专利名称：：长柄扁桃油渣提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法
技术领域：
：本发明涉及一种从长柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法。
背景技术：
：长柄扁桃又名野樱桃(AmygdaluspedunculatePall.)，是蔷薇科扁桃属的落叶灌木，由于沙漠淹没和人为破坏，分布零散且日趋绝迹，1992年版《内蒙古珍稀濒危植物图谱》已将长柄扁桃列为二级濒危植物。长柄扁桃用作防风固沙外，其果仁含油量为45%58%，可以使其成为治理北方荒漠地区发展木本油料基地的首选树种。长柄扁桃主要在沙漠和荒漠化地带种植，远离城市三废污染源，几乎不受化肥和农药等的污染，可发展为有机食用油。此外，长柄扁桃果仁榨油后油渣富含苦杏仁甙及蛋白质。苦杏仁甙(扁桃甙、扁桃苷Amygdalins，扁桃氰-!3-龙胆二糖甙)，属芳香族氰甙，在植物界中分布广泛，其中以蔷薇科植物(杏、桃、李)种子的含量最高，结构式为苯羟基乙氰-13-D-葡萄糖-6-13-D-葡萄糖甙，它在苦杏仁酶及樱叶酶等葡萄糖甙酶的作用下水解生成野樱皮甙和杏仁氰，后者不稳定，遇热易分解生成苯甲醛和氢氰酸(HCN)。近些年国外的研究多是集中在肿瘤药理研究、毒性试验研究及其他用途上。苦杏仁甙有抗突变作用，能够减少由安乃近、灭滴灵、丝裂霉素等引起的微核多染性红细胞的数量；苦杏仁甙还具有预防和治疗抗肿瘤药阿脲引起的糖尿病的作用。苦杏仁甙现已作为治疗牙斑药的一种成分，生产为一种制剂。苦杏仁甙水解生成的苯甲醛经安息香縮合酶作用生成安息香，安息香具有镇痛作用，因此用苦杏仁治疗晚期肝癌可解除病痛苦，有的甚至不用服止痛药。蛋白粉是一种富含蛋白质、碳水化合物、多种维生素及矿物质、具有很高营养价值的产品制剂，主要是从油料作物榨油后的油渣制取的。常用的提取方法有有机溶剂沉淀法、化学混凝法、冷冻法、碱溶酸沉法等。有机溶剂沉淀法及化学混凝法在加入化学试剂回收蛋白的同时，引入新的污染，且成本增大。冷冻法最大的缺点就是提取率低。碱溶酸沉法因成本低，且得到的蛋白粉呈粉末状，干燥细腻，呈淡黄色，故应用更加广泛。研究较多的是从花生制取花生蛋白粉，且已作为食品品质改良剂应用于许多食品的加工中。在治理荒漠化的同时，将荒漠化区域发展为食用油基地，并建立植物资源综合利用的产业链，将种植、产业化开发和工业化生产有机结合，就会使荒漠化防治过程中产生可观的经济效益，形成沙产业，实现荒漠化治理的可持续发展，并拓展我国的可利用土地资源，将具有重要的社会、生态和经济效益。
发明内容本发明的目的是提供一种从长柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，该方法实现了对油渣的综合利用，增加了油渣的经济开发价值。本发明的实现过程如下—种长柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，以长柄扁桃油渣为原料，溶剂回流法提取苦杏仁甙，粗品经重结晶即得纯品；提取苦杏仁甙后残渣再用碱溶酸沉法提3取蛋白，干燥后得到蛋白粉产品。提取苦杏仁甙所述溶剂为甲醇或无水乙醇，结晶溶剂为9297%乙醇或无水乙醇；调节溶液pH的碱溶液为0.1lmo1/1NaOH、KOH或其碳酸盐(Na2C03、K2C03)溶液，酸溶液为0.1lmol/1HC1、HN03或H2S04溶液。发明人尝试使用不同的结晶溶剂，95%乙醇一次结晶得到的苦杏仁甙纯度为95.93%，且呈白色晶体。无水乙醇一次结晶得到的苦杏仁甙纯度只有67.23%，且呈微黄色粉末。使用不同的酸碱溶液调节溶液的PH，对蛋白的提取率影响不大。具体提取方法包括如下步骤(1)将长柄扁桃油渣与乙醇或甲醇按照料液比(1:6)(1:30)g/ml提取苦杏仁甙，提取温度5080°C;(2)提取结束后趁热过滤，得到滤液及滤饼；(3)滤液减压浓縮回收溶剂，粗品再经9297%乙醇重结晶三次，干燥至恒重，即得苦杏仁甙纯品；(4)滤饼干燥后，按料液比(1:10)(1:30)g/ml加入蒸馏水，用0.1lmo1/LNaOH、KOH或其碳酸盐溶液将pH值调至8.012.0，然后在206(TC提取，静置后抽滤，收集滤液与滤饼；(5)再用0.1lmol/LHCl、HN03或H2S04溶液将滤液pH值调至3.06.O，静置、离心，按料液比(1:5)(1:100)g/ml加入蒸馏水，再用0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸盐溶液回调pH值至中性，搅拌使沉淀复溶，真空冷冻干燥后即得蛋白粉产品。经西北大学分析测试中心及谱尼测试中心对苦杏仁甙、蛋白粉产品进行检测，苦杏仁甙产品纯度达到98%以上，满足市场化需要。蛋白粉中蛋白含量为95.79%，属高蛋白粉(蛋白含量80%以上)。含有植物中存在的18种氨基酸，总氨基酸含量为82.44g/100g。其中8种人体不能合成的必需氨基酸(赖氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和缬氨酸)总量为21.68g/100g，占氨基酸总量的26.30%(见表1)。除此之外，长柄扁桃蛋白粉还含有Ca、Mg、P、Fe、K等多种人体必需的矿质元素，不含Cd、As、Pb(见表2)。表1蛋白粉中氨基酸组成及含量(g/100g)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>发明人发现，苦杏仁甙及蛋白粉的提取次序非常重要。如果先采用碱溶酸沉法提取蛋白，则天然存在的苦杏仁甙会发生构型变化，影响其功效。而在最佳工艺条件下，先采用乙醇回流提取苦杏仁甙，再采用碱溶酸沉法提取蛋白，所得苦杏仁甙保持天然构象且纯度较高，总收率为43.07%。蛋白粉中蛋白含量较高，总收率为41.52%，且营养成分_氨基酸及矿质元素含量丰富。本发明的优点使用榨油后油渣为原料，先回流提取苦杏仁甙，再采用碱溶酸沉法提取蛋白，可得到苦杏仁甙、蛋白粉产品；长柄扁桃油渣的利用将治理沙漠和产品综合开发有机结合，具有广阔的发展前景。图1为提取苦杏仁甙及制备蛋白粉工艺流程图。具体实施例方式如图1所示，在装有回流冷凝管、机械搅拌器的250ml三颈瓶中，加入15g长柄扁桃油渣，无水乙醇150ml，搅拌加热至7(TC，持续约60min。提取结束后趁热过滤，得到滤液及滤饼。滤液减压浓縮至干得到粗品。按料液比l:20加入95%乙醇，加热溶解，室温静置2处析晶。过滤，滤饼经105t:干燥，苦杏仁甙产品纯度为95.93%，再用95%乙醇结晶2次，苦杏仁甙产品纯度可达到98%以上，总收率为43.07%。将提苦杏仁甙后滤饼自然风干，精确称取10.00g粉末(蛋白含量49.28%)于500ml烧杯中，按固液比1:15加入蒸馏水，用0.5mo1/1NaOH溶液将pH值调至9.0，然后在4(TC水浴中搅拌提取30min，静置后抽滤，收集滤液与滤饼。考马斯亮蓝法测定提取液中蛋白含量为11.32mg/ml，蛋白质提取率为57.43X。再用0.5mo1/1HCl溶液将提取液的pH值调至4.5左右。静置30min，离心机5000r/m离心10min，按料液比1:10加入双蒸水，再用O.5mo1/1NaOH溶液回调pH值至7.0，搅拌使沉淀复溶，真空冷冻干燥后即得蛋白粉产品。蛋白粉总收率为41.52%，蛋白含量为95.79%。权利要求长柄扁桃油渣提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步骤(1)以长柄扁桃油渣为原料，溶剂回流法提取苦杏仁甙，粗品经重结晶得纯品；(2)提取苦杏仁甙后残渣用碱溶酸沉法提取蛋白，干燥后得蛋白粉。2.根据权利要求l所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特征在于步骤(1)中长柄扁桃油渣与乙醇/甲醇料液比(1:6)(1:30)g/ml，508(TC提取苦杏仁甙。3.根据权利要求1所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特征在于重结晶使用9297%乙醇或无水乙醇。4.根据权利要求3所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特征在于重结晶溶剂为95%乙醇。5.根据权利要求1所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特征在于步骤(2)中所述碱为0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸盐溶液。6.根据权利要求l所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特征在于步骤(2)中所述酸为0.1lmol/LHCl、腦3或H2S04溶液。7.根据权利要求1至6任意之一所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步骤(1)将长柄扁桃油渣与乙醇或甲醇按照料液比(1:6)(1:30)g/ml提取苦杏仁甙，提取温度5080°C;(2)提取结束后趁热过滤，得到滤液及滤饼；(3)滤液减压浓縮回收溶剂，粗品再经9297%乙醇重结晶，干燥至恒重，即得苦杏仁甙纯品；(4)滤饼干燥后，按料液比(1:10)(1:30)g/ml加入蒸馏水，用0.1lmol/LNa0H、K0H或其碳酸盐溶液将pH值调至8.012.O，然后在206(TC提取，静置后抽滤，收集滤液与滤饼；(5)再用0.1lmol/LHCl、HN03或H2S04溶液将滤液pH值调至3.06.0，静置、离心，按料液比(1:5)(1:100)g/ml加入蒸馏水，再用0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸盐溶液回调pH值至中性，搅拌使沉淀复溶，真空冷冻干燥后即得蛋白粉产品。全文摘要本发明公开一种从长柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步骤(1)以长柄扁桃油渣为原料，溶剂回流法提取苦杏仁甙，粗品经重结晶得纯品；(2)提取苦杏仁甙后残渣用碱溶酸沉法提取蛋白，干燥后得蛋白粉。本发明使用榨油后油渣为原料，先回流提取苦杏仁甙，再采用碱溶酸沉法提取蛋白，可得到苦杏仁甙、蛋白粉产品；长柄扁桃油渣的利用将治理沙漠和产品综合开发有机结合，具有广阔的发展前景文档编号C07H1/08GK101768194SQ20091025465公开日2010年7月7日申请日期2009年12月31日优先权日2009年12月31日发明者张应龙,李冰,李聪,申烨华,范云玺申请人:西北大学