专利名称：：双取代-l-酒石酸二甲酯类化合物及其医药用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及有机化学、药物化学和药理学领域，具体而言，本发明涉及双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐以及它们的制备方法和医药用途，该类化合物被发现有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能；同时対五株人体肿瘤细胞显示出一定的细胞毒性。该类化合物可以预期用于制备治疗相关的乙型肝炎病毒感染性疾病以及肿瘤疾病的药物。
背景技术：
：乙型病毒型肝炎(HepatitisB)是中国多发和常见重型传染性疾病，其病原体是乙型肝炎病毒(HBV)。全国约1.2亿HBV携带者，每年死于原发性肝癌的15万人中，绝大多数与乙型肝炎感染有关。目前，临床上对HBV病患的治疗方案只能达到抑制HBV复制和继发感染，最主要药物仍是核苷类药物如拉米呋啶(3-TC)、恩替卡韦、阿德福韦(ADV)等，它们虽然能有效地控制病情，但一则售价昂贵，二则长期使用均可出现耐药性，以及不同程度的反跳，三是长期使用核苷类药物出现的较为明显的众所周知的不良作用。所以从民族民间长期使用的药物中发现新的非核苷类乙肝病毒抑制剂有着很大的意义，选择先导化合物主要的判断指标在于该类新颖的非核苷类物质必须具有对乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)和/或乙肝表面抗原(HBsAg)的抑制活性。天然产物中的绿原酸(chlorogenicacid)是由咖啡酸(caffeicacid)与奎尼酸(鸡纳酸，quinkacid)组成的一取代的縮酚酸，为众多药材(如金银花、茵陈、杜仲)以及中成药(如复肝宁、双花注射液、粉刺口服液)中抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分，同时是某些中药制剂质量控制的重要指标。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用，尤其是在病毒防治领域有重要用途[赵昱等"咖啡酰奎尼酸类化合物研究进展"，中国中药杂志，2006，31(11)，869-874]。近期，科学家从菊科植物菊苣中发现了新的抗病毒咖啡酰有机酸酯类化合物L-菊苣酸(二咖啡酰酒石酸)[Robinson，W,E,Jr./"/e"A/k/.1998,15，129-137]。此先导化合物对HIV病毒整合酶(IN)具有强效抑制活性，同时无毒范围较大，有利于发展成为抗HIV型药物。相关的构效关系研究跟随开展，并制备出多种L-菊苣酸衍生物，其中活性化合物抑制fflV-l整合酶活性的IC5Q值约为0.8l.liLiM[King,P丄，Robinson,W.E.Jr.等，《/脸d1999,42,497—509;Lin，Z.，Bruke,T.R,Jr.,JMW.C/^m.1999,42,1401—1414]。上述研究报道结果指出咖啡酰结构中的邻苯二酚部分在整个分子的抑制活性中起着相当重要的作用，然而过多的酚羟基也会带来较大的毒性。因此为了寻找高效低毒的新的先导化合物，我们的设计中将L-菊苣酸中的咖啡酰部分进行改造将其改造成为不同取代的芳基烯丙酰基结构，并用烷氧基取代的苯甲酰基做尝试。另外，上述研究报道中还指出，将酒石酸的羧基甲酯化并同时将羟基瑪行酰化反应后所得到的分子仍然有抗HIV-1整合酶的活性。因此，我们设计合成了一系列不同取代的苯丙烯酰-L-酒石酸二甲酯。在本说明书中描述的系列化合物中，化合物I~d(2,3-二-氧-[3-苯烯丙酰]—L-酒石酸二甲酯)虽然己有报道[Utley,JamesH.P.等，Jowma/o/1995，15,1961-1970]，但该文报道的是化合物I~d参与在电解液中进行非对映立体选择性合成，并未披露任何关于化合物的生理活性方面的信息。由于抗HIV药物和HBV药物的高同源性，本发明对合成出的双取代-L-酒石酸二甲酯类测试了其对乙肝表面抗原HBsAg的抑制活性，以期寻找更多样的能对乙肝病毒复制产生抑制作用的L-菊苣酸类似物。为了探索本发明制备得到的双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物的其他生理活性，我们还采用了MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐]法对此类化合物针对五种人体肿瘤体外培养细胞株[人子宫颈癌细胞(Hela)、人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)、人肺癌细胞(A549)、人原髓细胞白血病细胞(HL-60)、人结肠腺癌(LS174T)]进行了生长抑制活性测试，^1而完成本发明。
发明内容本发明的目的在于提供一类用于制备新的抗乙肝病毒和细胞毒类抗肿瘤药物，具体而言，本发明提供了一类式(I)所示结构的双取代-L-酒石酸二甲用盐H贝CjC02CKR,~"0"5——&式(I)其中取代基Rt和R2可以相同或不同，分别选自2-呋喃环-3-烯丙酰基，2位或4位甲氧基取代的苯甲酰基，邻位或间位或对位二甲氧基取代的苯甲酰基，或邻位或间位或对位卤素二取代的3-苯烯丙酰基；其条件是&和112不能同时为3-(3,4-二甲氧基苯)-烯丙酰基，也不能同时为3-(3,4-二氯苯)-烯丙酰基。本发明的另一目的是提供了所述之双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐用于制备抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的药物用途。本发明的又一目的是提供了式(I)化合物及其可药用盐用于制备细胞毒类抗肿瘤药物的用途。本发明的再一个目的是提供了一种含有式(I)化合物的用于抗乙肝病毒疾病的药物组合物和/或细胞毒类抗肿瘤药物。根据本发明，该药物组合物中可加入各种药用赋形剂，添加剂及载体。本发明优选的式(I)化合物列举如下I-a.2，3-二-氧-(4-甲氧基苯甲酰)-L-酒石酸二甲酯；I-b.2，3-二-氧-[3-(2,4-二氯苯)-烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯；I-c.2，3-二-氧-[3-(2-呋喃基)-烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯。H3COOC,恥O,COOCH3I—aHcoc=oooc=o6本发明还提供了化合物2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯(14)的制备方法以及其用于制备抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)药物和细胞毒赠抗肿瘤药物的用途。oo具体实施例方式本发明的式(I)化合物以及化合物(I-d)或其可药用盐对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)有一定的抑制作用，其还对五种人体肿瘤体外培养细胞株[人子宫颈癌细胞(Hela)、人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)、人肺癌细胞(A549)、人原髓细胞白血病细胞(HL-60)、人结肠腺癌(LS174T)]的生长有一定的抑制作用。根据本发明，该类化合物或其可药用盐可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到可以用于治疗病毒性乙肝疾病相关的药物组合物和/或细胞毒类抗肿瘤药物。下面通过实施例进一步说明本发明。实施例给出了代表性化合物的合成及相关结构鉴定数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例1:化合物I-a即2,3-二-氧-(4-甲氧基苯甲酰)-L-酒石酸二甲酯的制备向反应瓶中加入对甲氧基苯甲酸(43毫克，0.28毫摩尔)，二环己基碳二亚胺(58毫克，0.28毫摩尔)，无水二氯甲烷8毫升，在室温下搅拌20分钟，出现白色混浊后，加入L-酒石酸二甲酯(20毫克，0.11毫摩尔)，4-J甲氨基吡啶(3.6毫克，0.03毫摩尔)，整个溶液在室温下反应过夜，抽滤除去不溶物，蒸去溶剂，脱溶得到白色固体，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1),分离得到白色固体35毫克，产率为71%。H3COOCCOOCH3^一乂？^I~c,8s〕7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>化合物(I一a):无色油状物；A(石油醚/乙酸乙酯-3/l):0.36;核磁共振氢谱(400MHz，氘代甲醇)33.75(6H，单峰，COOC//3)，3.91(6H,单峰，OO/s),5.94(2H,单峰，H-2，3),7.08(4H,双峰，《/=8.8Hz,H-4'，6',4〃，6")，8.03(4H，双峰，Hz，H-3'，7'，3"，7");电喷雾质谱ESI-MSw々463.93([M+H20〗+)。实施例2:化合物I—b即2，3-二-氧-[3-(2，4-二氯苯)烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯的制备反应瓶中加入L-酒石酸(500毫克，3.3毫摩尔)，无水硫酸钠(1.5克，10.6毫摩尔)，IO毫升无水甲醇，搅拌数分钟，再向反应瓶中滴加3微升浓硫酸，加热回流10小时。冷却到室温，加入碳酸氢钠调节pH约为7，抽滤除去不溶物，滤液浓縮。脱溶所得固体分散在3毫升氯仿和3毫升蒸馏水中，水层再用氯仿萃取3次(5毫升x3)，合并所有有机相，用水洗，饱和食盐水洗涤数次，无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除去溶剂得L-酒石酸二甲酯，白色阔体，390毫克，产率66%。向反应瓶中加入2,4-二氯苯丙烯酸(61毫克，0.28毫摩尔)，二环己基碳二亚胺(58毫克，0.28毫摩尔)，无水二氯甲垸8毫升，在室温下搅拌20分钟，出现白色混浊后，加入L-酒石酸二甲酯(20毫克，0.11毫摩尔)，4-二甲氨基吡啶(3.6毫克，0.03毫摩尔)，整个溶液在室温下反应过夜，抽滤除去不溶物，蒸去溶剂，脱溶得到白色固体，柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1)，分离得到白色固体49毫克，产率为77%。化合物(I-b):白色固体，熔点66~67。C(氯仿)；及y(石油醚/乙酸乙酯=3/1):0.4;核磁共振氢谱(400MHz，氘代甲醇)<53.82(6H,单峰，5.88(2H,单峰，H曙2，3)，6.54(2H，双峰，J-16.0Hz，H-2'，2")，7.29(2H，双峰，声2.0Hz,H画8',8"),7.46(2H,双峰，>2.0Hz,H國9'，9")，7.60(2R5单峰，H-6',6"),8.14(2H，双峰，7=16.0Hz,H-3',3");电喷雾质谱ESI-MSm/z:449.21([M+H20]+)0根据与以上实施例1-2相似的的方法，分别制备得到I"C和I~d化合物。下面列出它们的部分物化和核磁共振氢谱数据化合物(I-c):黄色油状物，&(石油醚/乙酸乙酯=3/1):0.22;(400MH:;氘代甲醇)(53.83(6H,单峰，COOC//》，5.55(2H,单峰，H-2，3),6.36(1H,双峰，J=16.0Hz,H-2')，6.49(1H，单峰，H-6'),6.68(1H，单峰，H-5'),7.48(1H，双峰，J=16.0Hz，H-3'),7.51(1H，单峰，H-7')。化合物(I-d):无色油状物，Rf(石油醚/乙酸乙酯=6/1):0.2;(400MHz,氖代甲醇)33.81(6H，单峰，CO(9a/》，5,91(2H，单峰，H-2,3)，6.58(2H，双峰,7=16.0Hz,H-2'，2〃)，7.42(6H,多重峰，H-6'，7'，8'，6"，7"，8"),7.58(4H，多重峰,H國5',9'，5",9"),7.80(2H,双峰，J-16.0Hz,H-3',3〃)；电喷雾质谱ESI-MSm/z:456.05([M+H20]+)。本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯(14)或其可药用盐具有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能，可以用于治疗相关的乙肝病毒感染性疾病。该药物可以与药学上常用的辅料或载体结合，用制药领域中的常规技术制备得到具有抗病毒活性从而可以用于防治病毒引起的疾病的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂等剂型药物，还可以利用现有公知技术制备成其控释、缓释剂型或纳米制剂，还可以应用靶向药物制剂技术制备成相应药物剂型和给药方式。本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2,3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-酒石酸二甲酯(I-d)或其可药用盐可以与现已上市的治疗乙型病毒性肝炎药物如拉米呋啶(lamivuding)、阿德福韦及其二匹伏酯(adevovir/adevovirdipivoxil)、恩替卡韦(entecavir)、恩曲他滨(emtricitabine)、克来福定(clevudine)、泛昔络韦(famciclovir)、洛布卡韦(lobucavir)、干扰素(IFN)等联合使用，制备得到具有治疗乙型病毒性肝炎的药物。上述各类药物组合物均可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用9搽剂等剂型药物，还可以利用现有公知技术制备成其控释、缓释剂型或纳米制剂，还可以应用靶向药物制剂技术制备成相应药物剂型和给药方式。此外，本发明所制备的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2,3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-酒石酸二甲酯(I~d)或其可药用盐对于五株人体肿瘤体外谱养细胞株[人子宫颈癌细胞(Hela)、人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)、人肺癌细胞(A549)、人原髓细胞白血病细胞(HL-60)、人结肠腺癌(LS174T)均具有一定的生长抑制活性，可期待作为防治相关肿瘤性疾病药物用途。本发明所制备的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-酒石酸二甲酯(I"d)或其可药用盐可以与药学上常用的辅料或载体结合，制备得到具有抗肿瘤用途的药物组合物。上述药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊、贴片、皮下植埋剂等剂型，或其他采用公知理论和抜术制备的控释、缓释剂型以及纳米制剂。本发明的式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2,3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-酒石酸二甲酯(I~d)或其可药用盐可以与现己上市的抗肿瘤药物如铂类药物顺铂(DDP)、喜树碱类药物伊立替康(Irinatecan，CPT-ll)、长春花碱类药物失碳长春花碱(Vinorebine，NVB诺维本)、脱氧胞昔类药物吉西他滨(Gemcitabine,Gemzar，健择)、足叶乙式(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等联合使用，制备得到具有肿瘤生长抑制活性的细胞毒性的药物组合物，可用于制备治疗多种肿瘤疾病的药物。为了更好地理解本发明的实质，下面分别用药理实施例的形式简述式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯(I-d)或其可药用盐对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)抑制试验以及它们对五株人体体外培养肿瘤细胞株的生长抑制之药理实验结果，说明其在抗病毒药物和/或抗肿瘤药物开发领域中的用途。药理实施例给出了式(I)化合物或其可药用盐，以及化合物2,3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯(I~d)或其可药用盐的部分活性数据。同样必须说明，本发明的药理实施例仍是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。药理实施例1:化合物I-a对HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原的抑制作用1.1细胞培养将HepG2.2.15细胞培养于含10%灭活胎牛血清，100U/毫升青霉素和100微克/毫升链霉素，100微克/毫升G418的DMEM培养基中，置37。C，5%二氧化碳C02，100%相对湿度的培养箱中培养。1.2采用MTT法测定化合物I-a对HepG2.2.15细胞生长的抑制作用取对数生长期的HepG2.2.15细胞，用培养基将细胞稀释成1乂105个/毫升，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在37-C，5%C02，100%相对湿度的培养箱中培养24小时后加入用培养基稀释的化合物I-a，浓度分别为100微克/毫升，20微克/毫升，和4微克/毫升，每孔200微升，每个浓度设三个复孔，置于37i:，5%C02，100%相对湿度的培养箱中培养，培养72小时后，每孔加入5毫克/毫升MTT[3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]试剂10微升，继续培养4小时，弃去培养基，每孔加入二甲基亚砜DMSO200微升，用振荡器振荡20分钟，在570nm波长下用酶标仪测定OD值。以只加培养基的培养孔为对照孔。实验重复三次。抑制率(%)=(对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值X1000/。。1.3测定化合物I-a对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抑制作用取对数生长期的HepG2.2.15细胞，用培养基将细胞稀释成1乂105个/毫升，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在100%相对湿度的5。％C02培养箱中37"C培养24小时后加入用培养基稀释的化合物I-a，浓度分别为100微克/毫升，20微克/毫升和4微克/毫升，每孔200微升，每个浓度设三个复孔，置于37'C，5%C02，100%相对湿度的培养箱中培养，每4天换含相阃浓度样品的培养基，将同一样品同一浓度的换出的培养基等体积混匀，作为待测样品。用酶联反应ELISA试剂盒测定培养基中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)浓度，以P/N表示；以拉米呋啶(3-TC)为阳性对照。1.4实验结果实验结果如表一所示，化合物I-a有显著的抑制乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的作用。其对H印G2.2.15细胞的生长无明显抑制作用，但对11卬02.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原13八§在高、中、低剂量下抑制活性都高于拉米呋啶。1.5结果说明乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制率是判断乙型肝炎病毒感染重要标志，有效抑制HBsAg分泌并使HBsAg反应转阴是治疗乙型肝炎的目标之一。化合物1-3在第八天对11叩02.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)具有显著的抑制作用，说明此类双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物可预期发展为降低乙型肝炎表面抗原、控制病毒性乙型肝炎症状的药物。表一化合物I-a对HepG2.2.15分泌的乙型肝炎表面抗原抑制率(％)样品编号浓度(微克/毫升)4天8天I一a10025.6142.332012.7621.5945.5513.373-TC(拉米呋啶)10012.1211.3720rr4/a/a表示无抑制活性。药理实施例2:化合物I-b对HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原的抑制作用2.1细胞培养同药理实施例l。2.2采用MTT法测定化合物I-b对HepG2.2.15细胞生长的抑制作用取对数生长期的HepG2.2.15细胞，方法同药理实施例1。2.3测定化合物I-b对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抑制作用以拉米呋啶(3-TC)为阳性对照。具体方法同药理实施例l。2.4实验结果实验结果如表二所示，化合物I-b有显著的抑制乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的作用。其对11印02.2.15细胞的生长无明显抑制作用，但对12HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原HBsAg在高、中、低剂量下抑制活性都高于拉米呋啶。表二化合物I-b对HepG2,2.15分泌的乙型肝炎表面抗原抑制率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>a表示无抑制活性。2.5结果说明乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抑制率是判断乙型肝炎病毒感染重要标志，有效抑制HBsAg分泌并使HBsAg反应转阴是治疗乙型肝炎的目标之一。化合物I-b在第八天对HepG2.2.15细胞分泌的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)具有显著的抑制作用，说明该类双取代-L-酒石酸酯类化合物可预期发展为降低乙型肝炎表面抗原、控制病毒性乙型肝炎症状的药物。药理实施例3:化合物对人子宫颈癌细胞的细胞毒活性3.1细胞培养人子宫颈癌(Hela)细胞用RPMI1640培养基培养，培养基中含10%小牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升链霉素。细胞以每孔1乂104个密度接种到96孔板中，在37-C,5%(:02潮湿空气的培养箱中培养24小时。3.2细胞存活率的测定方法用改良MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐]法。细胞经24小时的孵育后，分别将新配的化合物的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最终浓度分别为100微克/毫升、50微克/毫升、25微克/毫升、5微克/毫升。72小时后，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理盐水溶液，再继续在37-C，5%0)2潮湿空气的培养箱中培养3小时，每孔中加入150微升二甲亚砜，振荡溶解生成的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的甲臜用酶标仪在570nrn波长下比色，细胞存活率由样品OD值对于对照Od值的比值计算。其中化合物对Hda细胞的半数抑制浓度(IC5())由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的ICs()如表三所示。本试验以抗肿瘤一线用药顺铂(DDP)作为阳性对照，阳性对照药物顺铂对Hela细胞的IC50为19.6^M。表三各测试化合物对Hela细胞的与一数抑制浓度(IC5())(微克/毫升)化合物I-aI一bI~d抑制活性IC5o/111.8213.0/表示半数抑制浓度(IC5。)值>100微克/毫升。3.3结果说明化合物I-b和I~d对Hda细胞的生长具有一定的抑制作用，说明该类双取代酒石酸二甲酯类化合物有望发展为细胞毒类治疗人子宫颈癌的药物。药理实施例4:化合物对人慢性髓原细胞白血病细胞的细胞毒活性4.1细胞培养人慢性髓原细胞白血病(K562)细胞用RPMI1640培养基培养，培养基中含10%小牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升链霉素。细胞以每孔1XW个密度接种到96孔板中，在37-C，5^C(V潮湿空气的培养箱中培养24小时。4.2细胞存活率的测定方法用改良MTT法细胞经24小时的孵育后，分别将新配的化合物的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最终浓度分别为100微克/毫升、50微克/毫升、25微克/毫升、5微克/毫升。72小时后，加入10微升MTT(5毫克/毫升)的生理盐水溶液，再继续在37"C,5%0)2潮湿空气的培养箱中培养3小时，每孔中加入150微升二甲亚砜，振荡溶解生成的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的甲臜用酶标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品OD值对于对照OD值的比值计算。其中化合物对K562细胞的半数抑制浓度(IC5())由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的IC50如表四所本试验以抗肿瘤一线用药顺铂(DDP)作为阳性对照，阳性对照药物顺铂对K562细胞的IC5G为12.9|iM。表四各测试化合物对K562细胞的半数抑制浓度(IC5o)(微克/毫升)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>/表示半数抑制浓度(IC5Q)值>100微克/毫升。4.3结果说明化合物I-a和I-b对K562细胞的生长具有较为明确的抑制作用，说明该类双取代酒石酸二甲酯类化合物有望发展为细胞毒类治疗人慢性髓原细胞白血病的药物。药理实施例5:化合物对人肺癌细胞的细胞毒活性5.1细胞培养人肺癌(A549)细胞用RPMI1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5乂103的浓度加入到96孔板中，在37"C含5%(:02潮湿空气的培养箱中培养24小时。5.2细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例3。其中化合物对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的IC50如表五所示。而阳性对照药物顺铂对A549细胞的IC5o为17.8nM。表五各测试化合物对A549细胞的半数抑制浓度(IC5Q)(微克/毫升)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>/表示半数抑制浓度(IC5。)值>100微克/毫升。5.3结果说明化合物I-a和14对A549细胞的生长具有一定的抑制作用，说明该类双取代酒石酸二甲酯类化合物有望发展为细胞毒类治疗人肺癌的药物。药理实施例6.-化合物对HL-60的细胞毒活性6.1细胞培养人原髓细胞白血病(HL-60)细胞用RPM1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5X103的浓度加入到96孔板中，在37t:含5%(:02潮湿空气的培养箱中培养24小时。6.2细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例3。其中化合物对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50)由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的IC50如表六所示。阳性对照药物DDP对HL-60细胞的半抑制浓度IC5Q为7.6^M。表六各测试化合物对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC5())(微克/毫升)化合物I-aI一bI-d抑制活性IC5。34.852.6//表示无抑制活性或半数抑制浓度(IC5Q)值>100微克/毫升。6.3结果说明化合物I-a和I-b对HL-60细胞的生长具有明确的抑制作用，说明该类双取代酒石酸二甲酯类化合物有望发展为细胞毒类治疗人原髓细胞白血病的药物。药理实施例7:化合物对人结肠腺癌细胞的细胞毒活性7.1细胞培养人结肠腺癌(LS174T)细胞用RPMI1640培养基培养，培养基中含10%的胎牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5X103的浓度加入到96孔板中，在37"C含5%(302潮湿空气的培养箱中培养24小时。7.2细胞存活率的测定用改良MTT法,具体方法如药理实施例3。其中化合物对LS174T细胞半16抑制浓度(IC5())由剂量效应曲线得到。实验结果显示各测试化合物的IC:如表七所示。阳性对照药物顺铂对LS174T细胞的IC5。为4.43^iM。表七各测试化合物对LS174T细胞的半数抑制浓度(IC5o)(微克/毫升)化合物I—aI-bI~d抑制活性IC5o/151.4//表示半数抑制浓度(IC5Q)值〉100微克/毫升。7.3结果说明化合物I-b对LS174T细胞的生长具有一定的抑制作用，说明该类双取代酒石酸二甲酯类化合物有望发展为细胞毒类治疗人结肠腺癌的药物。在上述说明书阐述本发明时，同时提供了实施例和药理实施例的目的是举例说明本发明的实际操作过程和本发明的意义。在进入本发明权利要求和其等同物范围内时，本发明的实际应用包括所有一般变化、配合，或改进。权利要求1.一种具有式(I)所示结构的双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐式(I)其中取代基R1和R2可以相同或不同，分别选自2-呋喃环-3-烯丙酰基，2位或4位甲氧基取代的苯甲酰基，邻位或间位或对位二甲氧基取代的苯甲酰基，或邻位或间位或对位卤素二取代的3-苯烯丙酰基；其条件是R1和R2不能同时为3-(3，4-二甲氧基苯)-烯丙酰基，也不能同时为3-(3，4-二氯苯)-烯丙酰基。2.根据权利要求l，式(I)化合物选自I-a.2，3-二-氧-(4-甲氧基苯甲酰)-L-酒石酸二甲酯；I-b.2,3-二-氧-[3-(2,4-二氯苯)-烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯；I-c.2，3-二-氧-[3-(2-呋喃基)-烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯。3.根据权利要求1~2任一所述之双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐用于制备抑制乙型肝炎病毒表面抗原药物的用途。4.根据权利要求1~2任一所述之双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐用于制备细胞毒类抗肿瘤药物的用途。5.2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯及其可药用盐用于制备抑制乙型肝炎病毒表面抗原药物的用途。6.2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯及其可药用盐用于制备细胞毒类抗肿瘤药物的用途。7.—种用于抑制乙型肝炎表面抗原的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分的根据权利要求1、2之一的化合物、2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯、或它们的混合物以及它们的可药用盐和可药用辅料。8.—种用于治疗肿瘤疾病的细胞毒类药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分的根据权利要求l、2之一的化合物、2，3-二-氧-[3-苯烯丙酰]-L-酒石酸二甲酯、或它们的混合物以及它们的可药用盐和可药用辅料。9.根据权利要求38任一所述的药物或药物组合物，其剂型是注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂，或控释或缓释剂型或纳米制剂。全文摘要本发明涉及一类双取代-L-酒石酸二甲酯类化合物及其医药用途，本发明还涉及这些化合物的制备方法和含有该类化合物的药物组合物。本发明涉及的双取代酒石酸二甲酯类化合物及其可药用盐具有抑制乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的功能；其还对五株人体肿瘤细胞显示出一定的细胞毒性。该类化合物可以预期用于制备治疗乙肝病毒感染性疾病以及肿瘤性疾病的药物。文档编号C07C69/00GK101492374SQ200810062549公开日2009年7月29日申请日期2008年6月24日优先权日2008年6月24日发明者冯治国,巫秀美,张丽娟,李校堃,佳瞿,胡利红,昱赵,郑群雄,郝小江,黄可新申请人:温州医学院