专利名称：一种纯化景洪哥纳香甲素的方法
技术领域：
本发明涉及一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，特别是涉及一种应用超临界(X)2萃取和高速逆流色谱纯化景洪哥纳香甲素的方法。
背景技术：
景洪哥纳香甲素(Cheliensisin A)，化学名称6 (7、8_环氧-苯乙烯基)_5_乙酰氧基-5,6- 二氢-2-吡喃酮，分子量274，白色结晶，熔点152-153°C。景洪哥纳香甲素是从番荔枝科植物景洪哥纳香叶中提取得来，具有很强的抗肿瘤作用。文献“景洪哥纳香甲素诱导人早幼粒白血病细胞凋亡及其信号转导通路的研究”和专利“景洪哥纳香甲素及其制备方法和应用”都报道了景洪哥纳香甲素的显著抗肿瘤作用。现有纯化景洪哥纳香甲素的方法为景洪哥纳香叶或茎秆，用乙醇冷浸提取，减压回收乙醇，浓缩液加水调勻，用氯仿萃取，回收氯仿，得氯仿提取物，该提取物经硅胶进行柱层析，依次用石油醚，乙酸乙酯-石油醚梯度洗脱，得景洪哥纳香甲素(cheliensisin A)。 文献“景洪哥纳香中一个新的抗癌活性成分”和专利“景洪哥纳香甲素及其制备方法和应用”公开的方法均是此种方法。但是这种传统工艺，提取效率和收率都比较低，对环境污染严重。
发明内容
本发明的目的在于克服现有纯化工艺中的不足，提供一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，该方法能够提高产品收率，而且无污染。为了实现上述目的，本发明的技术方案如下
一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，其特征在于以景洪哥纳香叶为原料，粉碎60-80 目，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，流分减压干燥即得景洪哥纳香甲素。所述超临界(X)2萃取条件为萃取温度为50-55°C，萃取压力为20_25MPa，分离釜 I温度为50-55°C，压力为8-10MPa，分离釜II温度为45_50°C，压力为5_6MPa。所述的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统比例为3 (3-5) (4-5) :4。本发明的积极效果是
1)采用超临界(X)2萃取，提取时间短，效率高，能耗较低，CO2重复利用，绿色环保。2)采用高速逆流色谱分离，产品无损失，是一种高效分离方法，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大，无废弃物产生。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取景洪哥纳香叶药材，粉碎60目，取500g原料加入超临界(X)2萃取釜中，开启设备调节参数萃取温度为50°C，萃取压力为25MPa，分离釜I温度为55°C，压力为lOMPa，分离釜 II温度为45°C，压力为5MPa。达到上述参数后，以20L/h流量萃取4h，解析萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为3 :3 5 :4混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取乙酸乙酯溶解萃取物注入色谱仪，调节转速900r/min，流速2ml/min，分离得景红哥纳香甲素，收集景红哥纳香甲素流分，减压干燥得景红哥纳香甲素650mg，高效液相检测，含量98. 7%。实施例2:
取景红哥纳香叶药材，粉碎60目，取500g原料加入CO2萃取釜中，开启设备调节参数 萃取温度为50°C，萃取压力为20MPa，分离釜I温度为50°C，压力为8MPa，分离釜II温度为 45°C，压力为6MPa。达到上述参数后，以30L/h流量萃取池，收集萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为3 :5 :4 :4混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取乙酸乙酯溶解萃取物注入色谱仪，调节转速850r/min，流速2ml/min，分离景红哥纳香甲素，收集景红哥纳香甲素流分，减压干燥得景红哥纳香甲素671mg，高效液相检测，含量 98. 1%。实施例3:
取景红哥纳香叶药材，粉碎80目，取Ikg原料加入(X)2萃取釜中，开启设备调节参数 萃取温度为55°C，萃取压力为22MPa，分离釜I温度为50°C，压力为8MPa，分离釜II温度为 45°C，压力为6MPa。达到上述参数后，以30L/h流量萃取池，收集萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为3 4 5 :4混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，乙酸乙酯溶解萃取物注入色谱仪，调节转速850r/min，流速2ml/min，分离景红哥纳香甲素，收集景红哥纳香甲素流分，减压干燥得景红哥纳香甲素1. 31g，高效液相检测，含量 98. 5%ο实施例4:
取景红哥纳香叶药材，粉碎80目，取2kg原料加入(X)2萃取釜中，开启设备调节参数 萃取温度为50°C，萃取压力为25MPa，分离釜I温度为55°C，压力为9MPa，分离釜II温度为 50°C，压力为5MPa。达到上述参数后，以30L/h流量萃取池，收集萃取物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按比例为3 5 5 :4混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，乙酸乙酯溶解萃取物注入色谱仪，调节转速900r/min，流速3ml/min，分离景红哥纳香甲素，收集景红哥纳香甲素流分，减压干燥得景红哥纳香甲素2. 7g，高效液相检测，含量 98. 2%ο
权利要求
1.一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，其特征在于以景洪哥纳香叶为原料，粉碎60-80 目，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，流分减压干燥即得景洪哥纳香甲素。
2.根据权利要求1所述一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，其特征在于所述超临界CO2 萃取条件为萃取温度为50-55°C，萃取压力为20-25MPa，分离釜I温度为50_55°C，压力为 8-10MPa，分离釜II温度为45-50°C，压力为5_6MPa。
3.根据权利要求1所述一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，其特征在于所述的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统比例为3 (3-5) (4-5) :4。
全文摘要
本发明提供了一种纯化景洪哥纳香甲素的方法，方法是以景洪哥纳香叶为原料，粉碎60-80目，加入萃取釜中，采用超临界CO2萃取，收集萃取物，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，流分减压干燥即得景洪哥纳香甲素。本发明具有高效、绿色环保等优点。
文档编号C07D407/04GK102329311SQ20111021062
公开日2012年1月25日 申请日期2011年7月26日 优先权日2011年7月26日
发明者刘东锋, 李法庆 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司