作为wnt信号通路抑制剂的三唑衍生物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及式I的化合物、它们的制备方法、含这样的化合物的药物制剂以及它们在治疗上的用途。这样的化合物在治疗和/或预防受Wnt通路中信号转导的过度活化及核β-连环蛋白的含量增加影响的病症或疾病中具有特别的用途。例如，这些化合物可用于预防和/或延缓肿瘤细胞的增殖及转移，例如癌如结肠癌。
【专利说明】作为WNT信号通路抑制剂的三唑衍生物
【技术领域】
[0001]本发明涉及化合物，含有这样的化合物的药物制剂及其在治疗中的用途，特别是作为减少肿瘤细胞增殖和转移的Wnt通路抑制剂的用途。本发明还涉及这样的化合物的制备方法和在这些制备方法中形成的中间体。
【背景技术】
[0002]糖蛋白的Wnt家族控制着多种发育过程，包括细胞命运特化、增殖、极性和迁移。因此，fct通路在确保合适的胚胎组织发育和成人组织维持中起作用。在Wnt信号转导过程中至少涉及三种信号转导通路。经典(或β_连环蛋白依赖性)fct通路最先发现且研究的最多。在缺乏fct信号时，转录激活因子β_连环蛋白是一种磷酸化的细胞内多蛋白质复合体，其接着被降解。在这种复合体中，AXIN和腺瘤性结肠息肉病(APC)蛋白形成构架，其通过酪蛋白-激酶la (CKla )和糖原合成酶激酶3 β (GSK-3 β )促进β -连环蛋白磷酸化。磷酸化的β -连环蛋白而后被泛素化(ubiquitinylated),导致其蛋白酶体降解。当Wnt信号转导为非活性的，且因此游离β -连环蛋白水平低，使得DNA结合的T细胞因子/淋巴增强因子(TCF/LEF)蛋白与转录阻抑物相互作用，以阻断核内的Wnt靶基因表达。Wnt分子与FZD-LRP受体复合物在膜上的结合引起β -连环蛋白破坏复合物(destructioncomplex)失活的级联事件。这使得β _连环蛋白累积并进入细胞核，其在细胞核内与Tcf/Lef家族的膜相互作用,通过补充(recruiting)辅激活因子蛋白将Tcf蛋白转化为蛋白转录激活因子，以确保fct靶基因的有效活化。
[0003]经典Wnt信号转导在多种肿瘤中被过度活化，在细胞生长和肿瘤进程中扮演了核心角色(Barker等人，Nat.Rev.Drug.Discov.(〈〈自然评论:药物发现》)3:997-1014、2006; Grigoryan 等人，Genes Dev.(《基因与发育》)22:2308-2341, 2008;和 Shitashige 等人，Cancer Sc1.(《癌症科学》)99:631637，2008)。大约90%的散发性结肠癌显示了异常的Wnt信号转导(Liu等人，Nat.Genet.(《自然.遗传学》)26:146-147，2000;和Morin等人，Science (《科学》)275:1787-1790，1997)，而全部的胰腺癌均显示了 Wnt/Notch信号转导的改变(Jones 等人，Science (《科学》)321:1801-1806，2008)。
[0004]Wnt活化突变存在于多种癌症中，包括胃癌、肝细胞癌、肾的肾母细胞瘤、成神经管细胞瘤、黑素瘤、非小细胞肺癌、卵巢子宫内膜癌、甲状腺未分化癌、胰腺癌和前列腺癌(Barker等人，同上)。腺瘤样息肉基因(APC)、β -连环蛋白或Axin基因的突变导致核β_连环蛋白的累积，这样的突变往往与结肠癌相关(Morin等人，同上)。此外，使Wnt信号转导沉默的胞外蛋白质的改变，也可以导致异常的通路活性(Polakis, Curro Opin.Genet.Dev.(《遗传与发育新见》)11:45-51，2007)，所述蛋白质包括分泌性卷曲相关蛋白(SERPs)(Suzuki 等人,Nat.Genet (〈〈自然?遗传学》)36:417-422, 2004), Dickkopf (Dkk) (Aguilera等人，Oncogene(《癌基因》)翌:4116-4121，2006)和Wnt抑制因子(WIF)家族成员(Mazieres等人，Cancer Res.(《癌症研究》)Μ: 4717-4720，2004)。
[0005]在结肠直肠及其他Wnt失控的癌症中，阻断经典Wnt活性显示引发细胞周期在Gl停滞,而这是抑制肿瘤细胞生长的关键步骤(van de Wetering等人，Cell (《细胞》)111:241-250.2002;和 Sukhdeo 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA (《美国科学院自然科学进展》)1M:7516-7521，2007)。近年来，若干类小分子已证明具有Wnt抑制剂的作用。这些药物在Wnt信号转导通路的不同水平上发挥各自的抑制作用。干扰细胞核TCF/ β -连环蛋白的结合和环AMP反应单元结合蛋白(CBP)的小分子，已被鉴定和描述(Emami等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA (《美国科学院自然科学进展》)101:12682-12687，2004;和Lepourcelet M 等人，Cancer Cell (《癌细胞》)91-102, 2004)。已提出 Topo II α 和PARP-l(Shitashige 等人，Cancer Sc1.(《癌症科学》)盟:631-637，2008)或 TBP、BRG1、BCL9、pygopus和Hyrax(Barker等人，同上)为用于抑制经典Wnt信号转导的潜在祀点。近来，已确定两组化学物质(IWR-1和XAV939)稳定所述破坏复合物(Chen等人，Nat.Chem.Biol.5:100-107，2009;和 Huang 等人，Nature:461:614-620.2009)。通过阻断端锚聚合酶(Tankyrase)的PAPR域，XAV939和IWR-1被认为改变AXIN2的PAR化和泛素化，这导致稳定性增加和抑制经典的fct信号转导。由于β_连环蛋白在细胞核中水平升高是经典Wnt信号转导异常的普遍特征，因此通过减少β -连环蛋白的存在来下调经典fct活性代表了有效的治疗策略。
[0006]现在我们已发现了一类筛选出的化合物，其显示了阻断经典Wnt信号转导的活性，特别是能够降低细胞核连环蛋白的水平。从这些化合物能够影响APC和GSK-3 3的下游的活化β -连环蛋白稳定性的程度来看，与已知的在经典fct信号转导通路中作用于更上游的其他化合物相比，这些化合物具有更广阔的前景。这些化合物通常适用于抑制肿瘤细胞的增殖，特别是与结肠直肠癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌和胰腺癌相关的肿瘤细胞。
【发明内容】
[0007]本发明提供了通式I的化合物、其异构体(例如立体异构体)、可药用的盐和前药:
[0008]
【权利要求】
1.通式I的化合物、或其异构体(如:立体异构体)、可药用的盐或前药:
2.根据权利要求1所述的化合物，其异构体(如:立体异构体)、可药用的盐或前药，所述化合物具有通式II:
3.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物，其特征在于，在式I或II中，L1为任选地被一个或多个(例如I或2)Rd基团取代的Cy亚烷基基团(优选为Q_2亚烷基)，其中一个或多个(优选一个或两个)亚甲基基团各自被-CRe=CRf-,或被基团-C = C-所替代； 其中每个Rd可以为相同的或不同的，且可以选自C^6烷基(优选为Cm烷基)、羟基、CV6烷氧基(例如CV3烷氧基)和卤素(即:F、Cl、Br和I，优选为F);和其中Re和Rf独立地选自H、C1^3烷基、卤素(例如F或Cl)及-CN。
4.根据权利要求1或2所述的化合物、或其异构体(如:立体异构体)、可药用盐或前药，其中在式I或式II中: Z1代表含有两个或三个选自N、O和S的杂原子的五元杂环； Z2代表任选地被一个或多个(例如1、2、3或4个)Ra基团取代的苯基、吡啶基、嘧啶基或噁二唑基； 其中各Ra可相同或不同，且可选自卤素(即KCUBinDXh烷基(优选为Cm烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 卤代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (O) R、-C (O) OR、-OC (O)R、-OC (O) NR2, -NR2, -NR-C (O) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R、-S (0) OR 或-S (0) 2NR2 基团(其中每个R独立地为H、C1^6烷基、CV6卤代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基)； R1代表任选地被一个或多个(例如1、2、3或4个)Rb基团取代的芳基或杂芳基；其中各Rb可相同或不同，且可选自卤素(即KCUBinDXh烷基(优选为Cm烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 卤代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (0) R、-C (0) OR、-OC (0)R、-OC (0) NR2、-NR2、-N R-C (0) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R 或-S (0) OR 基团(其中每个 R独立地为H、CV6烷基、Cu卤代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基)； R2代表任选地被一个或多个(例如1、2、3或4个)R。基团取代的芳基； 其中每个R。可相同或不同，且可选自卤素(即:F、Cl、Br、I)、Cp6烷基(优选为CV3 烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 卤代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (0)R、-C (0) OR、-OC (0) R、-OC (0) NR2、-NR2、-NR-C (0) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R、-S (0) OR或-S(O)2NR2基团(其中每个R独立地为HXp6烷基、Cp6卤代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基); L1代表任选地被一个或多个(例如I或2个)Rd基团取代的Cy亚烷基(优选为Cm亚烷基)，其中一个或两个亚甲基基团(如:一个亚甲基)各自被-CRe=CRf-或-C = C-基团代替； 其中每个Rd可以为相同的或不同的，且可以选自CV6烷基(优选为Ci_3烷基)、羟基和C1-S烧氧基(例如C1-S烧氧基); 其中R6和Rf独立地选自H、C1^3烷基(例如甲基)、卤素(例如F或Cl)和-CN ;和 L2代表键，或者任选取代的CV4亚烷基基团，优选为键。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其异构体(例如立体异构体)、可药用的盐或前药，其特征在于，在式I或II中: Z1代表含有两个氮原子和一个氧原子的五元杂环； Z2代表任选地被Ra基团单取代或双取代的苯基、吡啶基或嘧啶基； 其中Ra可选自卤素(即:F、Cl、Br、I)、羟基，C1^6烷氧基(例如C^3烷氧基)和-S(O)2R(其中R为H或烷基)；R1代表任选地被Rb基团单取代的芳基或杂芳基基团； 其中Rb选自卤素(即:F、Cl、Br、I)、C1^6烷基(优选为C1^烷基)，(^_6烷氧基(例如CV3烷氧基)、羟基和-CN ； R2代表任选地被基团R。单取代或双取代的芳基基团； 其中每个R。可以为相同的或不同的，且可以选自卤素(即烷基(优选为Cp3烷基)和Cp6烷氧基(例如CV3烷氧基)； L1代表任选地被一个或多个(例如I或2个)Rd基团取代的Cy亚烷基基团(优选为CV2亚烷基)，其中一个或两个亚甲基基团(例如一个亚甲基基团)各自被基团-CRe=CRf-或基团-C = C-所替代； 其中每个Rd可以为相同的或不同的，且可以选自CV6烷基(优选为Ci_3烷基)、羟基和C1-S烧氧基(例如C1-S烧氧基); 其中Re和Rf独立地选自H、C1^3烷基和卤素(例如F或Cl);且 L2代表键或CV2亚烷基基团。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中基团Z1选自下述基团:
7.根据权利要求1所述的化合物、其异构体(例如立体异构体)、可药用的盐或前药，所述化合物具有式la、Ila、Ib或IIb:
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其特征在于，L1为基团-CRe=CRf-、-C = C-或-C=C=C-,其中Re和Rf如权利要求1至7中任一项所定义。
9.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其特征在于，L1为基团-CRe=CRf-,其中Re和Rf独立地选自H和甲基。
10.根据权利要求1所述的化合物或其异构体(例如立体异构体)、可药用的盐或前药，所述化合物具有式IIc或IId:
11.根据权利要求1所述的化合物或其异构体、可药用的盐或前药，所述化合物选自下述:
12.根据权利要求9所述的化合物，所述化合物选自下述:化合物编号(I)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)、(14)、(33)、(56)和(58)、它们的异构体、其可药用的盐及前药。
13.根据权利要求9所述的化合物，所述化合物选自下述:化合物编号(2)、(3)、(4)、⑶、(10)、(11)、(12)、(14)和(57)、它们的异构体、其可药用的盐及前药。
14.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，除了下述化合物:
15.一种制备权利要求1或2限定的式I或式II的化合物的方法，所述方法包括至少一个下述步骤: (a)将通式III的化合物:
16.一种药物制剂，其包括如权利要求1到14中任一项所述的化合物或其可药用的盐，和一种或多种可药用的载体或赋形剂。
17.如权利要求1到14中任一项所述的化合物或其可药用的盐，其用于治疗。
18.根据权利要求17所述的化合物，其特征在于，所述化合物用于治疗和/或预防Wnt通路中信号转导的过度活化引起的任何病症或疾病，例如涉及β_连环蛋白活化的这样的病症或疾病的治疗和/或预防。
19.根据权利要求17所述的化合物，所述化合物用于预防和/或延缓肿瘤细胞的增殖或转移，例如癌如腺癌，例如治疗和/或预防任一种下述癌症:结肠癌(例如结直肠癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝细胞和肝胚细胞癌)、肾的肾母细胞瘤、成神经管细胞瘤、皮肤癌(例如黑素瘤)、非小细胞肺癌、子宫颈癌、卵巢子宫内膜癌、膀胱癌、甲状腺未分化癌、头颈癌、乳腺癌、前列腺癌和成胶质细胞瘤。
20.根据权利要求1-14中任一项所述的化合物或其可药用的盐在制造用于治疗或预防下列癌症中任一种的方法中的药物中的用途:结肠癌(例如结直肠癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝细胞和肝胚细胞癌)、肾的肾母细胞瘤、成神经管细胞瘤、皮肤癌(例如黑素瘤)、非小细胞肺癌、子宫颈癌、卵巢子宫内膜癌、膀胱癌、甲状腺未分化癌、头颈癌、乳腺癌、前列腺癌和成胶质细胞瘤。
21.一种治疗人类或非人的动物机体减轻或预防下列癌症中任一种的方法:结肠癌(例如结直肠癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝细胞和肝胚细胞癌)、肾的肾母细胞瘤、成神经管细胞瘤、皮肤癌(例如黑素瘤)、非小细胞肺癌、子宫颈癌、卵巢子宫内膜癌、膀胱癌、甲状腺未分化癌、头颈癌、乳腺癌、前列腺癌和成胶质细胞瘤，所述方法包括向所述机体施用有效量的权利要求1-14中任一项所述的化合物或其可药用的盐。
22.一种促进和/或引导细胞分化的方法(例如体外方法)，其包括将祖细胞与有效量的权利要求1-1 4中任一项所述的化合物或其可药用的盐进行接触。
【文档编号】C07D401/12GK103429583SQ201180064778
【公开日】2013年12月4日 申请日期:2011年12月8日 优先权日:2010年12月8日
【发明者】D·霍尔斯沃斯, J·瓦勒, O·马洪, S·克劳斯, A·E·沃隆科夫 申请人:奥斯陆大学医院公司