专利名称：一种泰妙菌素碱的制备方法
技术领域：
本发明属于生物制药技术领域，特别是涉及一种泰妙菌素碱的制备方法。
背景技术：
泰妙菌素是通过发酵培养侧耳菌(Pleurotus mutilus)得到截短侧耳素后，再经过半合成制备的一种双職类(pluromulin)抗生素。泰妙菌素是一种新型的动物专用抗生素，对支原体及某些革兰氏阳性菌具有良好的抗菌活性，是迄今为止对鸡的败血支原体最有效的抗生素。同时，对金黄色葡萄球菌、链球菌、多种霉形体和某些螺旋体具有较强的作用。
目前市场上的产品主要是泰妙菌素的延胡索酸盐，先通过发酵得到截短侧耳素发酵液，从发酵液中提取截短侧耳素，经磺化反应后成盐得到延胡索酸延胡索泰妙菌素。多数制药行业均采用此工艺制备延胡索酸泰妙菌素，但该工艺均存在较多缺陷，成盐结晶过程控制较难，从而影响到产品质量。因此，提出一种制备泰妙菌素碱的方法，可将泰妙菌素碱作为制剂原料，缩减目前原有的工艺流程，降低生产成本，减少设备投资。
发明内容
本发明目的在于改进现有生产技术缺陷，提供一种生产成本相对较低，设备及操作简单，容易实现的泰妙菌素碱的制备方法。为实现上述目的所采取的技术方案如下
一种泰妙菌素碱的制备方法，其特征是首先将截短侧耳素发酵液过滤，将菌丝干燥，然后用甲醇作溶剂进行浸提，浸提液真空浓缩后用丙酮萃取，浓缩萃取液，将浓缩液转入合成反应釜，加入对甲苯磺酰氯，在PHll - 12、反应温度20 - 30°C下进行合成反应，反应完全后，静置分层，所得酮相中依次加入四丁基溴化铵和二乙胺基乙硫醇，在PH9 - 10、反应温度50 - 60°C下充分反应，后加水萃取，弃去水相，酮相经过滤后，真空浓缩至原体积的60-70%,得泰妙菌素喊。上述方案具体步骤如下
I、发酵液过滤与菌丝干燥
(I)向发酵液中加入5-10%体积的水搅拌，然后进板框压滤机过滤，待过滤至基本无滤液流出时，用空气将滤饼吹干。(2)滤饼破碎，用闪蒸机干燥，控制进风温度在150 - 160°C,出风温度在90 —100°C。菌丝干燥失重不超过15 — 20%。2、干菌丝浸提、萃取与浓缩
(I)将截短侧耳素干菌丝用甲醇分两次浸提，第一次加入甲醇的体积为干菌丝质量的5 一 7倍，第二次加入甲醇的体积为干菌丝质量的4 一 5倍，合并两次浸提液，真空浓缩至原体积的40 - 50%。(2)将浓缩液转入萃取罐，加入丙酮萃取两次，第一次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的5 - 6倍，第二次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的4 一 5倍。萃取结束后，静置分层，水相去废水处理，酮相转入进入下一步浓缩。(3)将萃取酮相真空浓缩，真空度控制在-0. 05 - -0. 06Mpa,浓缩温度控制在40 —500C。浓缩至原体积的30-40%为止。3、合成与精制
(I)将浓缩液转入合成反应釜，冷却至30°C以下，加入截短侧耳素质量I 一 I. 2倍的对甲苯磺酰氯，用氢氧化钠调节pH为11 一 12后，继续搅拌I 一 I. 5h，控制反应温度为20 -30 V。反应完全后，静置分层，水相转去废水 处理，酮相转入下一步合成。(2)向反应釜中加入四丁基溴化铵，四丁基溴化铵的加入量为截短侧耳素质量的2 — 3倍；继续加入二乙胺基乙硫醇，二乙胺基乙硫醇的加入量为截短侧耳素的I 一 I. 2倍；缓慢搅拌，用氢氧化钠调PH值为9 一 10，保持反应温度50 - 60°C，反应I 一 I. 5h。(3)反应结束后，加入2-3倍体积的水萃取两次，静置分层，弃去水相，酮相进入下一步浓缩。(4)酮相经0. 5微米膜过滤后，真空浓缩至泰妙碱含量在80 - 90%，真空度控制在-0. 04 - -0. 05Mpa,浓缩温度控制在40 — 50°C。与现有技术相比，本发明的有益效果如下
本发明从发酵液中提取截短侧耳素，进行半合成得到泰妙菌素碱，直接用于制剂原料。与目前大多数制药厂现有工艺相比，减少了成盐结晶步骤，简化了生产工艺，降低了设备和其他成本投资，提高了产品质量，且泰妙碱含量可达80 - 90%。提取和萃取所采用的甲醇和丙酮均可以回收利用，减少了对环境的危害。综上所述，本发明操作简单，工艺条件温和，易于操作且容易大规模工业生产，具有一定的发展前景。
具体实施例方式下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。实施例I
I、发酵液过滤与菌丝干燥
向发酵液中加入5-10%体积的水搅拌，然后进板框压滤机过滤，待过滤至基本无滤液流出时，用空气将滤饼吹干。将滤饼破碎，用闪蒸机干燥，控制进风温度在150 - 160°C，出风温度在90 - 100°C。菌丝干燥失重不超过15 20%。2、干菌丝浸提、萃取与浓缩
将截短侧耳素干菌丝用甲醇分两次浸提，第一次加入甲醇的体积为干菌丝质量的5倍，第二次加入甲醇的体积为干菌丝质量的4倍，合并两次浸提液，真空浓缩至原体积的40 — 50% o将浓缩液转入萃取罐，加入丙酮萃取两次，第一次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的5倍，第二次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的4倍。萃取结束后，静置分层，水相去废水处理，酮相转入进入下一步浓缩。将萃取酮相真空浓缩，真空度控制在-0. 05 - -0. 06Mpa,浓缩温度控制在40 —500C。浓缩至原体积的30-40%为止。3、合成与精制
将浓缩液转入合成反应釜，冷却至30°C以下，加入截短侧耳素质量I倍的对甲苯磺酰氯，用氢氧化钠调节pH为11 — 12后,继续搅拌I. 5h,控制反应温度为20°C。反应完全后，静置分层，水相转去废水处理，酮相转入下一步合成。向反应釜中加入四丁基溴化铵，四丁基溴化铵的加入量为截短侧耳素质量的2倍；继续加入二乙胺基乙硫醇，二乙胺基乙硫醇的加入量为截短侧耳素的I倍；缓慢搅拌，用氢氧化钠调pH值为9 — 10，保持反应温度50°C,反应I. 5h。反应结束后，加入2-3倍体积的水萃取两次，静置分层，弃去水相，酮相经0. 5微米膜过滤后，真空浓缩，真空度控制在-0. 04 - -0. 05Mpa，浓缩温度控制在40 — 50°C。最终泰妙碱含量达82%。实施例2
1、发酵液过滤与菌丝干燥步骤同实施例I
2、干菌丝浸提、萃取与浓缩
将截短侧耳素干菌丝用甲醇分两次浸提，第一次加入甲醇的体积为干菌丝质量的6倍，第二次加入甲醇的体积为干菌丝质量的5倍，合并两次浸提液，真空浓缩至原体积的40 — 50% o将浓缩液转入萃取罐，加入丙酮萃取两次，第一次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的6倍，第二次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的5倍。萃取结束后，静置分层，水相去废水处理，酮相转入进入下一步浓缩。将萃取酮相真空浓缩，真空度控制在-0. 05 - -0. 06Mpa,浓缩温度控制在40 —50°C。浓缩至原体积的30-40%为止。3、合成与精制步骤同实施例I 最终泰妙碱含量达87%。实施例3
1、发酵液过滤与菌丝干燥步骤同实施例I
2、干菌丝浸提、萃取与浓缩
将截短侧耳素干菌丝用甲醇分两次浸提，第一次加入甲醇的体积为干菌丝质量的7倍，第二次加入甲醇的体积为干菌丝质量的5倍，合并两次浸提液，真空浓缩至原体积的40 — 50% o将浓缩液转入萃取罐，加入丙酮萃取两次，第一次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的7倍，第二次萃取加入丙酮的体积为浓缩液体积的5倍。萃取结束后，静置分层，水相去废水处理，酮相转入进入下一步浓缩。将萃取酮相真空浓缩，真空度控制在-0. 05 - -0. 06Mpa,浓缩温度控制在40 —50°C。浓缩至原体积的30-40%为止。3、合成与精制步骤同实施例I 最终泰妙碱含量达85%。实施例4
I、发酵液过滤与菌丝干燥步骤同实施例I2、干菌丝浸提、萃取与浓缩步骤同实施例2
3、合成与精制
将浓缩液转入合成反应釜，冷却至30°C以下，加入截短侧耳素质量I. I倍的对甲苯磺酰氯，用氢氧化钠调节PH为11 - 12后，继续搅拌I. 5h，控制反应温度为20°C。反应完全后，静置分层，水相转去废水处理，酮相转入下一步合成。向反应釜中加入四丁基溴化铵，四丁基溴化铵的加入量为截短侧耳素质量的2. 5倍；继续加入二乙胺基乙硫醇，二乙胺基乙硫醇的加入量为截短侧耳素的I. I倍；缓慢搅拌，用氢氧化钠调PH值为9 一 10，保持反应温度50°C，反应I. 5h。反应结束后，加入2 — 3倍体积的水萃取两次，静置分层，弃去水相，酮相经0. 5微 米膜过滤后，真空浓缩，真空度控制在-0. 04 - -0. 05Mpa，浓缩温度控制在40 — 50°C。最终泰妙碱含量达88%。实施例5
1、发酵液过滤与菌丝干燥步骤同实施例I
2、干菌丝浸提、萃取与浓缩步骤同实施例2
3、合成与精制
将浓缩液转入合成反应釜，冷却至30°C以下，加入截短侧耳素质量I. 2倍的对甲苯磺酰氯，用氢氧化钠调节PH为11 - 12后，继续搅拌I. 5h，控制反应温度为20°C。反应完全后，静置分层，水相转去废水处理，酮相转入下一步合成。向反应釜中加入四丁基溴化铵，四丁基溴化铵的加入量为截短侧耳素质量的3倍；继续加入二乙胺基乙硫醇，二乙胺基乙硫醇的加入量为截短侧耳素的I. 2倍；缓慢搅拌，用氢氧化钠调PH值为9 一 10，保持反应温度50°C，反应I. 5h。反应结束后，加入2 — 3倍体积的水萃取两次，静置分层，弃去水相，酮相经0. 5微米膜过滤后，真空浓缩，真空度控制在-0. 04 - -0. 05Mpa，浓缩温度控制在40 — 50°C。最终泰妙碱含量达90%。实施例6
1、发酵液过滤与菌丝干燥步骤同实施例I
2、干菌丝浸提、萃取与浓缩步骤同实施例2
3、合成与精制
将浓缩液转入合成反应釜，冷却至30°C以下，加入截短侧耳素质量I. 2倍的对甲苯磺酰氯，用氢氧化钠调节PH为11 - 12后，继续搅拌lh，控制反应温度为30°C。反应完全后，静置分层，水相转去废水处理，酮相转入下一步合成。向反应釜中加入四丁基溴化铵，四丁基溴化铵的加入量为截短侧耳素质量的3倍；继续加入二乙胺基乙硫醇，二乙胺基乙硫醇的加入量为截短侧耳素的I. 2倍；缓慢搅拌，用氢氧化钠调pH值为9 — 10，保持反应温度60°C,反应Ih。反应结束后，加入2-3倍体积的水萃取两次，静置分层，弃去水相，酮相经0. 5微米膜过滤后，真空浓缩，真空度控制在-0. 04 - -0. 05Mpa，浓缩温度控制在40 — 50°C。最终泰妙碱含量达88%。
权利要求
1.一种泰妙菌素碱的制备方法，其特征是首先将截短侧耳素发酵液过滤，将菌丝干燥，然后用甲醇作溶剂进行浸提，浸提液真空浓缩后用丙酮萃取，浓缩萃取液，将浓缩液转入合成反应釜，加入对甲苯磺酰氯，在PHll - 12、反应温度20 - 30°C下进行合成反应，反应完全后，静置分层，所得酮相中依次加入四丁基溴化铵和二乙胺基乙硫醇，在PH9 - 10、反应温度50 - 60°C下充分反应后，加水萃取，弃去水相，酮相经过滤后，真空浓缩至原体积的60-70%,得泰妙菌素喊。
2.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述截短侧耳素发酵液过滤是向发酵液中加入5-10%体积的水搅拌，然后进板框压滤机过滤，至基本无滤液流出时，用空气将滤饼吹干。
3.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述菌丝干燥是指将滤饼破碎，用闪蒸机干燥至菌丝干燥失重不超过15 - 20%，控制进风温度在150 - 160°C，出风温度在90 - 100°C。
4.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述用甲醇作溶剂进行浸提两次，第一次加入甲醇的体积为干菌丝质量的5 — 7倍，第二次加入甲醇的体积为干菌丝质量的4 一 5倍。
5.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述浸提液真空浓缩至原体积的40 - 50%。
6.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述用丙酮萃取两次，第一次丙酮加入量为浓缩液体积的5 — 6倍，第二次丙酮加入量为浓缩液体积的4 一 5倍，萃取结束后，静置分层，水相去废水处理，酮相转入进入下一步浓缩。
7.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述浓缩萃取液是将萃取酮相真空浓缩至原体积的30-40%为止，真空度控制在-0. 05 - -0. 06Mpa，浓缩温度控制在 40 — 50°C。
8.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是所述对甲苯磺酰氯的加入量为浓缩液质量的I 一 I. 2倍量,反应I 一 I. 5小时。
9.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是所述四丁基溴化铵的加入量为酮相质量的2 — 3倍,二乙胺基乙硫醇的加入量为酮相质量的I 一 I. 2倍。
10.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述加水萃取时水的加入量为反应液体积的2 — 3倍。
11.按照权利要求I所述的泰妙菌素碱的制备方法，其特征是上述酮相过滤是采用.0.5微米膜过滤。
全文摘要
本发明涉及一种泰妙菌素碱的制备方法，该制备方法是首先将截短侧耳素发酵液过滤，将菌丝干燥，然后用甲醇作溶剂进行浸提，浸提液真空浓缩后用丙酮萃取，浓缩萃取液，将浓缩液转入合成反应釜，加入对甲苯磺酰氯，在pH11－12、反应温度20－30℃下进行合成反应，反应完全后，静置分层，所得酮相中依次加入四丁基溴化铵和二乙胺基乙硫醇，在pH9－10、反应温度50－60℃下充分反应，后加水萃取，弃去水相，酮相经过滤后，真空浓缩至原体积的60-70%，得泰妙菌素碱。本发明将原有工艺进行改进，减少了成盐结晶过程，直接将泰妙菌素碱用于制剂生产，从而降低了设备投资成本及生产成本，提高了产品质量，使泰妙菌素碱含量高达80－90%。该工艺生产过程中使用的有机溶剂均可以回收循环利用，减少了对环境的污染，具有一定的发展前景。
文档编号C07C323/52GK102675172SQ20121012718
公开日2012年9月19日 申请日期2012年4月27日 优先权日2012年4月27日
发明者周丽娜, 奇乃, 王 义, 赵伯龙 申请人:宁夏泰瑞制药股份有限公司