κ阿片样受体肽的N-氧化物的制作方法

专利名称：：κ阿片样受体肽的N-氧化物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及某些合成肽酰胺的代谢物和某些合成肽酰胺的N-氧化物，包括作为高度选择性k受体激动剂并表现出很少或者没有细胞色素p450抑制活性(如CYP3A4抑制活性)的这类化合物。
背景技术：
：k阿片样受体(KOR)存在于大脑、脊髓中和主要感官传入神经的中枢端、外周端和胞体(躯干和内脏)以及免疫细胞上。位于大脑的KOR已显示出介导通常称之为k激动剂的分子的中枢镇痛作用，所述分子激活这些KOR。该发现引发许多尝试(即来自于Upjohn的螺朵林和来自于Parke-Davis的依那朵林)以开发穿透大脑的非肽k激动剂用作原始的镇痛药，这将避免作用于p阿片样受体(MOR)的吗啡类似物的所不希望的副作用(便秘、呼吸抑制、依赖性和成瘾)。在动物和人类中均已明确了这类化合物具有镇痛活性以及不存在P阿片样副作用。然而，一些全身性k激动剂还显示出诱导特定副作用，如通过位于大脑的k受体所介导的多尿、镇静和焦虑，这将导致其发展的中止。除这些中枢介导的镇痛之外，位于外周神经或脊髓中的KOR的刺激也可引起镇痛。然而，不管是外周KOR还是脊髓KOR均与全身性k激动剂的任何副作用无关。因此，只要能产生不进入大脑的k受体阿片样5激动剂(在外周或脊髓施用之后)，应当有可能获得安全的原始性镇痛剂。现在认为对KOR具有选择性的肽类阿片样激动剂对于此目的是理想的，这是因为它们很可能在外周或脊髓施用后至多仅能很少地进入大脑；因此，它们有望避免中枢副作用。美国专利第5,610,271号公开了能结合于KOR的含有四个D-异构体氨基酸残基的四肽，并且美国专利第5,965,701号公开了具有长持续时间的外周活性的某些合成肽。胃肠外(静脉内(i.v.)、肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、硬膜外、外部或局部)施用途径可适用于此类化合物，以治疗与诸如类风湿性关节炎等炎症，或诸如源自于眼部手术、牙科手术、关节手术、腹部手术、分娩和剖腹产等术后疼痛相关的病症的疼痛。此外，腹部术后症状(消化道梗阻)的缓解目前被认为是肽类k激动剂的主要治疗靶。这些症状包括诸如胀气、恶心等蠕动紊乱以及与灵敏性紊乱有关的肠道转运抑制，如膨胀可能导致的疼痛。这样的运动障碍被认为是由局部炎症过程引起的神经敏化导致的内脏敏感性先期变化的结果，并且在动物模型中已显示出阻断疼痛的化合物能逆转运动损伤(Riviere等，Gastroenterology,104:724-731，1993)。的确，非肽类k激动剂显示出产生对试验性肠梗阻的抗伤害感受作用(antinnociception)，并伴有正常运动功能的恢复。这为开发用于治疗术后疼痛和消化道梗阻的非脑穿透性k激动剂提供了理论基础(Friese等，LifeSciences,60(9):625-634，1997)。因为这样的k激动剂一般不表现出便秘性或抗转运性(antitransit)副作用，对于该适应症，它们相比于吗啡样化合物具有显著的优势。还已经显示了k激动剂在由轻微局部炎症引起的小肠以及结肠痛觉过敏模型中产生外周抗伤害感受作用(Diop等，Eur.J.Pharm.，271:65-71，1994)。结果，肠易激综合征(IBS)(其包括可能与局部炎症相关的内脏超敏感性导致的放大内脏痛)也是外周k激动剂的靶(Junien和Riviere，AlimentaryPharmacologyandTherapeutics,9:117-126，1995)。除胃肠道之外，表现出牵涉主要感官传入神经的活化和/或敏化(即局部炎症)的病理学病症的其他内脏也被认为代表这类k受体阿片样物质的合适靶。可使用k受体阿片样物质的这些病症的例子包括膀胱炎症(膀胱6炎)导致的失禁、痛经、血管运动性鼻炎、眼部炎症和肾结石或者膀胱结石导致的疼痛。在体细胞组织中已确定k激动剂也通过抑制从主要感官传入神经中释放物质P而阻断神经源性炎症。假设这些活性也存在于胃肠道(GI)和内脏组织之中，预计外周k激动剂在与神经源性炎症相关的疼痛或内脏超敏感性的病症(例如膀胱炎)中具有缓解作用。也已知k阿片样激动剂作用于免疫系统并在免疫细胞中主要具有抑制作用。其作用包括(i)T细胞依赖性抗体产生的抑制，(ii)有丝分裂原和抗原诱导的淋巴细胞增殖的变化，(iii)自然杀伤(NK)细胞和T细胞介导的细胞毒性的调节；(iv)源自外周血的单核细胞(PBMC)的趋化性，和(v)PBMC功能的改变。在一些对降低免疫应答具有重要意义的具体适应症中，这些作用是令人感兴趣的。也已知k阿片样激动剂能缓解与多种病症相关的搔痒症(g卩，发痒)，例如正在进行血液透析的患者的尿毒症瘙痒症，预计外周作用性k激动剂将可用于治疗这些病症。另外，已知k阿片样激动剂能产生游离水多尿或者促水排泄(aquaresis)。不希望受限于理论，据信该电解质不足的多尿归因于对肾脏中或位于血脑屏障之外的垂体后叶和/或基底中部下丘脑神经元(basomedialhypothalamicneuron)中的k阿片样受体的作用，所述作用可导致对加压素的释放和/或生物作用的抑制。因此，所述外周作用性k激动剂可用于治疗正常血容积低钠血症(euvolemichyponatremia),-—种在身体血液钠水平低于正常水平时出现的潜在的危及生命的病症。当身体总水量增加而钠几乎不增加时出现的正常血容积低钠血症最常见的是与诸如不适当的抗利尿激素综合征(SIADH)、肾上腺功能不全、肺紊乱、甲状腺机能减退、某些癌症等病症和某些药物(诸如一些抗抑郁药)的使用有关。低钠血症经常起因于高水平的调节体内水盐平衡的激素精氨酸加压素(AVP)。这是住院患者中最常见的电解质紊乱并且是最难以治疗的疾病之一。当前治疗方法着眼于精氨酸加压素(AVP)受体拮抗剂，如考尼伐坦(conivaptan)。然而，因为考尼伐坦具有CYP3A4抑制活性，它不能与强7效的CYP3A4抑制剂(例如酮康唑、伊曲康唑、克拉霉素、利托那韦和印地那韦)共同施用，因此需要不受该限制的治疗剂。本发明的外周作用性k激动剂有望具有改善诸如充血性心力衰竭、肝硬化和导致SIADH的病症等疾病中的盐水失衡的临床应用。特别希望的是对KOR表现出高亲和力(与MOR相比)，但对细胞色素P450单加氧酶(CYP450)的同工酶/亚型，尤其是对CYP3A4同工酶/亚型具有很少或者不具有细胞色素抑制活性的肽类。这些特性是所希望的，这是因为许多重要药物相互作用都牵涉这些位于小肠、肝脏、肺、肾脏和大脑的同工酶。药物代谢分两个阶段进行阶段I包括氧化、还原和水解，而阶段II包括合成和结合。CYP450同工酶参与阶段I中的氧化反应。CYP450药物相互作用一般起因于以下两个过程之一抑制和诱导。诱导是指物质刺激所述酶的合成，并提高代谢能力。抑制是指在酶的结合位点的竞争性结合。对CYP450同工酶具有高亲和力的药物将减缓通常通过该酶进行代谢的任何低亲合性药物的代谢，潜在地导致所述药物在体内累积至毒性水平。CYP3A4是人体内最丰富的CYP450同工酶，并且负责范围最大的药物的代谢，所述药物包括胺碘酮、卡马西平、阿米替林、萘发扎酮(nefazadone)、舍曲林、各种苯二氮杂卓类、钙通道阻断剂、阿司咪唑、特非那定、丁螺环酮、环丙沙星、兰索拉唑、M也汀类药物(statins)'和西沙必利。因此，如果患者还服用作为CYP3A4有效抑制剂的药物，如大环内酯抗生素、氟西汀、氟伏沙明、葡萄柚汁、茚地那韦、伊曲康唑、酮康唑和利托那韦等时，施用这些药物时必须十分小心。其他重要的CYP450同工酶包括CYP2D6——氟西汀、帕罗西汀和奎尼丁是该酶的强效抑制剂。通过CYP2D6代谢的药物包括胺碘酮、氟哌啶醇和司来吉兰。CYP1A2——红霉素和氟伏沙明是该酶的强效抑制剂。通过CYP1A2代谢的药物包括对乙酰氨基酚、阿米替林和普萘洛尔。CYP2C9/10——SSRI抗抑郁药、西咪替丁、扎鲁司特、'他汀类药物，、胺碘酮、氟康唑是该酶的强效抑制剂。华法林、非甾族抗炎药、苯妥英和血管紧张素II受体拮抗剂通过CYP2C9/10代谢。因此，本发明的一个目的是提供对这些CYP450酶具有很少或者没有抑制活性的的k阿片样肽，以通过避免与需要抗伤害感受作用或其他治疗益处的受试对象服用的其他药物的潜在、危险的相互作用而提高所述肽的治疗应用。
发明内容在一个实施方式中，本发明主要提供了对KOR表现出高选择性，并且不表现出任何明显的CYP450酶抑制作用的一类合成肽酰胺。在本发明的一些实施方式中，没有CYP450酶的明显抑制作用体现为很少或者没有表现出肝代谢性酶CYP3A4的抑制活性。在一些实施方式中，本发明提供了包括合成肽酰胺的代谢物的化合物，其中(i)所述代谢物可以由向哺乳动物施用所述肽酰胺而形成，(ii)所述化合物对k阿片样受体所具有的亲和力至少是其对(i阿片样受体的亲和力的l，OOO倍，(m)所述化合物表现出很少或不表现出细胞色素P450酶抑制活性，以及(iv)所述肽酰胺具有下式H-X叫-X叫-X叫-X叫-Q其中，Xaa,选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、Cl或者CH3取代的D-Phe，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Phe，D-Tyr，D-Tic，D-Acp，D-2-Thi，或D-3-Thi;Xaa2选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、Cl、3,4二氯或者CHs取代的D-Phe，D-lNal，D-2Nal，D-Tyr，或D-Trp;Xaa3选自由下列物质组成的组D-Nle，D-Leu，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Leu，D-Hle，D-Met，D-Val，D-Phe，或D-Acp;Xaa4选自由下列物质组成的组D-Arg，D-Har，D-nArg，D-Lys，D-Lys(Ipr)，D-Arg(Et2)，D-Har(Et2)，D-Amf(G)，D-Dbu，D-Orn，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Orn，或D-Orn(Ipr)，而G是H或脒基；以及Q是NR,R2、哌啶基、4-羟基哌啶基、4-氧-哌啶基、哌嗪基、4-单取代或4,4-二取代的哌嗪基或者5-鸟氨酸基，而R！是具有取代基的苄基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或低级烷基。在本发明的一些实施方式中，所述代谢物是合成肽酰胺的N-氧化物。在--些实施方式中，本发明提供了作为合成肽酰胺的N-氧化物的化合物，所述肽酰胺具有下式H-Xaa,画Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q-N-氧化物其中，Xaa,选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、CI或者CH3取代的D-Phe，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Phe，D-Tyr，D-Tic，D-Acp，D-2-Thi，或D-3-Thi;Xaa2选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、Cl、3,4二氯或者CH3取代的D-Phe，D-lNal，D-2Nal，D-Tyr，或D-Trp;Xaa3选自由下列物质组成的组D-Nle，D-Leu，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Leu，D-Hle，D-Met，D-Val，D-Phe，或D-Acp;Xaa4选自由下列物质组成的组D-Arg，D-Har，D-nArg，D-Lys，D-Lys(Ipr)，D-Arg(Et2)，D-Har(Et2)，D-Amf(G)，D-Dbu，D-Om，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Orn，或D-Om(Ipr)，而G是H或脒基；以及Q是NR,R2、哌啶基、4-羟基哌啶基、4-氧-哌啶基、哌嗪基、4-单取代或4，4-二取代的哌嗪基或者5-鸟氨酸基，而R,是具有取代基的苄基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或低级烷基。-一些实施方式的特征在于诸如2-吡啶甲基酰胺、3-吡啶甲基酰胺、4-吡啶甲基酰胺和哌嗪酰胺的N-氧化物等作为酰胺-N-氧化物的化合物。图1是显示根据小鼠乙酸扭体测试方法进行的步骤时间表的图。图2是显示采用小鼠乙酸扭体测试方法测试的静脉注射的1号肽对内脏痛的抗伤害感受作用的图。将采用小鼠乙酸扭体测试方法测量的抗伤害感受作用百分比针对剂量以对数标度进行作图，所述对数标度基于在10、30和100微克1号肽/千克体重的剂量的数据点进行线性拟合。具体实施方式用以定义所述肽的命名法在Schroder和Lubke的"ThePeptides"(AcademicPress出版，1965)中有详细的说明，其中根据传统表示法，N端出现在左侧，而C端出现在右侧。除非另外说明，否则凡氨基酸残基有同分异构形式的，均为本文给出的氨基酸的L-异构体形式。在一些实施方式中，本发明提供了对KOR具有选择性，并且不仅对KOR表现出强亲和力而且很少或者不表现出CYP3A4抑制活性或者很少或者不表现出其他CYP450酶的抑制活性的肽。在某些实施方式，本发明的k选择性阿片样肽对KOR所具有的亲和力至少是对MOR所具有的亲和力的1,000倍，许多化合物具有至少超过10,000倍的亲和力，一些化合物表现出20,000倍以上的亲和力。然而，对于许多适应症来说重要的是，与这种高选择性一起，所述k激动剂应既表现出细胞色素P450抑制活性的缺乏也表现出体内抗伤害感受作用活性。如前文所概述，在某些实施方式中，本发明提供了一类具有以下式的D-异构体四肽H-Xaa,-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q-N-氧化物其中，Xaa,是(A)D-Phe、(CaMe)D-Phe、D-Tyr、D-Tic、D-Acp、D-2-Thi或D-3-Thi，A是H、N02、F、C1或者CH3;Xaa2是(A')D-Phe、D-lNa、D-2Nal、D-Tyr或者D-Trp，A'是A或者3，4C12;Xaa3是D-Nle、(B)D-Leu、D-Hle、D-Met、D-Val、D-Phe或者D-Acp，B是H或者CaMe;Xaa斗是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Lys(Ipr)、D-Arg(Et2)、D-Har(Et2)、D-Amf(G)、D-Dbu、(B)D-Orn或者D-Orn(Ipr)，G是H或者脒基，并且Q是NR,R2、(C)哌啶基、哌嗪基、单取代-或双取代哌嗪基或者S-鸟氨酸基，R,是2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或者低级烷基；并且C是H、4-羟基或者4-氧。D陽Nle是指D-正亮氨酸、D-Hle表示D-高亮氨酸。D-Har表示D-高精氨酸，而D-nArg代表D-正精氨酸(D-norarginine)，它比D-Arg少一个碳。D-Nal是指丙氨酸的D-异构体，其在卩-碳上被萘基取代。优选的是，采用D-2Nal，即与萘连接的位置在环结构的2位；但是，也可以采用D-lNal。縮略词D-Cpa和D-Fpa分别用以表示氯-D-Phe和氟-D-Phe，其li中优选的是D-4Cpa、D-2Fpa、D-3Fpa和D-4Fpa。D-Npa指硝基-D-Phe，而D-Mpa用以表示甲基D-Phe。D-3,4Cpa指3,4-二氯-D-Phe。D-Acp表示D-Ala(环戊基)。D-Orn表示D-鸟氨酸，D-Dbu表示a,二氨基丁酸。CML表示Ca甲基Leu，而CMP和CMO表示CaMePhe和CaMeOrn。D-4Amf指D-4(NH2CH2)Phe，而D-Gmf指的是Amf(咪基)，它表示其中4位被CH2NHC(NH)NH2取代的D-Phe。Amd表示咪基，也可以使用符号D-Amf(Amd)。D-Tic指D-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。Ala(Thi)中的Thi表示噻吩基，该噻吩基优选地在其2位与丙氨酸连接，虽然3-噻吩基是等效的。Ily和Ior分别指异丙基Lys和异丙基Orn，其中侧链氨基被异丙基烷基化。低等垸基指的是d到C6，并优选为C,到Cp但包括环丙基和环丁基。Me、Et、Pr、Ipr、Bu、Pn和Bzl用以表示甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、戊基和苄基。Cyp指的是环丙基，Cyb指的是环丁基。尽管连接键优选地连接至烷基链的一端，但所述连接键也可位于所述链的其他位置，例如3-戊基也可以指乙基丙基。4Nbz和4Abz表示4-硝基苄基和4-氨基苄基。2-、3-和4-吡啶甲基(Pic)指在2位、3位、4位上通过亚甲基连接的甲基吡啶基。4Ahx用以表示4-氨基环己基，hEt用以表不羟乙基，gp-CH2CH2OH。Aeb用以表示4-(2-氨基-2-羧乙基)苄基，如在美国专利5,965,701中所示。Pip指的是哌啶基，4-HyP和OxP指的是4-羟基哌啶基和4-氧-哌啶基。Ppz指的是哌嗪基。Ecp表示4-乙基氨基甲酰基哌嗪基；也可使用诸如4-二甲基哌嗪基(Dmp)或其他二-低级烷基取代的季铵部分。具有取代基的苄基优选为4-氨基苄基，2-Tzl指的是2-噻唑基，如美国专利5,965,701所示。Dor指的是5-鸟氨酸基，其中L-鸟氨酸的侧链氨基通过酰胺键与C-端连接。本文使用的化学部分的縮略词还另外描述在下表中縮略词定义D-PheD-苯丙氨酸D-TyrD-酪氨酸D-TicD-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸D-AlaD-丙氨酸D-lNal在p-碳上取代有萘基的D-丙氨酸，连接位置在萘环结构的1位上12縮略词定义D-2Nal.在P-碳上取代有萘基的D-丙氨酸，连接位置在萘环结构的2位上D-TrpD-色氨酸D-NleD-TE亮氨酸D-LeuD-亮氨酸D-HleD-高亮氮酸D-MetD-甲硫氨酸D-ValD-缬氨酸D-ArgD-精氨酸D-HarD-高精氨酸D-nArgD-正精氨酸D-LysD-赖氨酸D-Ily异丙基-D-赖氨酸D-Arg(Et2)二乙基-D-精氨酸D-Har(Et2)二乙基-D-高精氨酸D-AmfD-(NH2CH2)-苯丙氨酸D-GmfD-(CH2NHC(NH)NH2)-苯丙氨酸D-Dbua、y-二氨基丁酸D-OrnD-鸟氨酸D-Ior异丙基-D-鸟氨酸Aeb4-(2-氨基-2-羧乙基)苄基Ppz哌嗪基Pep4-苯基氨基甲酰基哌嗪-1-基Aao8-(乙酰氨基)-3,6-二氧辛-l-基Aoo8-氨基-3,6-二氧辛-l-基Hoh6-(L-氢乳清基氨基)-己-l-基；L-氢乳清酸为C4N2H5(0)2-COOHGhx6-(D-葡萄糖基氨基)-己基Gao6-(D-葡萄糖基氨基)-3，6-二氧辛-l-基D-4Fpa4-氟-D-苯丙氨酸D-4Cpa4-氯-D-苯丙氨酸D-3，4Cpa3,4-二氯-D-苯丙氨酸D-CMLCa甲基-D-亮氨酸D-AcpD-Ala(环戊基)Mor吗啉基Tmo硫代吗啉基Pip哌啶基4-HyP4-羟基哌啶-l-基OxP4-氧-哌啶-l-基Me甲基Et乙基Pr丙基Bu丁基13縮略词定义HEt羟乙基(即，-CH2CH2OH)Cyp环丙基Bzl节基D-2Fpa2-氟-D-苯丙氨酸D-2-ThiNH2^"C〇2HD-3-(2-噻吩基)-丙氨酸D-3-ThiNH2^"C02HD-3-(3-噻吩基)-丙氨酸4Pic4-吡啶甲基Camethyl与氨基酸的a-碳相连的甲基在一些实施方式中，D-Phe或具有取代基的D-Phe位于1位。苯环可在环的2位、3位和/或4位上被取代，并且通常优选在环的2位或4位上被氯或氟取代。在一些实施方式中，(x碳原子也可被甲基化。也可以使用类似于D-Phe的其他等价残基，这些包括D-Acp、D-Ala(噻吩基)、D-Tyr和D-Tic。2位残基也优选为D-Phe或者被取代的D-Phe，这样的取代优选包括苯环4位碳的取代，或者3位和4位上的取代。可替代地，可以使用被萘基取代的D-丙氨酸，以及D-Trp和D-Tyr。3位残基优选被诸如D-Nle、D-Leu、D-CML、D-Hle、D-Met或D-Val等氨基酸残基占据；然而，也可以使用D-Acp或者D-Phe。可被二乙基取代的D-Arg和D-Har通常优选用于4位残基；然而，也可以使用D-nArg和其他等价残基，如D-Lys或者D-Om(其中任一个可用异丙基烷基化其O)-氨基，或者使其a-碳基团甲基化)。此外，也可以使用D-Dbu、D-4Amf(优选取代有咪基)和D-His。在一些实施方式中，通过制备在C-端具有取代酰胺基的四肽化合物(诸如在美国专利第5，965，701号中公开的那些化合物)的形成有N-氧化物部分的衍生物，这样的化合物的CYP3A4抑制活性被充分削弱，这是令人惊讶的。这些N-氧化物可以是吡啶甲基N-氧化物的形式，以及其他等价残基(如具有取代基的苄基)的形式。通常，对于单取代酰胺而言,优选的是吡啶甲基N-氧化物取代基。二垸基取代基例如二乙基氨基是代替单取代酰胺的另一选择；然而，优选的是这样的二取代C-端由哌啶N-氧化物或4-哌嗪基N-氧化物部分所占据。不希望受限于任何具体理论，通常认为KOR结合是四肽的氨基酸序列的属性，因此一些实施方式提供了选择性K受体阿片样肽，只要其对K受体表现出的结合亲和力使得其IC5。在本文所描述的检测条件下等于约10nM或以下。在一些实施方式中，本发明提供了具有下式的阿片样肽亚属H-Xaa!-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q-N-氧化物其中，Xaa,是D-Phe(未取代或取代有CaMe、2F、4F或者4C1)、D-Acp、D陽2陽Thi或者D-3-Thi;Xaa2是(A')D-Phe、D-lNal、D-2Nal或者D-Trp，A'是H、4F、4C1、4N02或者3，4C12;Xaas是D-Nle、D-Leu、D-CML，D-Met或D-Acp;Xaa4是D-Arg、D-Arg(Et2)、D-Lys、D-Ily、D-Har、D-Har(Et2)、D-nArg、D-Om、D-Ior、D-Dbu、D-Amf禾nD陽Amf(Amd);并且Q是NR,R2、Pip、4-HyP、OxP或者Ppz，而R,是Me、Et、Pr、Bu、hEt、Cyp、BzI或者4-吡啶甲基，且R2是H或者Et。本发明的另一个实施方式提供了具有下式的K阿片样肽亚属H-Xaa!-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q-N-氧化物其中，Xaa,是D-Phe、D-4Fpa、D-2Fpa、D-4Cpa、D-Acp或者D-Ala(Thi);Xaa2是D-Phe、D-4Fpa、D-4Cpa、D-lNal、D-2Nal或者D-Trp;Xaa3是D-Nle、D-Met、D-CML或者D-Leu;Xaa4是D-Arg、D-Lys、D-Har、D-nArg或者D-Orn;并且Q是NR!R2、Pip、4-HyP或者Ppz，而R,是Et、Pr、Bu、Cyp、hEt、Bzl或者4-Pic，且R2是H或Et。本发明的另一个实施方式提供了具有下式的K阿片样肽亚属H-Xaa,-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q-N陽氧化物其中，Xaa!是D-Phe、D-4Fpa、D-2Fpa、D-Acp或者D-Ala(2Thi);Xaa2是(A)D-Phe、D-lNal、D-2Nal或者D-Trp，A是4F或4C1;Xaa3是D-Nle、D-Met或D-Leu;Xaa4是D-Arg、D-Har、D-nArg、D-Lys、D-Orn或者D-Amf(Amd);并且Q是NHR,、Pip或Ppz，而R!是Et、Pr或者4Pic。在--些实施方式中，Xaa!和Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle或D-Leu，以及Xaa4是D-Arg或D-Om。此外，在另外一些实施方式中，本发明提供了化合物H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-口比啶甲基N-氧化物，所述N-氧化物任选包括或者不包括任何药学可接受的反离子，其中乙酸根离子是药学可接受的反离子的一个例子。在一些实施方式中，本发明的阿片样肽被认为具有抗伤害感受作用体内活性以及实质性降低的细胞色素P450酶抑制，这是在4位氨基酸残基的C-端引入N-氧化物取代酰胺的结果。这个特别出乎意料的属性使得此类肽具有特别的价值，这是由于其中某些肽不但具有镇痛剂活性，而且基本没有CYP3A4抑制活性，并且因此不会导致基于细胞色素CYP3A4抑制的药物相互作用。在本发明的一些前述实施方式中，制备成不具有N-氧化物取代C-端酰胺的某些四肽也对KOR表现出高选择性(与MOR相比)，并且它们在10微摩尔以下浓度也可能表现出CYP3A4抑制活性。然而，完全可以预料的是，当合成为在C-端具有诸如4-吡啶甲基-N-氧化物等N-氧化物取代酰胺时，这些阿片样肽中的许多肽将表现出甚至更低的CYP3A4抑制活性。虽然在本发明的以上实施方式的描述中阐述了许多氨基酸序列，但肽化学领域中的普通技术人员应当理解，一个或多个所述氨基酸残基可通过保守氨基酸取代进行取代，例如用一个碱性氨基酸取代另一个碱性氨基酸，或者用一个疏水氨基酸取代另一个疏水氨基酸，例如D-Ile取代D-Leu。同样，各种残基也可经本领域中普遍已知的方式进行修饰；例如D-Phe(如之前所指出的)可通过(通常)在3位和/或4位引入卤素或硝基而进行修饰，或者a-碳可被甲基化。这些修饰被认为能够形成等效的k受体阿片样肽。所述肽可由任何适宜的方法合成，如专用的固相技术或经典溶液加成，或者作为另外一种选择，通过部分固相技术或通过片段縮合技术。例如，在教科书Solid-PhasePeptideSynthesis(Stewart&Young，第2版，PierceChemicalCompany,Rockford，Ill.，1984)中描述的专用固相肽合成(SPPS)技术，以及由美国专利第4,105,603号以举例方式公开的技术。片段縮合合成法在美国专利第3,972,859号中有例举，而其他可采用的合成在美国专利第3,842,067号和第3,862,925号中有例举。经典溶液加成合成在Bodanzsky等的PeptideSynthesis(第2版，JohnWiley&Sons,NewYork,1976)中有详细描述。偶联型肽化学合成的共同点是，对被偶联的氨基酸的任何不稳定侧链进行保护，并且通常也对ot-氨基进行所述保护，因此，加成发生在被加成的单个氨基酸或二肽或三肽的羧基上。这些保护基团在本领域中是熟知的，叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Z)和9-芴基甲氧羰基(Fmoc)通常优选用作SPPS或经典溶液合成中的(x-氨基保护基，不过有大量的其他各种a-氨基保护基可供选用。当使用SPPS时，C-端氨基酸残基偶联于固体树脂支持体，如0--CH2-聚苯乙烯支持体、0-CH2-苄基-聚酰胺树脂支持体、—NH-二苯甲基胺(BHA)树脂支持体或--NH-对甲基二苯甲基胺(MBHA)树脂支持体。当需要未取代酰胺吋，由于切割直接得到C-端酰胺，所以经常优选使用BHA或MBHA。当需要N-甲基酰胺时，可由N-甲基BHA树脂生成。其他单取代酰胺可通过W.Kornreich等(Int.J.PeptideProteinRes.，25:414-420,1985)所描述的步骤(在美国专利第4,701,499号中也有描述)进行合成。在C-端具有诸如N-哌啶基等二取代酰胺的肽优选通过经典溶液合成或通过溶液中的片段縮合进行制备。一旦合成，采用本领域中熟知的用于短肽纯化的方法就可容易地纯化这些四肽，所述方法例如为反相高效液相色谱(RP-HPLC)或其他适宜的方法。这些纯化在J.Rivier等，J.Chromatography,288:303-328，1984，和C.Miller和J.Rivier，PeptideScience,Biopolymers,40:265-317(1996)中有详细描述，在固相合成等之后进行的这些纯化的具体例子示于美国专利第5,098,995号中。可以采用各类检测方法测试本发明的化合物是否对k阿片样受体显示出高亲和力和选择性。受体检测在本领域中是已知的，并已克隆了来自数个物种的k阿片样受体，例如有阿片样受体和S阿片样受体。k17阿片样受体以及|h阿片样受体和S阿片样受体是典型的、七跨膜G蛋白偶联受体。虽然使用这些克隆受体可以容易地对特定候选化合物例如肽进行筛査，但是，如本领域中已知的，自然来源的哺乳动物阿片样受体同样可用于筛查(DooleyCT等，Selectiveligandsforthemu、delta、andkappaopioidreceptorsidentifiedfromasinglemixturebasedtetrapeptidepositionalscanningcombinatoriallibrary.J.CAew.273:18848-18856，1998)。因此，无论k阿片样受体和p阿片样受体是重组来源的还是自然来源的，都可以针对它们进行筛査，以确定一种或多种化合物对k阿片样受体的选择性(相对于|i阿片样受体)。结合亲和力指的是配体和受体之间相互作用的强度。为了说明对阿片样受体的结合亲和力，可以使用竞争结合研究来评价本发明的化合物。可以使用在稳定转染的细胞系中表达的经克隆的K阿片样受体和p阿片样受体或者自然产生自如上所述的富含受体的组织源的阿片样受体来进行这些研究。在这些研究中，使用测试化合物(未被标记的配体)以逐步增加的浓度来置换对所研究的受休具有高亲和力和选择性的放射性标记配休的特异性结合。经滴定的U-69，593和DAMGO可以分别用作k阿片样受体和p阿片样受体研究中的配体。两种配体都可以商购获得(NEN-Dupont)。DAMGO是[D-Ala2、MePhe4、Gly-ol5]-脑啡肽的首字母縮写。放射性配体的亲和力定义为放射性配体的导致饱和研究中的半数最大特异性结合(KD)的浓度。所述测试化合物(未被标记的配体或者非放射性配体)的亲和力在竞争结合研究中通过根据以下公式计算的抑制常数(K,)来确定Ki=IC50/[l+(F/KD)]其中，IC5Q=抑制50%的所述放射性配体的特异性结合的所述非放射性配体的浓度F=游离放射性配体浓度KD二放射性配体的在饱和研究中所确定的亲和力。当釆用相对较低浓度的受体在特定条件下进行这些检测时，针对测试化合物所算得的K,是其解离常数Kd的一个很好的近似信，它表示占18据一半(50%)结合位点所需的配体浓度。在纳摩尔和亚纳摩尔范围内的低Ki值被认为是鉴别出阿片样受体的高亲和力配体。优选的类似物对k阿片样受体具有约lO纳摩尔(nM)以下的Ki，而更优选的类似物具有约1nM以下的K,。优选高亲和力化合物以(l)能使用相对较低剂量的药物，从而将由于低亲和力相互作用而产生副作用的概率降至最低，以及(2)潜在地减少制造药剂的成本，这是由于，假设发生同等的吸收、分配、代谢和排泄，产生所希望的治疗效果所需的亲和力较高的化合物的量相应减少。优选的类似物也具有约1微摩尔0iM)以上的对(i阿片样受体的Ki，而更优选的类似物具有约10以上的对)i阿片样受体的Kj。出于鉴别本发明有用的化合物的目的，在适宜的检验条件下，ICs。是Ki的有用的近似值。这些使用k阿片样受体和p阿片样受体的结合检验法简单易行，并可以容易地针对大量的化合物进行，以确定这些化合物对k阿片样受体是否具有选择性以及是否具有高亲和力。这些结合检测可以用本领域技术人员已知的各种方法来进行，而该常见类型检测的一个具体例子在YoungEA等的[3H]DynorphinAbindingandkappaselectivityofprodynorphinpeptidesinrat,guineapigandmonkeybrain.五tmJ".jP/zarwaco/.121:355-365,1986中有描述。可以采用各种检测来测试本发明的化合物对一般的CYP450酶以及具体的CYP3A4是否表现出低抑制活性。酶检测在本领域中是熟知的，并且已克隆有来自数个物种的CYP450酶。虽然使用这些克隆的酶可以容易地对特定候选化合物例如肽进行筛选，但是，如本领域中所熟知的，天然来源(例如肝微粒体)的CYP450酶也可用于筛选。优选的类似物具有约]0微摩尔OM)以上的对CYP450酶的Ki，而更优选的类似物具有100微摩尔0iM)以上的对|i阿片样受体的Ki。出于鉴别本发明有用的化合物的目的，IQo是K,的有用的近似值。通过以下实施例进一歩描述本发明。然而，该实施例绝不应解释为对由本文末尾的权利要求所描述的本发明的实质或范围进行限制。19具有式H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-卩比啶甲基N-氧化物的1号肽按照肽合成领域熟知的方式恰当地合成，尤其是考虑到在美国专利第5,965,701号中公开的诸如H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-卩比啶甲基的合成。l号肽的结构如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>釆用分别含有KOR和MOR的豚鼠和大鼠脑细胞膜进行如前所述的结合检测。根据通过结合放射性配体的竞争性置换所进行的测定，KOR以高亲和力与1号肽结合，而IC5Q测定为约6.3nM(表1)。相比于MOR，亲和力的差异非常明显，其中ICs。太高，以致于在所述检测条件下无法测定，这是由于测量到了仅15.5%的最大结合抑制(表2)。因此，1号肽与KOR的结合比与MOR的结合强不止1,000倍。在KOR上的1号肽的生物活性在使用腺苷酸环化酶的G介导抑制的功能性第二信使检验中得以证明(表3)，这是按照本领域所熟知的用环AMP(cAMP)检测进行测量的。表11号肽对k阿片样受体结合的置换<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表21号肽缺乏对p阿片样受体结合的置换<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表3在K阿片样受体上的1号肽的生物活性<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>经选择的肽中的一种肽特地进一步接受体内测试以确定镇痛活性。体内测试采用非常适用于测定抗伤害感受作用生物活性的持续时间长短的小鼠扭体试验(WT)进行。该试验在G.A.Bentley等的文章(Br.J.Phamac.，73:325-332,1981)中有详细描述，并且该试验使用购自Harlan的体重在20克和30克之间的清醒雄性ICR小鼠。在试验前，小鼠要禁食约12小时到16小时。通过腹膜内(i.p.)施用稀乙酸来引发被监测的疼痛反应行为(即扭体)。每千克体重使用10毫升的0.6%的乙酸水溶液。对稀乙酸施用后15分钟时段的扭体进行打分。化合物通常以3倍到4倍逐步增加的剂量，在特定的预处理时间(乙酸注射前的-5分钟)，通过静脉内途径施用而进行测试。该歩骤用于确定效价(WT-ED5Q)以及次最大有效剂量(约8090%的抗伤害感受作用)。在整个试验过程中，使用一组仅施用不含有候选肽的赋形剂(vehicle)的小鼠作为对照组。在从乙酸注射时开始的15分钟时段内对扭体次数进行计数，生物活性即抗伤害感受作用以百分比表示，如美国专利第5,965,701号所述。在小鼠乙酸扭体测试(如下文所述和图1所示)中的肽的测试显示出静脉施用后约0.027mg/kg的Aso(图2;95%置信限:0.019到0.040;R2=0.603)。化合物1对数种细胞色素P450酶活性的测试证明没有明显的抑制活性(表4)，这对于P4503A4同工酶尤为明显，而对于仅在C端酰胺没有N-氧化物取代的相关化合物，则观察到所述活性受到抑制。表4化合物1对细胞色素P450酶活性的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>阿片样肽可用作镇痛药和其他药学应用以治疗与KOR系统相关的病理。它们表现出胜过p激动剂止痛药(例如具有诸如便秘、呼吸抑制和搔痒等不利作用的吗啡)的优点。采用之前描述的小鼠扭体测试(WT)测量了外周作用。因为这些肽牢固地结合KOR，所以它们也可用于体外检验以研究受体和确定在特定组织样品中存在何种受体，因此，它们可用于这方面的l參断并且对体内诊断也具有潜在的用途。通常，这些阿片样肽可用以在治疗内脏痛中实现抗伤害感受作用，并且还可用以治疗类风湿关节炎。它们对治疗腹部术后症状如消化紊乱和疼痛特别有用。它们还被认为可有效治疗IBS、不稳定膀胱、失禁和局部炎症引起肠或其他内脏的疼痛状态的其他适应症，例如炎性肠病(IBD)和痛经。这些阿片样肽降低免疫应答的能力可有利于应对IBD和诸如自身免疫疾病等其他适应症。关于急性和慢性炎性病症，可采用所述肽的施用来产生局部镇痛作用。它们可用于治疗具有诸如胀气、恶心等症状的消化道梗阻或与疼痛相关的肠道转运抑制(例如可能由痉挛收縮导致的肠梗阻)。所述阿片样肽还可有效地产生外周镇痛作用，并且它们可经耙向而缓解术后疼痛以及慢性疼痛，如由胃肠道和内脏组织的炎症导致的疼痛，并且还能在药物成瘾戒断时用以缓解。这些化合物还可用于治疗与各种病症相关的搔痒(发痒)，例如正在进行血液透析的患者的尿毒症瘙痒症，并且可以进一步用于在例如正常血容积低钠血症等水钠失衡的病症中诱导促水排泄，所述正常血容积低钠血症出现于身体总水量增加而钠几乎不增加时，经常与诸如不适当的抗利尿激素综合征(SIADH)、肾上腺功能不全、肺紊乱、甲状腺机能减退、某些癌症等病症和某些药物(诸如一些抗抑郁药)的使用有关。所述化合物还可用于产生促水排泄以治疗在诸如充血性心力衰竭和肝硬化等机能紊乱中的盐水失衡。本发明的化合物可以以药用无毒盐(如本领域中熟知的酸加成盐)的形式进行施用。这些酸加成盐的例子是盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、草酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、丹宁酸盐、双羟萘酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、藻酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐和酒石酸盐等。如果活性成分以片剂形式使用，则所述片剂可含有药用无毒稀释剂，其包括粘合剂，如黄芪胶、玉米淀粉或明胶。也可以以等渗盐水、磷酸盐缓冲液、甘露醇或葡萄糖溶液进行静脉内施用。药物组合物通常含有有效量的肽以及传统药用载体或稀释剂。所述组合物一般含有抗伤害感受作用量，即能有效阻断疼痛的量。通常，静脉给药时，剂量为每千克宿主体重约1微克到约io毫克的肽。可按需施用所述组合物；例如，以36小时的间隔重复施用。这些化合物的性质可允许有效的口服施用；然而，口服剂量可能会较高。如果希望在更长时间(例如一周以上的时间)内以单次施用来输送所述阿片样肽，则可采用缓释剂型、贮库制剂或植入物剂型。例如，用于注射的适宜的缓释贮库制剂可含有分散在或者包封在缓慢降解的无毒或非抗原性聚合物例如聚乳酸/聚羟基乙酸聚合物(如美国专利3,773,919所述)中的肽或其盐。也已知缓释施用可通过硅橡胶植入物或使用口腔贴片剂来实现，这在本领域中已有描述。23这些化合物可通过静脉内、皮下、肌内、经皮、鼻内、肺内、直肠内或阴道内向哺乳动物施用以实现抗伤害感受作用，如逆转腹膜刺激导致的胃肠道转运抑制。它们也可用于缓解术后疼痛。有效剂量随施用形式和所治疗的具体哺乳动物物种而变化。一种典型的剂型是pH为约3到8(例如约6)的含有肽的抑菌水溶液，持续地肠胃外施用所述溶液以提供每天每千克体重约0.3微克到3mg的剂量。据认为体内是能够充分耐受这些化合物的，并且它们被认为特别适用于以抑菌水溶液等通过皮下注射进行施用。对于鼻部施用，可将外周选择性k阿片样受体激动剂配制成气雾剂。术语"气雾剂"包括本发明的化合物的任何可以被吸入细支气管或者鼻道的气载悬浮相。具体而言，气雾剂包括本发明化合物的气载悬浮小滴，如可以在计量剂量吸入器或雾化器中形成，或者在弥雾器中形成。气雾剂也包括悬浮在空气中或者其他载气中的本发明化合物的干粉组合物，例如，它们可以通过吸入装置而吹入。参见Ganderton禾flJones，DmgDeliverytotheRespiratoryTract,'EllisHorwood(1987);Gonda(1990)CWf/ct//尺ev/e窗T7era/ezi"cZ>wgCam'erSy他腐6:273-313;禾口Raeburn等，(1992)J.r。x,co/.胸/zoA27:143-159。本发明的制剂的肠胃外施用包括静脉内、皮下、肌内和透皮施用。肠胃外施用制剂包括准备用于注射的无菌溶液、准备在刚要使用时与溶剂相混合的无菌干燥可溶性产品(包括皮下注射片)、准备用于注射的无菌悬浮液、准备在刚要使用时与赋形剂相混合的无菌干燥非溶性产品和无菌乳液。所述溶液可以是水性的或者非水性的，并借此配制成用于通过注射、输注或使用植入泵进行输送。对于静脉内施用、皮下施用和肌内施用，本发明的有用制剂包括具有控释性能的微胶囊制剂(R.Pwar20044(8):1203-1212)或者包封在脂质体中的制剂，优选形式是聚乙烯被覆的脂质体，在本领域中己知这样的制剂具有较长的在血管系统内循环的日寸间(例如Koppal,T."Drugdeliverytechnologiesarerightontarget",Z>wgDev.6，49-50,2003)。24将用于透皮输送的制剂装入到适用于所述输送的装置中，所述装置采用例如离子电渗疗法(KaliaYN等，Iontophoreticdrugdelivery.Z>wgDe"viev.56:619-658，2004)或者真皮穿透表面(PrausnitzMR.Microneedlesfortransdermaldrugdelivery.Z)e//v56:581-587,2004)，如本领域中所已知的能用于改善药物的透皮输送的方法。电转运装置及其操作方法在美国专利6,718,201中公开。使用离子电渗疗法来促进肽的透皮输送的方法在美国专利6,313,092和美国专利6,743,432中公开。本文的术语"电转运"、"离子电渗疗法"和"离子电渗疗法的"用于指通过将电动势施加到包含有试剂的储库的方式把一种或多种本发明的药学活性化合物通过身体表面(如皮肤)输送。所述试剂可通过电迁移、电穿孔、电渗透或其任意组合来输送。电渗透也可以指电水疗法(electrohydrokinesis)、电子对流和电力诱导渗透作用。通常，化合物电渗透进入组织源自于含有该化合物的溶剂的迁移，是对治疗物种储库施加电动势的结果，即其他离子物种电迁移所诱导的溶剂流动的结果。在电转运的过程中，皮肤可能会出现一定的改变或者变化，例如在皮肤上形成暂时出现的小孔，也被称为"电穿孔"。任何通过身体表面上的改变或变化(例如，皮肤中小孔的形成)而增强物种的电助转运也包含在如本文中所使用的术语"电转运"中。因此，应用于本发明的化合物时，如本文中所使用的术语"电转运"、"离子电渗疗法"和"离子电渗疗法的"指的是(l)通过电迁移来输送带电的试剂，(2)通过电渗透方法来输送不带电的试剂，(3)通过电穿孔来输送带电或不带电的试剂，(4)通过结合电迁移和电渗透方法来输送带电试剂，和/或(5)通过结合电迁移和电渗透方法来输送带电的和不带电的试剂的混合物。电转运装置一般使用两个电极，这两个电极均放置成与身体皮肤的一些部分紧密地电接触。一个电极叫做有源电极或者供体电极，所述治疗试剂从这个电极被输送到体内。另外一个电极叫做对电极或者返回电极，用以闭合通过身体的电路。与病人皮肤接合在一起，通过把电极与电源(如电池)连接在一起而构成电路，并且所述电路通常是能够控制通过所述装置的电流的电路。根据要透皮输送的化合物的电荷，阳极或者阴极都可以是所述有源电极或供体电极。因此，如果待转运的化合物带正电，例如本文实施例1中所举例的化合物，则正极(阳极)将是有源电极，而负极(阴极)将用作对电极，从而构成电路。但是，如果待输送的化合物带负电，那么阴极将是有源电极，而阳极将是对电极。电迁移装置另外还需要待输送至体内的治疗剂储库或治疗剂源。这些药物储库与所述电转运装置的阴极或者阳极连接，以提供一种或多种所需物种或试剂的固定的或可更新的来源。每个电极组件包括电导电极，该电导电极与在使用时和患者皮肤相接触放置的离子导电液体储库具有离子传递关系。诸如在Webster(美国专利4，383，529)中描述的凝胶储库是--种优选的储库形式，这是因为水合凝胶比充填有液体的容器更容易处理和制造。水是目前用作所述储库的优选液体溶剂，部分是因为本发明的优选肽化合物的盐是水溶性的，还有部分是因为水对皮肤没有刺激作用，因此使得所述水凝胶储库可与皮肤长期接触。储库和来源的实例包括在美国专利4，250，878中所描述的囊袋、在美国专利4,382,529中所公开的预成型凝胶体、以及在美国专利4,722.726的附图中所公开的装有药物的液体溶液的玻璃或塑料容器。对于电转运，本发明的肽可与通量增强剂(fluxenhancer)如离子表面活性剂(例如美国专利4,722,726)或者除水之外的助溶剂(例如欧洲专利申请278,473)—起进行配制。作为选择，可以在电转运输送之前，将待进行该电转运输送的外层皮肤(即皮肤的角质层)进行机械性破坏(例如美国专利5,250,023)。非常适合于电转运的外周选择性K阿片样受体激动剂可通过测量其通过身体表面(例如皮肤或者粘膜)的电转运通量，例如与具有已知的电转运通量特性的标准化测试肽(如促甲状腺激素释放激素)(R.Bumette等，./.5W.(1986)75:738)或血管力口压素(Nair等，尸/z,mflco/i红48:175-182，2003)相比较而进行选择。可以采用多种本领域内己知的体内或体外方法测定透皮电转运通量。体外方法包括在电转运通量单元的供体室和受体室之间夹持一片适当的哺乳动物的皮肤(例如人尸体皮肤)，使皮肤片的角质层侧面对供体室。含有待输送的药物的液体溶液或凝胶放置成与角质层相接触，并向电极施加电流，每个室中有一个电极。透皮通量是通过对受体室里药物的量进行采样而计算得到的。例如，用以优化透皮电转运药物输送的两个成功模型是分离的猪皮瓣模型(HeitMC等，Transdermaliontophoreticpeptidedelivery:W加andWvostudieswithluteinizinghormonereleasinghormone.JP/zawi5W.82:240-243，1993)和使用从无毛啮齿动物或者豚鼠中分离得到的无毛皮肤(例如参见Hadzij'aBW等,Effectoffreezingoniontophoretictransportthroughhairlessratskin./P/wmr.尸/wr附aco/.44:387-390,1992)。本发明的用于离子电渗疗法输送的优选化合物可以具有一个带电的氮原子(或者最优选具有两个带电的氮原子)以促进它们的输送。其他有用的透皮输送装置采用了压力下高速输送从而实现皮肤穿透而无需使用针头。如本领域内已知的，可以通过使用化学增强剂来改善透皮输送，所述化学增强剂在本领域中有时候也称为"渗透增强剂"，即与所述药物同时施用(或者在一些情况下在药物施用之前用于预处理皮肤)以提高角质层的渗透性，并因此提高药物通过皮肤的穿透性的化合物。优选的化学穿透增强剂是无害的化合物并且只用来促进药物通过角质层，而无论是通过被动扩散方法还是通过诸如电转运等能量驱动方法(参见伊J如MeidanVM等，Enhancediontophoreticdeliveryofbuspironehydrochlorideacrosshumanskinusingchemicalenhancers.尸/z"r,w.264:73-83,2003)。虽然已就本发明的优选实施方式对本发明进行了描述，但是可以作出对木领域技术人员而言显而易见的变化和修改，而不背离在所附权利要求中所阐述的本发明的范围，这是可以理解的。例如，在本领域内已知的不明显降低所述肽的有效性的其他取代也可在本发明的肽中采用。其他具有取代基的D-Phe残基，如(4Br)D-Phe或(2，4Cl2)D-Phe，可以用于2位。D-Lys(Bu)和D-Lys(Et2)均被认为等效于D-Ily和D-Arg(Et2)。如果需要，所述四肽的N-端可如在本领域中所知的那样进行全甲基化。以上提及的所有美国专利的公开内容都通过引用结合在此。本发明的具体特征在随后的权利要求中加以强调。权利要求1.一种化合物，包括一种合成肽酰胺的代谢物，其中，(i)所述代谢物可以由向哺乳动物施用所述肽酰胺而形成，(ii)所述化合物对κ阿片样受体具有的亲和力至少是所述化合物对μ阿片样受体的亲和力的1,000倍，(iii)所述化合物表现出很少或不表现出细胞色素P450酶抑制活性，以及(iv)所述肽酰胺具有下式H-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Q其中，Xaa1选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被NO2、F、Cl或者CH3取代的D-Phe，其中的氨基酸α碳被甲基取代的D-Phe，D-Tyr，D-Tic，D-Acp，D-2-Thi，或D-3-Thi；Xaa2选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被NO2、F、Cl、3，4二氯或者CH3取代的D-Phe，D-1Nal，D-2Nal，D-Tyr，或D-Trp；Xaa3选自由下列物质组成的组D-Nle，D-Leu，其中的氨基酸α碳被甲基取代的D-Leu，D-Hle，D-Met，D-Val，D-Phe，或D-Acp；Xaa4选自由下列物质组成的组D-Arg，D-Har，D-nArg，D-Lys，D-Lys(Ipr)，D-Arg(Et2)，D-Har(Et2)，D-Amf(G)，D-Dbu，D-Orn，其中的氨基酸α碳被甲基取代的D-Orn，或D-Orn(Ipr)，而G是H或脒基；以及Q是NR1R2、哌啶基、4-羟基哌啶基、4-氧-哌啶基、哌嗪基、4-单取代或4，4-二取代的哌嗪基或者δ-鸟氨酸基，而R1是具有取代基的苄基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或低级烷基。2.如权利要求1所述的化合物，其中，所述代谢物是该合成肽酰胺的一种N-氧化物。3.如权利要求2所述的化合物，其中，Q是NHR,，R,是2-吡啶甲基、3-吡啶甲基、或者4-吡啶甲基。4.如权利要求3所述的化合物，其中，所述N-氧化物形成在所述吡啶甲基部分的环氮上。5.如权利要求14所述的化合物，其中，Xaa,和Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle或D-Leu，Xaa4是D-Arg或D-Orn。6.如权利要求1所述的化合物，其中，所述合成肽酰胺是H-D-Phe-D-Phe-DNle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基，任选包括或不包括任何药学可接受的反离子。7.如权利要求6所述的化合物，其中，所述化合物是H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基N-氧化物，可选择地包括或不包括任何药学可接受的反离子。8.—种化合物或者所述化合物的任何多晶型物，所述化合物是具有下式的一种合成肽酰胺的N-氧化物H-X叫-X叫-X叫-X叫-Q-N-氧化物，其中，Xaa,选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、Cl或者CH3取代的D-Phe，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Phe，D-Tyr，D-Tic，D-Acp，D-2-Thi，或D-3-Thi;Xaa2选自由下列物质组成的组其中的苯基任选被N02、F、Cl、3，4二氯或者CH3取代的D-Phe，D-lNal，D-2Nal，D-Tyr，或D-Trp;Xaa3选自由下列物质组成的组D-Nle，D-Leu，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Leu，D-Hle，D-Met，D-Val，D-Phe，或D-Acp;Xaa4选自由下列物质组成的组D-Arg，D-Har，D-nArg，D-Lys，D-Lys(Ipr)，D-Arg(Et2)，D-Har(Et2)，D-Amf(G)，D-Dbu，D-Orn，其中的氨基酸a碳被甲基取代的D-Orn，或D-Om(Ipr)，而G是H或脒基；以及Q是NRiR2、哌啶基、4-羟基哌啶基、4-氧-哌啶基、哌嗪基、4-单取代或4,4-二取代的哌嗪基或者S-鸟氨酸基，而R！是具有取代基的苄基、2-噻唑基、2-吡啶甲基、3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，R2是H或低级垸基。9.如权利要求8所述的化合物，其中，Q是NHR,，Ri是2-吡啶甲基，3-吡啶甲基或者4-吡啶甲基，以及所述N-氧化物形成在所述吡啶甲基部分的环氮上。10.如权利要求89中任二项所述的化合物，其中，Xaa和Xaa2是D-Phe，Xaa3是D-Nle或D-Leu，Xaa4是D-Arg或D-Orn。11.如权利要求10所述的化合物，其中，所述化合物是H-D-Phe-D-Phe-DNle-D-Arg-NH-4-卩比啶甲基N-氧化物，任选包括或不包括任何药学可接受的反离子。12.—种药物组合物，所述药物组合物包含抗伤害感受作用量的权利要求111中任一项所述的化合物以及一种对其药学可接受的液体或固体载体。13.—种治疗方法，该方法包括施用药学有效量的权利要求111中任一项所述的化合物，其中所述方法能有效地(a)在存在内脏痛、类风湿性关节炎、腹部术后症状或者急性或慢性疼痛时实现抗伤害感受作用，或者(b)治疗不稳定膀胱、失禁或消化道梗阻，(c)治疗炎性肠病或自身免疫疾病，或者(d)缓解搔痒症，或者(e)在一种病症中产生促水排泄，所述病症的症状由体内钠和水失衡所促成。全文摘要本发明涉及表现出与μ阿片样受体相比而言对κ阿片样受体(KOR)的高选择性并表现出很少或者没有CYP3A4抑制活性的某些肽，所述肽包括四个D-异构体氨基酸残基的四肽，所述四肽具有作为N-氧化物取代酰胺的C-端，例如H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基-N-氧化物。一个优选的化合物是H-D-Phe-D-Phe-D-Nle-D-Arg-NH-4-吡啶甲基-N-氧化物，其对KOR的亲和力至少是其对μ阿片样受体的亲和力的1000倍，并且对CYP3A4具有大于约10微摩尔的IC₅₀。文档编号C07K5/10GK101454338SQ200780019373公开日2009年6月10日申请日期2007年5月25日优先权日2006年5月26日发明者克劳迪奥·D·施泰菌格特,吉恩-路易斯·朱尼安,哈维尔·S·迪亚斯,托德·W·范德拉赫,皮埃尔·J·M·里维埃,耶日·A·特洛伊纳尔,迈克尔·E·刘易斯申请人:卡拉治疗学股份有限公司