专利名称：复合药物组合物以及对与呼吸系统疾病或病症相关的疾病或病症进行治疗的方法
技术领域：
一种复合药物组合物，所述复合药物组合物包含(a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、(b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及(C)活性强化形式的抗吗啡抗体；以及对急性和慢性呼吸道紊乱或病症以及咳嗽症状进行治疗的方法。
背景技术：
几个世纪以来，人类呼吸道感染和咳嗽造成了广泛的痛苦。通常认为这些感染由微生物如细菌和病毒引起，所述微生物可通过空气传播或通过直接接触传染。感染早期阶段的特征通常为鼻窦充血，常伴有过多的粘液产生。随后，所述感染可向下扩散至喉咙、支气管和肺。普通感冒(人类最常见的病痛之一，也称为非变应性鼻炎、病毒性上呼吸道感染、病毒性URI)是一种接触传染性传染病,该病长期以来一直都是花费时间和金钱的痛苦根源，也是就医的主要原因。虽然已提出并使用了许多疗法来治疗和/或预防上呼吸道感染及其症状，但是这些疗法的效力和副作用仍有许多待改进之处。抗生素(其由执业医师以令人不安的频率开出)在理论上和实践中都是无效的，因为普通感冒是由病毒而非细菌引起(GonzalesR 等，“Antibiotic prescribing for adults with colds, upper respiratory tractinfections, and bronchitis by ambulatory care physicians，，，JAMA, Sep.17,1997, 278(11)901-4 ；Mainous A.G.等,“Antibiotics and upper respiratory infection:do somefolks think there i s a cure for the common cold ，，，J Fam Pract, 1996 年 4 月，42，357-61)。非处方感冒药总是通过抗组胺之类试剂的作用(抗组胺类药物，例如苯海拉明)、或者通过对自主神经系统的各种作用(如麻黄碱)来局部地抑制症状。咳嗽行为是一种防御反射。然而，持续咳嗽是不正常的，它常常是由于URTI。当咳嗽变得过度和/或严重时，它能显著地影响个人的生活质量。已经证实的是，非处方咳嗽抑制剂(supressants)和祛痰药(expectorants)被证明无效。此外，已经证实的是,这些药物中的许多特别是在儿童中造成了不良副作用。据美国胸内科医师学会称，唯一被证明有利的处方咳嗽药是可待因。然而，据记载，处方可待因衍生产品只在造成副作用(如胃肠便秘、镇静以及呼吸抑制)的剂量下才能抑制咳嗽。发现几乎没有药品用来解决咳嗽。因此，需要有效预防和/或治疗上呼吸道感染(包括普通感冒及其症状)的药剂。本发明涉及此类药剂以及对上呼吸系统疾病或病症及其症状进行预防和/或治疗的方法。本专利申请的发明人Dr.0leg 1.Epshtein已发现了经顺势疗法技术强化的极度稀释形式(或极低形式)抗体(活性强化形式，activated-potentiated form)的治疗效果。美国专利号7，582，294公开了通过给予抗前列腺特异性抗原(PSA)的、顺势疗法活性形式的抗体来治疗良性前列腺增生症(Benign Prostatic Hyperplasia)或前列腺炎(prostatitis)的药剂。激肽为借助于其如下能力参与炎症过程的低分子量肽:激活内皮细胞，并因此引起血管舒张、血管通透性增加、一氧化氮产生以及花生四烯酸的动员。缓激肽最具有这一组血管活性物质的特征。Kaplan AP, Joseph K, Silverberg Μ., Pathways for bradykininformation and inflammatory disease, J Allergy Clin Tmmunol.,2002 Feb 109 (2):195-209。当炎症、创伤、烧伤、休克、变态反应和特定心血管疾病发生时，缓激肽被释放。一旦释放，缓激肽启动或增强来自白细胞的介质的分泌，所述分泌激发感觉传入神经末梢。缓激肽受体在咳嗽的诱发中起重要作用。缓激肽具有血管活性性质，并通过影响上呼吸道的粘膜层来诱发咳嗽。Epstein等，Ultralow doses of antibodiesto inflammatory mediators:Antitussive properties of antibodies tobradykinin, histamine and serotonin, Bulletin of Experimental Biology andMedicine,增刊I, 2003,第146-149页。已知极低剂量的抗缓激肽抗体(Epstein等,2003)。组胺牵涉到很多医学病症，包括炎症、哮喘、变态反应、特应性皮炎以及慢性阻塞性肺病(C0PD)。组胺通过影响特异性的组胺受体来产生作用，所述组胺受体主要有四种类型:H1、H2、H3和H4。特定的医学病症涉及特定的组胺受体亚型。Hl受体拮抗剂(抗组胺剂)广泛用于治疗变态反应，所述变态反应包括变应性鼻炎(花粉症)、荨麻疹、昆虫叮咬和药物超敏反应。常常将H2受体拮抗剂用作胃酸分泌抑制剂。它们在治疗消化性溃疡中用作首选药物、在治疗卓-艾氏综合征(Zollinger-Ellison syndrome)中用作二线药物、以及用于对回流性食管炎进行治疗。H3可能对前庭输入(vestibular inputs)进行调节(Chavez2005)。H4受体可能参与了炎症作用。已证明极低剂量的抗组胺抗体具有抗溃瘍活性，Krylova等,Antiulcer activityof ultralow doses of antibodies to histamine under experimental conditions,BullExp Biol Med 2003 Jan,135 Suppl 7:80_2。吗啡是一种主要用于减轻疼痛的强效麻醉性镇痛药。吗啡还用于心力衰竭性呼吸困难的管理、肺水肿和咳嗽、作为镇静剂、以及用于腹泻控制。吗啡最重要的作用是镇痛、催目民、呼吸抑制、中枢神经系统抑制剂作用、以及作为局部麻醉剂。吗啡通过注射有效地给药，但是在药学和医疗领域中，似乎缺乏药学上可接受的物质手段(material means)用于将吗啡作为镇痛剂、麻醉辅助剂、镇咳药进行口服给予以及用于非特异性止泻治疗。已知极低剂量的抗吗啡抗体。Beregovoi等，Effect of antibodies to morphinein ultralow doses on induction of long-term potentiation in hippocampal slicesfrom rats with chronic morphine dependence,Bull Exp Biol Med.2003 Jan;135 Suppl7:26-8。存在着对用于呼吸系统紊乱和咳嗽的新疗法的持续需要。
图1示出了夜间咳嗽强度的变化，所述夜间咳嗽强度基于咳嗽强度量表进行评价，变化以各组平均分计(％)。图2示出了日间咳嗽强度的变化， 所述日间咳嗽强度基于咳嗽强度量表进行评价，变化以各组平均分计(％)。
发明内容
本发明涉及一种组合物以及对上呼吸道病症或紊乱及其相关症状进行治疗和预防的方法。在一个方面，本发明提供了复合药物组合物，所述复合药物组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。在一个变型中，本发明提供了复合药物组合物，所述复合药物组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体；其中，抗体针对的是整个缓激肽或其片段。在一个变型中，本发明提供了复合药物组合物，所述复合药物组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体；其中，抗体针对的是整个组胺或其片段。在一个变型中，本发明这一方面的复合药物组合物包含活性强化形式的抗缓激肽抗体，所述抗体处于浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液(homeopathic dilutions)的混合物形式。所述活性强化形式的抗组胺抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。所述活性强化形式的抗吗啡抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200 )顺势疗法稀释液的混合物形式。在一个变型中，本发明这一方面的复合药物组合物包含活性强化形式的抗组胺抗体，所述抗体处于浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。所述活性强化形式的抗缓激肽抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12.C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。所述活性强化形式的抗吗啡抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。在一个变型中，本发明这一方面的复合药物组合物包含活性强化形式的抗吗啡抗体，所述抗体处于浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。所述活性强化形式的抗缓激肽抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12.C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。所述活性强化形式的抗组胺抗体处于可随后浸溃至固态载体上的(C12、C30和C50)或(C12、C30和C200)顺势疗法稀释液的混合物形式。活性强化形式的抗缓激肽抗体优选为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体，更优选为多克隆抗体。在本发明这一方面的一个变型中，所述活性强化形式的抗缓激肽抗体通过连续的百倍稀释(successive centesimal dilution)、且每次稀释时均伴以振荡而制备。活性强化形式的抗组胺抗体优选为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体，更优选为多克隆抗体。在本发明这一方面的一个变型中，所述活性强化形式的抗组胺抗体通过连续的百倍稀释、且每次稀释时均伴以振荡而制备。活性强化形式的抗吗啡抗体优选为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体，更优选为多克隆抗体。在本发明这一方面的一个变型中，所述活性强化形式的抗吗啡抗体通过连续的百倍稀释、且每次稀释时均伴以振荡而制备。在另一方面，本发明提供了对呼吸系统疾病或病症进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的患者给予:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。优选地，以复合的药物组合物形式给予活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体、以及活性强化形式的抗吗啡抗体。在另一方面，本发明提供了通过给予复合药物组合物对患有呼吸道紊乱或病症的患者进行治疗的方法，其中，所述组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。在一个变型中，所述呼吸道紊乱或病症为病毒性呼吸道感染。在另一变型中，所述呼吸道紊乱或病症为急性上呼吸道紊乱。在另一变型中，所述呼吸道紊乱或病症为慢性上呼吸道紊乱。在另一方面，本发明提供了通过给予复合药物组合物对患有上呼吸道紊乱或病症的症状的患者进行治疗的方法，其中，所述组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。在一个变型中，所述呼吸道紊乱或病症的症状为咳嗽。在本发明的一个变型中，提供了以每日1-4次给予如下各剂型:1-2单位剂型的活性强化形式的抗缓激肽抗体、1-2单位剂型的活性强化形式的抗组胺抗体以及1-2单位剂型的活性强化形式的抗吗啡抗体。所述1-2单位剂型的各活性强化形式抗体优选以每日2次进行给予。在本发明这一方面的优选 变型中，提供了以复合组合物的1-2单位剂型、各剂型以每日1-4次进行给予，所述复合组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。优选1-2单位剂型以每日2次进行给予。在本发明这一方面的另一优选的变型中，所述复合物以I单位剂型、优选以每日2次进行给予，所述剂型包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。
具体实施例方式参考所附的权利要求书对本发明进行限定。考虑到权利要求书，下述术语汇编提供了有关定义。本文所使用的术语“抗体”意味着特异性地结合至另一分子的特定空间和极性结构、并因此被定义为与另一分子的特定空间和极性结构互补的免疫球蛋白。权利要求书中所列举的抗体可包括完整的免疫球蛋白或其片段，可为天然抗体、多克隆抗体或单克隆抗体，并可包括多个类及同种型，例如IgA, IgD, IgE, IgGU IgG2a、IgG2b和IgG3、IgM等。免疫球蛋白的片段可包括Fab、Fv和F(ab’)2以及Fab’等。单数“抗体(antibody)”包括复数“抗体(antibodies)”。相对于本文所列举的抗体，术语“活性强化形式”或“强化形式”分别用于表示任意的抗体初始溶液的顺势疗法强化产物。“顺势疗法强化”表示利用顺势疗法的方法对有关物质的初始溶液赋予顺势疗法效力(potency)。尽管不限于此，但是“顺势疗法强化”可包括例如结合外部处理、尤其是(机械)振荡的重复的连续稀释。换句话说，根据顺势疗法技术，对抗体的初始溶液进行连续的重复稀释并对每次获得的溶液进行多次竖直振荡。抗体处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的初始溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/mlo制备各组分(即抗体溶液)的优选过程为:使用抗体初级基质溶液(primary matrixsolution)(原始ET剂,mother tincture)分别被稀释 10012、1003° 和 1002°° 倍的 3 种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液(C12、C30和C200);或者使用抗体初级基质溶液分别被稀释10012、1003°和1005°倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液(C12、C30和C50)。在美国专利号7，572，441和7，582，294中描述了顺势疗法强化的实例，以引用的方式将其内容整体并入本文并用于所述目的。同时，术语“活性强化形式”用在权利要求书中，术语“极低剂量”用在实施例中。术语“极低剂量”在通过研究和使用顺势疗法稀释和强化形式的物质而产生的领域中成为行业术语。术语“极低剂量”意味着完全支持并与权利要求书中所使用的术语“活性强化”形式基本上同义。换句话说，当存在三个因素时，抗体处于“活性强化”或“强化”形式。首先，“活性强化”形式的抗体为顺势疗法领域广泛接受的制备方法的产品。其次，“活性强化”形式的抗体必须具备通过现代药物学广泛接受的方法确定的生物活性。第三，“活性强化”形式的抗体所表现出的生物活性不能由顺势疗法方法终产物中的分子形式抗体的存在加以解释。例如，活性强化形式的抗体可通过使处于分子形式的初始独立抗体经受伴以外部作用(如机械振荡)的连续多重稀释而制备。浓度降低过程中的外部处理还可通过例如暴露至超声、电磁或其它物理因素来完成。V.Schwabe, “Homeopathic medicines”, M., 1967,美国专利号7，229，648和4，311，897 (以引用的方式将其内容整体并入本文并用于所述目的)描述了顺势疗法领域中广泛接受的顺势疗法强化方法。这一过程使得初始分子形式抗体的分子浓度均匀降低。重复这一过程直至获得期望的顺势疗法效力。对于单独的抗体，可通过将中间稀释液在期望的药理学模型中进行生物测试来确定所需的顺势疗法效力。尽管不限于此，但是“顺势疗法强化”可包括例如与外部处理、尤其是竖直(机械)振荡相结合的重复的连续稀释。换句话说，根据顺势疗法技术，对抗体的初始溶液进行连续的重复稀释并对每次获得的溶液 进行多次竖直振荡。抗体处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的初始溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml。制备各组分(即抗体溶液)的优选过程为:使用抗体初级基质溶液(原始酊剂)分别被稀释10012、1003°和1002°°倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200 ;或者使用抗体初级基质溶液分别被稀释10012、IOO30和1005°倍的3种水稀释液或水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C50。例如在美国专利号7，229，648和4，311，897中，也提供了如何获得期望效力的实例，以引用方式将其并入本文用于所述目的。在下文将更加详细地描述适用于本文所述的“活性强化”形式抗体的过程。关于用顺势疗法对人类受试者进行治疗已有许多争议。虽然本发明依靠已接受的顺势疗法方法来获得“活性强化”形式的抗体，但是其并不仅仅依赖于在人类受试者中进行顺势疗法来证明其活性。本申请的发明人出乎预料地发现、并在已接受的药理学模型中充分证明，由起始分子形式的抗体进行连续多次稀释而最终得到的溶剂具有明确的活性，且与痕量分子形式抗体在目标稀释液中的存在无关。将本文所提供的“活性强化”形式的抗体在广泛接受的药理学活性模型中(在适当的体外实验中或于合适的动物模型中在体内)测试其生物活性。下文进一步提供的实验提供了在此类模型中的生物活性的证据。人类临床研究也提供了如下证据:在动物模型中观察到的活性被很好地转换至人类治疗。人类研究还提供了如下证据:本文所述的“活性强化”形式可用于对在医学科学中作为病理症状而广泛接受的具体人类疾病或紊乱进行治疗。同样，所要求保护的“活性强化”形式的抗体仅涵盖溶液或固体制剂，所述溶液或固体制剂的生物活性不能由初始、起始溶液中余留的分子形式抗体的存在进行解释。换句话说，虽然“活性强化”形式的抗体可包含痕量的初始分子形式抗体也在考虑之列，但是由于连续稀释后余留的分子形式抗体的浓度极低，因此本领域技术人员不能以任何程度的合理性将在已接受的药理学模型中观察到的生物活性归因于余留的分子形式抗体。虽然本发明并不受任何具体理论的限制，但是本发明的“活性强化”形式抗体的生物活性并不归因于初始分子形式的抗体。优选“活性强化”形式的抗体处于液体形式或固体形式，其中，初始分子形式抗体的浓度低于所接受的分析技术(如毛细管电泳和高效液相色谱)的检测限。特别优选“活性强化”形式的抗体处于液体形式或固体形式，其中，初始分子形式抗体的浓度低于阿伏伽德罗常数。在分子形式治疗物质的药物学中，通常制作剂量-响应曲线，在该曲线中，以药理学响应水平对给予受试者或在体外进行测试的活性药物的浓度作图。产生任何可检测响应的药物最低水平被称为阈剂量(threshold dose)。特别在考虑之列并优选的是，“活性强化”形式的抗体以低于所给定生物学模型中的分子形式抗体的阈剂量的浓度包含分子抗体(如果有的话)。术语“咳嗽强度量表”是指由患者对日间和夜间咳嗽严重程度进行主观评价的问卷，其由下列以0-5分进行评定的问题组成:曰间O分-不咳嗽I分-一次短期咳嗽
2分-多于两次短期咳嗽3分-不干扰惯常活动的频繁咳嗽4分-干扰惯常活动的频繁咳嗽5分-一天中多数时间困扰于咳嗽夜间O分-不咳嗽I分-只在醒来时咳嗽/只在即将入睡时咳嗽2分-由于咳嗽而醒来一次或较早醒来3分-由于咳嗽而频繁醒来4分-一晚多数时间频繁咳嗽5分-困扰于咳嗽本发明提供了复合药物组合物，所述复合药物组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。如上文所述，所述复合物的各单独组分由于其各自单独的医药用途而为大家所熟知。然而，本专利申请的发明人出乎意料地发现，给予所述复合物显著地减轻了咳嗽症状，并有助于对上呼吸道紊乱或病症进行治疗。根据本发明这一方面的复合药物组合物可处于液态或固态形式。药物组合物中所含的各活性强化形式抗体由初始分子形式的抗体通过顺势疗法领域所接受的方法制备。起始抗体可为根据已知方法制备的单克隆抗体或多克隆抗体，所述已知方法例如 Immunotechniques, G.Frimel, M., “Meditsyna”，1987,第 9-33 页;“Hum.Antibodies.Monoclonal and recombinant antibodies, 30years after，，，Laffly E., Sodoyer R.著，2005，Vol.14.，N 1-2.，第33-55页中所述，以引用的方式将其内容并入本文。单克隆抗体可通过如杂交瘤技术获得。所述方法的初始步骤包括基于已在多克隆抗血清制备过程中开发出的原则进行免疫。工作的进一步步骤包括制备出产生具有相同特异性的抗体克隆的杂交细胞。其各自的分离使用与多克隆抗血清制备的情况中相同的方法进行。多克隆抗体可通过动物的主动免疫获得。为了这一目的，例如使合适的动物(如兔)接受适当抗原(缓激肽、组胺或吗啡)的一系列注射。动物的免疫系统产生相应的抗体，以已知方法从动物中进行收集。这一过程使得能够制备富含单特异性抗体的血清。如果需要的话，包含抗体的血清例如可通过使用亲和色谱、盐沉淀分级分离或离子交换色谱进行纯化。可将所得到的经纯化的、富含抗体的血清用作制备活性强化形式抗体的起始材料。所得到的处于溶剂(优选水或水-乙醇混合物)中的初始抗体溶液的优选浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml。制备本发明所述复合药物的各组分的优选过程为:使用抗体初级基质溶液分别被稀释10012、IOO30和1005°倍的3种水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C50 ;或者使用抗体初级基质溶液分别被稀释10012、1003°和1002°°倍的3种水-醇稀释液的混合物，相当于百倍顺势疗法稀释液C12、C30和C200。为制备固体剂型，将固态载体通过顺势疗法方法所获得的期望稀释 液进行处理。为获得本发明复合物的固体单位剂型，用各稀释液对载体物质进行浸溃。为制备期望的复合剂型，两种浸溃顺序都是适合的。在优选的实施方式中，用于包含本发明所述药物组合物的活性强化形式制剂的起始材料是针对相应抗原(即，缓激肽、组胺或吗啡)的动物产多克隆抗体。为获得活性强化形式的抗缓激肽多克隆抗体，可将期望的抗原作为免疫原注射入实验动物、优选兔中。特别在考虑之列的是，将以下序列的缓激肽作为合适的抗原:SEQ.1D.N0.1Arg Pro Pro Gly Phe Ser Pro Phe ArgI59制备起始抗缓激肽多克隆抗体的示例性过程可描述如下。在采血前7-9天，将期望抗原经1-3次静脉注射至兔，以增高兔血流中的多克隆抗体水平。一旦免疫后，采集血样以测试抗体水平。通常，可溶性抗原免疫反应在抗原第一次注射后40-60天内达到最高水平。第一个免疫周期结束后，兔具有30天的康复期，之后经另外的1-3次静脉注射进行再免疫。为获得包含期望抗体的抗血清,从兔中收集免疫后的兔血液并置于50ml离心管中。用木质药匙将管壁上所形成的产物凝块移除，将棒置于管中心的凝块中。然后将血液放置于冷却器中于约40°C的温度下过夜。第二天，将药匙上的凝块移除，将剩余液体在13000转/分下离心lOmin。上清液体为目标抗血清。所获得的抗血清通常为黄色。向抗血清中加入20wt%的NaN3至最终浓度为0.02%并在_20°C的温度下于冷冻状态贮存至使用，或者不加入NaN3而在-70°C的温度下贮存至使用。为了从抗血清中分离目标抗缓激肽抗体，下述固相吸附顺序很适合:将IOml兔抗血清用0.15M的NaCl稀释2倍，之后加入6.26g Na2SO4,混合并在4°C下孵育12-16小时。将沉淀物经离心移除，在IOml磷酸盐缓冲液中稀释并使用相同的缓冲液在环境温度下透析过夜。移除沉淀物后，将溶液加样至用磷酸盐缓冲液平衡后的DEAE-纤维素柱。通过在280nm处对洗脱液的光密度进行测量来确定抗体馏分。使用亲和色谱法，通过将所获得的抗缓激肽抗体加至色谱介质的不溶性基质上、并随后用浓的盐溶液洗脱，对所分离出的粗抗体进行纯化。将所得到的缓冲溶液用作顺势疗法稀释方法的起始溶液，所述顺势疗法稀释方法用来制备活性强化形式的抗体。抗原纯化的抗缓激肽多克隆兔抗体的初始基质溶液的优选浓度为 0.5-5.0mg/ml,优选 2.0-3.0mg/ml。可使用类似于上述用于缓激肽的方法学，并将与KLH缀合的吗啡半琥珀酸盐/酯用作免疫原来获得抗吗啡多克隆抗体。可使用上述方法学、并使用佐剂和商业上制造的组胺二盐酸盐，来获得抗组胺(其为生物胺，化学式为C5H9N3的4-(2-氨基乙基)-咪唑或β -咪唑基乙胺)多克隆抗体。活性强化形式的复合物各组分可由初始溶液经顺势疗法强化来制备，优选使用通过连续稀释来成比例降低浓度的如下方法:将I份的各在先溶液(preceding solution)(由初始溶液开始)连续稀释于9份(十倍稀释)、或连续稀释于99份(百倍稀释)、或连续稀释于999份(千倍稀释)的中性溶剂中，用浓度范围为约0.5mg/ml至约5.0mg/ml的处于溶齐U(优选水或水-乙醇混合物)中的初始抗体溶液伴以外部作用来起始。所述外部作用优选包括每次稀释时的多次竖直振 荡(稀释增效法，dynamization)。优选将单独的容器用于后续各次稀释直至所需效力水平或稀释系数。这一方法在顺势疗法领域中被广泛接受。参见例如 V.Schwabe,“Homeopathic medicines，，,Μ.,1967,第 14-29 页，以引用的方式将其并入本文用于所述目的。例如，为了制备第12百倍稀释液(表示为C12)，将I份浓度为3.0mg/ml的抗缓激肽抗体的初始基质溶液稀释于99份中性水溶剂或水-醇溶剂(优选15%乙醇)中，并随后进行多次(10次以上)竖直振荡以制成第I百倍稀释液(表示为Cl)。第2百倍稀释液(C2)由第I百倍稀释液Cl制备。将这一过程重复11次，从而制得第12百倍稀释液C12。因此，第12百倍稀释液C12表示通过将I份浓度为3.0mg/ml的抗缓激肽抗体的初始基质溶液在处于不同容器内的99份中性溶剂中连续稀释12次所获得的溶液，相当于百倍顺势疗法稀释液C12。以相应的稀释系数进行类似过程，获得C30、C50和C200稀释液。可将中间稀释液在期望的生物模型中进行测试以检测活性。用于本发明复合物中的优选的两种活性强化形式抗体为C12、C30和C50稀释液的混合物或C12、C30和C200稀释液的混合物。当将活性物质的多种顺势疗法稀释液(主要为百倍稀释液)的混合物用作生物活性液体组分时，组合物的各组分(如，C12、C30、C50、C200)分别根据上述过程制备，直至获得倒数第二份稀释液(例如，分别直至C11、C29和C199)，然后根据混合物组成将I份的各组分加入一个容器中，并与所需量的溶剂(如，用97份以进行百倍稀释)进行混合。
可将活性物质作为多种顺势疗法稀释液、例如十倍和/或百倍稀释液(D20、C30、ClOO或C12、C30、C50或C12、C30、C200等)的混合物来使用，其效力通过在合适的生物模型、例如本文实施例所述的模型中对稀释液进行测试，从而以实验的方式确定。在强化和浓度降低的过程中，可将竖直振荡替代为外部暴露至超声、电磁场、或顺势疗法领域中接受的任何类似的外部作用过程。本发明的药物组合物优选可处于液体或固体单位剂型的形式。药物组合物优选的液体形式为混合物，优选活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体以及活性强化形式的抗吗啡抗体处于1:1:1比例的混合物。优选的液态载体为水或水-乙醇混合物。优选处于固体单位剂型的药物组合物由药学上可接受的载体的颗粒制备，所述颗粒预先用活性强化形式抗体的水稀释液或水-醇稀释液饱和。固体剂型可为药学领域中已知的任何剂型，包括片剂、胶囊、锭剂及其它。作为非活性药物成分，可使用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉、异麦芽糖、异麦芽酮糖醇及制药中使用的其它单糖、寡糖和多糖，还可使用上述非活性药物成分与其它药学上可接受的赋形剂的工艺混合物，所述赋形剂如异麦芽酮糖醇、交联聚维酮、甜蜜素(sodium cyclamate)、糖精钠、无水柠檬酸等，包括润滑剂、崩解剂、粘结剂和着色剂。优选的载体为乳糖和异麦芽酮糖醇。药物剂型可进一步包含标准药物赋形剂，例如微晶纤维素、硬脂酸镁和柠檬酸。优选处于固体单位剂型的药物组合物由药学上可接受的载体的颗粒制备，所述颗粒预先用如下抗体的水稀释液或水-醇稀释液饱和:活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体以及活性强化形式的抗吗啡抗体。优选的载体为异麦芽酮糖醇。药物剂型可进一步包含标准药物赋形剂，例如微晶纤维素、硬脂酸镁和交联聚维酮。制备固体单位剂型的实施例如下所述。为制备固体口服剂型，将异麦芽酮糖醇的颗粒用活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体以及活性强化形式的抗吗啡抗体的水溶液或水-醇溶液、以Ikg抗体溶液对5kg或IOkg载体(1:5至1:10)的比例进行浸溃。为有效浸溃，使异麦芽酮糖醇颗粒在沸腾床设备(如，fflittlin GmbH的“ Hiitt I in Pilotlab”)中的流化床中接受饱和灌洗(saturation irrigation),随后经由加热的空气流在低于40°C的温度下进行干燥。将用活性强化形式抗体饱和的估计量的干燥颗粒(9.5-98重量份)置于混合器内，并与2-88重量份的“非饱和”纯异麦芽酮糖醇(用于在不降低治疗功效的情况下，降低成本、简化和加速工艺方法的目的)、0.5-0.7重量份的甜蜜素(sodium cyclamate),0.1-1.5重量份的硬脂酸镁、0.05-0.07重量份的精糖钠和1-1.5重量份的柠檬酸进行混合。将所获得的片状物质进行均匀混合，并通过直接干压成型(如，在Korsch-XL 400压片机中)进行压片，从而形成150-500mg、优选250mg的圆丸。压片后，获得250mg的丸剂，所述丸剂用活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体和活性强化形式的抗吗啡抗体的复合物的水-醇溶液饱和(3.0-6.0mg/丸)。用于浸溃载体的复合物各组分均处于C12、C30和C50百倍顺势疗法稀释液的混合物的形式、或C12、C30和C200百倍顺势疗法稀释液的混合物的形式。在另一变型中，为制备固体口服剂型，将乳糖的100-300 Pm颗粒用活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体以及活性强化形式的抗吗啡抗体的水溶液或水-醇溶液、以Ikg抗 体溶液对5kg或IOkg乳糖(1:5至1:10)的比例进行浸溃。为有效浸溃，使乳糖颗粒在沸腾床设备(如，HUttlin GmbH的“Hiittlin PilotlabO中的流化床中接受饱和灌洗，随后经由加热的空气流在低于40°C的温度下进行干燥。将用活性强化形式抗体饱和的估计量的干燥颗粒(10-34重量份)置于混合器内，并与25-45重量份的“非饱和”纯乳糖(用于在不降低治疗功效的情况下，降低成本、简化和加速工艺方法的目的)、以及0.1-1重量份的硬脂酸镁和3-10重量份的微晶纤维素一起进行混合。将所获得的片状物质进行均匀混合，并通过直接干压成型(如，在Korsch-XL 400压片机中)进行压片，从而形成150-500mg、优选300mg的圆丸。压片后，获得300mg的丸剂，所述丸剂用活性强化形式的抗缓激肽抗体、活性强化形式的抗组胺抗体以及活性强化形式的抗吗啡抗体的复合物的水-醇溶液饱和(3.0-6.0mg/丸)。用于浸溃载体的复合物各组分均处于C12、C30和C50百倍顺势疗法稀释液的混合物的形式，或C12、C30和C200百倍顺势疗法稀释液的混合物的形式。尽管本发明并不受任何具体理论限制，但是认为，本文所述的活性强化形式抗体并不包含足够具有归因于此类分子形式的生物活性的量的分子形式抗体。本发明复合药物(复合药物组合物)的生物活性在所附的实施例中得以充分说明。在一个实施方式中，本发明提供了通过给予复合药物组合物对患有呼吸道紊乱或病症的患者进行治疗的方法，其中，所述组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。在优选的实施方式中，所述呼吸道紊乱或病症为病毒性呼吸道感染。在另一优选的实施方式中，所述呼吸道紊乱或病症为急性上呼吸道紊乱。在优选的实施方式中，所述呼吸道紊乱或病症为慢性上呼吸道紊乱。在另一实施方式中，本发明提供了通过给予复合药物组合物对患有上呼吸道紊乱或病症的症状的患者进行治疗的方法，其中，所述组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的 抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。在优选的实施方式中，所述呼吸道紊乱或病症的症状为咳嗽。为了治疗目的，本发明复合物优选每日给药1-4次，优选每日给药2次，每次给药包括1-2单位复合剂型。参考所附的非限制性实施例对本发明进行进一步的说明。实施例实施例1将30只重350_400g的雄性豚鼠用于实验。通过使用雾化器在5分钟内吸入30 μ M的辣椒素来诱发咳嗽。在15分钟内对咳嗽发作次数进行计数。诱发两次咳嗽:一次在给予药物前(基线)，第二次在给药后。向对照组给予蒸馏水(120yL/豚鼠)。向第二组给予极低剂量的抗吗啡抗体(40 μ L/豚鼠)。向第三组给予极低剂量的抗缓激肽抗体(ULDB)、极低剂量的抗组胺肽抗体(ULDH)以及极低剂量的抗吗啡抗体(ULDM)的复合物(120 μ L/豚鼠)。以120分钟的间隔经口(口服滴剂)给药3次，最后一次是在辣椒素诱发咳嗽前15分钟。该研究表明，复方复合药物ULDB+ULDH+ULDM比起单独的ULDM表现出更显著的镇咳作用。所述药物分别使咳嗽抑制了 55.2%和21.5% (ρ〈0.05)(参见表I)。表1:研究药物对咳嗽发作次数的作用，M±m
权利要求
1.一种复合药物组合物，所述复合药物组合物包含:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。
2.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗缓激肽抗体具有 SEQ ID NO:1。
3.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗缓激肽抗体处于浸溃至固态载体上的C12、C30及C50顺势疗法稀释液的混合物形式，并且所述活性强化形式的抗组胺抗体和所述活性强化形式的抗吗啡抗体处于浸溃至所述固态载体上的C12、C30及C50顺势疗法稀释液的混合物形式。
4.如权利要求3所述的复合药物组合物，其中，所述载体用所述稀释液的混合物进行浸溃。
5.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗缓激肽抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体。
6.如权利要求5所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗缓激肽抗体为多克隆抗体。
7.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗组胺抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体。
8.如权利要求7所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗组胺抗体为多克隆抗体。
9.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗吗啡抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或天然抗体。
10.如权利要求9所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式的抗吗啡抗体为多克隆抗体。
11.如权利要求1所述的复合药物组合物，其中，所述活性强化形式抗体通过连续的百倍稀释、且每次稀释时均伴以振荡而制备。
12.—种对呼吸系统疾病或病症进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的患者基本上同时给予:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体。
13.如权利要求12所述的方法，其中，所述活性强化形式的抗体以复合药物组合物的形式进行给予。
14.如权利要求13所述的方法，其中，所述呼吸系统疾病或病症为急性疾病或病症。
15.如权利要求13所述的方法，其中，所述呼吸系统疾病或病症为慢性疾病或病症。
16.如权利要求13所述的方法，其中，所述呼吸系统疾病或病症为呼吸系统感染。
17.如权利要求16所述的方法，其中，所述呼吸系统感染为病毒性呼吸系统感染。
18.如权利要求13所述的方法，其中，所述复合药物组合物以1-2单位剂型进行给予，各剂型每天给予1-4次。
19.如权利要求13所述的方法，其中，所述复合药物组合物以1-2单位剂型进行给予，各剂型每天给予2次。
20.一种对患有上呼吸道紊乱或病症的症状的患者进行治疗的方法，所述方法包括向有需要的患者给予包含如下物质的复合药物组合物:a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及C)活性强化形式的抗吗啡抗体。
21.如权利要求20所述的方法，其中，所述呼吸道紊乱或病症的症状为咳嗽。
22.如权利要求21所述的方法，其中，通过咳嗽强度量表进行测量，咳嗽减轻。
23.如权利要求21所述的方法，其中，所述复合药物组合物以1-2单位剂型进行给予，各剂型每天给予1-4次。
24.如权利要求21所述的方法，其中，所述复合药物组合物以1-2单位剂型进行给予，各剂型每天给予2次。
25.一种用于对患有呼吸系统疾病或病症的患者进行治疗的药物组合物，所述组合物通过如下步骤获得:提供a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体，各抗体根据顺势疗法技术通过对每次获得的溶液进行连续重复稀释和多次振荡而制备；然后通过混合将强化后的溶液进行复合，或者用所述复合后的溶液或用各 强化后的溶液单独浸溃载体物质。
全文摘要
本发明涉及复合药物组合物，所述复合药物组合物包含a)活性强化形式的抗缓激肽抗体、b)活性强化形式的抗组胺抗体、以及c)活性强化形式的抗吗啡抗体；还涉及通过给予所述复合组合物对上呼吸道病症或紊乱及其相关症状进行治疗和预防的方法。
文档编号C07K16/44GK103200964SQ201180045571
公开日2013年7月10日 申请日期2011年7月15日 优先权日2010年7月21日
发明者奥列格·伊里奇·爱泼斯坦 申请人:奥列格·伊里奇·爱泼斯坦