从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法

专利名称：从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法
技术领域：
本发明涉及从魔芋中提取有效物质的方法，特别是一种从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法。
背景技术：
魔芋是有益的碱性食品，对食用动物性酸性食品过多的人，搭配吃魔芋，可以达到食品酸、碱平衡，对人体健康有利；目前世界各地对魔芋的保健、医疗作用作了许多临床试验研究，结论基本一致，其中主要成分魔芋葡甘聚糖属水溶性半纤维素，其突出的营养保健 功能在于能发挥膳食纤维对营养不平衡的调节作用，它与白菜、芹菜等蔬菜类中所含非水溶性的纤维，进入人体后原形排出者不同，它能参与人体的代谢作用及影响肠道菌向有利于健康的方向变化；魔芋除含有大量葡甘聚糖外，还含有生物碱、果胶、17种人体所需的氨基酸和10种矿物质微量元素以及丰富的食物纤维，是生物界唯一含有大量葡甘聚糖的植物，对高血脂、高胆固醇、糖尿病、肥胖病、便秘症等现代富贵病具有很好的防治作用，是中老年人理想的健康食品，深受世界保健食品市场的青睐；在日本，魔芋早已成为席席必备的佳肴，被誉为“魔力食品”。魔芋葡甘聚糖还具有增稠、乳化、胶凝、粘结、保水等性能，其粉即可作为主料做成各种食品，也可作为食品添加剂以改善其它食品的品质，在食品工业中被用作增稠剂、悬乳齐U、乳化剂、稳定剂、品质改良剂等食品添加剂，广泛应用于粮食制品、肉制品、饮料、调味品、豆制品中；另外还可用于化妆品、纺织业、建筑业、食用膜、环境保护、文物保护等领域。由于魔芋的广泛用途以及世界各地对魔芋的认识，使得魔芋的市场需求越来越大，目前已形成日本市场、韩国及东南亚市场、欧美市场等三大市场。2006年国内外需鲜魔芋90万吨，而产量仅52万吨，远远无法满足需要。从20世纪80年代开始，中国魔芋开始了产业化发展，种植面积和加工生产量都在飞速发展，在生产的同时产生的大量魔芋飞粉，由于魔芋飞粉抗营养且含有异味，一般都废弃不用，不仅浪费，而且污染环境。但是，魔芋飞粉中神经酰胺的含量达O. 15%-0. 20%，与大豆、小麦等其他来源相比，含量相对较高。神经酰胺是生物体内重要的功能物质，具有抗肿瘤、抗肝病毒、降血脂、降血糖、减肥、抗衰老、美白等作用，广泛应用于医药保健品中，具有很高的实际应用价值。所以从魔芋飞粉中提取神经酰胺是一个很好的增加经济效益和社会效益的途径。在现有技术中，有很多提取魔芋神经酰胺的方法，专利申请号2011103279658公布了“一种从魔芋飞粉中制备神经酰胺的方法”，该方法用乙醇浸泡提取、石油醚萃取、用石油醚-乙酸乙酯通过硅胶柱梯度洗脱、然后用乙醇-水通过C18键合硅胶ODS柱梯度洗脱，最后得到神经酰胺含量达95%以上的样品，该方法虽然很好，但是由于最初提取方法问题，使得提取率不高；专利申请号2010105989816公布了 “魔芋神经酰胺极其提取方法”，该方法采用乙醇多次浸提，然后用乙酸乙酯萃取浓缩，再用乙醇、乙酸乙酯和石油醚反复溶解、萃取、浓缩，最后得到的神经酰胺产品含量太低。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种综合提取方法，提高对神经酰胺的提取率，然后采用适当的溶媒组合及其比例通过硅胶柱进行梯度洗脱提取高纯度的神经酰胺产品；以提高经济效益。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是一种从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法，由选料、综合提取、浓缩、萃取、梯度洗脱、干燥、再次梯度洗脱和干燥八大工序完成，具体方法如下。⑴选料收集魔芋飞粉，去掉杂质。⑵综合提取将魔芋飞粉用70%的乙醇溶液按照固液比为I :5-6的标准在70°C温度下搅拌浸泡10-20min，再用600W功率的超声波提取40min，然后再搅拌浸泡10_20min，接着将提取浸出液离心，取上清液；然后再将滤渣用95%的乙醇溶液按照固液比为I :4-5的标准在70°C温度下浸泡，用600W功率的超声波提取30min，然后再搅拌浸泡10_20min，接着将提取浸出液离心，取上清液，最后将两次上清液合并。.M农缩蒸馏回收乙醇，将残留液用旋转蒸发仪浓缩至黏稠状。⑷萃取将浓缩液用3-5倍体积的石油醚在60°C温度下搅拌萃取40-50min，然后静置分层30min，收集石油醚相；然后再重复两次；合并石油醚相，浓缩，获得神经酰胺浸膏。(5)梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用洗脱剂平衡后，将神经酰胺浸膏上样，采用石油醚-乙酸乙酯溶剂溶解并梯度洗脱，洗脱液的梯度变化秩序为石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液。(6)干燥蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后干燥得神经酰胺粗品。(7)再次梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用洗脱剂平衡后，将神经酰胺粗品用洗脱剂溶解后上样，采用乙醇-水为溶剂溶解并梯度洗脱，洗脱剂的梯度变化秩序为乙醇水=19:1至1:1体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液。(8)干燥蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后真空冷冻干燥得神经酰胺粉粒；经HPLC-ELSD检测，粉粒中神经酰胺的含量达95. 5%。本发明的有益效果是采用适当的乙醇浓度、固液比、温度、浸泡方法和时间、以及超声波提取，可以提高神经酰胺成分从魔芋飞粉中渗透出来的分量，提高提取率；再通过多次萃取和采用适当的溶媒组合及其比例通过硅胶柱进行梯度洗脱，可以提高神经酰胺的纯度，本发明从魔芋飞粉中提取神经酰胺的提取率达75%，纯度达95. 5%。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例I。取魔芋飞粉1kg，用70%的乙醇溶液5kg在70°C温度下搅拌浸泡lOmin，再用600W功率的超声波提取40min，然后再搅拌浸泡lOmin，然后将提取浸出液离心，取上清液；然后再将滤渣用95%的乙醇溶液4kg在70°C温度下浸泡，用600W功率的超声波提取30min，然后再搅拌浸泡lOmin，将提取浸出液离心，取上清液，最后将两次上清液合并；再蒸馏回收乙醇，将残留液用旋转蒸发仪浓缩得到黏稠状物质50. 5g ;然后用100毫升石油醚在60°C温度下搅拌萃取40min，然后静置分层30min，收集石油醚相；然后再重复两次；合并石油醚相，浓缩，获得神经酰胺浸膏23. 7g ;将硅胶湿法装柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脱剂平衡，将神经酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上样，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脱，梯度变化秩序为石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后干燥得神经酰胺粗品7. 12g ;再次梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用乙醇-水洗脱剂平衡后，将神经酰胺粗品用乙醇-水洗脱剂溶解后上样，采用乙醇-水为洗脱剂梯度洗脱，洗脱剂的梯度变化秩序为乙醇水=19:1至1:1体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后真空冷冻干燥得神经酰胺粉粒I. 21g ;经HPLC-ELSD检测，粉粒中神经酰胺的含量为95. 5%，原飞粉中神经酰胺的含量为O. 152%，提取率为76. 02%。 实施例2。取魔芋飞粉100kg，用70%的乙醇溶液600kg在70°C温度下搅拌浸泡15min，再用600W功率的超声波提取40min，然后再搅拌浸泡15min，然后将提取浸出液离心，取上清液；然后再将滤渣用95%的乙醇溶液500kg在70°C温度下浸泡，用600W功率的超声波提取30min，然后再搅拌浸泡15min，将提取浸出液离心，取上清液，最后将两次上清液合并；再蒸馏回收乙醇，将残留液用旋转蒸发仪浓缩得到黏稠状物质4. 97kg ;然后用10升石油醚在60°C温度下搅拌萃取45min，然后静置分层30min，收集石油醚相；然后再重复两次；合并石油醚相，浓缩，获得神经酰胺浸膏2. 25kg ;将硅胶湿法装柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脱剂平衡，将神经酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上样，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脱，梯度变化秩序为石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后干燥得神经酰胺粗品657g ;再次梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用乙醇-水洗脱剂平衡后，将神经酰胺粗品用乙醇-水洗脱剂溶解后上样，采用乙醇-水为洗脱剂梯度洗脱，洗脱剂的梯度变化秩序为乙醇水=19:1至1:1体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后真空冷冻干燥得神经酰胺粉粒118g ;经HPLC-ELSD检测，粉粒中神经酰胺的含量为95. 1%，原飞粉中神经酰胺的含量为O. 152%，提取率为73. 82%。实施例3。取魔芋飞粉1000kg，用70%的乙醇溶液5500kg在70°C温度下搅拌浸泡20min，再用600W功率的超声波提取40min，然后再搅拌浸泡20min，然后将提取浸出液离心，取上清液；然后再将滤渣用95%的乙醇溶液4500kg在70°C温度下浸泡，用600W功率的超声波提取30min,然后再搅拌浸泡20min，将提取浸出液离心，取上清液，最后将两次上清液合并；再蒸馏回收乙醇，将残留液用旋转蒸发仪浓缩得到黏稠状物质48. 9kg ;然后用100升石油醚在60°C温度下搅拌萃取50min，然后静置分层30min，收集石油醚相；然后再重复两次；合并石油醚相，浓缩，获得神经酰胺浸膏22. 2kg ;将硅胶湿法装柱并用石油醚-乙酸乙酯洗脱剂平衡，将神经酰胺浸膏用石油醚-乙酸乙酯溶解上样，采用石油醚-乙酸乙酯溶梯度洗脱，梯度变化秩序为石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后干燥得神经酰胺粗品6. 37 kg ;再次梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用乙醇-水洗脱剂平衡后，将神经酰胺粗品用乙醇-水洗脱剂溶解后上样，采用乙醇-水为洗脱剂梯度洗脱，洗脱剂的梯度变化秩序为乙醇水=19:1至1:1体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液，然后蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后真空冷冻干燥得神经酰胺粉粒1151g ；经HPLC-ELSD检测，粉粒中神经酰胺的含量为94. 8%，原飞粉中神经酰胺的含量为O. 152%，提取率为71. 79%。
权利要求
1.从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法，由选料、综合提取、浓缩、萃取、梯度洗脱、干燥、再次梯度洗脱和干燥八大工序完成，其特征在于具体方法如下 ⑴选料收集魔芋飞粉，去掉杂质； ⑵综合提取将魔芋飞粉用70%的乙醇溶液按照固液比为I :5-6的标准在70°C温度下搅拌浸泡10-20min，再用600W功率的超声波提取40min，然后再搅拌浸泡10_20min，接着将提取浸出液离心，取上清液；然后再将滤渣用95%的乙醇溶液按照固液比为I :4-5的标准在70°C温度下浸泡，用600W功率的超声波提取30min，然后再搅拌浸泡10_20min，接着将提取浸出液离心，取上清液，最后将两次上清液合并； 浓缩蒸馏回收乙醇，将残留液用旋转蒸发仪浓缩至黏稠状； ⑷萃取将浓缩液用3-5倍体积的石油醚在60°C温度下搅拌萃取40-50min，然后静置分层30min，收集石油醚相；然后再重复两次；合并石油醚相，浓缩，获得神经酰胺浸膏； (5)梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用洗脱剂平衡后，将神经酰胺浸膏上样，采用石油醚-乙酸乙酯溶剂溶解并梯度洗脱，洗脱液的梯度变化秩序为石油醚乙酸乙酯=19:1至1:19体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液； (6)干燥蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后干燥得神经酰胺粗品; ⑴再次梯度洗脱将硅胶湿法装柱并用洗脱剂平衡后，将神经酰胺粗品用洗脱剂溶解后上样，采用乙醇-水为溶剂溶解并梯度洗脱，洗脱剂的梯度变化秩序为乙醇水=19:1至1:1体积比，分步收集流出液，合并具有相同成分的流出液； ⑶干燥蒸馏回收溶剂，静置残留物析出白色絮状物，离心收集后真空冷冻干燥得神经酰胺粉粒。
全文摘要
从魔芋飞粉中提取神经酰胺的方法，由选料、综合提取、浓缩、萃取、梯度洗脱、干燥、再次梯度洗脱和干燥八大工序完成；其有益效果是采用适当的乙醇浓度、固液比、温度、浸泡方法和时间、以及超声波提取，可以提高神经酰胺成分从魔芋飞粉中渗透出来的分量，提高提取率；再通过多次萃取和采用适当的溶媒组合及其比例通过硅胶柱进行梯度洗脱，可以提高神经酰胺的纯度，本发明从魔芋飞粉中提取神经酰胺的提取率达75%，纯度达95.5%。
文档编号C07C235/08GK102675139SQ20121013320
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月3日 优先权日2012年5月3日
发明者周麟 申请人:重庆市彭水县天娇农业开发有限公司