专利名称：蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于蛋白质结晶筛选的试剂盒，特别是用于蛋白质结晶筛选的96 条件试剂盒。
背景技术：
公开号为101817869A的中国专利一种以聚乙二醇作为沉淀剂用于蛋白质结晶筛 选96条件试剂盒(PEG Grid kreen)，具体组成如表1，包括三部分，沉淀剂、添加剂、缓冲 1。
齐UySiiBMCD-Hj^ (Biological Macromolecule CrystallizationDatabase) ψ 统计出的使用频率最高的前八种，浓度为10% -30% w/v ；添加剂包括11种，分别是硫酸 铵，甲酸钠、氯化镁、丙二酸钠、2-甲基_2，4戊二醇、乙二醇、异丙醇、Tacsimate pH 7. O、甘 氨酸、酒石酸钾钠、乙二胺四乙酸，其浓度为0. IM ；缓冲液包括4种，分别是乙酸钠、柠檬酸 钠、2，2-双二羟甲基苯胺、N-2-羟乙基哌嗪-N’ -2-乙磺酸，浓度为0. 1Μ，ρΗ值范围从4到 8。表1 :PEG Grid Screen 96 条件成分表
权利要求
1. 一种蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒，包括缓冲液、沉淀剂和添加剂，其特征在于 成分组成如下表序号缓冲液pH沉淀剂添加剂Al0.1 M柠檬酸ρΗ3·535% ν/ν PEG 4000.2M硫酸铵A20.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ4.540% ν/ν PEG 4000.2M硫酸铵A30.1M2,2-双二羟甲基苯胺pH 5.535% ν/ν PEG 4000.1M硫酸铵A40.1M哌嗪-N, N-双(2-乙磺 酸)pH 6.540% ν/ν PEG 4000.1M硫酸铵A50.1M咪唑-盐酸ρΗ7.535% ν/ν PEG 4000.1M硫酸铰A60.1M N，N-双(2-羟乙基)甘氨 酸pH 8.540% ν/ν PEG 4000.2M硫酸铵A70.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ3.5AOVovh PEG 550 MME0.2M 1,6-己二醇A80.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ4.530% ν/ν PEG 550 MME0.1 M硫腈酸钾A90. IM双二羟甲基苯胺ρΗ5.530% ν/ν PEG 550 MME0.05 M无水氯化钙AlO0. IM 2,2-双二羟甲基苯胺ρΗ6.630% ν/ν PEG 550 MME0.05 M无水氯化钙All0.1M哌嗪-N, N-双(2-乙磺 酸)ρΗ6.530% ν/ν PEG 550 MME0.2 M无水氯化 丐A120.1M咪唑-盐酸ρΗ7.540% ν/ν PEG 550 MME0.1 M无水氯化钙Bl0.1M柠檬酸ρΗ3.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸锂B20.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ4.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸锂B30. IM 2,2-双―羟甲基苯胺ρΗ5.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸锂B40.1M哌嗪-N，N-双(2-乙磺 酸)ρΗ6.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸锂-B50.1 M咪唑-盐酸ρΗ 7.530% w/v PEG 10000.2 M 一水硫酸锂B60.1M N，N-双(2-羟乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 10000.1 M 一水硫酸锂B70.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ3.530% w/v PEG 20000.4M氯化钠B80.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ4.535% w/v PEG 20000.2M氯化钠B90.1M2,2-双二羟甲基苯胺ρΗ5.530% w/v PEG 20000.4M氯化钠BlO0.1M哌嗪-N, N-双(2-乙磺 酸)ρΗ6.535% w/v PEG 20000.2M氯化钠B110.1M咪唑-盐酸ρΗ7.530% w/v PEG 20000.4M氯化钠B120.1M N,N-双(2-羟乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 20000.2M氯化钠Cl30% w/v PEG 2000 MME0.1 M硫氰酸钾C230% w/v PEG 2000 MME0.15 M溴化钾C330% w/v PEG 2000 MME0.2M氯化钾C40.1M柠檬酸钠--柠檬酸ρΗ3.535% w/v PEG 2000 MMEC50.05M磷酸氢二钠/磷酸二氢 钠ρΗ7.035% w/v PEG 2000 MMEC60.1M N,N-双(2-羟乙基)甘氨 酸ρΗ8.535% w/v PEG 2000 MME
2.根据权利要求1所述的蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒，其特征在于所述沉淀剂 是 PEG4000、PEG6000、PEG8000、PEG3350、PEG400、PEG 1000、PEG2000、PEG10000、PEG2000、 PEG 550MME、PEG 2000MME、PEG 5000MME、硫酸铵、2-甲基-2，4 戊二醇或 Tacsimate 的任一 种。
3.根据权利要求1所述的蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒，其特征在于所述添加剂 是一价盐、二价盐、三价盐、己二醇或乙二胺四乙酸的任一种。
4.根据权利要求1所述的蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒，其特征在于所述缓冲液 是2，2_双二羟甲基苯胺、咪唑-盐酸、柠檬酸钠-柠檬酸、N，N-双(2-羟乙基)甘氨酸、三 羟甲基氨基甲烷或哌嗪-N，N-双乙磺酸)的任一种。
全文摘要
本发明公开了一种蛋白质结晶筛选的96条件试剂盒，用于解决现有的现有的96条件筛选试剂盒在蛋白质结晶条件筛选中成功率低的技术问题。技术方案是以聚乙二醇系列作为主要沉淀剂用于蛋白质结晶筛选96条件试剂盒，本试剂盒所选PEG种类覆盖齐全，分子量从400到20000，而且还包括聚乙二醇单甲醚550、2000、5000，同时还包括了几种成功率较高的盐类如丙二酸钠，2-甲基-2，4戊二醇，增加了结晶的可能性，提高了蛋白质结晶条件筛选成功率。
文档编号C07K1/30GK102060907SQ20101053552
公开日2011年5月18日 申请日期2010年11月4日 优先权日2010年11月4日
发明者尹大川, 张仙芳 申请人:西北工业大学