专利名称：一种利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法
技术领域：
本发明涉及一种提取胆汁酸的方法。
背景技术：
随着科学技术的进步和国内外新药研制开发中面临越来越激烈的竞争和挑战，新药研究的重点日益转向传统中药及天然药物活性成分的开发和利用。中药活性成分是其发挥药效作用的物质基础，它的深入研究是中药现代化的关键。从上世纪开始，胆汁及胆汁酸的研究一直是化学和医药科学领域中的一个热点， 其研究重点已从初期的分离及结构鉴定转向药理作用的探索，但研究的主要对象是游离胆汁酸。随着医学与生物化学的发展，胆汁的药用价值亦被不断地深入挖掘。目前除对胆汁开展解热镇痛、镇静、抗惊厥、抗炎、抗疲劳、免疫等作用地研究外，还开展了胆汁对动物支气管及小肠平滑肌影响，对动物心脏及血压地影响、对动物血脂含量地影响等多方面药效学的研究。目前，制备胆汁酸主要有化学合成法和天然胆汁酸提取法两类。目前，公开的从天然胆汁中提取胆汁酸的方法存在操作复杂，纯度较低，收率较低，试剂消耗量大，成本较高， 难以应用于工业化等缺点。1、Haslewond，G.A.D 等(Studies in bile acids，Biochem. J，1958，70，349 ； Biochem. J, 1953,55,293)公开了两种从胆汁中提取胆汁酸的方法方法一将胆汁与其2倍体积量的乙醇混合，静置M小时，过滤后蒸干。方法二 将胆汁用一定量乙醇不断提取，直至醇提取液中呈无色，直至全部蛋白沉淀除去，合并提取液蒸干成粉。上述两种方法的缺点是虽然能将胆汁中全部蛋白除去，但是胆汁酸中仍保留胆固醇和中性脂肪，因此产品纯度较低。2,Setchell 等(Gastroenterology，1997，112,No. 1)公开了一种从胆汁中提取胆汁酸的方法将肝组织(IO-IOOmg)加水20mL，捣成2小时，过滤后沉淀，用1 1等量氯仿和甲醇抽提，过滤液合并后，用旋转蒸发器蒸干，得肝胆汁酸粉末。该方法的缺点是操作复杂，甲醇用量大，以氯仿和甲醇抽提胆固醇时分层不明显，很难掌握，易出现误差，很难达到分离胆固醇和脂质的目的，成本太高。3、胡祥正等Q00610015697. 5)公开了一种从动物胆汁为原料提取胆红素和胆汁酸的方法将提取完胆红素的胆汁中加入氢氧化钠，调节PH值为10-11，加热浓缩得到固化物，将固化物溶于适量的乙醇中，向其中滴加盐酸，调节PH值为3-4，得到固体胆汁酸。该方法的缺点是乙醇的价格高，而且不能反复的利用，生产中成本较高，再者，得到的胆汁酸的纯度不高，杂质不能全部去除，很难达到分离胆固醇和脂质的目的。
发明内容
本发明的目的是解决上述不足而提供一种利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，
3该种方法操作简单，而且没有有毒有害的有机溶剂，可形成工业化大规模生产。本发明采取的技术方案为一种利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，步骤如下(1)胆汁酸的皂化将胆汁提取完胆红素的下脚料(胆膏)粉碎，加入质量浓度的碱液，制成悬浊液，投料重量比例为下脚料碱液=1 8-10;在悬浊液中加入胆膏重量2%的消泡剂，100°C加热回流10-12小时，进行皂化；(2)总胆酸脱色皂化完成后，待反应液冷却至80°C以下时，虹吸上层液体，加入上层液体10-12倍体积的水溶解，然后加入上层液体2-4倍体积的双氧水脱色，然后静置。(3)总胆酸的分离将脱色之后的胆盐过滤，取清液，在搅拌的条件下，不断加入30% (wt% )盐酸溶液调节PH值，待胆汁酸析出，PH在3左右时，过滤，取固体；然后水洗3-4遍，直至PH在7 左右为止。本发明是利用生产胆红素之后的废弃物作为原料生产，有效利用了资源。通过碱液高温皂化，将胆膏中的蛋白，脂肪之类的杂质溶解在碱液中，更好的除去杂质。而且通过化学脱色，进一步除杂。最后通过调节PH值，胆汁酸析出，水溶性的杂质溶解，经过水洗，将杂质的去除，从而达到纯化的目的。本发明的生产胆汁酸的方法操作简单，而且没有有毒有害的有机溶剂，而且碱液可以反复的利用，可形成工业化大规模生产，所得产品纯度高(胆汁酸> 98% )，总收率在 40%以上。
具体实施例方式下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但是并不因此将本发明限制在所述的实施例范围内。以下实施例中，本发明的收率定义为收率=胆汁酸产品质量/胆膏质量 X100%o实施例1将提取胆红素的下脚料胆膏500公斤，粉碎，加入反应罐。然后加入胆膏10倍体积的10%氢氧化钠溶液，加热至100°C。待胆膏溶解后开始计时，加热，回流，反应12小时。 然后，待液体冷却至80°C，反应液分层之后，将上层液体虹吸出，加上层液体10倍体积的水溶解，待全部溶解之后，加入上层液体2倍体积的双氧水氧化，静置12小时。氧化完成之后，过滤取清液，用30%盐酸溶液调节其PH值，在不断搅拌的情况下加入盐酸，使胆汁酸晶体析出。在PH到2-3时，胆汁酸基本全部析出。然后过滤，水洗胆汁酸固体至中性。将水溶性杂质去除。将所得固体干燥，称重。胆汁酸得率43%。测定其含量为96%。实施例2将提取胆红素的下脚料胆膏500公斤，粉碎，加入反应罐。然后加入胆膏10倍体积的10%氢氧化钠溶液，加热至100°C。待胆膏溶解后开始计时，加热，回流，反应10小时。 然后，待液体冷却至60°C，反应液分层之后，将上层液体虹吸出，加上层液体10倍体积的水溶解，待全部溶解之后，加入上层液体3倍体积的双氧水氧化，静置10小时。氧化完成之后，过滤取清液，用30%盐酸溶液调节其PH值，在不断搅拌的情况下加入盐酸，使胆汁酸晶体析出。在PH到2-3时，胆汁酸基本全部析出。然后过滤，水洗胆汁酸固体至中性。将水溶性杂质去除。将所得固体干燥，称重。胆汁酸得率40%。测定其含量为95%。实施例3将提取胆红素的下脚料胆膏500公斤，粉碎，加入反应罐。然后加入胆膏10倍体积的10%氢氧化钠溶液，加热至100°C。待胆膏溶解后开始计时，加热，回流，反应14小时。 然后，待液体冷却至80°C，反应液分层之后，将上层液体虹吸出，加上层液体10倍体积的水溶解，待全部溶解之后，加入上层液体2倍体积的双氧水氧化，静置16小时。氧化完成之后，过滤取清液，用30%盐酸溶液调节其PH值，在不断搅拌的情况下加入盐酸，使胆汁酸晶体析出。在PH到2-3时，胆汁酸基本全部析出。然后过滤，水洗胆汁酸固体至中性。将水溶性杂质去除。将所得固体干燥，称重。胆汁酸得率43%。测定其含量为95%。
权利要求
1.一种利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，其特征是，步骤如下(1)胆汁酸的皂化将胆汁提取完胆红素的下脚料粉碎，加入碱液，制成悬浊液，在悬浊液中加入消泡剂， 加热回流进行皂化；(2)总胆酸脱色皂化完成后，待反应液冷却至80°C以下时，虹吸上层液体，加入水溶解，然后加入双氧水脱色，静置；(3)总胆酸的分离将脱色之后的胆盐过滤，取清液，加盐酸调节PH值，待胆汁酸析出，过滤，取固体，然后水洗至中性。
2.按照权利要求1所述的利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，其特征是，步骤(1)所述的碱液质量浓度8% -12% ；所述的下脚料与碱液投料重量比例为 1 8-10。
3.按照权利要求1所述的利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，其特征是，步骤(1)所述的皂化温度为100°c，反应时间10-12小时。
4.按照权利要求1所述的利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，其特征是，步骤(1)所述的消泡剂加入量为胆膏重量的2%。
5.按照权利要求1所述的利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，其特征是，所述的双氧水的加入量为上层液体体积的2-4倍。
全文摘要
本发明涉及一种利用胆红素下脚料提取胆汁酸的方法，该方法以胆汁提取完胆红素的下脚料为原料，先加碱皂化再加双氧水脱色，最后加酸分离、洗涤，本发明通过高温皂化，将胆膏中的蛋白，脂肪之类的杂质溶解在碱液中，而且通过化学脱色，进一步除杂，最后通过调节pH值，将水溶性的杂质溶解，洗出，从而达到纯化的目的。本发明的生产胆汁酸的方法操作简单，而且没有有毒有害的有机溶剂，可形成工业化大规模生产，所得产品纯度高(胆汁酸＞98％)，总收率在40％以上。
文档编号C07J9/00GK102443033SQ20101050365
公开日2012年5月9日 申请日期2010年10月8日 优先权日2010年10月8日
发明者娄倩倩, 籍立民 申请人:娄倩倩, 籍立民