专利名称：一种长春碱的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种长春碱的制备方法，尤其是一种从长春花中提取长春碱的方法。
背景技术：
长春碱(vinblastine)是从夹竹桃科植物长春花中提取的一种具有明显的抗肿瘤活性的 二聚吲哚类生物碱。它对何杰金病及非小细胞性肺癌、恶性淋巴肿瘤等有显著疗效。其硫酸 盐已广泛用于临床30余年，迄今仍是主要的肿瘤用药之一。自1950年代中晚期Beer和Johnson 等从长春花中发现并提取长春碱，已从长春花全草lKg中分离出100余种吲哚生物碱，长春碱 的含量约为十万分之四。目前主要是从天然植物中提取长春碱，虽然利用化学合成和半合成 的方法可以得到长春碱及其衍生物，也有人研究通过组织培养的途径获得，但都不理想，不 适合生产。所以从天然植物中检测并分离提取长春碱的技术就显得重要。
现有技术中，提取长春碱主要采用溶剂法和超临界萃取法，前者大量采用有机溶剂，对 环境造成污染；后者设备投入大，不利于产业化。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简便、设备投入小、污染小的长春碱的制备 方法。
为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案
取长春花全草，用8-12倍量浓度为5-20%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间2-8分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至S，采用大孔吸附树脂柱吸附， 用pH=5的20-6096乙醇洗脱除杂，再用9596乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗涤、干 燥即得。
提取用乙酸水溶液浓度优选为10%，用量优选为10倍量。 微波辅助提取时间优选为4分钟。
大孔吸附树脂柱的型号为H-1020 、 X-5 、 AB-8 、 H-103 、 D-101 、 DA-201 、 DS-401、 DM-301中的一种或几种。
大孔树脂洗脱除杂用乙醇浓度优选为50%。
采用上述技术方案制备长春碱，操作简便、污染少、设备投入小，利于大生产操作。 下面将结合具体实施方式
对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于 下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取长春花全草lKg,用8倍量浓度为5%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提取 功率600W，提取时间2分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用H-1020型大孔吸附树脂 柱吸附，用pH=5的20%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓縮洗脱液，加入丙酮结晶，洗 涤、干燥即得长春碱0.36g，采用HPLC检测，其纯度为97.6%。
实施例2
取长春花全草1Kg，用12倍量浓度为20%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间8分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用X-5型大孔吸附树脂柱 吸附，用pH=5的60%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓縮洗脱液，加入丙酮结晶，洗涤、 干燥即得长春碱0.48g，采用HPLC检测，其纯度为96.7%。
实施例3
取长春花全草lKg，用IO倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用AB-8型大孔吸附树脂 柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗 漆、干燥即得长春碱0. 42g，釆用HPLC检测，其纯度为98.99L
实施例4
取长春花全草lKg，用IO倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用H-103型大孔吸附树脂 柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓縮洗脱液，加入丙酮结晶，洗 涤、干燥即得长春碱0.39g,采用HPLC检测，其纯度为97.9%。
实施例5
取长春花全草lKg，用10倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用D-101型大孔吸附树脂 柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用9596乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗 涤、干燥即得长春碱0.37g，采用HPLC检测，其纯度为98.4%。
实施例6
取长春花全草lKg，用IO倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W,提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用M-201型大孔吸附树 脂柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗涤、干燥即得长春碱0.45g，釆用HPLC检测，其纯度为98.4%。 实施例7
取长春花全草lKg，用IO倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用DS-401型大孔吸附树 脂柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓縮洗脱液，加入丙酮结晶， 洗涤、干燥即得长春碱0.35g，采用HPLC检测，其纯度为98.0%。
实施例8
取长春花全草lKg，用IO倍量浓度为10%的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提 取功率600W，提取时间4分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用DM-301型大孔吸附树 脂柱吸附，用pH=5的50%乙醇洗脱除杂，再用95%乙醇洗脱，浓縮洗脱液，加入丙酮结晶， 洗涤、干燥即得长春碱0.39g，采用HPLC检测，其纯度为97.9%。
权利要求
1、一种长春碱的制备方法，其特征在于所述的方法包括下列步骤取长春花全草，用8-12倍量浓度为5-20％的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提取功率600W，提取时间2-8分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用大孔吸附树脂柱吸附，用pH＝5的20-60％乙醇洗脱除杂，再用95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗涤、干燥即得。
2、 根据权利要求l所述一种长春碱的制备方法,其特征在于所述提取用乙酸水溶液浓度为廳。
3、 根据权利要求l所述一种长春碱的制备方法，其特征在于所述提取用乙酸水溶液用量为 IO倍量。
4、 根据权利要求l所述一种长春碱的制备方法，其特征在于所述微波辅助提取时间优选为 4分钟。
5、 根据权利要求l所述一种长春碱的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂柱的型号为 H-1020 、 X—5 、 AB—8 、 H-103 、 D—101 、 DA—201 、 DS—401、 DM—301中的一种或几种。
6、 根据权利要求l所述一种长春碱的制备方法,其特征在于所述大孔树脂洗脱除杂用乙醇 浓度为50%。
全文摘要
本发明涉及一种操作简便、污染小、设备投入少的长春碱的制备方法，工艺步骤为取长春花全草，用8-12倍量浓度为5-20％的乙酸水溶液浸泡2小时，微波辅助提取，提取功率600W，提取时间2-8分钟，滤过，滤液用氨水调节pH至8，采用大孔吸附树脂柱吸附，用pH＝5的20-60％乙醇洗脱除杂，再用95％乙醇洗脱，浓缩洗脱液，加入丙酮结晶，洗涤、干燥即得。采用本发明制备长春碱，易于实现产业化放大。
文档编号C07D519/04GK101643478SQ200910027239
公开日2010年2月10日 申请日期2009年5月26日 优先权日2009年5月26日
发明者琳 王, 范淦彬 申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司