2-甲基-5-硝基咪唑类化合物及其制备方法和应用的制作方法

专利名称：：2-甲基-5-硝基咪唑类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一类亲乏氧肿瘤的放射性核素标记的硝基咪唑类配合物及其前体，还涉及它们的制备方法和在人或动物器官或组织的显像剂中的应用，特别是在肿瘤显像剂中的应用，属于放射性药物及核医学领域。
背景技术：
：组织乏氧是临床上多种重要疾病的一个主要特征，动物和人实体肿瘤中普遍存在乏氧细胞，而乏氧细胞对放疗和化疗都不敏感，因而常成为肿瘤难以治愈、容易复发的重要原因。对肿瘤患者治疗前后肿瘤的氧水平进行检测，可评价疗效、有助于制定治疗方案。采用非侵入性方法确定肿瘤乏氧一直受到广泛重视，核医学技术是利用乏氧组织显像剂进行单光子发射计算机断层显像(SPECT)或正电子发射断层显像(PET)，该技术简便易行。乏氧显像能在活体水平上整体、无创性地评价肿瘤的乏氧程度，为临床选择合理的肿瘤治疗方案提供客观依据，非常适于临床推广应用。因此，用肿瘤乏氧组织显像剂检测肿瘤组织乏氧成为这一领域研究的热点。1955年，Nakamura发现5-硝基咪唑能迅速抗厌氧感染。硝基咪唑类在厌氧环境中的这种特性，已用于肿瘤乏氧组织放射增敏剂的研究。早在80年代初，Chapman等(GarrechtBM,ChapmanJD.5r.Ji^/。/.1983,56,745)就提出将这些化合物用于体内乏氧组织显像(PET或SPECT)测定组织中氧水平的设想。碳-14(14C)、氢-3(3H)、氟-18(18F)、溴-82(82Br)以及放射性碘标记的2-硝基咪唑已用于心肌和肿瘤的显像研究(NunnA.etal./Wwc/.Mec/.1995,22:265;SchneiderRFetal.gwaWer/_y./M/c/.Met/.1995，39:41;GrosharD，etal.J!TVwc/.她d.1993，34:885;A1-ArafajA,etal.五wr.J7Vwc/.她d1994,21:1338;YehSH,etal./7Vmc/.她d1994,35:205;WebbP，etal./Z^e〃edCompd.ia力'—"服1990，28:257;TewsonTJ,etal.7Vwc/.Afed所o/.1997,24:755;PiertM,etal./TVwc/.Tkfec/.1999,26:95)。然而，这些放射性核素不易获得以及昂贵的PET显像设备严重制约着这些药物的广泛研究和应用。由于"mTc的优良核性质以及很容易从"Mo/"，c发生器中淋洗得到，这些优点吸引着研究者对"mTc标记乏氧组织显像药物进行着艰苦的探索，并且成为近年研究的热点。近年来已经合成了一系列锝-99m(99mTc)标记的2-硝基咪唑配合物。1994年Linder等合成了"，c-[PnAO-l-(2-硝基咪唑)](即BMS181321,结构如下面的结构式a)(LinderKE,etal./Oze附.1994,37:9)，1995年Wedeking等又合成了BMS194796(亦称BRU59-21，结构如下面的结构式b)(WedekingP，etal.Wmc/.1995,36:17)，这是目前临床研究最多的一类乏氧显像剂。Ballinger等(Ballinger,J.R.;Kee，J.W.M.;Rauth,A.M.M/c/.Mec/.1996，37:1023)和Melo等(Melo，T.;Duncan,J.;Ballinger,J.R.;Rauth,A.M./A^c/.A/ed2000,41:169)对BMS181321和BRU59-21两种显像剂的生物性能研究结果表明它们可以用于实体肿瘤乏氧状态的临床研究且目前已用于临床研究。国内外其他学者(例如:BallingerJR.S讓'".Med2001,31:321;SophieM,etal.T^ra/zeJraw.2001，57:9979)也在硝基咪唑类乏氧显像剂的研究中进行了大量的工作，并取得了一定的研究成果。然而，研究表明这些硝基咪唑类乏氧显像剂都存在肿瘤绝对摄取值较低和肝本底较高的缺陷，这影响了肿瘤乏氧显像效果。5-硝基咪唑类化合物，尽管其亲电性略低，但在一些新近研究中也显示出具有在乏氧细胞中摄取及滞留的能力，且表现出部分不典型的、不同于2-硝基咪唑类化合物的特征。近年来，一些学者(KumarP,etal.々p/.iaWaZ.Zo.2002，57:719;YangDJ,etal.户/z齒.版1999，16:743;DasT,etal.肠/.Med編.2003,30，127.MalliaMB,etal.iWedOzem.2005,15:3398;MalliaMB,etal.M^/.Ozew.2006,14:7666)报道合成了含2-甲基-5-硝基咪唑基团的配合物，研究表明该类配合物在肿瘤中有一定摄取且具有一定的乏氧选择性，并表现了不同于2-硝基咪唑类配合物的生物特征，但是这些配合物也存在着肿瘤摄取低和肝本底高的缺陷。氮杂大环的合成及其配位化学一直是人们感兴趣的领域，这是由于大环的不同腔径对不同金属离子具有配位选择性，氮杂大环配合物对酸催化降解不敏感，在低的pH下具有动力学稳定，这些性质有利于它作为螯合基团用于放射性诊断和治疗药物的研究。1，4，8，11-四氮杂环十四垸(cydam)作为氮杂大环中重要的一种，可作为双功能联接剂标记生物分子(一般为小肽、蛋白质或单克隆抗体等)和其它生物活性分子，目前用于氮杂大环化合物标记的放射性核素主要为"'"Tc、64Cu、67Cu、188Re、90Y、'"In和"Ga等。其中目前已报道的用"m丁ca配合物BMS181321b配合物BRU59-21形成^Tc02形式的配合物，而"mTcO、9^TcN和"mTc(CO)3形式的氮杂大环配合物鲜有报道。基于以上考虑，发明人合成了一种以l，4，8，ll-四氮杂十四烷(cyclam)为双功能联接剂的2-甲基-5-硝基咪唑化合物，并用锝-99m对此化合物进行标记，得到了一类放射性锝-99m标记的配合物。该类配合物可以作为肿瘤乏氧显像剂，能够明显改善目前肿瘤乏氧显像剂肿瘤绝对摄取值低和肝本底高的缺点，从而明显改善在肿瘤乏氧组织中的显像质量，可广泛应用于医疗显像领域。本发明的首要目的在于提供一类与乏氧肿瘤组织具有更高亲和力的硝基咪唑类配合物，该目的通过以下方案实现先提供一种新的硝基咪唑类化合物，即含有l，4，8，ll-四氮杂十四垸(cyclam)的2-甲基-5-硝基咪唑类化合物(MN正C)，其结构如下式A。所述MNIEC的合成方法包括以下步骤1)用三氟乙酸乙酯将l，4,8,ll-四氮杂十四烷(cydam)进行三氮保护；2)用甲磺酰氯对2-溴乙醇与2-甲基-5-硝基咪唑发生烷基化反应得到的产物进行磺酰化；3)将步骤2)的磺酰化产物与步骤l)的三氮保护产物发生烷基化反应；4)将步骤3)的烷基化产物在甲醇作为溶剂和氢氧化钠条件下脱保护，得到目标化合物MNIEC。上述合成方法的具体方案与实施例l中的方法相同，此处不再赘述。本发明进一步提供由放射性核素标记上述化合物MNIEC配体而得到的配合物。所述放射性核素可以是放射性锝-99m。所述由放射性核素标记配体而得到的配合物优选99mTcO-MNIEC、"，cN-画正C或"mTc(CO)3-MNIEC。本发明还提供所述优选配合物的制备方法，包括下述步骤1)分别制备"，c-葡庚糖酸钠(99mTcO-GH)、[99mTcN]+中间体或+中间体；
发明内容72)将步骤l)得到的9加Tc-GH、[""cN]2+中间体或["，c(CO)3(H20)3]+中间体分别加入到配体中，用0.1M氢氧化钠溶液将之调整为PH13,沸水浴加热30分钟，分别得到""TcO-配合物、"，cN-配合物或"，c(CO)3-配合物。通过上述方法制备所述3种优选配合物的具体方案分别与实施例24中的方法相同，此处不再赘述。本发明还提供所述配合物在人或动物的器官与组织中作为显像剂的用途，特别是作为肿瘤乏氧显像剂的用途。本发明所述的配合物是以cyclam为双功能联接剂的放射性核素标记的2-甲基-5-硝基咪唑化合物，因其特定的分子结构而具有较高的肿瘤摄取，特别是99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNIEC配合物，它们的肿瘤绝对摄取值高且肝本底低，肿瘤/肝比值在l左右，瘤/肉和瘤/血比值也较高，瘤/肉比值在注射后2小时都大于3.5，并且瘤/血比值也在l左右，作为显像剂应用于肿瘤显像时，与目前用于临床的比较流行的肿瘤乏氧显像剂""^c-BMS181321和99mTc-BRU59-21的生物分布比较，都具有肿瘤摄取高和肝本底低的显著特点，99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNIEC在注射后2小时，肿瘤绝对摄取值分别为2.12±0.45%ID/g和2.52±0.69%ID/g，明显高于"mTc-BMS181321和"mTc隱BRU59-21(后者注射后2小时，肿瘤摄取值分别为0.55土0.08。/。ID/g和0.37士0.14。/。ID/g)。注射后2小时，99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNIEC的肝摄取分别为2.29±0.37%ID/g和2.26±0.22%ID/g，明显低于99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21的肝摄取(后者注射后2小时，肝摄取分别为8.79±3.05%ID/g和8.37±0.87%ID/g)。因此，本发明所述的配合物，特别是"""TcO-MNIEC和"mTcN-MNIEC配合物显示出明显优于目前用于临床的比较流行的肿瘤乏氧显像剂99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21的生物性能，有望发展为具有我国自主知识产权的新型肿瘤乏氧显像剂。具体实施例方式以下通过具体的实施例可使本发明得到更清楚地说明，但本发明的技术方案并不局限于下列实施例。实施例l按照下面所示的合成路线合成本发明提供的化合物MNIEC:N。2N024MNIEC其中每个步骤所用的试剂为-(a)EtOTFA、Et3N和MeOH;(b)2-bromoethanol、K2CO^t!CH3CN;(c)CH3S02Cl、CH2CEt3N;(d)化合物1、K2CO^nCH3CN;0)NaOH和MeOH具体步骤如下Tri-TFAcyclam(化合物l)的合成在干燥的50mL三口烧瓶中，将cyclam(l.Og，5mmo1)和三乙胺(0.69mL，5mmo1)溶解于20mL的无水甲醇中，通入氮气保护并用冰水浴将反应液保持在0-5°C，然后滴加入三氟乙酸乙酯(6.0mL，50,0mmol),滴加持续十分钟，搅拌反应7小时，悬蒸除去溶剂，残留物通过一个小的硅胶柱，用乙酸乙酯作为淋洗剂，得到化合物1的白色泡沫状固体。'HNMR(500MHz,CDC13)5:3.79-3.51(m,12H),2.95(m，2H),2.72(m，2H)，2.18(m,2H),1.86(m,2H)。92國(2-methyl-5-nitro曙lH-imidazol國l國yl)ethylmethanesulfonate(化合物3)的合成在50mL三口瓶中将2-甲基-5-硝基咪唑(0.96g,5mmol)和2-溴-l-乙醇(1.04g，7.5mmo1)溶解于20mL无水乙腈中，然后加入无水碳酸钾(1.04g,7.5mtno1)，混合物搅拌回流七小时。滤去固体，旋蒸除去溶剂，得到淡黄色化合物2，无需提纯可以用于下一步的反应。将化合物2(1.25g，5mmo1)和三乙胺(lmL,7.5mmo1)溶解于50mL二氯甲烷中，冷却至0~5°C，然后用恒压滴液漏斗逐滴加入甲磺酰氯(0.87g,7.5mmo1)的二氯甲烷溶液，室温搅拌过夜，反应液分别用饱和氯化铵溶液(30mL)和饱和食盐水(30mL)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，悬蒸除掉溶剂，残留物用色谱柱提纯，淋洗流动相选取V(甲醇)/V(二氯甲烷)=1/15，得到化合物3的白色固体。&NMR(500MHz,DMSO)5:8.07(s,1H),4.64-4.67(m，2H),4.55-4.57(m，2H)，3.16(s，3H)，2.46(s，3H)。2隱(2-methyl-5曙nitro画lH國imidazol-l画yl)ethyl]Tri-TFA-cyclam(化合物4)的合成在50mL三口瓶中，将反应物1(0.97g，2mmol)和无水碳酸钾(0.42g,3mmoD加入到20mL无水DMF中，然后加入反应物3(0.65g，2mmo1)，混合物搅拌回流9小时。滤去固体，旋蒸除去溶剂，残留物用色谱柱提纯，淋洗流动相选取V(甲醇)/V(二氯甲烷)=1/15，得到化合物4的白色固体。'HNMR(500MHz，CDC13)S:7.93(s,1H),4.56画4.59(m，2H),3.82-3.85(m，2H)，3.44-3.69(m,12H),2.61-2.81(m，4H)，2.51(s,3H),2.10-2.12(m，4H)。2醒(2匪methyl-5-nitro-lH画imidazol-l-yl)ethyl]cyclam(MNIEC)的合成将化合物4(0.36g，0.5mmoD溶解在10mL的甲醇中，用冰水浴将反应液冷却至05。C后将NaOH(0.40g，lOmmol)分批次加入到反应液中，然后混合物室温搅拌30分钟，滤去固体，旋蒸除去溶剂得到白色固体，然后加入水(20mL)和氯仿(10mL)搅拌，用分液漏斗分离有机相，用水(3xl0mL)洗涤，水溶液再次用氯仿(15mL)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，悬蒸除掉溶剂得到化合物MN正C的白色固体。！HNMR(500MHz,CDC13)S:7.98(s，1H),4.34画4.37(m，2H),3.63-3.65(m,2H)，3.24-3.57(m,12H),2.64-2,89(m,4H),2.47(s,3H),2.06-2.14(m,4H)。实施例2制备99mTcO-MNIEC配合物1)"，cO-GH的制备称取GH配体25mg，用0.5mL生理盐水使其完全溶解，加入0.5mL的SnCI22H20(lmg/mL，0.1MHCI)，调节pH^7-7.5，加入0.5mL新鲜淋洗的""^TcCV溶液(大约10mCi)，40。C水浴加热反应10分钟，冷至室温，备用于配体交换法的前体。2)""cO-薩EC的帝恪将20mg的化合物MNIEC配体溶解于20mL甲醇中，取出0.15mL放入青霉素小瓶中，用l.OmL的pH43即0.1M的NaOH缓冲液调节pH值为13，加入0.15mL的^Tc-GH溶液，混合物沸水浴加热45min，滤膜过滤，得到电中性且水溶性的目标配合物，标记率大于95%。实施例3制备99mTcN-MNIEC配合物(1)中间体[^TcNf的制备可以采用两种方法制备""^cN中间体，即取12mL自TcCV新鲜淋洗液加入到DTCZ药盒中，摇匀，沸水浴加热15min，可获得中间体[""TcN产，标记率大于98%;或取12mL"mTcCV新鲜淋洗液加入到SDH药盒中，摇匀，室温静置15min，可获得中间体["mTcN]2—，标记率在98%以上。(2)衡TcN-画EC的帝iJ备取0.1mL上述配制的配体溶液MNIEC放入青霉素小瓶中，用1.0mL的0.1M的NaOH缓冲液调节MNIEC配体溶液pH值为13，然后加入0.1mL[99mTcN]2+中间体，沸水浴加热40min，得到电中性且水溶性的目标配合物，标记率在95%以上。实施例4制备99mTc(CO)3-MNIEC配合物1)["mTc(CO)3(H20)3]+中间体的制备称取5mg无水碳酸钠、10mg硼氢化钠、15mg酒石酸钾钠放入10mL青霉素小瓶中，通一氧化碳5min排净瓶中的空气后，加入lmL的Na99mTc04(大约290~370MBq)。继续通一氧化碳并在75'C条件下加热20min，反应结束后，将溶液冷却至室温，制备得到标记率在95。/。以上的["mTc(CO)3(H20)3]+中间体。2)99mTc(CO)rMMEC的制备取O.lmL上述配制的配体溶液MNIEC放入青霉素小瓶中，用l.OmL的0.1M的NaOH缓冲液调节MNIEC配体溶液pH值为13，然后加入0.1mL["，c(CO)3(H20)3]+中间体，沸水浴加热40min，得到正电荷且水溶性的99mTc(CO)3-MNIEC，标记率在95%以上。11对实施例2~4的配合物进行薄层色谱(TLC)鉴定体系l:生理盐水/聚酰胺；体系2:乙腈/聚酰胺。各个组分的A值列于表1中。_表1.各组分在TLC上的if值生理盐水乙月f-0.10.3~0.599mTc02.nH200.10.199mTc-GH0.9~L00.199mTcO-MNIEC0.2~0.30.1[衡TcN产0.81.00.199mTcN-MNIEC0.10.199mTc(CO)3(H20)30.10.8~1.099mTc(CO)3-MNIEC0.10.1通过薄层色谱(TLC)能很好的区分各中间体与目标配合物，是良好的TLC检测体系。配合物在S180肿瘤小鼠体内生物分布1)S180肿瘤小鼠的培养取S180肿瘤细胞约1><106个通过皮下注射到昆明小鼠(雌性，18~20g)的左前腿，9~10天后，肿瘤直径为10~15mm，待用。2)按实施例2~4方法分别制备标记率大于95%的9mTcO-MNIEC、99mTcN-MNIEC、和99mTc(CC03-MNIEC配合物溶液，从S180肿瘤小鼠的尾静脉注射0.1mL标记配合物(约20pCi)，注射后lh、2h、4h断头处死小鼠。取血及脑、心、肝、肺、肉、骨、血、脾、肾、肿瘤等有关组织和器官，擦净后称重，并测定放射性计数，选用1。/。ID/g作为标准，计算放射性药物在小鼠体内各组织中的分布情况。每组实验取四组平行数据，即11=4。实验结果列于表24。表2.99mTcO-MNIEC在S180肿瘤小鼠体内生物分布(n二4)_器官或耙/非靶%ID/g±SDlh2h4h0.89±0.171.65±0.161.03±0.232,02±0.337.53士0.970.76±0.182.29±0.371.04±0.391.35±0.318.39土1.070.50±0.081.47±0.381.52±0.600.99±0.187.49±0.27心肝脾肺肾121.00±0.190.59±0.070.16±0.032.60±0.422.31±0.423.920.891.400.90±0.240.49±0.120.11±0.021.96±0.182.12±0.454.331.080.930.58±0.090.26±0.020.08±0.011.37±0.051.76±0.106.771.281.20表3.99mTcN-MNIEC在S180肿瘤小鼠体内生物分布(11=4)器官或靶/非靶0/oID/g±SDlh2h4h_表4.99mTc(CO)3-MNIEC在S180肿瘤小鼠体内生物分布(『4)器官或靶/非靶——％ID/2±SDlh2h4h1.43±0.401.20±0.130.73±0.062.20±0.062.26±0.221.57±0.221.88±0.662.05±0.371.09±0.373.99±1.063.39±0.531.79±0.147.11±0.756.56±1.365.20±0.281,20±0.281.00±0.180.78±0.090.63±0.060.68±0.210.39±0.070.19±0.050.14±0.010.09±0.004.32±1.182.95±0.411.50±0.062.76±0.452.52±0.691.81±0.143.493.724.640.510.861.210.711.12U50.76±0.1211.95±1.140.68±0.051.55±0.356.75±0.861.17±0.170.98±0.210.64±0.089.46±1.040.61±0.031.21±0.065.70±0.690.82±0.050.56±0.010.49±0.028.60±0.520.49±0.170.89±0.044.30±0.130.69±0.400.28±0.03骨u」J1I肉血肝勾丄凶饥窗AwtpnH3T=-f一naj13alean心肝脾肺肾骨肉脑命顺肝心肝脾肺肾骨肉由表2~4可见，本发明的上述三种配合物都具有一定的肿瘤摄取，特别是99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNIEC配合物，它们肿瘤绝对摄取值高和肝本底低，肿瘤/肝比值在l左右。瘤/肉和瘤/血比值也较高，瘤/肉比值在注射后2小时都大于3.5，并且瘤/血比值也在1左右，显示出优良的生物性能。本发明的上述三种配合物与目前用于临床的比较流行的肿瘤乏氧显像剂99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21的生物分布比较列于表5。表5.本发明的三种配合物与其它已知乏氧显像剂的在注射后2h的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由表5可见，本发明的上述三种配合物都具有较高的肿瘤摄取，尤其是，TcO-MN正C和"mTcN-MNIEC配合物，它们在注射后2小时，肿瘤绝对摄取值分别为2.12±0.45%ID/g禾B2.52±0.69%ID/g，明显高于99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21(注射后2小时，肿瘤摄取值分别为0.55±0.08%ID/g和0.37±0.14%ID/g)。此外，99mTcO-MNIEC和99raTcN-MNIEC在具有较高肿瘤摄取的同时还具有较低的肝摄取，注射后2小时，99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNIEC的肝摄取分別为2.29±0.37%ID/g和2.26±0.22%ID/g，明显低于99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21的肝摄取(注射后2小时，肝摄取分别为8.79±3.05%ID/g和8.37±0.87%ID/g)。上述各项结果表明，本发明所述的配合物，特别是99mTcO-MNIEC和99mTcN-MNffiC配合物显示出明显优于目前用于临床的比较流行的肿瘤乏氧显像剂99mTc-BMS181321和99mTc-BRU59-21的生物性能，有望发展为具有我国自主知识产权的新的"mTc标记的肿瘤乏氧显像剂。0.14±0.040.11±0.020.06±0.001.81±0.041.39±0.071.17±0.211.24±0.211.09±0.170.83±0.021.271.952.960.680.780.710.100.120.10脑血滴权利要求1.一种新的硝基咪唑类化合物，是含有1，4，8，11-四氮杂十四烷的2-甲基-5-硝基咪唑类化合物MNIEC，其结构如下式A。2.—种权利要求1所述化合物MNIEC的合成方法，包括以下步骤1)用三氟乙酸乙酯将l，4，8,ll-四氮杂十四垸进行三氮保护；2)用甲磺酰氯对2-溴乙醇与2-甲基-5-硝基咪唑发生烷基化反应得到的产物进行磺酰化；3)将步骤2)的磺酰化产物与步骤l)的三氮保护产物发生垸基化反应；4)将步骤3)的烷基化产物在甲醇作为溶剂和氢氧化钠条件下脱保护，得到所述的硝基咪唑类化合物MNIEC。3.权利要求2所述的合成方法，具体方法是1)在干燥的50mL三口烧瓶中，将5mmol的l，4，8,ll-四氮杂十四烷和5mmo1的三乙胺溶解于20mL的无水甲醇中，通入氮气保护并用冰水浴将反应液保持在05'C，然后滴加入50.0mmol三氟乙酸乙酯，滴加持续十分钟，搅拌反应7小时，悬蒸除去溶剂，残留物通过一个小的硅胶柱，用乙酸乙酯作为淋洗剂，得到白色泡沫状固体；2)在50mL三口瓶中将5mmo12-甲基-5-硝基咪唑和7.5mmo12-溴-l-乙醇溶解于20mL无水乙腈中，然后加入7.5mmol无水碳酸钾，混合物搅拌回流7小时，滤去固体，旋蒸除去溶剂，得到淡黄色化合物；将5mmol该淡黄色化合物和7.5mmol三乙胺溶解于50mL二氯甲烷中，冷却至05"C，然后用恒压滴液漏斗逐滴加入7.5mmol甲磺酰氯的二氯甲垸溶液，室温搅拌过夜，反应液分别用30mL饱和氯化铵溶液和饱和30mL食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，悬蒸除掉溶剂，残留物用色谱柱提纯，淋洗流动相选取甲醇/二氯甲垸体积比=1/15，得到白色固体；3)在50mL三口瓶中，将2mmol步骤l)得到的化合物和3mmol无水碳酸钾加入到20mL无水DMF中，然后加入2mmol步骤2)得到的化合物，混合物搅拌冋流9小时，滤去固体，旋蒸除去溶剂，残留物用色谱柱提纯，淋洗流动相选取甲醇/二氯甲烷体积比=1/15，得到白色固体；4)将0.5mmol步骤3)得到的化合物溶解在10mL的甲醇中，用冰水浴将反应液冷却至05'C后将10mmo1NaOH分批次加入到反应液中，然后混合物室温搅拌30分钟，滤去固体，旋蒸除去溶剂得到白色固体，然后加入20mL水和10mL氯仿搅拌，用分液漏斗分离有机相，用3xl0mL水洗涤，水溶液再次用15mL氯仿萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，悬蒸除掉溶剂，得到化合物MNIEC的白色固体。4.由放射性核素标记权利要求1所述的MNIEC配体得到的配合物。5.权利要求4所述的配合物，其特征在于:所述放射性核素是放射性锝-99m。6.权利要求5所述的配合物，其特征在于它是""TcO-MNIEC，它由以下方法制备得到1)称取葡庚糖酸钠配体25mg，用0.5mL生理盐水使其完全溶解，加入0.5mL的lmg/mL的SnCl22H20，调节pH-77.5，加入0.5mL新鲜淋洗的"mTc(V溶液，4(TC水浴加热反应10分钟，冷至室温，得到备用于配体交换法前体的"mTc-葡庚糖酸钠；2)将20mg的化合物MNIEC配体溶解于20mL甲醇中，取出0.15mL放入青霉素小瓶中，用1.0mL的pH-13即0.1M的NaOH缓冲液调节pH值为13，加入0.15mL步骤l)制备的"mTc-葡庚糖酸钠溶液，混合物沸水浴加热45min，滤膜过滤，得到电中性且水溶性的"""TcO-MNIEC配合物。7.权利要求5所述的配合物，其特征在于它是"mTcN-MNIEC，它由以下方法制备得到1)取12mL"mTcCV新鲜淋洗液加入到DTCZ药盒中，摇匀，沸水浴加热15min，可获得中间体["mTcN]2、或取12mL"ntCV新鲜淋洗液加入到SDH药盒中，摇匀，室温静置15min，可获得中间体["mTcN]2、2)取0.15mLMNIEC配体溶液放入青霉素小瓶中，用L0mL的0.1M的NaOH缓冲液调节MNIEC配体溶液pH值为13，然后加入0.1mL步骤l)制备的["，cN产中间体，沸水浴加热40min，得到电中性且水溶性的"mTcN-MNIEC配合物。8.权利要求5所述的配合物，其特征在于它是""^Tc(CO)3-MNIEC，它由以下方法制备得到1)称取5mg无水碳酸钠、10mg硼氢化钠、15mg酒石酸钾钠放入10mL青霉素小瓶中，通一氧化碳5min排净瓶中的空气后，加入lmL的Na""^Tc04，继续通一氧化碳并在75'C条件下加热20min，反应结束后，将溶液冷却至室温，得到["，C(CO)3(H20)3]+中间体；2)将步骤1)得到的["，c(CO)3(H20)3]+中间体加入到1.5mg配体MNIEC中，用0.1M氢氧化钠将其PH值调整为13，沸水浴加热40min，得到带正电荷且水溶性的99mTc(CO)3-MMEC配合物。9.权利要求4所述的配合物在制备人或动物器官或组织显像剂中的应用。10.权利要求9所述的应用，其特征在于所述应用是在制备肿瘤乏氧显像剂中的应用。全文摘要本发明提供一类亲乏氧肿瘤的放射性核素标记的配合物，其前体是含有1，4，8，11-四氮杂十四烷的2-甲基-5-硝基咪唑类化合物，结构如右式。本发明还提供了所述配合物及其前体的制备方法和该配合物作为潜在的肿瘤乏氧显像剂的应用。该类配合物亲水性好，在肿瘤有较高的摄取，尤其^99mTcO-MNIEC和^99mTcN-MNIEC配合物在肿瘤中的绝对摄取值高且肝本底低，并且瘤/肉和瘤/血比值也较高，明显改善了目前肿瘤乏氧显像剂肿瘤绝对摄取值低和肝本底高的缺点，有望成为一类新的性能更好的肿瘤乏氧显像剂。文档编号C07D403/06GK101486707SQ20091007891公开日2009年7月22日申请日期2009年2月27日优先权日2009年2月27日发明者键刘,唐志刚,张俊波,张现忠,王凤龙,王学斌,洁陆申请人:北京师范大学;北京师宏药物研制中心