专利名称：一种洋蓟素的纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种洋蓟素的纯化方法，特别是涉及一种采用高速逆流色谱纯化洋蓟素的方法。
背景技术：
洋蓟素(Cynarin)又叫朝蓟素，朝鲜蓟酸，无色针状结晶(稀醋酸)，熔点225 2270C，CAS 号 1884-23-7，分子式 C25H24O12,分子量 516. 54，分子结构
洋蓟素微溶于冷水，较易溶于沸水中，溶于醇类、冰醋酸等，具有增强胆汁降低脂肪，肝脏解毒，预防脂肪肝；能有效抑制LDL胆固醇氧化，降低胆固醇的作用。朝鲜蓟学名O^arasco/jMAs L，为菊科(Comopsite)菜蓟属多年生草本植物。未开放时花蕾的总苞和膨大的花托供食用。研究发现朝鲜蓟的茎叶中含有大量的酚酸类物质，其中洋蓟素含量在0. 5%左右，而茎叶多为废弃物。从朝鲜蓟中提取洋蓟素的方法，一般采用的大孔树脂和膜分离法，得到的产品多为粗提物。如专利(申请号200910107323)“一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯方法”，该专利公开的方法是朝鲜蓟叶通过乙醇或丙酮溶液提取，提取液浓缩后水沉过滤，再将滤液进行微滤处理；调节所得透析液PH值，通过大孔吸附树脂层析柱得蓟素粗产品纯度达20%以上。制备高含量洋蓟素的方法，一般硅胶柱层析或制备液相分离。硅胶柱分离样品损失严重，溶剂用量大，周期长，而制备液相分离制备量较小。
发明内容
本发明的目的是克服现有方法的不足和技术缺陷，提供一种洋蓟素的纯化方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的一种洋蓟素的纯化方法，其特征在于以下步骤
a.取朝鲜蓟茎叶粉碎，加入4-10倍量水，加热至45-65°C，浸泡提取1_2小时，提取2_3 次，提取液减压浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；
b.取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合充分分层后，取下相做流动相，上相做固定相，采用高速逆流色谱分离上述粗提物，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩结晶，干燥得高纯度洋蓟素。
所述步骤b中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合比例为1-3:5-9:2-4:6-11。所述步骤b中的高速逆流色谱分离主机转速600-1000rpm，流动相流速1_細1/
mirio本发明的优势是方法采用高逆流色谱方法纯化洋蓟素，是一种液液分配色谱法， 无需固体载体，对分离样品无吸附，分离速度快，制备量大，溶剂用量小而可以循环利用。
具体实施例方式下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。实施例1:
朝鲜蓟茎叶粉碎，取^g，加入10倍量水加热到65°C，浸泡1小时，抽取液体，再加4倍量水，提取1次，合并提取液减压浓缩，浓缩液加入等体积乙酸乙酯萃取2次，萃取液回收试剂，得浸膏。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液按1:5:2:6比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱柱做固定相，转动主机700rpm，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速调整为2ml/min，并用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩，结晶，干燥得洋蓟素900mg，含量98. 5%。实施例2:
朝鲜蓟茎叶粉碎，取^g,加入8倍量水加热到45°C，浸泡2小时，抽取液体，再加5倍量水，提取1次，合并提取液减压浓缩，浓缩液加入等体积乙酸乙酯萃取2次，萃取液回收试剂，得浸膏。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液按3:9:4:11比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱柱做固定相，转动主机800rpm，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速调整为3ml/min，并用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩，结晶，干燥得洋蓟素940mg，含量98. 1%。
权利要求
1.一种洋蓟素的纯化方法，其特征在于以下步骤a.取朝鲜蓟茎叶粉碎，加入4-10倍量水，加热至45-65°C，浸泡提取1_2小时，提取2_3 次，提取液减压浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；b.取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合充分分层后，取下相做流动相，上相做固定相，采用高速逆流色谱分离上述粗提物，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩结晶，干燥得高纯度洋蓟素。
2.如权利要求1所述的洋蓟素的纯化方法，其特征在于所述步骤b中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合比例为1-3 5-9 2-4 6-11。
3.如权利要求1所述的洋蓟素的纯化方法，其特征在于所述步骤b中的高速逆流色谱分离主机转速600-1000rpm，流动相流速Uml/min。
全文摘要
本发公开了一种洋蓟素的纯化方法。方法步骤如下a.取朝鲜蓟茎叶粉碎，加入4-10倍量水，加热至45-65℃，浸泡提取1-2小时，提取2-3次，提取液减压浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；b.取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水溶液混合充分分层后，取下相做流动相，上相做固定相，采用高速逆流色谱分离上述粗提物，紫外检测器在线监测，收集目标流分，减压浓缩结晶，干燥得高纯度洋蓟素。本发明具有分离速度快、制备周期短、试剂用量少等优势，所得产品可达98%以上。
文档编号C07C67/56GK102276465SQ20111026418
公开日2011年12月14日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司