用作组胺h1和h3拮抗剂的2-取代的4-苄基酞嗪酮衍生物的制作方法

专利名称：用作组胺h1和h3拮抗剂的2-取代的4-苄基酞嗪酮衍生物的制作方法
专利说明用作组胺H1和H3拮抗剂的2-取代的4-苄基酞嗪酮衍生物 本发明涉及化合物、其制备方法、包含其的药物组合物及其在治疗各种疾病，尤其是呼吸道炎性和/或过敏性疾病中的用途。
过敏性鼻炎、肺炎和肺充血为通常与例如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎其他病症相关的医学病症。一般而言，这些病症至少部分由与从各种细胞，尤其是肥大细胞，释放组胺相关的炎症介导。
过敏性鼻炎，也称作“枯草热”，影响全球大部分人口。存在这两种过敏性鼻炎；季节性和常年性。季节性过敏性鼻炎的临床症状通常包括鼻痒和疼痛、打喷嚏以及通常伴随着鼻充血的流水样鼻涕。常年性过敏性鼻炎的临床症状类似，只是鼻塞可能更明显。两种过敏性鼻炎都还可导致其他症状，例如咽喉痒和/或眼睛痒、泪溢以及眼睛周围浮肿。过敏性鼻炎症状的强弱可在令人讨厌的程度和衰弱之间变动。
过敏性鼻炎和其他过敏性病症与从各种细胞，但尤其是肥大细胞，中释放组胺相关。组胺的生理效应通常由名为H1、H2和H3的三种受体亚型所介导。H1受体广泛分布于CNS和外周，并与失眠和急性炎症相关。H2受体介导响应组胺的胃酸分泌。H3受体存在于CNS和外周神经末梢，并介导神经递质释放的抑制[Hill等，Pharmacol.Rev.，49253-278，(1997)]。近来，已鉴别出名为H4受体的组胺受体家族的第四名成员[Hough，Mol.Pharmacol.，59415-419，(2001)]。同时H4受体的分布似乎被限定在免疫和炎症系统的细胞中，该受体的生理作用仍有待于阐明。
血管和神经末梢中H1受体的活化引起过敏性鼻炎的许多症状，其包括痒、打喷嚏以及产生水样鼻涕。为选择性H1受体拮抗剂的口服抗组胺化合物(例如氯苯那敏、西替利嗪、地氯雷他定和非索非那定)和鼻内抗组胺药(例如氮

斯丁和左卡巴斯汀)能有效治疗与过敏性鼻炎相关的痒、打喷嚏和流鼻涕，但对鼻充血症状无效[Aaronson，Ann.Allergy，67541-547，(1991)]。因此，同时给予H1受体拮抗剂和拟交感神经药例如伪麻黄碱或羟甲唑啉以治疗过敏性鼻炎的鼻充血症状。认为这些药物通过激活α-肾上腺素能受体和提高鼻粘膜内血管的血管紧张度而产生解充血作用。利用拟交感神经药治疗鼻充血常常受到CNS刺激性及其对血压和心率的影响的限制。因此降低鼻充血而不对CNS和心血管系统造成影响的治疗可提供现有疗法所没有的优势。
组胺H3受体在CNS和外周神经末梢广泛表达，并介导神经递质释放的抑制。在离体人体隐静脉中体外电刺激交感神经引起去甲肾上腺素释放提高和平滑肌收缩，这可通过组胺H3受体激动剂而得到抑制[Molderings等，Naunyn-Schmiedeberg’s Arch.Pharmacol.，34646-50，(1992)；Valentine等，Eur.J.Pharmacol.，36673-78，(1999)]。H3受体激动剂还抑制交感神经在猪鼻粘膜中对血管紧张度的活化作用[Varty & Hey.，Eur.J.Pharmacol.，452339-345，(2002)]。在体内，H3受体激动剂抑制交感神经激活引起的鼻气道阻力的降低[Hey等，Arzneim-Forsch Drug Res.，48881-888，(1998)]。人体鼻粘膜内组胺H3受体的激活抑制交感血管收缩[Varty等，Eur.J.Pharmacol.，48483-89，(2004)]。此外，已表明H3受体拮抗剂与组胺H1受体拮抗剂结合能逆转肥大细胞活化对鼻气道阻力和鼻腔体积(鼻充血的指标)的影响[Mcleod等，Am.J.Rhinol.，13391-399，(1999)]，在正常人体受试体进行的组胺鼻测试研究提供了H3受体对组胺诱导的鼻塞的作用的进一步证据[Taylor-Clark等，Br.J.Pharmacol.，144，867-874，(2005)]，虽然这一方面H3机理是新的和不可预见的，并可能最终证实为临床沉默。
WO2004/035556公开了作为组胺H3或组胺H1/H3双拮抗剂或反相激动剂的取代的哌嗪、(1，4)氮杂

和2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷。
已发现为双组胺H1和H3受体拮抗剂的新型化合物。“双”组胺H1和H3受体拮抗剂指化合物对两种受体亚型具有活性。例如，对H1受体的活性可为对H3受体的活性的约100倍以内，例如在约10倍或更小以内。
因此，本发明提供了式(I)化合物或其盐
其中 A代表N或CH； R1和R2各自独立代表卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基或三氟甲基； y和z各自独立代表0、1或2； R3代表-(CH2)aNR4R5基团或式(i)基团
其中 a代表1、2或3； b代表0或1； c代表0、1或2，d代表0、1、2或3，使c和d不同时为0； R4代表氢或C1-6烷基； R5和R6各自独立代表选自式(a)、(b)或(c)的基团(a)
其中，对式(a)而言 e代表1-6； e′代表2-4； f代表0、1或2，g代表0、1、2或3，使f和g不同时为0； h代表0、1或2； R7代表C1-3烷基； 其中，对式(b)而言 i代表1-6； X代表化学键、O或-N(R10)C(O)-，其中R10代表氢或C1-6烷基； j和k各自代表1或各自代表2； R8代表氢、C3-6环烷基或C1-6烷基； 其中，对式(c)而言 l代表1-6； l′代表0-3； m代表0、1或2，n代表0、1、2或3，使m和n不同时为0，且使1’加n必须为1、2或3； R9代表氢、C3-6环烷基或C1-6烷基。
式(I)化合物可用于治疗与从细胞例如肥大细胞释放组胺有关的各种疾病，尤其是炎性和/或过敏性疾病，例如呼吸道炎性和/或过敏性疾病，例如过敏性鼻炎。此外，式(I)化合物可表现出提高的效果，因为其可具有以下性质中的一种或多种 (i)H3拮抗剂活性，pKi大于约7，例如大于约8； (ii)H1受体拮抗剂活性，pKi大于7，例如大于约8； (iii)黏膜纤毛清除率更小/作用时间延长； (iv)低CNS浸透。
具有如此效果的化合物适于鼻内输送，和/或能每天给药一次，和/或相对于其他已知疗法还可能具有改善的副作用。
在一个实施方案中，提供了式(I)化合物，其中A代表CH，即提供了下式(I)化合物
其中取代基R1、R2、R3、y和z如上所定义。
在另一个实施方案中，提供了式(I)化合物，其中A代表N。
在另一个实施方案中，提供了式(I)化合物，其中 A代表CH，R1和R2各自独立代表卤素，例如氟或氯、C1-3烷基(例如甲基)、C1-3烷氧基(例如甲氧基)、羟基或三氟甲基； y和z各自独立代表0、1或2，例如0或1； R3代表-(CH2)aNR4R5基团或式(i)基团
其中 a代表1、2或3，例如2； b代表0或1，例如0； c代表0、1或2，d代表0、1、2或3，使c和d不同时为0，例如c和d均独立代表1或2； R4代表氢或C1-3烷基，例如甲基； R5和R6各自独立代表选自式(a)、(b)或(c)的基团
其中，对式(a)而言 e代表1-6，例如1-5，例如3或4； e′代表2-4，例如3； f和g各自独立代表1或2； h代表0或1，例如0； R7代表C1-3烷基，例如甲基或异丙基； 其中，对式(b)而言 i代表1-6，例如1-3，例如3； X代表化学键、O或-N(R10)C(O)-，其中R10代表氢或C1-3烷基，例如甲基，例如氢； j和k各自代表1或各自代表2，例如各自代表2； R8代表氢、C3-5环烷基(例如环丁基)或C1-3烷基(例如异丙基)； 其中，对式(c)而言 l代表1-5，例如2或4 l′代表0-2，例如0； m和n各自独立代表1或2，使m和n不同时为0，例如分别为1和2，且使1’加n必须为1、2或3； R9代表氢、C3-5环烷基(例如环丁基)或C1-3烷基(例如异丙基)。
或者，在该其他实施方案中，A可代表N。
在另一个实施方案中，R3代表式(i)基团。
在另一个实施方案中，A代表CH，R3代表式(i)基团。
在另一个实施方案中，R3代表式(i)基团，R6代表式(a)基团。
在另一个实施方案中，A代表CH，R3代表式(i)基团，R6代表式(a)基团。
在另一个实施方案中，R3代表基团-(CH2)aNR4R5，R5代表选自式(a)、(b)或(c)的基团，尤其是式(b)基团。
在另一个实施方案中，A代表CH，R3代表基团-(CH2)aNR4R5、R5代表选自式(a)、(b)或(c)的基团，尤其是式(b)基团。
在另一个实施方案中，y代表0。
在另一个实施方案中，A代表CH，y代表0。
在另一个实施方案中，z代表1。
在另一个实施方案中，A代表CH，z代表1。
在另一个实施方案中，z代表1，R2在4-位即对位取代。
在另一个实施方案中，A代表CH，z代表1，R2在4-位即对置取代。
在另一个实施方案中，R2代表氯、氟、C1-3烷氧基(例如甲氧基)或羟基。
在另一个实施方案中，A代表CH，R2代表氯、氟、C1-3烷氧基(例如甲氧基)或羟基。
在另一个实施方案中，R5和R6代表式(a)或(c)基团，其中在苯环上的取代方式为对位。
在另一个实施方案中，A代表CH，R5和R6代表式(a)或(c)基团，其中在苯环上的取代方式为对位。
在另一个实施方案中，R5和R6代表式(a)基团，其中f和g均代表2，h代表0。
在另一个实施方案中，R5和R6代表式(b)基团，其中R8代表C3-5环烷基，尤其是环丁基。
在另一个实施方案中，R5和R6代表式(c)基团，其中R9代表C3-5环烷基，尤其是环丁基。
在另一个实施方案中，R5和R6代表式(b)基团，其中j和k各自代表2。
在另一个实施方案中， b代表0或1； c代表0、1或2，d代表0、1、2或3，使c和d不同时为0，条件是b和d不同时为0； i代表1-6；和 X代表化学键、O或-N(R10)C(O)-，其中R10代表氢或C1-6烷基，条件是当X代表O时，i代表2-6。
当A代表CH，R5和R6的代表性实例包括 4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基， 2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基， 4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基， 5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊基， (4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)甲基， 2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基， 3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙基， 3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基， (3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)甲基， N-(2-乙基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-羧酰胺， N-(3-丙基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-羧酰胺， N-(4-丁基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-羧酰胺， 2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基或 4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}丁基。
在另一个实施方案中，提供了如上所定义的式(I)化合物，条件是所述化合物不是4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其盐或其单独的异构体或其混合物。
代表性的式(I)化合物包括实施例1-24的化合物或其盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(包括其R和S异构体及其混合物)及其盐，尤其是其药学可接受的盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮及其盐，尤其是其药学可接受的盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2S)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮及其盐，尤其是其药学可接受的盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮及其盐，尤其是其药学可接受的盐。
应当理解的是本发明包括本文所述实施方案、基团、代表性实例和取代基的所有可能组合。
C1-6烷基，无论是单独的或作为另一基团的一部分，可为直链或支化的，C1-6烷氧基应作类似解释。代表性的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、新戊基和正己基。具体的烷基和烷氧基基团为C1-3烷基和C1-3烷氧基。
C3-6环烷基指具有3-6个碳原子的非芳族环烃环。代表性的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
除非另有说明，否则术语“卤素”在本文中用于描述氟、氯、溴或碘。
应当理解的是本文提及式(I)化合物时包括式(I)化合物的游离碱或其盐，例如其药学可接受的盐，或溶剂化物。
式(I)化合物可为药学可接受的盐的形式和/或可以药学可接受的盐给药。药学可接受的盐包括酸和碱加成盐。合适的盐的综述见Berge等，J.Pharm.Sci.，661-19，(1977)。
一般而言，药学可接受的盐可通过利用所需的合适的酸轻易制备。盐可从溶液中沉淀并通过过滤收集，或可通过蒸发溶剂回收。
药学可接受的酸加成盐可通过以下方法形成式(I)化合物与合适的无机或有机酸(例如氢溴酸、盐酸、甲酸、硫酸、硝酸、磷酸、丁二酸、马来酸、乙酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、萘二磺酸、联苯磺酸或萘磺酸)任选在合适的溶剂例如有机溶剂中反应得到盐，所得盐一般通过例如结晶和过滤分离。因此，式(I)化合物的药学可接受的酸加成盐可为例如氢溴酸盐、盐酸盐、甲酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、丁二酸盐、马来酸盐、乙酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘二磺酸盐、联苯二磺酸盐或萘磺酸盐。
其他非药学可接受的盐，例如草酸盐或三氟乙酸盐可用于例如式(I)化合物的分离中，这些盐包括在本发明范围内。式(I)化合物盐的所有可能化学计量和非化学计量形式包括在其范围内。
具体的盐包括萘二磺酸盐，例如2，6-或1，5-萘二磺酸盐，例如1，5-萘二磺酸盐。
在一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮的萘二磺酸盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮的1，5-萘二磺酸盐。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮的1，5-萘二磺酸盐一水合物盐。
应当理解的是许多有机化合物可与有机化合物在其中反应或有机化合物从其中沉淀或结晶的溶剂形成络合物。这些络合物称作“溶剂化物”。例如与水的络合物称作“水合物”。高沸点溶剂和/或极易形成氢键的溶剂，例如水、二甲苯、N-甲基吡咯烷酮或甲醇，可用于形成溶剂化物。用于鉴别溶剂化物的方法包括但不限于NMR和微量分析。式(I)化合物的溶剂化物在本发明范围内。
式(I)化合物可为晶体或无定形形式。此外，式(I)化合物的某些晶体形式可以多晶型存在，其包括在本发明范围内。式(I)化合物的热力学最稳定多晶型物尤其引人注目。
式(I)化合物的多晶型物可利用许多传统分析方法表征和区别，包括但不限于X-射线粉末衍射(XRPD)图、红外(IR)谱图、拉曼谱图、差示扫描量热法(DSC)、热重量分析(TGA)和固状核磁共振(NMR)。
应当理解的是式(I)化合物可具有一个或多个不对称的碳原子从而使可形成光学异构体，例如对映异构体或非对映异构体。本发明包括式(I)化合物的所有光学异构体，分离的单独异构体以致基本不含其他异构体(即纯的)或其混合物(例如消旋体和外消旋混合物)。可分离分离的单独异构体以致基本不含其他异构体(即纯的)，从而使存在小于约10％，尤其是小于约1％，例如小于约0.1％的其他异构体。
此外，应当理解的是R和S对映异构体可通过以下方法从消旋体中分离传统拆分法，例如包括手性固定相的制备HPLC，利用游离碱与手性酸的盐分步结晶拆分，利用手性助剂化学转换为非对映异构体，接着色谱分离所述异构体，然后去除手性助剂并再生纯的对映体，或不对称全合成。
应当从上文理解的是式(I)化合物及其盐的所有溶剂化物、水合物、络合物、异构体和多晶型物均包括在本发明范围内。
还提供了制备式(I)化合物或其盐的方法。
依据第一种方法A，式(I)化合物可通过式(IIa)或(IIb)化合物
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d和R4如上文对式(I)中的定义， 与反应式(IIIa)、式(IIIb)或式(IIIc)化合物制备

其中e、e′、f、g、h、R7、i、X、j、k、R8、l、l′、m、n和R9如上文对式(I)中的定义，L代表离去基团，例如氯、溴、碘、活化的羟基，例如甲磺酸基或甲苯磺酸基，或L代表醛，这样L-(CH2)e、i或1为HC(O)-(CH2)(e、i或1)-1。
烷基化反应通常可在以下条件进行在合适的碱存在下，例如三乙胺(NEt3)、二异丙基乙基胺(DIPEA)或碳酸氢钠(NaHCO3)，在合适的溶剂中，例如乙腈(MeCN)或N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，任选合适的高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如碘化钾(KI)或碘化钠(NaI)。
当L代表醛时，还原胺化反应可在以下条件进行利用合适的还原剂，例如三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)3)，任选在合适的酸催化剂存在下，例如乙酸，在溶剂中，例如二氯甲烷(DCM)或四氢呋喃(THF)。
在方法A的一个实施方案中，A代表CH。
式(IIa)化合物可依据本文所述方法制备(见

图1和2)。
德国专利申请DE 3634942A1公开了式(IIb)化合物。或者，式(IIb)化合物可依据本文所述方法制备(见图2)。
流程1式(IIa)化合物的合成-其中R4为H，A代表CH
其中A代表CH，R1、y、R2、z和a如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)合适的碱，例如氢化钠(NaH)，溶剂，例如DMF；ii)肼(NH2NH2)，溶剂，例如乙醇(EtOH)，高温，例如回流。
就其中R4为C1-6烷基的式(IIa)化合物而言，可任选进行烷基化反应。一般而言，烷基化反应在以下条件进行利用烷基化剂R4-L(其中R4如上所定义，L代表离去基团，例如氯、溴、碘或活化的羟基，例如甲基磺酸基或甲苯磺酸基)，与合适的碱，例如碳酸钾(K2CO3)，在溶剂中，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI或NaI。
美国专利US 4,841,047、美国专利1,377,231和G Scheffer等在Arch.Pharm.，321205-208(1988)中公开了其中A代表CH的式(XI)化合物的合成(见化合物4)。或者，式(XI)化合物可依据本文所述方法制备(见流程2)。
式(XII)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如N-(溴甲基)邻苯二甲酰亚胺、N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺和N-(3-溴丙基)邻苯二甲酰亚胺。
流程2其中A代表CH的式(IIb)化合物的合成
其中A代表CH，R1、y、R2、z、b、c和d如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)高温，例如约180℃-约250℃，合适的碱，例如乙酸钠(NaOAc)，合适的溶剂，例如N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)；ii)NH2NH2，或硫酸肼和氢氧化钠(NaOH)，在合适的溶剂中，例如乙醇；iii)合适的溶剂，例如四氢呋喃(THF)，合适的偶氮二甲酸酯例如偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)或其他试剂例如溴化四丁基铵(TBAD)，合适的膦，例如三苯基膦(PPh3)，任选在低温，例如在约-15℃；iv)利用酸去保护，例如氯化氢(HCl)或三氟乙酸(TFA)，溶剂，例如二氧六环或DCM。
在上述合成的改进中，步骤iii和iv可连续进行，而不分离Boc-保护的中间体。
在上述反应流程的另一种改进中，可活化式(XV)化合物中的醇基团以提高反应性，进而得到例如甲磺酸酯或甲苯磺酸酯等基团。一般而言，式(XV)的活化化合物与式(XI)化合物的偶联反应在以下条件进行利用合适的碱，例如碳酸铯或碳酸钾，任选在高温，例如约100℃，在合适的溶剂中，例如甲基异丁基酮(MIBK)。
其中A代表CH的式(XIII)化合物购自例如Sigma-Aldrich、Apollo、Fluorochem、Apin、Davos或Merck，例如邻苯二甲酸酐、3-氯邻苯二酸酐、4-氯邻苯二酸酐、4-溴邻苯二酸酐、5-溴-异苯并呋喃-1，3-二酮、3-氟邻苯二酸酐、4-氟邻苯二酸酐、3，6-二氯邻苯二酸酐、4，5-二氯邻苯二酸酐、4，5-二氟邻苯二酸酐、3，6-二氟邻苯二酸酐、3-羟基邻苯二酸酐和4-甲基邻苯二酸酐，和/或可利用本领域熟练技术人员所熟知的方法制备，例如可由购自例如Wako的3，6-二乙酰氧基邻苯二酸酐制备的3，6-二羟基邻苯二酸酐。C1-6烷基取代的邻苯二甲酸酐可利用本领域熟练技术人员所熟知的方法由市售的溴化物化合物制备。此类反应通常可在以下条件进行利用合适的三烷基硼烷(例如购自例如Sigma-Aldrich的三乙基硼烷和三丁基硼烷)，与合适的钯催化剂，例如二氯[1，1’-二(二苯基膦)二茂铁]合钯，在合适的高温，例如70-100℃，与合适的碱，例如K2CO3，在合适的溶剂中，例如DMF。
式(XIV)化合物购自例如Sigma-Aldrich、Wako、Fluka或Apollo，例如苯乙酸、3-碘苯乙酸、2-溴苯乙酸、4-溴苯乙酸、3-氯苯乙酸、4-氯苯乙酸、3-氟苯乙酸、4-甲基苯乙酸、4-异丙基苯乙酸、4-叔丁基苯乙酸、4-甲氧基苯乙酸、4-乙氧基苯乙酸、4-正丁氧基苯乙酸、4-羟基苯乙酸、3-(三氟甲基)苯乙酸、4-(三氟甲基)苯乙酸、4-(溴甲基)苯乙酸、2，4-二氯苯乙酸、2-氟-3-(三氟甲基)苯乙酸、4-羟基-3-甲氧基苯乙酸和2，4-二甲氧基苯乙酸。
式(XV)化合物购自例如Sigma-Aldrich、Magical Scientific、Fluka、SynChem Inc.或Apollo，例如(R)-(-)-N-Boc-3-羟基吡咯烷醇、(S)-(+)-N-Boc-3-羟基吡咯烷醇、(R)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇、(S)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇、3-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯、1-Boc-4-羟基哌啶、N-Boc-4-哌啶甲醇和4-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯。Israeli J.Chem.，3747-67(1997)公开了3-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯。
其中醇被活化的式(XV)化合物可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法制备，例如通过相应市售的醇的甲磺酰化或甲苯磺酰化。此外，其可通过本文所述方法制备(见上文和实施例24C，步骤3A)。活化反应通常可在以下条件进行利用合适的活化剂，例如甲磺酰氯(MsCl)，与合适的碱，例如三乙胺(NEt3)，在合适的溶剂中，例如叔丁基甲基醚(TBME)，一般在低温，例如0-20℃。
流程3式(IIIa)化合物的合成-其中L为活化的羟基
其中e、e′、f、g、h和R7如上文对式(I)中的定义，R11代表C1-6-烷基。
试剂和条件i)合适的碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI；ii)R11OH(其中R11代表C1-6烷基，例如甲醇[MeOH])，酸，例如HCl；iii)溶剂，例如THF，合适的催化剂，例如DIAD、PPh3；iv)合适的还原剂，例如氢化锂铝(LiAlH4)，溶剂，例如THF和/或乙醚；v)合适的活化剂例如甲苯磺酰氯(TsCl)或MsCl，合适的碱，例如DIPEA，在合适的溶剂中，例如DCM。
式(X)化合物购自例如Sigma-Aldrich或Alfa Aesar，例如氮杂环辛烷、六氢-1H-氮杂

、哌啶、2-甲基哌啶、3-甲基哌啶、4-甲基哌啶、2，6-二甲基哌啶、3，3-二甲基哌啶、吡咯烷、2-甲基吡咯烷、2，5-二甲基吡咯烷和氮杂环丁烷。
式(XVI)化合物购自Sigma-Aldrich，例如3-羟基苄醇、4-羟基苄醇、4-羟基苯乙醇和3-(4-羟基苯基)-1-丙醇。
式(XVII)化合物购自Sigma-Aldrich，例如1-溴-2-氯乙烷、1-溴-3-氯丙烷和1-溴-4-氯丁烷。
式(XVIII)化合物购自Sigma-Aldrich，例如3-羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、2-羟基苯乙酸、4-羟基苯乙酸、3-(4-羟基苯基)丙酸和4-(2-羟基苯基)-丁酸。
其他式(XVIII)化合物可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法制备，例如通过市售的相应甲氧基化合物的脱甲基化制备。此类反应可例如通过利用溴化氢的乙酸溶液(约48％)进行。4-(4-甲氧基苯基)丁酸购自例如Sigma-Aldrich。
式(XIX)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如2-溴乙醇、3-溴-1-丙醇和4-溴-1-丁醇。
式(XX)化合物购自Apollo或Maybridge，例如3-(4-羟基苯基)丙酸乙酯。或者，式(XX)化合物可依据本文所述方法制备(见流程3，上文)。
流程4式(IIIa)化合物的合成-其中e为3-6，L为活化的羟基
其中e为3-6，e′、f、g、h和R7如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI或NaI；ii)碘化铜(CuI)，合适的催化剂，例如氯化二[三苯基膦]合钯(II)(Pd(PPh3)2Cl2)，碱，例如NEt3，溶剂，例如THF；iii)氢气，合适的催化剂，例如载在碳上的钯(Pd/C)，溶剂，例如EtOH；iv)合适的活化剂，例如TsCl或MsCl，碱，例如NEt3或吡啶，任选在合适的溶剂中，例如DCM。
式(XXI)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如2-碘苯酚、3-碘苯酚和4-碘苯酚。
式(XXII)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如炔丙醇、3-丁炔-1-醇、4-戊炔-1-醇和5-己炔-1-醇。
流程5式(IIIa)化合物的合成-其中L为醛，e为4
其中e代表4，e′、f、g、h和R7如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI或NaI；ii)3-丁烯醛缩二乙醇，合适的硼烷，例如9-硼杂双环壬烷(9-BBN)，合适的催化剂，例如二氯[1，1’-二(二苯基膦)二茂铁]合钯，碱，例如K2CO3，溶剂，例如水/DMF，一般在高温，例如约70℃；iii)H2，催化剂，例如Pd/C，溶剂，例如EtOH；iv)合适的酸，例如乙酸(AcOH)；v)MeOH，SCX-2层析柱。
式(XXIII)化合物，例如2-溴苯酚、3-溴苯酚和4-溴苯酚，购自例如Sigma-Aldrich。
流程6式(IIIb)化合物的合成-其中X为O，L为活化的羟基或卤化物
其中i、j、k和R8如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI；ii)合适的活化剂，例如TsCl或MsCl，碱，例如NEt3，溶剂，例如DCM。
国际专利申请WO 2004/056369(见实施例3和4)和WO 2005/123723(见描述17)公开了式(XXIV)化合物，并为Bioorg.Med.Chem.Lett.，11685-688(2001)所描述。
式(XXXVI)化合物购自例如Sigma-Aldrich或TCI，例如2-溴乙醇、3-溴-1-丙醇、4-溴-1-丁醇、5-溴-1-戊醇和6-溴-1-己醇。
式(XXXVII)化合物购自Sigma-Aldrich，例如溴氯甲烷、1-溴-2-氯乙烷、1-溴-3-氯丙烷、1-溴-4-氯丁烷、1-溴-5-氯戊烷和1-溴-6-氯己烷。
流程7式(IIIc)化合物的合成-其中L为活化的羟基
其中l、l′、m、n和R9如上文对式(I)中的定义，P代表基于硅的保护基。
试剂和条件i)溶剂，例如THF，合适的偶氮二甲酸酯，例如DIAD或偶氮二甲酸二叔丁酯(DTBAD)，合适的膦，例如PPh3；ii)TFA，溶剂，例如DCM；iii)合适的还原剂，例如NaBH(OAc)3，溶剂，例如MeOH，酸催化剂，例如AcOH；iv)2N氢氧化钠；v)活化剂，例如TsCl或MsCl，合适的碱，例如NEt3，溶剂，例如DCM。
式(XXV)化合物可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法、通过保护相应的市售的醇(例如购自例如Sigma-Aldrich的4-(2-羟乙基)苯酚)或通过利用本文所述方法(见例如中间体52)制备。
式(XXVI)化合物购自例如Sigma-Aldrich、Magical Scientific、Fluka、SynChem Inc.或Apollo，例如(R)-(-)-N-Boc-3-羟基吡咯烷醇、(S)-(+)-N-Boc-3-羟基吡咯烷醇、(R)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇、(S)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇、3-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯、1-Boc-4-羟基哌啶、N-Boc-4-哌啶甲醇和4-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯。Israeli J.Chem.，3747-67(1997)公开了3-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯。
式(XXVI)化合物也可制备本领域熟练技术人员所熟知的方法通过，例如Boc-保护市售的胺，例如购自例如Sigma-Aldrich或AlbernateCorporation的3-(羟甲基)吡咯烷、2-(2-羟乙基)哌啶和4(2-羟乙基)哌啶。
式(XXVII)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如环丁酮、环戊酮、环己酮、甲醛、乙醛、丙醛、2-丙酮、2-丁酮、丁醛、戊醛和己醛。
流程8式(IIIc)化合物的合成-其中1为3-6，L为活化的羟基
其中l为3-6，l′、m、n和R9如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)合适的碱，例如氢化钠，合适的溶剂，例如N-甲基-2-吡咯烷酮，高温，例如约80℃；ii)合适的酸，例如TFA，溶剂，例如DCM；iii)合适的还原剂，例如NaBH(OAc)3，溶剂，例如DCM，任选的酸催化剂，例如AcOH；iv)CuI，合适的催化剂，例如Pd(PPh3)2Cl2，碱，例如NEt3，溶剂，例如THF；v)H2，催化剂，例如Pd/C，溶剂，例如EtOH；vi)合适的活化剂，例如TsCl或MsCl，碱，例如NEt3，溶剂，例如DCM。
式(XXXVIII)化合物，例如1-氟-2-碘苯、1-氟-3-碘苯和1-氟-4-碘苯、购自例如Sigma-Aldrich。
式(XXVIII)化合物，例如炔丙醇、3-丁炔-1-醇、4-戊炔-1-醇和5-己炔-1-醇，购自例如Sigma-Aldrich。
依据第二种方法B，其中R3为式(i)基团和其中A代表CH的式(I)化合物可通过式(IV)化合物
其中A代表CH，R1和y如上文对式(I)中的定义，R3为式(i)基团，L代表离去基团，例如氯或溴，
其中R2和z如上文对式(I)中的定义，M-配体代表以下基团中的一种Zn-X(其中X为氯或溴)、B(OH)2、SnR3(其中R代表C1-6烷基，例如丁基)或SiR3(其中R代表C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基)。
当M-配体为Zn-X时，Negishi偶联反应可在以下条件进行在合适的催化剂存在下，例如四(三苯基膦)合钯(O)(Pd(PPh3)4)，在合适的溶剂中，例如THF，在合适的温度。
当M-配体为B(OH)2时，Suzuki偶联反应可在以下条件进行在合适的碱存在下，例如K2CO3，在合适的催化剂存在下，例如Pd(PPh3)4或氯化(二苯基膦基二茂铁)合钯(II)(Pd(dppf)Cl2)，在合适的溶剂中，例如THF或苯，一般在高温，例如约60℃。
当M-配体为时SnR3，Stille偶联反应通常在以下条件进行利用合适的催化剂，例如Pd(PPh3)4，在合适的溶剂中，例如MeCN或DMF，任选与活化剂，例如氯化锂或CuI，任选在高温，例如约60℃。
当M-配体为SiR3时，Hiyama偶联反应可在以下条件进行利用合适的碱，例如氢氧化钠，在合适的溶剂中，例如THF，合适的氟离子源，例如氟化叔丁基铵，与合适的催化剂，例如乙酸钯(II)。
式(IV)化合物可依据下流程9制备。
式(V)化合物，例如3-氯苄基氯化锌、4-氯苄基氯化锌、4-溴苄基氯化锌、4-氟苄基氯化锌、3，4-二氟苄基氯化锌、4-甲氧基苄基氯化锌、4-乙氧基苄基氯化锌、3-甲基苄基氯化锌、4-甲基苄基氯化锌和3-(三氟甲基)苄基氯化锌，购自Sigma-Aldrich或Reike Metals。
式(V)化合物也可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法制备，例如相应的市售的苄基氯(例如购自Sigma-Aldrich的2-甲氧基苄基氯、4-异丙基苄基氯和4-叔丁基苄基氯)与锌粉在标准条件下反应。
流程9式(IV)化合物的合成，其中R3代表式(i)基团，A代表CH
其中A代表CH，R1、y、b、c和d如上文就式(I)所述，L代表离去基团，例如氯或溴。
试剂和条件i)合适的溶剂，例如THF，合适的偶氮二甲酸酯，例如DIAD，合适的膦，例如PPh3；ii)酸，例如HCl，溶剂，例如二氧六环；iii)碱，例如NEt3，溶剂，例如DMF，在合适的温度，例如约80℃。
式(XXIX)化合物购自Maybridge或Apollo，例如4-氯-1，2-二氢酞嗪-1-酮，和/或可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法由市售的式(XIII)化合物(见流程2)制备，例如Acta Chim.Acad.Sci.Hungaricae，88129-136(1976)所述方法。
依据第三种方法C，式(I)化合物，其中R5或R6代表式(b)基团，其中X代表-N(R10)C(O)-，可通过式(VI)化合物
其中j、k和R8如上文对式(I)中的定义， 与式(VIIa)或(VIIb)化合物反应制备
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d、i、R4和R10如上文对式(I)中的定义。
酰胺偶联反应通常可在以下条件进行在合适的活化剂存在下，例如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)，在合适的碱存在下，例如NEt3，在合适的溶剂中，例如DMF。
在方法C的一个实施方案中，A代表CH。
式(VI)化合物可依据流程10制备 流程10式(VI)化合物的合成
其中j、k和R8如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)三甲基氯硅烷和EtOH，接着氢氧化钠(NaOH)和水；ii)合适的还原剂，例如NaBH(OAc)3，溶剂，例如DCM，任选的酸催化剂，例如AcOH；iii)NaOH，水，EtOH。
欧洲专利申请EP 0528369A2公开了式(XXX)化合物(见实施例17)。5-氰基异二氢吲哚-2-甲酸叔丁酯购自例如Milestone Pharm.Tech.。
式(XXXI)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如环丁酮、环戊酮、环己酮、甲醛、乙醛、丙醛、2-丙酮、2-丁酮、丁醛、戊醛和己醛。
式(VIIa)和(VIIb)化合物可依据以下反应流程制备 流程11式(VIIa)和(VIIb)化合物的合成-其中R10为H，其中A代表CH
其中R10为H，A代表CH，i、R1、R2、y、z、a、b、c、d和R4如上文对式(I)中的定义，AG为活化基团，例如甲磺酸基或甲苯磺酸基。
试剂和条件i)合适的活化剂，例如TsCl或MsCl，碱，例如NEt3，溶剂，例如DCM；ii)合适的碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI；iii)合适的酸，例如HCl，溶剂，例如二氧六环。
对其中R10代表C1-6烷基的式(VIIa)和(VIIb)化合物而言，可进行任选的烷基化反应。一般而言，烷基化反应在以下条件进行利用烷基化剂R10-L(其中L为如上文所定义的离去基团)，与合适的碱，例如K2CO3，在溶剂中，例如2-丁酮，一般在高温，例如约80℃。任选可包括活化剂，例如KI或NaI。
式(XXXII)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如N-Boc-氨基乙醇、3-(Boc-氨基)-1-丙醇、4-(Boc-氨基)-1-丁醇、5-(Boc-氨基)-1-戊醇和6-(Boc-氨基)-1-己醇。
式(XXXIII)化合物可依据L.E.Canne，R.L.Winston，S.B.H.Kent，Tet.Lett.，383361-4(1997)(见化合物2)、S Kondo等，J.Antibiotics，341625-7(1981)和W.Hu，E.Reder，M.Hesse，Helv.Chim.Acta，792137-51(1996)(见化合物6)所述方法制备。
依据第四种方法D，式(I)化合物，其中R5或R6代表式(b)基团，其中X代表化学键，可通过式(VIII)化合物
其中j、k和R8如上文对式(I)中的定义， 与式(IIa)或(IIb)化合物反应制备。
还原胺化反应通常可在以下条件进行利用合适的还原剂，例如NaBH(OAc)3，任选在合适的酸催化剂存在下，例如乙酸，在合适的溶剂中，例如DCM或THF。
在方法D的一个实施方案中，A代表CH。
式(VIII)化合物可依据流程12制备 流程12式(VIII)化合物的合成
其中j、k和R8如上文对式(I)中的定义。
试剂和条件i)甲基溴化镁，合适的溶剂，例如THF，然后多聚甲醛，在溶剂中，例如甲苯，合适的碱，例如NEt3，高温，例如约80℃；ii)合适的碱，例如NEt3，溶剂，例如DMF，1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺酰基]甲磺酰胺；iii)乙酸钯(II)，1，3-二(二苯基膦)丙烷，三辛基甲硅烷，高温，例如约75℃。
根据需要可分离或可不分离中间体三氟甲磺酸酯化合物。
国际专利申请WO2004/056369(见实施例3和4)和WO2005/123723(见描述17)公开了式(XXIV)化合物，并为Bioorg.Med.Chem.Lett.，11685-688(2001)所描述。
依据第五种方法E，式(I)化合物，其中R5或R6代表式(a)基团，可通过式(IXa)或(IXb)化合物

其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d、e、e′和R4如上文对式(I)中的定义，L代表离去基团，例如氯、溴、碘， 与式(X)化合物反应制备
其中f、g、h和R7如上文对式(I)中的定义。
烷基化反应通常可在以下条件进行在合适的溶剂中，例如2-丁酮、MIBK或丙酮，任选在活化剂存在下，例如碘化钠或碘化钾，合适的碱，例如DIPEA或碳酸钾，在合适的温度，例如回流。
在方法E的一个实施方案中，A代表CH。
式(IXa)和(IXb)化合物可依据以下反应流程制备 流程13式(IXa)或(IXb)化合物的合成-其中L为Cl，其中A代表CH
其中R1、y、R2、z、b、c、d、e和e′如上文就式(I)所述，Ms代表甲磺酸基。应当理解的是用式(IIa)化合物代替式(IIb)化合物使用相同顺序的反应和试剂将得到式(IXa)化合物。
试剂和条件i)合适的还原剂，例如NaBH(OAc)3，溶剂，例如DCM，任选加入酸催化剂，例如AcOH；ii)合适的碱，例如K2CO3，溶剂，例如2-丁酮或MIBK，一般在高温，例如约80℃或回流，任选利用微波照射，任选加入活化剂，例如KI或NaI；iii)BBr3，溶剂，例如DCM，在合适的温度，例如-60℃-室温，例如0℃-室温。
如果需要，用于方法E前不需要分离式(IXa)和(IXb)化合物。
式(XXXIV)化合物购自例如Sigma-Aldrich，例如2-羟基苯甲醛、3-羟基苯甲醛和4-羟基苯甲醛。
式(XXXV)化合物可通过本领域熟练技术人员所熟知的方法和/或通过本文所述方法制备，例如活化相应的醇。2-甲氧基苄基醇、3-甲氧基苄基醇、4-甲氧基苄基醇、2-(3-甲氧基苯基)乙醇、2-(4-甲氧基苯基)乙醇、3-(4-甲氧基苯基)-1-丙醇和4-[4-(甲氧基)苯基]-1-丁醇购自例如Sigma-Aldrich。此类活化反应可例如使用合适的活化剂，例如MsCl，在合适的溶剂中，例如TBME，采用合适的碱，例如NEt3。
式(I)化合物，其中A代表N 其中A代表N的式(I)化合物可通过本文所述方法制备。
更具体地，其中A代表N的式(I)化合物可由其中A代表N的式(IIa)和(IIb)化合物通常依据方法A、方法C(流程11)、方法D和方法E(流程13)所述反应制备。其中A代表N的其他式(I)化合物可依据方法F和G制备。
其中A代表N的式(IIa)和(IIb)化合物可由其中A代表N的式(XI)化合物通常依据上文流程1和2所述反应制备。
其中A代表N的式(XI)化合物可依据下流程14制备。
流程14式(XI)化合物的合成，其中A代表N
其中R1、R2、y和z如上文就式(I)所述。
试剂和条件i)甲醇钠，THF/MeOH；ii)a)合适的活化剂，例如羰基二咪唑或草酰氯，合适的溶剂，例如DMF，合适的高温，例如约50℃，b)合适的碱，例如NaH，c)；iii)合适的酸催化剂，例如TFA，合适的溶剂，例如DCM；iv)H2NNH2·H2O，在合适的溶剂中，例如EtOH，催化量的酸，例如AcOH。
其中A代表N的式(XIII)化合物购自Sigma-Aldrich，例如吡啶-3，4-二甲酸酐。2-甲基-吡啶-4，5-二甲酸酐可依据Werner，W.Graefe，U.，Ihn，W.，Tresselt，D.，Winter，S.，Paulus，E.，Tetrahedron，53(1)109-118(1997)(见化合物4)所述方法制备。3-甲氧基吡啶-4，5-二甲酸酐可依据Krapcho，A.P.，Maresch，M.J.，Gallagher，C.E.，Hacker，M.P.，J.Het.Chem.，32(6)1693-702，(1995)公开的方法(见化合物10)制备。2-甲基-3，4-吡啶二甲酸酐可依据Moriconi，E.J.和Spano，F.A.，J.Amer.Chem.Soc.，86(1)38-46，(1964)(见化合物14)所述方法制备。
式(XXXVI)化合物可通过下流程15公开的方法或通过WO2002/079143所述方法(见制备149)制备。
流程15式(XXXVI)化合物的合成
其中R2和z如上文就式(I)所述。
试剂和条件i)二甲基甲酰胺缩二叔丁醇，合适的溶剂，例如甲苯，高温，例如80℃，约18h。
二甲基甲酰胺缩二叔丁醇购自例如Sigma-Aldrich。
式(XIV)化合物的利用如上所述(见流程2)。
依据第六种方法F，式(I)化合物可通过其他式(I)化合物的相互转换制备。
相互转换包括但不限于在本领域熟练技术人员所熟知的标准条件下烷基化和去保护。
因此，一般而言，烷基化反应可由式(I)化合物和C1-6烷基完成，其中C1-6烷基已被活化以取代离去基团例如卤素或活化的羟基。所述反应在以下条件进行在合适的碱存在下，例如NEt3或DIPEA，在合适的溶剂中，例如2-丁酮或DMF，在合适的温度，例如约80℃。
可用于所述合成路线的保护基的实例和去除其的方法可见T.W.Greene‘有机合成中的保护基(Protective Groups in OrganicSynthesis)’(第3版，J Wiley and Sons，1999)。合适的胺保护基包括磺酰基(例如甲苯磺酰基)、酰基(例如乙酰基、2′，2′，2′-三氯乙氧羰基、苄氧羰基或叔丁氧羰基)和芳烷基(例如苄基)，其可通过合适的水解(例如利用酸，例如氯化氢的二氧六环溶液或三氟乙酸的二氯甲烷溶液)或还原(例如氢解苄基或利用锌在乙酸中还原去除2′，2′，2′-三氯乙氧羰基)去除。其他合适的胺保护基包括三氟乙酰基(-COCF3)，其可通过碱催化的水解去除，或固体相树脂结合的苄基，例如Merrifield树脂结合的2，6-二甲氧基苄基(Ellman连接基团)，其可通过酸裂解去除，例如利用三氟乙酸。
在方法F的一个实施方案中，A代表CH。
依据第七种方法G，式(I)化合物的盐可通过平衡离子的交换或将所述盐从游离碱中沉淀出来制备。
在方法G的一个实施方案中，A代表CH。
应当理解的是用于制备式(I)化合物的所有新型中间体构成本发明的另一个实施方案。
在一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(中间体4)或其盐的式(IIb)化合物。
其中式(I)化合物或其药学可接受的盐可能具有潜在消炎和/或抗过敏有益效果的病状的实例包括呼吸道炎性和/或过敏性疾病，例如过敏性鼻炎或其他疾病，例如支气管炎(包括慢性支气管炎)、哮喘(包括过敏原诱导的哮喘反应)、慢性阻塞性肺病(COPD)、窦炎和过敏性鼻炎(季节性和常年性)。
此外，式(I)化合物可用于治疗肾炎和皮肤病，例如牛皮癣、湿疹、过敏性皮炎和超敏性反应。此外，式(I)化合物可用于治疗昆虫叮咬。
式(I)化合物也可用于治疗鼻息肉、结膜炎或瘙痒症。
尤其引人注目的疾病是过敏性鼻炎。
其中组胺可能具有病理生理作用的其他疾病包括非过敏性鼻炎和胃肠道疾病，例如肠炎，包括炎性肠病(例如Crohn′s病或溃疡性结肠炎)和辐射暴露或过敏原暴露引起的肠炎。
本领域熟练技术人员应当理解的是本文提及治疗时扩大至包括预防以及治疗已知病症。
如上所述，式(I)化合物可用作治疗剂。因此提供了式(I)化合物或其药学可接受的盐在治疗中的用途。
在另一个实施方案中，提供了用于治疗的4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物。
在一个实施方案中，提供了式(I)化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗任何上述疾病的药物中的用途。
在另一个实施方案中，提供了4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物在制备用于治疗任何上述疾病的药物中的用途。
在另一个实施方案中，提供了在有需要的人体或动物患者中治疗任何上述疾病的方法，所述方法包括给予有效量式(I)化合物或其药学可接受的盐。
在另一个实施方案中，提供了在有需要的人体或动物患者中治疗任何上述疾病的方法，所述方法包括给予有效量为4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物。
当用于治疗时，式(I)化合物或其药学可接受的盐通常可配制在合适的组合物中。此类组合物可利用标准方法制备。
因此，提供了一种组合物，所述组合物包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和任选的一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂。
还提供了一种组合物，所述组合物包含4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物和任选的一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂。
可通过适合在环境温度和环境压力混合制备的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物可能适于局部给药(包括上皮、吸入、鼻内或经眼给药)、经肠给药(包括口服或直肠给药)或不经肠给药(例如通过注入或灌注)。引人注目的是适于局部给药，尤其是适于鼻内给药，的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物。
一般而言，组合物可为给药途径所需的溶液或悬浮液(溶液或非溶液)、片剂、胶囊、口服液制剂、粉末、颗粒、锭剂、洗液、乳膏、软膏、凝胶、泡沫、可复水的粉末或栓剂形式。
一般而言，包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物依据给药途径可包含约0.1％-99％(w/w)，例如约10-60％(w/w)(基于组合物总重量)，式(I)化合物或其药学可接受的盐。用于治疗上述疾病的化合物的剂量随着疾病的严重程度、患者体重和其他类似因素以正常方式变动。然而，作为通用指南，合适的单位剂量可为约0.05-1000mg，例如约0.05-200mg，一天可给予此单位剂量一次以上，例如一天两次或三次天或者根据需要。此类疗法可延续几周或几个月。
式(I)化合物或其药学可接受的盐在主题组合物中的比例取决于待制备组合物的准确类型和具体给药途径，但基于组合物总重量一般为约0.001-10％(w/w)。然而，一般而言，对大部分制剂而言所使用的比例基于组合物总重量为约0.005-1％(w/w)，例如约0.01-1％(w/w)，例如约0.01-0.5％(w/w)。然而，在吸入的粉末中，所使用的比例基于组合物总重量一般为约0.1-5％(w/w)。
一般而言，适于鼻内或吸入给药的组合物可任选与一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂，例如溶液或非溶液赋形剂、增稠剂、等渗调节剂、抗氧化剂和/或防腐剂，方便地制成气溶胶、溶液、悬浮液、滴剂、凝胶或干粉末。
对适于鼻内或吸入给药的组合物而言，式(I)化合物或其药学可接受的盐通常可为颗粒大小变小的形式，其可通过传统方法制备，例如微粉化和研磨。一般而言，大小变小(例如微粉化)的式(I)化合物或其药学可接受的盐可定义为D50值为约0.5-10微米，例如约2-4微米(例如如利用激光衍射所测量)。
在一个实施方案中，包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物适于鼻内给药。包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的鼻内组合物可允许将化合物输送至鼻腔(目标组织)的所有区域，此外，还可允许化合物与目标组织保持接触更长时间。鼻内组合物的合适剂量应适合病人通过鼻子缓慢吸入随后到达清理过的鼻腔。在吸入过程中，应将组合物给予一个鼻孔，而另一个鼻孔用手压住。然后针对另一个鼻孔重复该过程。一般而言，通过上述过程每天多达两次或三次，理想的是每天一次，给予每个鼻孔一次或两次喷雾剂。特别引人注目的是适于每天给药一次的鼻内组合物。
鼻内组合物可任选包含所需的一种或多种悬浮剂、一种或多种防腐剂、一种或多种润湿剂和/或一种或多种等渗调节剂。适于鼻内给药的组合物还可任选包含其他赋形剂，例如抗氧化剂(例如偏亚硫酸氢钠)、掩味剂(例如薄荷醇)和甜味剂(例如右旋糖、甘油、糖精和/或山梨醇)。
悬浮剂，如果包括，通常基于组合物总重量以约0.1-5％(w/w)的量存在于鼻内组合物中，例如约1.5％-2.4％(w/w)。悬浮剂的实例包括Avicel

、羧甲基纤维素、veegum、黄芪胶、膨润土、甲基纤维素和聚乙二醇，例如微晶纤维素或羧甲基纤维素钠。如果合适，悬浮剂也可包含在适于吸入、经眼和口服给药的组合物中。
为了稳定性目的，包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的鼻内组合物可通过包含防腐剂而防止微生物或真菌污染和生长。药学可接受的抗微生物剂或防腐剂的实例可包括季铵化合物(例如苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵和西吡氯铵)、含汞试剂(例如硝酸苯汞，苯基醋酸苯汞和硫柳汞)、醇试剂(例如氯丁醇、苯基乙醇和苄基醇)、抗菌酯(例如对羟基苯甲酸的酯)、螯合剂(例如乙二氨四乙酸二钠(EDTA))以及其他抗微生物剂(例如双氯苯双胍己烷、氯甲酚、山梨酸及其盐(例如山梨酸钾)和多粘菌素)。药学可接受的抗真菌剂或防腐剂的实例可包括苯甲酸钠。防腐剂，如果包括，基于组合物总重量可为约0.001-1％(w/w)，例如约0.015％(w/w)。如果合适，防腐剂可包括在适于其他给药途径的组合物中。
包含悬浮药物的组合物可包括药学可接受的润湿剂，其起到润湿药物颗粒以促使其分散在组合物溶液相中的作用。一般而言，所使用润湿剂的量在混合过程中不会导致分散体发泡。润湿剂的实例包括脂肪醇、酯和醚，例如聚环氧乙烷(20)山梨聚糖单油酸酯(Polysorbate 80)。润湿剂可以基于组合物总重量为约0.001-0.05％(w/w)的量存在于鼻内组合物中，例如约0.025％(w/w)。如果合适，润湿剂可包含在适于其他给药途径的组合物中，例如吸入和/或经眼给药。
可包含等渗调节剂以实现与例如鼻腔流体等体液等渗，进而导致刺激性降低。等渗调节剂的实例包括氯化钠、右旋糖、木糖醇和氯化钙。等渗调节剂可以基于组合物总重量为约0.1-10％(w/w)，例如约5.0％(w/w)，的量包含在鼻内组合物中。如果合适，等渗调节剂也可包含在适于其他给药途径的组合物中，例如包含在适于吸入、经眼、口服液体和不经肠给药的组合物中。
此外，包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的鼻内组合物可通过加入合适的缓冲剂而得到缓冲，例如柠檬酸钠、柠檬酸、磷酸盐(例如磷酸二钠盐(例如十二水合物、七水合物、二水合物和无水形式)或磷酸钠)及其混合物。如果合适，缓冲剂也可包含在适于其他给药途径的组合物中。
局部给予鼻子或肺以例如治疗鼻炎的组合物包括加压气溶胶组合物和通过加压泵输送给鼻腔的溶液组合物。特别引人注目的是非加压和适于局部给予鼻腔的组合物。合适的组合物包含实现该目的水稀释剂或载体。给予肺或鼻子的溶液组合物可含有传统赋形剂，例如缓冲剂和张力改良剂等。溶液组合物也可通过雾化给予鼻子。
通常可使用液体分配器以将组合物输送至鼻腔。液体组合物可为溶液或非溶液，但通常为溶液。此类液体分配器可具有分配喷嘴或分配孔，通过使用者向液体分配器的泵机构施加压力而通过所述喷嘴或孔分配计量剂量的液体组合物。此类液体分配器一般设有多份计量剂量液体组合物的储罐，可通过连续驱动泵分配这些剂量。可对分配喷嘴或孔进行设置以插入使用者的鼻孔从而将所述液体组合物喷雾分配到鼻腔中。WO05/044354描述和阐明了前述类型的液体分配器，通过引用将其全部内容结合到本文中。分配器具有外壳，其包裹着具有压缩泵的液体分配装置，压缩泵安装在用于包含液体组合物的容器上。所述外壳具有至少一个手指可操作的侧杆，其相对于外壳向内移动以用凸轮带动外壳中的容器向上，进而导致泵压缩并将计量剂量的组合物通过外壳的鼻喷嘴泵出泵杆。在一个实施方案中，WO05/044354的图30-40阐述了通用类型的液体分配器。
在一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的鼻内组合物，尤其是为4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物。在另一个实施方案中，此类组合物不含苯扎氯铵。
吸入给药包括向肺局部给药，例如通过气溶胶或干粉组合物。适于吸入给药的气溶胶组合物可包含所述化合物在药学可接受的水性或非水溶剂中的溶液或微悬浮液。适于吸入的气溶胶组合物可为悬浮液或溶液，并通常包含式(I)化合物或其药学可接受的盐以及合适的挥发剂，例如氟烃或含氢氯氟烃或其混合物，例如氢氟烷，例如1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷或其混合物。气溶胶组合物可任选地包含本领域熟知的其他赋形剂，例如表面活性剂或助溶剂。表面活性剂的实例包括但不限于油酸、卵磷脂、低聚乳酸或例如如WO94/21229和WO98/34596所述的衍生物。助溶剂的实例包括但不限于乙醇。气溶胶组合物可以在密封容器中的单剂量或多剂量无菌形式存在，所述容器可采取药筒形式或再充装以与雾化装置或吸入器一起使用。或者，密封容器可为一体的分配装置，例如单一剂量鼻吸入器，或装有计量阀的气溶胶分配器(计量剂量吸入器)，一旦所述容器的内容物用尽则可将其丢弃。
干粉可吸入组合物可采取用于吸入器或吹入器的胶囊、例如明胶药筒或例如层压铝箔泡罩的形式。可将此类组合物制成包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和合适的粉末基底例如乳糖或淀粉的粉末混合物。
任选地，就干粉可吸入组合物而言，可将适于吸入给药的组合物结合到纵向装在合适吸入装置中的条带上的许多密封药剂容器中(例如包括所述干粉组合物)。所述容器可根据需要而被破坏或剥离打开，可通过例如GlaxoSmithKline上市的DISKUSTM装置等装置吸入给予例如干粉组合物的药剂。例如GB 2242134 A描述了DISKUSTM吸入装置，在此类装置中，在两个彼此可剥离地固定的部件间限定了至少一个用于粉末形式组合物的容器(所述容器可为例如许多纵向装在条带上的密封药剂容器)；所述装置包括限定所述容器打开位置的装置；用于在打开位置剥离部件以打开所述容器的装置；以及与打开的容器相通的出口，通过所述出口使用者可从打开的容器吸入粉末形式的组合物。
通常对气溶胶组合物进行设置从而使各计量剂量或气溶胶“泡”包含约20μg-2000μg，具体约20μg-500μg，式(I)化合物或其药学可接受的盐。可每天给药一次或几次，例如2、3、4或8次，每次给予例如1、2或3个剂量。每天气溶胶的总剂量为约100μg-10mg，例如约200μg-2000μg。通过吸入器或吹入器中的胶囊和药筒输送的每天总剂量和计量剂量一般为气溶胶组合物剂量的两倍。
在另一个实施方案中，提供了适于上皮给药的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物。每天涂覆一次或多次的涂覆于感染区域例如皮肤的上皮组合物可为例如软膏、霜剂、乳状液、洗液、泡沫、喷雾、含水凝胶或微乳剂形式。此类组合物可任选包含一种或多种增溶剂、皮肤渗透增强剂、表面活性剂、芳香剂、防腐剂或乳化剂。
通过加入合适的增稠剂和/或胶凝剂和/或溶剂，例如可将软膏、霜剂和凝胶与水性或油性基底配制在一起。因此，此类基底可例如包括水和/或油，例如液体石蜡或植物油，例如花生油或蓖麻油，或溶剂，例如聚乙二醇。可依据基底性质而使用的增稠剂和胶凝剂包括软石蜡、硬脂铝、十八十六醇、聚乙烯二醇、羊毛脂、蜂蜡、聚羧乙烯和纤维素衍生物，和/或单硬脂酸甘油酯和/或非离子乳化剂。可将洗液与水性或油性基底配制在一起，并一般还包含一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂或增稠剂。
在另一个实施方案中，提供了适于经眼给药的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物。此类组合物可任选包含一种或多种悬浮剂、一种或多种防腐剂、一种或多种润湿/润滑剂和/或一种或多种等渗调节剂。眼科润湿/润滑剂的实例可包括纤维素衍生物、葡聚糖70、明胶、液态多元醇、聚乙烯醇和聚烯吡酮，例如纤维素衍生物和多元醇。
在另一个实施方案中，提供了适于口服给药的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物。口服给药的片剂和胶囊可为单位剂量形式，并可包含传统的赋形剂，例如粘合剂、填充剂、压片滑润剂、崩散剂和可接受的润湿剂。可依据普通制药实践中所熟知的方法对所述片剂进行包衣。
口服液制剂可为例如水性或油性悬浮液、溶液、乳浊液、糖浆或酏剂形式，或者可为使用前与水或其他合适的载体复原的干燥产品形式。此类液体制剂可包含传统的添加剂，例如悬浮剂、乳化剂、非水载体(其可包括可食用的油)、防腐剂以及，如果需要，传统的调味剂或着色剂。
在另一个实施方案中，提供了适于不经肠给药的包含式(I)化合物或其药学可接受的盐的组合物。适于不经肠给药的液态单位剂量形式可利用式(I)化合物或其药学可接受的盐和可为水基或油基的无菌载体制备。化合物，取决于所使用的载体和浓度，可悬浮或溶解在载体中。在制备溶液的过程中，可将化合物溶解以供注射，并在填充到合适的小瓶或小玻璃瓶中之前过滤灭菌，密封。任选地，可将辅料例如局麻醉药、防腐剂和缓冲剂溶解在载体中。为提高稳定性，可在填充到小瓶中后冰冻组合物，并真空去除水。给药前可利用合适的溶剂使冻干的不经肠组合物复原。不经肠的悬浮液可以基本相同的方法制备，只是将化合物悬浮在载体中，而非溶解，同时不能通过过滤实现灭菌。可在悬浮在无菌载体中之前通过暴露于环氧乙烷中对化合物进行灭菌。表面活性剂或润湿剂可包含在组合物中以促进化合物均匀分布。
化合物和包含式(I)化合物的药物组合物也可与一种或多种其他药物组合使用或者包含一种或多种其他药物，例如其他抗组胺药物，例如H4受体拮抗剂，抗胆碱能药，消炎药，例如皮质类固醇(例如丙酸氟替卡松、丙酸倍氯米松、糠酸莫米他松、醋酸曲安缩松、布地缩松和糠酸氟替卡松)；或非甾族消炎药(NSAIDs)(例如色甘酸钠、尼多考米钠)，PDE-4抑制剂，白三烯拮抗剂，脂肪氧合酶抑制剂，趋化因子拮抗剂(例如CCR3、CCR1、CCR2、CCR4、CCR8、CXCR1、CXCR2)，IKK拮抗剂，iNOS抑制剂，类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂，β-2整联蛋白拮抗剂和腺苷2a激动剂；或β肾上腺素能药(例如沙美特罗、沙丁胺醇、福莫特罗、非诺特罗、特布他林和WO02/66422，WO02/270490，WO02/076933，WO03/024439和WO03/072539描述的β激动剂及其盐)；或抗感染药物例如抗生素(例如retapamulin)和抗病毒药。
本领域熟练技术人员清楚的是，如果合适，可以盐(例如碱金属或胺盐或酸加成盐)、前药、酯(例如低级烷基酯)或溶剂化物(例如水合物)形式使用其他药物以优化所述药物的活性和/或稳定性和/或物理性质(例如溶解性)。还应当清楚的是，如果合适，可以光学纯形式使用所述药物。
在另一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐、一种或多种(例如一种或两种，例如一种)其他治疗活性剂以及任选的一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂的组合物。
在另一个实施方案中，提供了包含4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其药学可接受的盐的化合物、一种或多种(例如一种或两种，例如一种)其他治疗活性剂以及任选的一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂的组合物。
可单独或与双H1/H3受体拮抗剂结合使用的其他组胺受体拮抗剂包括H4受体的拮抗剂(和/或反向激动剂)，例如Jablonowski等，J.Med.Chem.463957-3960(2003)公开的化合物。
在一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和β2-肾上腺素能受体激动剂的组合物。
β2-肾上腺素能受体激动剂的实例包括沙美特罗(其可为消旋体或单一对映体，例如R-对映体)、沙丁胺醇(其可为消旋体或单一对映体，例如R-对映体)、福莫特罗(其可为消旋体或单一非对映异构体，例如R，R-非对映异构体)、沙甲胺醇、非诺特罗、卡莫特罗、依坦特罗、那明特罗、克仑特罗、吡布特罗、flerbuterol、瑞普特罗、班布特罗、茚达特罗、特布他林及其盐，例如沙美特罗的羟萘甲酸(1-羟基-2-萘甲酸酯)盐、沙丁胺醇的硫酸盐或游离碱或者福莫特罗的富马酸盐。在一个实施方案中，包含式(I)化合物的组合物可包含长效β2-肾上腺素能受体激动剂，例如提供约12h或更长时间有效支气管扩张的化合物。
其他β2-肾上腺素能受体激动剂包括WO 02/066422、WO02/070490、WO 02/076933、WO 03/024439、WO 03/072539、WO03/091204、WO 04/016578、WO 2004/022547、WO 2004/037807、WO 2004/037773、WO 2004/037768、WO 2004/039762、WO2004/039766、WO 01/42193和WO03/042160所述激动剂。
β2-肾上腺素能受体激动剂的实例包括 3-(4-{[6-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-(羟甲基)苯基]乙基}氨基)己基]氧基}丁基)苯磺酰胺； 3-(3-{[7-({(2R)-2-羟基-2-[4-羟基-3-羟甲基)苯基]乙基}-氨基)庚基]氧基}丙基)苯磺酰胺； 4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2，6-二氯苄基)氧基]乙氧基}己基)氨基]-1-羟乙基}-2-(羟甲基)苯酚； 4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(环戊基磺酰基)苯基]丁氧基}己基)氨基]-1-羟乙基}-2-(羟甲基)苯酚； N-[2-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-[[2-4-[[(2R)-2-羟基-2-苯基乙基]氨基]苯基]乙基]氨基]乙基]苯基]甲酰胺； N-2{2-[4-(3-苯基-4-甲氧基苯基)氨基苯基]乙基}-2-羟基-2-(8-羟基-2(1H)-喹啉酮-5-基)乙胺；和 5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙基氨基)-1-羟基-乙基]-8-羟基-1H-喹啉-2-酮。
β2-肾上腺素能受体激动剂可为与药学可接受的酸形成的盐的形式，所述酸选自硫酸、盐酸、富马酸、羟萘甲酸(例如1-或3-羟基-2-萘甲酸)、肉桂酸、取代的肉桂酸、三苯基乙酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、萘丙烯酸、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-或4-羟基苯甲酸、4-氯苯甲酸和4-苯基苯甲酸。
在另一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和腺苷2a激动剂的组合物。
腺苷2a激动剂包括国际专利中请公开PCT/EP/2005/005651的腺苷2a激动剂，例如(2R，3R，4S，5R，2′R，3′R，4′S，5′R)-2，2′-{反-1，4-环己烷二基双[亚氨基(2-{[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基}-9H-嘌呤-6，9-二基)]}二[5-(2-乙基-2H-四唑-5-基)四氢-3，4-呋喃二醇]。
在另一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和消炎药的组合物。
消炎药包括皮质类固醇。可与式(I)化合物结合使用的合适皮质类固醇为口服和吸入皮质类固醇及其具有消炎活性的前药。实例包括甲基强的松龙、强的松龙、地塞米松、丙酸氟替卡松、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯(糠酸氟替卡松)、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-(2-氧代-四氢-呋喃-3S-基)酯、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基环丙基羰基)氧基-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氰基甲基酯、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-(1-甲基环丙基羰基)氧基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、倍氯米松酯(例如17-丙酸酯或17，21-二丙酸酯)、布地缩松、氟尼缩松、莫米他松酯(例如糠酸莫米他松)、醋酸曲安缩松、罗氟奈德、环索奈德(16α，17-[[(R)-环己基亚甲基]二(氧基)]-11β，21-二羟基-孕烷-1，4-二烯-3，20-二酮)、布替可特丙酸酯、RPR-106541和ST-126。特别引人注目的皮质类固醇可包括丙酸氟替卡松、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯、6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基环丙基羰基)氧基-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氰基甲基酯、6α，9α-二氟-11b-羟基-16α-甲基-17α-(1-甲基环丙基羰基)氧基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯和糠酸莫米他松。在一个实施方案中，皮质类固醇为6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯(糠酸氟替卡松)或糠酸莫米他松。
在一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和皮质类固醇例如6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羟基-16α-甲基-3-氧代-雄烷-1，4-二烯-17β-硫代甲酸S-氟甲基酯(糠酸氟替卡松)或糠酸莫米他松的组合物。此类组合物因为鼻内给药而可能特别引人注目。
可能对转录激活具有选择性转录抑制和可用于联合治疗的具有糖皮质激素激动的非甾族化合物包括以下专利申请和专利描述的非甾族化合物WO03/082827、WO98/54159、WO04/005229、WO04/009017、WO04/018429、WO03/104195、WO03/082787、WO03/082280、WO03/059899、WO03/101932、WO02/02565、WO01/16128、WO00/66590、WO03/086294、WO04/026248、WO03/061651、WO03/08277、WO06/000401、WO06/000398和WO06/015870。
在一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和糖皮质激素激动剂的组合物。
消炎药包括非甾族消炎药(NSAID)。
NSAID包括色甘酸钠、尼多考米钠、磷酸二酯酶(PDE)抑制剂(例如茶碱、PDE4抑制剂或混合的PDE3/PDE4抑制剂)、白三烯拮抗剂、白三烯合成抑制剂(例如孟鲁司特)、iNOS(诱发的硝酸氧化物合成酶)抑制剂(例如口服iNOS抑制剂)、IKK拮抗剂、类胰蛋白酶和弹性蛋白酶抑制剂、β-2整联蛋白拮抗剂和腺苷受体激动剂或拮抗剂(例如腺苷2a激动剂)、细胞因子拮抗剂(例如趋化因子拮抗剂，例如CCR1，CCR2，CCR3，CCR4或CCR8拮抗剂)或细胞因子合成抑制剂或5-脂肪氧合酶抑制剂。iNOS抑制剂包括WO93/13055、WO98/30537、WO02/50021、WO95/34534和WO99/62875公开的iNOS抑制剂。
在一个实施方案中，提供了式(I)化合物或其药学可接受的盐在与磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂结合中的用途。用于该实施方案的PDE4特异性抑制剂可为已知抑制PDE4酶或发现起到PDE4抑制剂作用的任何化合物，其仅仅是PDE4抑制剂，而非抑制PDE家族其他成员的化合物，例如PDE3、PDE5以及PDE4。
可能引人注目的化合物包括顺-4-氰基-4-(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)环己烷-1-甲酸、2-甲氧基羰基-4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己烷-1-酮和顺-[4-氰基-4-(3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)环己烷-1-醇]。以及顺-4-氰基-4-[3-(环戊氧基)-4-甲氧基苯基]环己烷-1-甲酸(也称作西洛司特)及其盐、酯、前药或1996年9月3日授权的美国专利5,552,438所述的物理形式。
其他PDE4抑制剂包括Elbion的AWD-12-281(Hofgen，N.等，15thEFMC Int.Symp.Med.Chem.，(9月6-10，Edinburgh)1998，Abst.P.98；CAS号247584020-9)、名为NCS-613的9-苄基腺嘌呤衍生物(INSERM)、Chiroscience和Schering-Plough的D-4418、识别为CI-1018(PD-168787)并属于Pfizer的苯并二氮杂

PDE4抑制剂、KyowaHakko在WO99/16766公开的苯并间二氧杂环戊烯衍生物、KyowaHakko的K-34、Napp的V-11294A(Landells，L J.等，Eur.Resp.J.[Ann.Cong.Eur.Resp.Soc.(9月19-23，Geneva)1998]1998，12(Suppl.28)Abst P2393)、Byk-Gulden的罗氟司特(CAS号162401-32-3)和酞嗪酮(WO99/47505)、Byk-Gulden(现为Altana)制备和公布的苯芬群和混合PDE3/PDE4抑制剂的(-)-p-[(4aR*，10bS*)-9-乙氧基-1，2，3，4，4a，10b-六氢-8-甲氧基-2-甲基苯并[c][1，6]二氮杂萘-6-基]-N，N-二异丙基苯甲酰胺、Almirall-Prodesfarma正在开发的阿罗茶碱、Vernalis的VM554/UM565、T-440(Tanabe Seiyaku；Fuji，K.等，J.Pharmacol.Exp.Ther.，284(1)162，(1998))和T2585。
公布的国际专利申请WO04/024728(Glaxo Group Ltd)、WO04/056823(Glaxo Group Ltd)和WO04/103998(Glaxo Group Ltd)公开了可能引人注目的其他化合物。
在另一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物或其药学可接受的盐和抗胆碱能药的组合物。
抗胆碱能药为起到毒蕈碱受体拮抗剂作用的化合物，尤其是为M1或M3受体拮抗剂、M1/M3或M2/M3受体双拮抗剂或M1/M2/M3受体三拮抗剂的化合物。通过吸入给药的示例性化合物包括异丙托品(例如溴化物，CAS 22254-24-6，以Atrovent名称销售)，氧托品(例如溴化物，CAS 30286-75-0)和噻托品(例溴化物，CAS 136310-93-5，以Spiriva名称销售)。还引人注目的是瑞伐托酯(例如氢溴酸盐，CAS262586-79-8)和WO01/04118公开的LAS-34273。口服给药的示例性化合物包括哌仑西平(例如CAS 28797-61-7)、达非那新(例如CAS133099-04-4，或以Enablex名称销售的氢溴酸盐CAS 133099-07-7)、奥昔布宁(例如CAS 5633-20-5，以Ditropan名称销售)、特罗地林(例如CAS 15793-40-5)、托特罗定(例如CAS 124937-51-5，或以Detrol名称销售的酒石酸盐CAS 124937-52-6)、奥替铵(otilonium)(例如溴化物，CAS 26095-59-0，以Spasmomen名称销售)、托司氯铵(例如CAS10405-02-4)和索非那新(例如CAS 242478-37-1，或CAS 242478-38-2，或也称作YM-905并以Vesicare名称销售的丁二酸酯)。
其他抗胆碱能药包括美国专利申请60/487981公开了的式(XXI)化合物
其中，与莨菪烷环相连的烷基链的具体取向为内位； R31和R32独立选自具有例如1-6个碳原子的直链或支链低级烷基、具有5-6碳原子的环烷基、具有6-10个碳原子的环烷基烷基、2-噻吩基、2-吡啶基、苯基、具有不超过4个碳原子的烷基取代的苯基和具有不超过4个碳原子的烷氧基取代的苯基； X-代表与N原子正电荷对应的阴离子。X-可为但不限于氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、苯磺酸根和甲苯磺酸根，包括例如 溴化(3-内)-3-(2，2-二-2-噻吩基乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 溴化(3-内)-3-(2，2-二苯基乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； (3-内)-3-(2，2-二苯基乙烯基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷4-甲基苯磺酸盐； 溴化(3-内)-8，8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-噻吩基)乙烯基]-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷；和/或 溴化(3-内)-8，8-二甲基-3-[2-苯基-2-(2-吡啶基)乙烯基]-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷。
其他抗胆碱能药包括美国专利申请60/511009公开的式(XXII)或(XXIII)化合物
其中 所示H原子在外位； R41-代表与N原子正电荷对应的阴离子。R1-可为但不限于氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、苯磺酸根和甲苯磺酸根； R42和R43独立选自直链或支链低级烷基(具有例如1-6碳原子)、环烷基(具有5-6碳原子)、环烷基烷基(具有6-10碳原子)、N或O作为杂原子的杂环烷基(具有5-6碳原子)、N或O作为杂原子的杂环烷基烷基(具有6-10碳原子)、芳基、任选取代的芳基、杂芳基和任选取代的杂芳基； R44选自(C1-C6)烷基、(C3-C12)环烷基、(C3-C7)杂环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)杂环烷基、芳基、杂芳基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-杂芳基、-OR45、-CH2OR45、-CH2OH、-CN、-CF3、-CH2O(CO)R46、-CO2R47、-CH2NH2、-CH2N(R47)SO2R45、-SO2N(R47)(R48)、-CON(R47)(R48)、-CH2N(R48)CO(R46)、-CH2N(R48)SO2(R46)、-CH2N(R48)CO2(R45)、-CH2N(R48)CONH(R47)； R45选自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)杂环烷基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-杂芳基； R46选自(C1-C6)烷基、(C3-C12)环烷基、(C3-C7)杂环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)杂环烷基、芳基、杂芳基、(C1-C6)烷基-芳基、(C1-C6)烷基-杂芳基； R47和R48独立选自H、(C1-C6)烷基、(C3-C12)环烷基、(C3-C7)杂环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C12)环烷基、(C1-C6)烷基(C3-C7)杂环烷基、(C1-C6)烷基-芳基和(C1-C6)烷基-杂芳基，包括例如 碘化(内)-3-(2-甲氧基-2，2-二噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基丙腈； (内)-8-甲基-3-(2，2，2-三苯基乙基)-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷； 3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基丙酰胺； 3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基丙酸； 碘化(内)-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 溴化(内)-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙-1-醇； N-苄基-3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙酰胺； 碘化(内)-3-(2-氨基甲酰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 1-苄基-3-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； 1-乙基-3-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-乙酰胺； N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-苯甲酰胺； 3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二-噻吩-2-基-丙腈； 碘化(内)-3-(2-氰基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-苯磺酰胺； [3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-脲； N-[3-((内)-8-甲基-8-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-2，2-二苯基-丙基]-甲磺酰胺；和/或 溴化(内)-3-{2，2-二苯基-3-[(1-苯基-甲酰氧基)-氨基]-丙基}-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷。
可使用的具体抗胆碱能化合物包括 碘化(内)-3-(2-甲氧基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 碘化(内)-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 溴化(内)-3-(2-氰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 碘化(内)-3-(2-氨基甲酰基-2，2-二苯基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷； 碘化(内)-3-(2-氰基-2，2-二-噻吩-2-基-乙基)-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷；和/或 溴化(内)-3-{2，2-二苯基-3-[(1-苯基-甲酰氧基)-氨基]-丙基}-8，8-二甲基-8-氮鎓杂二环[3.2.1]辛烷。
上文所指组合可方便地存在于药物组合物以及包含上文所指组合和任选的药学可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物形式中。
此类组合的单独化合物可以单独的药物组合物依次给予和以结合的药物组合物同时给予。可将其他治疗活性组分与式(I)化合物一起悬浮在组合物中。已知药物的合适剂量轻易地为本领域熟练技术人员所理解。
式(I)化合物可通过下文所述方法或类似方法制备。因此以下中间体和实施例阐述了式(I)化合物的制备，无论如何不能认为其限定本公开的范围。
通用试验 缩写 aq.溶液 9-BBN9-硼杂双环壬烷 BBr3三溴化硼 BOC(Boc)叔丁氧羰基 Cs2CO3碳酸钯 CV柱体积 DCM二氯甲烷 DIPEAN，N-二异丙基乙基胺 DMFN，N-二甲基甲酰胺 DMSO二甲亚砜 EtOAc乙酸乙酯 EtOH乙醇 HCl氯化氢 HPLC高效液相色谱 K2CO3碳酸钾 LCMS液相色谱-质谱 mbar毫巴(压力) MDAP质量引导的自制备 MeCN乙腈 MeOH甲醇 MgSO4硫酸镁 MIBK甲基异丁基酮 MsCl甲磺酰氯 NaHCO3碳酸氢钠 NaOH氢氧化钠 Na2SO4硫酸钠 NEt3三乙胺 NMPN-甲基吡咯烷酮 NMR核磁共振 PTFE聚四氟乙烯 Pd/C载在活性碳上的钯 RT保留时间 SiO2二氧化硅 TBTUO-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐 TFA三氟乙酸 THF四氢呋喃 TLC薄层色谱 TBME叔丁基甲基醚 h小时 min分钟 通用方法 快速硅胶指Merck Art No 9385；硅胶指Merck Art No 7734。
SCX层析柱为离子交换SPE柱，其中固定相为聚合苯磺酸。其用于分离胺。
SCX2层析柱为离子交换SPE柱，其中固定相为聚合丙磺酸。其用于分离胺。
LCMS在Supelcosil LCABZ+PLUS柱(3.3cm×4.6mm ID)上进行，用0.1％甲酸和0.01M乙酸铵的水溶液(溶剂A)以及0.05％甲酸和5％水的MeCN溶液(溶剂B)洗脱，利用以下洗脱梯度0.0-7分钟0％ B，0.7-4.2分钟100％ B，4.2-5.3分钟0％ B，5.3-5.5分钟0％ B，流速为3ml min-1。在使用电喷雾正模式和负模式(ES+ve和ES-ve)的Fisons VGPlatform质谱仪上记录质谱。
Flashmaster II为购自Argonaut Technologies Ltd的自动多用户快速层析系统，其使用一次性正常相SPE层析柱(2g-100g)。其提供了四种在线溶剂混合以使能运行梯度法。利用多功能开放式软件排列样品，其管理着溶剂、流速、梯度图和收集条件。系统装有Knauer可变波长UV-检测器和两个允许自动峰去除、搜集和跟踪的Gilson FC204流分收集器。
如下进行质量引导的自动制备(Mass directedautopreparative)(MDAP)HPLC在包括具有加长泵头的Waters 600泵、Waters 2700自动取样器，Waters 996二极管阵列和Gilson 202流分收集器的Waters FractionLynx系统上，在10cm×2.54cm内径ABZ+柱上，用0.1％甲酸的水溶液(溶剂A)和0.1％甲酸的MeCN溶液(溶剂B)洗脱，使用15分钟内的合适洗脱梯度，20mlmin-1流速，在200-320nm和室温检测。在使用电喷雾正模式和负模式交替扫描的Micromass ZMD质谱仪上记录质谱图。所使用的软件为具有OpenLynx和FractionLynx可选件的MassLynx 3.5。
在400MHz运行的Bruker AV400上记录1H NMR谱图。使用标准氘化溶剂。一般而言，利用供参考的氘锁定进行NMR。任选地，将四甲基硅烷用作内标。
利用本领域熟练技术人员所熟知的方法对反应进行常规监测，例如TLC、LCMS和/或HPLC。此类方法用于确定反应是否完成，同时，反应时间可相应地变动。
用于分析化合物晶体形式的XRPD法如下 XRPD分析在PANalytical X’Pert Pro X-射线粉末衍射仪上进行，型号X’Pert Pro PW3040/60，序列号DY1850，使用X’Celerator检测器。采集条件辐射Cu K，发生器电压40kv，发生器电流45mA，始角2.000°2θ，端角39.997°2θ，步长0.0167，时间/步31.75秒。利用冲洗硅片制备样品。
差示扫描量热法(DSC)在装有冷冻冷却系统的TA instrumentsQ1000差示扫描量热计上进行。基于所使用的特定仪器和盘设置、分析员的样品制备技术以及试样量，可预料到所观察峰的轻微变动。在上文所报导的峰归属中存在一些误差范围。峰最大值误差范围为约±5℃，熔化热误差范围为±10J/g。
利用ACD/Name PRO 6.02化学命名软件Advanced ChemistryDevelopments Inc.；Toronto，Ontario，M5H2L3，Canada命名化合物。
中间体 中间体1 2-{2-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]乙基}-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在氮气气氛中将氢化钠(0.19g，4.75mmol)悬浮在无水DMF(20ml)中，在冰水浴中搅拌和冷却。缓慢加入4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如美国专利1,377,231所公开，见实施例9，步骤1)(1.055g，3.90mmol)的DMF(8ml)溶液，在冷却浴中继续搅拌30分钟。移除冷却浴，室温搅拌混合物30分钟。缓慢加入N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺(购自例如Aldrich)(1.12g，4.42mmol)的DMF(12ml)溶液，在氮气气氛中搅拌所得混合物过夜。真空浓缩混合物，使残留物分配在水和EtOAc中。分层，干燥(MgSO4)有机层，真空浓缩。粗产物通过硅胶层析纯化(Flashmaster II，100g，60分钟内0-50％ EtOAc-DCM梯度)。合并合适的流分，真空浓缩得标题化合物(1.192g)。LCMS RT＝3.44分钟，ES+ve m/z 444/446[M+H]+。
中间体2 2-(2-氨基乙基)-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮 在EtOH(30ml)中搅拌2-{2-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]乙基}-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(例如如中间体1所制备)(1.192g，2.69mmol)和水合肼(约65％溶液，0.4ml，8.02mmol)，回流加热4h。冷却所得粘稠悬浮液，过滤去除固体，洗涤。真空浓缩滤液得标题化合物(0.66g)。LCMS RT＝2.34分钟，ES+ve m/z 314/316[M+H]+。
中间体3 (2R)-2-{[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯 在-15℃向三苯基膦(1.86g，7.09mmol)的无水THF(6ml)溶液加入偶氮二甲酸二异丙酯(1.12ml，5.69mmol)。在-15℃搅拌所得浅黄色粘稠悬浮液2分钟。为有益于搅拌，加入更多无水THF(2ml)。然后在-15℃用4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如美国专利1,377,231所公开，实施例9，步骤1)(0.571g，2.11mmol)和N-叔丁氧羰基-D-脯氨醇(购自例如Fluka)(0.650g，3.23mmol)的无水THF(10ml)悬浮液处理反应混合物。使反应混合物升温至室温，20℃搅拌23h。然后加入MeOH(20ml)，真空去除溶剂。所得残留物通过Flashmaster II层析纯化(70g硅胶层析柱)，用40分钟内0-50％ EtOAc-环己烷梯度洗脱。真空去除溶剂得标题化合物黑褐色油状物(1.05g)。LCMS RT＝3.71分钟。
中间体4 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮 向(2R)-2-{[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体3所制备)(1.05g，2.31mmol)的无水二氧六环(12ml)溶液加入HCl的1，4-二氧六环(4.0M，6ml)溶液。20℃搅拌溶液2h。向混合物加入TFA(1ml)，搅拌30分钟，然后每10分钟加入更多TFA(3×约1ml)直至完成去保护。真空去除溶剂，将残留物上载至SCX层析柱(20g)，用MeOH洗涤(×2)，然后用10％的氨的MeOH溶液洗脱(2×50ml)。真空去除溶剂，通过Flashmaster II层析纯化所得残留物(50g硅胶层析柱)，用40分钟内0-30％ MeOH+1％ NEt3-DCM梯度洗脱得标题化合物深褐色泡沫(0.351g)。LCMS RT＝2.45分钟。
中间体5 (2S)-2-{[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯 搅拌下将偶氮二甲酸二叔丁酯(1.15g，5mmol)的THF(5ml)溶液加入三苯基膦(1.8g，7mmol)的THF(5ml)溶液中，冷却至-15℃。所得粘稠悬浮液用4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如美国专利1,377,231所公开，见实施例9，步骤1)(0.558g，2mmol)和N-叔丁氧羰基-D-脯氨醇(购自例如Fluka)(0.64g，3.2mmol)的THF(5ml)悬浮液处理，然后在搅拌下继续向混合物加入THF(15ml)。在氮气气氛中搅拌继续过夜，使温度升高至室温。真空浓缩反应混合物，残留物通过硅胶层析纯化(Flashmaster II，100g，60分钟内0-50％ EtOAc-环己烷梯度)。合并合适的流分，真空浓缩得标题化合物(0.738g)。LCMS RT＝3.71分钟，ES+ve m/z 454/456[M+H]+。
中间体6 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2S)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮 (2S)-2-{[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体5所制备)(738mg，1.6mmol)的二氧六环(5ml)溶液用HCl的二氧六环溶液(4M，5ml)处理，在氮气气氛、室温中搅拌1h。继续加入HCl的二氧六环溶液(4M，2ml)，继续搅拌40分钟。真空浓缩反应混合物。将残留物上载至SCX层析柱(50g)上，依次用MeOH和10％的氨的MeOH溶液洗脱。合并合适的流分，真空浓缩得标题化合物(0.555g)。LCMS RT＝2.45分钟，ES+ve m/z 354/356[M+H]+。
中间体7 (3Z)-3-{[4-(甲氧基)苯基]亚甲基}-2-苯并呋喃-1(3H)-酮 在Dean-Stark装置和氮气中加热4-甲氧基苯乙酸(购自例如Aldrich)(13.948g，83.94mmol)、邻苯二甲酸酐(购自例如Aldrich)(12.43g，83.94mmol)和乙酸钠(276mg，3.4mmol)的混合物至240℃2.5h，冷却至室温过夜，然后再加热7h。在氮气中冷却混合物，并在其固化前加入EtOH使其迅速结晶。过滤收集晶体，用少量EtOH洗涤，干燥得标题化合物(15.8g，75％)。LCMS RT＝3.45分钟，ES+ve m/z 253[M+H]+。
中间体8 4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮 用NaOH溶液(2M，70ml)、水(70ml)和EtOH(20ml)处理(3Z)-3-{[4-(甲氧基)苯基]亚甲基}-2-苯并呋喃-1(3H)-酮(例如如中间体7所制备)(15.8g，62.7mmol)和硫酸肼(9g，69mmol)的混合物，加热混合物至95℃ 18h。继续加入硫酸肼(0.9g，6.9mmol)和NaOH溶液(2M，10ml)，继续加热混合物7h，然后冷却至室温过周末。用水(750ml)稀释反应混合物，过滤收集固体。固体用水洗涤，真空干燥得标题化合物(15.25g，91％)。LCMS RT＝2.76分钟，ES+ve m/z 267(M+H)+。
中间体9 (2R)-2-{[4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯 将20℃的4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体8所制备)(1.46g，5.5mmol)和N-Boc-D-脯氨醇(购自例如Fluka)(1.08g，5.36mmol)的THF(20ml)混合物加入-15℃的三苯基膦(2.81g，10.7mmol)和偶氮二甲酸二叔丁酯(1.85g，8.04mmol)的THF(20ml)混合物中。在氮气中搅拌混合物，同时升温至室温过夜。减压蒸发反应混合物，通过层析纯化残留物(Flashmaster II，两根100g硅胶层析柱)，用60分钟内0-100％ EtOAc-环己烷洗脱。合并合适的流分，减压蒸发得标题化合物(2.19g，91％)。LCMS RT＝3.49分钟，ES+ve m/z 450[M+H]+。
中间体10 4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮 室温用TFA(5ml)处理(2R)-2-{[4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体所制备9)(1.4g，3.1mmol)的DCM(20ml)溶液。搅拌混合物0.45分钟，然后浓缩减压。在SCX-2层析柱(20g)上纯化残留物，依次用MeOH和10％的氨的MeOH溶液洗脱。合并含氨流分，浓缩减压得标题化合物(1.08g)。LCMS RT＝2.25分钟，ES+ve m/z 350[M+H]+。
中间体11 (2R)-2-[(4-氯-1-氧代-2(1H)-酞嗪基)甲基]-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯在-10℃向三苯基膦(3.06g，11.6mmol)的无水THF(26ml)溶液加入偶氮二甲酸二异丙酯(1.95ml，9.9mmol)。在-10℃至-5℃搅拌所得悬浮液10分钟。向所述悬浮液加入4-氯-1(2H)-酞嗪酮(购自例如Acros)(0.8g，4.43mmol)和N-Boc-D-脯氨醇(购自例如Fluka)(1.15g，5.7mmol)的THF(27ml)悬浮液。使悬浮液升温至20℃，搅拌1.5h。用MeOH(10ml)猝灭悬浮液，真空去除溶剂。残留物(5.63g)通过MDAP HPLC(100g硅胶层析柱)纯化，利用EtOAc-环己烷梯度得标题化合物(2.213g)。LCMS RT＝3.30分钟，ES+ve m/z 364和366(M+H)+。
中间体12 4-氯-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮 向粗产物(2R)-2-[(4-氯-1-氧代-2(1H)-酞嗪基)甲基]-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体所制备11)(2.213g，6.1mmol)的二氧六环(10ml)溶液加入4.0M的HCl的二氧六环(10ml)溶液。20℃搅拌混合物1.5h。真空去除溶剂，将残留物上载至SCX层析柱(2×20g)上。依次用MeOH(2CV)和10％ 0.88的氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。浓缩碱性流分得标题化合物(0.816g)。RT＝1.79分钟，ES+vem/z 264和266(M+H)+ 中间体13 4-氯-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮 向4-氯-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体12所制备)(0.206g，0.78mmol)的MeCN(3ml)轻微悬浮液依次加入4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基甲磺酸酯(例如如中间体35所制备)(0.2g，0.52mmol)和碳酸氢钠(0.087g，1.04mmol)。加热悬浮液至80℃ 5天。将混合物上载至SCX层析柱(20g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88的氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分，将残留物(0.27g)溶解在MeOH(2ml)中，用TFA(0.12ml，1.61mmol)处理。通过MDAP(将样品分为4份)纯化溶液得胶状物(0.173g)，将其上载至SCX层析柱(5g)上。依次用MeOH(2CV)和10％ 0.88的氨水的MeOH溶液(2CV)洗涤层析柱。真空浓缩碱性流分得标题化合物(0.109g)。LCMS RT＝2.27分钟，ES+vem/z 551(M+H)+和276+277(M/2+H)+ 中间体14 4-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯 分批向4-氧代六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如专利申请WO2000/00203A1所公开，见实施例1A)(2.146g，10.0mmol)的MeOH(60ml)溶液加入硼氢化钠(购自例如Aldrich)(0.426g，12.2mmol)。20℃搅拌溶液1.5h。用MeOH和水(1:1，10ml)小心猝灭溶液。真空去除溶剂。使残留物分配在EtOAc(100ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)中。分层，用盐水(50ml)洗涤有机萃取物。MgSO4干燥有机萃取物。真空去除溶剂得标题化合物蜡状固体(2.094g，97％)。LCMSRT＝2.40分钟，ES+ve m/z 216(M+H)+。
中间体15 4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯 在-15℃向三苯基膦(2.77g，10.57mmol)的无水四氢呋喃(10ml)溶液加入偶氮二甲酸二异丙酯(1.77ml，9mmol)。在-15℃至-20℃搅拌所得悬浮液5分钟。在-20℃向混合物滴加4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如美国专利1,377,231所公开，见实施例9，步骤1)(0.887g，3.23mmol)和4-羟基六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体14所制备)(1.0g，4.64mmol)的无水THF(20ml)溶液。6.5h内使悬浮液逐渐升温至20℃。用MeOH(10ml)猝灭混合物，真空去除溶剂。通过层析(Flashmaster II，两根100g硅胶层析柱)纯化残留物(7.3g)，用60分钟内0-50％ EtOAc-环己烷洗脱得标题化合物(2.5g)。LCMS RT＝3.85分钟，ES+ve m/z 468(M+H)+。
中间体16 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮 向4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体15所制备)(2.5g，5.34mmol)的1，4-二氧六环(10ml)溶液加入HCl/1，4-二氧六环(4.0M，10ml)。20℃搅拌溶液1.5h。真空去除溶剂，将残留物上载至SCX层析柱(50g，用MeOH预洗)上，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88的氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。合并碱性流分，真空浓缩得浅黄色油状物(1.179g)。残留物通过层析(Flashmaster II，70g层析柱)进一步纯化，用包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH洗脱得标题化合物(0.787g)。LCMS RT＝2.44分钟，ES+ve m/z 368[M+H]+。
中间体16也可通过利用TFA作为去保护酸制备。
中间体17 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[(4-羟基苯基)甲基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮甲酸盐 用三乙酰氧基硼氢化钠(230mg，1mmol)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(100mg，0.27mmol)和4-羟基苯甲醛(购自例如Aldrich)(33.2mg，0.27mmol)的DCM(2ml)溶液和1滴乙酸的混合物，在氮气中搅拌过夜。继续加入醛(10mg)和三乙酰氧基硼氢化钠(57.6mg)。2.5h后，使反应混合物分配在EtOAc和碳酸氢钠溶液中。用碳酸氢钠溶液洗涤有机相，MgSO4干燥，蒸发。将残留物(90mg)溶解在MeOH-DMSO(1:1；0.8ml)中，通过MDAP HPLC纯化得标题化合物(19.2mg)LCMS RT＝2.69分钟，ES+ve m/z 474(M+H)+。还获得第二较不纯的流分(34.7mg)，不进一步纯化而用于下步反应。
中间体18 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-({4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}甲基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮 用碳酸钾(15.7mg)和1-溴-3-氯丙烷(购自例如Aldrich)(0.1ml)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[(4-羟基苯基)甲基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮甲酸盐(例如如中间体17所制备)(53.9mg，0.1mmol)的2-丁酮(2ml)溶液，在氮气中加热混合物至80℃过夜。继续加入碳酸钾(47.1mg)和1-溴-3-氯丙烷(0.056ml)，继续加热混合物4天。继续加入碳酸钾(49mg)、1-溴-3-氯丙烷(0.056ml)和2-丁酮(2ml)，继续加热混合物4h。然后减压蒸发反应混合物，使残留物分配在EtOAc和碳酸氢钠溶液中。用碳酸氢钠溶液洗涤有机相，MgSO4干燥，蒸发。残留物通过层析(Flashmaster II，5g层析柱)纯化，用0-25％MeOH-DCM洗脱，然后在第二根硅胶层析柱(10g)上层析，依次用DCM与2％、4％和5％ MeOH-DCM洗脱。合并合适的流分，减压蒸发得标题化合物(15mg)LCMS RT＝3.03分钟，ES+ve m/z 550/552(M+H)+。
中间体19 (2-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 依次用4-甲基苯磺酸2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基酯(例如如L.E.Canne，R.L.Winston，S.B.H.Kent，Tet.Lett.，383361-4，(1997)所公开，见化合物2)(0.15g，0.47mmol)的丙酮(2ml)溶液、碘化钠(64.7mg，0.43mmol)和DIPEA(51.8μl，0.43mmol)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(0.16g，0.43mmol)的丙酮(5ml)溶液，在氮气中加热混合物至66℃过夜。第二天早上加入另一份4-甲基苯磺酸2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基酯(75mg)和DIPEA(26μl)，继续加热混合物一天。然后将混合物上载至SCX-2层析柱(20g)上，用MeOH洗涤，用10％的氨的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分，残留物通过层析(Flashmaster II，50g层析柱)纯化，用30分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH洗脱得标题化合物(133.8mg)。LCMSRT＝2.80分钟，ES+ve m/z 511[M+H]+。
中间体20 2-[1-(2-氨基乙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐 在室温用HCl的二氧六环溶液(4M，1ml)处理(2-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体19所制备)(133.8mg)的DCM(5ml)溶液。2h后，继续加入HCl(4M，0.5ml)，减压蒸发混合物得标题化合物(69.6mg)LCMS RT＝2.25分钟，ES+ve m/z 411(M+H)+。
中间体21 (3-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 依次用4-甲基苯磺酸3-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)丙基酯(例如如S.Kondo，H.Iwasawa，D.Ikeda，Y.Umeda，Y.Ikeda，H.Iinuma，H.Umezawa，J.Antibiotics，341625-7，(1981)所公开)(156mg，0.47mmol)的丙酮(2ml)溶液、碘化钠(64.7mg，0.43mmol)和DIPEA(51.8μl，0.43mmol)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(0.16g，0.43mmol)的丙酮(5ml)溶液，在氮气中加热混合物至66℃过夜。然后将混合物上载至SCX-2层析柱(20g)上，用MeOH洗涤，用10％的氨的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分，残留物通过层析(Flashmaster II，50g层析柱)纯化，用30分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH洗脱得标题化合物(241mg)。LCMS RT＝2.81分钟，ES+ve m/z 525[M+H]+。
中间体22 2-[1-(3-氨基丙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐 在室温用HCl的二氧六环溶液(4M，1ml)处理(3-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体21所制备)(241.4mg)的DCM(5ml)溶液。2h后，减压蒸发混合物得标题化合物(114mg)LCMS RT＝2.22分钟，ES+ve m/z 425(M+H)+。
中间体23 (4-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯 依次用4-甲基苯磺酸4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)丁基酯(例如如W.Hu，E.Reder，M.Hesse，Helv.Chim.Acta，1996，79，2137-51所公开，见化合物6)(163mg，0.47mmol)的丙酮(2ml)溶液、碘化钠(64.7mg，0.43mmol)和DIPEA(51.8μl，0.43mmol)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(0.16g，0.43mmol)的丙酮(5ml)溶液，在氮气中加热混合物至66℃过夜。然后将混合物上载至SCX-2层析柱(20g)上，用MeOH洗涤，用10％的氨的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分，残留物通过层析(Flashmaster II，50g层析柱)纯化，用30分钟内包含1％NEt3-DCM的0-30％ MeOH洗脱得标题化合物(118.6mg)。LCMS RT＝2.83分钟，ES+ve m/z 539[M+H]+ 中间体24 2-[1-(4-氨基丁基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐 在室温用HCl的二氧六环溶液(4M，1ml)处理(4-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体23所制备)(118.6mg)的DCM(5ml)溶液。2h后，减压蒸发混合物得标题化合物(108.8mg)LCMS RT＝2.25分钟，ES+ve m/z 439(M+H)+。
中间体25 2-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}乙醇 将4-(2-羟乙基)苯酚(购自例如Aldrich)(10g，72mmol)溶解在2-丁酮(250ml)中，然后加入碳酸钾(19.9g，0.144摩尔)，接着加入1-溴-3-氯丙烷(购自例如Aldrich)(8.54ml，0.144摩尔)，80℃加热反应混合物18h。用水(500ml)稀释冷却的反应混合物，分层，用DCM(2×200ml)萃取水溶液。干燥(MgSO4)合并的有机萃取液，真空蒸发，通过Flashmaster II(3×100g硅胶层析柱)纯化，用40分钟内0-100％EtOAc-环己烷洗脱得标题化合物(14.12g)。LCMS RT＝2.84分钟，ES+ve m/z 232[M+H]+。
中间体26 2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙醇 用碳酸钾(17.96g，0.13摩尔)、碘化钾(1.24g，7.5mmol)和六氢-1H-氮杂

(购自例如Aldrich)(14.71ml，0.1308摩尔)处理2-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}乙醇(例如如中间体25所制备)(14g，0.065摩尔)的2-丁酮(200ml)溶液，在氮气中80℃加热18h。用水(300ml)稀释冷却的反应混合物，分层，用DCM(2×200ml)萃取水溶液。干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，真空蒸发得黄色油状物(23g)。部分黄色油状物(10g)通过Flashmaster II(100g硅胶层析柱)纯化，依次用15分钟内0-100％ EtOAc-环己烷、100％ EtOAc 10分钟、0-10％(10％氨水-MeOH)-DCM 15分钟以及10％(10％氨水-MeOH)-DCM 10分钟洗脱得标题化合物(5.3g)。LCMS RT＝1.9分钟，ES+ve m/z 278[M+H]+。
中间体27 甲磺酸2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基酯 制备A 将2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙醇)(例如如中间体26所制备)(273mg，0.98mmol)溶解在DCM(5ml)中，用DIPEA(0.204ml，1.2mmol)和甲磺酰氯(0.093ml，1.2mmol)处理。室温搅拌混合物3h。继续加入甲磺酰氯(0.020ml，0.26mmol)，继续搅拌45分钟。向混合物加入饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)。分层，继续用DCM洗涤水溶液。真空浓缩合并的DCM萃取物得标题化合物，不进一步纯化而直接使用。LCMS RT＝2.18分钟，ES+ve m/z 356[M+H]+。
制备B 可以类似于中间体35的方法利用2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙醇(例如如中间体26所制备)(0.080g，0.29mmol)制备中间体27，得标题化合物(0.101g，100％)。LCMS RT＝2.18分钟，ES+ve m/z 356[M+H]+。
中间体28 3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙酸乙酯， -20℃搅拌下将3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)-1-丙醇(例如如E.L.Strogryn，J.Med.Chem.，13864-6，(1970)所公开)(412mg，3mmol)和(4-羟基苯基)丙酸乙酯(购自例如Maybridge)(641mg，3.3mmol)加入到三苯基膦(1.02g，3.9mmol)和偶氮二甲酸二异丙酯(0.66ml，3.9mmol)的THF(15ml)混合物中。10分钟后，使溶液升温至21℃。18h后，LCMS表明原料不再明显存在。加入MeOH猝灭任何过量试剂，蒸干混合物。将残留物上载至两根100g Flashmaster II硅胶层析柱上，以40分钟内0-50％ EtOAc的环己烷溶液运行。层析柱利用40分钟内0-25％的MeCH的EtOAc溶液再次运行。UV-检测器没有检测到产物，因此蒸发洗脱液得粗产物(782mg)。在以40分钟内0-50％ MeOH的DCM溶液运行的50g硅胶层析柱上对其进行进一步纯化得标题化合物(306mg)。LCMSRT＝2.39分钟，ES+ve m/z 334[M+H]+。
中间体29 3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-丙醇 在氮气和THF(5ml)中搅拌3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙酸乙酯(例如如中间体28所制备)(306mg，0.92mmol)，在21℃约20秒内加入氢化锂铝的乙醚(1M，0.5ml)溶液。30分钟后，LCMS表明反应完成。加入含水THF，10分钟后加入Na2SO4。过滤混合物，蒸干滤液和固体滤饼的浸出液。为去除最后的痕量Na2SO4，将残留物溶解在EtOAc中，滤过棉花塞。蒸发得标题化合物，LCMSRT＝2.04分钟，ES+ve m/z 292[M+H]+。
中间体30 4-甲基苯磺酸3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙基酯和1-(3-{[4-(3-氯丙基)苯基]氧基}丙基)六氢-1H-氮杂

的混合物(3:2) 在包含吡啶(0.2ml，2.5mmol)的DCM(2ml)中搅拌3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-丙醇(例如如中间体29所制备)(146mg，0.5mmol)，冰水冷却，加入甲苯磺酰氯(115mg，0.6mmol)。10分钟后，使混合物升温至21℃。2h后，LCMS表明反应完成。继续加入甲苯磺酰氯(60mg，0.31mmol)，搅拌继续5h。反应不完全。使混合物在21℃静置三天，然后继续加入甲苯磺酰氯(60mg，0.31mmol)和吡啶(0.1ml，1.25mmol)。继续搅拌3h后，LCMS表明仅剩少量原料。蒸发混合物至油状物。将其溶解在DCM中，上载至50g Flashmaster II硅胶层析柱上。层析柱以30分钟内0-50％ MeOH的DCM溶液运行。蒸发包括双峰的洗脱液得粗标题混合物(133mg)，甲苯磺酸盐LCMS RT＝2.79分钟，ES+ve m/z 446[M+H]+，氯类似物LCMS RT＝2.59分钟，ES+ve m/z 310和312[M+H]+以及甲苯磺酸RT＝2.31分钟ES-ve m/z 171[M-H]-。将该混合物用于下步反应。
中间体31 1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯 在氮气气氛中回流搅拌4-碘苯酚(购自例如Aldrich)(20g)、1-溴-3-氯丙烷(购自例如Aldrich)(17.91g)和碳酸钾(25.2g)的2-丁酮(400ml)混合物18h。冷却混合物，过滤。蒸发滤液，将残留物溶解在环己烷中，在100g硅胶层析柱上通过Flashmaster II纯化，依次用环己烷和20％的EtOAc的环己烷溶液洗脱。从合适的流分中蒸发溶剂得标题化合物无色油状物(15.928g)，静置结晶。LCMS RT＝3.70分钟。从另一组流分中蒸发溶剂得另一部分标题化合物的浅黄色油状物(6.668g)，静置固化。1H NMR(CDCl3)δ 2.23(2H，五重峰，J＝6Hz)，3.74(2H，t，J＝6Hz)，4.09(2H，t，J＝6Hz)，6.70(2H，m)，7.57(2H，m)。
中间体32 1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}六氢-1H-氮杂
在80℃和氮气气氛中搅拌1-[(3-氯丙基)氧基]-4-碘苯(例如如中间体31所制备)(15.855g)、碘化钠(8g)和六亚甲基亚胺(购自例如Aldrich)(15.1ml)的2-丁酮(200ml)混合物约22h。过滤反应混合物，蒸发滤液得米色残留物。用乙醚研磨该物质，过滤回收得灰白色固体。
使固体分配在DCM(200ml)和饱和碳酸氢钠溶液(200ml)中。无水Na2SO4干燥有机层，蒸发得残留物，在50g硅胶层析柱上通过Flashmaster II层析纯化，使用50分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％MeOH梯度。从合适的流分中蒸发溶剂得标题化合物黄色固体(1.2708g)。LCMS RT＝2.39分钟，ES+ve m/z 360[M+H]+。蒸发研磨物的滤液得褐色残留物，在2×100g硅胶层析柱上通过Flashmaster II层析纯化，使用50分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH梯度。从合适的流分中蒸发溶剂得标题化合物黄色油状物(15.9g)。LCMS RT＝2.40分钟，ES+ve m/z 360[M+H]+。
中间体33 4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-3-丁炔-1-醇 在氮气气氛中室温搅拌1-{3-[(4-碘苯基)氧基]丙基}六氢-1H-氮杂

(例如如中间体32所制备)(1.268g)、3-丁炔-1-醇(购自例如Aldrich)(668μl)、NEt3(2.5ml)、氯化二(三苯基膦)合钯(II)(124mg)和碘化铜(I)(34mg)的THF(15ml)混合物约5h。过滤(60ml PTFE滤管)混合物，蒸发滤液得残留物。在100g硅胶层析柱上通过FlashmasterII层析纯化该物质，使用60分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH梯度。从合适的流分中蒸发溶剂得残留物，将残留物溶解在MeOH中，上载至SCX离子交换层析柱(50g)。用MeOH洗涤层析柱，然后用2M氨的MeOH溶液洗脱。从含氨流分中蒸发溶剂得标题化合物暗黄色残留物(823mg)。LCMS RT＝2.10分钟，ES+ve m/z 302[M+H]+。
中间体34 4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-丁醇 向4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-3-丁炔-1-醇(例如如中间体33所制备)(823mg)的EtOH(20ml)溶液加入1.25M HCl的MeOH(3.25ml)溶液，10％ w/w Pd/C(350mg)氢化所得混合物约4h。使反应混合物滤过Celite硅藻土，蒸发溶剂。将残留物溶解在DCM(125ml)中，用2N NaOH(100ml)和盐水(100ml)洗涤所得溶液，无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂得标题化合物暗黄色残留物(726mg)。LCMS RT＝2.18分钟，ES+ve m/z 306[M+H]+。
中间体35 甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯 依次向4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-丁醇(例如如中间体34所制备)(0.077g，0.25mmol)的无水DCM(2ml)溶液加入DIPEA(0.053ml，0.30mmol)和甲基磺酰氯(0.023ml，0.30mmol)。
20℃搅拌溶液2h。用DCM(10ml)和饱和碳酸氢钠(10ml)稀释溶液。振荡两相混合物，利用憎水玻璃料分层。真空去除有机相得标题化合物(0.09g)。LCMS RT＝2.43分钟，ES+ve m/z 384[M+H]+。
中间体36 1-{3-[(4-溴苯基)氧基]丙基}六氢-1H-氮杂
加热1-溴-4-[(3-氯丙基)氧基]苯(例如如R.Faghih，W.Dwight，A.Vasudevan，J.Dinges，S.E.Conner，T.A.Esbenshade，Y.L.Bennani，A.A.Hancock，Biorg.Med.Chem.Lett.，123077-9，(2002)所公开，见流程1)(25mmol)、六亚甲基亚胺(购自例如Aldrich)(6ml，50mmol)、碘化钠(300mg，2mmol)和碳酸钾(3.45g，25mmol)的丙酮(50ml)混合物至78℃过夜。冷却混合物至室温，过滤去除固体。减压蒸发滤液，将残留物溶解在EtOAc中，用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，MgSO4干燥，减压蒸发。将残留物溶解在MeOH中，上载至SCX-2层析柱(70g)，依次用MeOH和10％的氨的MeOH溶液洗脱。合并含氨流分，减压蒸发得标题化合物(6.866g)。LCMS RT＝2.28分钟，ES+ve m/z312/314(M+H)+。
中间体37 1-[3-({4-[(1E)-4，4-二(乙氧基)-1-丁烯-1-基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂
在氮气和冰浴中用9-BBN的THF(0.5m，50ml)溶液处理3-丁烯醛缩二乙醇(购自例如Aldrich)(4.14ml，24.4mmol)的THF(7ml)溶液，搅拌溶液3h。同时，用碳酸钾(10.11g，73.2mmol)和二氯[1，1’-二(二苯基膦)二茂铁]合钯(536mg，0.73mmol)处理1-{3-[(4-溴苯基)氧基]丙基}六氢-1H-氮杂

(例如如中间体36所制备)(6.866g，22mmol)的DMF(7ml)溶液，然后用上述溶液缓慢处理。然后在氮气中加热混合物至70℃ 3h，然后在80℃加热过夜。冷却混合物至室温，用EtOAc和水稀释。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)，减压蒸发。将残留物(11.12g)溶解在DCM(30ml)中，通过层析(Flashmaster II，3×100g硅胶层析柱)纯化，用40分钟内包含1％NEt3-DCM的0-15％ MeOH洗脱。合并合适的流分，减压蒸发得标题化合物(6.14g)与1-[3-({4-[4，4-二(乙氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

的1:1混合物LCMS RT＝2.5分钟，ES+ve m/z 376/378(11)(M+H)+。
中间体38 1-[3-({4-[4，4-二(乙氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂
在10％ Pd/C(0.6g)上氢化包含1-[3-({4-[4，4-二(乙氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

的1-[3-({4-[(1E)-4，4-二(乙氧基)-1-丁烯-1-基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

(例如如中间体37所制备)(1:1，6.14g)的EtOH(120ml)溶液。4h后，过滤收集催化剂，用EtOH洗涤，减压蒸发滤液和洗涤物。残留物通过层析(Flashmaster II，2×100g硅胶层析柱)纯化，用40分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-15％ MeOH洗脱。合并合适的流分，减压蒸发得3.5g不纯产物，在100g硅胶层析柱上通过Flashmaster I层析进一步纯化，用0-15％(10％的氨水的EtOH溶液)-DCM洗脱得标题化合物和1-[3-(苯氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

的混合物(1.78g，4:1)LCMS RT＝2.59分钟ES+ve m/z 378(M+H)+。合并剩余流分，减压蒸发得较不纯的产物(1.782g)，在Flashmaster I(100g硅胶层析柱)上层析，用0-15％ MeOH-EtOAc洗脱。合并合适的流分，蒸发得标题化合物(410mg)LCMS RT＝2.58分钟ES+ve m/z 378(M+H)+。
中间体39 1-[3-({4-[4，4-二(甲氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂
将1-[3-({4-[4，4-二(乙氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

(例如如中间体38所制备)的MeOH溶液上载至SCX-2层析柱(20g)，用3CV MeOH洗涤。然后用10％的氨的MeOH溶液洗脱层析柱，合并含氨流分，蒸发得标题化合物(243mg)LCMS RT＝2.43分钟ES+ve m/z 350(M+H)+。
中间体40 4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁醛乙酸盐 在氮气中加热1-[3-({4-[4，4-二(甲氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

(例如如中间体39所制备)(243mg，0.6mmol)的乙酸(5ml)和水(3ml)溶液至60℃ 2h。然后减压蒸发混合物得标题化合物(305mg)LCMS RT＝2.20分钟ES+ve m/z 304(M+H)+。
中间体41 5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊酸甲酯 -20℃搅拌三苯基膦(1.84g，7.0mmol)和偶氮二甲酸二叔丁酯(1.61g，7mmol)的THF(30ml)溶液，10分钟后，加入3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)-1-丙醇(例如如E.L.Strogryn，J.Med.Chem.，1970，13，864-866所公开)(1.0g，6.35mmol)和5-(4-羟基苯基)戊酸甲酯(以类似于Yi，Ching Sui；Martinelli，Louis C.；Blanton，C.DeWitt，Jr.J.Org.Chem.，43405-9，(1978)(化合物17)所述方法制备，但用室温下的硫酸代替回流的盐酸)(1.32g，6.35mmol)各自的THF(约4ml)溶液。1小时内使溶液升温至室温，然后加热至75℃ 48h，此时不再发生反应。蒸干溶液，将残留物溶解在MeOH中，上载至已用MeOH预处理过的SCX-2层析柱(70g)。用MeOH洗脱层析柱，然后用10％ 0.88的氨水的MeOH溶液洗脱产物。蒸发得标题化合物(1.52g)。LCMS RT＝2.55分钟，ES+ve m/z 348[M+H]+。
中间体42 5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-戊醇 在氮气和THF(30ml)中搅拌5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊酸甲酯(例如如中间体41所制备)(1.52g，4.37mmol)，约1分钟内加入氢化锂铝的乙醚溶液(1M，2.2ml)。15分钟后，LCMS表明反应完成。加入含水THF，10分钟后，加入Na2SO4。过滤混合物，蒸发滤液得标题化合物油状物(0.95g)LCMS RT＝2.34分钟，ES+ve m/z 320[M+H]+。
中间体43 甲磺酸5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊基酯 在室温和氮气中搅拌5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)-1-戊醇(例如如中间体42所制备)(0.12g，0.37mmol)和甲磺酰氯(0.035ml，0.45mmol)的DCM(3ml)溶液，加入DIPEA(0.078ml，0.45mmol)。3h后，反应完成。用DCM稀释溶液，用碳酸氢钠溶液洗涤。用DCM萃取水层，用水洗涤合并的有机层，MgSO4干燥，蒸发得标题化合物油状物(148mg)LCMS RT＝2.60分钟，ES+ve m/z 398[M+H]+。
中间体44 3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]-1-丙醇 回流加热和搅拌3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-醇(例如如专利申请WO2004/056369A1所公开，见实施例3)(5g)、碳酸钾(7.95g)和3-溴-1-丙醇(购自例如Aldrich)(2.18ml)的2-丁酮(115ml)混合物约18h。过滤混合物，蒸发得残留物，将其溶解在DCM中，在100g硅胶层析柱上通过Flashmaster II层析纯化，用40分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-30％ MeOH梯度洗脱。从合适的流分中蒸发溶剂得标题化合物粗样品(3.375g)，在KP-Sil 40M层析柱上通过Biotage快速层析进一步纯化，用3％(2M氨的MeOH溶液)的DCM洗脱。从合适的流分中蒸发溶剂得标题化合物(2.3g)。LCMS RT＝1.80分钟，ES+ve m/z 276[M+H]+。
中间体45 甲磺酸3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基酯 将3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]-1-丙醇(例如如中间体44所制备)(55mg，0.2mmol)溶解在DCM(1.5ml)中，用DIPEA(0.042ml，0.24mmol)和甲磺酰氯(0.017ml，0.24mmol)处理。在氮气气氛中室温搅拌混合物2h，然后真空浓缩得标题化合物，不进一步纯化而用于下步反应。LCMS RT＝2.09分钟，ES+ve m/z 354[M+H]+。
中间体46 7-[(3-氯丙基)氧基]-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂
依次向3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-醇(例如如专利申请WO2004/056369A1所公开，见实施例3)(0.3g，1.38mmol)的丙酮(3ml)悬浮液加入碳酸钾(0.253g，1.83mmol)和1-溴-3-氯丙烷(购自例如Aldrich)(0.150ml，1.52mmol)。35分钟后加入另一份碳酸钾(0.140g，1.0mmol)。回流加热悬浮液23h。蒸发溶剂过夜。使混合物分配在EtOAc(50ml)和水(40ml)中。分层，用水洗涤(2×40ml)有机相，MgSO4干燥，过滤。真空去除溶剂得标题化合物(0.3g，74％)。LCMSRT＝2.27分钟，ES+ve m/z 294/296(M+H)+ 中间体47 3-环丁基-8-羟基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲醛 在氮气中滴加甲基溴化镁的乙醚溶液(3M，3.1ml)处理3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-醇(例如如专利申请WO2004/056369A1所公开，见实施例3)(2g)的THF(20ml)溶液。搅拌悬浮液10分钟，然后用甲苯(100ml)稀释。加入多聚甲醛(1g)和NEt3(1.5g)，80℃加热混合物3h。用2MHCl(50ml)处理冷却后的混合物，搅拌10分钟。用饱和碳酸氢钠水溶液小心碱化混合物，并萃取到EtOAc中。蒸发干燥(Na2SO4)过的有机相，通过硅胶(20g)柱层析纯化残留物，用DCM-MeOH-氨水(95:5:0.5)洗脱得标题化合物(1.4g)。LCMS RT＝1.55分钟。
中间体48 3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲醛 用1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺酰基]甲磺酰胺(购自例如Aldrich)(14g)分批处理3-环丁基-8-羟基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂环庚烯-7-甲醛(例如如中间体47所制备)(8.5g)和NEt3(20ml)的DMF(60ml)溶液。搅拌混合物16h，加入乙酸钯(II)(300mg)、1，3-二(二苯基膦)丙烷(520mg)和三辛基硅烷(20ml)。在氮气中和75℃加热混合物2h，冷却，在水和DCM中分配。蒸发干燥(Na2SO4)过的有机相，通过硅胶(150g)柱层析纯化残留物，用DCM-MeOH-氨水(98:2:0.2)洗脱，通过硅胶(150g)柱层析纯化进一步纯化，用EtOAc-MeOH-氨水(95:5:0.5)洗脱得标题化合物(7.4g)LCMS RT＝1.56分钟。
中间体49 2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸乙酯 在静态氩气中回流(热浴温度71℃)7-氰基-1，2，4，5-四氢-3H-苯并氮杂环庚烯-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如专利申请EP0528369A2所公开，见实施例17)(3.7g，13.6mmol)在预先混合好的三甲基氯硅烷(25ml)-EtOH(15ml)中的溶液过夜。在最初升温至回流的过程中剧烈冒泡。5天后，加入其他等分三甲基氯硅烷和EtOH直至总共加入了103ml三甲基氯硅烷(0.81摩尔)和EtOH(69ml，1.17摩尔)。冷却反应物，冰浴冷却下缓慢加入水(100ml)，保持温度<40℃。15分钟后，升温至24℃，加入2N NaOH直至pH>13。用DCM萃取溶液(2×500ml)，用盐水洗涤有机萃取物，干燥，蒸发得粗产物(2.59g)。去除0.13g后，通过硅胶层析(200g Biotage柱)纯化残留物，用DCM-2M氨的MeOH溶液洗脱(10:1)得标题化合物(2.3g，81％)。TLC(硅胶)Rf＝0.10 DCM-2N氨的MeOH溶液，20:1 中间体50 3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸乙酯 在氩气中和冰浴冷却下搅拌2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸乙酯(例如如中间体49所制备)(2.3g，10.5mmol)的DCM(30ml)-乙酸(0.3ml)溶液，加入环丁酮(购自例如Aldrich)(1.24ml，16.5mmol)。30分钟后，在10℃分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.5g，16.5mmol)。移除冰浴，在环境温度搅拌混合物17h，然后倒入DCM(50ml)-饱和碳酸钾溶液(50ml)中。利用2N NaOH水溶液碱化两相混合物至pH13。分层，用DCM(80ml)萃取水溶液，用盐水洗涤合并的有机层，干燥，蒸发得(标题化合物)结晶固体(2.8g，97％)。TLC(硅胶)Rf＝0.67DCM-2N氨的MeOH溶液(20:1) 中间体51 3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸 搅拌下用2N NaOH(10ml)处理3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸乙酯(例如如中间体50所制备)(2.7g，10mmol)的EtOH(35ml)溶液。在环境温度27h后，用约10ml 2N HCl小心酸化溶液至pH6。蒸发溶液，用氯仿处理残留物，真空浓缩干。将固体残留物溶解在预先混合的1:1 氯仿:MeOH(50ml)中，使固体滤过Celite硅藻土。蒸发溶液，用氯仿处理残留物，真空浓缩干得具有约25mol％氯仿的标题化合物(3.2g，定量)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ 7.84(1H，d)，7.83(1H，s)，7.26(1H，d)，3.63(1H，m)，3.20(8H，br s)，2.35(4H，m)，1.88(1H，m)，1.77(1H，m)。
中间体52 4-(2-{[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)苯酚 在21℃和氮气中搅拌4-(2-羟乙基)苯酚(购自例如Aldrich)(8.28g，0.06摩尔)和叔丁基二甲基氯硅烷(9.9g，0.066摩尔)与咪唑(8.4g，0.123摩尔)的DMF(60ml)溶液19h。10％ EtOAc-环己烷TLC表明反应完成。蒸发溶液至浆状物，使其分配在乙醚和水中，加2N HCl得pH 3。用更多乙醚萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，MgSO4干燥，蒸发。将残留物溶解在DCM中，上载至已在DCM中制好的硅胶凝胶柱(500g)上。用DCM洗脱柱子得标题化合物(13.09g)。LCMS RT＝3.78分钟，ES+ve m/z 253[M+H]+ 中间体53 4-{[4-(2-{[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)苯基]氧基}-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯 搅拌和0℃下向4-(2-{[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)硅基]氧基}乙基)苯酚(例如如中间体52所制备)(0.96g，3.8mmol)、4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(购自例如Aldrich)(0.842g，4.18摩尔)和三苯基膦(1.09g，4.18mmol)的无水THF(10ml)混合物分批加入偶氮二甲酸二叔丁酯(0.963g，4.18mmol)。一旦加完，使混合物升温至室温，在氮气中搅拌3h。真空浓缩反应混合物，然后用乙醚(20ml)研磨三次，过滤去除三苯基氧化膦。真空浓缩乙醚。完全如上，以1mmol规模重复所述实验，在硅胶层析柱(100g)上利用Flashmaster II纯化合并的粗产物(3.3g)。首先将粗产物预吸附至Florisil(100-200目)上，用25-50％EtOAc-环己烷冲洗5分钟后，用65分钟内0-25％ EtOAc-环己烷洗脱柱子。合并合适的流分，真空浓缩得标题化合物(1.46g)。LCMS RT4.36分钟ES+ve m/z 436(M+H)+，453(M+NH4)+ 中间体54 三氟乙酸2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基酯三氟乙酸盐 将4-{[4-(2-{[(1，1-二甲基乙基)(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基)苯基]氧基}-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体53所制备)(1.37g，3.14mmol)溶解在DCM(25ml)中，然后加入TFA(5.5ml)。在氮气中和室温搅拌所得溶液约17h。真空浓缩溶液，溶解在DCM(5ml)中，真空蒸发，然后将残留物溶解在甲苯(5ml)中得标题化合物(1.55g)。LCMS RT＝2.38分钟，ES+ve m/z 318[M+H]+。
中间体55 2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙醇 搅拌下向三氟乙酸2-[4-(4-哌啶氧基)苯基]乙基酯三氟乙酸盐(例如如中间体54所制备)(1.49g，3.46mmol)的DCM(60ml)溶液加入乙酸(0.2ml)和环丁酮(购自例如Aldrich)(0.775ml，10.38mmol)。加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.1g，5.19mmol)，室温搅拌混合物5天。继续加入乙酸(0.2ml)、环丁酮(0.775ml)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.88g，2.77mmol)，搅拌混合物20h。用DCM(20ml)稀释反应混合物，用NaOH溶液(2N，80ml)洗涤，Na2SO4干燥，真空浓缩。在SCX离子交换层析柱(50g)上纯化残留物，依次用MeOH(6×45ml)和2N氨的MeOH溶液(6×45ml)洗脱柱子。合并碱性流分，真空浓缩得标题化合物(0.668g)。LCMS RT＝1.84分钟ES+ve m/z 276(M+H)+。
中间体56 甲磺酸2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基酯 以类似于甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)的方法，利用2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙醇(例如如中间体55所制备)(0.070g，0.25mmol)制备得标题化合物(0.089g)。LCMS RT＝2.11分钟，ES+ve m/z 354[M+H]+。
中间体57 4-[(4-碘苯基)氧基]-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯 搅拌下向4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯(购自例如Aldrich)(10.064g，50mmol)的N-甲基-2-吡咯烷酮(45ml)溶液分批加入氢化钠(60％ w/w在矿物油中的分散体，3g，75mmol)。最初冒泡停止后，加入1-氟-4-碘苯(购自例如Aldrich)(11.1g，50mmol)，在80℃和氮气气氛中加热所得混合物20h。使混合物分配在EtOAc(500ml)和水(400ml)中。用水(2×400ml)洗涤有机相，无水MgSO4干燥，蒸发得标题化合物(19.56g)。LCMS RT＝3.86分钟，ES+ve m/z 404[M+H]+。
中间体58 4-[(4-碘苯基)氧基]哌啶三氟乙酸盐 用TFA(17ml)处理4-[(4-碘苯基)氧基]-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体57所制备)(4g，9.9mmol)的DCM(90ml)溶液。室温搅拌所得混合物2h。真空蒸发溶剂得标题化合物(3.85g)。LCMSRT＝2.21分钟，ES+ve m/z 304[M+H]+。
中间体59 1-环丁基-4-[(4-碘苯基)氧基]哌啶 搅拌下依次向4-[(4-碘苯基)氧基]哌啶三氟乙酸盐(例如如中间体58所制备)(3.85g，9.23mmol)在具有乙酸(0.57ml)的DCM(50ml)中的溶液加入环丁酮(购自例如Aldrich)(2.22ml，29.7mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.15g，14.8mmol)。在氮气中室温搅拌混合物约17h，继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.57g，7.4mmol)和环丁酮(1.11ml，14.8mmol)。继续搅拌混合物2h，然后使其分配在DCM(70ml)和NaOH溶液(2N，100ml)中。分离有机层，用HCl(2N，2×100ml)洗涤，硫酸钠干燥，蒸发溶剂得米色固体。在两根SCX离子交换层析柱(2×20g)上进一步纯化所述化合物。依次用MeOH和氨水的MeOH溶液(1:10)洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分得标题化合物(2.066g)。LCMS RT＝2.38分钟，ES+ve m/z 358[M+H]+。
中间体60 4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-3-丁炔-1-醇 将3-丁炔-1-醇(购自例如Aldrich)(0.284ml，3.74mmol)溶解在THF(15ml)和NEt3(0.659ml，4.67mmol)中，在氮气气流中室温搅拌溶液30秒。依次加入催化剂、氯化二(三苯基膦)合钯(II)(30mg)、碘化铜(I)(20mg)和1-环丁基-4-[(4-碘苯基)氧基]哌啶(例如如中间体59所制备)(0.670g，1.87mmol)。在氮气、室温中搅拌约17h后，过滤去除固体，用MeOH洗涤。真空浓缩滤液以去除溶剂，然后通过SCX离子交换(20g层析柱)进一步纯化。依次用MeOH(5×50ml)和(5×50ml)氨水的MeOH溶液(1:10)洗脱柱子。真空浓缩碱性流分，完全如上，在SCX离子交换层析柱上再次纯化残留物得标题化合物(0.525g)。LCMS RT＝2.06分钟，ES+ve m/z 300[M+H]+。
中间体61 4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-1-丁醇 将4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-3-丁炔-1-醇(例如如中间体60所制备)(0.52g，1.74mmol)溶解在MeOH-EtOH(1:9，50ml)和乙酸(0.2ml，3.48mmol)的混合物中，10％重量Pd/C(130mg)室温氢化约17h。通过滤过10g硅藻土层析柱去除催化剂。真空浓缩滤液，在SCX离子交换层析柱(10g)上纯化残留物，依次用MeOH(5×45ml)和(4×45ml)2N氨的MeOH溶液洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分得标题化合物(0.51g)。LCMS RT＝2.12分钟，ES+ve m/z 304[M+H]+。
中间体62 甲磺酸4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}丁基酯 以类似于甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)的方法，利用4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}-1-丁醇(例如如中间体61所制备)(0.063g，0.2mmol)制备得标题化合物(0.085g)。LCMS RT＝2.38分钟，ES+ve m/z 381[M+H]+。
中间体63 甲磺酸4-[4-(甲氧基)苯基]丁基酯 在氮气中向冷至0℃的4-[4-(甲氧基)苯基]-1-丁醇(购自例如Aldrich)(0.36g，2mmol)和NEt3(1.39ml，10mmol)的无水乙醚(10ml)溶液滴加甲基磺酰氯(0.46ml，6mmol)。室温搅拌4h后，使反应混合物分配在乙醚和水中。用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机相，无水MgSO4干燥。真空去除溶剂得标题化合物无色油状物(0.52g)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 7.10(d，J＝8.8Hz，2H)，6.84(d，J＝8.8Hz，2H)，4.24(t，J＝6.3Hz，2H)，3.80(s，3H)，2.99(s，3H)，2.61(t，J＝7Hz，2H)，1.82-1.68(m，4H)。
中间体64 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2R)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷)甲基]-1(2H)-酞嗪酮 在氮气中向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体4所制备)(35.35g，100mmol)的2-丁酮(250ml)溶液加入4-[4-(甲氧基)苯基]丁基甲磺酸酯(例如如中间体63所制备)(31g，120mmol)和碳酸钾(27.6g，200mmol)。回流加热反应混合物24h。通过过滤去除固体，用2-丁酮(3×100ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在DCM(70ml)中。将其上载至硅胶Biotage层析柱(800g)，依次用DCM(5000ml)和5％的MeOH/DCM(5000ml)洗脱。真空蒸发所需流分，将其溶解在DCM(70ml)中。将其上载至氨基丙基层析柱(8×70g)，用30分钟内0-100％DCM的环己烷溶液梯度洗脱。合并所需流分，真空蒸发得标题化合物浅褐色油状物(30.96g)。LCMS RT＝2.95分钟，ES+ve m/z 516/518[M+H]+。
中间体65 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮 在氮气中向冷至-60℃的4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2R)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体64所制备)(24.35g，47mmol)的无水DCM(100ml)溶液滴加1.0M的三溴化硼的DCM(52ml，52mmol)溶液。使反应混合物升温至室温，在氮气中搅拌18h。在冰/水浴中冷却反应混合物，然后用2N盐酸(50ml)猝灭。利用饱和碳酸氢钠碱化反应混合物，用DCM(500ml)萃取。无水MgSO4干燥分离的有机相，真空蒸发得标题化合物橙色泡沫(22.04g)。LCMS RT＝2.80分钟，ES+ve m/z 502/504[M+H]+。
中间体66 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2R)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮 在氮气中向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体65所制备)(22.03g，44mmol)的2-丁酮(220ml)溶液加入1-溴-3-氯丙烷(购自例如Aldrich)(5.2ml，53mmol)和碳酸钾(12.2g，88mmol)。在氮气中回流加热反应混合物18h。过滤去除固体，用2-丁酮(200ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在DCM(60ml)中。将其上载至硅胶层析柱(330g)，用12CV内0-25％ MeOH的DCM溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分。在氮气中将部分残留物(19.65g)溶解在2-丁酮(200ml)中，向其加入1-溴-3-氯丙烷(4.65ml，47mmol)和碳酸钾(10.8g，78.4mmol)。在氮气中回流加热反应混合物18h。继续加入1-溴-3-氯丙烷(1ml)，继续回流加热反应混合物5h。通过过滤去除固体，用2-丁酮(3×100ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在DCM(50ml)中。将其上载至硅胶层析柱(330g)，用12CV内0-10％ MeOH的DCM溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分得标题化合物褐色油状物(21.68g)。LCMS RT＝3.18分钟，ES+ve m/z 578/580[M+H]+。
中间体67 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2S)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷)甲基]-1(2H)-酞嗪酮 向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2S)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体6所制备)(0.457g，1.29mmol)的2-丁酮(25ml)悬浮液加入甲磺酸4-[4-(甲氧基)苯基]丁基酯(0.52g，2mmol)和碳酸钾(0.276g，2mmol)。回流加热反应混合物20h。过滤去除固体，用2-丁酮(20ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在DCM(3ml)中。将其上载至氨基丙基层析柱(10g)，用40分钟内0-100％ DCM的环己烷溶液梯度洗脱。合并所需流分，真空蒸发得标题化合物(0.23g)。LCMS RT＝2.99分钟，ES+ve m/z 516/518[M+H]+。
中间体68 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2S)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮 向冷至-60℃的4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2s)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体67所制备)(0.23g，0.45mmol)的无水DCM(5ml)溶液滴加1.0M三溴化硼的DCM(2.5ml，2.5mmol)溶液。使反应混合物升温至室温，在氮气中搅拌18h。冷却反应混合物，然后用2N盐酸(5ml)猝灭。利用饱和碳酸氢钠碱化反应混合物，用DCM(20ml)萃取。无水MgSO4干燥分离的有机相，真空蒸发得标题化合物(0.20g)。LCMS RT＝2.79分钟，ES+ve m/z502/504[M+H]+。
中间体69 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2S)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮 在氮气中向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2S)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体68所制备)(0.22g，0.44mmol)的2-丁酮(10ml)溶液加入1-溴-3-氯丙烷(0.052ml，0.53mmol)和碳酸钾(0.122g，0.83mmol)。回流加热反应混合物18h。继续加入1-溴-3-氯丙烷(0.052ml，0.53mmol)，继续回流加热反应混合物5h。过滤去除固体，用2-丁酮(20ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在DCM(2ml)中。将其上载至硅胶层析柱(10g)，用20分钟内0-10％ MeOH的DCM溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分得标题化合物(0.149g)。LCMS RT＝3.20分钟，ES+ve m/z578/580/582[M+H]+。
中间体70 (4-氯苯基)乙酸1，1-二甲基乙基酯 在氮气中将(4-氯苯基)乙酸(购自例如Aldrich)(13.76g，81mmol)悬浮在甲苯(100ml)。向其加入二叔丁基二甲基缩醛(购自例如Aldrich)(50ml)，80℃加热反应混合物18h。真空去除溶剂，将残留物溶解在EtOAc(200ml)中。用饱和碳酸氢钠溶液(2×200ml)和盐水(2×200ml)洗涤所述溶液。无水MgSO4干燥有机相，真空蒸发得标题化合物(6.68g，36％)浅褐色油状物。1H NMR(CDCl3)7.28(2H，d，J8.5Hz)，7.19(2H，d，J8.5Hz)，3.48(2H，s)，1.43(9H，s)。
中间体71 4-[(甲氧基)羰基]-3-吡啶甲酸 在-70℃和氮气中向吡啶-3，4-二甲酸酐(购自例如Aldrich)(26.73g，180mmol)的无水THF(250ml)悬浮液加入甲醇钠(11.2g，2.01摩尔)的无水MeOH(50ml)悬浮液。使反应混合物升温至室温，搅拌18h。真空去除溶剂，将残留物溶解在水(350ml)中。利用浓盐酸将其酸化至～pH 2。过滤收集所得固体，用水洗涤。45℃真空干燥固体得标题化合物(14.6g，45％)白色固体。LCMS RT＝0.98分钟，ES+ve m/z 182[M+H]+。
中间体72 3-{2-(4-氯苯基)-3-[(1，1-二甲基乙基)氧基]-3-氧代丙酰基}-4-吡啶甲酸甲酯 在氮气中向4-[(甲氧基)羰基]-3-吡啶甲酸(例如如中间体71所制备)(1.81g，10mmol)的无水DMF(90ml)溶液加入羰基二咪唑(1.7g，10.5mmol)。50℃加热反应混合物90分钟，然后在盐/冰浴中冷却至-5℃。向其加入4-氯苯基乙酸1，1-二甲基乙基酯(例如如中间体70所制备)(2.38g，10.5mmol)，接着15分钟内分批加入氢化钠(1.4g，60％分散在矿物油中，35mmol)。-5℃搅拌反应混合物10分钟，然后升温至室温。2h后，将反应混合物倒入饱和氯化铵溶液(100ml)中。用EtOAc(3×100ml)萃取。用水(2×100ml)和盐水(2×100ml)洗涤合并的有机物。干燥(MgSO4)有机相，真空去除溶剂。将残留物溶解在DCM(5ml)中，上载至100g硅胶层析柱。利用60分钟内0-50％ EtOAc的环己烷溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分得标题化合物(2.94g，75％，酮和烯醇的混合物，99％纯度)浅褐色油状物。LCMS RT＝3.41和3.63(U-形峰)分钟ES+ve m/z 390/392(M+H)+。
中间体73 3-[(4-氯苯基)乙酰基]-4-吡啶甲酸甲酯 将3-{2-(4-氯苯基)-3-[(1，1-二甲基乙基)氧基]-3-氧代丙酰基}-4-吡啶甲酸甲酯(例如如中间体72所制备)(2.94g，7.5mmol)溶解在无水DCM(12ml)中，向其加入TFA(5ml)。在氮气中室温搅拌反应混合物20h。真空去除溶剂，将残留物溶解在DCM(5ml)中。将其上载至100g硅胶层析柱，用60分钟内0-100％ EtOAc的环己烷溶液梯度洗脱。合并所需流分，真空蒸发得标题化合物(1.59g，73％)浅橙色油状物。LCMS RT＝3.02分钟ES+ve m/z 290/292(M+H)+。
中间体74 4-[(4-氯苯基)甲基]吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮 将3-[(4-氯苯基)乙酰基]-4-吡啶甲酸甲酯(例如如中间体73所制备)(1.59g，5.5mmol)溶解在EtOH(60ml)中，向其加入水合肼(购自例如Aldrich)(0.3ml，6mmol)和几滴AcOH。回流加热反应混合物3h。冷却反应混合物，过滤收集固体，用EtOH(10ml)洗涤。真空干燥固体得标题化合物(1.17g，78％)白色固体。LCMS RT＝2.73分钟，ES+vem/z 272/274(M+H)+。
中间体75 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮 -10℃向三苯基膦(10.42g，40mmol)的无水THF(80ml)溶液加入偶氮二甲酸二叔丁酯(8.38g，36mmol)的无水THF(60ml)溶液。使溶液升温至15℃，然后冷却至0-5℃。向所述轻微悬浮液加入4-[(4-氯苯基)甲基]吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮(例如如中间体74所制备)和N-Boc-D-脯氨醇(购自例如Aldrich)(5.14g，25.6mmol)的无水THF(100ml)悬浮液。使悬浮液升温至环境温度，搅拌23h。真空去除溶剂得油状物(30g)。LCMS RT＝3.48分钟，ES+ve m/z 455/457。向粗产物(30g)的1，4-二氧六环(80ml)溶液加入4.0M HCl的1，4-二氧六环(80ml，320mmol)溶液。在环境温度搅拌溶液5h。真空去除溶剂，使残留物分配在1M盐酸溶液(400ml)和EtOAc(200ml)中。分层，用EtOAc(200ml)洗涤水相。用1M盐酸溶液(200ml)洗涤合并的有机萃取物。利用2M NaOH溶液(300-350ml)碱化合并的水相萃取物至pH10，用EtOAc(2×400ml，1×200ml)萃取所得悬浮液。真空浓缩合并的有机萃取物得标题化合物(8.0g)。LCMS RT＝2.15分钟，ES+vem/z 355/357(M+H)+。
实施例 实施例1 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(2-{[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]氨基}乙基)-1(2H)-酞嗪酮
搅拌、80℃下加热2-(2-氨基乙基)-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体2所制备)(190mg，0.606mmol)、甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)(115mg，0.300mmol)和碳酸氢钠(50mg，0.595mmol)的MeCN(10ml)混合物3天。使冷却后的反应混合物分配在水和EtOAc中。用EtOAc洗涤水层(×2)。干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，真空浓缩。通过硅胶层析(10g，用DCM-MeOH-氨水洗脱，200:8:1，然后100:8:1)纯化残留物。单独真空浓缩合适的流分得不纯产物。通过硅胶层析(1g，用DCM-MeOH-氨水洗脱，200:8:1)进一步纯化第一部分，接着浓缩合适的流分得标题化合物(5.7mg)。LCMS RT＝2.38分钟，ES+vem/z 601[M+H]+和301[M/2+H]+。通过硅胶层析(5g，用DCM-MeOH-氨水洗脱，200:8:1，然后150:8:1)进一步纯化得自第一次纯化的第二部分，接着浓缩合适的流分得其他大量标题化合物(32mg)。
实施例2 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(2-{[2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基]氨基}乙基)-1(2H)-酞嗪酮
搅拌、80℃下加热2-(2-氨基乙基)-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体2所制备)(190mg，0.606mmol)、甲磺酸2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基酯(例如如中间体27所制备)(112mg，0.315mmol)和碳酸氢钠(50mg，0.595mmol)的MeCN(10ml)混合物3天。使冷却后的反应混合物分配在水/盐水(1:1)和EtOAc中。用EtOAc洗涤水层(×2)。干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，真空浓缩。通过制备TLC(4块硅胶板)纯化残留物，用DCM-MeOH-氨水(200:8:1)洗脱，利用MeOH从硅胶萃取得标题化合物(5.1mg)。LCMSRT＝2.41分钟，ES+ve m/z 573/575[M+H]+和287[M/2+H]+。通过制备TLC得其他大量标题化合物(12mg)。
实施例3 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{2-[[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基](甲基)氨基]乙基}-1(2H)-酞嗪酮
用甲醛(37％重量的水溶液，2ml)和甲酸(0.20ml)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(2-{[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]氨基}乙基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如实施例1所制备)(16mg，0.027mmol)，搅拌下100℃加热所述混合物40分钟。冷却后，真空浓缩混合物。然后在蒸汽浴上高真空加热残留物2h得标题化合物(11mg)，不对其进行进一步纯化。LCMS RT＝2.47分钟，ES+ve m/z 615[M+H]+和308/309[M/2+H]+。
实施例4 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{2-[[2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基](甲基)氨基]乙基}-1(2H)-酞嗪酮
用甲醛(37％重量的水溶液，2ml)和甲酸(0.20ml)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(2-{[2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基]氨基}乙基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如实施例2所制备)(12.3mg，0.021mmol)，100℃搅拌下加热所述混合物1h。冷却后，真空浓缩混合物。然后在蒸汽浴上高真空加热残留物2h得标题化合物(8.5mg)，不对其进行进一步纯化。LCMS RT＝2.30分钟，ES+ve m/z 587/589[M+H]+和294/295[M/2+H]+。
实施例5 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2S)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮
在氮气中向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2S)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体69所制备)(0.149g，0.26mmol)的2-丁酮(5ml)溶液加入碘化钾(购自例如Aldrich)(0.086g，0.52mmol)、碳酸钾(0.072g，0.52mmol)和六亚甲基亚胺(0.059ml，0.52mmol)。回流加热反应混合物41h。过滤去除固体，用2-丁酮(20ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在MeOH-DMSO(2ml，1:1)中。将其上载至C18反相层析柱(20g)，利用40分钟内0-50％ MeCN(0.05％ TFA)的水(0.05％ TFA)溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分，将残留物溶解在MeOH中。将其上载至氨基丙基层析柱(10g)，用MeOH洗脱。真空蒸发所需流分得标题化合物(0.092g)。LCMS RT＝2.68分钟，ES+ve m/z 641/643[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δ 8.85(m，1H)，7.90(m，1H)，7.86-7.88(m，2H)，7.29-7.24(m，4H)，7.00(d，J＝8.5Hz，2H)，6.77(d，J＝8.5Hz，2H)，4.33(dd，J＝4.8，13Hz，1H)，4.30(s，2H)，4.11(dd，J＝8，13Hz，1H)，3.93(t，J＝6.3Hz，2H)，3.11(m，1H)，2.98(m，1H)，2.80(m，1H)，2.70-2.91(m，6H)，2.47(m，2H)，2.31(m，1H)，2.24(m，1H)，1.92(m，2H)，1.85-1.72(m，4H)，1.70-1.58(m，8H)，1.55-1.46(m，4H)。
实施例6 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮
在包含碳酸氢钠(60mg，0.72mmol)的MeCN(10ml)、80℃和氮气中搅拌甲磺酸5-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)戊基酯(例如如中间体43所制备)和4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体4所制备)(126mg，0.36mmol)六天，此时反应基本完成。蒸干混合物，将残留物在DCM中的溶液上载至已用DCM预处理过的20g硅胶层析柱。用DCM-EtOH-0.88氨水溶液(200:8:1)洗脱层析柱，然后(100:8:1)洗脱得不纯产物的三流分(52mg，74mg和25mg)。合并74mg和25mg部分，上载至2×20×20cm硅胶板(1mm层厚)，在DCM-EtOH-0.88氨水溶液(100:8:1)中展开两次。取下主带，洗脱得标题化合物(50mg)。LCMS RT＝2.58分钟，ES+ve m/z 655[M+H]+，ES+ve m/z 328[1/2M+H]+。
实施例7 2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮二甲酸盐
在氮气中用三乙酰氧基硼氢化钠(0.42g，2mmol)处理4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体10所制备)(409mg，1.1mmol)和4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁醛(例如如中间体40所制备)(305mg)的DCM(5ml)和乙酸(2ml)溶液。室温搅拌混合物，然后加入另一份4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁醛(211mg)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.42g，2mmol)。LCMS表明为原料和产物的混合物(1:1)。向反应混合物加入1-[3-({4-[4，4-二(乙氧基)丁基]苯基}氧基)丙基]六氢-1H-氮杂

(例如如中间体38所制备)(150mg)，继续搅拌3天。减压去除溶剂，使残留物分配在EtOAc和碳酸氢钠水溶液中。用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤有机溶液，干燥(MgSO4)，减压蒸发。将残留物(714mg)溶解在DCM中，通过层析(Flashmaster II，100g硅胶层析柱)纯化，用60分钟内包含1％ NEt3-DCM的0-15％ MeOH洗脱。合并合适的流分，减压蒸发得标题化合物游离碱(335mg)。将其溶解在MeOH-DMSO(2:1，2.4ml)中，通过MDAP HPLC纯化得标题化合物(193mg)LCMS RT＝2.37分钟，ES+ve m/z 637(M+H)+，319(M/2+H)+；ES-ve m/z 681(M+HCO2)-。
实施例8 2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-4-[(4-羟基苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮
在冰浴和氮气中冷却2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-4-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮二甲酸盐(例如如实施例7所制备)(100mg，0.13mmol)的DCM(10ml)溶液，然后用三溴化硼的已烷(1M，0.3ml)溶液处理，2h后用另一份(0.3ml)处理。室温静置混合物共2天4h，然后减压去除溶剂。将残留物溶解在MeOH-DMSO(1:1，2ml)中，通过MDAP HPLC纯化得18mg，通过MDAPHPLC再次纯化得标题化合物(13mg)LCMS RT＝2.37分钟，ES+ve m/z 623(M+H)+，312(M/2+H)+。
实施例9 4-[(4-氟苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮
在环境温度和氮气中向4-氯-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体13所制备)(0.055g，0.1mmol)的无水THF(4ml)溶液加入四(三苯基膦)合钯(0)(0.013g，0.01mmol)，然后加入4-氟-苄基氯化锌(购自例如Aldrich)(0.5M，0.6ml)的THF溶液。加热溶液至60℃ 1h。在环境温度向所述混合物加入四(三苯基膦)合钯(0)(0.014g，0.01mmol)，然后加入4-氟-苄基氯化锌的THF溶液(0.5M，0.6ml)。加热混合物至80℃ 4h。在环境温度继续向所述混合物加入四(三苯基膦)合钯(0)(0.014g，0.01mmol)，然后加入4-氟-苄基氯化锌的THF溶液(0.5M，2.5ml)。加热混合物至80℃ 2.5h。用MeOH(2ml)猝灭反应。将混合物上载至SCX层析柱(20g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱，真空浓缩碱性流分得胶状物(0.038g)。通过MDAP(MDAP前加入0.1ml TFA)纯化粗产物得胶状物(0.009g)，将其上载至SCX层析柱(5g)。用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱，真空浓缩碱性流分得标题化合物(0.005g)。LCMS RT＝2.42分钟，ES+ve m/z 625(M+H)+和313(M/2+H)+ 实施例10 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)甲基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮
用碘化钠(10mg)和六亚甲基亚胺(购自例如Aldrich)(0.1ml)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-({4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}甲基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体18所制备)(15mg，0.027mmol)的2-丁酮(1ml)溶液，在氮气中加热混合物至75℃ 2h。继续加入六亚甲基亚胺(0.1ml)，在相同温度加热混合物过夜。减压浓缩反应混合物，将残留物溶解在MeOH-DMSO(1:1；1ml)中，通过MDAP HPLC纯化。合并合适的流分得标题化合物(10.7mg)LCMS RT＝2.54分钟ES+ve m/z 613(M+H)+，307(M/2+H)+。
实施例11 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮
以类似于4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-(2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮(实施例21)的方法，利用甲磺酸2-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)乙基酯(例如如中间体27所制备)(0.101g，0.284mmol)制备得标题化合物(0.0044g)。LCMS RT＝2.54分钟，ES+ve m/z 314和315(M+H)+。
实施例12 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮
在包含碘化钠(18mg，0.12mmol)和碳酸钾(70mg)的丙酮(4ml)中回流搅拌4-甲基苯磺酸3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙基酯和1-(3-{[4-(3-氯丙基)苯基]氧基}丙基)六氢-1H-氮杂

的混合物(3:2)(例如如中间体30所制备)(42mg，约0.12mmol烷基化剂)和4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(33mg，0.09mmol)三天。反应不完全，因此继续加入碘化钠(18mg，0.12mmol)和碳酸钾(70mg)。继续回流1天后，判断反应完全以分离产物。通过过滤去除固体，浓缩滤液，上载至2×20×20cm硅胶板(1mm层厚)，在DCM-EtOH-0.880氨水溶液(50:8:1)中展开。利用MeOH-DCM(1:1)从硅胶洗脱主带，蒸发洗脱物得标题化合物(28mg)。LCMS RT＝2.52分钟，ES+ve m/z 321[1/2M+H]+ 实施例13 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[3-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丙基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮
依次向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体所制备16)(0.072g，1.96mmol)的无水DCM(2ml)溶液加入DIPEA(0.041ml，2.3mmol)和甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)(0.090g，0.23mmol)。20℃搅拌溶液26h，然后加热至74℃ 20h。将混合物上载至SCX层析柱(20g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88的氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分，通过MDAP纯化残留物。合并合适的流分，真空去除溶剂。将残留物溶解在DCM(5ml)中。依次向所述溶液加入DIPEA(0.034ml，0.19mmol)和乙酰氯(0.1ml，1.4mmol)。20℃搅拌溶液15-20分钟，然后用MeOH(1ml)猝灭。将溶液上载至SCX层析柱(10g，用MeOH预洗)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分得标题化合物(0.0323g)。LCMS RT＝2.58分钟，ES+ve m/z328和329(M/2+H)+。
实施例14 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2S)-1-{3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基}-2-吡咯烷基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮二甲酸盐
在DMF(1.5ml)中混合4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2S)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体6所制备)(30mg，0.08mmol)、甲磺酸3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基酯(例如如中间体45所制备)(50mg，0.14mmol)、DIPEA(0.02ml，0.13mmol)和碘化钠(20mg，0.13mmol)，在150℃微波炉中加热20分钟，然后继续加热20分钟。将混合物上载至SCX层析柱(20g)，依次用MeOH和10％氨水的MeOH溶液洗脱。真空浓缩合适的流分。通过制备TLC(2块硅胶板)纯化粗产物，用DCM-MeOH-氨水(100:8:1)洗脱，利用DCM-EtOH-氨水(100:8:1)从硅胶中萃取。用甲酸处理由此所得产物，然后在氮气气流中干燥得标题化合物(2.4mg)的二甲酸盐。LCMSRT＝2.45分钟，ES+ve m/z 611[M+H]+和306[M/2+H]+。
实施例15 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2R)-1-{3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基}-2-吡咯烷基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮
在微波炉中加热4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体4所制备)(32mg，0.09mmol)、7-[(3-氯丙基)氧基]-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂环庚烯(例如如中间体46所制备)(32mg，0.108mmol)、碘化钠(16mg，0.108mmol)和DIPEA(0.019ml，0.108mmol)的无水DMF(1.5ml)悬浮液至150℃ 15分钟，继续加热20分钟。然后将粗产物混合物倒入SCX-2层析柱(20g)中，用MeOH(×2)洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分，通过MDAP HPLC纯化所得油状物。浓缩所需流分，然后将所得残留物溶解在DCM(约3ml)中，用DIPEA(0.007ml)和乙酰氯(0.003ml，0.04mmol)处理。20℃搅拌溶液20分钟，然后用MeOH(1ml)猝灭。将混合物倒入SCX-2层析柱(10g)中，用10％氨水的MeOH溶液洗脱。真空去除溶剂，通过MDAP HPLC纯化所得油状物。然后将所得浓缩残留物上载至制备TLC板上，用DCM-EtOH-氨水(100:8:1)洗脱。收集合适的带，用相同的洗脱液洗涤，真空浓缩合并的滤液得标题化合物(4.5mg)。LCMS RT＝2.40分钟。ES+ve m/z611[M+H]+，306[M/2+H]+。
实施例16 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(1-{3-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)氧基]丙基}六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮甲酸盐
依次向7-[(3-氯丙基)氧基]-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

(例如如中间体46所制备)(0.095g，0.32mmol)的DMF(3ml)溶液加入4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(0.097g，0.26mmol)和DIPEA(0.056ml，0.32mmol)。20℃搅拌溶液20h。加热溶液70℃2h。在微波炉中加热溶液至150℃30分钟。将粗产物混合物上载至SCX层析柱(20g，用MeOH预洗)。用MeOH(2CV)洗涤层析柱，然后用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱。真空浓缩碱性流分，通过MDAP HPLC进一步纯化残留物(0.137g)得标题化合物(0.068g，40％)。LCMS RT＝2.48分钟ES+ve m/z 625(M+H)+，313/314(M/2+H)+。
实施例17 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{1-[(3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-基)甲基]六氢-1H-氮杂

-4-基}-1(2H)-酞嗪酮二甲酸盐
用乙酸(1滴)和三乙酰氧基硼氢化钠(43mg，0.2mmol)处理4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(36.7mg，0.1mmol)和3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲醛(例如如中间体48所制备)(22.9mg，0.1mmol)的DCM(1ml)混合物，在氮气中搅拌混合物过夜。继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(42.4mg，0.2mmol)和DCM(1ml)，2h后，继续加入醛(6mg)。2h后，使反应混合物分配在EtOAc(10ml)和碳酸氢钠溶液(10ml)中。用10ml碳酸氢钠溶液洗涤有机相，MgSO4干燥，减压蒸发。将残留物(46.5mg)溶解在DCM(1.5ml)中，用甲苯磺酰氯(5mg)处理，搅拌过周末。减压蒸发反应混合物，将残留物(50.6mg)溶解在MeOH-DMSO(1:1；1ml)中，通过MDAP HPLC纯化。蒸发合适的流分得标题化合物(12.6mg)LCMS RT＝2.40分钟，ES+ve m/z 581(M+H)+，291(M/2+H)+。
实施例18 N-(2-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}乙基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酰胺二甲酸盐
用NEt3(0.24ml)和TBTU(80.3mg)处理2-[1-(2-氨基乙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐(例如如中间体20所制备)(69.6mg)，3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸(例如如中间体51所制备)(39.5mg，0.17mmol)的DMF(1.02ml)混合物，室温搅拌混合物过夜。将反应混合物上载至SCX-2层析柱(20g)，用MeOH洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分得残留物(243mg)，将其溶解在MeOH-DMSO(1:1；2.4ml)中，然后通过MDAP HPLC纯化，蒸发合适的流分后得87.5mg。将该残留物溶解在MeOH中，上载至SCX-2层析柱(10g)，用MeOH洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压蒸发含氨流分得标题化合物游离碱(33mg)。将其溶解在MeOH中，用甲酸(0.3ml)处理，减压蒸发得标题化合物(40.4mg)LCMS RT＝2.38分钟ES+ve m/z638(M+H)+，320(M/2+H)+。
实施例19 N-(3-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丙基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酰胺二甲酸盐
用NEt3(0.35ml)和TBTU(128mg)处理2-[1-(3-氨基丙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐(例如如中间体22所制备)(114mg)和3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸(例如如中间体51所制备)(72.6mg，0.27mmol)的DMF(1.62ml)混合物，室温搅拌混合物过夜。将反应混合物上载至SCX-2层析柱(20g)，用MeOH洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分得残留物(253mg)，将其溶解在MeOH-DMSO(1:1；2.5ml)中，然后通过MDAP HPLC纯化，蒸发合适的流分后得99mg。将该残留物溶解在MeOH中，上载至SCX-2层析柱(10g)，用MeOH洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压蒸发含氨流分得标题化合物游离碱(55.7mg)。将其溶解在MeOH中，用甲酸(0.3ml)处理，减压蒸发得标题化合物(72.6mg)LCMS RT＝2.37分钟ES+ve m/z652(M+H)+，327(M/2+H)+。
实施例20 N-(4-{4-[4-[(4-氯苯基)甲基]-1-氧代-2(1H)-酞嗪基]六氢-1H-氮杂

-1-基}丁基)-3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酰胺二甲酸盐
用NEt3(0.5ml)和TBTU(120.4mg)处理2-[1-(4-氨基丁基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-4-[(4-氯苯基)甲基]-1(2H)-酞嗪酮盐酸盐(例如如中间体24所制备)(108.8mg)和3-环丁基-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

-7-甲酸(例如如中间体51所制备)(58mg，0.25mmol)的DMF(1.5ml)混合物，室温搅拌混合物过夜。将反应混合物上载至SCX-2层析柱(20g)，用MeOH洗涤，然后用10％氨水的MeOH溶液洗脱。减压浓缩含氨流分得残留物(217.9mg)，将其溶解在MeOH-DMSO(1:1；2.2ml)中，然后通过MDAP HPLC纯化，蒸发合适的流分后得标题化合物(81.9mg)LCMS RT＝2.40分钟ES+ve m/z 666(M+H)+，334(M/2+H)+。
实施例21 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-(2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮
依次向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-(六氢-1H-氮杂

-4-基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体16所制备)(0.072g，0.196mmol)的无水DCM(2ml)溶液加入DIPEA(0.0434ml，0.244mmol)和甲磺酸2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基酯(例如如中间体56所制备)(0.089g，0.25mmol)。20℃搅拌溶液26h，然后加热至74℃20h。将混合物上载至SCX层析柱(20g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。真空浓缩合并的碱性流分，通过MDAP纯化残留物。合并合适的流分，真空去除溶剂。将残留物溶解在DCM(5ml)中。依次向所述溶液加入DIPEA(0.020ml，0.11mmol)和乙酰氯(0.1ml，1.4mmol)。20℃搅拌溶液15-20分钟，然后用MeOH(1ml)猝灭。将溶液上载至SCX层析柱(10g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。真空浓缩碱性流分。将残留物上载至制备板(20×20cm，1mm厚度)，用15:100:1 MeOH-DCM-NEt3洗脱。将从制备板所得产物上载至SCX层析柱(1g)，用MeOH(2CV)洗涤层析柱。用10％ 0.88氨的MeOH溶液(2CV)洗脱层析柱。利用氮气气流浓缩碱性流分得标题化合物(0.0048g)。LCMS RT＝2.51分钟，ES+ve m/z 313和314(M/2+H)+。
实施例22 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-(4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}丁基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮
以类似于4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[1-(2-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}乙基)六氢-1H-氮杂

-4-基]-1(2H)-酞嗪酮(实施例21)的方法，利用甲磺酸4-{4-[(1-环丁基-4-哌啶基)氧基]苯基}丁基酯(例如如中间体62所制备)(0.0849g，0.22mmol)制备得标题化合物(0.004g)。LCMS RT＝2.62分钟，ES+ve m/z 327和328(M/2+H)+。
实施例23 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮
在氮气气氛、搅拌、80℃下加热4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮(例如如中间体75所制备)(54mg，0.15mmol)、甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)(78mg，0.20mmol)和碳酸氢钠(28mg，0.33mmol)的MeCN(3ml)混合物6天。过滤冷却后的反应混合物，真空浓缩滤液。利用憎水玻璃料使残留物分配在水和DCM中。利用憎水玻璃料，用盐水稀释水层，继续用DCM(×6)洗涤。真空浓缩合并的有机萃取物，通过质量引导的自制备HPLC纯化残留物。浓缩相关流分得两批产物，各批产物包含不同的杂质。各批通过硅胶层析[2g，用2％-4％(10％氨水的MeOH溶液)-DCM洗脱]进一步单独纯化。浓缩来自这两种纯化操作的合适流分，从其中一种得纯产物(16mg)，从另一种得不纯产物。后一种产物通过质量引导的自制备HPLC进一步纯化得另一部分纯产物(3mg，甲酸盐)。合并两部分纯产物，干燥真空以去除甲酸，由此得标题化合物游离碱(18mg，19％)。LCMS RT＝2.42分钟，ES+ve m/z 642[M+H]+和322[M/2+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 9.23(s，1H)，8.89(d，J＝5.5Hz，1H)，8.17(d，J＝5Hz，1H)，7.27-7.33(m，4H)，7.00(d，J＝8Hz，2H)，6.76(d，J＝8Hz，2H)，4.37(s，2H)，4.30(dd，J＝13，4.5Hz，1H)，4.11(dd，J＝13，8Hz，1H)，3.94(t，J＝6Hz，2H)，3.07-3.14(m，1H)，2.94-3.01(m，1H)，2.75-2.85(m，1H)，2.65-2.73(m，6H)，2.48(t，J＝6.5Hz，2H)，2.20-2.35(m，4H)，1.89-1.97(m，2H)，1.58-1.88(m，12h)，1.45-1.57(m，4H)。
实施例24A 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮游离碱
方法1 在氮气中向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2R)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体66所制备)(20g，34.6mmol)的2-丁酮(200ml)溶液加入碘化钾(11.5g，69.2mmol)、碳酸钾(9.6g，69.2mmol)和六亚甲基亚胺(购自例如Aldrich)(7.8ml，69.2mmol)。回流加热反应混合物41h。通过过滤去除固体，用2-丁酮(2×100ml)洗涤。真空蒸发合并的滤液和洗涤物，将残留物溶解在MeOH-DMSO(30ml，1:1)中。将其上载至C18反相层析柱(2×330g)。利用12 CV内0-50％ MeCN(0.05％ TFA)的水(0.05％ TFA)溶液梯度洗脱。真空蒸发所需流分，将残留物溶解在MeOH中。将其上载至氨基丙基层析柱(4×70g)，用MeOH洗脱。真空蒸发所需流分得标题化合物橙色胶状物(10.74g)。LCMS RT＝2.67分钟，ES+ve m/z 641/643[M+H]+。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.46(m，1H)，7.74-7.62(m，3H)，7.26(d，J＝8.5Hz，2H)，7.20(d，J＝8.5Hz，2H)，7.06(d，J＝8.5Hz，2H)，6.81(d，J＝8.5Hz，2H)，4.42(dd，J＝4，13Hz，1H)，4.24(s，2H)，4.07(dd，J＝8，13Hz，1H)，3.98(t，J＝6.3Hz，2H)，3.16(m，1H)，2.97(m，1H)，2.90(m，1H)，2.65(m，6H)，2.55(m，2H)，2.37(m，1H)，2.21(m，1H)，1.93(m，2H)，1.89-1.52(m，16H)。
方法2 在氮气气氛中、搅拌、80℃下加热4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体4所制备)(1.017g，2.87mmol)、甲磺酸4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基酯(例如如中间体35所制备)(1.115g，2.91mmol)和碳酸氢钠(474mg，5.64mmol)的无水MeCN(50ml)混合物5天。使冷却后的反应混合物分配在水(70ml)和EtOAc(70ml)中。用EtOAc洗涤水层(2×50ml)。干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，真空浓缩。将残留物(1.35g)溶解在DMF(10ml)中，并分成10份。用TFA(0.5ml)稀释各份。各份通过利用Kromasil C8柱(25cm×5cm)的制备HPLC纯化，用40分钟内5％-45％(0.25％ TFA的MeCN溶液)的(0.25％ TFA的水溶液)溶液梯度洗脱，接着继续保持最终浓度15分钟。合并各次运行的相关流分，真空浓缩得水溶液。将其上载至Amberchrom CG-161M柱(25cm×2.5cm)以吸附所述化合物。用水洗涤柱子以去除过量TFA，用MeCN洗脱，得产物三氟乙酸盐。依次用MeOH和MeCN洗涤SCX层析柱(20g)。将部分上述产物(0.98g)溶解在MeCN中，并上载至SCX层析柱，依次用MeCN和10％氨水的MeCN溶液(200ml)洗脱。真空浓缩合适的流分得标题化合物橙色胶状物(651mg)。LCMS RT＝2.52分钟，ES+ve m/z 641[M+H]+和321/322[M/2+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 8.38(dd，J＝7.7，1.6Hz，1H)，7.93(m，1H)，7.86(m，1H)，7.82(m，1H)，7.30(m，4H)，7.03(d，J＝8.5Hz，2H)，6.80(d，J＝8.5Hz，2H)，4.36(m，1H)，4.33(s，2H)，4.14(dd，J＝13.1，8.0Hz，1H)，3.98(t，J＝6.1Hz，2H)，3.14(m，1H)，3.03(dd，J＝7.8，4.5Hz，1H)，2.84(m，1H)，2.75(m，6H)，2.50(t，J＝6.9Hz，2H)，2.31(m，2H)，1.97(m，2H)，1.82(m，4H)，1.68(m，8H)，1.55(m，4H)。
实施例24B 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮二甲酸盐 从2.25mmol 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮(例如如中间体4所制备)开始并依据例如实施例24A，方法2的制备方法，如下处理最初水相处理后的残留物 将粗产物(1.20g)溶解在DCM(5ml)中，用DIPEA(0.087ml，0.499mmol)和乙酰氯(0.036ml，0.506mmol)处理，室温搅拌混合物45分钟。将反应混合物上载至SCX层析柱(50g)，依次用MeOH(×2)和10％氨水的MeOH溶液洗脱。真空浓缩合适的流分得橙色油状物(853mg)。将部分油状物(548mg)溶解在MeOH(6ml)和DMSO(1ml)的混合物中，通过MDAP HPLC纯化该溶液。合并相关流分，真空浓缩得标题化合物橙色胶状物(384mg)。LCMS RT＝2.42分钟，ES+ve m/z641/643[M+H]+和321/322[M/2+H]+。
实施例24C 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮1，5-萘二磺酸盐一水合物 方法1 将4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如实施例24A所制备)(400mg)溶解在MeOH(4.44ml)中。加入1，5-萘二磺酸(232mg)的MeOH(1ml)溶液，利用气枪加热所得胶状溶液。开始形成少量固体，冷却使固体沉淀。室温搅拌所述浆料约1h。加入MeOH(2ml)以增加所述浆料的流动性，再次加热和冷却，继续搅拌1小时。通过过滤分离固体，40℃真空干燥得标题化合物(464.5mg，73％)。
方法2 向4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如实施例24A所制备)(3.82g，5.96mmol)加入水(200ml)和盐酸(2N12ml)。加热反应混合物90℃以获得透明溶液。20分钟内向其加入1，5-萘二磺酸一水合物(2.2g，6mmol)的水(100ml)溶液。90℃搅拌悬浮液20分钟，然后冷却至室温。过滤收集固体，用水洗涤(100ml)。空气干燥固体3天，然后真空干燥20h得标题化合物(5.1g，92％)白色固体。LCMS RT＝2.58分钟，ES+ve m/z 641[M+H]+。
方法34-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮1，5-萘二磺酸盐一水合物也可依据以下方法制备。
针对该方法使用以下缩写 eq当量(1eq＝1摩尔试剂/1摩尔原料) vol体积(1vol＝1ml/克原料) vol/vol体积/体积 wt重量(1wt＝1g试剂/1g原料) wt/vol重量/体积 中间体76(步骤1) (3E)-3-[(4-氯苯基)亚甲基]-2-苯并呋喃-1(3H)-酮
在NMP(3vol)中混合4-氯苯乙酸(购自例如Aldrich)(1.00eq)、邻苯二甲酸酐(购自例如Aldrich)(1.10eq)和乙酸钠(0.04eq)。加热所得悬浮液至约200℃，搅拌所得褐色溶液2天。在反应过程中，在环境压力蒸掉NMP/水(0.45vol)。确认转化完全后(99％，HPLC)，1h内冷却反应混合物至约70℃，在约70℃和1h内加入EtOH(4.5vol)。1.5h内冷却所得褐色溶液至约50℃，在此过程中所述溶液变为褐色悬浮液。在约50℃和1h内加入EtOH(3.8vol)，1h内冷却所得褐悬浮液至约2℃，在约0-5℃搅拌1h。通过滤过吸滤器分离褐色固体，用冷EtOH溶液(EtOH/水＝l/1，vol/vol，约2℃，3×1vol)洗涤，在氮气中和吸滤器上干燥。得产物浅褐色和湿润固体。确定干燥失重，将产物用于下步反应。产率(针对干燥失重和1H NMR测试进行了校正)80％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ 6.37.(s，1H)，7.38(d，2H)，7.58(t，1H)，7.77(m，4H)，7.95(d，1H) 中间体77(步骤2) 4-{[4-氯苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮
将(3E)-3-[(4-氯苯基)亚甲基]-2-苯并呋喃-1(3H)-酮(如例如步骤1所制备)(1.0eq，针对干燥失重进行了校正)悬浮在EtOH(3.7vol)中，约85℃轻微回流加热。通过滴液漏斗1h内加入水合肼(购自例如Aldrich)(1.2eq)的EtOH(0.63vol)溶液。加入后，通过滴液漏斗将EtOH(0.63vol)加入反应悬浮液以去除痕量水合肼。约85℃轻微回流加热反应悬浮液14h。冷却至约20℃，取样测转化率(99％转化，HPLC)。30分钟内向反应混合物加入丙酮(0.35vol)(放热反应)。搅拌猝灭的悬浮液至少1h，然后30分钟内冷却至约2℃，约2℃搅拌1h。通过滤过吸滤器分离产物，用冷EtOH(约0-5℃，3×1.9vol)洗涤。在真空、氮气中和吸滤器上完全干燥浅褐色固体。得标题化合物浅褐色固体。产率(针对1HNMR测试进行了校正)90-95％。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)，

4.30(s，2H)，7.35(m，4H)，7.88(m，3H)，8.26(d，1H)，12.62(s，1H) 中间体78(步骤3a) 2-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯
冷却N-Boc-D-脯氨醇(购自例如Aldrich)(1.0eq)的MIBK(9.5vol)溶液至约2℃，加入NEt3(1.03vol)。通过滴液漏斗1h内加入MsCl(1.2eq)，形成白色悬浮液。用MIBK(0.5vol)洗涤滴液漏斗。使反应混合物升温至约22℃，搅拌2h。取样测转化率(TLC表明完全转化)。加入水(5.0vol)。分层(良好和迅速分层)。用饱和NaHCO3溶液(5.0vol)洗涤有机相，最后用水(5.0vol)洗涤(良好和迅速分层)。通过在装有MgSO4(0.46wt)的吸滤器上过滤干燥有机相。测定干燥有机相的体积(12.40vol)。浓缩有机相至43％wt/vol(基于N-Boc-D-脯氨醇/溶液)，通过在约40℃真空蒸馏至最终体积(2.20vol)。确定干燥样品失重，蒸干(约40℃，<100毫巴)；形成黄色油状物，取样分析。将浓缩的黄色有机相(2.0vol)直接用于烷基化反应。产率(针对干燥失重和1H NMR测试进行了校正)100％。
中间体4(步骤3b) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮，HCl盐
加热4-{[4-氯苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤2所制备)(1.0eq)和Cs2CO3(2.5eq)的MIBK(9.7vol)的悬浮液至约100℃。在2h内和约100℃滴加新制备的2-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}-1-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(如例如步骤3a所制备)的MIBK(1.2eq，以N-Boc-D-脯氨醇计)的溶液。用MIBK(0.2vol)洗涤滴液漏斗，并将其加入反应混合物中。在约100℃搅拌反应混合物17h。形成褐色悬浮液。冷却至约50℃后，取样测转化率(99％转化率，HPLC)。冷却反应混合物至约22℃，向反应混合物加入水(16.7vol)，接着加入MIBK(16.7vol)。分层。确定有机相的体积(18.8vol)，通过蒸馏真空(约45℃，<100毫巴)浓缩至50％w/vol(4-{[4-氯苯基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮/溶液)。在约22℃向浓缩的有机相加入HCl的异丙醇溶液(5-6M，3eq，2.0vol)。观察到产生气体，约1h内形成浅褐色悬浮液。在约22℃搅拌反应混合物14h。取样测转化率(完全转化，HPLC)。2h内冷却浅褐色悬浮液至约1℃，通过滤过烧结漏斗分离产物，用冷MIBK(3×1vol)洗涤。得白色固体，依次在吸滤器上和真空(45℃，<20毫巴)干燥。得标题化合物(HCl盐)白色固体。产率(针对1H NMR测试进行了校正)86％。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)，δ 1.76(m，1H)，1.95(m，2H)，2.14(m，1H)，3.15(m，1H)，3.27(m，1H)，3.91(m，1H)，4.36(d，2H)，4.47(m，2H)，7.35(d，2H)，7.41(d，2H)，7.80-8.00(m，3H)，8.31(d，1H)，8.92(bs，1H)，9.48(bs，1H) 中间体63(步骤4a) 甲磺酸4-[4-(甲氧基)苯基]丁基酯
在约21℃向4-(4-甲氧基苯基)-1-丁醇(购自例如Aldrich)(1.0eq)的MIBK(9.5vol)溶液加入NEt3(1.5eq，1.16vol)。冷却所得溶液至约10-15℃，1h内加入MsCl(1.2eq，0.52vol)，保持约16℃温度。立即形成白色悬浮液。加入后，用MIBK(0.5vol)洗涤滴液漏斗，并将其转移到反应烧瓶中。3h内使反应混合物升温至约22℃，在约22℃搅拌15h。产生浅黄色悬浮液。取样测转化率(完全转化，HPLC)。冷却反应混合物至约10-15℃，加入水(5.6vol)，保持温度低于约18℃。在约22℃搅拌乳状液10分钟。分层。用饱和NaHCO3水溶液(5.6vol)洗涤有机相，最后用水(5.6vol)洗涤。通过在装有MgSO4(0.5wt)的吸滤器上过滤干燥有机相，用MIBK(2×0.2vol)洗涤MgSO4。测定干燥有机相的体积(12.40vol)。浓缩有机相至40％w/vol(4-(4-甲氧基苯基)-1-丁醇/溶液)，通过在约45℃真空蒸馏至2.20vol。取样测干燥失重，蒸干(约40℃，<100毫巴)；剩下黄色油状物，取样分析。将包含黄色有机相(2.5vol)的产物用于随后的烷基化反应(步骤4b)。产率(针对干燥失重和1H NMR测试进行了校正)101％。
1H NMR(DMSO-d6)δ 1.53-1.71(m，4H)，2.52-2.57(m，2H)，3.11-3.20(s，3H)，3.68-3-76(s，3H)，4.15-4.26(m，2H)，6.81-6.87(m，2H)，7.08-7.15(m，2H) 中间体64(步骤4b) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2R)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷)甲基]-1(2H)-酞嗪酮
在MIBK(16.5vol)中混合4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[(2R)-2-吡咯烷基甲基]-1(2H)-酞嗪酮HCl盐(如例如步骤3b所制备)(1.0eq)和K2CO3(5.0eq，1.77wt)，约135℃回流加热所得浅褐色悬浮液。1h内回流加入甲磺酸4-[4-(甲氧基)苯基]丁基酯(如例如步骤4a所制备)(2.4eq，1.59wt)的MIBK(4.9vol)透明橙色溶液。回流搅拌所得黄褐色悬浮液20h。取样测转化率(88.5％转化，HPLC)。在约19℃和5分钟内加入水(24.7vol)(轻微放热)。在约20℃搅拌由此形成的浑浊橙褐色混合物15分钟。分层。通过滤过装有MgSO4(0.92wt)的吸滤器干燥有机相；用MIBK(2×4.1vol)洗涤MgSO4。真空(约40-45℃，600毫巴以完全吸住)彻底去除所得有机相的溶剂。合并所得粗产物(2.45wt，暗褐色油状物，HPLC纯度73.50％面积/面积)和以相同方法所得粗产物(2.41wt)，通过填塞过滤(SiO2)纯化。然后，将合并的粗产物(4.86wt)溶解在DCM中，将其置于装有SiO2的吸滤器上(45.7wt，高度24.5cm，直径30cm)以用DCM(823vol)洗去杂质。洗脱液逐渐由纯DCM变为DCM:MeOH＝10:1以洗脱标题化合物。得产物溶液(494vol)。通过真空蒸馏(45℃，600毫巴以完全吸住)去除溶剂得标题化合物(2.46wt)浅褐色油状物。产率(针对1H NMR测试进行了校正)86％ 1H NMR(DMSO-d6)δ 1.32-1.53(m，4H)，1.61-1.79(m，4H)，2.08-2.18(m，1H)，2.20-2.27(m，1H)，2.37-2.45(m，2H)，2.66-2.76(m，1H)，2.84-2.93(m，1H)，2.96-3.04(m，1H)，3.69-3.71(m，3H)，3.89-3.98(m，1H)，4.18-4.26(m，1H)，4.28-4.36(m，2H)，6.77-6.83(m，2H)，6.98-7.04(m，2H)，7.33-7.39(m，4H)，7.79-7.90(m，2H)，7.91-7.97(m，1H)，8.26-8.31(m，1H)。
中间体65(步骤5) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮
冷却4-[(4-氯苯基)甲基]-2-[((2R)-1-{4-[4-(甲氧基)苯基]丁基}-2-吡咯烷)甲基]-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤4b所制备)(1.0eq)的DCM(4.2vol)溶液至约0℃。20分钟内加入BBr3(1.8eq，0.33vol)的DCM(3.4vol)溶液，保持温度低于约2℃。约20℃搅拌反应混合物过夜。取样测转化率(90％转化，HPLC)。在约-1℃和10分钟内继续加入BBr3(0.2eq，0.05vol)。使反应混合物升温至约20℃。约5h后，再次取样测转化率(96％转化，HPLC)。继续加入BBr3(0.2eq，0.05vol)，在约25℃搅拌反应过夜，再次取样测转化率(>99％转化，HPLC)。冷却反应混合物至约15℃，15分钟内滴加HCl溶液(2N，2.4vol)，保持温度低于约19℃。加入约2/3HCl后，观察到发生放热反应。加完后，形成包含一些褐色油状产物的褐色悬浮液。在约11℃和20分钟内缓慢加入饱和NaHCO3水溶液(5.1vol)，保持温度低于约13℃。形成深色和稍浑浊的乳状液。15分钟内使反应混合物升温至约20℃，分层。用DCM(4.28vol)反萃取水相。通过在装有MgSO4(0.69wt)的吸滤器上过滤干燥合并的有机相，然后用DCM(3×1.7vol)洗涤MgSO4。干燥的有机相为深色和透明的。在真空(600毫巴-完全吸住，35-40℃)去除溶剂的过程中，形成褐色泡沫。所得褐色固体(HPLC纯度73.22％面积/面积)包含残留的DCM，再次干燥过周末(35℃，<20毫巴)。干燥产物的HPLC纯度降低(63.98％面积/面积)。将粗产物分成2等份(2×0.50wt)，通过柱层析(2根柱子；SiO2(2×2.74wt)；高度＝20.5cm，直径＝14cm；DCM:MeOH＝20:1)纯化。合并包含产物的流分，真空浓缩(约35℃，600毫巴以完全吸住)。得标题化合物浅褐色泡沫状固体。产率(针对1H NMR测试进行了校正)65％。
1H NMR(DMSO-d6)δ 1.39-1.72(m，4H)，1.82-2.05(m，3H)，2.12-2.24(m，1H)，2.35-2.48(m，2H)，3.00-3.25(m，2h，)，3.26-3.54(m，1H)，3.56-3.71(m，1H)，3.80-3.97(m，1H)，4.25-4.43(m，2H)，4.49-4.62(m，2H)，6.58-6.74(m，2H)，6.91-7.03(m，2H)，7.27-7.48(m，4H)，7.79-8.04(m，3H)，8.23-8.39(m，1H)，9.06-9.37b，2H) 中间体66(步骤6) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2R)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮
在2-丁酮(7.1vol)中和约20℃混合4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-羟基苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤5所制备)(1.0eq)和K2CO3(4.0eq，1.1wt)。向所得褐色悬浮液加入1-溴-3-氯丙烷(2.0eq，0.40vol)的2-丁酮(2.9vol)溶液。回流加热褐色混合物25h。取样测转化率(98％转化，HPLC)。在约20℃和5分钟内加入水(14.8vol)(轻微放热)。加入MIBK(14.8vol)，搅拌橙色混合物25分钟；分层。通过在装有Na2SO4(1.90wt)的吸滤器上过滤干燥有机相，用MIBK(2×2.4vol)洗涤Na2SO4。真空(40℃，600毫巴-完全吸住)蒸发溶剂得标题化合物(氯衍生物和溴衍生物的混合物)褐色油状物。产率(针对HPLC纯度进行了校正)91％。
1H NMR(CDCl3)δ 1.47-1.91(m，6H)，2.16-2.27(m，3H)，2.33-2.43(m，1H)，2.51-2.60(m，2H)，2.80-3.04(m，2H)，3.08-3.23(m，1H)，3.47-3.86(m，3H)，4.01-4.14(m，3H)，4.18-4.30(m，2H)，4.36-4.50(m，1H)，6.74-6.88(m，2H)，7.01-7.14(m，2H)，7.15-7.34(m，4H)，7.57-7.77(m，3H)，8.37-8.52(m，1H)。
实施例24A(步骤7) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮游离碱
在MIBK(10.9vol)中混合4-[(4-氯苯基)甲基]-2-{[(2R)-1-(4-{4-[(3-氯丙基)氧基]苯基}丁基)-2-吡咯烷基]甲基}-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤6所制备)(1.0eq)、KI(3.0eq，0.86wt)、K2CO3(3.0eq，0.72wt)和六亚甲基亚胺(购自例如Aldrich)(3.0eq，0.59vol)，回流加热所得褐色悬浮液18h。取样测转化率(完全转化，HPLC)。冷却浅褐色悬浮液至约30℃，5分钟内加入水(6.9vol)。搅拌20分钟后分层。用MIBK(3.96vol)反萃取水相。真空(40-50℃，600毫巴-完全吸住)去除溶剂得标题化合物褐色油状物。产率(针对1HNMR测试进行了校正)83％。
1H NMR(CDCl3)δ 1.41-2.05(m，14H)，2.13-2.27(m，1H)，2.29-2.44(m，1H)，2.47-2.72(m，6H)，2.81-3.02(m，2H)，3.08-3.22(m，1H)，3.92-4.11(m，3H)，4.20-4.28(m，2H)，4.34-4-49(m，1H)，6.72-6.87(m，2H)，6.96-7.12(m，2H)，7.14-7.31(m，4H)，7.59-7.77(m，3H)，8.38-8.52(m，1H)。
实施例24C(步骤8) 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮1，5-萘二磺酸盐一水合物
制备1 冷却4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤7所制备)(1.0eq)的MeOH(41.41vol)的橙色溶液至约15℃。20分钟内加入HCl溶液(2N，41.4vol)，同时保持温度低于约18℃。蒸掉溶剂(约80℃，600毫巴以完全吸住)，剩下橙褐色油状物，将其溶解在水(32.1vol)中。加热所得橙褐色稍浑浊的溶液至约100℃(回流)，加入MeOH(61.1vol)。2分钟内向所得黄色溶液加入1，5-萘二磺酸四水合物(1.0eq，0.57wt)的水(6.0vol)溶液。溶液仍为黄色，90分钟内从约58℃冷却至约20℃。形成白色悬浮液，在约20℃使其滤过吸滤器。用MeOH水溶液(MeOH:水＝1:1，2×10.4vol)洗涤固体，真空(约50℃，完全吸住)干燥回收的浅褐色产物。得标题化合物浅褐色固体。产率(针对HPLC纯度进行了校正)69％。
制备2 冷却4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(如例如步骤7所制备)(1.0eq)的MeOH(39.9vol)褐色溶液至约15℃。20分钟内加入HCl溶液(2N，42.6vol)，保持温度低于约18℃。蒸掉溶剂(约80℃，600毫巴以完全吸住)，剩下橙褐色油状物，将其溶解在水(32.9vol)中。用EtOAc(1×41.2vol，1×39.5vol)洗涤所得橙褐色稍浑浊的溶液，形成分为两相的白色乳状液。蒸干无机相，剩下橙褐色油状物。将所述状油物溶解在MeOH(79.9vol)中，约90℃回流加热所得橙褐色溶液。2分钟内向所述溶液加入1，5-萘二磺酸四水合物(1.0eq，0.56wt)的水(4.8vol)溶液。溶液保持透明，100分钟内冷却至约2℃。得白色固体悬浮液，在约2℃搅拌30分钟。通过过滤(良好)分离固体，用冷MeOH溶液(3×11.0vol)洗涤。真空干燥褐色固体(50℃，10毫巴，18h)。浅褐色产物包含颗粒，将其机械研碎。得标题化合物浅褐色固体。总回收率(针对HPLC纯度进行了校正)74％。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)，δ 1.30-2.28(m，18H)，3.13(m，4H)，3.20(m，2H)，3.27-3.53(m，9H)，3.62(m，1H)，3.85(m，1H)，3.94(m，2H)，4.31(m，2H)，4.55(d，2H)，6.82(m，2H)，7.05(d，2H)，7.29-7.51(m，6H)，7.79-8.05(m，5H)，8.31(m，1H)，8.86(d，2H)，9.15(m，2H) DSC温度记录图以瓦/秒对温度图示了加热的不同速率。晶体4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮1，5-萘二磺酸盐一水合物盐(例如如实施例24C所制备)的DSC温度记录图在约53℃±5、190℃±5和234℃±5示出了三个宽吸热峰，其分别对应于失水、少量吸热行为和熔化。通过对熔点峰进行积分测得熔化焓为58J/g±10。代表性的DSC温度记录图见图1。
4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮1，5-萘二磺酸盐一水合物(例如如实施例24C所制备)的代表性XRPD图见图2。该种形式的峰角列表如下。

实施例24D 4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮二盐酸盐 将4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂

-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮(例如如实施例24A所制备)(3.85g，6.0mmol)溶解在MeOH(100ml)和2N盐酸(12ml，24mmol)中。真空去除溶剂。将残留物溶解在MeOH(50ml)中，然后蒸发。重复该过程3次。真空干燥残留物得标题化合物(4.3g，100％)易碎泡沫。LCMS RT＝3.41分钟，ES+ve m/z 641(M+H)+。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ 10.60(1H，br s)，10.49(1H，br s)，8.30(1H，dd，J＝7.5，1.5Hz)，7.96(1H，d，J＝7.5Hz)，7.88-7.93(1H，m)，7.84-7.89(1H，m)，7.38(2H，d，J＝8.5Hz)，7.34(2H，d，J＝8.5Hz)，7.09(2H，d，J＝8.5Hz)，6.84(2H，d，J＝8.5Hz)，4.62(1H，dd，J＝14.0，4.5Hz)，4.55(1H，dd，J＝14.0，7.0Hz)，4.37(1H，d，J＝16.5Hz)，4.33(1H，d，J＝16.5Hz)，4.00(2H，t，J＝6.0Hz)，3.77-3.85(1H，m)，3.55-3.64(1H，m)，3.31-3.46(3H，m)，3.15-3.22(2H，m)，3.02-3.14(4H，m)，2.47-2.53(2H，m)，2.07-2.23(4H，m)，1.49-1.99(14H，m)。
生物数据 可依据以下或类似测试对本发明化合物进行体外和/或体内生物活性测试。
H1受体细胞系产生和FLIPR测试法 1 组胺H1细胞系的产生 利用文献[Biochem.Biophys.Res.Commun.，201(2)894(1994)]所述已知方法克隆人体H1受体。依据文献[Br.J.Pharmacol.，117(6)1071(1996)]所述已知方法产生稳定表达人体H1受体的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞。
组胺H1功能拮抗剂测试功能pKi值的测定 将组胺H1细胞系接种至开放的黑壁透明底384孔组织培养板极限必需培养基(Gibco/Invitrogen，货号22561-021)中，其中补加了10％渗析的胎牛血清(Gibco/Invitrogen货号12480-021)和2mM L-谷氨酰胺(Gibco/Invitrogen货号25030-024)，并在5％ CO2和37℃中保持过夜。
从各孔去除过量培养基以剩下10μl。向每个孔加入30μl负载染料(250μM Brilliant Black，在Tyrodes缓冲液+丙磺舒(145mM NaCl，2.5mM KCl，10mM HEPES，10mM D-葡萄糖，1.2mM MgCl2，1.5mM CaCl2，2.5mM丙磺舒，用NaOH 1.0M调节pH至7.40)中稀释的2μM Fluo-4)，在5％ CO2和37℃中孵化培养板60分钟。
向每个孔加入10μl在Tyrodes缓冲液+丙磺舒中稀释至所需浓度的受试化合物(或10μl Tyrodes缓冲液+丙磺舒作为对照)，在37℃和5％ CO2中孵化培养板30分钟。然后将培养板放入FLIPRTM(MolecularDevices，UK)中以便如Sullivan等(In Lambert DG(ed.)，CalciumSignaling Protocols，New Jersey Humana Press，1999，125-136)所述方法在以导致组胺最终测试浓度为EC80的浓度加入10μl组胺之前和之后监测细胞荧光(λex＝488nm，λEM＝540nm)。
功能拮抗以如FLIPRTM系统(Molecular Devices)所测组胺诱导的荧光增加的抑制表示。通过浓度效果曲线，利用标准药理学数学分析确定功能亲和力。
组胺H1功能拮抗剂测试拮抗剂pA2和持续时间的测定 如上所述，将表达的组胺H1受体CHO细胞接种至开放的黑壁透明底96孔组织培养板。
培养过夜后，从每个孔去除生长培养基，用200μl磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤，并置换成50μl负载染料(250μM Brilliant Black，在Tyrodes缓冲液+丙磺舒(145mM NaCl，2.5mM KCl，10mM HEPES，10mM D-葡萄糖，1.2mM MgCl2，1.5mM CaCl2，2.5mM丙磺舒，用NaOH 1.0M调节pH至7.40)中稀释的1μM Fluo-4)。在37℃孵化细胞45分钟。去除负载缓冲液，如上洗涤细胞，向每个孔加入90μl Tyrodes缓冲液+丙磺舒。向每个孔加入10μl在Tyrodes缓冲液+丙磺舒中稀释至所需浓度的受试化合物(或10μl Tyrodes缓冲液+丙磺舒作为对照)，在37℃和5％ CO2中孵化培养板30分钟。
然后将培养板放入FLIPRTM(Molecular Devices，UK)中以便如Sullivan等(In Lambert DG(ed.)，Calcium Signaling Protocols，NewJersey Humana Press，1999，125-136)所述方法在以1mM-0.1nM浓度范围加入50μl组胺之前和之后监测细胞荧光(λex＝488nm，λEM＝540nm)。通过非线性回归利用标准四参数逻辑等式分析所得浓度响应曲线以确定组胺EC50和产生50％组胺最大响应的响应所需的组胺浓度。利用以下标准等式计算拮抗剂pA2:pA2＝log(DR-1)-log[B]，其中DR＝剂量比，定义为EC50拮抗剂处理的/EC50对照，[B]＝拮抗剂的浓度。
为测定拮抗剂持续时间，在开放的黑壁透明底96孔组织培养板中培养细胞过夜，用PBS洗涤，用所选拮抗剂浓度孵化得约30-300DR。拮抗剂孵化30分钟后，用200μl PBS洗涤细胞两次或三次，然后向每个孔加入100μl Tyrodes缓冲液以引起拮抗剂离解。在37℃孵化预定时间后，一般为30-270分钟，然后再次用200μl PBS洗涤细胞，如上所述在37℃用100μl包含Brilliant Black、丙磺舒和Fluo-4的Tyrodes缓冲液孵化45分钟。之后，如上所述利用组胺在FLIPRTM中对细胞进行测试。各时间点的剂量比用于通过以下等式确定局部H1受体占有率局部受体占有率＝(DR-1)/DR。受体占有率随时间的降低约为直线，通过线性回归对其进行分析。将该直线拟合的斜率作为拮抗剂离解速率的指标。各时间点的拮抗剂处理的细胞与拮抗剂处理和洗涤的细胞的剂量比用于计算相对剂量比(相对DR)，其也用作拮抗剂持续时间的指标。作用时间长的拮抗剂产生接近1的相对DR值，作用时间短的拮抗剂产生接近于针对拮抗剂处理单独所得的剂量比值的相对DR值。
2.H3受体细胞系产生、膜制备和功能GTPγS测试法 组胺H3细胞系的产生 通过具有酶BamH1和Not-1的质粒DNA的限制酶切消化从其结合的载体pCDNA3.1 TOPO(InVitrogen)分离组胺H3 cDNA，并连接到用相同酶系消化的诱导型表达载体pGene(In Vitrogen)上。如在US专利5,364,791、5,874,534和5,935,934中所述使用Gene SwitchTM系统(一种在诱导物不存在时关闭并在诱导物存在时打开的转基因表达系统)。将连接DNA转移到活性DH5α E.大肠杆菌宿主细菌细胞中并以50μgml-1的浓度接种到含有ZeocinTM(一种抗菌素，其允许细胞表达sh ble基因的选择，所述基因存在于pGene和pSwitch上)的LuriaBroth(LB)琼脂上。经限制酶切分析鉴定含有重配位质粒的菌落。从250ml含有pGeneH3质粒的宿主细菌的培养物中制备用于转移到哺乳动物细胞中的DNA并如每一制造商指导(Qiagen)的使用DNA制备试剂盒(Qiagen Midi-Prep)使其分离。
将预先用pSwitch调节质粒(InVitrogen)转染的CHO K1细胞在完全培养基中以2 x 106细胞/每T75烧瓶的浓度接种，所述完全培养基含有Hams F12(GIBCOBRL，Life Technologies)培养基，其补加了10％v/v透析的胎牛血清、L-谷氨酰胺和潮霉素(100μg ml-1)，24小时后使用。使用脂质转染胺并根据制造商的指导(InVitrogen)，将质粒DNA转染到细胞中。48小时后将转染的细胞放置到补加500μg ml-1ZeocinTM的完全培养基中。
10-14天后，将选择性10nM Mifepristone(In Vitrogen)加入到培养基中以诱导受体的表达。18小时后，使用乙二胺四乙酸(EDTA；1:5000；InVitrogen)使诱导的细胞从烧瓶中脱离，随后用pH7.4的磷酸缓冲盐溶液洗涤数次并重悬浮在含有极限必需培养基(MEM)的分选培养基中，所述培养基没有酚红，并补加了Earles盐和3％ Foetal Clone II(Hyclone)。通过用兔多克隆抗体、4a染色，检查作为受体表达的近似1 x 107个细胞，高位阻止组胺H3受体的N-端结构域，在冰上温育60分钟，随后在分选培养基中洗涤两次。通过将所述细胞在带有山羊抗兔抗体的冰上培育60分钟检测受体结合的抗体，将受体结合的抗体与Alexa 488荧光标记(Molecoular Probes)结合。随后再用分选培养基洗涤两次，将细胞通过50μm FilconTM(BD Biosciences)过滤，然后在装备有自动细胞沉着部件的FACS Vantage SE Fiow Cytometer上分析。对照细胞是以相同方法处理的非诱导细胞。将阳性着色细胞作为单一细胞分选进96-孔平板中，该平板中含有500μg ml-1 ZeocinTM的完全培养基并充许在通过抗体和配体结合研究对于受体表达重分析前膨胀。一种克隆，3H3被选择用于膜制剂。
来自培养细胞的膜制剂 该方案的所有步骤都在4℃下并与预冷却的试剂一起进行。将细胞沉淀物重悬浮在10容积均化缓冲液中(50mM N-2-羟基乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)，1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，用KOH调节pH为7.40，其中补加了10-6M亮抑酶肽(乙酰基-亮氨酰基-亮氨酰基精氨醛(arginal)；Sigma L2884)、25μgml-1杆菌肽(Sigma B0125)、1mM苯基甲基磺酰氟(PMSF)和2 x 10-6M抑胃酶肽A(Sigma)。然后在1升玻璃Waring搅拌器中经2 x 15秒裂解，随后在500g下离心20分钟使细胞均化。然后将上清液在48,000g下离心30分钟。经涡旋5秒钟将沉淀物重悬浮在均化缓冲液中(4×初始细胞沉淀物的体积)，随后在Dounce匀浆器(10-15振幅)中均化。此时将制备物等分试样放入聚丙烯管中并放置在-80℃下。
组胺H3功能拮抗剂测试 向纯白384孔平板中的每一种需测试的化合物中加入- (a)0.5μl在DMSO中稀释至所需浓度的受试化合物(或0.5μlDMSO作为对照)； (b)如下制备的30μl珠粒/膜/GDP混合液将麦胚凝集素聚苯乙烯

(WGA PS LS)闪烁亲近测定法(SPA)珠粒与膜(根据以上所述方法制备)混合并以测试缓冲液(20mM N-2-羟基乙基哌嗪-N′-2-乙磺酸(HEPES)+100mM NaCl+10mMMgCl2，pH 7.4 NaOH)稀释得到30μl终容积，其包含5μg蛋白、0.25mg珠粒/孔和10μM最终测试浓度的鸟苷5’-二磷酸(GDP)(Sigma，稀释到测试缓冲液中)，在振荡器上和室温孵化60分钟； (c)15μl 0.38nM[35S]-GTP S(Amersham；放射性浓度＝37MBqml-1；比活性＝1160Cimmol-1)，组胺(导致组胺最终测试浓度为EC80的浓度)。
2-6h后，1500rpm离心平板5分钟，在Viewlux计数器上利用613/55滤光器5minplate-1计数。利用4参数逻辑等式分析数据。作为最低量的基础活性，即组胺不加入到孔中。
鼻内测试方法整体体积描记法 (a)致敏 用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝(Al(OH)3或Alum)的生理盐水溶液以25μl/鼻孔每天致敏150-250g雌性Dunkin-Hartley豚鼠两次，共5天(第1周)。溶液由20μg/ml OVA和180mg/ml Alum组成。在第2周和第3周，动物接受25μl/鼻孔OVA(5mg/ml)，每天一次。在第4周，豚鼠进入研究，但如第2周和第3周那样连续致敏直至给予化合物或载体的前一天。
(b)化合物/载体预处理 在组胺测试前在不同时间对受试化合物进行预处理。给药1h后测定效果剂量响应曲线，而给药7天后对作用时间进行研究。将受试化合物配制成在0.9％无菌盐水中的溶液或在0.9％无菌盐水/吐温80中的悬浮液。
用异氟烷麻醉豚鼠(5％，2-31/分钟O2)，仰卧放置，利用Gilson移液管给予每个鼻孔25μl受试化合物或载体。给药后，在从麻醉中恢复的过程中动物保持仰卧至少30秒。
(c)组胺测试方法 组胺测试前30分钟，给予豚鼠硫酸阿托品(Sigma A0257，溶解在盐水中)，1mg/kg腹腔注射。然后将动物置于整体体积描记系统中

Electronics)，其中如Hamelmann E.，Schwarze，J.，Takeda，K.，Oshiba，A.，Larsen，L.，Irvin，C.G.和Gelfand，E.W.，Am.J.Respir.Crit.Care Med.156766-775(1997)所述记录参数PenH曲线下面积(AUC)。记录10分钟基线AUC，如果该值大于1000，则将所述动物排除在外。
到达规定的前剂量时间后，用异氟烷再次麻醉豚鼠，并给予15mM组胺或磷酸盐缓冲盐水(PBS)(25μl/鼻孔)。在从麻醉恢复的过程中，将动物放回单独的体积描记室，并记录4×10分钟连续的PenHAUC。归纳这些记录得每只动物组胺测试后40分钟内的累积AUC。利用具有事后比较Fishers LSD检验(通用线性模型，

)和最后Hochberg调整的ANOVA分析数据。利用化合物预处理组相对于载体预处理组胺测试组的平均响应间的统计学上的明显区别确定组胺诱导的充血的抑制。
CNS渗透 (i)通过推注给药的CNS渗透 以1mg/kg标称剂量静脉给予CD Sprague Dawley大鼠化合物。将化合物配制在5％DMSO/45％ PEG 200/50％水中。在用异氟烷末端麻醉下和给药5分钟后取血液样品，同时还去除脑部以评价脑部渗透。直接将血液样品置于肝素化的管中。利用蛋白质沉淀制备血液样品以供分析，通过均化和随后的蛋白质沉淀从脑部萃取药物制备脑部样品。通过使用化合物特异性质量转化的定量LC-MS/MS分析测定血液和脑部萃取物中的母药浓度。
(ii)稳态静脉注射后的CNS渗透 以0.4mg/kg标称剂量给予雄性CD Sprague Dawley大鼠化合物负荷剂量。然后以0.1mg/kg/h标称剂量静脉注射化合物4h。将化合物配制在2％DMSO/30％ PEG 200/68％水中。给药0.5、1.5、2.5、3、3.5和4h后取连续或最终血液样品。在用异氟烷末端麻醉下收集最终血液样品，同时还去除脑部以评价脑部渗透。直接将血液样品置于肝素化的管中。利用蛋白质沉淀制备血液样品以供分析，通过均化和随后的蛋白质沉淀从脑部萃取药物制备脑部样品。通过使用化合物特异性质量转化的定量LC-MS/MS分析测定血液和脑部萃取物中的母药浓度。
大鼠药代动力学 通过单次静脉或口服给药分别以1mg/kg和3mg/kg标称剂量给予雄性CD Sprague Dawley大鼠化合物。将化合物配制在5％DMSO/45％ PEG 200/50％水中。通过在给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4和7h取连续或者最终血液样品(对某些研究而言，可取12和24h样品)获得静脉分布。通过在给药后0.25、0.5、1、2、4、7和12h取连续或最终血液样品(对某些研究而言，可取24和30h样品)获得口服分布。直接将血液样品置于肝素化的管中。通过蛋白质沉淀制备血液样品，并通过LC-MS/MS利用化合物特异性质量转化进行定量分析。获得药物浓度时间图，非房室PK分析用于获得半衰期、清除率、体积分布和口服生物利用率的估计值。
狗药代动力学 通过单次静脉或口服给药分别以1mg/kg和2mg/kg标称剂量给予雄性Beagle狗化合物。依据交叉设计进行研究从而使同一只狗用于两次给药，每隔1周给药一次。将化合物配制在5％DMSO/45％ PEG200/50％水中。通过在给药后0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6和12h取连续血液样品(对某些研究而言，可取24h样品)获得静脉分布。通过在给药后0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、12和24h取连续血液样品获得口服分布。直接将血液样品置于肝素化的管中。通过蛋白质沉淀制备血液样品，并通过LC-MS/MS利用化合物特异性质量转化进行定量分析。获得药物浓度时间图，非房室PK分析用于获得半衰期、清除率、体积分布和口服生物利用率的估计值。
结果 在上述或类似测试/方法中对实施例1-23的化合物进行了测试，并表现出 (i)实施例化合物对H1的平均pKi(pKb)大于约7。实施例7化合物对H1的平均pKi(pKb)大于约8。
实施例1-3、5-9、11-13、15、18和23化合物对H1的平均pA2值大于约7。实施例3、8、11、12、13、15和18化合物对H1的平均pA2值大于约8。实施例6、7、9和23化合物对H1的平均pA2值大于约9。
(ii)实施例化合物对H3的平均pKi(pKb)大于约8。实施例1、2、5-10、12、14-20和23化合物对H3的平均pKi(pKb)大于约9。
(iii)实施例7、8、9、11、12、13、15、18和23化合物在H1功能拮抗剂测试中的作用时间较氮

斯丁更长(在一个或多个时间点)。
(iv)实施例7和13化合物表现出较氮

斯丁更低的CNS渗透。实施例16化合物表现出与氮

斯丁相当的CNS渗透。
在上述或类似测试/方法中对实施例24化合物及其各种盐进行了测试，并表现出 i)对H1的平均pKi(pKb)为约7.8，对H1的平均pA2值为约8.9。
ii)对H3的平均pKi(pKb)为约9.6。
iii)在组胺H1功能拮抗剂测试中，在一个或多个时间点，较氮

斯丁的作用时间明显更长。
iv)在豚鼠整体体积描记法模型中，给药24小时后相对于氮

斯丁统计学上明显地抑制鼻充血(图3)。
v)CNS渗透较氮

斯丁更小。
权利要求
1.式(I)化合物或其盐
其中
A代表N或CH；
R1和R2各自独立代表卤素、C1-6-烷基、C1-6烷氧基、羟基或三氟甲基；
y和z各自独立代表0、1或2；
R3代表-(CH2)aNR4R5基团或式(i)基团
其中
a代表1、2或3；
b代表0或1；
c代表0、1或2，d代表0、1、2或3，使c和d不同时为0；
R4代表氢或C1-6烷基，R5和R6各自独立代表选自式(a)、(b)或(c)的基团
其中，对式(a)而言
e代表1-6；
e′代表2-4；
f代表0、1或2，g代表0、1、2或3，使f和g不同时为0；
h代表0、1或2；
R7代表C1-3烷基；
其中，对式(b)而言
i代表1-6；
X代表化学键、O或-N(R10)C(O)-，其中R10代表氢或C1-6烷基；
j和k各自代表1或各自代表2；
R8代表氢、C3-6环烷基或C1-6烷基；
其中，对式(c)而言
l代表1-6；
l′代表0-3；
m代表0、1或2，n代表0、1、2或3，使m和n不同时为0，且使l’加n必须为1、2或3；
R9代表氢、C3-6环烷基或C1-6烷基。
2.权利要求1的化合物，其中A代表CH。
3.权利要求1或权利要求2的化合物，其中z代表1，R2在4-位(对位)取代。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R3代表式(i)基团。
5.权利要求4的化合物，其中R6代表式(a)基团。
6.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R3代表基团-(CH2)aNR4R5，R5代表式(b)基团。
7.实施例1至实施例24的化合物或其盐。
8.一种化合物，所述化合物为4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂
-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其盐。
9.一种化合物，所述化合物为4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2S)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂
-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)-1(2H)-酞嗪酮或其盐。
10.一种化合物，所述化合物为4-[(4-氯苯基)甲基]-2-({(2R)-1-[4-(4-{[3-(六氢-1H-氮杂
-1-基)丙基]氧基}苯基)丁基]-2-吡咯烷基}甲基)吡啶并[3，4-d]哒嗪-1(2H)-酮或其盐。
11.权利要求1-10中任一项的化合物或其药学可接受的盐。
12.用于治疗的权利要求11的化合物。
13.用于治疗呼吸道炎性和/或过敏性疾病的权利要求12的化合物。
14.用于治疗过敏性鼻炎的权利要求13的化合物。
15.一种组合物，所述组合物包含权利要求11的式(I)化合物与任选的一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂。
16.权利要求15的组合物，其中所述组合物适于鼻内输送。
17.一种组合物，所述组合物包含权利要求11的化合物和一种或多种其他治疗剂。
18.权利要求11的化合物在制备用于治疗或预防呼吸道炎性和/或过敏性疾病的药物中的用途。
19.权利要求18的用途，其中所述疾病为过敏性鼻炎。
20.一种治疗或预防呼吸道炎性和/或过敏性疾病的方法，所述方法包括给予有需要的病人有效量的权利要求11的式(I)化合物。
21.权利要求20的方法，其中所述疾病为过敏性鼻炎。
22.一种制备式(I)化合物的方法，所述方法选自A-G的方法
A)使式(IIa)或(IIb)化合物
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d和R4如权利要求1所定义，
与式(IIIa)、式(IIIb)或式(IIIc)化合物反应
其中e、e′、f、g、h、R7、i、X、j、k、R8、l、l′、m、n和R9如权利要求1所定义，L代表离去基团，例如氯、溴、碘、活化的羟基，例如甲磺酸基或甲苯磺酸基，或L代表醛，在这种情况下L-(CH2)e.i或l为HC(O)-(CH2)(e.i或l)-1；
B)使式(IV)化合物
其中A代表CH，R1和y如权利要求1所定义，R3为式(i)基团，L代表离去基团，例如氯或溴，
与式(V)化合物反应
其中R2和z如权利要求1所定义，M-配体代表以下基团中的一种Zn-X(其中X为氯或溴)、B(OH)2、SnR3(其中R代表C1-6烷基，例如丁基)或SiR3(其中R代表C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基)；
C)对其中R5或R6代表式(b)基团，其中X代表-N(R10)C(O)-的式(I)化合物而言，使式(VI)化合物
其中j、k和R8如权利要求1所定义，
与式(VIIa)或(VIIb)化合物反应
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d、i、R4和R10如权利要求1所定义；
D)对其中R5或R6代表式(b)基团，其中X代表化学键的式(I)化合物而言，使式(VIII)化合物
其中j、k和R8如权利要求1所定义，
与式(IIa)或(IIb)化合物反应
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d和R4如权利要求1所定义；
E)对其中R5或R6代表式(a)基团的式(I)化合物而言，使式(IXa)或(IXb)化合物
其中A、R1、y、R2、z、a、b、c、d、e、e′和R4如权利要求1所定义，L代表离去基团，例如氯、溴、碘，
与式(X)化合物反应
其中f、g、h和R7如权利要求1所定义；
F)由其他式(I)化合物变换；或
G)制备式(I)化合物的盐。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物、及其盐、其制备方法、包含其的组合物及其在治疗各种病症(例如过敏性鼻炎)中的用途。
文档编号C07D237/00GK101472899SQ200780023232
公开日2009年7月1日 申请日期2007年4月18日 优先权日2006年4月20日
发明者P·M·戈尔, A·P·汉库克, S·T·霍奇森, L·J·金顿, P·A·普罗科皮欧 申请人:葛兰素集团有限公司