专利名称：四氢-异α酸组合物及体重管理方法
技术领域：
本发明一般涉及包含四氢-异α酸化合物的组合物和方法，其可以用来在有需要的哺乳动物中促进体重减轻或减缓体重增加。
背景技术：
肥胖和过重可以定义为可以损害健康的过量或异常脂肪积累。肥胖和过重之间的区别简单来说是程度的问题。世界卫生组织(WHO)定义“过重”为BMI (体重指数)等于或大于25，而“肥胖”为BMI等于或大于30。WHO进一步指出有证据显示BMI 21以上的群体中慢性疾病的风险逐渐增加。WHO 2005年的预测估计约1. 6X IO9成年人(年龄15+)过重；并且至少4X IO8成年人肥胖。该组织进一步预测到2015年，约2. 3 X IO9成年人会过重，并且超过7 X IO8成年人会肥胖。肥胖和过重是由摄入的卡路里与消耗的卡路里之间的能力失衡所导致的，并且可以部分归因于体力活动减少的趋势(主要是由于许多工作形式以及家中技术越来越需要久坐的性质，以及更被动的休闲活动)，改变的运输模式，以及越来越城市化加上饮食转向增加摄入高脂肪和糖类但是低维生素、矿物质和其他微量营养素的高能量食物。这样的脂肪积累的健康后果包括心血管疾病、一些癌症(乳房、结肠和子宫内膜)、肌肉骨骼病症(例如，骨关节炎)和糖尿病的风险增加。(http://www.who.int/ mediacentre/factsheets/fs311/en/index. html ；最近浏览 2010 年 8 月 2 日)。这些健康后果的认识稳步增加，并且体重管理已从身体美学的领域发展至需要干预(例如，药物或手术)的医学问题至生活方式管理，包括遭受痛苦的个体的饮食和锻炼的变化。一个最常与生活方式管理相关的常现问题是无法开始减轻体重或随着时间的推移保持体重减轻，特别是在个体转变为自警性生活方式管理方案时。历年来已研究许多基于植物化学或草药的减肥产品或系统，包括例如以荷荷芭(USPN 7,138,134)，白粉藤属(Cissus)、斑鸠菊属(Vernonia)和 Brillantasia(USPN 7，175，589和7，736，675)，植物化学二吲哚基甲烷(DIM)以及其前体吲哚_3_甲醇(I3C) 和类似物2-(吲哚-3-基甲基)-3，3' 二吲哚基甲烷(LTR-I) (USPN 6，5；34，085)，或者赫蒙阿魏(Ferula hermonis) (USPN6, 780,440)为中心的减肥产品或系统。这些产品或系统全部均已取得有限程度的商业成功，部分可归因于难以随着时间的推移保持产品使用或系统顺应性。此外，一旦体重已减轻，在从“节食”方案转变至日常的“正常”生活方式中随着时间推移可能出现体重控制问题。肥胖控制研究的另一领域集中于GLP-I (胰高血糖素样肽-1)。肠内分泌细胞通过它们对包括内分泌胰腺在内的外周靶器官的作用在调节能量摄入和葡萄糖稳态中起重要作用。在回肠末端和结肠中发现的L细胞合成的前胰高血糖素被翻译后加工为有效的胰岛素促分泌素 GLP-I (胰高血糖素样肽-1) (Drucker DJ 1998 Glucagon-Iike peptides. Diabetes 47 :159-169)。胰高血糖素样肽1 (GLP-I) 1称为促胰岛素，在以下方面发挥其对葡萄糖稳态的作用，调节1)胰岛激素功能(胰岛素和胰高血糖素)，2)营养递送，以及3) 食物摄入。据发现脑室内给予GLP-I在大鼠中抑制进食并减轻体重(Turton M. D, 1996 ； Meeran K,1999)。在人临床试验中，稳定的GLP-I模拟物利拉糖肽(GLP-1中2个氨基酸改变，97% 同源)在患有T2DM的患者中剂量依赖性地减轻体重，具有对心血管有益的效应，如降低血压和甘油三酯含量(Pratley 2008，Sulistio，2009中综述)。食物摄入后几分钟内GLP-I水平在血液中上升，在任何食物出现在肠中之前，这提示对L细胞的神经信号(Drucker 2006)。GLP-I是来源于前胰高血糖素基因的30个氨基酸的肽。据证实GLP-I通过多种机制调控，包括前胰高血糖素基因调控、DPP-4抑制和G 蛋白偶联受体(GPR)信号通路。GLP-I分泌涉及许多因素，包括葡萄糖负荷、油(玉米和紫苏)和不易消化的碳水化合物(Irini 1999，Cani，2007，Lu 2008)。最近，据报道不饱和长链脂肪酸(例如a_亚麻酸)通过主要在结肠表达的GPR120 促进GLP-I分泌(Hirasawa A，2008)。M2受体拮抗剂(阿托品&哌仑西平)阻断玉米油诱导的GLP-I，这提示M2受体在GLP-I激活中的作用(Anini 2002)。据报道苦味受体TlR (Dyer， 2005)和T2R(Wu，2002，Jeon，2008)在肠中表达并刺激激素的释放。而且，GPR 119通过提高肠内分泌细胞中的GLP-I来参与血糖控制(Chu 2008)，并显示在T2D和肥胖的治疗中有益(Overton，2008)。这些数据显示多种GPR调控L细胞中的GLP-I分泌。除了增强葡萄糖诱导的胰岛素分泌，GLP-I刺激胰岛素原基因表达和生物合成 (Drucker DJ,Philippe J,Mojsov S, Chick WL,Habener JF 1987Glucagon_like peptide I stimulates insulin gene expression and increases cyclic AMP levels in a rat islet cell line. Proc Natl Acad Sci USA 84 :3434-3438)。此外，最近证实GLP-1 通过与下丘脑相互作用促进饱腹感并减少食物摄入(Turton MD, 0' Shea D，Gunn I，et al. 1996， Nature 379 :69-72 ；Flint A, Raben A, Astrup A, Hoist JJ, 1998 J Clin Invest 101 515-520)。本发明人发现包含四氢-异α酸化合物的组合物和方法，其可以用来在有需要的个体中直接促进体重减轻或减缓体重增加。发明概述本发明一般涉及包含四氢-异α酸化合物的组合物和方法，其可以用来在有需要的哺乳动物中促进体重减轻或减缓体重增加。本发明的第一实施方案描述一种促进有需要的哺乳动物的健康体重管理的方法， 其中所述方法包括给予包含治疗有效量的四氢-异α酸的组合物。
图1通过图表示出维持标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入罗格列酮(0. 5mg kgHTHIAAdOOmg kgD 或 Insinase (lOOmgkg—cf1)的高脂肪饲料(HFD)的C57BL6/J小鼠的体重变化。图2通过图表示出维持单独高脂肪饲料(HFD)、或者将THIAA加入HFD、或者将 HFD+THIAA的小鼠转换为单独HFD的C57BL6/J小鼠的体重变化。*表示相对于单独HFD饲料，体重的统计上显著的变化；一表示转换或改变饲料。图3通过图表示出维持标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入罗格列酮(0. 5mg kgH、THIAAdOOmg kg—cf1)或 hsinase (IOOmgkg-1Cf1)的高脂肪饲料 (HFD)，或者如图所示转换至可选饲料的C57BL6/J小鼠的肝重变化。*表示相对于单独HFD 饲料，体重的统计上显著的变化；一表示转换或改变饲料。图4通过图表示出维持标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入罗格列酮(0. 5mg kgH、THIAAdOOmg kg—cf1)或 hsinase (IOOmgkg-1Cf1)的高脂肪饲料 (HFD)，或者如图所示转换至可选饲料的C57BL6/J小鼠的性腺脂肪重量变化。*表示相对于单独HFD饲料，体重的统计上显著的变化；一表示转换或改变饲料。图5通过图表示出维持标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入罗格列酮(0. 5mg kgH、THIAAdOOmg kg—cf1)或 hsinase (IOOmgkg-1Cf1)的高脂肪饲料 (HFD)，或者如图所示转换至可选饲料的C57BL6/J小鼠的皮下脂肪重量变化。*表示相对于单独HFD饲料，体重的统计上显著的变化；一表示转换或改变饲料。图6图示标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入罗格列酮 (“Rosi" ； 0. 5mg kgD、THIAA (IOOmg kgD 或 Insinase (IOOmg kgH 的高脂肪饲料(HFD) 12周之后的代表性小鼠。图7图示维持标准饲料(LFD)或者单独高脂肪饲料(HFD)或者加入THIAA (IOOmg kg—1 Cf1)或者如图所示转换至可选饲料的代表性小鼠。图8通过图表示出与未刺激的细胞相比，给予THIA之后NCI-H716细胞中GLP-I 分泌增加。发明详述本发明一般涉及包含四氢-异α酸化合物的组合物和方法，其可以用来在有需要的哺乳动物中促进体重减轻或减缓体重增加。本文所提及的专利、公开的申请以及科学文献构成本领域技术人员的知识，并且整体援引加入本文，达到与具体并分别指明将每一篇援引加入相同的程度。本文所引用的任何参考文献与本说明书的具体教导之间的任何冲突均应通过以后者为准来解决。同样地，本领域所理解的词或短语的定义与本说明书中所具体教导的词或短语的定义之间的任何矛盾均应通过以后者为准来解决。除非另外定义，本文所使用的技术术语及科学术语具有本发明所属领域的技术人员通常理解的意思。本文提及本领域技术人员已知的多种方法和材料。阐述重组DNA技术的一般原理的标准参考著作包括Sambrook et al. ,Molecular Cloning :A Laboratory Manual,2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York(1989) ；Kaufman et al. , Eds., Handbook of Molecular and Cellular Methods in Biology in Medicine, CRC Press, Boca Raton (1995) ；McPherson, Ed. , Directed Mutagenesis :A Practical Approach, IRL Press, Oxford (1991)。阐述药理学的一般原理的标准参考著作包括Goodman and Gilman' s The Pharmacological Basis of Therapeutics,Ilth Ed. , McGraw HillCompanies Inc. , New York(2006)。在本说明书及所附权利要求书中，除非上下文另有明确规定，单数形式包括复数的所指对象。除非上下文另有明确规定，当用于本说明书时，单数形式“一个(a)”、“一个 (an)”和“这个(the)”还具体地包括它们所涉及的术语的复数形式。此外，除非另有具体规定，本文所用的词“或”是以“和/或”的“内含的”意义使用，而不是以“或者(either)/ 或(or)”的“排外的”意义使用。本文所用的术语“约”意指近似，在附近，大致或大约。当术语“约”与数值范围结合使用时，其通过扩展所给数值的上下边界来调整该范围。一般而言，术语“约”在本文中用于调整以20%的差异高于和低于给定值的数值。如本文所用，变量的数值范围旨在表示可以用等于该范围内的任意值的变量来实施本发明。因此，对于固有离散的变量，所述变量可以等于所述数值范围的任意整数值，包括所述范围的端点。类似地，对于固有连续的变量，所述变量可以等于所述数值范围的任何实数值，包括所述范围的端点。例如，描述为具有0至2的值的变量，其对于固有离散的变量可以是0、1或2，并且其对于固有连续的变量则可以是0. 0、0. 1、0. 01、0. 001或任何其他实数值。在下文中详细提及本发明的具体实施方案。虽然会结合这些具体实施方案对本发明加以描述，但是应当理解这并非意味着将本发明限于这样的具体实施方案。相反地，其意图涵盖可包括在如所附权利要求所定义的本发明的精神和范围内的替代、修改和等效物。 在以下描述中，阐述了许多具体细节以提供对本发明的透彻理解。可以在没有这些具体细节中的一些或全部的情况下实施本发明。在其他情况下，为了避免不必要地使本发明含糊不清，没有对公知方法的操作进行详细描述。本领域技术人员已知的任何合适的材料和/或方法均可用于实施本发明。然而， 仍对优选的材料和方法进行描述。除非另有说明，在以下描述和实施例中所涉及的材料、试剂等均可由商业来源获得。本发明的第一实施方案描述一种促进有需要的哺乳动物的健康体重管理的方法， 其中所述方法包括给予包含治疗有效量的四氢-异α酸的组合物。在这个实施方案的一些方面，所述组合物包含50mg_10，OOOmg的四氢-异 α酸。在其他方面，所述四氢-异α酸选自四氢-异潷草酮、四氢-异类潷草酮 (tetrahydro-isocohumulone)禾口四S1 -异伴律草 (tetrahydro-isoadhumulone)。在这个实施方案的其他方面，所述方法通过在有需要的哺乳动物中促进体重减轻或减缓体重增加来促进健康体重管理。在一些方面，所述有需要的哺乳动物患有选自糖尿病、心血管疾病、血脂异常、高血压、勃起功能障碍、多囊卵巢综合征、终末期肾病、骨质疏松、非酒精性脂肪性肝炎、肥胖以及睡眠呼吸暂停的疾病状况。在一些方面，给予所述组合物在个体中减少食物渴求感或增加饱腹感。此外，给予本发明的组合物之后，GLP-I (胰高血糖素样肽-1)合成增加。如本文所用，“促进健康体重管理”或其变化指这样的应用，其中鼓励体重减轻 (“促进体重减轻”)或减缓体重增加。预期减缓体重增加的应用包括预防性应用，其中在摄取高脂肪/高卡路里膳食之前使用本发明以避免由于该膳食而增加体重，或者当个体从积极减肥计划转变并恢复更“正常”(至少对于该个体)的饮食方案时，在从任何饮食方案或治疗减轻体重之后的维持模式的应用。
本发明的预期用途包括但不限于这样的应用，其中个体体重减轻是直接目标(例如，肥胖)；其中体重减轻减少身体应激(例如，骨质疏松)或来自另一治疗方式的副作用 (例如，糖尿病)。在其他情况下，体重减轻可以与改善与疾病或疾病状况相关的风险因素有关(例如，勃起功能障碍)。如本文所用，“四氢-异α酸”或“ΤΗΙΑΑ”指四氢-异伴潷草酮、四氢-异类潷草酮和四氢-异潷草酮中的任何一种或多种。在结构上，THIAA包括属A的化合物
(属Α)其中示出四氢-异潷草酮(R = -CH2CH(CH3)2)；四氢-异类潷草酮(R = CH(CH3)2)； 以及四氢-异伴潷草酮(R = -CH(CH3) (CH2CH3))。术语“药学可接受”用于表示与所述组合物的其他成分相容，并且不会对其接受者有害。如本文所用，“hsinase”应当指包含二氢-异α酸以及阿拉伯金合欢(Acacia nilotica)的醇提取物的组合物。如本文所用，“化合物”可以通过它们的化学结构、化学名称或通用名中的任一种来确认。当化学结构与化学名或通用名冲突时，化学结构对于化合物的确认是起决定作用的。本文所述的化合物可以含有一个或多个手性中心和/或双键，因此可以以立体异构体如双键异构体(即几何异构体)、对映异构体或非对映异构体的形式存在。因此，本文所述的化学结构包括所说明或所确认的化合物的所有可能的对映异构体及立体异构体，包括立体异构纯形式(例如几何异构纯、对映异构纯或非对映异构纯)以及对映异构体和立体异构体的混合物。可以利用本领域技术人员所公知的分离技术或手性合成技术来将对映异构体及立体异构体的混合物拆分为它们的组分对映异构体或立体异构体。所述化合物还可以数个互变异构形式存在，包括烯醇式、酮式及其混合物。因此，本文所述的化学结构包括所说明或所确认的化合物的所有可能的互变异构形式。所述化合物还包括同位素标记的化合物，其中一种或多种原子的原子量不同于通常在自然界中所发现的原子量。可以掺入本发明化合物的同位素的实例包括但不限于2h、3H、13C、14C、15N、18O、”O等。化合物可以非溶剂合物形式和溶剂合物形式(包括水合物形式)存在，以及作为N-氧化物而存在。一般而言， 化合物可以为水合物、溶剂合物或N-氧化物。某些化合物可以多晶型或无定形形式存在。 本发明还包括所述化合物的同源物、类似物、水解产物、代谢产物以及前体或前药。一般而言，除非另有说明，所有的物理形式是对于本文的用途而言是等效的，并且意图在本发明的范围之内。本发明的化合物可以作为盐存在。具体而言，包括所述化合物的药学可接受的盐。 本发明的“药学可接受的盐”为本发明化合物以及与所述化合物形成盐(例如镁盐，本文表示为“Mg”或“Mag”)的酸或碱的组合，并且在治疗条件下为个体所耐受。一般而言，本发明化合物的药学可接受的盐会具有1或更大的治疗指数(最低毒性剂量与最低治疗有效剂量的比值)。本领域技术人员会认识到所述最低治疗有效剂量会随个体以及症状的不同而不同，并且会因此进行相应调整。将本发明的化合物与任何公知的药学可接受的载体(包括稀释剂和赋形剂)任选地配制在药学可接受的媒介物中[参见Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. , Gennaro, Mack Publishing Co. , Easton, PA 1990 and Remington :The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott，Williams&Wilkins，1995]。然而用于产生本发明组合物的药学可接受的载体/媒介物的类型会根据向哺乳动物给予所述组合物的方式变化， 通常药学可接受的载体在生理上是惰性且无毒的。本发明组合物的制剂可以含有多于一种类型的本发明的化合物，以及用于治疗所治疗的症状/疾病状况的任何其他药理学活性成分。可以利用本领域技术人员已知的配制方法将本发明的化合物提供于药学可接受的媒介物中。本发明的组合物可以通过标准途径给药，但是优选通过吸入途径给药。本发明的组合物包括适合口服、吸入、直肠、眼部(包括玻璃体内或前房内)、鼻腔、局部(包括含服及舌下)、阴道或胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、皮内及气管内)给药的那些组合物。 此外，可以根据本领域的标准工艺加入聚合物以供给定化合物的持续释放。适合通过吸入给药的制剂包括可以通过本领域技术人员已知的吸入装置分配的制剂。这样的制剂可以包含诸如粉末和气溶胶的载体。本发明包括适合喷雾以及支气管内使用的液体和粉状组合物，或者通过分配计量(dispensing metered dose,"MDI")的气雾剂单元给药的气雾剂组合物。可以将活性成分配制在水性的药学可接受的吸入剂媒介物中，例如等渗盐水或抑菌水以及本领域公知的其他类型媒介物。为了导致或使得必要剂量的液体组合物能够被吸入到患者的肺中，通过泵或挤压驱动的雾化喷雾分配器或通过任何其他常规方式来给予所述溶液剂。含有本发明的抗炎化合物的粉状组合物包括例如与乳糖或其他适于支气管内给药的惰性粉末充分混合的所述活性成分的药学可接受的粉状制剂。 所述粉状组合物可以通过分配器(包括但不限于气雾剂分配器)给药或者装入易碎的胶囊中，患者可以将所述胶囊插入用于戳破胶囊并将粉末在稳定的气流中吹出的装置中。用于所述主题方法的气雾剂制剂通常包含抛射剂、表面活性剂和共溶剂，并且可以被装入由合适的计量阀关闭的常规气雾剂容器中。载体为固体的适合鼻腔给药的本发明组合物的制剂包括粒度在例如20-500微米范围内的粗粉，其以嗅剂(snuff)的方式给药，即通过从靠近鼻子处的粉末容器中经鼻腔通道快速吸入来给药。载体为液体的例如通过鼻腔喷雾、气雾剂或作为滴鼻剂给药的合适制剂包括本发明化合物的水溶液或油溶液。对于口服给药，可以如下形式提供本发明的组合物作为离散单位(discrete unit)，例如各自含有预定量的作为粉末或颗粒的活性成分的胶囊剂、囊片剂、软胶囊剂、扁囊剂、丸剂或片剂；作为水性液体或非水性液体中的溶液剂或混悬剂；或者作为水包油液体乳剂或油包水乳剂以及作为大丸剂等。或者，本发明所有方面的组合物的给药均可以通过液体溶液剂、混悬剂或酏剂、散剂、锭剂、微粒以及渗透递送体系来实现。适合胃肠外给药的本发明该方面的组合物的制剂包括水性的和非水性的无菌注射溶液剂，其可以含有抗氧化剂、稳定剂、缓冲剂、抑菌剂以及使所述制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；以及水性的和非水性的无菌混悬剂，其可以包含助悬剂和增稠剂。所述制剂可以在单位剂量或多剂量容器(例如密封的安瓿和小瓶)中提供，并且可以在冷冻干燥 (冻干)条件下存放，仅需在使用之前立即加入无菌液体载体，例如，注射用水。可以从上文所述种类的无菌粉末、颗粒和片剂制备即时注射溶液剂和混悬剂。可以通过任选地与一种或多种助剂进行压制或模制来制备片剂。可以通过在合适的机器中压制任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活化或分散剂混合的自由流动形式(例如粉末或颗粒)的活性成分来制备压制片剂。可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备模制片剂。任选地，可以将所述片剂包衣或刻痕，并且可以将其配制以提供其中活性成分的缓释或控释。用于直肠给药的本发明组合物的制剂可以制备为具有合适基质(包括例如可可脂)的栓剂。适合在口腔中局部给药的本发明组合物的制剂包括在调味基质(通常为蔗糖以及阿拉伯胶或黄蓍胶)中包含所述成分的锭剂；在惰性基质(例如明胶和甘油，或者蔗糖和阿拉伯胶)中包含所述活性成分的软锭剂；以及在合适的液体载体中包含待给予成分的漱口剂。适合向皮肤局部给药的本发明组合物的制剂可以作为在药学可接受的载体中包含待给予成分的软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、洗剂以及糊剂而提供。还包括局部递送体系，其为含有待给予成分的透皮贴剂。适合阴道给药的本发明该方面的组合物的制剂可以作为子宫托、栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或者喷雾剂而提供，除了本发明的化合物之外，其还含有本领域已知合适的药学可接受的载体。本发明的方法和组合物意图用于可以感受本发明方法的益处的任何哺乳动物。在这样的哺乳动物中最重要的是人，但是本发明并非意图受限于此，其同样适用于兽用。因此，根据本发明，“哺乳动物”或“有需要的哺乳动物”包括人以及非人哺乳动物，尤其是驯养的动物，包括但不限于猫、狗和马。如本文所用，“治疗”是指与未根据本发明治疗的个体的症状相比，减轻、预防和 /或逆转已向其给予本发明化合物的个体的症状。从业者会理解，应在由有经验的从业者 (医生或兽医)进行连续临床评价的同时使用本文所述的化合物、组合物和方法，以便确定后续治疗。因此，治疗之后，从业者会根据标准方法评价在减少心血管风险因素或相关失调 (dyregularities)方面的任何改善。这样的评价会对是否增加、减少或维持特定治疗剂量、 给药模式等有所帮助并提供资料。应当理解，给予本发明化合物的个体不必患有特定的创伤性状态。事实上，可以在症状的任何发展之前预防性给予本发明的化合物。术语“治疗的”、“治疗地”以及这些术语的变形用于包括治疗性、缓解性以及预防性使用。因此，如本文所用，通过“治疗或缓解所述症状”是指与未接受这样的给药的个体的症状相比，减轻、预防和/或逆转已向其给予本发明化合物的个体的症状。术语“治疗有效量”用来表示以有效实现所寻求的治疗结果的剂量治疗。而且，本领域技术人员会理解，可以通过微调和/或通过给予一种以上本发明的化合物，或者通过将本发明的化合物与另一化合物给药来减少或增加本发明化合物的治疗有效量。参见，例如 Meiner，C. L.，“ Clinical Trials :Design，Conduct，and Analysis, “ Monographsin Epidemiology and Biostatistics, Vol. 8 Oxford University Press, USA(1986)。因此，本发明提供针对给定哺乳动物的具体急性症状(exigency)定制给药/治疗的方法。如下文实施例所述，可以容易地确定治疗有效量，例如通过以相对低的量起始并通过在评价有益效果的同时逐步增量来凭经验确定有效量。本领域技术人员会理解，根据患者在任何给定时间的特定医疗状态(包括其他临床因素，例如所述哺乳动物的年龄、体重和状况以及所选择的给药途径)，本发明化合物的给药量会随患者的不同而不同。以下实施例意图进一步说明本发明的某些优选实施方案，并且实际上是非限制性的。本领域技术人员仅利用常规试验会认识到或者能够确定本文所述的具体物质和操作的许多等效物。
实施例实施例1饮食THIAA对体重减轻和体重维持的效果这个实验的目的是确定四氢-异α酸化合物对体重减轻和体重维持的效果。动物处理和饲料实验开始时，C57B16/J雄性小鼠为12周龄。将12只小鼠维持 4 只 / 笼。标准饲料购自 Research Diets, Inc (New Brunswick, NJ)。对照饲料(“LFD，，) (D12450B)的热量组成为20 70 10(蛋白质碳水化合物脂肪)，并且高脂肪饲料 (“HFD”)(D12451)的热量组成为20 35 45。脂肪的增量增加由猪油提供。建立之后有味觉厌恶，向高脂肪饲料补充测试物质。每隔一周测定体重和食物消耗，并且如果需要进行调整以确保递送的活性物质THIAA或^^皿紹(IOOmg kgH和罗格列酮(0. 5mg kgH 的量。12周之后将代表性动物处死，并且测定总体重、肝重、皮下脂肪重量和性腺脂肪重量。另外，以交叉方式将一些动物转换至可选饲料(HFD —HFD+THIAA或HFD+THIAA —HFD)， 测定测试化合物对维持体重减轻或诱导新的体重减轻的效果。MM 在3周时，与单独HFD饲料相比，所有测试化合物均导致显著降低的体重。 另外，在6周时，HFD+THIAA饲料的动物表现出与单独LFD的对照小鼠没有显著差异的总体重(图1)。从第16周，HFD — HFD+THIAA转换的动物表现出与单独HFD相比显著降低的体重， 然而，在第19周，HFD+THIAA —HFD动物表现出与单独HFD+THIAA相比显著更高的体重(图 2)。在HFD+THIAA动物中观察到与单独HFD相比肝重显著降低(图3)。对于HFD+THIAA 或HFD+THIAA — HFD动物中的性腺脂肪重量观察到相似结果(图4)。进一步注意到与单独HFD相比，所有测试化合物均导致皮下身体脂肪的显著流失 (图5)，这在饲料转换之前或之后是视觉上非常明显的(分别为图6和7)。实施例2THIAA增加NCI-NIH716细胞中的GLP-1分泌这个实验的目的是确定THIAA对GLP-1 (胰高血糖素样肽_1)合成的影响。MM =RPMI 1640培养基、DMEMU-谷氨酰胺、青霉素、链霉素和FBS购自Hyclone Laboratories (South Logan, UT))。将 THIAA 原液以 20mg/ml 的终浓度制备于 DMSO 中。 PMA (已知的GLP 1刺激的标准品)购自Sigma (St. Louis, M0)。人NCI—H716细胞获得自美国典型培养物保藏中心(Manassas，VA)。基质胶(Matrigel)板购自BD biosciences, CA0 GLP-1ELISA 试剂盒购自 Millipore (Billerica, MA)。细胞培养为了维持，使NCIH716细胞在补充了 10% FBS、2mm 1_谷氨酰胺、 100IU/ml青霉素和lOOyg/ml链霉素的RPMI 1640中悬浮生长。通过使细胞于用基质胶(BD)包被的皿中，在高葡萄糖DMEMUO % FBS、2mm 1-谷氨酰胺、100IU/ml青霉素和 ΙΟΟμ g/ml链霉素中生长来启动细胞粘附和内分泌分化(de Bruine AP, Dinjens WN, van der Linden EP, Pijls MM, Moerkerk PT, Bosman FT 1993 Extracellular matrix components induce endocrine differentiation in vitro in NCI—H716 cells. Am J Pathol 142 :773-782)。据描述来源于人盲肠的低分化腺癌的NCIH716细胞系(Park JG, Oie HK, Sugarbaker PH, et al. 1987 Characteristics of cell lines established from human colorectal carcinoma. Cancer Res 47 :6710-6718)表现出一些内分泌特征， 特别是形成分泌颗粒和嗜铬粒蛋白A表达(de Bruine AP, Dinjens WN, van der Linden EP, Pijls MM, Moerkerk PT, Bosman FT 1993Extracellular matrix components induce endocrine differentiation in vitro inNCI_H716 cells. Am J Pathol 142:773-782)。细胞刺激实验之前2-3天，将NCI细胞接种在用基质胶包被的48孔培养板中。 在实验当天，将细胞用无血清DMEM培养基洗涤，并且用具有终浓度0. 1% DMSO的含有或不含测试化合物(20 μ g/ml THIAA和1 μ ΜΡΜΑ)的无血清DMEM培养。将细胞培养2小时，并且利用Linco GLP-I (7-36)活性ELISA试剂盒立即分析培养基的活性GLP-I (7-36)。统计分析将GLP-I水平用未刺激的细胞(DMS0对照)归一化，并且测试化合物的数据表示为倍数刺激。每个实验代表最少3个独立测量。最终数据代表来自3个独立实验。结星与未刺激的细胞相比，THIAA在NCI-H716细胞中增加GLP-1分泌约2. 62倍 (参见图8)。虽然已详细并参考其具体实施方案描述所要求保护的发明，但是本领域技术人员应当清楚可以对所要求保护的发明进行各种变化和修改而不背离其精神和范围。因此，例如，本领域技术人员仅利用常规试验会认识到或者能够确定本文所述的具体物质和操作的许多等效物。认为这样的等效物在本发明的范围之内，并且被所附权利要求所涵盖。
权利要求
1.一种促进有需要的哺乳动物的健康体重管理的方法，所述方法包括给予包含治疗有效量的四氢-异α酸的组合物。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含50mg-10，OOOmg的所述四氢-异α酸。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述四氢-异α酸选自四氢-异潷草酮、四氢-异类潷草酮和四氢-异伴潷草酮。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述促进健康体重管理选自在有需要的哺乳动物中促进体重减轻或减缓体重增加。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述有需要的个体患有选自糖尿病、心血管疾病、血脂异常、高血压、勃起功能障碍、多囊卵巢综合征、终末期肾病、骨质疏松、非酒精性脂肪性肝炎、肥胖以及睡眠呼吸暂停的疾病状况。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述给予减少食物渴求感或增加饱腹感。
7.如权利要求1所述的方法，其中所述给予增加GLP-I合成。
全文摘要
本发明公开利用四氢-异α酸化合物促进或维持体重减轻的组合物和方法。本发明公开增加GLP-1合成的方法。
文档编号C07C45/00GK102574760SQ201080035875
公开日2012年7月11日 申请日期2010年8月13日 优先权日2009年8月14日
发明者G·达兰, M·L·特里普, V·孔达 申请人:麦特普罗泰欧米克斯有限公司