌的EtOAc和NaHCO3(sat.)的4∶1混合物中。分离两相，有机液用盐水洗涤，硫酸钠干燥并浓缩至干。得到的固体用Et2O洗涤二次，干燥得到目标产物，为白色固体。LC/MS(m/z)214.0(MH+)，Rt1.13分钟。
4-(2-(二乙基氨基)乙基)噻唑-2-胺
于0℃，将2-(2-氨基噻唑-4-基)-N，N-二乙基乙酰胺(1eq)的THF悬浮液滴加至剧烈搅拌的LAH(1eq)的THF悬浮液中。将混合物于室温下搅拌2小时。此时，将得到的混合物冷却至0℃，滴加1份H2O，随后滴加1份10％NaOH，最后滴加3份H2O。将混合物搅拌10分钟，过滤，固体残留物用THF洗涤。收集滤液，浓缩至干。得到的粗品产物用Et2O洗涤二次，干燥得到粘稠的棕色油状物。LC/MS(m/z)200.1，(MH+)，Rt0.34分钟。

该目标化合物根据实施例2中所述的通用方法合成。LC/MS(m/z)523.1(MH+)，Rt2.11分钟。1H-NMR(DMSO)δ 8.15(1H，s)；7.08(1H，s)；6.96(1H，s)；6.38(1H，s)；3.78(4H，m)；3.65(4H，m)；3.31(2H，m)；3.13(4H，q，J＝7.2Hz)；3.02(2H，m)；1.20(6H，t，J＝7.2Hz)。
实施例14 N6-(2-甲氧基乙基)-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺的制备
在密封的压力容器中，向6-氯代-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2′-胺(10mg，0.03mmol)和2-甲氧基乙胺(0.018mL，0.20mmol)的NMP(0.8mL)混合物中充入氩气，于155℃在微波中加热1000秒。将反应混合物过滤并经反相制备性HPLC纯化得到N6-(2-甲氧基乙基)-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺，为TFA盐(4.0mg，30％)。LC/MS(m/z)332.2(MH+)，Rt1.44分钟。
实施例15 2-吗啉代-6-(2-苯基吗啉代)-4，5’-联嘧啶-2′-胺的制备
在密封的压力容器中，向6-氯代-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2′-胺(10mg，0.03mmol)、Cs2CO3(27mg，0.09mmol)和2-苯基吗啉(11mg，0.068mmol)的NMP(0.5mL)混合物中充入氩气，于170℃在微波中加热600秒。将反应混合物过滤并经反相制备性HPLC纯化得到2-吗啉代-6-(2-苯基吗啉代)-4，5’-联嘧啶-2′-胺，为TFA盐(7.2mg，45％)。LC/MS(m/z)420.1(MH+)，Rt2.20分钟。
实施例16 N6-叔-丁基-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺的制备
在密封的压力容器中，向6-氯代-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2′-胺(10mg，0.03mmol)和叔-丁基胺(12.5mg，0.17mmol)的NMP(0.5mL)混合物中充入氩气，于175℃在微波中加热800秒。向反应物中加入叔-丁基胺(50mg，0.68mmol)。将反应物于175℃在微波中再次加热800秒，然后于175℃再次加热800秒直到原料消失。将粗品产物过滤。粗品产物经反相制备性HPLC纯化得到N6-叔-丁基-2-吗啉代-4，5’-联嘧啶-2’，6-二胺，为TFA盐(0.9mg，7％)。LC/MS(m/z)330.2(MH+)，Rt1.96分钟。
实施例17 1-(2-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-6-吗啉代-嘧啶-4-基)哌啶-2-酮的制备 5-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基氨基)戊酸
将5-氨基戊酸(140mg，1.19mmol)、4-(2，6-二氯代嘧啶-4-基)吗啉(根据方法22制备；234mg，1.0mmol)和DIEA(0.530mL，3.0mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(6mL)。将反应溶液于40℃搅拌40小时。反应物用EtOAc(100mL)稀释，用0.5M HCl(40mL)、水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤并蒸发得到固体。粗品产物经硅胶柱色谱纯化，采用80％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到5-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基氨基)戊酸，为白色固体(190mg，60％)。LC/MS(m/z)315.0(MH+)，Rf1.79分钟。
1-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基)哌啶-2-酮
在氩气环境中，向HATU(304mg，0.8mmol)、HOAT(82mg，0.6mmol)和DIEA(0.209mL，1.2mmol)的氯仿(20mL)溶液中缓慢加入5-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基氨基)戊酸(190mg，0.6mmol)的氯仿(10mL)溶液。将反应溶液于室温下搅拌5小时。反应完成后，将溶液蒸发至干得到白色固体，将其经硅胶柱色谱纯化，采用40％EtOAc/己烷洗脱得到1-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基)哌啶-2-酮，为白色固体(62mg，35％)。LC/MS(m/z)297.0(MH+)，Rt2.74分钟。
1-(2-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-6-吗啉代嘧啶-4-基)哌啶-2-酮
在氩气环境中，向1-(2-氯代-6-吗啉代嘧啶-4-基)哌啶-2-酮(16mg，0.05mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(根据方法4制备；23mg，0.08mmol)和二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(8mg，0.009mmol)的二氧六环(1.1mL)悬浮液中加入2M碳酸钠水溶液(0.4mL，0.8mmol)。将反应混合物于120℃在微波中加热1000秒。将粗品产物在EtOAc(30mL)和饱和的碳酸氢钠(10mL)之间分配。分离有机层，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗品产物经制备性反相HPLC纯化得到1-(2-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-6-吗啉代嘧啶-4-基)哌啶-2-酮，为黄色固体(8.8mg，42％)。LC/MS(m/z)423.0(MH+)，Rt2.25分钟。
实施例18 1-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮的制备 N1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-N2-苯基乙-1，2-二胺
向4-(4，6-二氯代嘧啶-2-基)吗啉(根据方法22所述制备；932mg，4.0mmol)和DIEA(0.7mL，4.0mmol)的ACN(40mL)溶液中缓慢加入纯N1-苯基-乙-1，2-二胺(0.523mL，4.0mmol)。将反应混合物于70-80℃、氮气环境下搅拌。20小时后，将反应混合物冷却，减压除去溶剂。粗品产物在EtOAc(120mL)和0.1M NaHCO3(50mL)之间分配。有机层用另外的0.1M NaHCO3(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥，过滤并浓缩得到N1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-N2-苯基乙-1，2-二胺，为灰白色固体(1.29g，96％)。
LC/MS(m/z)334.0(MH+)，Rt1.94分钟。
1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮
于0℃、氮气环境下，向N1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-N2-苯基乙-1，2-二胺(100mg，0.3mmol)的DCM(15mL)溶液中缓慢加入光气的甲苯溶液(1.89M，0.32mL，0.6mmol)。20分钟后，将反应物温热至室温。18小时后，加入DIEA(0.42mL，2.4mmol)，将反应溶液加热至40-50℃40小时。减压蒸发反应混合物，粗品产物经硅胶色谱纯化，采用70％EtOAc/己烷洗脱得到1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮，为白色固体(94mg，87％)。LC/MS(m/z)360.1(MH+)，Rt3.41分钟。
1-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮
在氩气环境中，向1-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮(18mg，0.05mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(根据方法4所述制备；18mg，0.06mmol)和二氯代[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(3.2mg，0.004mmol)的DME(1.2mL)悬浮液中加入2M碳酸钠水溶液(0.4mL，0.8mmol)。将反应混合物于95℃搅拌5小时。粗品产物在EtOAc(30mL)和饱和的碳酸氢钠(10mL)之间分配。分离有机层，硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗品产物经制备性HPLC纯化得到1-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-3-苯基咪唑烷-2-酮，为浅黄色粉末(8.4mg，总收率35％)。
LC/MS(m/z)448.1(MH+)，Rt3.29分钟。
实施例19 1-(4-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-基)乙酮的制备 步骤12-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶的烷氧基化
于0℃、氩气环境下，向N-Boc-4-羟基哌啶(2.58g，12.81mmol)的四氢呋喃溶液中加入氢化钠(60％，512mg，12.81mmol)。搅拌20分钟后，通过注射器加入2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶(2.0g，8.54mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液。将冰浴温热至室温，将溶液搅拌14小时。此时，将反应混合物用水(2mL)淬灭，在EtOAc(350mL)和Na2CO3(sat.)(75mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤(50mL)，经硫酸钠干燥，过滤、浓缩，残留物经SiO2色谱纯化(15-20％EtOAc的己烷溶液)得到4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为白色固体(2.64g，77％)。LCMS(m/z)399.1(MH+)。1H NMR(CDCl3)δ6.00(s，1H)，5.18(m，1H)，3.74(s，8H)，3.64-3.74(m，2H)，3.28-3.38(m，2H)，1.86-1.96(m，2H)，1.68-1.78(m，2H)，1.44(s，9H)。
步骤22-吗啉代-4-烷氧基-取代的-6-氯代嘧啶的Suzuki反应
将4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(250mg，0.63mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(根据方法4制备，325mg，1.13mmol)和Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(25.6mg，0.031mmol)在二甲氧基乙烷/2M Na2CO3(31，8mL)中的混合物在微波照射下于120℃加热15分钟。反应混合物在EtOAc(200mL)和Na2CO3(sat.)(50mL)之间分配，分离有机层，用盐水洗涤(50mL)，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩并经二氧化硅色谱纯化(50-75％EtOAc/己烷)得到为白色固体的产物(207mg，63％)。LCMS(m/z)525.2(MH+)。
步骤3N-Boc保护基团的水解
将4-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(649mg，1.24mmol)和4M HCl/二氧六环(15mL，60mmol)的混合物于室温下放置14小时。真空除去挥发物后，加入乙醚(50mL)，将混合物超声处理并浓缩得到目标产物的二盐酸盐，为灰白色固体。
LCMS(m/z)425.1(MH+)。
步骤4酰化反应
向4-(三氟甲基)-5-(2-吗啉代-6-(哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)吡啶-2-胺的NMP溶液中加入二异丙基乙胺(5eq)和乙酰氯(1.5eq)。将反应混合物于室温下搅拌2小时，然后直接通过反相HPLC纯化，冷冻干燥得到为TFA盐的产物。或者，在经反相HPLC纯化后，产物的游离碱可以通过碱化后萃取到EtOAc中，然后经硫酸钠干燥并真空除去挥发物进行分离。LCMS(m/z)467.1(MH+)。
实施例20 5-(6-((S)-哌啶-3-基氧基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺的制备
为进行2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶的烷氧基化，根据实施例19步骤1制备3-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸(S)-叔丁基酯(87％)。LCMS(m/z)399.1(MH+)。Boc保护的中间体根据实施例19步骤2中所述的Suzuki反应进行制备，经SiO2色谱纯化(30-60％EtOAc/己烷；78％)。LCMS(m/z)526.0(MH+)。根据实施例19步骤3中所述方法将N-Boc保护基团裂解制备目标化合物。LCMS(m/z)425.1(MH+)。
实施例21 5-(6-((R)-哌啶-3-基氧基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺的制备
为进行2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶的烷氧基化，根据实施例19步骤1制备3-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸(R)-叔丁基酯(82％)。LCMS(m/z)399.1(MH+)。Boc保护的中间体根据实施例19步骤2中所述的Suzuki反应进行制备，经硅胶色谱纯化(30-60％EtOAc/己烷，54％)。LCMS(m/z)526.0(MH+)。根据实施例19步骤3中所述方法将N-Boc保护基团裂解制备目标化合物。LCMS(m/z)425.1(MH+)。
实施例22 1-((R)-3-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)吡咯烷-1-基)乙酮的制备
为进行2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶的烷氧基化，根据实施例19步骤1制备3-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)吡咯烷-1-甲酸(R)-叔丁基酯(41％)。LCMS(m/z)385.0(MH+)。
Boc保护的中间体根据实施例19步骤2中所述的Suzuki反应进行制备，碱化后用EtOAc萃取，然后通过反相HPLC纯化和分离为游离碱(71％)。LCMS(m/z)511.0(MH+)。根据实施例19步骤3中所述方法进行N-Boc保护基团的裂解。LCMS(m/z)411.0(MH+)。根据实施例19步骤4中所述方法制备目标化合物。LCMS(m/z)453.1(MH+)，Rt2.18。
实施例23 1-((S)-3-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)吡咯烷-1-基)乙酮的制备
为进行2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶的烷氧基化，根据实施例19步骤1制备3-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)吡咯烷-1-甲酸(S)-叔丁基酯(99％)。LCMS(m/z)385.0(MH+)。Boc保护的中间体根据实施例19步骤2中所述的Suzuki反应进行制备，碱化后用EtOAc萃取，然后通过反相HPLC纯化和分离为游离碱(72％)。LCMS(m/z)511.0(MH+)。根据实施例19步骤3中所述方法进行N-Boc保护基团的裂解。LCMS(m/z)411.0(MH+)。根据实施例19步骤4中所述方法制备目标化合物。LCMS(m/z)453.1(MH+)，Rt2.18。
实施例24 4-(三氟甲基)-5-(2-吗啉代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)嘧啶-4-基)吡啶-2-胺的制备
用4-羟基四氢吡喃对2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶进行烷氧基化，根据实施例19步骤1制备4-(4-氯代-6-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)嘧啶-2-基)吗啉(80％)。LCMS(m/z)300.1(MH+)。根据实施例19步骤2所述的Suzuki反应制备目标化合物。LC/MS(m/z)426.1(MH+)，Rt2.26分钟。
实施例25 5-(6-((R)-四氢呋喃-3-基氧基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺的制备
采用(R)-3-羟基四氢呋喃对2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶进行烷氧基化，根据实施例19步骤1制备(R)-4-(4-氯代-6-(四氢呋喃-3-基氧基)嘧啶-2-基)吗啉(81％)。LCMS(m/z)286.1(MH+)。根据实施例19步骤2所述的Suzuki反应制备目标化合物。LC/MS(m/z)412.1(MH+)。
实施例26 5-(6-((S)-四氢呋喃-3-基氧基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺的制备
采用(S)-3-羟基四氢呋喃对2-吗啉代-4，6-二氯代嘧啶进行烷氧基化，根据实施例19步骤1制备(S)-4-(4-氯代-6-(四氢呋喃-3-基氧基)嘧啶-2-基)吗啉(85％)。LCMS(m/z)286.1(MH+)。根据实施例19步骤2所述的Suzuki反应制备目标化合物。LC/MS(m/z)412.1(MH+)。
实施例27 4-(三氟甲基)-5-(2-吗啉代-6-(哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺的制备
根据实施例19步骤2所述，通过4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯与5-(4，4，5，5-四甲基(1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基))-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基胺(根据方法5制备)的Suzuki反应，制备4-(6-(2-氨基-4-(三氟甲基)嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。粗品产物经硅胶色谱纯化(30-50％EtOAc/己烷)(63％)。LCMS(m/z)526.0(MH+)。根据实施例19步骤3所述，通过裂解N-Boc保护基团制备目标化合物。LCMS(m/z)426.0(MH+)。
实施例28 5-(2-吗啉代-6-(哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-2，4-二胺的制备
根据实施例19步骤2所述，通过4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2，4-二胺(根据方法7制备)的Suzuki反应，制备4-(6-(2，4-二氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯。将其碱化后用EtOAc萃取，然后粗品产物通过反相HPLC纯化和分离为游离碱(70％)。LCMS(m/z)473.1(MH+)。根据实施例19步骤3所述，通过裂解N-Boc保护基团制备目标化合物。LCMS(m/z)373.0(MH+)。
实施例29 1-((R)-3-(6-(2，4-二氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-基)乙酮的制备
根据实施例19步骤2所述，通过4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯与5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶-2，4-二胺的Suzuki反应，制备3-(6-(2，4-二氨基嘧啶-5-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸(R)-叔丁基酯。将其碱化后用EtOAc萃取，然后粗品产物通过反相HPLC纯化和分离为游离碱(77％)。LCMS(m/z)473.1(MH+)。根据实施例19步骤3所述裂解N-Boc保护基团。LCMS(m/z)373.0(MH+)。目标化合物根据实施例19步骤4所述合成。LCMS(m/z)460.1(MH+)，Rt2.51。
实施例30 2-氨基-5-(2-吗啉代-6-(N-酰基-哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-4(3H)-酮的制备
将4-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(500mg，1.26mmol)、4-甲氧基-2-氨基嘧啶基硼酸酯(根据方法8制备，630mg，2.51mmol)和Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(51mg，0.063mmol)在二甲氧基乙烷和2MNa2CO3(3∶1，12mL)中的混合物在微波照射下于120℃加热15分钟。反应混合物在EtOAc(200mL)和Na2CO3(sat.)(50mL)之间分配，分离有机层，用盐水洗涤(50mL)。合并的水层用EtOAc(2×100mL)进一步萃取，合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。向混合物中加入4M HCl/二氧六环(20mL)以除去Boc基团。放置12小时后，真空除去挥发物，残留物在CH2Cl2(200mL)和1N NaOH(50mL)之间分配。分离后，水层再用CH2Cl2(200mL)萃取，然后用CHCl3(2×150mL)萃取。将合并的有机层浓缩得到1，6-二氢-6-甲氧基-5-(2-吗啉代-6-(哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺(464mg)。将粗品化合物和吗啉(0.9mL，10.45mmol)的NMP(10mL)溶液在微波照射下于200℃加热15分钟，将甲氧基嘧啶转化为嘧啶酮。加入另外的吗啉(0.9mL，10.45mmol)，将溶液在微波照射下于200℃加热15分钟，然后再加热10分钟。冷却后，将产物直接经反相HPLC纯化。冷冻干燥后，分离得到2-氨基-5-(2-吗啉代-6-(哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-4(3H)-酮的二TFA盐，为灰白色固体(325mg，45％)。LCMS(m/z)374.1(MH+)。根据实施例19步骤4通过仲氨基的酰化制备目标化合物。LCMS(m/z)416.0(MH+)，Rt1.67。
实施例31 2-氨基-5-(2-吗啉代-6-(N-甲氧基羰基-哌啶-4-基氧基)嘧啶-4-基)嘧啶-4(3H)-酮的制备
根据实施例30制备目标化合物，但是在最后步骤中采用氯代甲酸甲酯代替乙酰氯。LCMS(m/z)432.0(MH+)，Rt2.05。
实施例32 6-[6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基]-N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-吗啉代嘧啶-4-胺的制备
在玻璃压力容器中，将Pd(OAc)2(5.0mg，0.022mmol)、BINAP(17.0mg，0.028mmol)、碳酸铯(72.0mg，0.22mmol)和THF(2.0mL)混合并于室温下搅拌1-3分钟。向得到的混合物中加入5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-吡啶-2-基胺(40.0mg，0.11mmol)，随后加入4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯胺(37.0mg，0.16mmol)。将玻璃压力容器密封，搅拌并在微波中于110℃加热10分钟。将反应混合物过滤并减压浓缩。将产物经制备性反相HPLC纯化得到6-[6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基]-N-[4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)苯基]-2-吗啉代嘧啶-4-胺(3.0mg，5％)。LC/MS(m/z)558.3(MH+)，Rt1.90分钟。
实施例33 6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-N-(4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺的制备
在玻璃压力容器中，将Pd(OAc)2(5.0mg，0.02mmol)、BINAP(17.0mg，0.028mmol)、碳酸铯(72.0mg，0.22mmol)和THF(2.0mL)混合并于室温下搅拌1-3分钟。向得到的混合物中加入5-(6-氯代-2-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-吡啶-2-基胺(40.0mg，0.11mmol)，随后加入4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯胺(46.6mg，0.16mmol)。将玻璃压力容器密封，搅拌并在微波中于120℃加热10分钟。将反应混合物过滤并减压浓缩。残留物经制备性反相HPLC纯化得到6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-N-(4-(1-异丙基哌啶-4-基氧基)-3-甲氧基苯基)-2-吗啉代嘧啶-4-胺(6.6mg，10％)。LC/MS(m/z)588.3(MH+)，Rt1.92分钟。
实施例34 N-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺的合成
将N-(6-氯代-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺(15mg，0.040mmol)、5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(23mg，0.080mmol)和1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯(II)(6.6mg，0.0080mmol)的0.5mL的1，4-二氧六环溶液和0.05mL的2M aq.碳酸钠在微波中于120℃加热600秒。粗品产物经反相制备性HPLC纯化得到N-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺。LC/MS(m/z)500(MH+)，Rt2.46分钟。
实施例35 N-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-5-甲基-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺的制备
N-(6-(6-氨基-4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-5-甲基-2-吗啉代嘧啶-4-基)-4-苯基噻唑-2-胺根据实施例35进行制备。LC/MS(m/z)514(MH+)，Rt2.62分钟。
表1































































表1中的化合物根据上面所提供的方法1-30和实施例1-35合成。对Akt磷酸化抑制的PI3K IC50值和pSer473 Akt EC50值可以分别根据生物学方法1和2进行测定。表1中所示的细胞增殖EC50值根据生物学方法3测定。
表1显示了根据本文中所述的生物学方法1、2、3和4测定的化合物的IC50和EC50值。在表1中，“+”代表该化合物的IC50或EC50值>25μM；“++”代表化合物的IC50或EC50值<25μM；“+++”代表化合物的IC50或EC50值>10μM；“++++”代表化合物的IC50或EC50值>1μM。表1中“N/D”代表该值没有测定。
表1中的每一个化合物对PI3K的IC50值均小于10μM。表1中的许多化合物对PI3K的IC50值均小于1μM，有些甚至小于0.1μM。为此，每一个化合物均可以单独优选并且可以优选为一组。表1中所示的PI3激酶α的IC50值根据本文中所公开的生物学方法1中的ATP消耗分析测定。
另外，表1中的许多化合物对pSer473 Akt磷酸化抑制的EC50值小于10μM。这些化合物中的许多对pAkt抑制的EC50值小于1μM，有些甚至小于0.1μM。表1显示了抑制pSER473 AKT磷酸化的EC50值。该分析根据本文中所公开的生物学方法2进行。
另外，根据生物学方法4对表1中的许多化合物进行了研究，在细胞增殖分析中测定了它们的抑制活性。许多这些化合物的EC50值小于1μM，有些甚至小于0.1μM，证明它们具有抑制细胞增殖的能力。表1显示了抑制卵巢癌细胞系A2780/的细胞增殖的EC50值。
生物学方法1 磷酸化分析 分析1均质液相分析(Homogenous solution phase assay) 将实验化合物溶于DMSO，以每孔1.25μL的量直接分布到384孔闪光板上(flashplate)。为开始反应，向每一个孔中加入20μL的6nM PI3激酶，随后加入20μL的400nM ATP，后者含有痕量的放射标记的ATP和900nM的1-α-磷脂酰肌醇(PI)。将板简单离心以除去任何存在的空气。将反应进行15分钟，然后通过加入20μL的100mm EDTA中止。将该被中止的反应物于室温下温育过夜，从而可以通过疏水性作用使得脂类底物与闪光板的表面结合，然后洗涤出各孔中的液体，采用闪烁计数测定标记的底物。
分析2一步固相分析(One step solid phase assay) 该方法与分析1相似，但是首先将脂类底物(1-α-磷脂酰肌醇(PIP))溶于包被缓冲液中，于室温下在闪光板上温育过夜，从而通过疏水性作用使得脂类底物与闪光板的表面结合。然后将未结合的底物洗除。在分析进行的当天，向每一个孔中加入20μL的6nM PI3激酶，随后加入20μL含有痕量ATP的400nM ATP。将化合物与酶和ATP一起加至脂类包被的板中。将板简单离心以除去任何存在的空气。将反应进行2-3个小时，然后通过加入20μL的100mm EDTA中止，或者通过直接冲洗板中止反应。采用闪烁计数测定磷酸化的脂类底物。
分析3ATP消耗分析 将实验化合物溶于DMSO，以每孔1.25μL的量直接分布到黑色384孔板上。为开始反应，向每一个孔中加入25μL的10nM PI3激酶和5μg/mL1-α-磷脂酰肌醇(PI)，随后加入25μL的2μM ATP。反应进行直到约50％的ATP被消耗，然后通过加入25μL的KinaseGlo溶液(购自Promega)中止反应。将该被中止的反应物温育5分钟，然后通过荧光测定剩余的ATP。
生物学方法2 监测PI3K通路的pSer473Akt分析 该方法描述了采用本发明的具有代表性的抑制剂化合物处理后测定PI3K介导的pSer473-Akt状况的分析方法。
将A2780细胞在补充有10％FBS、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠和抗生素的DMEM中培养。将细胞在相同的介质中以每孔15000个细胞的密度涂布于96孔组织培养板中，使外面的孔保持空白，使其结合过夜。
将溶于DMSO中的受试化合物再在DMSO中稀释，使其浓度为所需浓度的500倍，然后在培养基中稀释为最终浓度的2倍。将相同体积的2×化合物加至96孔板的细胞中，于37℃培养1小时。然后除去介质和化合物，将板冷却，在补充有磷酸酶和蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液(150mmNaCl，20mm Tris pH7.5，1mm EDTA，1mm EGTA，1％Triton X-100)中进行细胞裂解。充分混合后，将细胞裂解产物转移到pSer473Akt和总Akt分析板(得自Meso Scale Discovery(MSD))中，于4℃振摇培养过夜。将板用1×MSD洗涤缓冲液洗涤，采用次级抗体测定收集的被分析物。与次级抗体一起于室温下培养1-2小时后，将板再次洗涤，向各孔中加入1.5×浓度的读板缓冲液(Read Buffer)T(MSD)。
分析测定在SECTOR Imager 6000仪器(Meso Scale Discovery)上进行。得自pSer473Akt和总Akt分析的信号的比例用于校正任何变异性，自采用化合物处理的细胞中得到的总信号与单独采用DMSO得到的信号的比计算pSer473Akt的抑制百分率，用于测定每一个化合物的EC50值。
生物学方法3 在卵巢癌异种移植模型中的药理学靶向调节和功效研究 将获自George Coukos(Fox Chase Cancer Center，University ofPennsylvania，Philadelphia，PA)的A2780卵巢癌细胞保存在补充有10％热灭活的胎牛血清以及1％谷氨酰胺的DMEM(Invitrogen，Inc.)中。根据Coukos博士及其同事推荐的方法进行细胞增殖。使用雌性nu/nu小鼠(8-12周龄，20-25g，Charles River)进行所有的体内药理学研究。根据州和联邦对于人类治疗和实验室动物照料的指导原则饲养这些小鼠，随意给予食物和水。采用胰蛋白酶-EDTA(Invitrogen，Inc.)自中-对数期(mid-log phase)收集癌细胞。将500万个细胞通过皮下注射到每一个小鼠的右肋腹部。当肿瘤体积达到300-400mm3时采用化合物治疗进行PK/PD研究，当肿瘤体积达到200-300mm3时采用化合物治疗进行功效研究。所有的化合物治疗均为口服给药。肿瘤体积采用StudyDirector软件进行测定。
为进行体内靶向调节PK/PD时间-进程研究，口服给予单剂量化合物(60或100mg/kg)或载体后，在30分钟至36小时中的不同的时间点自各个小鼠切除肿瘤组织。对于PK/PD剂量依赖性研究，给予携带肿瘤的小鼠不同浓度的单次口服剂量的化合物(10、30、60和100mg/kg)或载体，给药后于10小时或24小时切除肿瘤。采用预先装有硫酸肝素的注射器通过心脏穿刺采集血样。将切除的肿瘤在干冰上迅速冷冻，采用液氮冷却的cryomortar和乳钵将其粉化，在冷却的细胞提取缓冲液(Biosource)中裂解，所述缓冲液含有蛋白酶抑制剂片剂(完全的(Complete)；不含EDTA，Amersham)。将肿瘤细胞裂解产物于4℃以300×g离心10分钟后取出上清液，通过BCA(BioRad)测定每一份上清液中的蛋白质浓度。将得自每一份肿瘤细胞裂解产物的相同量的蛋白质置于10％Tris-甘氨酸凝胶(Invitrogen)上进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，然后将蛋白质自该凝胶转移到PVDF膜上。采用能够识别磷酸基AktSer473或磷酸基AktThr308(phosphoAktThr308)(Cell Signaling)的抗体、然后是与HRP轭合的次级羊抗兔IgG(Amersham)探测该膜。采用X-射线胶片通过增强的化学发光目测阳性带。相似的方法用于测定相同肿瘤裂解产物中总AKT，用作每一次测定中总蛋白质的归一化。扫描X-射线胶片上阳性带的密度，每一个化合物的靶向调节表达为每一个化合物与载体治疗相比的抑制百分率。靶向抑制的排列次序(<50％、50-75％、>75％，与载体治疗相比)用于表示化合物的靶向调节活性。
对于功效研究，将A2780癌细胞(100μl的DMEM培养基中含有5×106个)通过皮下注射到每一个nu/nu小鼠的右肋腹部。当平均肿瘤体积达到约200mm3时，每日口服给予小鼠(q.d.)或(b.i.d.)在100μl介质(incipient)中的三种不同浓度的化合物(通常为10、30和100mg/kg)。采用每日临床观察的方法每周测定二次肿瘤生长和动物体重以监测与治疗有关的潜在毒性。通常，当载体治疗组中的肿瘤达到2500mm3或观察到有临床不良反应时终止研究。PI3K信号通路的激活导致Ser473和/或Thr308下游信号分子Akt磷酸化。在给予60或100mg/kg的单一化合物剂量后，于30分钟至36小时内的不同时间点在A2780异种移植肿瘤中测定AktSer473磷酸化的化合物调节。表2总结了具有代表性的化合物在8小时或10小时对AKTSer473磷酸化的调节。与载体治疗相比，抑制百分率依次为<50％、50-75％和>75％。
表2.本发明的具有代表性的嘧啶化合物的AktSer473磷酸化调节作用。
化合物91的功效在A2780肿瘤异种移植模型中进行实验。携带A2780肿瘤的小鼠以10和60mg/kg的剂量每天二次口服给予化合物91。观察60mg/kg治疗中肿瘤生长的抑制(50％)，而在10mg/kg的治疗中没有观察到抑制活性(图1)。
由于其靶向调节时间短(50％的抑制持续8小时)，所以60mg/kg q.d.的化合物91对肿瘤生长的抑制最温和。因此，在A2780模型中评价三种其它化合物(化合物10、化合物76和化合物66)的抗肿瘤功效，而这些化合物已经被证明在A2780肿瘤中具有较长的AktSer473抑制(>50％的抑制>10hr)。当肿瘤体积达到约200mm3时，每天口服给予化合物。化合物10被证明为剂量依赖性肿瘤生长抑制30mg/kg时为40％，60mg/kg时为70％，100mg/kg时肿瘤生长停滞(图2)。采用化合物76以30和60mg/kg的剂量进行治疗时，在A2780肿瘤模型中也观察到相似的剂量依赖性肿瘤生长抑制(图3)，而化合物84被发现具有较弱的抗肿瘤活性(60mg/kg时<50％TGI)(图4)。
以更频繁的剂量方案(b.i.d)评价化合物10的抗肿瘤活性。如图5所示，当口服给药b.i.d.时，剂量为30mg/kg的化合物10显示具有显著的抗肿瘤活性。非常明显，与相同的日剂量方案(60mg/kg，图2)相比，30mg/kg b.i.d.对肿瘤生长抑制更为有效。在本研究中化合物可以被很好耐受。该结果显示化合物10在A2780肿瘤中持久但并不特别显著的靶向抑制(贯穿整个给药期间，但只有<75％的靶向抑制)能够诱导显著的抗肿瘤功效。
尽管已经对本发明优选的实施方案进行了阐明和描述，但是，可以理解，本文中可以有各种变通但并不背离本发明的精神和范围。
生物学方法4 A2780细胞中细胞增殖研究 本发明化合物抑制细胞增殖的性能可以采用Cell Titer Glo(可购自Promega Corporation的分析试剂)测定。在加入化合物至少2小时之前，将A2780卵巢癌细胞以每孔1000个细胞的密度接种于TC处理的96孔板的含有DMEM各孔中，其中含有10％FBS、1％丙酮酸钠和1％青霉素链霉素。对于每一受试化合物的每一个浓度，将2μl(500×)等份的化合物或100％DMSO在500μl培养基中稀释为2×倍浓度，然后在细胞中稀释为1×浓度。将细胞于37℃、5％CO2环境中培养72小时。培养72小时后，加入Cell Titer Glo试剂以测定暴露于化合物后剩余的存活细胞的数量，计算EC50值。根据生产商的说明(Promega Corporation，Madison，WI.USA)进行该分析。每一个实验条件均以一式两份进行。结果如表1所示。
权利要求
1.式I化合物或其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐
其中
W为CRw或N，其中Rw选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)卤素，
(4)甲基，
(5)三氟甲基，
(6)亚磺酰氨基；
R1选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)取代的和未取代的烷基，
(6)取代的和未取代的链烯基，
(7)取代的和未取代的炔基，
(8)取代的和未取代的芳基，
(9)取代的和未取代的杂芳基，
(10)取代的和未取代的杂环基，
(11)取代的和未取代的环烷基，
(12)-COR1a，
(13)-CO2R1a，
(14)-CONR1aR1b，
(15)-NR1aR1b，
(16)-NR1aCOR1b，
(17)-NR1aSO2R1b，
(18)-OCOR1a，
(19)-OR1a，
(20)-SR1a，
(21)-SOR1a，
(22)-SO2R1a，和
(23)-SO2NR1aR1b，
其中R1a和R1b独立选自下列基团
(a)氢，
(b)取代的或未取代的烷基，
(c)取代的和未取代的芳基，
(d)取代的和未取代的杂芳基，
(e)取代的和未取代的杂环基，和
(f)取代的和未取代的环烷基；
R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)羟基，
(6)氨基，
(7)取代的和未取代的烷基，
(8)-COR2a，和
(9)-NR2aCOR2b，
其中R2a和R2b独立选自下列基团
(a)氢，和
(b)取代的或未取代的烷基；
R3选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)取代的和未取代的烷基，
(6)取代的和未取代的链烯基，
(7)取代的和未取代的炔基，
(8)取代的和未取代的芳基，
(9)取代的和未取代的杂芳基，
(10)取代的和未取代的杂环基，
(11)取代的和未取代的环烷基，
(12)-COR3a，
(13)-NR3aR3b，
(14)-NR3aCOR3b，
(15)-NR3aSO2R3b，
(16)-OR3a，
(17)-SR3a，
(18)-SOR3a，
(19)-SO2R3a，和
(20)-SO2NR3aR3b，
其中R3a和R3b独立选自下列基团
(a)氢，
(b)取代的或未取代的烷基，
(c)取代的和未取代的芳基，
(d)取代的和未取代的杂芳基，
(e)取代的和未取代的杂环基，和
(f)取代的和未取代的环烷基；并且
R4选自下列基团
(1)氢，和
(2)卤素。
2.权利要求1的化合物，其中W为N。
3.权利要求1的化合物，其中W为CH。
4.权利要求1的化合物，其中R1选自下列基团
(1)取代的和未取代的烷基，
(2)取代的和未取代的芳基，
(3)取代的和未取代的杂芳基，
(4)取代的和未取代的杂环基，
(5)取代的和未取代的环烷基，
(6)-OR1a，和
(7)-NR1aR1b，
其中R1a和R1b独立选自下列基团
(a)取代的和未取代的杂芳基，和
(b)取代的和未取代的杂环基。
5.权利要求4的化合物，其中R1为取代的或未取代的杂环基，或为取代的或未取代的-O-杂环基。
6.权利要求4的化合物，其中R1为取代的或未取代的吗啉基。
7.权利要求6的化合物，其中R1为未取代的N-连接的吗啉基。
8.权利要求4的化合物，其中R1为取代的或未取代的四氢吡喃或取代的或未取代的四氢吡喃基氧基。
9.权利要求8的化合物，其中R1为未取代的4-四氢吡喃基氧基。
10.权利要求4的化合物，其中R1为取代的或未取代的四氢呋喃基或取代的或未取代的四氢呋喃基氧基。
11.权利要求10的化合物，其中R1为未取代的3-四氢呋喃基氧基。
12.权利要求1的化合物，其中R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)羟基，
(4)卤素，
(5)氨基，
(6)甲基，和
(7)三氟甲基。
13.权利要求1的化合物，其中R2为氢或卤素。
14.权利要求1的化合物，其中R2为氢。
15.权利要求1的化合物，其中R3选自下列基团
(1)氰基，
(2)硝基，
(3)卤素，
(4)羟基，
(5)氨基，和
(6)三氟甲基。
16.权利要求1的化合物，其中R3为三氟甲基。
17.权利要求1的化合物，其中R3为氰基。
18.权利要求2的化合物，其中R3为＝O。
19.式II化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐
其中
W为CRw或N，其中Rw选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)卤素，
(4)甲基，
(5)三氟甲基，和
(6)亚磺酰氨基；
X为O、S、NH或键；
R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)羟基，
(6)氨基，
(7)取代的和未取代的烷基，
(8)-COR2a，和
(9)-NR2aCOR2b，
其中R2a和R2b独立选自下列基团
(a)氢，和
(b)取代的或未取代的烷基；
R3选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)取代的和未取代的烷基，
(6)取代的和未取代的链烯基，
(7)取代的和未取代的炔基，
(8)取代的和未取代的芳基，
(9)取代的和未取代的杂芳基，
(10)取代的和未取代的杂环基，
(11)取代的和未取代的环烷基，
(12)-COR3a，
(13)-NR3aR3b，
(14)-NR3aCOR3b，
(15)-NR3aSO2R3b，
(16)-OR3a，
(17)-SR3a，
(18)-SOR3a，
(19)-SO2R3a，和
(20)-SO2NR3aR3b，
其中R3a和R3b独立选自下列基团
(a)氢，
(b)取代的或未取代的烷基，
(c)取代的和未取代的芳基，
(d)取代的和未取代的杂芳基，
(e)取代的和未取代的杂环基，和
(f)取代的和未取代的环烷基；
R4选自下列基团
(1)氢，和
(2)卤素；并且
R5选自下列基团
(1)取代的和未取代的环烷基，
(2)取代的和未取代的杂环基，
(3)取代的和未取代的芳基，和
(4)取代的和未取代的杂芳基。
20.权利要求19的化合物，其中R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)羟基，
(4)氨基，
(5)卤素，和
(6)取代的和未取代的C1-3烷基。
21.权利要求19的化合物，其中R3选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硫代，
(4)卤素，
(5)硝基，
(6)取代的和未取代的烷基，
(7)取代的和未取代的链烯基，
(8)取代的和未取代的炔基，
(9)-OR3a，
(10)-NR3aR3b，
(11)-COR3a，和
(12)-NR3aCOR3b，
其中R3a和R3b独立选自下列基团
(a)氢，和
(b)取代的或未取代的烷基。
22.权利要求19的化合物，其中R3为三氟甲基。
23.权利要求19的化合物，其中W为CH。
24.权利要求19的化合物，其中R2为H。
25.权利要求19的化合物，其中R5选自下列基团
(1)取代的或未取代的吗啉基，
(2)取代的或未取代的四氢吡喃基，和
(3)取代的或未取代的四氢呋喃基。
26.权利要求19的化合物，其中X为键，R5为未取代的N-连接的吗啉基。
27.权利要求19的化合物，其中X为O，R5为4-四氢吡喃基。
28.权利要求19的化合物，其中X为O，R5为3-四氢呋喃基。
29.权利要求19的化合物，其中W为N。
30.权利要求19的化合物，其中R3为＝O。
31.式III化合物或其立体异构体、互变异构体或其药学上可接受的盐
其中
W为CRw或N，其中Rw选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)卤素，
(4)甲基，
(5)三氟甲基，和
(6)亚磺酰氨基；
R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)羟基，
(6)氨基，
(7)取代的和未取代的烷基，
(8)-COR2a，和
(9)-NR2aCOR2b，
其中R2a和R2b独立选自下列基团
(a)氢，和
(b)取代的或未取代的烷基；
R3选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)硝基，
(4)卤素，
(5)取代的和未取代的烷基，
(6)取代的和未取代的链烯基，
(7)取代的和未取代的炔基，
(8)取代的和未取代的芳基，
(9)取代的和未取代的杂芳基，
(10)取代的和未取代的杂环基，
(11)取代的和未取代的环烷基，
(12)-COR3a，
(13)-NR3aR3b，
(14)-NR3aCOR3b，
(15)-NR3aSO2R3b，
(16)-OR3a，
(17)-SR3a，
(18)-SOR3a，
(19)-SO2R3a，和
(20)-SO2NR3aR3b，
其中R3a和R3b独立选自下列基团
(a)氢，
(b)取代的或未取代的烷基，
(c)取代的和未取代的芳基，
(d)取代的和未取代的杂芳基，
(e)取代的和未取代的杂环基，和
(f)取代的和未取代的环烷基；
R4选自下列基团
(1)氢，和
(2)卤素；并且
R6选自下列基团
(1)氢，
(2)取代的和未取代的烷基，和
(3)取代的和未取代的环烷基。
32.权利要求31的化合物，其中R2选自下列基团
(1)氢，
(2)氰基，
(3)羟基，
(4)卤素，
(5)氨基，
(6)甲基，和
(7)三氟甲基。
33.权利要求31的化合物，其中R3选自下列基团
(1)氰基，
(2)硝基，
(3)卤素，
(4)羟基，
(5)氨基，和
(6)三氟甲基。
34.权利要求31的化合物，其中R6选自下列基团
(1)氢，
(2)甲基，和
(3)乙基。
35.在人类或动物宿主中抑制Akt磷酸化的方法，该方法包括给予人类或动物宿主有效量的权利要求1-34任一项中的化合物。
36.组合物，该组合物包括药学上可接受的载体和当给予该组合物时在人类和动物宿主中能够有效抑制PI3-K活性的一定量的权利要求1-34任一项中的化合物。
37.权利要求36的组合物，当给予该组合物时在人类和动物宿主中能够有效抑制PI3-Kα的活性。
38.权利要求35的组合物，该组合物另外包括至少一种治疗癌症的其它药物。
39.权利要求38的组合物，其中所述至少一种治疗癌症的其它药物为瓦他拉尼、伊马替尼或吉非替尼。
40.治疗由PI3K活性调节的疾病的方法，该方法包括给予需要此类治疗的人类或动物宿主有效量的权利要求1-34任一项中的化合物。
41.权利要求40的方法，其中所述化合物对PI3K抑制的IC50值低于约1μM。
42.权利要求40的方法，其中所述疾病为癌症。
43.在人类或动物宿主中抑制PI3-K活性的方法，该方法包括给予人类或动物宿主组合物，该组合物含有能够有效抑制人类或动物宿主PI3-K活性的一定量的权利要求1-34任一项中的化合物。
44.在人类或动物宿主中治疗癌症的方法，该方法包括给予人类或动物宿主组合物，该组合物含有能够有效抑制人类或动物宿主PI3-K活性的一定量的权利要求1-34任一项中的化合物。
45.权利要求44的方法，该方法另外包括给予人类或单位宿主至少一种治疗癌症的其它药物。
46.权利要求45的方法，其中所述至少一种治疗癌症的其它药物为瓦他拉尼、伊马替尼或吉非替尼.
47.权利要求44的方法，其中所述癌症为乳癌、膀胱癌、结肠癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、肺癌、肝细胞癌、胃癌、黑素瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、肾癌、子宫颈癌、胰腺癌食、食道癌、前列腺癌、脑癌或卵巢癌。
48.调节Akt磷酸化的方法，该方法包括使得权利要求1-34任一项中的化合物与细胞接触。
49.权利要求48的方法，其中所述化合物对pAKT抑制的EC50小于约1μM。
50.用于治疗癌症的权利要求1-34任一项中的化合物。
51.权利要求1-34任一项中的化合物在生产治疗癌症的药物中的用途。
52.试剂盒，该试剂盒包括权利要求1-34任一项中的化合物以及包装说明书或其它标签，包括通过给予PI3-K抑制量的化合物治疗细胞增生性疾病的说明。
53.抑制KSP驱动蛋白活性的方法，该方法包括使得所述驱动蛋白与有效抑制量的权利要求1的化合物接触。
54.在细胞中抑制KSP驱动蛋白活性的方法，该方法包括使得所述细胞与有效抑制量的权利要求1的化合物接触。
全文摘要
本发明公开磷脂酰肌醇(PI)3-激酶抑制剂化合物(I)、其药学上可接受的盐及其前药；该新化合物的组合物，该组合物单独含有该化合物或者还含有至少一种其它治疗成分以及药学上可接受的载体；新化合物的用途，单独使用或者与至少一种其它治疗成分组合使用，用于预防或治疗增生性疾病，所述疾病特征在于生长因子、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶和磷脂激酶的异常活性。
文档编号C07D417/12GK101389622SQ200780006374
公开日2009年3月18日 申请日期2007年1月22日 优先权日2006年1月20日
发明者T·皮克, P·巴尔桑尼, E·伊瓦什凯维奇, W·范特尔, T·亨德里克森, M·纳普, H·梅里特, C·沃尔特娃, M·维斯曼, X·辛, M·比尔热, Z·倪, S·佩基, G·阿塔略, S·巴尔图利斯, K·弗雷泽, A·史密斯, J·韦尔哈根, Y·张, A·韦格曼, S·额, K·菲斯特, D·蓬, A·路易 申请人:诺瓦提斯公司