专利名称：一种纯化羟基马桑毒素的方法
技术领域：
本发明涉及一种纯化羟基马桑毒素的方法，特别是涉及一种利用高速逆流色谱法纯化羟基马桑毒素的方法。
背景技术：
羟基马桑毒素(tutin)属于苦毒素倍半萜类化合物，CAS号2571-22-4，分子式C15H1806,分子量294. 33，分子结构
I
羟基马桑毒素为无味白色结晶，溶于水、乙醇、乙醚。羟基马桑毒素是马桑内酯中治疗精神分裂症的主要有效成分，能够消除精神症状，具有控制兴奋、消除幻觉妄想以及使退缩少动患者增加外界活动能力的作用，对中枢神经有防己毒样的兴奋作用。羟基马桑毒素成分分离一般采用硅胶柱和制备液相。如文献“马桑寄生及马桑子中内酯成分分析方法的研究”方法采用生药乙醇提取液经聚酰胺柱净化，在硅胶G薄层上，环己烧一乙酸乙酯(1:1)为展开剂，分离了马桑毒素、羟基马桑毒素、马桑亭。还有文献“马桑内酯的提取分离、衍生物合成及活性研究”采用的方法是马桑干籽粉碎后用95%乙醇回流提取，提取液浓缩成浸膏，用石油醚萃取除去叶绿素和油，然后蒸馏水丙酮石油醚=3:1:1萃取，得水相和有机相，水相有不溶物，拌样上大孔吸附树脂柱层析，以水和甲醇混合溶液梯度洗脱，然后过硅胶柱层析，经石油醚、乙酸乙酯梯度洗脱。通过柱层析分离、重结晶和制备高效液相等分离方法，得到羟基马桑毒素、马桑亭、马桑宁三种马桑内酯。如上所述，现有纯化羟基马桑毒素的方法较为繁琐，周期长，溶剂用量大等诸多缺点。
发明内容
本发明旨在克服现有技术的缺陷和不足，提供一种高效、快速纯化羟基马桑毒素的方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的
一种纯化羟基马桑毒素的方法，其特征在于以马桑籽为原料，粉碎20-80目，采用70-80%丙酮溶液超声提取2-3次，提取液过氧化铝短柱，浓缩过柱液，所得浸膏利用高速逆流色谱法分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得高纯度羟基马桑毒素。所述的氧化铝为中性氧化铝，粒度120-300目。
所述的高速逆流色谱法分离操作步骤为取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:1-9:1-5:1-9比例充分混合，取上相注满高速逆流色谱管，以700-1000rpm转动主机，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速设置为l_4ml/min，用流动相溶解浸膏进样，根据图谱收集成分。本发明的优点是采用了高速逆流色谱法纯化，操作简单，高效快速，样品无损失，溶剂用量少，可以循环使用，可一次性制得含量不低于95%的羟基马桑毒素。
具体实施例方式
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明。实施例I :
马桑籽干燥后，粉碎40目，取500g，加3倍量80%丙酮溶液超声30分钟，提取3次，提取 液过中性氧化铝短柱(粒度120-300目)，过柱液浓缩成浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:2:2:2比例充分混合，取上相注满高速逆流色谱管，以SOOrpm转动主机，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速设置为2ml/min，用流动相溶解浸膏进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集成分，连续进样，回收试剂减压干燥，得白色粉末羟基马桑毒素400mg，高效液相检测含量96. 7%。实施例2:
马桑籽干燥后，粉碎20目，取1000g，加5倍量70%丙酮溶液超声30分钟，提取2次，提取液过中性氧化铝短柱(粒度120-300目)，过柱液浓缩成浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:5:4:7比例充分混合，取上相注满高速逆流色谱管，以900rpm转动主机，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速设置为3ml/min，用流动相溶解浸膏进样，紫外检测器在线监测，根据图谱收集成分，连续进样，回收试剂减压干燥，得白色粉末羟基马桑毒素900mg,高效液相检测含量97. 1%。
权利要求
1.一种纯化羟基马桑毒素的方法，其特征在于以马桑籽为原料，粉碎20-80目，采用70-80%丙酮溶液超声提取2-3次，提取液过氧化铝短柱，浓缩过柱液，所得浸膏利用高速逆流色谱法分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得高纯度羟基马桑毒素。
2.根据权利要求I所述的纯化羟基马桑毒素的方法，其特征在于所述的氧化铝为中性氧化铝，粒度120-300目。
3.根据权利要求I所述的纯化羟基马桑毒素的方法，其特征在于所述的高速逆流色谱法分离操作步骤为取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:1-9:1-5:1-9比例充分混合，取上相注满高速逆流色谱管，以700-1000rpm转动主机，泵入下相做流动相，动态平衡后，流动相流速设置为l_4ml/min，用流动相溶解浸膏进样，根据图谱收集成分。
全文摘要
本发明公开了一种纯化羟基马桑毒素的方法。方法是以马桑籽为原料，粉碎20-80目，采用70-80%丙酮溶液超声提取2-3次，提取液过氧化铝短柱，浓缩过柱液，所得浸膏利用高速逆流色谱法分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得高纯度羟基马桑毒素。采用本方法纯化羟基马桑毒素，操作简单，样品无损失，制备周期短，溶剂用量少，可一次性制得纯度不低于95%的产品，适合推广使用。
文档编号C07D493/20GK102659806SQ201210124419
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月26日 优先权日2012年4月26日
发明者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司