专利名称：：一类14-羟基青藤碱衍生物、合成方法及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一类化合物、制备方法和药物用途，具体的说是涉及一类14-羟基青藤碱衍生物，该类化合物的化学合成方法，本发明提供的化合物具有抗炎活性。
背景技术：
：青藤碱(sinomenine)是从防风己科植物清风藤及毛青藤的根茎中提取生物碱。据记载青藤碱具有抗炎、镇痛、降压、抗心律失常等生物活性，临床上主要用于治疗类风湿关节炎、心律失常等疾病(王耐勤等.药学学报，1992，23(2)81;周金黄等主编.中药药理与临床研究进展，第二册，北京中国科学技术出版社，1993.)。20世纪90年代后，我国国内对青藤碱的临床应用研究得到迅速发展，如青藤碱制成戒毒散剂药品，能明显缓解和解除戒断症状，无药物依赖性和成瘾性(CN.1149456)。动物活体试验表明青藤碱可显著降低荷瘤小鼠升高的TNF和IL-6细胞因子水平，改善小鼠实验性癌症恶变质状态，对放、化疗自愿者给药2530天后，病人的食欲得到改善(CN.1679574)。另外青藤碱盐酸盐在治疗慢性肾小球肾炎(CN.1142946)、免疫性眼科疾病(CN.1686130.)等方面，也具有较好效果。针对C环的结构改造工作主要有C环的稠杂环化(CN.1687065);对C环的羰基的还原、双键的催化氢化等(叶仙蓉等.药学学报，2004，39,180-183.);C环羰基的肟化、腙化等手段合成系列青藤碱衍生物，小鼠Morris水迷宫试验结果表明青藤碱及其衍生物具有明显的益智作用，能显著提高受试动物记忆力，并有保护神经的功效(WO2004048340Al)。对青藤碱-金属络合物的研究表明青藤碱一铜络合物具有较高的抗炎和镇痛作用(庞志功等.西f秀,染,吉.1995，10(4),170-172.);而青藤碱-锗络合物可作为广谱抗癌药物(CN.1153171)，毒副作用小，且不降低人体免疫功能。在H202损害PC12细胞(ratpheochromocytomaline，小鼠交感神经系统的嗜铬细胞瘤)的试验中青藤碱、7V-去甲基青藤碱均显示较强的清除自由基的功效，因而是一种治疗Alzheimer症的潜在药物(秦国伟等.Ato2005,68,1128-1130.)。综上所述，青藤碱是一种具有多种生理活性，具有很高的研究价值的天然产物。类A湿关节炎是危害人类健康的顽症，青藤碱虽以联合用药方式用于治疗类风湿关节炎取得一定效果，但其作用强度弱、起效慢、生物利用度低，因此寻找新的具有更高药效和更好的药代性质的青藤碱衍生物具有重要的应用意义。本发明的第一个目的是公开一类如结构通式I所示的14-羟基青藤碱衍生物；本发明的第二个目的是公开该类化合物的制备方法；本发明的第三个目的是公开该类化合物作为抗类风湿关节炎的药物用途。
发明内容<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>R,为H、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、甲基、苄基或4一苄氧基苄基;R2为^、乙酰基、新戊酰基或苯甲酰基；X为-OH或二Oc结构通式I结构通式为I的14-羟基青藤碱衍生物包括下述细类Ia，Ib和Ic。当I中R2=H，X=^0时为la;当I中X:-O时为Ib;当I中X二-OH时为Ic。本发明是通过如下技术方案实施的。制备R,不为H的Ia、Ib、Ic的化学反应式如下:'"'N—Me誕化N一MeII是O-烃基青藤碱或者O-酰基青藤碱；Rl是乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、甲基、苄基或4一苄氧基苄基;R2是乙酰基、新戊酰基或苯甲酰基。制备R,为H的Ia、Ib、Ic的反应式如下la(R^节基)la(R^4-苄氧卞-基)lb(F^-苄基)lb(R产4-苄氧卞基)lc(Ft!-苄基)lc(R^4-卞氧卞基)氣解二氟醋酸溶液la(R禍気解二氟醋酸溶液Ib(R^H)氢解二氟醋酸溶液lc(R禍本发明所涉及的14一羟基青藤碱衍生物是通过以下反应制备的1、氧化反应II(O-烃基青藤碱或O-酰基青藤碱)与一种有机溶剂混和，加入氧化剂，以薄层层析方法跟踪至反应完全，硅胶柱层析分离得到Ia。该步骤使用的氧化剂为Mn02或者是负载于一种载体上的Mn02;负载的载体是氧化铝、硅胶、硅藻土、活性炭中的任意一种；该步骤使用的溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙垸、苯、甲苯、二甲苯、中的任意一种；反应的投料比是II:Mn02:溶剂=1:220:350(mol);适宜的反应温度为—10~150°C。2、酯化反应-制备Ib:Ia在三乙胺为缚酸剂存在的情况下、在有机溶剂中与一种酰氯反应，经过分离纯化得到Ib。这里所用的酰氯是乙酰氯、新戊酰氯或者苯甲酰氯。3、还原反应-制备Ic:将Ia或Ib在乙醇或甲醇中与还原剂硼氢化钠或硼氢化钾常温下反应，得到青藤碱衍生物Ic。4、氢解反应将将青藤碱衍生物Ia(R产苄基)、Ib(R产苄基)或Ic(R产苄基)与一种氢源在Pd/C催化下发生氢解反应，脱去苄基，分别得到Ia(R产H)、Ib(R产H)、Ic(R尸H)。反应中使用的氢源是氢气、甲酸、甲酸铵、甲酰胺、环己烯或者环己二烯中的任意一种；使用的溶剂是甲醇、乙醇、醋酸中的任意一种。投料比为青藤碱氢源催化剂溶剂=1:0.8~20:0.001~0.5:5~50(mol)。该步骤的反应温度为-1085'C。5、脱苄氧苄基反应将Ia(R尸4-苄氧苄基)、Ib(R产4-苄氧苄基)或Ic(R产4-苄氧苄基)与三氟醋酸溶液发生作用，脱去苄氧苄基，得到Ia(R产H)、Ib(R产H)、Ic(R产H)。这里所使用的三氟醋酸溶液是体积含量为2~15%的三氟醋酸/二氯甲垸或三氟醋酸/三氯甲烷溶液。该步骤的反应温度为-104(TC。本发明涉及的化合物的具体结构及其物性常数、纯度见下表<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>结构通式I表l具有结构通式I所示的化合物结构及其物性常数<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>114-BnOBnPhCO-=0>200(分解)98.512HPhCO國=0182.0-184.199.3134画BnOBnPhCO--OH>200°C96.714HPhCO--OH189,6-191.597.915AcH=0152.6-153.299.016AcH曙OH160.2-161.798.217AcPhCO-=0170.4-172.097,818PhCO-H=o167.3-169.598.8具体实施例方式下列实施例可以进一步说明但并不限制本发明。实施例l14-羟基-0-甲基青藤碱(化合物l)0.5gO-甲基青藤碱以30mL二氯甲垸溶解，分批加入5g活性Mn02，升温至回流反应42h。冷却至室温，过滤，所得滤液浓縮，得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物l，产率13%，mp:157.3-157.5。C。实施例26，14-双羟基-0-甲基青藤碱(化合物2)0.3g14-羟基-0-甲基青藤碱以10mL无水甲醇溶解，冰水浴冷却至0。C，加入0.3gNaBH4，升温至室温搅拌2h，浓縮反应物，所得固体加入IOmL水和0.3gNH4Cl，常温搅拌15min，以二氯甲垸2x20mL提取，合并有机层，以无水硫酸钠干燥。减压脱去溶剂后的剩余物硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物2，产率88%，mp:167.2-169.0。C。实施例314-乙酰氧基-0-甲基青藤碱(化合物3)0.5g14-羟基-0甲基青藤碱、20mL二氯甲垸和lmL醋酐混合，开动搅拌，回流2h，冷却，减压旋去溶剂，以硅胶色谱柱装柱，依次用乙酸乙酯、及20:l的氯仿/甲醇淋洗，得到化合物3，产率78%,mp:149.5-152.1°C。实施例414-羟基-0-苄基青藤碱(化合物4)0.5gO-苄基青藤碱以20mL二氯甲垸溶解，加入5g新制Mn02，升温至回流反应40h。冷却至室温，过滤除去Mn02。滤液浓縮，得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到纯品化合物4，产率15%,mp:180.1-180.4。C。实施例514-羟基青藤碱(化合物5)0.3g14-羟基-0-苄基青藤碱以10mL无水甲醇溶解，加入lmL环己烯和0.1g5。/。Pd/C催化剂，升温至回流反应5h。冷却至室温，过滤，所得滤液浓縮得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物5，产率90%，MP:174.8-175,2°C.实施例614-乙酰氧基-0-苄基青藤碱(化合物6)0.5g化合物4、20mL二氯甲垸和lmL醋酐混合，回流反应2h，冷却，减压旋去溶剂，以硅胶色谱柱装柱，依次用乙酸乙酯、及20:l的氯仿/甲醇淋洗，得到化合物6，产率76%，mp:162.3-164.0。C。实施例714-乙酰氧基青藤碱(化合物7)0.2g化合物6以10mL无水乙醇溶解，加入lmL环己烯和0.04g10%Pd/C催化剂，升温至回流反应58h。冷却至室温，过滤，所得滤液浓縮。剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物7。产率88%，mp:156.4-156.9。C.实施例86，14-双羟基青藤碱(化合物8)0.2g化合物5以10mL无水甲醇溶解，冰水浴冷却至0。C，加入0.2gNaBH4，升温至室温搅拌3h，浓縮反应物，所得固体加入10mL水和0.3gNH4C1，常温搅拌15min，以二氯甲烷2x20mL提取，合并有机层，以无水硫酸钠干燥。减压脱去溶剂后，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液..乙酸乙酯)得到化合物8。产率80%,mp:175.1-176.9°C。实施例914-乙酰氧基-6-羟基青藤碱(化合物9)0.2g化合物7以10mL无水甲醇溶解，冰水浴冷却至0。C，加入O.lgNaBH4，升温至室温搅拌3h，浓縮反应物，所得固体加入10mL水和0.3gNH4Cl，常温搅拌15min，以二氯甲烷2x20mL提取，合并有机层，以无水硫酸钠干燥。减压脱去溶剂后，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物9。产率72%，mp:163.2-165.4°C。实施例IO14-羟基-0-(4—苄氧苄基)青藤碱(化合物IO)0.5g(9-(4—苄氧苄基)青藤碱以20mL二氯甲烷溶解，加入15gl0。/。的新制Mn(V硅胶，升温至回流反应40h。冷却至室温，过滤除去催化剂。滤液浓縮，得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物10，产率35%，mp:195.7-197.3。C。实施例ll14-苯甲酰氧基-0(4—苄氧苄基)青藤碱(化合物ll)向0.2g化合物10的10mL二氯甲垸溶液中，加入三乙胺0.3g，冰水浴冷却至0。C。向其中逐滴加入0.3g苯甲酰氯与5mL二氯甲烷的混合溶液。滴加完毕，室温搅拌反应2h。旋转蒸发蒸去溶剂，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物ll，产率77%，mp:>200°(:(分解)。实施例1214-苯甲酰氧基青藤碱(化合物12)向0.3g化合物ll中加入5mL二氯甲垸溶解，加入5mL5X三氟醋酸/二氯甲烷，室温下搅拌10min，加入饱和碳酸氢钠溶液中和。将混合物静置分出有机层，浓縮后剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物12，产率92%，mp:182.0-184.1°C实施例136-羟基-14-苯甲酰氧基-0-(4—苄氧苄基)青藤碱(化合物13)0.2g化合物11以15mL无水甲醇溶解，冰水浴冷却至0。C，加入0.2gNaBH4，升温至室温搅拌5h，浓縮反应物，所得固体加入IOmL水和0.3gNH4C1，搅拌15min，以三氯甲烷2x10mL提取，合并有机层，以无水硫酸钠干燥。减压脱去溶剂后，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物13。产率79%，mp:>200°(:(分解)。实施例146-羟基_14-苯甲酰氧基青藤碱(化合物14)向0.2g化合物13中加入5mL二氯甲垸溶解，加入5mL5%三氟醋酸/二氯甲烷，室温下搅拌10min，加入饱和碳酸氢钠溶液中和。将混合物静置分出有机层，浓縮后剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物14，产率89%，mp:189.6-191.5°C。实施例1514一羟基一(9一乙酰基青藤碱(化合物15)向0.5gO—乙酰基青藤碱、20mL苯混合物中分批加入25g10%的活性MnCV硅胶，升温至回流反应72h。冷却至室温，过滤除去不溶物。滤液浓縮，得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到纯品化合物15，产率32%,mp:152.6國153.2。C。实施例166，14一双羟基一0—乙酰基青藤碱(化合物16)0.35g化合物15以15mL甲醇溶解，冰水浴冷却至0。C，加入0.4gNaBH4，升温至室温搅拌5h，浓縮反应物，所得固体加入20mL水和0.5gNH4Cl，搅拌15min，以三氯甲垸2xl5mL提取，合并有机层，以无水硫酸钠干燥。减压脱去溶剂后，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物16，产率75%，mp:160.2-161.7。C。实施例1714一苯甲酰氧基一O—乙酰基青藤碱(化合物17)向0.3g化合物15的10mL二氯甲垸溶液中，加入三乙胺0.3g，冰水浴冷却至0°C。向其中逐滴加入0.3g苯甲酰氯与5mL二氯甲烷的混合溶液。滴加完毕，室温搅拌反应2h。旋转蒸发蒸去溶剂，剩余物用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物17，产率80%，mp:170.4-172.0°C实施例1814一羟基—O—苯甲酰基青藤碱(化合物18)0.5g0-苯甲酰基青藤碱以20mL二氯乙烷溶解，分批加入30g5%的活性Mn02/活性炭，升温至回流反应72h。冷却至室温，过滤除去不溶物。滤液浓縮，得到粗品，用硅胶填充柱层析分离(淋洗液乙酸乙酯)得到化合物18，产率12%，mp:167.3-169.5。C。实施例19青藤碱的抗炎活性基于二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎活性试验。每个化合物用0.5n/。CMC(羧甲基纤维素钠)配制成0.4%、0.2%混悬液。取昆明小鼠120只(体重1822g，雌雄各半，由中国药科大学动物实验中心提供。)，按照体重、雌雄各半随机分成20组，每组6只。按0.4mL/20g的剂量每天给药一次，连续给药5天，最后一次给药lh后，用二甲苯0.05mL/鼠涂抹小鼠右耳致炎，左耳对照，致炎30min后，脱颈椎处死小鼠，以7mm直径打孔器取下左右耳片，分别用电子秤称量，以右、左耳重量差表示肿胀度，进行组间显著差比较，实验结果见下表。表2本发明提供的14-羟基青藤碱衍生物的生物活性<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>权利要求1、一类如结构通式I所示的14-羟基青藤碱衍生物R1为H、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、甲基、苄基或4-苄氧基苄基；R2为H、乙酰基、新戊酰基或苯甲酰基；X为-OH或＝O。结构通式I当I中R2＝H，X＝＝O时为Ia；当I中X＝＝O时为Ib；当I中X＝-OH时为Ic。2、根据权利要求l所述的14-羟基青藤碱衍生物的制备方法，其特征是通过以下反应合成的(1)氧化反应将O-酰基青藤碱或O-烃基青藤碱与一种氧化剂作用发生氧化反应，得到Ia(其中Rt是除了H之外的如权利要求l所述的基团)；(2)酯化反应Ia在三乙胺为缚酸剂存在的情况下、在有机溶剂中与一种酰氯反应，经过分离纯化得到Ib(其中Ri是除了H之外的如权利要求l所述的基团)。该步骤中所用的酰氯是乙酰氯、新戊酰氯或者苯甲酰氯；(3)还原反应Ib与硼氢化钠发生还原反应得到Ic(Ri是除了H之外的如权利要求l所述的基团)；(4)氢解反应R，为苄基的Ia、Ib或Ic分别在Pd/C为催化剂下与氢源试剂作用，获得R!为H的Ia、Ib、Ic;(5)脱苄氧苄基反应R,为4-苄氧苄基的Ia、Ib或Ic分别与三氟醋酸溶液作用，获得Ri为H的Ia、Ib、Ic。3、权利要求2所述的氧化反应的特征是使用的氧化剂为Mn02或者是负载于一种载体上的Mn02;负载的载体是硅胶、氧化铝、硅藻土、活性炭中的任意一种；该步骤所使用溶剂为二氯甲烷、三氯甲垸、二氯乙烷、苯、甲苯、二甲苯、氯苯中的任意一种；投料比为O-烃基青藤碱或者O-酰基青藤碱Mn02:溶剂=1:2-20:350(mol);反应温度为一10~150°C。4、权利要求2所述的氢解反应的特征是使用的氢源试剂是氢气、甲酸、甲酸铵、甲酰胺、环己烯或者环己二烯中的任意一种；使用的催化剂是Pd/C;使用的溶剂是甲醇、乙醇或醋酸中；投料比为Ia(R尸苄基)或者Ib(R产苄基)或者Ic(R产节基)氢源催化剂二l:0.820:0.0010.5(mol)。该步骤的反应温度为-1085'C。5、权利要求2所述的脱苄氧苄基反应的特征是使用的三氟醋酸溶液是体积含量为2~15%的三氟醋酸/二氯甲烷或三氟醋酸/三氯甲烷溶液；适宜的反应温度为-1040'C。6、权利要求l所述的14-羟基青藤碱衍生物在制备抗炎药物中的应用。全文摘要本发明公开一类14-羟基青藤碱衍生物，制备方法及其抗炎活性。本发明公开的青藤碱衍生物是以O-烃基和O-酰基青藤碱为原料，通过化学方法在14位发生氧化羟基化等反应制备的。本发明涉及的化合物在动物活体试验中表现出良好的抗炎活性，具有较好的应用前景。文档编号C07D221/00GK101628893SQ20081024393公开日2010年1月20日申请日期2008年12月17日优先权日2008年12月17日发明者宋广亮,朱红军,李玉峰,王锦堂,溢钱申请人:南京工业大学