抑制有丝分裂的化合物的制作方法

专利名称：：抑制有丝分裂的化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及治疗癌症的化合物和方法。具体来说，本发明提供抑制极光(Aurora)激酶的化合物、包含所述化合物的医药组合物和使用所述化合物治疗癌症的方法。背景技水据美国癌症学会(AmericanCancerSociety)估计，2004年有140万美国人被新确诊患有癌症并且有约56万受害者死于该病。尽管医学进步已提高了癌症存活率，但持续存在对新颖和更有效治疗的需要。癌症特征为不受控制的细胞繁殖。有丝分裂是细胞周期的一个阶段，期间发生一系列确保染色体分离进入两个子细胞的保真性的复杂事件。目前的数种癌症疗法(包括紫杉烷(taxane)和长春花属生物碱(vincaalkaloid))用以抑制有丝分裂机制。有丝分裂进程主要是通过蛋白水解和通过有丝分裂激酶所介导的磷酸化作用来调控。极光激酶家族成员(例如极光A、极光B、极光C)经由调节中心体分离、纺锤体动力学、纺锤体组装检査点、染色体排列和细胞质分裂来调控有丝分裂进程(杜戴尔特(Dutertre)等人，致癌基因(O"cogene)，21:6175(2002);贝尔尼克(Berdnik)等人，当代生物学(Cwr.S!'o/.),12:640(2002))。在数种肿瘤类型(包括那些结肠癌和乳癌)中极光激酶的过度表达和/或扩增与肿瘤形成相关(沃纳(Wamer)等人，分子肿瘤疗法(MoZ.C朋c"7Ti")，2:589(2003);比斯科夫(Bischoff)等人，欧洲分子生物学组织(￡似石0)，17:3062(1998);森(Sen)等人，癌症研究(C朋c^"/e",94:1320(2002))。此外，抑制肿瘤细胞中的极光激酶致使有丝分裂停滞和细胞凋亡，暗示这些激酶是癌症疗法的重要靶点(迪茨费德(Ditchfidd),细胞生物学杂志(乂Ce〃肌o/.)，161:267(2003);哈林顿(Harrington)等人，自然医学(A^mw1(2004))。假设有丝分裂在几乎所有恶性疾病的进程中起主要作用，则预期极光激酶抑制剂在整个人类肿瘤的广泛范围中具有应用性。因此对新颖极光激酶抑制剂存在需要。
发明内容克莱本(Claiborne)等人的国际专利公开案WO05/111039揭示具有极光激酶抑制活性的嘧啶并苯并氮杂卓化合物。本发明者目前已发现具有出乎意料优越的针对极光激酶A的效能的嘧啶并苯并氮杂卓化合物。所主张的化合物适用于活体外和活体内抑制极光激酶A活性，并且特别适用于治疗各种细胞增殖性疾病。因此，在一方面，本发明提供式(/)所表示的化合物或其医药学上可接受的盐，其中Ra选自由Cw脂族基、d—3氟脂族基、-R1、-T-R1、-R2和-T-R2组成的群组；T为任选经氟取代的d-3亚烷基链；Ri为任选取代的芳基、杂芳基或杂环基；R2选自由卤基、-C三C-r3、-CH=CH-r3、'N(r4)2和-or5组成的群组；W为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；各R4独立地为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；或者同一氮原子上的两个R"连同氮原子一起形成除氮原子以外具有0-2个选自N、0和S的环杂原子的任选取代的5至6元杂芳基或4至8元杂环基环；RS为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；并且Rb选自由氟、氯、-CH3、-CF3、-OH、-OCH3、-OCF3、-OCH2CH3和-OCH2CF3组成的群组。在一些实施例中，W为任选经一个或两个独立地选自由卤基、Cw脂族基和Cw氟脂族基组成的群组的取代基取代的5或6元芳基、杂芳基或杂环基环。在某些实施例中，R1为任选经一个或两个独立地选自由卤基、d-3脂族基和Cw氟脂族基组成的群组的取代基取代的苯基、呋喃基、吡咯浣基或噻吩基环。在一些实施例中，W为氢、d-3脂族基、d.3氟脂族基或-CH2-OCH3。在一些实施例中，RS为氢、d-3脂族基或d-3氟脂族基。在某些实施例中，Ra为卤基、Cw脂族基、Cw氟脂族基、-OH、-O(Cw脂族基)、-0(d-3氟脂族基)、-CeC-R3、-CH=CH-R3，或任选取代的吡咯垸基、噻吩基、呋喃基或苯环，其中113为氢、Cw脂族基、d-3氟脂族基或-CH2-OCH3。在某些特定实施例中，Ra选自由下列各基团组成的群组氯、氟、Ci.3脂族基、d-3氟脂族基、-OCH3、-OCF3、-C三C-H、-C^C-CH3、-CeC-CH2OCH3、-CH=CH2、-CH=CHCH3、7V-甲基吡咯垸基、噻吩基、甲基噻吩基、呋喃基、甲基呋喃基、苯基、氟苯基和甲苯基。表1展示式(/)化合物的特定实例。表l.极光激酶抑制剂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>上表l中的化合物也可通过以下化学名称识别:<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>144-({7-(2-氟-6-甲氧苯基)-9-[(1￡)-丙-1-烯-1-基]-5//-嘧啶并[5,4-《[2]苯并氮杂卓-2-基}氨基)-2-甲氧基苯甲酸154-({9-氯-7-[2-氟-6-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基]-5//-嘧啶并[5，4-《[2]苯并氮杂卓-2-基}氨基)-2-甲氧基苯甲酸164-{[7-(2-氟-6-甲氧苯基)-9-(2-呋喃基)-5//-嘧啶并[5,4-《[2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸174-{[9-氯-7-(2-氟-6-羟基苯基)-5H-嘧啶并[5,4-rf][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基卜2-甲氧基苯甲酸184-{[7-(2-氟-6-甲氧苯基)-9-苯基-5//-嘧啶并[5，4-《[2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸在一实施例中，式(/)化合物为4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5//-嘧啶并[5,4-《[2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸或其医药学上可接受的盐。在一特定实施例中'，式②化合物为4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5//-嘧啶并[5,4-《[2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠。除非另外说明，否则本文所述的结构打算包括仅在一个或多个富同位素原子的存在上存在差异的化合物。例如，具有本发明结构，但以氘或氚替代氢原子或以富^C或"C碳替代碳原子的化合物在本发明的范围内。本文中所使用的术语"脂族"或"脂族基"意指完全饱和或含有一个或多个不饱和单位，但并非芳族的经取代或未经取代的直链、支链或环状Cw2烃。例如，合适的脂族基包括经取代或未经取代的直链、支链或环状烷基、烯基、炔基和其杂合物，诸如(环烷基)垸基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。单独或作为较大部分的一部分使用的术语"环脂基"是指具有3至约14个成员的饱和或部分不饱和环状脂族环系统，其中所述脂族环系统为任选取代的。在一些实施例中，环脂基为具有3-8或3-6个环碳原子的单环烃。非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环庚烯基、环辛基、环辛烯基和环辛二烯基。在一些实施例中，环脂基为具有6-12、6-10或6-8个环碳原子的桥式或稠合双环烃，其中双环系统中的任何个别环具有3-8个成员。在一些实施例中，环脂族环上两个相邻取代基连同介于其间的环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选取代的稠合5至6元芳环或3至8元非芳环。因此，术语"环脂基"包括稠合至一个或多个芳环、杂芳环或杂环基环的脂族环。非限制性实例包括茚满基、5，6，7,8-四氢喹喔啉基、十氢萘基或四氢萘基，其中连接基团或连接点在脂族环上。术语"环脂基"可与术语"碳环"、"碳环基(carbocyclyl)"、"碳环基(carbocyclo)"或"碳环状"互换使用。10单独或作为较大部分(例如"芳烷基"、"芳烷氧基"或"芳氧基烷基")的一部分使用的术语"芳基"和"芳"是指包含各自为任选取代的一个至三个环的C6至C14芳族烃。优选地，芳基为C^。芳基。芳基包括(但不限于)苯基、萘基和蒽基。在一些实施例中，芳环上两个相邻取代基连同介于其间的环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选取代的稠合5至6元芳环或4至8元非芳环。因此，本文所使用的术语"芳基"包括芳环稠合至一个或多个杂芳环、环脂环或杂环基环的基团，其中连接基团或连接点在芳环上。所述稠合环系统的非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、喷唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、昨唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、荷基、茚满基、菲啶基、四氢萘基、吲哚啉基、吩噁嗪基、苯并二噁烷基和苯并间二氧杂戊烯基。芳基可为单环、双环、三环或多环，优选为单环、双环或三环，更优选为单环或双环。术语"芳基"可与术语"芳基基团"、"芳基部分"和"芳环"互换使用。"芳垸基"或"芳基垸基"包含共价连接至垸基的芳基，其任一者独立地为任选取代的。优选地，芳烷基为Cw。芳基(Q-6)烷基、C6,芳基(Cm)院基或C6—u)芳基(d.3)烷基，包括(但不限于)节基、苯乙基和萘基甲基。单独或作为较大部分(例如"杂芳烷基"或"杂芳垸氧基")的一部分使用的术语"杂芳基"和"杂芳"是指具有5至14个环原子，优选地5、6、9或10个环原子；具有在环阵列中共用的6、10或14个ii电子；并且除碳原子以外具有一个至四个杂原子的基团。术语"杂原子"是指氮、氧或硫并且包括任何氧化形式的氮或硫和任何季铵化形式的碱性氮。杂芳基包括(但不限于)噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡咬基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚嗪基、嘌呤基、萘啶基和蝶啶基。在一些实施例中，杂芳基上两个相邻取代基连同介于其间的环原子一起形成具有0-3个选自由O、N和S组成的群组的环杂原子的任选取代的稠合5至6元芳环或4至8元非芳环。因此，本文所使用的术语"杂芳基"和"杂芳"也包括杂芳环稠合至一个或多个芳环、环脂环或杂环基环的基团，其中连接基团或连接点在杂芳环上。非限制性实例包括吲哚基、异吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、二苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、4H-喹嗪基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡啶并[2,3-b]-l,4-噁嗪-3(4H)-酮。杂芳基可为单环、双环、三环或多环，优选为单环、双环或三环，更优选为单环或双环。术语"杂芳基"可与术语"杂芳环"、"杂芳基"或"杂芳族"互换使用，所述术语中的任一者均包括任选取代的环。术语"杂芳烷基"是指经杂芳基取代的烷基，其中烷基和杂芳基部分独立地经任选取代。本文所使用的术语"杂环"、"杂环基"、"杂环基团"和"杂环状环"可互换使用且指稳定的3至7元单环或指稠合7至10元或桥式6至10元双环杂环部分，其可为饱和的或部分不饱和的并且除碳原子以外具有一个或多个(优选一个至四个)如上所定义的杂原子。当结合杂环的环原子使用时，术语"氮"包括经取代的氮。例如，在具有l-3个选自氧、硫或氮的杂原子的杂环基环中，所述氮可为N(如在3,4-二氢-2if-吡咯基中)、NH(如在吡咯垸基中)或+NR(如在iV-经取代的吡咯垸基中)。杂环状环可在任何可产生稳定结构的杂原子或碳原子处连接其侧基，并且环原子中的任一者均可任选受到取代。所述饱和或部分不饱和杂环基团的实例包括(但不限于)四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯垸基、吡咯烷酮基、哌啶基、吡咯啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、噁唑烷基、哌嗪基、二噁烷基、二氧戊环基、二氮杂卓基、氧氮杂卓基、硫氮杂卓基、吗啉基和奎宁环基。在一些实施例中，杂环状环上两个相邻取代基连同介于其间的环原子一起形成具有0-3个选自由0、N和S组成的群组的环杂原子的任选取代的稠合5至6元芳环或3至8元非芳环。因此，术语"杂环"、"杂环基"、"杂环基环"、"杂环状基"、"杂环状部分"和"杂环状基团"在本文中可互换使用，并且包括杂环基环稠合至一个或多个芳环、杂芳环或环脂环的基团，诸如吲哚啉基、3//-刚哚基、苯并二氢吡喃基、菲啶基或四氢喹啉基，其中连接基团或连接点在杂环基环上。杂环基可为单环、双环、三环或多环，优选为单环、双环或三环，更优选为单环或双环。术语"杂环基烷基"是指经杂环基取代的垸基，其中垸基和杂环基部分独立地经任选取代。本文所使用的术语"部分不饱和"是指在环原子之间包括至少一个双键或三键的环部分。术语"部分不饱和"欲涵盖具有多个不饱和位点的环，但不欲包括如本文所定义的芳基或杂芳基部分。术语"卤代脂族基"、"卤代烷基"、"卤代烯基"和"卤代垸氧基"是指视情况而定经一个或多个卤素原子取代的脂族基、浣基、烯基或烷氧基。本文所使用的术语"卤素"或"卤基"意指F、Cl、Br或I。术语"氟脂族基"是指卤素为氟的卤代脂族基。术语"亚垸基"是指二价烷基。"亚烷基链"为聚亚甲基，即-(CH2)。-，其中n为正整数，优选为从1到6，从1到4、从1到3、从1到2或从2到3。经取代的亚烷基链为其中一个或多个亚甲基氢原子被取代基替代的聚亚甲基。合适的取代基包括以下关于12经取代的脂族基描述的那些取代基。亚烷基链也可在一个或多个位置处经脂族基或经取代的脂族基取代。本文中所使用的术语"经取代"意指所表示部分中的氢基被指定取代基替代，其限制条件为取代产生稳定或化学上可行的化合物。本文中所使用的短语"一个或多个取代基"是指等于一个至根据可用键结位点可能的取代基最大数量的取代基数量，其限制条件为满足以上稳定性和化学可行性条件。除非另有说明，否则任选取代的基团可在基团的每个可取代位置处具有取代基，并且取代基可相同或不同。芳基(包括芳垸基、芳烷氧基、芳氧基烷基和其类似基团的芳基部分)或杂芳基(包括杂芳烷基和杂芳垸氧基和其类似基团的杂芳基部分)可含有一个或多个取代基。芳基或杂芳基的不饱和碳原子上的合适取代基实例包括-卤基、-N02、-CN、-R*、-C(R*)=C(R*)2、-C三C-R承、-OR*、-SR°、-S(O)R。、-S02R°、-S03R°、-S02N(R+)2、-N(R+)2、-NR+C(0)R*、-NR+C(0)N(R+)2、-NR+C02R°、-0-C02R*、-OC(0)N(R+)2、-0-C(0)R*、-C02R*、-C(0)-C(0)R*、-C(0)R*、-C(0)N(R+)2、-C(0)N(R+)C(=NR+)-N(R+)2、-N(R+)C(=NR+)-N(R+)-C(0)R*、-C(=NR+)-N(R+)2、-C(=NR+)-OR*、-N(R+)-N(R+)2、-N(R+)C(=NR+)-N(R+)2、-NR+S02R。、-NR+S02N(R+)2、-P(0)(R*)2、-P(0)(OR*)2、-0-P(0)-OR"B-P(0)(NR+)-N(R+)2;或者两个相邻取代基连同介于其间的原子一起形成具有0-3个选自由N、O和S组成的群组的环原子的5-6元不饱和或部分不饱和环。芳基(包括芳垸基、芳烷氧基、芳氧基烷基和其类似基团的芳基部分)或杂芳基(包括杂芳烷基和杂芳烷氧基和其类似基团的杂芳基部分)可含有一个或多个取代基。芳基或杂芳基的不饱和碳原子上的合适取代基实例包括-卤基、-N02、-CN、-R*、-C(R*)=C(R*)2、-C三C-R伞、-OR*、-SR°、-S(O)R0、-S02R°、-S03R°、-S02N(R+)2、-N(R+)2、-NR+C(0)R*、-NR+C(0)N(R+)2、-NR+C02R°、-0-C02R*、-OC(0)N(R+)2、-0-C(0)R*、-C02R*、-C(0)-C(0)R*、-C(0)R*、-C(0)N(R+)2、-C(0)N(R+)C(=NR+)-N(R+)2、-N(R+)C(=NR+)-N(R+)-C(0)R*、-C(=NR+)-N(R+)2、-C(=NR+)-OR*、-N(R+)-N(R+)2、-N(R+)C(=NR+)-N(R+)2、-NR+S02R°、-NR+S02N(R+)2、-P(0)(R*)2、-P(0)(OR*)2、-0-P(0)-OR*和-P(0)(NR+)-N(R+)2;或者两个相邻取代基连同介于其间的原子一起形成具有0-3个选自由N、O和S组成的群组的环原子的5-6元不饱和或部分不饱和环。各R+独立地为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基，或者同一氮原子上的两个R+连同氮原子一起形成除氮原子以外具有0-2个选自N、0和S的环杂原子的5-8元芳环或非芳环。各R"虫立地为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基。各RO为任选取代的脂族基或芳基。脂族基或非芳族杂环可经一个或多个取代基取代。脂族基或非芳族杂环的饱和碳上的合适取代基实例包括(但不限于)以上关于芳基或杂芳基的不饱和碳列出的那些取代基以及以下取代基=0、=S、=C(R*)2、=N-N(R*)2、-N-OR*、=N-NHC(0)R*、=N-NHC02R°、二N-NHS02R。或-N-R、其中各11*和R。如上所定义。非芳族杂环的氮原子上的合适取代基包括-R*、-N(R*)2、-C(0)R*、-C02R*、-C(0)-C(0)R*、-C(0)CH2C(0)R*、-S02R*、-S02N(R*)2、-C(=S)N(R*)2、-C(=NH)-N(R*)2和-NI^S02R气其中各11*如上所定义。式(/)化合物为极光激酶的抑制剂。可活体外或活体内分析化合物结合和/或抑制极光激酶的能力。活体外分析包括测定对极光激酶使底物蛋白或肽磷酸化的能力的抑制。替代的活体外分析是定量化合物与极光激酶结合的能力。抑制剂结合可通过在结合前放射性标记抑制剂，分离抑制剂/极光激酶复合物并测定放射性标记结合量来测量。或者，抑制剂结合可通过进行一项竞争实验来测定，其中以与已知放射性配体结合的极光激酶培育新抑制剂。也可分析本发明化合物影响由极光激酶活性介导的细胞或生理功能的能力。这些活性各自的分析描述于实例中和/或在此项技术中是已知的。因此，在另一方面，本发明提供抑制细胞中极光激酶活性的方法，其包含使需要抑制极光激酶的细胞与式(/)极光激酶抑制剂或其医药学上可接受的盐接触。优选地，根据本发明此方面的方法引起对所接触细胞的细胞增殖的抑制。短语"抑制细胞增殖"用以表示与未与极光激酶抑制剂接触的细胞相比，极光激酶抑制剂抑制所接触细胞中细胞数量或细胞生长的能力。细胞增殖的评定可通过使用细胞计数器计数细胞或通过细胞生存力分析(例如BrdU、MTT、XTT或WST分析)来进行。当细胞处于实体生长时(例如实体肿瘤或器官)，所述细胞增殖评定可通过(例如)以测径规测量生长并比较所接触细胞与未经接触细胞的生长尺寸来进行。优选地，与未经接触细胞的生长相比，与抑制剂接触过的细胞的生长被延迟至少约50%。在各种实施例中，与未经接触的细胞相比，所接触细胞的细胞增殖被抑制至少约75%，至少约90%或至少约95%。在一些实施例中，短语"抑制细胞增殖"包括与未经接触的细胞相比，所接触细胞的数量降低。因此，抑制所接触细胞中细胞增殖的极光激酶抑制剂可诱导所接触细胞经历生长延迟，经历生长停滞，经历渐进性细胞死亡(即细胞凋亡)或经历坏死性细胞死亡。本发明者已发现，与结构类似的化合物相比时，以环C中羧酸取代基邻位上的甲氧基取代基和环B中的非氢取代基Rb为特征的式(J)化合物在基于细胞的分析中展现令人惊讶的效能。14例如，表2展示化合物l与克莱本等人的国际专利公开案WO05/111039中所揭示的化合物i、ii和iii的比较。用三种细胞分析测试化合物1和(1)pT288极光A自身磷酸化分析；(2)HCT116细胞中的BrdU细胞增殖分析；和(3)SW480细胞中的BrdU细胞增殖分析。这些分析的方案在此项技术中是已知的并且描述于实例6中。化合物i和ii在全部三个分析中展现极类似的效能，暗示在环C中羧酸取代基的邻位上添加甲氧基取代基对细胞效能几乎无、甚至完全无影响。反之，与化合物ii相比，化合物iii在全部三个分析中展现显著增强的效能，暗示环B上的额外取代基提高了效能。鉴于这些数据，化合物l比化合物i和ii有效并不出乎意料。然而，令人惊讶的是，与化合物iii相比，化合物1也展现2倍到4倍的明显效能增强。如这些数据所示，羧酸取代基邻位上的甲氧基取代基与环B中非氢取代基Rb的组合提供出乎意料的效能增强。表2:极光激酶抑制剂的细胞效能<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>HO0HIMiii0扁0.130.94如在小鼠HCT116人类结肠癌异种移植模型中所表明，在活体内化合物l也比化合物iii有效(参见实例7)。预期式(I)化合物活体内效能的提高产生关于脱靶副作用而言治疗指数的提高。因此，在另一方面，本发明提供包含式(/)化合物或其医药学上可接受的盐和医药学上可接受的载剂的医药组合物。如果在这些组合物中使用本发明化合物的医药学上可接受的盐，那么盐优选衍生自无机或有机酸或碱。关于合适盐的论述，参见(例如)伯格(Berge)等人，药物科学杂志(/.尸/z画.Sc/.)66:1-19(1977)和雷明登氏药学的理论与实践(/em/"^o",7TjeS"'e"ce尸raWce0/尸Aaraac;y)，f20嚴，编者A.格纳罗(A.Gennaro)，利平科特威廉斯威尔金斯出版公司(LippincottWilliams&Wilkins)，2000。合适的酸加成盐的非限制性实例包括以下乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、梓檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二垸基硫酸盐、乙垸磺酸盐、延胡索酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙垸磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基-丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一酸盐。合适的碱加成盐包括(但不限于)铵盐、碱金属盐(诸如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(诸如钙盐和镁盐)、有机碱的盐(诸如二环己胺、iV-甲基-D-葡糖胺、叔丁胺、乙二胺、乙醇胺和胆碱)和氨基酸的盐(诸如精氨酸、赖氨酸)等。在一实施例中，可将式(l)化合物调配为对应的钠盐。另外，含碱性氮的基团可用以下试剂季铵化诸如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物等低碳垸基卤化物，诸如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯和硫酸二戊酯等硫酸二烷酯，诸如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物等长链卤化物，诸如苄基溴化物和苯乙基溴化物等芳烷基卤化物，和其他类似物。由此获得水或油可溶性或可分散性产物。本文中所使用的术语"医药学上可接受的载剂"是指与接受的个体(优选哺乳动物，更优选人类)相容并且适用于在不终止活性剂活性下将活性剂传递到靶位点的材料。与载剂相关的毒性或副作用(若存在)优选与所预期的活性剂用途的合理风险/效益比相匹配。术语"载剂"、"佐剂"或"媒剂"在本文中可互换使用，并且视所需要的特定剂型而定，包括任何和所有溶剂、稀释剂和其他液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂和其类似物。雷明登氏药学的理论与实践(/emVigfoM:7Tze5We"ce<a"dPracriceo/尸/iamwc;y)，第20嚴，编者A.格纳罗(A.Gennaro),利平科特'威廉斯'威尔金斯出版公司(LippincottWilliams&Wilkins)，2000中揭示用于调配医药学上可接受的组合物的各种载剂和用于其制备的已知技术。除非(诸如)因产生任何不当生物效应或以有害方式与医药学上可接受的组合物的任何其他组分相互作用而与本发明的化合物不相容，否则任何常规载剂介质的使用均涵盖在本发明的范围内。可用作医药学上可接受的载剂的材料的一些实例包括(但不限于)离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(诸如人类血清白蛋白)、缓冲剂物质(诸如磷酸氢二钠、磷酸氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾、氢氧化镁和氢氧化铝、甘氨酸、山梨酸或山梨酸钾)、饱和植物脂肪酸、水、无热原水、盐或电解质(诸如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠和锌盐)的部分甘油酯混合物、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、羊毛脂、糖(诸如乳糖、葡萄糖、蔗糖)、淀粉(诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉)、纤维素和其衍生物(诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)、粉末状黄芪胶；麦芽、明胶、滑石、赋形剂(诸如可可脂和栓剂蜡)、油(诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、乙二醇(诸如丙二醇和聚乙二醇)、酯(诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯)、琼脂、海藻酸、等渗生理盐水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)、醇(诸如乙醇、异丙醇、十六醇和甘油)、环糊精、润滑剂(诸如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁)、石油烃(诸如矿物油和矿脂)。根据调配者的判断，组合物中也可存在着色剂、脱模剂、涂覆剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂以及抗氧化剂。本发明的医药组合物可通过此项技术中所熟知的方法来制造，诸如常规的造粒、混合、溶解、囊封、冻干或乳化法。可产生各种形式的组合物，包括颗粒、沉淀或微粒、粉末(包括冷冻干燥、旋转干燥或喷雾干燥粉末、非晶粉末)、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射液、乳液、酏剂、悬浮液或溶液。视所需要的特定剂型而定，调配物可任选地含有溶剂、稀释剂和其他液体媒剂、分散或悬浮助剂、表面活性剂、pH值调节剂、等渗剂、17增稠剂或乳化剂、稳定剂和防腐剂、固体粘合剂、润滑剂和其类似物。根据一优选实施例，本发明的组合物经调配以向哺乳动物(优选人类)投药。本发明的医药组合物可经口、肠道外、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻内、经颊、经阴道或经由植入式储存器投与。本文中所使用的术语"肠道外"包括皮下、静脉内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输液技术。所述组合物优选经口、静脉内或皮下投与。可将本发明的调配物设计为短效、快速释放或长效的。此外，化合物可以局部而非全身方式投与，诸如在肿瘤部位投与(例如通过注射)。用于经口投药的液体剂型包括(但不限于)医药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物以外，所述液体剂型也可含有此项技术中常用的惰性稀释剂，例如，水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、环糊精、二甲基甲酰胺、油(尤其是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，和其混合物。除惰性稀释剂以外，口服组合物也可包括佐剂，诸如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮液可使用合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂，根据已知技术调配。无菌可注射制剂也可为无毒肠道外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如于1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒剂和溶剂中，可采用水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，常规采用无菌、不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可采用包括合成甘油单酯或甘油二酯在内的任何温和的不挥发性油。此外，在注射剂的制备中也使用诸如油酸等脂肪酸。可注射调配物可(例如)通过经由细菌阻留过滤器过滤，或通过将杀菌剂并入在使用前可溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式中而得以杀菌。经调配以供肠道外投与的组合物可通过快速注射或通过定时推注而注射或者可通过连续输液来投与。为延长本发明化合物的效应，经常需要减缓从皮下或肌肉内注射吸收化合物。这可通过使用水溶性不良的结晶或非晶材料的液体悬浮液完成。化合物的吸收速率则视其溶解速率而定，溶解速率又可视晶体大小和结晶形式而定。或者，肠道外投与的化合物的延迟吸收是通过将化合物溶解或悬浮于油媒剂中完成。可注射储槽形式是通过在可生物降解聚合物(诸如聚乳酸-聚乙醇酸)中形成化合物的微胶囊基质而制成。视化合物与聚合物的比率和所采用的特定聚合物的性质而定，可控制化合物释放速率。其他可生物降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。也通过将化合物包裹于与身体组织相容的脂质体或微乳液中而制备储槽式可注射调配物。用于直肠或阴道投药的组合物优选为可通过将本发明的化合物与合适的无刺激性赋形剂或载剂(诸如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合而制备的栓剂，所述赋形剂或载剂在周围温度下为固体，但在体温下为液体且因此融化于直肠或阴道腔中并释放活性化合物。用于经口投药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在所述固体剂型中，活性化合物与至少一种惰性、医药学上可接受的赋形剂或载剂，诸如柠檬酸钠或磷酸二钙混合，和/或与以下各物混合a)填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂，诸如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，诸如甘油；d)崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，诸如石蜡；f)吸收促进剂，诸如季铵化合物g)湿润剂，诸如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸附剂，诸如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包含缓冲剂，诸如磷酸盐或碳酸盐。类似类型的固体组合物也可用作使用如乳糖以及高分子量聚乙二醇和其类似物等赋形剂的软质填充明胶胶囊和硬质填充明胶胶囊中的填料。可用包衣和外壳(诸如肠衣和医药调配技术中众所熟知的其他包衣)制备固体剂型片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂。其可任选地含有遮光剂并且也可具有使得其仅或优选在肠道的某部分(任选地)以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。类似类型的固体组合物也可用作使用如乳糖以及高分子量聚乙二醇和其类似物等赋形剂的软质填充明胶胶囊和硬质填充明胶胶囊中的填料。活性化合物也可为具有一种或多种如上文所述的赋形剂的微胶囊形式。可用包衣和外壳(诸如肠衣、释放控制型包衣和医药调配技术中众所熟知的其他包衣)制备固体剂型片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂。在所述固体剂型中，可将活性化合物与至少一种诸如蔗糖、乳糖或淀粉等惰性稀释剂掺和。所述剂型也可包含(如为正常操作)除惰性稀释剂外的额外物质，例如压片润滑剂和其他压片助剂，诸如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包含缓冲剂。其可任选地含有遮光剂并且也可具有使得其仅或优选在肠道的某部分(任选地)以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。用于局部或透皮投与本发明化合物的剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、粉末、溶液、喷雾、吸入剂或贴片。在无菌条件下将活性组分与医药学上可接受的载剂和(根据需要)任何所需防腐剂或缓冲剂掺和。眼用调配物、滴耳剂和滴眼剂也涵盖于本发明的范围内。此外，本发明涵盖使用透皮贴片，其具有使化合物受控传递至身体的附加优势。所述剂型可通过将化合物溶解或分配在适当的介质中而制成。吸收增强剂也可用以增加化合物穿过皮肤的通量。所述速率可通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制。本发明的医药组合物特别适用于与极光激酶介导的病症相关的治疗应用。本文中所使用的术语"极光激酶介导的病症"包括由极光激酶表达或活性的增加所引起或以极光激酶表达或活性的增加为特征，或需要极光激酶活性的任何病症、疾病或病况。术语"极光激酶介导的病症"也包括抑制极光激酶活性为有益的任何病症、疾病或病况。极光激酶介导的病症包括增生性病症。增生性病症的非限制性实例包括慢性发炎性增生性病症，例如牛皮癣和类风湿性关节炎；增生性眼病，例如糖尿病性视网膜病变；良性增生性病症，例如血管瘤；和癌症。优选地，所述组合物经调配以向患有极光激酶介导的病症或处于患极光激酶介导的病症的危险中或在经历极光激酶介导的病症复发的患者投与。本文中使用的术语"患者"意指动物，优选为哺乳动物，更优选为人类。本发明优选的医药组合物为经调配以供口服、静脉内或皮下投与的那些医药组合物。然而，含有治疗有效量的本发明化合物的任何上述剂型也在常规实验的范围内，并因此也在本发明的范围内。在一些实施例中，本发明的医药组合物可另外包含另一种治疗剂。优选地，所述其他治疗剂为通常向患有所治疗疾病或病况的患者投与的治疗剂。"治疗有效量"意指足以引起可检测的极光激酶活性减低或极光激酶介导的病症严重性减低的量。所需极光激酶抑制剂的量将视抑制剂对既定细胞类型的有效性和治疗所述病症所需的时间长度而定。也应了解任何特定患者的特定剂量和治疗方案将视多种因素而定，包括所采用特定化合物的活性，患者年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、投药时间、排泄速率、药物组合、治疗医师的判断和所治疗特定疾病的严重程度。存在于本发明组合物中的额外治疗剂的量一般将不超过通常在包含这种治疗剂作为唯一活性剂的组合物中所投与的量。优选地，所述额外治疗剂的量将是在通常存在于包含这种药剂作为唯一治疗活性剂的组合物中的量的约50%至约100%的范围内。为便于投与和使剂量均匀，可将本发明的组合物调配为单位剂型。本文中所使用的表述"单位剂型"是指适合于待治疗患者的药剂的物理离散单位。然而，应理解本发明的化合物和组合物的日用总量将由主治医师在合理医学判断的范围内确定。肠道外投与的单位剂型可在安瓿中或在多剂量容器中。在另一方面，本发明提供治疗患有极光激酶介导的病症或处于患极光激酶介导的病20症的危险中或正在经历极光激酶介导的病症复发的患者的方法。所述方法包含向患者投与本发明化合物或医药组合物的步骤。本发明的化合物和医药组合物可用以(例如)在患有上述增生性病症的患者体内达成有益的治疗或预防效果。本发明的化合物和医药组合物特别适用于治疗癌症。本文中所使用的术语"癌症"是指以不受控制或不可调控的细胞增殖、减低的细胞分化、不适当的侵入周围组织的能力和/或在异位部位建立新生长的能力为特征的细胞病症。术语"癌症"包括(但不限于)实体肿瘤和血源性肿瘤(bloodbornetumor)。术语"癌症"涵盖皮肤、组织、器官、骨骼、软骨、血液和血管疾病。术语"癌症"另外涵盖原发性和转移性癌症。可通过本发明方法治疗的实体肿瘤的非限制性实例包括胰腺癌；膀胱癌；结肠直肠癌；乳癌，包括转移性乳癌；前列腺癌，包括雄激素依赖型和非雄激素依赖型前列腺癌；肾癌，包括(例如)转移性肾细胞癌；肝细胞癌；肺癌，包括(例如)非小细胞肺癌(NSCLC)、细支气管肺泡癌(BAC)和肺腺癌；卵巢癌，包括(例如)进行性上皮癌或原发性腹膜癌；子宫颈癌；胃癌；食道癌；头颈部癌，包括(例如)头颈部鳞状细胞癌；黑素瘤；神经内分泌癌，包括转移性神经内分泌肿瘤；大脑肿瘤，包括(例如)神经胶质瘤、间变性少突神经胶质瘤、成人多形性胶质母细胞瘤和成人间变性星形细胞瘤；骨癌；和软组织肉瘤。在一些其他实施例中，癌症为恶性血液病。恶性血液病的非限制性实例包括急性骨髓白血病(AML);慢性骨髓性白血病(CML)，包括CML加速期和CML急变期(CML-BP);急性淋巴母细胞性白血病(ALL);慢性淋巴细胞性白血病(CLL);霍奇金氏病(Hodgkin'sdisease)(HD);非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，包括滤泡性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤；B细胞淋巴瘤；T细胞淋巴瘤；多发性骨髓瘤(MM);瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症(Waldenstrom'smacroglobulinemia);骨髓发育不良综合症(MDS),包括难治性贫血(RA)、难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多(ringedsiderblast)(RARS)、难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)和转化中的RAEB(RAEB-T);和脊髓增生性综合症。在一些实施例中，本发明的化合物和组合物是用以治疗极光激酶活性增强的癌症。在一些实施例中，本发明的化合物或组合物是用以治疗患有癌症或处于患癌症的危险中或在经历癌症复发的患者，所述癌症选自由结肠直肠癌、卵巢癌、乳癌、胃癌、前列腺癌和胰腺癌组成的群组。在某些实施例中，癌症选自由乳癌、结肠直肠癌和胰腺癌组成的群组。在一些实施例中，本发明的极光激酶抑制剂与另一种治疗剂联合投与。所述其他治疗剂也可抑制极光激酶或可通过不同机制运作。在一些实施例中，所述其他治疗剂为通常向患有所治疗疾病或病况的患者投与的治疗剂。本发明的极光激酶抑制剂可与其他治疗剂以单一剂型或分离剂型投与。当以分离剂型投与时，其他治疗剂可在投与本发明的极光激酶抑制剂之前、同时或之后投与。在一些实施例中，本发明的极光激酶抑制剂与选自由细胞毒性剂、放射性疗法和免疫疗法组成的群组的治疗剂联合投与。适用于与本发明的极光激酶抑制剂组合使用的细胞毒性剂的非限制性实例包括抗代谢物，例如卡培他滨(capecitibine)、吉西他滨(gemcitabine)、5-氟尿嘧啶或5-氟尿嘧啶/亚叶酸、氟达拉滨(fludarabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、喷司他丁(pentostatin)和甲氨蝶呤；拓扑异构酶抑制剂，包括(例如)依托泊苷(etoposide)、替尼泊甙(teniposide)、喜树碱(camptothecin)、拓扑替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、多柔比星(doxorubicin)和道诺霉素(daunombicin);长春花属生物碱，包括(例如)长春新碱(vincristine)和长春碱(vinblastin);紫杉垸，包括(例如)太平洋紫杉醇(paclitaxel)和多烯紫杉醇(docetaxel);铂试剂，包括(例如)顺铂、卡铂和奥赛力铂(oxaliplatin);抗生素，包括(例如)放线菌素D(actinomycinD)、博来霉素(bleomycin)、丝裂霉素C、P可霉素(adriamycin)、道诺霉素、伊达比星(idanibicin)、多柔比星和聚乙二醇化脂质体多柔比星；垸化剂，诸如美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulfan)、塞替派(thiotepa)、异环磷酰胺(ifosfamide)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、司莫司汀(semustine)、链脲佐菌素(streptozocin)、达卡巴嗪(decarbazine)和环磷酰胺；沙利度胺(thalidomide)和相关类似物，包括(例如)CC-5013和CC-4047;蛋白质酪氨酸激酶抑制剂，包括(例如)甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)和吉非替尼(gefitinib);抗体，包括(例如)曲妥珠单抗(trastuzumab)、利妥昔单抗(rituximab)、西妥昔单抗(cetuximab)禾t]贝伐单抗(bevacizumab);米托蒽酉昆(mitoxantrone);地塞米松(dexamethasone);强的松(prednisone);和替莫唑胺(temozolomide)。为了更完整地理解本发明，列出以下制备和测试实例。这些实例说明如何制造或测试特定化合物并且不认为其以任何方式限制本发明的范围。具体实施例方式实例定义22AcOH乙酸ATP三磷酸腺苷BrdU5-溴-2'-脱氧尿苷BSA牛血清白蛋白DCM二氯甲烷DMSO二甲亚砜DTT二硫苏糖醇EDTA乙二胺四乙酸EtOH乙醇HPbCD羟丙基e环糊精MeOH甲醇MTT甲基噻唑四唑総WST(4-[3-(4-碘苯基)-2-(4-硝基苯基)-2H-5-四唑]-l,3-苯二磺酸钠盐)PKAcAMP依赖性蛋白激酶THF四氢呋喃h小时min分钟m/z质量电荷比MS质谱HRMS高分辨质谱熔点在MEL-TEMPII毛细管测熔点装置上测定并且未进行校正。1HNMR谱记录于BrukerAvance400质谱仪上。在WatersZQ2000(3.5kV毛细管电压，30V锥孔电压)质谱仪上获得质谱。通过AtlanticMicrolab进行元素分析。实例1:制备4-([9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸(1)可如克莱本等人的美国专利公开案2005-256102中所述制备8-氯-4-[(二甲氨基)亚甲基卜l-(2-氟-6-甲氧苯基)-3，4-二氢-5H-2-苯并氮杂卓-5-酮(W)。以类似于杉木(Sugiki)等人的国际专利公开案WO01/042199所述的方式制备4-{[氨基(亚氨基)甲基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸'HCl(v)。将甲醇(50.0mL)添加至装备有搅拌棒和回流冷凝器的100mL圆底烧瓶中的iv(2.39g，6.42mmo1)、v(1.77g，7.21mmol)和碳酸钾'1.5[H20](2,65g，16.0mmol)。在回流下搅拌反应混合物16小时。将反应混合物冷却至室温，以水(450mL)稀释并以1NHC1酸化至pH值为l。添加乙醚(200mL)并搅拌混合物15分钟。通过过滤收集所得沉淀并通过快速硅胶色谱法(NH40H:MeOH:DCM，0.5:5:94.5至2:20:78)纯化以产生呈棕色固体的铵盐。将固体悬浮于水(100mL)中并且在快速搅拌下添加1NHCl至pH值为1。搅拌混合物约30分钟，且接着添加乙醚(50mL)和乙酸乙酯(5mL)并在室温下搅拌混合物约1小时。产物收集于烧结漏斗(精细)上，用水(50mL)和乙醚(50mL)洗涤，并且在4(TC下于真空中干燥过夜，得到1.65g(507。产率)的4-([9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-(1][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸(1)。NMR(DMSO-d6)S12.08(s，1H),10,23(s,1H)，8.72(s,1H)，8.29(d,1H)，7.95(brs，1H)，7.80(dd,1H),7.70(d,1H)，7.4-7.35(m,2H)，7.21(brs，1H)，6.9(brs,2H),4.9(brs,1H)，3.9(brs,1H),3.85(s,3H),3.3(brs,3H);MSm々519(M++H,100%)。化合物2-18通过类似于那些关于化合物1或在克莱本等人的WO05/111039中描述的方法制备。实例2:制备4-([9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠多晶型1向4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基卜2-甲氧基苯甲酸(98.0g，190mmol)于乙醇(2.0L)中的搅拌悬浮液中添加水(199mL)中1.044M氢氧化钠。搅拌所得均匀溶液l小时，期间形成粘稠沉淀。通过过滤收集产物并以乙醇(0.5L)和乙醚(1.0L)洗涤。所得固体在60-7(TC下于真空中干燥4天，得到88.6g(86.8%)呈浅棕色固体的4-U9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠，mp为225。C(分解)。^NMR(DMS0-d6)S9.86(s，1H),8.60(s，1H),8.29(d,1H)，7.79(dd,1H),7.60(brs，1H)，7.40(dd，1H)，7.29(d，1H)，7.25-7.15(m，2H)，6.9(brs，2H)，4.9(brs，1H)，3,8(brs，1H)，3.70(s,3H),3.35(brs,3H);MSm々519(M+-Na+H,100%);CHN分析计算值C27H19ClFN4NaO40.33EtOH1.3H20:C，57.33;H,4.10;N,9.67。实验值C,57.14;H,3.99;N,9.65。实例3:制备4-U9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠多晶型2将4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠多晶型1(100mg)悬浮于水(0.2mL)和乙醇(2mL)中并将混合物在70'C加热下搅拌6小时。使混合物冷却到室温，且将浅黄色固体收集于烧结漏斗上并在7(TC下于真空中干燥3天，得到70mg多晶型2,mp为265。C。^NMR(DMSO-d6)S:9.86(s，1H)，8.60(s，1H)，8.29(d,1H),7.79(dd，1H),7.60(brs,1H)，7.40(dd,1H)，7.29(d，1H),7.25-7,15(m,2H)，6.9(brs，2H),4.9(brs，1H),3.8(brs,1H)，3.70(s,3H)，3.35(brs，3H)。MSm/z519(M+.Na+H，100%)。实例4:蛋白激酶的表达和纯化极光A酶的表达和纯化使用标准杆状病毒载体和昆虫细胞表达系统(Bac-to-Bac,英杰公司(Invitrogen))来表达具有氨基端六聚组氨酸标签的重组小鼠极光A(His-极光A)。如制造商所述使用Ni-NTA琼脂糖(凯杰公司(Qiagen))从昆虫细胞纯化可溶性重组小鼠极光A并且在S75尺寸排阻色谱柱(安发玛西亚生物技术公司(AmershamPharmaciaBiotech))上进一步纯化。极光B酶的表达和纯化使用标准杆状病毒载体和昆虫细胞表达系统(Bac-to-Bac③,英杰公司)来表达具有氨基端六聚组氨酸标签的重组小鼠极光B(His-极光B)。如制造商所述使用Ni-NTA琼脂糖(凯杰公司)从昆虫细胞纯化可溶性重组小鼠极光B。实例5:蛋白激酶分析极光ADELFIA⑧激酶分析小鼠极光A酶促反应总计25uL并且含有25mMTris-HCl(pH值为8.5)、2.5mMMgCl2、0.05%Surfact-AMPS-20、5mM氟化钠、5mMDTT、1mMATP、3UM肽底物(生物素-e-Ala-QTRRKSTGGKAPR-NH2)和0.5nM重组小鼠极光A酶。将具有和不具有测试化合物的酶促反应混合物在室温下培育10分钟，随后以100UL终止缓冲液(1%BSA、0.05%Surfact-AMPS-20禾卩100mMEDTA)终止。将总共100yL酶反应混合物转移到中性链亲和素(Neutravidin)涂覆的％孔板(皮尔斯公司(Pierce))的孔中并且在室温下培育30分钟。孔用洗涤缓冲液(25mMTris，150mM氯化钠和0.1%吐温20(Tween20))洗涤并且以100yL含有1%BSA、0.05%Surfact-AMPS-20、抗磷酸化-PKA兔多克隆抗体(1:2000，纽英伦生物技术公司(NewEnglandBiolabs))和铕标记的抗兔IgG(l:2000,珀金埃尔默公司(PerkinElmer))的抗体反应混合物培育1小时。洗涤孔并接着使用100uL增强溶液(EnhancementSolution)(珀金埃尔默公司)释放所结合的铕。使用WallacEnViskm(珀金埃尔默公司)进行铕的定量。极光BDELFIA⑧激酶分析小鼠极光B酶促反应总计25wL,含有25mMTris-HCl(pH值为8.5)、2.5mMMgCl2、0.025%Surfact-AMPS-20(皮尔斯公司)、1%甘油、1mMDTT、lmMATP、3iiM肽底物(生物素-e-Ala-QTRRKSTGGKAPR-NH2)和20nM重组小鼠极光B酶。将具有或不具有测试化合物的酶促反应混合物在室温下培育3小时，随后以IOOUL终止缓冲液(1呢BSA、0.05%Surfact-AMPS-20和100mMEDTA)终止。将总共100wL酶反应混合物转移到中性链亲和素涂覆的96孔板(皮尔斯公司)的孔中并且在室温下培育30分钟。孔用洗涤缓冲液(25mMTris,150mM氯化钠和0.1%吐温20)洗涤并且以100uL含有1%BSA、0.05%Surfact-AMPS-20、抗磷酸化-PKA兔多克隆抗体(1:2000，纽英伦生物技术公司)和铕标记的抗兔IgG(l:2000，珀金埃尔默公司)的抗体反应混合物培育1小时。洗涤孔并接着使用100txL增强溶液(珀金埃尔默公司)释放所结合的铕。使用WallacTMEnVision(珀金埃尔默公司)进行铕的定量。实例6:细胞分析pT288极光A自身磷酸化分析使人类肿瘤细胞(HCT-116，从ATCC获得)在96孔盘上，在补充有10%小牛血清和200nML-谷氨酰胺的麦克考依(McCoy)氏5A培养基中生长。培育后，以75uL新鲜培养基替代生长培养基并且将25WL测试化合物于二甲亚砜(DMSO)中的两倍稀释液添加至细胞中达到5至0.010wM范围内的最终浓度。各稀释的测试化合物在盘上重复添加4行，并向两列的各孔中添加DMSO(20nM)作为未经处理的对照物。在湿润的细胞培养室中，在37'C下以测试化合物或DMSO处理细胞60分钟。接着将细胞以磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)中4%多聚甲醛固定IO分钟，以PBS中0.5%曲拉通X-100(TritonX-100)渗透10分钟并且于PBS中洗涤两次。将细胞以磷酸化-极光2/AIK(T288)兔抗体(1:60)和抗磷酸化-Ser/Thr-Pro、MPM2小鼠抗体(1:750)，随后以与阿雷克斯488(Alexa488)接合的山羊抗兔IgG(l:180)和与阿雷克斯594(Alexa594)接合的鸡抗小鼠IgG(l:180;分子探针公司(MolecularProbes))染色。接着将细胞以与阿雷克斯488(Alexa488)接合的鸡抗山羊IgG(l:180,分子探针公司)和赫斯特(Hoechst)(l:50，000)染色。使用Discovery-l高容量成像系统观测细胞。以200倍放大来捕捉每孔九或十六个位点的图像。通过使用麦特莫夫(Metamorph)软件测量MPM2免疫阳性(有丝分裂)细胞内的pT288(极光A自身磷酸化)荧光强度来测定对极光A的抑制。通过计算经测试化合物处理的样本中相对于经DMSO处理的对照物中pT288荧光强度的减低来产生浓度反应曲线，并由那些曲线确定生长抑制(IC50)值。在此分析中化合物1-28均展现小于或等于0.03"M的IC5Q值。在此分析中化合物1-8展现小于或等于0.01uM的IC5o值。BrdU细胞增殖分析利用细胞增殖酶联免疫吸附分析法(ELISA)，根据制造商的建议使用5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)比色法测定试剂盒测量各细胞系的细胞增殖。所述分析通过定量并入复制脱氧核糖核酸(DNA)中的BrdU来测量细胞增殖。简单的说，将各孔在湿润的细胞培养室中在37'C下以10liLBrdU标记试剂培育2小时。抽出标记介质后，通过向各孔中添加200yL乙醇将细胞固定且变性并在室温下培育30分钟。抽出乙醇并且向细胞中添加100uL与过氧化物酶接合的抗BrdU抗体(抗BrdU-POD;抗体稀释缓冲液中1:100)。在室温下以抗体培育细胞90分钟。接着以每孔250UL洗涤缓冲液洗涤细胞3次并向各孔中添加IOOliL四甲基联苯胺。在分光光度分析之前将细胞在室温下培育15至30分钟。使用司派曲玛普朗斯384(SpectraMaxPlus384)平板读取器(加利福尼亚州森尼韦尔的分子装置公司(MolecularDevices,SunnyValeCA))来测量370nm时各孔的吸光率。通过计算以测试化合物处理的样本中相对于经DMSO处理的对照物中光学密度的减低来产生浓度反应曲线。在此分析中，HCT116细胞中化合物1-18均展现小于或等于0.1uM的LDso值。在此分析中，在SW480细胞中化合物1-3、S、7-14、17和18均展现小于或等于1.0UM的LD5Q。未测试化合物4和6。实例7:活体内分析活体内肿瘤功效模型使用23号针，将麦克考依氏5A培养基中的HCT-116(1X10"细胞无菌注射于雌性CD-1裸小鼠(8周大，查士睿华公司(ChariesRiver))右背侧的皮下空隙中。使用标准程序(0.5X(长度X宽度")计算肿瘤体积。当肿瘤达到约200mr^体积时，对小鼠口服给予10%HPbCD+1%NaHC03媒剂中各种剂量的化合物1或化合物m。经由22号口服灌胃针投与各剂量(0.1mL)。对照动物接受单独的媒剂。对动物每日给药一次历时21天，并且各组有10只动物。每周测量两次肿瘤尺寸和体重。在此研究中所有剂量的化合物1和iii耐受性良好。各剂量的化合物1产生比化合物iii长的肿瘤生长延迟[TGD=(经处理动物达到1000mn^平均肿瘤体积的时间)-(对照动物达到1000mn^平均肿瘤体积的时间)]和比化合物iii高的肿瘤生长抑制[TGI-(对照动物的平均肿瘤体积-经处理动物的平均肿瘤体积)X100/(对照动物的平均肿瘤体积)]。尽管已为清晰和理解目的以一定程度详细描述前述的本发明，但认为这些特定实施例是说明性的而非限制性的。所属领域的技术人员阅读本揭示案后将了解，在不偏离由随附权利要求书而非特定实施例所界定的本发明的真实范围下可进行形式和细节的各种改变。本文中所引用的专利和科学文献建立了所属领域的技术人员可用的知识。除非另有说明，否则本文中所使用的所有技术和科技术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。本文中所引用的已授予的专利、申请案和文献以如同其各自被特别和个别说明以引用的方式并入般的相同程度以引用的方式并入本文中。在矛盾的情况下，本揭示案，包括定义将为优先。权利要求1.一种式(I)的化合物或其医药学上可接受的盐，其中Ra选自由C1-3脂族基、C1-3氟脂族基、-R1、-T-R1、-R2和-T-R2组成的群组；T为任选经氟取代的C1-3亚烷基链；R1为任选取代的芳基、杂芳基或杂环基；R2选自由卤基、-C≡C-R3、-CH＝CH-R3、-N(R4)2和-OR5组成的群组；R3为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；各R4独立地为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；或者同一氮原子上的两个R4连同所述氮原子一起形成除所述氮原子以外具有0-2个选自N、O和S的环杂原子的任选取代的5至6元杂芳基或4至8元杂环基环；R5为氢或任选取代的脂族基、芳基、杂芳基或杂环基；并且Rb选自由氟、氯、-CH3、-CF3、-OH、-OCH3、-OCF3、-OCH2CH3和-OCH2CF3组成的群组。2.根据权利要求1所述的化合物，其中Ri为任选经一个或两个独立地选自由卤基、Cw脂族基和d.3氟脂族基组成的群组的取代基取代的5或6元芳基、杂芳基或杂环基环。3.根据权利要求l所述的化合物，其中Ra为卤基、Cw脂族基、d.3氟脂族基、-OH、-。(d—3脂族基)、-0(C"3氟脂族基)或-C^C-R3、-CH=CH-R3，其中R3为氢、C!-3脂族基、Cw氟脂族基或-CH2-OCH3;或者Ra为任选经一个或两个独立地选自由卤基、3脂族基和d.3氟脂族基组成的群组的取代基取代的苯基、呋喃基、吡咯烷基或噻吩基环。4.根据权利要求3所述的化合物，其中Ra选自由下列各基团组成的群组氯、氟、Cw脂族基、C-3氟脂族基、-OCH3、-OCF3、-C三C-H、-C=C-CH3、-C=C-CH2OCH3、-CH=CH2、-CH=CHCH3、W-甲基吡咯烷基、噻吩基、甲基噻吩基、呋喃基、甲基呋喃基、苯基、氟苯基和甲苯基。5.—种化合物，其为4-U9-乙炔基-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-《[2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸或其医药学上可接受的盐。6.—种化合物，其为4-{[7-(2-氟-6-甲氧苯基)-9-(1-甲基-1//-吡咯-2-基)-5//-嘧啶并[5,4-《[2]苯并氮杂卓-2-基腐基}-2-甲氧基苯甲酸或其医药学上可接受的盐。7.—种化合物，其为4-U9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-5H-嘧啶并[5，4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸或其医药学上可接受的盐。8.—种化合物，其为4-{[9-氯-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-511-嘧啶并[5,4-(1][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基}-2-甲氧基苯甲酸钠。9.一种医药组合物，其包含根据权利要求1至8中任一权利要求所述的化合物。10.—种抑制细胞中极光(Aurora)激酶活性的方法，其包含使需要抑制极光激酶的细胞与根据权利要求1至8中任一权利要求所述的化合物接触。11.根据权利要求IO所述的方法，其中所述极光激酶为极光激酶A。12.—种治疗有需要的患者中极光激酶介导的病症的方法，其包含向所述患者投与治疗有效量的根据权利要求1至8中任一权利要求所述的化合物。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述极光激酶介导的病症为癌症。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述癌症选自由结肠直肠癌、卵巢癌、乳癌、胃癌、前列腺癌和胰腺癌组成的群组。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述癌症选自由乳癌、结肠直肠癌和胰腺癌组成的群组。全文摘要本发明涉及式(I)的化合物和治疗癌症的方法。具体来说，本发明提供极光激酶A的有效抑制剂、包含所述化合物的医药组合物和使用所述化合物治疗癌症的方法。文档编号C07D487/04GK101547924SQ200780042383公开日2009年9月30日申请日期2007年11月14日优先权日2006年11月16日发明者克里斯托弗·F·克莱本,托德·B·塞尔斯,斯蒂芬·G·斯特劳德申请人:米伦纽姆医药公司