专利名称：：含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(aoz)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备的制作方法
技术领域：
：本发明属于化学
技术领域：
，更具体涉及一种含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(A0Z)的li鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备方法。
背景技术：
：呋喃唑酮属硝基呋喃类药物，动物服用呋喃唑酮后，原药分子在动物体内迅速代谢，其在体内的稳定性不超过几小时，代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成为结合态，结合态可长期保持稳定，从而延缓原药在体内的清除速度。而普通的食品加工方法(如烧烤、微波加工、烹调等)难以使蛋白结合态呋喃唑酮残留物大量降解，食用含有该残留物的肉制品会对人体产生一定的毒副作用。研究表明，蛋白结合态的呋喃唑酮残留物含有称为3-氨基一2-唑酮(AOZ)的完整侧链，在人胃的弱酸性条件下，侧链可以从蛋白结合态的母体分子上解离下来，A0Z可以代谢成为0—轻乙基麟，该代谢物是致突变和致癌化合物。在兽药残留分析中，样品基体涉及到各种动、植物及加工食品。分析基体本身的差别使得在分析过程中不能简单地采用传统的纯品标准物质来校准或进行质量控制，需要采用基体标准物质两类标准物质以满足要求，包括证明检测工作与所要求的标准操作程序相符或参加能力验证中、校准仪器、用于质量控制、解决分析中遇到的问题以及保证结果的准确。欧洲委员会对标准物质有明确定义，欧盟有关农、兽药残留检测的法规性文件均提到了要采用标准物质作为质量控制手段，对检测方法进行验证；因此标准物质对于兽药残留分析是十分重要的。发明目的本发明的目的是提供一种含呋喃哇酮代谢物3-氨基-2-唑酮(A0Z)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备方法，制备科学合理，可操作性强，制备得到的基体标准物质不需冷冻可在室温条件下长期保存，可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制，萆用方便广泛，品质好。本发明的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(A0Z)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备步骤为1)将含有浓度约57iig/kg左右呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织按约l:4重量比例加入不含呋喃唑酮代谢物A0Z的鳗鲡肌肉组织，匀浆；2)组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；3)粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(A0Z)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。3本发明的显著优点本发明获得的基体标准物质本发明采用含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2_唑酮(A0Z)的鳗鲡肌肉为原料，制备科学合理，可操作性强，制备得到的基体标准物质不需冷冻可在室温条件下长期保存，可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制，运用方便广泛，品质好。图l是本发明的制备流程图。图2是本发明实施例2的A0Z标准溶液(上)与鳗鲡肌肉冻干粉(下)的MRM色谱图。具体实施例方式制备步骤为采用药浴给药呋喃唑酮的方式，使呋喃唑酮药物在鳗鲡体内代谢，对其代谢曲线进行测定，获得肌肉中呋喃唑酮代谢物A0Z浓度在约57ug/kg左右的鳗鲡，将鳗鲡宰杀、放血、去骨、去内脏，取得含有呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉；所述药浴给药呋喃唑酮为所述药浴给药呋喃唑酮约为0.16mg/L，全池泼洒方式药浴给药，养鳗池日换水率约95%，给药后第10小时开始采集样本，之后每24小时采集一次样本，每次取样随机取6条鳗鲡，宰杀、去皮、去骨，洗净，取肌肉一并匀浆作为一个样本进行检测。按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色it"串联质谱法》检测，同位素稀释内标法定量。用药15曰后经检测取呋喃唑酮代谢至一平台，取全部鳗鲡，宰杀、去皮、去骨、洗净，待制备。将呋喃唑酮代谢物A0Z的浓度约57ug/kg左右的鳗鲡肌肉组织按约l:4比例加入不含呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织，匀浆；将制得的样品按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测AOZ含量，同位素稀释内标法定量。以方差检验法对匀浆的鱼浆进行均匀性检验；组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；低温冷冻干燥的条件为样品先置于-7(TC冰箱中预冻7个小时，取出于冷冻干燥机中冷冻干燥56小时后取出。粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。步骤3的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质经过铝箔袋复合膜真空独立包装、辐照杀菌后制备成含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(M)Z)的鳗ig肌肉冻干粉基体标准物质成品。制备的冻干粉基体标准物质成品经过均匀性检验、稳定性检验后进行定值及不确定值计算，获得了最终成品。本产品最终定值为3.71土0.686ug/kg，样品数据400个，独立包装约3g，可置于室温保存对该产品进行了长期稳定性(有效期)与短期稳定性(运输条件下材料的稳定性)两种类型的稳定性。本项目的稳定性实验设计为经典稳定性研究，即同时制备的样品在相同条件下随着时间的推移进行测量。在第4个月测定时样品模拟运输条件，置于-6(TC冰柜中放置60天后于室温下放置30天，再于70'C烘箱放置48小时后测定。另外，由于测量是在(实验室内)再现性条件下进行的，其中也包括了测量的不稳定性。研究证明该产品十分稳定，有效期长，使用方便。制备得到的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制。以下是本发明的几个具体实施例，进一步说明本发明，但是本发明不仅限于此。采用本发明制得了鳗鲡肌肉中呋喃唑酮代谢物AOZ的标准物质，定值为3.71土0.686ug/kg,已用于从事相关检测实验进行分析方法的确认和质量控制，并保证食品分析量值溯源链的有效性和不间断性。实施例l采用药浴给药呋喃唑酮的方式，使呋喃唑酮药物在鳗鲡体内代谢，对其代谢曲线进行测定，获得呋喃哇酮代谢物A0Z的浓度约57ug/kg左右的鳗鲡，将鳗鲡宰杀、放血、去骨、去内脏，取得含有呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉；所述药浴给药呋喃唑酮为O.16iig/L，全池泼洒方式药浴给药，养鳗池日换水率约95%，给药后第10小时开始采集样本，之后每24小时采集一次样本，每次取样随机取6条鳗鲡，宰杀、去皮、去骨，洗净，取肌肉一并匀浆作为一个样本进行检测。按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测，同位素稀释内标法定量。用药15日后经检测取呋喃唑酮代谢至一平台，取全部鳗鲡，宰杀、去皮、去骨、洗净，待制备。将呋喃唑酮代谢物A0Z的浓度约57ug/kg左右的鳗鲡肌肉组织按约l:4重量比例加入不含呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织，匀浆，将制得的样品按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测AOZ含量，同位素稀释内标法定量。以方差检验法对匀浆的鱼浆进行均匀性检验；组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；低温冷冻干燥的条件为样品先置于-70'C冰箱中预冻7个小时，取出于冷冻干燥机中冷冻干燥56小时后取出。粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。步骤3的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质经过铝箔袋复合膜真空独立包装、辐照杀菌后制备成含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质成品。实施例2含呋喃唑酮代谢物AOZ样本的获得用于研究的样本为格每条大小约200g300g的鳗鲡，全池泼洒方式药浴给药，药浴浓度约O.16mg/L。用药15天后采集阳性样本。将宰杀、去皮、洗净后的肌肉组织于一20'C冷库保存。养殖过程在福建省三明市梅列区华盛特种养殖场进行。均匀实验材料的获得将鱼肉样本取出，置于4'C冰箱解冻后，去皮，取鱼肌肉切成小块，置于匀浆机中，充分匀浆，将匀浆后的样本按四分法随机取出1/4，分装于洁净的塑料离心管(容量为50mL)中，密闭，制成供试样，置于-18'C冰柜中保存。鳗鲡肌肉中水分含量较高，为便于贮存、包装、运输及使用，本项目将其制成冻干粉。鳗鲡肌肉中含有大量脂肪，为防脂肪可能在保存过程中析出以及可能酸败变质，本项目采用正己烷脱脂。经实验证明正已垸脱脂不会造成AOZ损失。为延长保存期，本文将样品以钴60辐照，接收剂量为9kGY，辐照后样品按GB/T4789.2-2003检测细菌总数，检测值〈10CFU/g。均匀性检验均匀性实验按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测，同位素稀释内标法定量，用以定量的参数见表l,谱图见图2。表1保留时间、母离子和子离子序号化合物母离子(M+H)子离子碰撞能量(cv)1NPAOZ23610419134112NPd4-A0Z24013412注下划线为定量离子碎片均匀性实验的总样本数共100个，顺序编号后按总样本数N的3XN1/3随机抽取14个样品进行样品均匀性实验，其中l个样品(编号2)因取样时污染弃用。以每个检体3个重复性条件下检测获得的数据为一组，共获得15组数据；计算每组内的均方差和组间的均方差，以及各自的自由度，显著性水平a，按方差检验给定的方法计算统计量F。査F分布表，找出临界值F，进行比较判断，作出结论。F值岣.703〈F。.。5(14，30)=2.31，样本是均匀的。结果见表2。6表2冻干粉的均匀性检验结果及方差分析结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表2可见，均匀性实验所得F值〈F。.。5(14，30)，表明样品间不存在明显差异，证明制得的样本是均匀的。稳定性考察根据GB/T15000.3-2008，标准物质在进行定值时，需考虑长期稳定性(如有效期)与短期稳定性(如运输条件下材料的稳定性)两种类型的稳定性。标准物质的长期稳定性与fe^准物质在生产者的贮存条件下的行为有关，短期稳定性与样品运输过程中的外部因素有关。本项目的稳定性实验设计为经典稳定性研究，即同时制备的样品在相同条件下随着时间的推移进行测量。在第4个月测定时样品模拟运输条件，置于-60'C冰柜中放置60天后于室温下放置30天，再于70'C烘箱放置48小时后测定。另外，由于测量是在(实验室内)再现性条件下进行的，其中也包括了测量的不稳定性。稳定性研究的基本模型可表示为；r-A+AY+e，其中A和A为回归系数，s为随机误差分量。本项目中作为候选标准物质是由复现了实验材料研制过程所得的，因而稳定性数据采用实验材料研制过程所进行的稳定性实验所得的数据。数据见表3。表3稳定性实验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根据表10的相关数据，回归参数可按下式计算得到斜率的计算6,=-=——=0.0139;截距的计算6。=f-6^=5.152;通过误差分析可以计算、和6。的标准偏差，按S()=式中一^1-=0.3536，w—20.3536估计^的标准偏差，4.24260.0833;自由度为n-2和口=0.95(95%置信水平)的学生分布t因子为2.35，由于|6」</Q95,,.故斜率是不显著的，因而未观测到不稳定性。瓶),定值与不确定度评估定值根据中华人民共和国国家标准GB/T15000.3-2008"标准物质工作导则(3)标准物质定值的一般原则和统计方法"中有关技术及要求，对呋喃唑酮代谢物残留质量控制样品进行定值。采用同位素稀释质谱法进行测定(n=3)。定值结果汇总于表4。表4定值结果实验室编号测定结果(yg/kg)标准偏差Si第一次第二次第三次平均值0014.094.183.914.0613.750023.553,823.673.6813.530034.003.553.743.7622.590043.283.753.653.5624.760054.053.293.263.5344.770063.893.943.903.912.6460073.513.643.553.576.6580083.703.453.563.5712.530093.733.693.923.7812.290103.493.743.783.6715.72平均值(ug/kg)3.71/标准偏差S/0.1721对所得数据进行检验分析，包括的步骤有(1)检验实验室平均值之间显著性差异以此来决定是否应该求出单个数值的平均值或实验室平均值的均值；(2)检验根据(1)中决定选取的数据组的正态性并找出异常值；(3)检验全部数据组中异常的实验室的方差。检验过程如下(1)先对所有数据进行柯克伦(Cochran)检验。给定P个由相同的n次重复测试结果计算的标准偏差Si，柯克伦(Cochran)检验的定义为C二^L^，柯克伦的结果判定如下判定结果正确可疑值离群值值C与临界值Co关系C《CoCo(5%)<C《Cou%)C>Coa在p二10，11=3时，柯克伦的临界值为C。(1W=0.536，C。<5W=0.445，而10个实验室的柯克伦(Cochran)检验的结果为0.4881，005实验室的Si值最大，结果可疑，需进一步检验决定是否采用该实验室数据。(2)对005实验室的最大值和最小值进行格拉布斯(Grubbs)检验单值格拉布斯(Grubbs)检验量C^则是检验该单元中最大值、是否为离群值，其中Gn则检验该单元中最小值^是否为离群值，其中(^=^-a)/S;单值格拉布斯检验结果判定如下9判定结果正确值可疑值离群值^与临界值G。关系Gi《G。(5%)Go(5%)<Gl《GoU%)&>Go(1在n=3时，单值格拉布斯(Grubbs)的临界值G咖和G。(加均为1.155，而005实验室的格拉布斯检验结果Gu=0.6105，Glp=l.1541,属正确值，故该单元数据可保留以参加下一步检验。(3)对10个单元的均值进行单值格拉布斯(Grubbs)检验在11=10时，单值格拉布斯(Grubbs)的临界值G。(1W=2.482，G。(5W=2.290，而单值格拉布斯(Grubbs)检验结果G=2.0375，Glp=1.0226，所有单元的均值均可保留以参加下一步双值格拉布斯(Grubbs)检验。4、对10个单元的均值进行双值格拉布斯(Grubbs)检验双值格拉布斯(Grubbs)检验量《p则是检验最大的两个值是否为离群值，《p=is(2p-^)/isc2其中《是原数组的方差，《P-^是p个数据去除最大两值后的方差。检验量《i是检验最小两值是否为离群值，e"-《""《其中《'"是p个数据去除最小两值后方差。双值格拉布斯检验结果判定如上判定结果正确值歧离值离群值G2与临界值G0关系G2》G0(5%)Go(1%)《G2<Go(5%)G2<Go(1在n二10时，双值格拉布斯(Grubbs)的临界值G,=0.1150，G。(5=0.1864，而双值格拉布斯(Grubbs)检验结果G21=0.7505，G2p=0.2452，因此所有单元的数据均为正确值，均可以保留并参与定值。本项目定值最终是协同定值实验室提供结果的平均值。不确定度评估根据GB/T15000.3-2008，标准物质特性值不确定度的确定应考虑的因素包括4点(1)材料的测定过程伴随的不确定度；(2)用户一般每次只用一个样品；(3)材料被生产者/销售者在较长时间内储存；(4)材料必须运送给用户。这些因素对标准物质被测量值(也就是标准值)的不确定度有显著贡献，可用式l来表示x隱=u+++<-(1)式中一特性值；AA。r—由批测定得到的特性值，或在测定单个制品时，由该制品得到的特性值；&M—瓶间差异引起的误差项；&to—长期不稳定性引起的误差项；—短期不稳定性引起的误差项。根据GB/T15000.7"标准物质工作导则(7)标准物质生产者能力的通用要求"中对标准物质定值方式的划分，本项目中采用的定值方式属由实验室网络，用特定方法测量，只给出该方法评定的特性值。参与协同定值的实验室给出的数据格式为每个实验室的检测值。CCQM(国际物质量咨询委员会)确定的基准测量方法中包括同位素稀释质谱法，采用同位素稀释质谱法进行定值，属基准测量方法，消除了由仪器不同、样品前处理等过程对测试结果的影响。不确定度计算过程如下(虽然所有的不确定度计算过程均给出了计算公式，但全部计算过程是由EXCEL所带的统计软件完成的)(1)由协同定值实验室所带来的批测定的不确定度"^,的计算由于本项目中参与协同定值的所有数据经检验，均可采纳进行定值，即本项目实验材料的特性值是平均值的均值，即^=K，与平均值的均值有关的合成标准不确定度的主要分量是由式(2)得到的标准偏差P—lS而合成不确度为"￡^=+，在这些公式中，P代表实验室数。由表ll所给的数据，s为O.1721，本项目中0.0544。(2)由瓶间均匀性所带来的不确定度i^的计算在预实验所进行的均匀性研究中，瓶间均匀性已被验证。因此，此时的统计方法采用的是单因素方差分析。表5均匀性研究的测量数据<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>瓶间方翻的计算《=巡。隱广风"0.歸-謹36=0扁8瓶间标准偏差是该方差的平方根&"0.0308=0.1755重复性标准偏差^==V0.0136=0.1167由瓶间均匀性所带来的不确定度"M=、^+<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(3)由稳定性所带来的不确定度^,的计算根据GB/T15000.3-2008,有效期与长期稳定性的标准不确定度的关系见式3，其基础是稳定性数据中无显著趋势。r(W,^)=;rfl(i+6'x)-(3)式中假设特性值y从初始值y。以一个常数6'线性降解，6'是相对降解速率，为时间x的函数。特性值的不确定度可通过将自变量K、z和6'的不确定度传播给因变量y得到。在给定的有效期x没有显著降解的情况下，可采用式4估计样品长期稳定性的不确定度。(4)作为候选标准物质是由复现了实验材料研制过程所得的，因而稳定性数据采用实验材料研制过程所进行的稳定性实验所得的数据。数据见表8。表8稳定性实验数据时间(月)AOZ的含量(ug/kg)04.81815.56825.14035.40345.112由于没有一种物理/化学模型能够真实地描述该实验材料的降解机理，故采用直线作为经验模型。事实上，对于鳗鲡肌肉冻干粉中的特性值(AOZ含量)而言，所希望的是截距(在不确定度内)等于测定得到的值，而斜率趋近于零。2(A-;c)(y-y)根据表15相关数据，斜率的计算——^~~=0.0139;截距的计算60=;r-V-5.152;直线上的点的标准偏差的计算S=n—20.3536与斜率相关的不确定度的计算S(&,)=,^==0.0833;724.242J2A-"自由度为n-2和p^.95(95%置信水平)的学生分布t因子为4.30，由于1、hA^,"^^fe)，故斜率是不显著的，因而未观测到不稳定性。根据式4，有效期t二4月的长期稳定性的不确定度为"to=&.,=0.0833x4=0.3332。(4)鳗鲡肌肉冻干粉中AOZ的扩展不确定度综上，鳗鲡肌肉冻千粉中AOZ的扩展不确定度是通过合成测定、均匀性和稳定性对特性值总不确定度的贡献来估计的，按式5计算"，=+《+《+"i-(5)在置信水平为95%时，A=2。由于本项目采用的是协同定值，通过邮政网络将候选标准物质分发给各参加协同定值的实验室，所得到的一系列测量值已包含了运输不稳定性造成的附加不确定度，另外，在进行稳定性实验时，第4个月测定时样品模拟运输条件，置于-60。C冰柜中放置60天后于室温下放置30天，再于7(TC烘箱放置48小时后测定，在稳定性不确定度中也包括了运输不稳定性造成的不确定度，因此，此处的^=0。由上述计算过程中得到的各不确定度值，根据式5，鳗鲡肌肉冻干粉中AOZ的扩展不确定度计算如下"隱=2xV0.05442+0.05942+0.33322=0.686。该不确定度是根据3个月的有效期确定的。如果材料的稳定性得到进一步证明，则有效期还可延长。测量结果本发明的标准物质最终确定标准值为3.71±0.686(ng/kg)。权利要求1.一种含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备，其特征在于所述制备步骤为1)将呋喃唑酮代谢物AOZ的浓度5～7μg/kg的鳗鲡肌肉组织按重量比例1∶4加入不含呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织，匀浆；2)组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；3)粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮AOZ的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。2.根据权利要求1所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备，其特征在于所述步骤3的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质经过铝箔袋复合膜真空独立包装、辐照杀菌后制备成含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质成品。3.根据权利要求1所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AQZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备，其特征在于所述步骤1)的含有呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉的制备方法为采用药浴给药呋喃唑酮的方式，使呋喃唑酮药物在鳗鲡体内代谢，对其代谢曲线进行测定，获得肌肉中含呋喃唑酮代谢物AOZ的浓度57ug/kg的鳗鲡，将鳗鲡宰杀、放血、去骨、去内脏，取得含有呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉。4.根据权利要求3所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备，其特征在于所述药浴给药呋喃唑酮为0.16mg/L，全池泼洒方式药浴给药，养鳗池日换水率95%，给药后第10小时开始釆集样本，之后每24小时采集一次样本，每次取样随机取6条鳗鲡，宰杀、去皮、去骨，洗净，取肌肉一并匀浆作为一个样本进行检观ij，按GB汀21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测，同位素稀释内标法定量，用药15日后经检测取呋喃唑酮代谢至一平台，取全部鳗鲡，宰杀、去皮、去骨、洗净，待制备。5.根据权利要求1所述的含呋喃哇酮代谢物3-氨基-2-唑酮(A0Z)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备，其特征在于所述步骤2)中低温冷冻干燥的条件为样品先置于-70'C冰箱中预冻7个小时，取出于冷冻干燥机中冷冻干燥56小时后取出。全文摘要本发明是提供一种含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备方法，将含有预期浓度呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织匀浆；组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。本发明制备科学合理，可操作性强，制备得到的基体标准物质不需冷冻可在室温条件下长期保存，可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制，运用方便广泛，品质好。文档编号C07D263/26GK101504341SQ200910111188公开日2009年8月12日申请日期2009年3月10日优先权日2009年3月10日发明者方杨申请人:福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心