专利名称：一种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法
技术领域：
本发明涉及一种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，尤其是涉及ー种柱层析与逆流色谱结合分离纯化款冬花酮和新款冬花内酯的方法。
背景技术：
款冬花酮和新款冬花内酷，均为倍半萜类化合物，来源于来源于菊科植物款冬花ijussilago farfara L.)的花蕾。款冬花具有润肺下气，化痰止嗽等功效。现代药理研究表明，款冬花对呼吸系统具有止咳，祛痰和平喘作用；对交感神经、拟交感神经、血管平滑肌等具有直接兴奋作用；对在体或离体胃肠道平滑肌均呈抑制作用。款冬花分布河北、河南、湖北、四川、山西、陕西、甘肃、内蒙古、新疆、青海，西藏等地，资源丰富。款冬花酮，分子式=C21H3tlO3,分子量330. 47，无色胶状物。新款冬花内酷，分子式C21H28O4，分子量344.45.。款冬花酮和新款冬花内酯均具有较强的抑制血小板活化因子的作用，能抑制PAF诱导的血小板聚集。目前尚未见提纯款冬花酮和新款冬花内酷的相关报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供ー种利用高速逆流色谱法纯化款冬花酮和新款冬花内酯的方法。本发明所述的ー种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，其特征在于按下列步骤进行
(1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%こ醇超声提取1-2次，合并提取液加入针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩；
(2)将浓缩液以热水分散，加入20-100目硅胶层析柱，ニ氯甲烷-甲醇混合溶剂洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥；
(3)采用高速逆流色谱仪，溶剂系统由正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水组成，体积比为6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相为固定相，下相为流动相，取步骤(2)干燥物溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动，泵入流动相，当流动相流出吋，连续进样，根据检测器谱图收集目标成分，浓缩，低温干燥即得产品。所述步骤(I)中活性炭用量为提取液总质量的3-5%。。所述步骤(2)中柱层析所用的混合溶剂的比例为1:3-10。所述步骤(3)中高速逆流色谱仪流动相流速控制在2-3ml/min,主机转速为750-950rpm.。本发明与现有技术相比具有如下的优点及有益效果
1)本发明先用柱层析富集纯化，降低了后续エ序的处理量；
2)采用高速逆流色谱法分离纯化，制备量大，产品纯度高，处理过程中样品无损失。
具体实施例方式实施例I :
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用80%こ醇超声提取2次，合并提取液加入3%。针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入100目硅胶层析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:3)洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(6 7 8 3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到950rpm,以2. Oml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酷，检测含量都在98%以上。
实施例2:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用こ醇超声提取I次，合并提取液加入5%。针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓縮，浓缩液以热水分散，加入20目硅胶层析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:10)洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(11 15 :4:3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到750rpm,以2. Oml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酷，检测含量都在98%以上。实施例3:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超声提取2次，合并提取液加入4%。针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入80目硅胶层析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(7 8 5 3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到850rpm,以2. 5ml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酷，检测含量都在98%以上。实施例4:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用85%こ醇超声提取2次，合并提取液加入5%。针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入60目硅胶层析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:5)洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(9 11 5 3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到800rpm,以2. 8ml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酷，检测含量都在98%以上。实施例5:
取IOkg款冬花的花蕾粉碎后用90%こ醇超声提取2次，合并提取液加入4%。针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩，浓缩液以热水分散，加入80目硅胶层析柱，用ニ氯甲烷-甲醇(1:8)洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥得粗提物；
取正己烷、こ酸こ酷、甲醇和水(10 9 6 :3)置于分液漏斗中，静置分层，上相为固定相，下相为流动相，取样品溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动达到 850rpm,以2. Oml/min流速泵入流动相，当流动相流出时，开始连续进样，根据检测器谱图分别收集款冬花酮流分和新款冬花内酯流分，浓缩，低温干燥即得到款冬花酮和新款冬花内酷，检测含量都在98%以上。
权利要求
1.一种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，其特征在于按下列步骤进行 (1)取款冬花的花蕾粉碎后用80-100%乙醇超声提取1-2次，合并提取液加入针剂类药用活性炭脱色，滤出活性炭，提取液减压浓缩； (2)将浓缩液以热水分散，加入20-100目硅胶层析柱，二氯甲烷-甲醇混合溶剂洗脱，薄层跟踪，收集洗脱液，浓缩干燥； (3)采用高速逆流色谱仪，溶剂系统由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水组成，体积比为6-11 :7-15 :4-8 :3，置于分液漏斗中，上相为固定相，下相为流动相，取步骤(2)干燥物溶于下相中，用泵将固定相灌满分离柱，然后使主机转动，泵入流动相，当流动相流出时，连续进样，根据检测器谱图收集目标成分，浓缩，低温干燥即得产品。
2.根据权利要求I所述的同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，其特征在于所述步骤(I)中活性炭用量为提取液总质量的3-5%。。
3.根据权利要求I所述的同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，其特征在于所述步骤(2)中柱层析所用的混合溶剂的比例为1:3-10。
全文摘要
本发明公开了一种同时制备款冬花酮和新款冬花内酯的方法，包括取款冬花的花蕾粉碎醇提，提取液过柱层析初步分离，再采用高速逆流色谱法纯化，将洗脱溶剂系统置于分液漏斗中分层，取上相为固定相，下相为流动相，取款冬花提取物溶解于下相中，将固定相用泵灌满分离柱，连接柱首端与进样阀，调节流动相流速和主机转速，分段收集分离物，浓缩干燥即得款冬花酮及新款冬花内酯。该分离方法分离效率高，能得到高含量的款冬花酮和新款冬花内酯。
文档编号C07C67/56GK102659585SQ201210117158
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月20日 优先权日2012年4月20日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司