专利名称：从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法
技术领域：
本发明涉及天然产物分离工程技术领域，具体涉及一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法。
背景技术：
东莨菪内酯是自然界广泛存在的香豆素类化合物，已经有报道称可从多种植物中提取获得，如杭白芷、当归、颠茄、丁公藤等。东莨菪内酯可调节血压，对不同种类的细菌有抑菌活性，其中包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌属以及肺炎克雷伯菌和绿脓杆菌等。东莨菪内酯具有抗炎活性，可用于治疗支气管疾病和哮喘。还具有调节激素血清素，帮助减轻焦虑和抑郁症。申请人还研究发现，东莨菪内酯对朱砂叶螨、柑橘全爪螨等重要的农业害螨具有明显的杀螨活性，是一种具有潜在开发价值的植物性杀螨活性物质。但东莨菪内酯的合成工艺较为复杂，成本高。要想获得大量的东莨菪内酯只有从植物组织中提取较为经济。虽有报道称可从杭白芷、当归、颠茄、丁公藤等多种植物中提取获得，但还没有成熟完善的工业提取方法。特别是从生产青蒿素以后的黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法。本发明所述的一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法，依次通过以下步骤实现
(1)将提取过青蒿素的黄花蒿残渣与丙酮按质量体积比1:4-1 :8kg/ L的比例于提取罐中回流提取4次，丙酮每次加入总量的四分之一，每次在53°C和0. 06MP蒸汽压下回流提取2-池，合并提取液；
(2)将上述提取液导入浓缩罐中于60°C条件下真空浓缩至无丙酮味，得到的浸膏与等质量的80 120目的硅胶搅拌均勻，50°C条件下干燥；
(3)将上述吸附了提取物的硅胶上硅胶柱，用石油醚乙酸乙酯体积比7:1-5 1的混合溶剂洗脱，分段收集洗脱液；
(4)将含有目标化合物的洗脱液加热浓缩后导入结晶罐内降温结晶，结晶完成后抽滤掉结晶罐内的洗脱液，然后用石油醚洗涤所得结晶，得东莨菪内酯。进一步，上述方法步骤(1)中，丙酮可以用甲醇、乙酸乙酯或二氯甲烷替代。进一步，上述方法中，硅胶活性不低于70%，丙酮、石油醚及乙酸乙酯为分析纯。将所得东莨菪内酯在GF-2M硅胶板上用氯仿-甲醇(体积比为8:2)混合溶剂展开，自然光下不显色；2 nm的紫外光下，&= 0.8左右处呈现单一椭圆形亮蓝色荧光斑点， 该斑点在365 nm的紫外光下又呈现较强的亮蓝色荧光。测得其熔点为204°C左右，核磁共振波普数据与文献一致，确定此物质为东莨菪内酯。本发明的优点是使用已经提取过青蒿素的黄花蒿残渣为原料，可与工业化提取青蒿素的生产线无缝对接，省掉了购买原材料的投入，大大降低了原材料的成本。本方法操作简单，能有效的提取东莨菪内酯，所得提取物中东莨菪内酯纯度高。
具体实施例方式下面将以具体实施例对本发明进行进一步的说明，但本发明不局限于这些实施例的任何一个或类似实例。实施例1
一次性加入900kg黄花蒿残渣于提取罐内，然后向提取罐中加入总量为16000L的丙酮 (分析纯)，分四次加入，每次加入量为4000L，每次在53°C和0. 06MP蒸汽压下回流提取池后，过滤收集提取液，共提取4次，将提取液导入浓缩罐中于60°C条件下真空浓缩(第一、二次的提取液单独浓缩，三、四次的提取液合并浓缩)，回收丙酮溶剂；获得60kg粗提取物，加入60kg 80 120目的硅胶拌样，50°C下减压干燥，将干燥后的硅胶上硅胶柱进行柱层析分离，用石油醚(分析纯)乙酸乙酯(分析纯)体积比6 :1的混合溶剂洗脱，在洗脱过程中不同的成分会依次被洗脱出来，所以采用分段收集洗脱液的方式来进行洗脱，以确保分离效果， 然后依照薄层层析色谱确定目标物在那一段；分段收集洗脱液，所得洗脱液共36000L ；各洗脱液分别回收溶剂，含有目标化合物的洗脱液浓缩至300L后导入结晶罐内静置析晶，随着温度的降低溶剂中析出大量的晶体，抽滤掉结晶罐内的洗脱液，然后用石油醚洗涤，得到东莨菪内酯淡黄色粗结晶1. 25kg。实施例2
一次性加入900kg黄花蒿残渣于提取罐内，然后向提取罐中加入总量为16000L的甲醇 (分析纯)，分四次加入，每次加入量为4000L，每次在53°C和0. 06MP蒸汽压下回流提取池后，过滤收集提取液，共提取4次，将提取液导入浓缩罐中于60°C条件下真空浓缩(第一、二次的提取液单独浓缩，三、四次的提取液合并浓缩)，回收甲醇溶剂；获得60kg粗提取物，加入60kg 80 120目的硅胶拌样，50°C下减压干燥，将干燥后的硅胶上硅胶柱进行柱层析分离，用石油醚(分析纯)乙酸乙酯(分析纯)体积比7 1的混合溶剂洗脱，在洗脱过程中不同的成分会依次被洗脱出来，所以采用分段收集洗脱液的方式来进行洗脱，以确保分离效果， 然后依照薄层层析色谱确定目标物在那一段；分段收集洗脱液，所得洗脱液共41000L;各洗脱液分别回收溶剂，含有目标化合物的洗脱液浓缩至300L后导入结晶罐内静置析晶，随着温度的降低溶剂中析出大量的晶体，抽滤掉结晶罐内的洗脱液，然后用石油醚洗涤，得到东莨菪内酯淡黄色粗结晶1. 23kg。实施例3
与实施例1相同的方法提取东莨菪内酯，不同的是所用的提取溶剂丙酮(分析纯)的量不同，丙酮加入总量为12000L 柱层析时洗脱剂为石油醚(分析纯):乙酸乙酯(分析纯)体积比5 1的混合溶剂。所得东莨菪内酯淡黄色粗结晶为1. 22kg。实施例4
与实施例1相同的方法提取东莨菪内酯，不同的是所用的提取溶剂为乙酸乙酯，柱层析时洗脱剂为石油醚(分析纯)乙酸乙酯(分析纯)体积比5:1的混合溶剂。所得东莨菪内酯淡黄色粗结晶为1. 19kg。实施例5与实例1相同的方法提取东莨菪内酯，不同的是所用的提取溶剂为二氯甲烷，柱层析分离后将得到的含有目标化合物的洗脱液浓缩至200L后导入结晶罐内静置析晶，所得粗结晶颜色较深杂质含量较多，其质量为1. 27kg。
权利要求
1.一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法，其特征在于依次通过以下步骤实现(1)将提取过青蒿素的黄花蒿残渣与丙酮按质量体积比1:4-1 :8kg/ L的比例于提取罐中回流提取4次，丙酮每次加入总量的四分之一，每次在53°C和0. 06MP蒸汽压下回流提取2-池，合并提取液；(2)将上述提取液导入浓缩罐中于60°C条件下真空浓缩至无丙酮味，得到的浸膏与等质量的80 120目的硅胶搅拌均勻，50°C条件下干燥；(3)将上述吸附了提取物的硅胶上硅胶柱，用石油醚乙酸乙酯体积比7:1-5 1的混合溶剂洗脱，分段收集洗脱液；(4)含有目标化合物的洗脱液加热浓缩后导入结晶罐内降温结晶，结晶完成后抽滤掉结晶罐内的洗脱液，然后用石油醚洗涤所得结晶，得东莨菪内酯。
2.根据权利要求1所述的一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法，其特征在于， 步骤(1)中，丙酮可以用甲醇、乙酸乙酯或二氯甲烷替代。
3.根据权利要求1所述的一种从黄花蒿残渣中提取东莨菪内酯的方法，其特征在于， 硅胶活性不低于70%，丙酮、石油醚及乙酸乙酯为分析纯。
全文摘要
本发明提供了一种东莨菪内酯的提取方法，以提取过青蒿素的黄花蒿残渣为原料，利用甲醇、丙酮、乙酸乙酯或二氯甲烷于53℃和0.06MPa蒸汽压下加热回流提取，再经浓缩、柱层析分离、结晶等工艺步骤实现。本发明用黄花蒿残渣为原料，可与工业化提取青蒿素的生产线无缝对接，省掉了购买原材料的投入，大大降低了原材料的成本。本方法操作简单，能有效的提取东莨菪内酯，所得提取物中东莨菪内酯纯度高。
文档编号C07D311/16GK102321060SQ20111031154
公开日2012年1月18日 申请日期2011年10月14日 优先权日2011年10月14日
发明者丁伟, 张永强, 李阳, 杨振国, 秦培元, 罗金香 申请人:西南大学