专利名称：：一种芍药苷的制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种芍药苷的制备方法，尤其是一种采用提取法生产芍药苷的方法，芍药苷(paeoniflorin)是一种单瞎类糖苷化合物，广泛存在于芍药科多种植物中，如芍药尸oeo"fc/oc/i>7ora811.、毛果芍药尸卿"''。/acft>7or。Pall.Var.WcAocot/mi(Bunge)Stem、川赤芍尸。柳i'。v"Yc/ti'i'Lynch、草芍药户咖"f。ofrov咖Maxim.、毛叶草芍药户咖":'ao6av加MaxinLvar.wi7/mo甜。e(S鄉f)Stern、美丽芍药Poeonjom。frei'L6vl.、窄叶芍药尸。eoni'。onomabiL.、块根芍药Paeoniaonoma&iL.var.i'ntermet&i(CA.Mey.)O.etB.Fedtsh..、牡丹户aeon:'aji^u/ZcoraAndr.、玄参&7iqp/m/ari。"i>igpoens&Hemsl.、j匕玄参&pA/flrffl6"e/gertowMiq.等。'芍药苷具有抗炎、镇痛、抗血栓、神经保护、保肝等多种生理活性。现有技术中多采用常规手段从原料中提取含有该物质的粗提物，然后进一步分离纯化。如中国专利申请文件CN1443539A公开了一种釆用煎煮法从赤芍中提取赤芍总苷的方法，中国专利申请文件CN1726965A公开了—种釆用乙醇回流法从赤芍中提取芍药苷的方法。现有技术多釆用常规方法提取，加热时间长，提取效率低，生产成本高；采用大孔树脂等常规分离方法纯化，专属性低，纯化效果大多不理想。
发明内容本发明要解决的技术问题是提供一种提取制备芍药苷的方法，该方法能降低生产成本，提髙产品质量，便于工业化搡作。为了解决上述技术问题，本发明提出技术方案如下将含有芍药苷的原料投入到微波提取设备中，加入水，进行微波提取；收集提取液，滤过，使其通过大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用20-80%浓度的乙醇洗脱，收集乙醉洗脱液，减压回收乙醉并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得。含有芍药苷的原料来源于芍药科植物芍药、毛果芍药、川赤芍、草芍药、毛叶草芍药、美丽芍药、窄叶芍药、块根芍药、牡丹中的一种或几种。微波提取的工艺条件为加入药材重量5倍量的水，提取l-3次，每次0.2-1小时；优选为提取2次，每次0，5小时。大孔树脂选自D101型、D"3520型、AB-8型、HPIh700型、H-50型、CIM80型大孔吸附树脂。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度优选为60%，收集洗脱液l-8倍量柱体积，优选收集5倍量柱体积。收集活性炭洗脱液l-8倍量柱体积，优选收集5倍量柱体积。本发明采用微波提取技术，由于微波可以穿透式加热，使提取时间和溶剂用量大大节省，效率高、产量大，降低了生产成本微波提取没有热惯性，易控制；微波提取是用电设备，不需要配备锅炉，无污染、安全、属于绿色工程。采用火孔吸附树脂、活性碳联用纯化:l:艺，可优化分离效果，提髙产品的纯度。微波提取的优点可以通过下列试验说明试验例1微波与常规法提取芍药苷的比较试验方法分别称取同批次赤芍药材各lKg,按下列方法提取。1、微波法加入3000ml水，微波提取2次，每次0,5小时，合并提取液，滤过，浓缩至1000ml。2、煎煮法加入6000ml水，煎煮3次，每次2小时，合并提取液，滤过，浓縮至1000ml。3、回流法分别加8000ml、6000ml的50%的乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，滤过，减压回收乙醉，并浓缩至1000ml。精密吸取上述提取液各lOnl，注入液相色谱仪，参照实施例中的測定方法测定提取液中芍药苷的含量,试验结果试验结果见表l表1微波法、煎煮法、回流法提取芍药苷比较<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>试验结果表明，与常规提取方法相比，微波法提取芍药苷仅需少量的溶媒和很少的提取时间即可达到良好的效果，大大降低了生产成本。下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式下述实施例中芍药苷的含量测定采用HPLC法(参照中国药典2005版附录附录VID)，具体方法如下:色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(16:84)为流动相。检测波长230咖，理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品适量，加甲醇制成每lml含O.5mg的溶液，即得。供试品洛液的制备精密称取提取物12mg，置25迈1量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。测定法分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10ul，注入液相色谱仏测定，即得。实施例l将lKg白芍(来源于芍药科植物芍药尸從o祝'a/flc/iytoraPall.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取l次，0.2小时收集提取液，滤过，使其通过D101大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质,再用20%浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液1倍量柱#^,减压回收乙醇并浓缩；浓缩液加到装有活性碳的层析柱上,用水进行洗脱；收集洗脱液l倍量柱体积,通过反渗透膜浓缩，干燥，即得芍药苷6.28，含*95.1%。实施例2将lKg白芍(来源于芍药科植物芍药户您oWfl/ocft)foraPall.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取3次，每次l小时；收集提取液，滤过，使其通过D"3520型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用80%浓度的乙醇洗脱，收集乙酵洗脱液8倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液8倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷11.2&含量94.8%。实施例3将lKg白芍(来源于芍药科植物芍药尸aeo/rfa/flrf诉oraPall.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0.5小时收集提取液，滤过，使其通过AB-8型大孔吸附树脂柱上样，先用7jC洗脱杂质，再用60%浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷10.68，含量98.2%。实施例4将lKg白芍(来源于芍药科植物毛果芍药尸oeonfatort/;ZoraPall.Var.WcA0efli7x1(Bim辟)Stem的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0.5小时；收集提取液，滤过，使其通aHPD-700型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醉洗脱，收集乙醉洗脱ME5倍量柱体积，减压回收乙醉并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反潘透膜浓縮，干燥，即得芍药苷9,8g,含量97.8%.实施例5将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物芍药Pfleo"to/arft;/7oroPall.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0,5小时收集提取液，滤过，使其通iiH-50型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醉洗脱，收集乙醉洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醉并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷19.88，含量诉.3%。实施例6将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物川赤芍尸aeo/itovete秘Lynch的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0,5小时收集提取液，滤过，使其通过CD-180型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60y魂度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱船倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗SJg浓縮，干燥，即得芍药苷18.68,含量诉.5%。实施例7将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物草芍药AwontootovoteMaxim.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0,5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醇洗脱，收集乙酵洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醉并浓縮浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗Si^浓缩，干燥，即得芍药苷19.2&含量诉.1%。实施例8将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物毛叶草芍药/Vieo;itooAoratoMaximvor.w战Moftffle(Stapf)Stem的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提啦次，每次0,5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醇洗脱，收集乙酵洗脱^5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱收驗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓缩，干燥，即得芍药苷18,2g,含量97.9%。实施例9将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物美丽芍药尸。eo"toBKrfre,'L6vl.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0,5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓缩浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷18,8g,含量98.3%。实施例IO将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物窄叶芍药iVieontoomww/aL.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0,5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60。/。浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗itjg浓縮，干燥，即得芍药苷19.28,含量诉.6%。实施例ll将lKg赤芍(来源于芍药科植物芍药科植物块根芍药Paeo/itoonomafaL.var.加termerffa(C.A.Mey.)O.etB.Fedtsh.的干燥根)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0.5小时收集提取液，滤过,使其通加101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60y魂度的乙酵洗'脱，收集乙醇洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷19.88,含量诉.3%。实施例12将lKg芍药根皮(来源于芍药科植物芍药科植物芍药/Vieo/ito/ocftytoraPall.)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提取2次，每次0.5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60%浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱^5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓缩；浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓縮，干燥，即得芍药苷3L6g，含量99.1%。实施例13将lKg芍药叶(来源于芍药科植物芍药科植物芍药户從o"to/ocft;/toraPa11.)投入到微波提取设备中，加入5L水，微波提船次，每次0.5小时；收集提取液，滤过，使其通过D101型大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用60。/说度的乙醇洗脱，收集乙酵洗脱液5倍量柱体积，减压回收乙醇并浓縮浓縮液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液5倍量柱体积，通过反渗透膜浓缩，干燥，即得芍药苷7-8g,含量97.2%。权利要求1、一种芍药苷的制备方法，其特征在于所述的方法包括下列步骤将含有芍药苷的原料投入到微波提取设备中，加入水，进行微波提取；收集提取液，滤过，使其通过大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用20-80％浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩；浓缩液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液，通过反渗透膜浓缩，干燥，即得。2、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于所述含有芍药苷的原料来源于芍药科植物芍药、毛果芍药、川赤芍、草芍药、毛叶草芍药、美丽芍药、窄叶芍药、块根芍药、牡丹中的一种或几种。3、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于所述银波提取的工艺条件为加入药材重量5倍量的水，提取l-3次，每次0.2-1小时。4、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述微波提取的次数为2次，每次提取时间为0.5小时。5、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于所述大孔树脂选自D101型、f35加型、旭-8型、HPD"700型、H-50型、CD"180型大孔吸附树脂。6、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于所述洗脱用乙醇的浓度为60%。7、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于收集所述大孔树脂洗脱液的体积为柱体积的l-8倍量。8、根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于收集所述大孔树脂洗脱液的体积为柱体积的5倍量。9、根据权利要求l所述的制备方法，其特征在于收集所述活性碳洗脱液的体积为柱体积的l-8倍量。10、根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于收集所述活性碳洗脱液的体积为柱体积的5倍量。全文摘要本发明涉及一种操作简便、设备投入小的芍药苷的制备方法，工艺步骤包括将含有芍药苷的原料投入到微波提取设备中，加入水，进行微波提取；收集提取液，滤过，使其通过大孔吸附树脂柱上样，先用水洗脱杂质，再用20-80％浓度的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩；浓缩液加到装有活性碳的层析柱上，用水进行洗脱；收集洗脱液，通过反渗透膜浓缩，干燥，即得。采用该方法能降低生产成本，提高产品质量，便于工业化操作。文档编号C07H17/00GK101418025SQ20081023575公开日2009年4月29日申请日期2008年12月5日优先权日2008年12月5日发明者范淦彬,高广印申请人:亳州市亳广中药饮片有限公司