专利名称：一种二氢柯楠因碱的提取方法
技术领域：
本发明属于中药提取分离技术领域，特别涉及一种二氢柯楠因碱的提取方法。
背景技术：
二氢柯楠因减是菌草科(Rubiaceae)胼胝叶钩藤callophylla Korth.茎中的活性成分，为咔啉类生物碱，无色棒状结晶(乙醚)，分子式C22H28N2O3，结构式
OgC\
O 。
'COOCH3
H二氢柯楠因碱具有以下生物活性(I)降压作用，静脉注射本品O. 5-5. Omg/kg，能有效降低清醒或麻醉大鼠的动脉压。(2)对刺毁脑脊髓的(pithed)大鼠具有a-肾上腺受体阻断活性。(3)小鼠LD50 (腹腔注射)为89mg/kg。经文献检索，尚未发现二氢柯楠因碱的工业提取纯化方法的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种二氢柯楠因碱的提取方法。本发明是通过以下技术方案加以实现的
(1)将胼胝叶钩藤茎粉碎，加O.5-1%盐酸或硫酸水溶液浸泡3-6h，超声处理20-45min，过滤得到提取液；
(2)提取液调节pH至7-8，加入超滤膜超滤，再加入纳滤膜纳滤，得到浓缩液；
(3)浓缩液调pH9-ll，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；
(4)粗品采用高速逆流色谱分离，紫外在线检测，收集目标成分，低温干燥即得二氢柯楠因碱产品。所述步骤(2)超滤膜为截留分子量为3000-6000的超滤膜，纳滤膜为截留分子量为200-500的纳滤膜。所述步骤(4)中高速逆流色谱流动相为氯仿-甲醇-水，体积比为7-9:3-4:7-8，紫外检测波长为227nm。本发明的优点在于
(I)本发明采用酸水浸提，有效减少杂质的溶出，超声处理，能更好地溶出有效成分，效
率闻;(2)采用膜分离能滤除多种杂质，属物理除杂，不影响有效成分的性质；
(3)高速逆流色谱具有提取量大、产品纯度高、简单易行等优点，可产业规模化。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行说明。实施例I :
将胼胝叶钩藤茎粉碎，取1kg，加1%盐酸水溶液浸泡3h，超声处理40min，过滤得到提取液，调节PH至7，加入截留分子量为3000的超滤膜超滤，再加入截留分子量为200的纳滤膜纳滤，得到浓缩液，调PH10，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；以体积比为9:3:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气 25min,上相为固定相，下相为流动相，将粗品溶于两相(上相与下相体积比为I: I)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为227nm，收集目标成分，低温干燥，得到纯度为96. 5%的二氢柯楠因碱。实施例2:
将胼胝叶钩藤茎粉碎，取1kg，加O. 5%硫酸水溶液浸泡6h，超声处理45min，过滤得到提取液，调节PH至8，加入截留分子量为5000的超滤膜超滤，再加入截留分子量为500的纳滤膜纳滤，得到浓缩液，调PH9，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；以体积比为9:4:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气20min,上相为固定相，下相为流动相，将粗品溶于两相(上相与下相体积比为I: I)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为227nm，收集目标成分，低温干燥，得到纯度98. 2%的二氢柯楠因碱。实施例3:
将胼胝叶钩藤茎粉碎，取5kg，加O. 8%硫酸水溶液浸泡6h，超声处理35min，过滤得到提取液，调节PH至8，加入截留分子量为5000的超滤膜超滤，再加入截留分子量为300的纳滤膜纳滤，得到浓缩液，调PH11，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；以体积比为8:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气25min,上相为固定相，下相为流动相，将粗品溶于两相(上相与下相体积比为I: I)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为227nm，收集目标成分，低温干燥，得到纯度96. 6%的二氢柯楠因碱。实施例4:
将胼胝叶钩藤茎粉碎，取10kg，加O. 5%盐酸水溶液浸泡5h，超声处理20min，过滤得到提取液，调节PH至8，加入截留分子量为6000的超滤膜超滤，再加入截留分子量为300的纳滤膜纳滤，得到浓缩液，调PH10，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；以体积比为7:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气30min，上相为固定相，下相为流动相，将粗品溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为227nm，收集目标成分，低温干燥，得到纯度95. 5%的二氢柯楠因碱。实施例5:
将胼胝叶钩藤茎粉碎，取10kg，加O. 8%盐酸水溶液浸泡4h，超声处理40min，过滤得到提取液，调节PH至8，加入截留分子量为6000的超滤膜超滤，再加入截留分子量为300的纳滤膜纳滤，得到浓缩液，调PH10，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品；以体积比为7:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气20min，上相为固定相，下相为流动相，将粗品溶于两相(上相与下相体积比为1:1)混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为227nm，收集目标成分， 低温干燥，得到纯度98. 7%的二氢柯楠因碱。
权利要求
1.一种ニ氢柯楠因碱的提取方法，其特征在于包括以下步骤 (1)将胼胝叶钩藤茎粉碎，加O.5-1%盐酸或硫酸水溶液浸泡3-6h，超声处理20-45min，过滤得到提取液； (2)提取液调节pH至7-8，加入超滤膜超滤，再加入纳滤膜纳滤，得到浓缩液； (3)浓缩液调pH9-ll，用氯仿萃取，取有机层，回收氯仿，干燥得到粗品； (4)粗品采用高速逆流色谱分离，紫外在线检測，收集目标成分，低温干燥即得ニ氢柯楠因碱产品。
2.根据权利要求I所述的ー种ニ氢柯楠因碱的提取方法，其特征在于所述步骤(2)超滤膜为截留分子量为3000-6000的超滤膜，纳滤膜为截留分子量为200-500的纳滤膜。
3.根据权利要求I所述的ー种ニ氢柯楠因碱的提取方法，其特征在于所述步骤(4)中高速逆流色谱流动相为氯仿-甲醇-水，体积比为7-9:3-4:7-8，紫外检测波长为227nm。
全文摘要
本发明公开了一种二氢柯楠因碱的提取方法，它是将胼胝叶钩藤茎粉碎，加0.5-1%盐酸或硫酸水溶液提取，提取液调节pH至7-8，加入超滤膜超滤，再加入纳滤膜纳滤，浓缩液调pH9-11，用氯仿萃取，萃取液浓缩干燥得到粗提物，采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化，紫外在线检测，收集目标成分，低温干燥即得二氢柯楠因碱产品。本发明能耗低，污染少，产品含量高，可达95%以上，既适合小型实验，也可以用于产业化生产。
文档编号C07D471/14GK102659781SQ201210122809
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月25日 优先权日2012年4月25日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司