专利名称：一种秋水仙碱的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种秋水仙碱的制备方法，特别是由丽江山慈菇、光慈姑、百合采用超声波辅助双水相萃取制备秋水仙碱的方法。
背景技术：
秋水仙碱又名秋水仙素，是一种生物碱，分子式为C22H25O6N,纯秋水仙素呈黄色针状结晶，熔点157°C。易溶于水、乙醇和氯仿。味苦，有毒。秋水仙素能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。自1937年美国学者布莱克斯利(A.F. Blakeslee)等，用秋水仙素加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后，秋水仙素就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种。针对痛风性关节炎有效的唯一抗炎剂，对痛风急性发作有特别显着的治疗效果，也是有效的预防药。此外，秋水仙碱在用于治疗肝纤维化、淀粉样变性、家族地中海热、儿茶酚胺异常性周期热、慢性免疫性血小板减少性紫癜、白塞综合征等方面亦有一定作用。秋水仙碱存在于百合中，其中秋水仙碱的含量在O. 1-0. 4%之间。在现有技术中，秋水仙碱主要采用合成方法生产，步骤长，产率低。专利CN101602686用CO2超临界从秋水仙碱鳞茎粉中萃取，并采用大孔吸附树脂进行分离，秋水仙碱的提取率为O. 002%，纯度大于90%。此方法制备成本高，提取率低。专利CN101817760一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法，以甲醇回流提取2-3次，酸碱纯化后用氧化铝柱吸附，再用石油醚、乙酸乙酯洗脱，洗脱液浓缩至其体积的1/4放置结晶得粗结晶物。粗结晶物用乙酸乙酯回流饱和溶解，调节温度至0°C以下结晶16小时，滤出，再结晶至少两次干燥后得秋水仙碱，其提取率为O. 16%以上，含量大于97%，此方法工艺过于复杂。
发明内容
本发明针对上述技术问题，提供一种成本较低、工艺较简单，可进行工业化制备秋水仙碱的方法，该方法以百合、云南丽江山慈菇、光慈菇为原料，采用超声波协助双水相萃取制备秋水仙碱。本发明通过以下技术方案实现
1、双水相萃取将含秋水仙碱原料粉碎，分别加入原料重量3-5倍的80%-95%乙醇和原料重量4-6倍的水，混匀浸泡20-30min后加入O. 5-2倍的盐，在一定频率超声波的作用下进行双水相萃取30-60min,温度为40_70°C,萃取后过滤,将滤液静置10_15min,滤液分层，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度50-55°C，回收乙醇，浓缩至不出冷凝液后，继续升温至70-80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 10-1. 15g/cm3,制得含秋水仙碱浸膏；
2、脱盐纯化在浸膏中加入浸膏重量6-10倍的氯仿，浸膏中的秋水仙碱溶解，而无机盐等杂质成分不溶解，过滤，得含秋水仙碱的氯仿溶液；
3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过大孔吸附树脂柱分离，以O.5-0. 8%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发不少于3/4的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度0-10°C,时间8-10h,晶体干燥后,得秋水仙碱产品,通过HPLC分析产品的纯度。本发明中所述含秋水仙碱原料为云南I 江山慈燕、云南I 江光慈姑、百合中一种。本发明中所述盐为硫酸铵、硫酸钠、甲酸钠中的一种。本发明中所述超声波的频率为30_200kHz。本发明中所述大孔吸附树脂为D101、D3520、D201大孔吸附树脂中的一种。本发明中所述晶体干燥是在真空，在30_60°C条件下处理15_20h。与现有技术相比，本发明具有如下优点
I、本发明采用超声波辅助萃取，提高了秋水仙碱的萃取率，同时与常规溶剂法提取相比可缩短萃取时间30min以上。2、本发明采用双水相萃取，萃取的同时又起到了分离纯化的作用。3、本发明避免使用有毒的有机溶剂萃取，价格便宜，操作简单，萃取率高，适合用于工业化生产。
具体实施例方式实施例I :本秋水仙碱的制备方法，具体操作如下
I、双水相萃取取云南丽江山慈燕3kg,分别加入IOkg 95%乙醇和15kg水,浸泡30min后加入3kg硫酸铵，在超声波的作用下进行双水相萃取40min，温度为在45°C，超声波频率控制在100kHz，过滤，将滤液静置15min，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度为55°C，回收乙醇3. 56kg，至不出冷凝液后，继续升温至80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 12g/cm3,得浸膏重314. 15g。2、脱盐纯化将浸膏中加入2. 6kg的氯仿，溶解秋水仙碱，过滤得含秋水仙碱的氯仿溶液。3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过DlOl大孔吸附树脂柱分离，以质量百分比浓度O. 5%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发掉3/4的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度0°C，时间8h，晶体蒸馏水洗涤、真空50°C干燥16h，得秋水仙碱产品5. 65g，通过HPLC分析产品的纯度为96. 04%。实施例2 :本秋水仙碱的制备方法，具体操作如下
I、双水相萃取取云南丽江光慈姑3kg,分别加入9kg 95%乙醇和15kg水,浸泡25min后加入2kg硫酸钠，在超声波的作用下进行双水相萃取50min，温度为50°C，超声波频率为40kHz，过滤，将滤液静置15min，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度为55°C，回收乙醇3. 12kg，至不出冷凝液后，继续升温至75°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. lOg/cm3，得浸膏重286. 32g。2、脱盐纯化将浓缩浸膏中加入I. 8kg的氯仿，溶解秋水仙碱，过滤得含秋水仙碱的氯仿溶液。 3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过D3520大孔吸附树脂柱分离，以质量百分比浓度O. 6%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发掉4/5的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度5°C，时间10h，晶体蒸馏水洗涤、真空60°C干燥15h，得秋水仙碱产品4. 68g，通过HPLC分析产品的纯度为97. 26%。实施例3 :本秋水仙碱的制备方法，具体操作如下 I、双水相萃取取百合鳞茎3kg，分别加入12kg 85%乙醇和16kg水，浸泡30min后加入I. 5kg甲酸钠，在超声波的作用下进行双水相萃取30min，温度为60°C，超声波频率为80kHz。过滤，将滤液静置lOmin，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度为55°C，回收乙醇4. 64kg，至不出冷凝液后，继续升温至80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 13g/cm3，得浸膏重269. 55g。2、脱盐纯化将浓缩浸膏中加入浸膏重量2kg的氯仿，溶解秋水仙碱，过滤得含秋水仙碱的氯仿溶液。3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过D201大孔吸附树脂柱分离，以O. 8%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发掉4/5的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度10°C，时间10h，晶体蒸馏水洗涤、真空30°C干燥20h，得秋水仙碱产品3. 46g，通过HPLC分析产品的纯度为95. 01%。实施例4 :本秋水仙碱的制备方法，具体操作如下
I、双水相萃取取云南丽江山慈菇3kg，分别加入14kg 80%乙醇和12kg水，浸泡30min后加入4kg硫酸铵,在超声波的作用下进行双水相萃取45min,温度为在70°C,超声波频率控制在140kHz，过滤，将滤液静置12min，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度为50°C，回收乙醇4. 95kg，至不出冷凝液后，继续升温至80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 15g/cm3,得浸膏重365. 48g。2、脱盐纯化将浓缩浸膏中加入3kg的氯仿，溶解秋水仙碱，过滤得含秋水仙碱的氯仿溶液。3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过D201大孔吸附树脂柱分离，以O. 6%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发掉3/4的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度2°C，时间9h，晶体蒸馏水洗涤、真空40°C干燥20h，得秋水仙碱产品5. 03g，通过HPLC分析产品的纯度为97. 67%。实施例5 :本秋水仙碱的制备方法，具体操作如下
I、双水相萃取取云南丽江光慈姑3kg,分别加入15kg 90 %乙醇和18kg水，浸泡20min后加入6kg硫酸钠。在超声波的作用下进行双水相萃取60min,温度为在40°C,超声波频率控制在200kHz，过滤，将滤液静置14min，液液分离得富含秋水仙碱的上层溶液，取上层液减压浓缩，温度为54°C，回收乙醇5. 21kg，至不出冷凝液后，继续升温至80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 10g/cm3，得浸膏重341. 26g。2、脱盐纯化将浓缩浸膏中加入浸膏重量3. 4kg的氯仿，溶解秋水仙碱，过滤得含秋水仙碱的氯仿溶液。3、吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过DlOl大孔吸附树脂柱分离，以O. 8%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发掉3/4的水，将浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度8°C，时间10h，晶体蒸馏水洗涤、真空35°C干燥18h，得秋水仙碱产品4. 04g，通过HPLC分析产品的纯度为96. 44%。
权利要求
1.一种秋水仙碱的制备方法，其特征在于按如下步骤进行 (1)双水相萃取将含秋水仙碱原料粉碎，加入原料重量3-5倍的80-95%乙醇和原料重量4-6倍的水，混匀浸泡20-30min后加入原料重量O. 5-2倍的盐，混匀在40_70°C、超声波作用下进行双水相萃取30-60min,过滤,将滤液静置10_15min,滤液分层,取上层液减压浓缩，在50-55°C下回收乙醇，浓缩至不出冷凝液后，继续升温至70-80°C，蒸发水分至萃取浓缩液比重为I. 10-1. 15g/cm3，制得含秋水仙碱浸膏； (2)脱盐纯化在浸膏中加入浸膏重量6-10倍的氯仿，过滤，得含秋水仙碱的氯仿溶液； (3)吸附分离、结晶将含秋水仙碱的氯仿溶液通过大孔吸附树脂柱分离，以质量百分比浓度O. 5-0. 8%的硫酸溶液作洗脱剂，收集洗脱液并减压蒸发不少于3/4的水，在浓缩液中加入乙酸乙酯进行重结晶两次，结晶温度0-10°C，时间8-10h，晶体洗涤干燥后制得秋水仙碱产品，通过HPLC分析产品的纯度。
2.根据权利要求I所述秋水仙碱的制备方法，其特征在于含秋水仙碱原料为云南丽江山慈菇、云南丽江光慈姑、百合中一种或几种的混合物。
3.根据权利要求I所述秋水仙碱的制备方法，其特征在于盐为硫酸铵、硫酸钠、甲酸钠中的一种。
4.根据权利要求I所述秋水仙碱的制备方法，其特征在于超声波的频率为30-200kHz。
5.根据权利要求I所述秋水仙碱的制备方法，其特征在于大孔吸附树脂为D101、D3520、D201大孔吸附树脂中的一种。
6.根据权利要求I所述秋水仙碱的制备方法，其特征在于晶体干燥是在真空，温度30-60°C条件下处理15-20h。
全文摘要
本发明公开了一种秋水仙碱的制备方法，这是一种采用超声波辅助双水相萃取制备秋水仙碱的方法，具体是将含秋水仙碱原料粉碎，在超声波作用下进行双水相萃取，得富含秋水仙碱的上层溶液，经浓缩得浸膏，而后加入氯仿溶解过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱、浓缩结晶后，干燥即得秋水仙碱，本发明方法操作简单、萃取率高、萃取时间短，适用于工业化生产。
文档编号C07C233/32GK102627576SQ201210087258
公开日2012年8月8日 申请日期2012年3月29日 优先权日2012年3月29日
发明者刘谋盛, 杨亚玲, 石瑶 申请人:昆明理工大学