专利名称：一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取分离方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物中一个孕留糖苷的提取分离方法，具体地，涉及从一 种中药组合物中提取分离 Δ 5-pregnene-3 β , 16 β，20 (R)-triol3_0-[2，-0-acetyl-β -D-digitalopyranosyl-(1 — 4) - β -D-cymaropyranoside] 20-0- [ β -D-glucopyranosyl- (1 — 6)-β -D-glucopyranosyl-(1 — 2) - β -D-digitalopyranoslde]的方法。
背景技术：
本发明中中药组合物包含如下原料药黄芪、附子、人参或党参、丹参、葶苈子、香 加皮或南五加皮、泽泻、玉竹、桂枝、红花、陈皮，该中药组合物是石家庄以岭药业股份有限 公司研制的一个治疗中轻度慢性心衰的药物，临床用于治疗冠心病、高血压病所致轻、中度 充血性心力衰竭等有较好疗效[1]魏聪，贾振华，吴以岭，刘建勋.芪苈强心胶囊对兔实验 性慢性心力衰竭心室重构的保护作用[J].疑难病杂志，2007，6 (3) :144-146。中国专利ZL 02146573. 8公开了该中药组合物的组方和制备工艺以及用途。化合物孕甾糖苷A5-pregnene-3 3，16β，20(R)-triol3-0_[2，-O-acetyl-β-D-digitalopyranosyl-(1 — 4) β -D-cymaropyranoside]20-0-[β -D-glucopyranosyl-(1 —6) - β -D-glucopyranosyl- (1 — 2) - β -D-digitalopyranoslde](简称 S_4a)首次 艮道 其来源于中药香力口皮[5]Hideji Itokawa, Junping Xu and Koichi Takeya. Pregnane Glycosides from an Antitumour Fraction of Periploca sepium[J]. Phytochemistry, 1988,27(4) :1173-1179。传统的中药质量控制技术多为经验式的主观评判和常规的理化及仪器分析，很难 从根本上解决中药质量控制中的关键问题.随着现代工程技术的发展，一些先进的中药制 药工程技术逐渐在中药质量控制中得以推广和应用，从中药中提取一些富有代表性的化合 物，为新的质量控制方法提供了可能。随着现代药剂学及有关药学科学的发展，新研究手段及现代技术应用于中药制剂 的研究和生产，使中药制剂突破了常规制剂的传统观念。中药中的化合物的确定与分离，为 中药制剂保证安全、有效、实用提供了物质依据。
发明内容
本发明目的是提供一种中药组合物中一个孕留糖苷的提取分离方法；所述中药组合物由如下重量份的原料药制成黄芪150-450份、附子40-120份、人 参或党参75-225份、丹参75-225份、葶苈子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻 75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、红花30-90份、陈皮25-75份，所述孕留糖苷的化δ 5-pregnene-3 β , 16 β , 20 (r) -triol3-0-[2, -0-acetyl-β -d-digitalopyra nosyl-(l — 4) β -D-cymaropyranoside] 20-0-[ β -D-glucopyranosyl-(1 — 6)- β -D-glucop yranosyl-(l — 2) - β -D-digitalopyranoslde](简称 S_4a)，分离方法如下a、按比例称取其中黄芪、人参或党参、葶苈子、泽泻、香加皮，加入8倍量70%乙4醇，浸泡30分钟，回流提取3小时，滤过，再加入8倍量70%乙醇，回流提取2小时，滤过，合 并滤液，减压回收乙醇，浓缩至在60°C测定相对密度为1. 15-1. 20，得醇提浸膏；b、步骤a所得醇提浸膏冷藏过夜，板框过滤，加水稀释至密度为0. 1克药材/ml，得 中药液；C、大孔树脂加入4倍树脂体积的5%氢氧化钠，充分搅拌，浸泡，水洗至中性，加入 95%乙醇浸泡、装柱，以两倍柱体积的95%乙醇冲洗，继水洗至无醇味，备用；d、步骤b所得中药液以1倍柱体积/小时通过树脂柱，收集过柱液；e、用4倍柱体积的水进行洗脱，收集洗脱液，与过柱液合并，减压浓缩呈浓浸膏， 记为El ；继续用4倍柱体积的10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为 E2 ；继续用4倍柱体积的30%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E3 ；继 续用4倍柱体积的50%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E4 ；继续用4 倍柱体积的70%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E5 ；继续用4倍柱体 积的95%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E6 ；f、取E4部分经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水洗脱，分份收集，合并相同流份；g、将步骤f中第四个相同流份减压浓缩干燥，再经开放C18柱色谱，依次用50%甲 醇、甲醇洗脱，甲醇部分经HPLC制备纯化，即得目标化合物。其中步骤c所述大孔树脂，优选为AB-8树脂。该方法优选为如下步骤a、按比例称取其中黄芪、人参或党参、葶苈子、泽泻、香加皮，加入8倍量70%乙 醇，浸泡30分钟，回流提取3小时，滤过，再加入8倍量70%乙醇，回流提取2小时，滤过，合 并滤液，减压回收乙醇，浓缩至在60°C测定相对密度为1. 15-1. 20，得醇提浸膏；b、醇提浸膏冷藏过夜，板框过滤，加水稀释至密度为0. 1克药材/ml，得中药液；c、AB-8树脂加入4倍树脂体积的5 %氢氧化钠，充分搅拌，浸泡，水洗至中性，加入 95%乙醇浸泡、装柱，以两倍柱体积的95%乙醇冲洗，继水洗至无醇味，备用；d、步骤b所得中药液以1倍柱体积/小时通过树脂柱，收集过柱液；e、用4倍柱体积的水进行洗脱，收集洗脱液，与过柱液合并，减压浓缩呈浓浸膏， 记为El ；继续用4倍柱体积的10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为 E2 ；继续用4倍柱体积的30%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E3 ；继 续用4倍柱体积的50 %乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E4 ；继续用4 倍柱体积的70%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E5 ；继续用4倍柱体 积的95%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E6 ；f、取E4部分20g溶解于60 %甲醇中，与90g薄层硅胶拌勻后烘干，上样于 10X 30cm的硅胶干柱，依次用9 1的氯仿-甲醇2000mL，18 3的氯仿-甲醇6000mL， 9 2的氯仿-甲醇7000mL，65 35 10的氯仿-甲醇-水6000mL梯度洗脱，每份收集 IOOmL,共收集150份，最后用纯甲醇洗脱2000mL ；TLC检测各流份，10%浓硫酸显色，分别将 相近斑点的流份合并，得到16个部分分别标记为Frl-Frie ；g、Fr4溶解于50%甲醇中，上样于50%甲醇平衡的3 X 32cm的C18柱色谱，依次 用50%甲醇洗脱2000mL，甲醇洗脱500mL，分份收集，每份80mL ；HPLC-ELSD检测，合并相同 流份，其中甲醇洗脱部分再经制备HPLC即得目标化合物。
本发明中所述中药组合物组方中的其它药味的提取和浓缩等制备工艺在中国专 利ZL 02146573. 8均已公开，本发明中化合物S-如仅是从本发明中药组合物中醇提部分分 离得到，但该中药组合物密不可分，缺少某些药味可能会丧失临床价值。本发明所述中药组合物原料药的重量份比例优选为黄芪450份、附子112. 5份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、桂枝90份、红花90份、陈皮75份。或者黄芪250份、附子112. 5份、人参或党参200份、丹参120份、葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、桂枝75份、红花75份、陈皮60份。或者黄芪150份、附子40份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子50份、香加皮或南五加皮180份、泽泻75份、玉竹75份、桂枝30份、红花90份、陈皮25份。为阐明本发明提取分离方法所得化合物的结构，对实施例中所的化合物(表述为 化合物a)，进行如下鉴定1、实验条件各种NMR实验均在Varian unityINOVA 600超导核磁共振谱仪上完成，1H观测频率 为599. 66MHz，13C观测频率为150. 78MHz，样品以pyridine_d5为溶剂，使用5mm NMR探头， NMR实验在27°C进行，氢谱以TMS为内标，碳谱以pyridine-d5为内标(δ = 149.9,135.5, 123. 5)。1Hi普谱宽 12004. 8Hz，碳谱谱宽 36003. 6Hz。二维谱包括 1H-1H COSY, HSQC, HMBC 谱，均采用标准脉冲程序。1H-^ COSY谱宽为5700. OHzX5700.0Hz，采样矩阵点数分别为 2048X2048 ；HSQCi普宽为5800Hz X ^OOOHz，采样矩阵点数分别为2048X128。HMBCi普宽分 别为5800HzX34000Hz，采样矩阵点数分别为2048X256。2、结果分析化合物a 为白色无定形粉末。正离子 FAB-MS m/z :1187. 5[M+Na]+，1165. 5[M+H]+， 1003. 5[M+H-162]+，801. 3 [M+H-162-202]+，639. 2 [M+H-162-202-162]+，299. 1 [M+H-162 -202-162-144-160-36]+。结合化合物a的1H和13C NMR数据可知其分子式为C56H92O25, 分子量为 1164。在 1HNMR 中δ 0. 94 (3Η, s, CH3-19)，1. 03 (3H, s, CH3-18)，1. 65 (3H, d, J = 6. 5Hz，CH3-2I)，分别为苷元上3个甲基的特征信号；δ 1. 45 (3Η，d，J = 7. 2Hz， CH3-6 ‘ “ )，1. 46(3H，d，J = 6. 6Hz，CH3-6' )，1. 56 (3H，d，J = 6. 0Hz，CH3_6 〃 ),2. 12 (3H, s，2 〃 -COCH3) ,3. 35 (3H, s，3 〃 -OCH3)，3. 51 (6H，s，3 ‘ -OCH3 和 3 ‘ “ -OCH3)，分别是加拿 大麻糖和洋地黄糖上的甲基和甲氧基；S 4.61 (1H，d，J = 7.8Hz，H-I' ‘‘ )，4. 72(lH，d，J =7. 8Hz, H-I “ ) ,5. 26 (1H, d, J = 9. 6Hz, H-I' )，5. 35 (1H, d, J = 7. 8Hz, H-I ““)和 5. 44 (1H, d, J = 7. 8Ηζ,Η-1'‘‘“)为5个糖基的端基质子信号，糖端基氢的J值大于7， 说明均为β构型，糖上其它质子信号大都集中在S3.5 5.0之间张洁，马百平，康利 平et.滇黄精中两个呋留皂苷的NMR研究[J].波谱学杂志，2006，23(1) 30-40 ；Agrawal P K. NMR spectroscopy inthe structural elucidation of oligosaccharides andglycosides [J]. Phytochemistry, 1992,31 (10) :3307-3330 ；杨秀伟，崔育新，刘雪辉·卷 丹皂苷A和甾体皂苷的NMR特征[J],波谱学杂志，2002，19 (3) :301-308. ] ； δ 5. 28 (1Η, br s, H-6)是 C-5 和 C-6 双键的特征质子信号；δ 3. 78 (1Η, m, H-3),4. 26 (1H, m, H_20) 和5. 11(1H，m，H-16)为苷元含氧碳上的特征质子信号。在13C NMR中δ 96. 3 (C-Γ )， 103.6(0-1" ),104. 3 (C-Γ “ )，104. 1 (C-1 〃 “)和 105.3(C-1'““)是糖的端基碳 信号；δ 140.7 (C-5)和122. l(C-6)是C_5和C_6双键的特征信号。以上主要数据均与 S_4aHideji Itokawa, Junping Xu and Koichi Takeya. PregnaneGlycosides from an Antimmour Fraction of Periploca sepium[J]. Phytochemistry,1988,27(4) :1173_1179
一致，但未见其氢信号的全归属报道。综合利用C0SY，HMQC和HMBC谱，将化合物a的所有碳氢信号进行了确切的归属。 通过糖的端基氢和甲基氢等特征信号为出发点，通过COSY将氢信号进行确切位置归属，再 通过HSQC确定碳的位置，中间辅以HMBC解决一些信号重叠和连接中断的问题，从而确定各 个自旋系统的所有碳氢信号，最后通过HMBC把糖与糖之间和苷元与糖联系起来，确定化合 物的结构，见
图1。苷元上，在COSY谱中，从特征的角甲基质子信号δ 1.65(CH3-21)出发，可以 依次看到如下相关关系S 1.65 — δ 4. 25 (Η-20) - δ1·73(Η_17)— δ 5. 11 (H-16)-δ 1· 40 和 δ2·32(Η_15) — δ1·04(Η_14) — δ 1. 50 (Η-8) — δ 0· 89 (Η_9) — δ 1· 35 和1.37 (H-Il) — δ 1.17和1.84(Η-12)；从特征的烯基质子出发，有如下相关信号 δ 5. 28 (H-6) - δ 1.56和1.92(Η_7)— δ 1. 50 (Η_8)；从特征的3位含氧碳原子上质 子信号出发，可得到如下相关信号3 2.34和2. 48(Η-4) — δ 3. 78 (Η_3) — δ 1. 70和 2. 07 (Η-2) — δ 0. 94 和 1. 70 (H-I)。在 HMBC 谱上，δ 1. 65 (CH3_21)与碳信号 δ 62. 7 (C-17) 和 79. 4(C-20)远程相关，δ 1. 03(CH3-18)与碳信号 δ 39. 6 (C-13)，41. 2 (C-12)， 54. 3 (C-14)和 62. 7 (C-17)远程相关，δ 0. 94 (CH3-19)与碳信号 δ 36. 9 (C-IO)，37. 4 (C-I)， 50.3(C-9)和122. I(CI)远程相关，见图2。从而可以将苷元上的所有碳氢信号确切归 属，见表 1，确定苷元的结构为A5-pregnene-3 0，16β，20(R)_triolHideji Itokawa, Junping Xu andKoichi Takeya. Pregnane Glycosides from an Antitumour Fraction of Periplocasepium[J]. Phytochemistry, 1988, 27 (4) :1173_1179。其中 16 位 20 位的构型 是由碳原子的化学位移 δ 39. 6 (C-13)，54. 3 (C-14)，35. 7 (C-15) ,71. 5 (C-16)，62. 7 (C-17)， 79. 4(C-20)和22.2(C-21)确定的(16a ,20( 构型化合物的化学位移位S42.4(C_13)， 53. 6 (C-14)，35. 8 (C-15)，77. 3 (C-16)，68. 5 (C-17)，82. O (C-20)和 23. 8(C-21)) [Hideji Itokawa, Junping Xu and Koichi Takeya. PregnaneGlycosides from an Antitumour Fraction of Periploca sepium[J].Phytochemistry,1988, 27(4) 1173-1179 ；Kaoru Umehara, Nacomi Samm, Iiua and Hiroko Satoh, et.al.Studies on differentiation Inducers. V. Steroid glycosides from periplocaeradicis cortex[J]. Chem Pharm Bull,1995,43(9) :1565-1568.。从洋地黄糖的端基氢信号δ4.72(Η_1")出发，在COSY谱中，可以看到如下关 系，δ 4. 72— δ 5. 82— δ 3. 53 — δ 4. 08 依次相关，见图 3，δ 1. 56 和 δ 3. 77 相关；在 HMBC谱中，δ 1.56的甲基信号分别于δ 67. 8和δ 71. 5两个碳信号有远程相关，δ 3. 35 的甲氧基信号与S 82. 3的碳有远程相关，见图2，δ 5. 82的氢信号和δ 2. 12的甲基信号分别与δ 169. 7的碳有远程相关；在HSQC谱中，δ 4. 08和δ 67. 8相关，这样就确定了这 个糖上所有氢质子的确切位置和一个乙酰基的连接位置；再通过HSQC谱，即可确定这个糖 上所有碳氢的信号S 4.72 (H-l" )/103.6(0-1" )，5.82(H_2" )/71.8(0-2" ),169.7(0 = C-2" )，2· 12/56. 2(-C0CH3-2" ),3.53 (H-3 " )/82. 3 (C_3" )，3. 35/56. 5 (0CH3_3 ")， 4. 08(H-4" )/67. 8 (C-4" ),3.77 (H-5" )/71. 5 (C_5〃 )，1.56(H_6" )/17.2(C-6")。从加拿大麻糖的端基氢信号δ5^6(Η_1')出发，在COSY谱中，可以看到如下关 系，δ 5. 26 和 δ 1. 89 相关，δ 2. 32 — δ 4. 07 — δ 3. 53 — δ 4. 23 — δ 1. 46 依次相关；在 HMBC谱中，δ 1. 46的甲基信号分别于δ 68. 8和δ 84. 2两个碳信号有远程相关，δ 3. 51的 甲氧基信号与δ 77. 5的碳有远程相关；这样就可将这个糖上所有氢的位置和所连甲氧基 的位置进行确切归属，再通过HSQC得到对应碳的信号，就可全归属加拿大麻糖上所有碳氢 信号，见表1和图2。从葡萄糖的端基氢信号δ5.44(Η_1'丨‘“)出发，在COSY谱中，可以看到如下关 系，δ 5. 44— δ 4. 02— δ 4. 47 — δ 4. 17 — δ 4. 12 — δ 4. 38 — δ 4. 57 依次相关，实际 归属中，由于S 4. 04 4. 之间氢信号重叠严重，并不能确切δ 4. 17— δ 4. 12的相关关 系，见图3 ；但在HSQC谱中，六碳糖中比较特征的6位碳信号δ 63. O与δ 4. 38和δ 4. 57两 个氢信号相关，在HMBC谱中，碳信号δ 63. O与δ 4. 17的氢信号远程相关，氢信号δ 4. 38 与δ 72. 1和78. 4两个碳有远程相关；再通过HSQC得到相互对应的碳氢信号，就可全归属 加这个葡萄糖糖上所有碳氢信号。同样的方法，我们可以分别通过端基氢δ4.61(Η_1'“)和5.35(Η_1〃 “)出 发，归属另一个洋地黄糖和葡萄糖的所有碳氢信号。具体见表1。表1化合物a的核磁数据Position^h (J in Hz)(5h (J in Hz)137.40.94 ο, 1.70 m4'-0-Dig230.41.70 m, 2.07 m1"103.64.72 d (7= 7.8)377.43.78 m2"71.85.82 dd(J=8.4, 9.6)439.42.34 m, 2.48 brd (J= 0.8)3"82.33.53 m
权利要求
1.一种中药组合物中一个孕留糖苷的提取分离方法，该中药组合物由如下重量份的原 料药制成黄芪150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、丹参75-225份、葶苈 子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、 红花30-90份、陈皮25-75份，该孕甾糖苷的结构为Δ 5-pregnene-3 β，16 β，20 (R)-triol 3-0-[2,-0-acetyl-β -D-digitalopyranosyl-(1 — 4)-β -D-cymaropyranoside]20_0_[ β -D-glucopyranosyl- (1 — 6) - β -D-glucopyranosyl- (1 — 2) - β -D-digitalopyranoslde]， 其特征在于该孕留糖苷是经如下步骤制得的a、按比例称取其中黄芪、人参或党参、葶苈子、泽泻、香加皮，加入8倍量70%乙醇，浸 泡30分钟，回流提取3小时，滤过，再加入8倍量70%乙醇，回流提取2小时，滤过，合并滤 液，减压回收乙醇，浓缩至在60°C测定相对密度为1. 15-1. 20，得醇提浸膏；b、步骤a所得醇提浸膏冷藏过夜，板框过滤，加水稀释至密度为0.1克药材/ml，得中药液；c、大孔树脂加入4倍树脂体积的5%氢氧化钠，充分搅拌，浸泡，水洗至中性，加入95 % 乙醇浸泡、装柱，以两倍柱体积的95%乙醇冲洗，继水洗至无醇味，备用；d、步骤b所得中药液以1倍柱体积/小时通过树脂柱，收集过柱液；e、用4倍柱体积的水进行洗脱，收集洗脱液，与过柱液合并，减压浓缩呈浓浸膏，记为 El ；继续用4倍柱体积的10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E2 ；继 续用4倍柱体积的30%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E3 ；继续用4 倍柱体积的50%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E4 ；继续用4倍柱体 积的70%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E5 ；继续用4倍柱体积的 95%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E6 ；f、取E4部分经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水洗脱，分份收集，合并相同流份；g、将步骤f中第四个相同流份减压浓缩干燥，再经开放C18柱色谱，依次用50%甲醇、 甲醇洗脱，甲醇部分经HPLC制备纯化，即得目标化合物。
2.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于该分离方法中步骤c所述大孔树脂 为AB-8树脂。
3.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于该分离方法经如下步骤a、按比例称取其中黄芪、人参或党参、葶苈子、泽泻、香加皮，加入8倍量70%乙醇，浸 泡30分钟，回流提取3小时，滤过，再加入8倍量70%乙醇，回流提取2小时，滤过，合并滤 液，减压回收乙醇，浓缩至在60°C测定相对密度为1. 15-1. 20，得醇提浸膏；b、步骤a所得醇提浸膏冷藏过夜，板框过滤，加水稀释至密度为0.1克药材/ml，得中药液；c、AB-8树脂加入4倍树脂体积的5%氢氧化钠，充分搅拌，浸泡，水洗至中性，加入95 % 乙醇浸泡、装柱，以两倍柱体积的95%乙醇冲洗，继水洗至无醇味，备用；d、步骤b所得中药液以1倍柱体积/小时通过树脂柱，收集过柱液；e、用4倍柱体积的水进行洗脱，收集洗脱液，与过柱液合并，减压浓缩呈浓浸膏，记为 El ；继续用4倍柱体积的10%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E2 ；继 续用4倍柱体积的30%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E3 ；继续用4 倍柱体积的50%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E4 ；继续用4倍柱体积的70%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E5 ；继续用4倍柱体积的 95%乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E6 ；f、取E4部分20g溶解于60%甲醇中，与90g薄层硅胶拌勻后烘干，上样于10X30cm 的硅胶干柱，依次用9 1的氯仿-甲醇2000mL，18 3的氯仿-甲醇6000mL，9 2的氯 仿-甲醇7000mL，65 35 10的氯仿-甲醇-水6000mL梯度洗脱，每份收集lOOmL，共收 集150份，最后用纯甲醇洗脱2000mL ;TLC检测各流份，10 %浓硫酸显色，分别将相近斑点的 流份合并，得到16个部分分别标记为Frl-Frie ；g、Fr4溶解于50%甲醇中，上样于50%甲醇平衡的3X 32cm的C18柱色谱，依次用50% 甲醇洗脱2000mL，甲醇洗脱500mL，分份收集，每份80mL ；HPLC-ELSD检测，合并相同流份，其 中甲醇洗脱部分再经制备HPLC即得目标化合物。
4.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原 料药制成黄芪450份、附子112. 5份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、桂枝90份、红花90份、陈皮75份。
5.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原 料药制成黄芪150份、附子40份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子50份、香加皮或南五加皮180份、泽泻75份、玉竹75份、桂枝30份、红花90份、陈皮25份。
6.如权利要求1所述的提取分离方法，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原 料药制成黄芪250份、附子112. 5份、人参或党参200份、丹参120份、葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、桂枝75份、红花75份、陈皮60份。
全文摘要
本发明公开了一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取方法。本发明中药组合物由黄芪、人参、丹参等11味中药组成，临床用于治疗冠心病、高血压病所致轻、中度充血性心力衰竭等有较好疗效，本发明从其活性部位提取分离得到了一个孕甾糖苷，首次报道其来源于中药香加皮，该提取分离方法可用于质量控制或者制备新的制剂。
文档编号C07J17/00GK102040641SQ20091007566
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月13日 优先权日2009年10月13日
发明者余河水, 刘奕训, 吴以岭, 康利平, 王宏涛, 贾继明, 邹鹏, 郑亚杰, 马百平 申请人:河北以岭医药研究院有限公司