专利名称：肽及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及肽和它们在治疗细菌感染中的用途。
背景技术：
抗微生物肽是先天免疫系统的关键效应分子和所有真核生物抗微生物感染的第一道防线的必需成分。许多原核生物还利用抗微生物肽作为抗争来自其他微生物挑战的手段。许多抗微生物肽的特征是有利于与微生物膜带负电荷的磷脂相互作用的阳离子特性，然后随着膜的通透而导致微生物的裂解和死亡。例如，已表明抗微生物肽分子能够在脂双层聚集并形成电压依赖性通道，导致微生物的内膜和外膜都通透(Lehrer，R.I.，J.Clin.Investigation，84553(1989))。这些分子的两亲性质还可以有利于通过静电吸引使疏水性残基插入到脂双层中，而使极性残基伸入膜和突出在膜上。
随着感染率持续上升，而有效的控制方法变得越来越有限，药物抗性微生物，特别是细菌变得越来越成问题。在过去的50来年，对抗生素的大量使用，加上抗生素的滥用处方和患者对治疗方案的非依从性，已经选择出了已发展出或已获得抗生素耐受的微生物。抗药生物体的传播和控制正成为医疗保健中最显著的问题之一。
特别值得注意的是，已发展出或已获得对诸如甲氧苯青霉素(甲氧西林)等抗生素的各种不同水平抗性的葡萄球菌属(Staphylococcus spp.)菌株。这些菌株一般被称为甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(MRSA)。此外，凝固酶阴性葡萄球菌，如表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)，也已成为重要的医院病原体。从装置相关感染物中分离的大约80％的表皮葡萄球菌是甲氧苯青霉素抗性(MRSE)以及多重抗性的。用于由甲氧苯青霉素抗性细菌如MRSA和MRSE参与或引起的感染的治疗选择目前是有限的，迫切需要发现抑制或杀死这种生物体的新疗法。
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是机会致病菌，其导致尿路感染、呼吸系统感染、皮炎、软组织感染、菌血症和各种全身性感染，尤其是在免疫抑制的严重烧伤者和癌症及AIDS患者中。由铜绿假单胞菌引起的呼吸道感染几乎专有地在具有受损的下呼吸道或受损的全身性防御机制的个体中发生。原发性肺炎发生于慢性肺病和充血性心力衰竭患者。菌血症性肺炎一般发生于接受化疗的中性粒细胞减少的癌症患者。常见囊性纤维化患者的下呼吸道被铜绿假单胞菌的粘液菌株定植，且很难治疗。需要开发治疗铜绿假单胞菌感染的有效方法。
尽管有来自数百万年共存的进化压力，但是由于微生物病原体并不易于获得对阳离子肽的抗性，因此有许多开发阳离子肽作为潜在抗微生物疗法的商业兴趣和努力。例如，在发明人的共同在审申请WO 2006/018652中，发明人描述了可以用于治疗微生物感染包括某些细菌感染的肽的确定。
仍然迫切需要能够用于治疗诸如那些由葡萄球菌和假单胞菌菌株引起的细菌感染的进一步的抗微生物活性物质。
发明内容
本发明部分基于发现精氨酸或赖氨酸的均聚物具有较强的杀菌性，因此能有效治疗细菌感染。
一方面，本发明提供作为抗细菌剂使用的肽，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
在本发明的优选肽中，所述序列的氨基酸为碱性氨基酸。
在优选肽中，所述碱性氨基酸选自赖氨酸、精氨酸和组氨酸，尤其是赖氨酸和精氨酸。更优选的碱性氨基酸为精氨酸。
在此所使用的“基本上”是相对修饰词，旨在表明从所修饰的特征中允许的变异。具体地，通过“所述氨基酸序列中基本上所有的氨基酸都是相同的”，意味着序列中的全部或者高比例的氨基酸都是相同的。“高比例”涵盖在序列中可以存在1或2个取代。
在一个优选方面，本发明提供作为药物使用的包含根据式(I)的氨基酸序列的肽或其肽变体， (X) (I) 其中X为氨基酸，精氨酸或赖氨酸。
在本发明的肽中，X可以为精氨酸。
在本发明的肽中，X可以为赖氨酸。
在本发明的肽中，X可以为组氨酸。
在本发明的一个优选方面，所述肽包含5至15个碱性氨基酸组成的序列。
在一个优选方面，本发明的肽包含9至15个例如10至15或10至13个碱性氨基酸组成的序列，其中所述氨基酸序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。更优选地，本发明的肽包含9至13个例如11至13个碱性氨基酸序列，其中所述序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
在进一步优选方面，本发明提供作为药物使用的包含根据式(II)的氨基酸序列的肽或其肽变体， (X)n(II) 其中X为氨基酸，精氨酸或赖氨酸，且n为5至15之间的整数。
在本发明的优选肽中，X为精氨酸。
在本发明的肽中，n可以是9至15之间的整数，如9、10、11、12、13、14或15。在本发明的优选肽中，n为9至14之间的整数，例如11至14之间的整数。优选n为13或14。
在式(I)的肽中，X可以是D-或L-氨基酸。
在一个优选方面，本发明提供由根据式(I)的氨基酸组成的线性肽。
本发明还包括上述氨基酸的已知的异构体(结构、立体、构象和构型)和结构类似物，包括模拟肽以及经自然(如翻译后修饰)或化学修饰的那些，所述化学修饰包括但不限于磷酸化、糖基化、磺酰化和/或羟基化。
此外，可以修饰所述肽的氨基酸序列以得到肽变体，所述肽变体包括肽中至少一个氨基酸残基取代另一个氨基酸残基例如碱性或非碱性残基，包括利用D而不是L型的取代，其中所述变体保留相应非变体肽的部分(通常至少10％)或全部生物学活性。因此，本发明提供肽变体，其中一个或更多个式(I)的赖氨酸或精氨酸残基被一个或更多个其他残基(如组氨酸)取代。
在此所使用的术语“肽”，概括地说，是指通过肽键连接在一起的多个氨基酸残基。与多肽、寡肽和蛋白的含义相同，可替换使用。
本发明的肽一般是合成肽。所述肽可以是分离、纯化的肽或其变体，其可以例如通过固相肽合成法、通过酶催化肽合成或借助于重组DNA技术在体外合成。
本发明的肽可以以不同的形式如游离酸、游离碱、酯和其他前药、盐和互变异构体存在，且本发明包括肽的所有变体形式。因此，本发明包括肽的盐或前药。
本发明的肽可以以药学上可接受的盐的形式给予。因此，本发明包括本发明的肽的药学上可接受的盐，其中该母体化合物通过制备其酸式盐或碱式盐进行修饰，所述酸式盐或碱式盐例如由如无机或有机酸或碱形成的常规无毒盐或季铵盐。这种酸加成盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、palmoate、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一酸盐。碱式盐包括铵盐，碱金属盐如钠和钾盐，碱土金属盐如钙和镁盐，与有机碱成的盐如二环己基胺盐，N-甲基-D-谷氨酸盐以及与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等成的盐。另外，含氮的碱性基团可以被试剂季铵化，所述试剂诸如低级烷基卤化物如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘；二烃基硫酸盐如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；长链卤化物如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷基氯、溴和碘，芳烷基卤化物如苯甲基和苯乙基溴以及其他。
本发明的肽或肽变体的羧基盐可以通过使肽与一当量或更多当量的期望碱相接触的常见方法制备，所述碱例如金属氢氧化物碱如氢氧化钠；金属碳酸盐或碳酸氢盐如碳酸钠或碳酸氢钠；或者胺碱如三乙胺、三乙醇胺等。
给药和药物制剂 本发明另一方面提供包含本发明的药学上有效量的肽的药物组合物。
所述组合物还包含药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。在此使用的短语“药学上可接受的”用于指那些在正确的医学判断范围内，适合用于与人或有些情况可能是动物的组织相接触的化合物、材料、组合物和/或剂型，它们没有过度的毒性、刺激性、过敏性反应或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比相称。
为达到期望的效果，肽、其变体或它们的组合可以单次或多次剂量给予，例如，以至少大约0.01mg/kg体重至大约500-750mg/kg体重，至少大约0.01mg/kg体重至大约300-500mg/kg体重，至少大约0.1mg/kg体重至大约100-300mg/kg体重或者至少大约1mg/kg体重至大约50-100mg/kg体重或者至少大约1mg/kg体重至大约20mg/kg体重的剂量给予，不过其他剂量也能提供有益效果。
为制备组合物，肽被合成或以其他方式获得，根据需要或期望纯化，随后冻干并使其稳定。然后可将所述肽调整至适当的浓度并任选与其他试剂组合。
因此，包含本发明的治疗肽的一种或更多种合适的单位剂型可以通过各种途径给予，所述途径包括口服、局部、肠胃外(包括皮下、静脉内、肌内和腹膜内)、阴道、直肠、皮肤、经皮、胸内、肺内和鼻内(呼吸)途径。该治疗肽还可以制成脂质制剂或者配制用于缓释(例如，使用微胶囊，参见WO 94/07529和第4,962,091号美国专利)。适当地，该制剂可以方便地以分散单位剂型提供，并可以通过制药领域熟知的任何方法制备。这些方法可以包括将治疗剂与液体载体、固体基质、半固体载体、微细的固体载体或它们的组合混合的步骤，然后若有必要，将产品引入或成形为期望的递送系统。
当本发明的治疗肽制备用于口服给药时，它们一般与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相结合形成药物制剂或单位剂型。用于口服给药，所述肽可以以粉末、颗粒形态、溶液、悬浮液或乳液存在。
包含本发明的治疗肽的药物制剂可以与常见赋形剂、稀释剂或载体一起配制并制成片剂、胶囊剂、溶液剂、混悬剂、粉剂、气雾剂等。
本发明的治疗肽还可以制成便于口服给药的酏剂或溶液剂，或者制成适合肠胃外给药的溶液剂，所述肠胃外给药例如通过肌内、皮下、腹腔内或静脉内途径进行。本发明的治疗肽的药物制剂还可以采用水溶液或无水溶液或分散体的形式，或者可选择地，采用乳剂或混悬剂或软膏的形式。
本发明的治疗肽可以制成用于肠胃外给药(如通过注射，例如团注或持续输注)，并可以以单位剂型存在于安瓿、预装注射器、小容量输注容器或多剂量容器中。
这些制剂可以包含本领域内熟知的药学上可接受的载体、介质(vehicle)和助剂。例如为制备溶液，可能使用除水之外的一种或多种从生理学角度上可接受的有机溶剂，该有机溶剂选自例如丙酮、乙酸、乙醇、异丙醇、二甲基亚砜、乙二醇醚如商品名为“Dowanol”的产品、聚乙二醇和聚氧乙烯、短链酸的C1-C4烷基酯、乳酸乙酯或乳酸异丙酯、脂肪酸甘油三酯如商品名为“Miglyol”的产品、豆蔻酸异丙酯(isopropyl mytrisate)，动物、矿物和植物油以及聚硅氧烷。
优选的给药途径为局部给药。对于局部给药，肽可以按照本领域内已知的用于直接施用于目标部位例如指甲和皮肤的方式进行配制。主要适用于局部施用的形式采用例如漆剂(laquer)、乳膏、乳剂(milk)、凝胶、粉剂、分散体或微乳液、较大或较小程度上增稠的洗剂、浸渍垫(impregnated pad)、软膏或棒剂、气雾剂制剂(如喷雾剂或泡沫剂)、皂剂、清洁剂、洗剂或皂块的形式。用于此目的的其他常规形式包括伤口敷料、涂层绷带或其他聚合物遮盖物、软膏、乳膏、洗剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂和气雾剂。因此，本发明的治疗肽可以通过贴剂或绷带递送用于皮肤给药。
本发明的肽可能可以例如通过一些经皮递送装置的形式经皮给药。这种装置是有利的，尤其是对于抗生素化合物给药而言，因为相对于例如口服或静脉内药物，它们可以允许延长治疗期。经皮递送装置的实例可以包括如适于通过患者皮肤释放肽的贴剂、敷料、绷带或硬膏剂。本领域技术人员熟悉可用于经皮递送化合物或物质的材料和技术，示例性的经皮递送装置在GB2185187、US3249109、US3598122、US4144317、US4262003和US4307717中有记载。例如，本发明的肽可以与一些基质或物质，如非水成聚合物载体相结合，使其适合用于经皮递送系统。所述肽/基质或物质混合物还可以使用机织物或编织物、无纺布、相对透气的网眼织物来进一步加强，以制备可暂时附着于患者身体特定部位的贴剂、绷带、硬膏剂等。以这种方式，经皮递送装置与患者皮肤接触时，按需要直接在感染部位或通过皮肤释放出化合物或物质。
本发明的肽还可以作为消毒或清洁助剂用于例如在体表上减少和/或消除细菌引起的感染。例如，在作为消毒或清洁剂使用之前，本发明的肽可以加入或稀释于合适的赋形剂或溶液中。示例性的赋形剂已在上文描述。这种消毒或清洁溶液可以用于消毒如家具、地板、包括诸如专业医院设备和/或外科手术设备的设备。在另一个实施方案中，本发明的肽可以用于消除和/或减少身体部位尤其是例如手上的细菌污染。所述肽可以作为水或非水溶液稀释(溶解于水、非水或有机溶剂中)，可以被施用到身体部位，例如手。
本发明的肽还可以给药至呼吸道。因此，为了在本发明的方法中使用，本发明还提供气雾剂药物制剂和剂型。一般地，这种剂型包含有效治疗或预防特定感染、适应症或疾病的临床症状的本发明的至少一种试剂的量。依照本发明的方法治疗的感染、适应症或疾病的一种或更多种症状在统计学上的任何显著性减轻，都被认为是在本发明的范围内治疗该感染、适应症或疾病。
本发明的肽可以作为与一种或更多种已知的抗微生物剂一起的组合疗法提供。通常本发明的肽以用于感染治疗的单一疗法提供。
应用 本发明的肽可以用于治疗或预防各种细菌感染。
因此，本发明另一方面提供根据本发明的肽或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或缓解由细菌参与或引起的感染的药物中的用途。所述细菌可以是革兰氏阴性或革兰氏阳性菌。
根据本发明的应用，所述细菌感染可以由选自以下但是不限于以下的细菌引起乏养菌属(Abiotropha spp)、无色杆菌属(Achromobacter spp)、氨基酸球菌属(Acidaminacoccus spp)、不动杆菌属(Acinetobacter spp)、放线杆菌属(Actinobacillus spp)、马杜拉放线菌属(Actinomadura spp)、放线菌属(Actinomyces spp)、气球菌属)(Aerococcus spp)、气单胞菌属(Aeromonas spp)、产碱杆菌属(Alcaligenes spp)、厌氧孤菌属(Anaerovibrio spp)、无形体属(Anaplasma spp)、隐秘杆菌属(Arcanobacterium spp)、节杆菌属(Arthrobacterspp)、芽孢杆菌(Bacillus spp)、拟杆菌属(Bacteroides spp)、巴尔通氏体属(Bartonella spp)、包特氏菌属(Bordatella spp)、包特氏菌属(Bordetella spp)、疏螺旋体属(Borrelia spp)、短螺旋体属(Brachyspira spp)、布氏杆菌属(Brucella spp)、伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia spp)、鞘杆菌属(Calymmatobacterium spp)、弯曲菌属(Campylobacter spp)、二氧化碳嗜纤维菌属(Capnocytophaga spp)、心杆菌属(Cardiobacterium spp)、卡托氏菌(Catonella spp)、衣原体属(Chlamydia spp)、金黄杆菌属(Chryseobacteriumspp)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter spp)、梭菌属(Clostridium spp)、棒状杆菌属(Corynebacterium spp)、考克斯氏体属(Coxiella spp)、皮肤杆菌属(Dermabacter spp)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio spp)、小杆菌属(Dialisterspp)、气球菌属(Dolosicoccus spp)、狡诈菌属(Dolosigranulum spp)、爱德华菌属(Edwardsiella spp)、依格斯氏菌属(Eggerthella spp)、埃立克体属(Ehrlichia spp)、艾肯菌属(Eikinella spp)、稳杆菌属(Empedobacter spp)、肠杆菌属(Enterobacter spp)、肠球菌(Enterococcus spp)、丹毒丝菌属(Erysipelothrix spp)、埃希氏菌属(Escherichia spp)、优杆菌属(Eubacteriumspp)、费克蓝姆菌属(Facklamia spp)、产线菌属(Filifactor spp)、黄色单胞菌属(Flavimonas spp)、黄杆菌属(Flavobacterium spp)、荧光杆菌属(Fluoribacter spp)、弗朗西斯氏菌属(Francisella spp)、梭形杆菌属(Fusobacterium spp)、加德纳菌属(Gardnerella spp)、孪生菌属(Gemella spp)、格鲁比卡氏菌属(Globicatella spp)、颗粒链菌属(Granulicatella spp)、嗜血杆菌属(Haemophilus spp)、哈夫尼亚菌属(Hafnia spp)、螺杆菌属(Helicobacter spp)、盐球菌属(Helococcus spp)、不活动粒菌属Ignavigranumspp)、寄居昆虫(Inquilinus spp)、金氏菌属(Kingella spp)、克雷伯菌属(Klebsiella spp)、克吕沃尔菌属(Kluyvera spp)、不动盖球菌属(Kytococcusspp)、乳杆菌属(Lactobacillus spp)、乳球菌属(Lactococcus spp)、军团菌属(Legionella spp)、钩端螺旋体(Leptospira spp)、纤毛菌属(Leptotrichia spp)、明串珠菌属(Leuconostoc spp)、李斯特菌属(Listeria spp)、巨球形菌属(Megasphaera spp)、微球菌属(Micrococcus spp)、小多孢菌属(Micropolyspora spp)、动弯杆菌属(Mobiluncus spp)、莫拉氏菌属(Moraxellaspp)、摩根菌属(Morganella spp)、分枝杆菌属(Mycobacterium spp)、支原体属(Mycoplasma spp)、气味黄杆菌(Myroides spp)、奈瑟菌属(Neisseria spp)、诺卡氏菌属(Nocardia spp)、东方体属(Orientia spp)、伯克氏菌属(Pandoraeaspp)、巴氏杆菌属(Pasteurella spp)、片球菌属(Pediococcus spp)、消化链球菌属(Peptostreptococcus spp)、光杆菌属(Photorhabdus spp)、邻单胞菌属(Plesiomonas spp)、卟啉单胞菌属(Porphyromonas spp)、普氏菌属(Prevotellaspp)、丙酸杆菌属(Propionibacterium spp)、变形杆菌属(Proteus spp)、普罗威登斯菌属(Providencia spp)、假单胞菌属、劳尔氏菌属(Ralstonia spp)、根瘤菌属(Rhizobium spp)、红球菌属(Rhodococcus spp)、立克次体属(Rickettsiaspp)、罗沙利马体属(Rochalimaea spp)、玫瑰单胞菌属(Roseomonas spp)、罗氏菌属(Rothia spp)、沙门氏菌属(Salmonella spp)、新月形单胞菌(Selenomonas spp)、小蛇菌属(Serpulina spp)、沙雷氏菌属(Serratia spp)、志贺氏菌属(Shigella spp)、Sneathia菌属、葡萄球菌属、窄食单胞菌属(Stenotrophomonas spp)、链杆菌属(Streptobacillus spp)、链球菌属(Steptococcus spp)、链霉菌属(Streptomyces spp)、Streptophomonas菌属、高温放线菌属(Thermoactinomyces spp)、高温单孢菌属(Thermomonosporaspp)、密螺旋体属(Treponema spp)、Tropheryma属、脲原体属(Ureaplasmaspp)、漫游球菌属(Vagococcus spp)、韦荣氏球菌属(Veillonella spp)、弧菌属(Vibrio spp)、魏斯菌属(Weisella spp)、威廉西亚菌属(Williamsia spp)、耶尔森菌属(Yersinia spp)。
根据本发明的应用，所述细菌感染可以由葡萄球菌属例如金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌引起，或者与其相关。所述金黄色葡萄球菌感染可以是甲氧苯青霉素抗性或甲氧苯青霉素敏感性的金黄色葡萄球菌菌株。
根据本发明的应用，所述细菌感染可以由假单胞菌属例如铜绿假单胞菌引起，或者与其相关。
根据本发明的应用，所述细菌感染可以由丙酸杆菌属例如痤疮丙酸杆菌引起，或者与其相关。
根据本发明的应用，所述细菌感染可以由医院细菌病原体，例如葡萄球菌属(如金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌)或假单胞菌属(如铜绿假单胞菌)引起，或者与其相关。
本发明还提供本发明的肽或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或缓解由细菌感染参与或引起的疾病或病症的药物中的用途。
所述疾病或病症可以由革兰氏阳性菌感染引起，或者与其有关，所述疾病或病症，例如疮(boil)、疖、蜂窝织炎、脓疱病、医院感染、菌血症、肺炎、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎、脓肿(abcesses)、囊性纤维化、胃肠感染、泌尿生殖器感染、败血症、咽炎、坏死性筋膜炎、急性肾小球肾炎、中耳炎(otilis media)、创伤感染(包括烧伤)、炭疽、脑炎、白喉、气性坏疽、肉毒中毒以及破伤风。
所述疾病或病症可以由革兰氏阴性菌感染引起，或者与其有关，所述疾病或病症包括淋病、脑膜炎、肺炎、中耳炎、骨髓炎、囊性纤维化、泌尿生殖器感染、腹膜炎、结膜炎、败血症、性病、菌血症、医院感染、痢疾、胃肠感染、伤寒、肺鼠疫、创伤感染、霍乱、肾脏感染、类鼻疽、结膜炎、百日咳、兔热病、布氏菌病、军团病、消化性溃疡、斑疹伤寒、咽炎。
根据本发明可治疗的其他疾病或病症，包括脓皮病、结核病、麻风病、布鲁里(buruli)溃疡、回归热、莱姆病、梅毒、呼吸道感染、泌尿生殖器感染。
根据本发明的应用，要治疗的疾病或病症可以是机会性细菌感染例如由通常不致病的细菌引起的细菌感染，或者由已知在身体部位通常与该细菌病原体的感染不相关的细菌病原体引起的细菌感染。例如，机会性感染可以由葡萄球菌属如金黄色葡萄球菌或表皮葡萄球菌引起。一个另外的应用，要治疗的疾病或病症可以为机会性细菌感染，例如由假单胞菌属如铜绿假单胞菌引起的，或与其相关的细菌感染。
细菌感染在免疫受损寄主中参与或引起主要的临床疾病包括但是不限于，尿路感染、呼吸道感染、皮炎、软组织感染、菌血症、骨和关节感染、胃肠感染以及各种全身性感染，尤其是在严重烧伤、癌症、囊性纤维化或AID患者中。对这些疾病的治疗是本发明的优选方面。
在一个实施方案中，本发明提供式(I)的肽或其药学上可接受的盐在制备用于治疗细菌感染，如机会性细菌感染的药物中的用途，在式(I)中，n为11至15之间的整数(尤其是11至13之间的整数)。
本发明的另一方面提供用于细菌感染的治疗、预防或延缓进展的方法，该方法包括向患者给予治疗有效量的根据本发明的肽或其药学上可接受的盐。
优选地，所述患者为哺乳动物，尤其是人。
本发明的方法可治疗的细菌感染可以是机会性感染，例如社区获得性感染或医院感染。
在本发明的优选方法中，所述肽或其药学上可接受的盐旨在作为用于吸入或肠胃外给药的制剂。
因此，在一个实施方案中，本发明提供用于细菌感染的治疗、预防或延缓进展的方法，该方法包括向患者给予治疗有效量的包含根据本发明的肽或其药学上可接受的盐的气雾剂制剂。本发明还提供包含根据本发明的肽或其药学上可接受的盐的气雾剂制剂，包括包含所述气雾剂制剂的吸入器。
在另一个实施方案中，本发明提供用于细菌感染的治疗、预防或延缓进展的方法，该方法包括向患者给予治疗有效量的包含根据本发明的肽或其药学上可接受的盐的肠胃外制剂。本发明还提供包含根据本发明的肽或其药学上可接受的盐的肠胃外制剂(尤其是静脉内)。
本发明涵盖表1的内容，该表提供根据本发明可治疗的细菌感染及其致病细菌的非排他性列表。
表1 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 其他细菌 根据本发明可治疗的具体疾病和病症的诊断，可以由本领域技术人员通过从血液、组织、尿液等中分离致病性细菌随后测定肽的杀菌/抑菌作用很容易地确定。
保护的范围包括含有或意图含有本发明的化合物的仿制品或假品，不论它们是否在事实上包含了这种化合物，也不论任意一种该化合物是否以治疗有效量包含。
可以理解地，与本发明的具体方面、实施方案或实施例相关联描述的特征、整数、特性、化合物、化学组成部分和基团都可被应用于在此描述的任何其他方面、实施方案或实施例，除非与此不相容。
以下实施例例示本发明。
实施例 材料和方法 所有的肽都是通过与肽供应商NeoMPS SA(法国斯特拉斯堡)的合同进行固相合成制备，或者购自Sigma-Aldrich化学试剂公司(英国普尔)。
阳离子肽序列 分析的肽序列示于表2中。Ac表示在寡肽C-端的乙酰化修饰，NH2表示寡肽N-端的酰胺化。
培养基稀释抗细菌敏感性试验 使用为临床和实验室标准化协会(Clinical Laboratory Standard Institute，CLSI；前身为NCCLS)已批准的标准测定相关细菌菌株对肽的敏感性。使用“厌氧生长细菌的稀释法抗微生物药物敏感性试验；批准标准-第7版M7-A7(Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria ThatGrow Anaerobically；Approved Standard-Seventh Edition M7-A7)”测试细菌的敏感性。
结果 肽的抗细菌活性示于表2中。
表2肽抗细菌的最小抑菌浓度(除非指明为(D)，所有的肽都是L异构体，*数值的单位为mg/ml)。
权利要求
1.作为抗细菌剂使用的肽，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
2.如权利要求1所述的肽，其中所述序列中基本上所有的氨基酸都是碱性氨基酸。
3.如权利要求1或2所述的肽，其中所述碱性氨基酸选自赖氨酸、精氨酸和组氨酸。
4.如权利要求3所述的肽，其中所述碱性氨基酸选自赖氨酸和精氨酸。
5.作为药物使用的肽或其肽变体，其包含根据式(I)的氨基酸序列，
(X)(I)
其中X为碱性氨基酸。
6.如权利要求5所述的肽，其中所述肽包含5至15个碱性氨基酸序列。
7.如权利要求5或权利要求6所述的肽，其中X为精氨酸。
8.如权利要求5或权利要求6所述的肽，其中X为赖氨酸。
9.如权利要求5或权利要求6所述的肽，其中X为组氨酸。
10.如前述任一项权利要求所述的肽或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或缓解由细菌参与或引起的感染的药物中的用途。
11.如权利要求10所述的用途，其中所述细菌为葡萄球菌属(Staphylococcus spp)。
12.如权利要求10所述的用途，其中所述细菌为假单胞菌属(Pseudomonas spp)。
13.如权利要求1至9中任一项所述的肽或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或缓解由细菌感染参与或引起的疾病或病症的药物中的用途。
14.如权利要求13所述的用途，其中所述疾病或病症选自疮、疖、蜂窝织炎、脓疱病、医院感染、菌血症、肺炎、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎、脓肿、囊性纤维化、胃肠感染、泌尿生殖器感染、败血症、咽炎、坏死性筋膜炎、急性肾小球肾炎、中耳炎、创伤、炭疽、脑炎、白喉、气性坏疽、肉毒中毒以及破伤风。
15.如权利要求13所述的用途，其中所述疾病或病症选自淋病、脑膜炎、肺炎、中耳炎、骨髓炎、囊性纤维化、泌尿生殖器感染、腹膜炎、结膜炎、败血症、性病、菌血症、医院感染、痢疾、胃肠感染、伤寒、肺鼠疫、创伤、霍乱、肾脏感染、类鼻疽、结膜炎、百日咳、兔热病、布氏菌病、军团病、消化性溃疡、斑疹伤寒、咽炎。
16.如权利要求13所述的用途，其中要治疗的疾病或病症由机会性细菌感染参与或引起。
17.如权利要求16所述的用途，其中所述疾病或病症选自在严重烧伤、癌症、囊性纤维化或AIDS患者中的尿道感染、呼吸道感染、皮炎、软组织感染、菌血症、骨和关节感染、胃肠感染和全身性细菌感染。
18.用于细菌感染的治疗、预防或延缓进展的方法，包括向患者给予治疗有效量的如权利要求1至9中任一项所述的肽或其药学上可接受的盐。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述肽或其药学上可接受的盐经肠胃外给予。
20.如权利要求18所述的方法，其中所述肽或其药学上可接受的盐通过吸入给予。
21.一种气雾剂制剂，其包含如权利要求1至9中任一项所述的肽或其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明涉及作为抗细菌剂使用的肽或其肽变体，其中所述肽的氨基序列中基本上所有的氨基酸都是相同的。
文档编号C07K7/06GK101641371SQ200880009199
公开日2010年2月3日 申请日期2008年1月28日 优先权日2007年2月2日
发明者D·奥尼尔 申请人:诺瓦生命科学有限公司