斜生孔菌抗突变成分ssI的提取分离方法
【专利摘要】本发明公开了一种药用真菌斜生孔菌的功效成分ssI的提取分离方法。是以浓度为0.5～2％的盐酸溶液对斜生孔菌进行脱盐处理后，中和盐酸。分别采用乙醇、石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行逐级萃取分离。本提取分离方法包括斜生孔菌中盐分的脱盐处理，使用65～95％的乙醇溶液对脱盐后的斜生孔菌提取后，有机溶剂30～50％的石油醚、33～65％的醋酸乙酯、65～90％的正丁醇进行逐级提取分离，最终获得纯度较高的斜生孔菌的功效成分ssI。
【专利说明】斜生孔菌抗突变成分SSl的提取分离方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种药用真菌斜生孔菌的功效成分SSl的提取分离方法，特别采用盐酸对原料浸泡氨水中和的方式脱盐处理后采用乙醇、石油醚、醋酸乙酯、正丁醇为有机萃取溶剂，经过梯度逐级萃取获得纯度较高的斜生孔菌抗突变成分ssl。
【背景技术】
[0002]斜生孔菌[Inonotus obliguus (Fr) Pilat]在俄罗斯、波兰、芬兰等地是一种应用很广泛的要用真菌，英文名chaga。1955年，chaga被俄罗斯医学研究院用来治疗肿瘤，特别是消化系统和肺部肿瘤。16世纪至今，东欧一些国家的民间就用这种野生真菌的菌核来防治癌症。西伯利亚的Khanty人用这种真菌来预防和治疗心脏病、肝病、胃病和食道疾病等。近期研究表明，斜生孔菌能抑制艾滋病病毒(HIV-1)，抗辐射、并通过抑制蛋白质生物合成、抗有丝分裂及消除自由基活性等作用机制来抑制或延缓肿瘤细胞的生长和防治0-157大肠杆菌中毒。
[0003]斜生孔菌的使用主要以野生为主，野生的斜生孔菌主要生长在俄罗斯的西伯利亚地区、日本北海道、芬兰、等地。在我国吉林长白山地区和黑龙江张广才岭和大、小兴安岭地区有野生斜生孔菌生长。
[0004]生物学研究表明，斜生孔菌在野生状态下生长极为缓慢，野生的品种只有在活的桦树上生长10~15年才具有很高的药用价值，因此野生的斜生孔菌价格十分昂贵。美国也把它列为“特殊天然物”作为宇宙人的未来饮品。因此，斜生孔菌的研究及产品的开发具有十分广阔的应用前景。有研究报道斜生孔菌在提高免疫力、抗癌等方面作用的功效成分为斜生孔菌独有成分斜生孔菌抗突变成分ssl。
[0005]目前对斜生孔菌提取仅限于实验室中研究性的提取未能实现工业化提取生产，本发明采用有机溶剂逐级萃取，萃取后回收有机溶剂的方法从斜生孔菌中提取斜生孔菌抗突变成分ssl，斜生孔菌抗突变成分ssl的提取率高，有机溶剂回收反复使用，萃取过程中没有能源消耗适合于工业化生产斜生孔菌抗突变成分ssl。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于采用盐酸浸泡粉碎后的斜生孔菌进行脱盐处理后，使用氨水溶液中和加入的盐酸溶液使原料保持中性，将脱盐处理后的斜生孔菌使用有机溶剂乙醇、石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行逐级提取分离获得纯度较高的斜生孔菌抗突变成分ssl。
[0007]本发明提取分离方法是这样实现的，使用斜生孔菌重量I~5倍重量的0.5~3%的盐酸溶液浸泡粉碎后的斜生孔菌，盐酸浸泡后使用氨水中和加入的盐酸使其保持中性，向中和后的溶液中分别加入浓度65~99%的乙醇、30~50%的石油醚、33~65%的醋酸乙酯、65~90%的正丁醇进行逐级提取分离，获得纯度较高的桦褐孔菌素。具体提取分离过程如下:
[0008]1.向粉碎后过40~80目筛的斜生孔菌中加入其I~5倍重量0.5~2%的盐酸溶液浸泡10~24h脱去天然斜生孔菌中所含有的大量盐分，脱盐处理后向其中加入氨水溶液中和所加入的盐酸，使斜生孔菌保持中性。
[0009]2.向I得到的斜生孔菌中加入3~8倍量的浓度为65~99%的乙醇溶液提取4~8h，过滤后弃滤渣，加压回收加入的乙醇得到固体提取物。
[0010]3.将2得到的固体提取物溶解在3~8倍的水中，充分搅拌使固体提取物混悬于水中，制得悬浊液。
[0011]4.向3中加入3~5倍量的30~50%石油醚溶剂萃取溶液分层后，分离水层回收石油醚。
[0012]5.向4获得的水层中加入3~5倍量的33~65%的醋酸乙酯溶剂萃取，分离水层，醋酸乙酯回收。
[0013]6.向5水层中加入3~5倍量的65~90%正丁醇溶液萃取3~5次，溶液分层后分离取正丁醇层得固体白色结晶物即为斜生孔菌抗突变成分ssl。
[0014]本发明的有点
[0015]本发明斜生孔菌抗突变成分ssl提取分离方法，采用有机溶剂逐级萃取，萃取后回收有机溶剂的方法从斜生孔菌中提取斜生孔菌抗突变成分ssl，斜生孔菌抗突变成分ssl的提取率高，有机溶剂回收反复使用，萃取过程中没有能源消耗适合于工业化生产斜生孔菌抗突变成分 ssl。
【权利要求】
1.一种药用真菌斜生孔菌的功效成分SSl的提取分离方法，其特征在于使用浓度0.2~2%的盐酸溶液对斜生孔菌原料进行脱盐处理后中和加入的盐酸溶液。对脱盐处理后的桦褐孔菌分别使用浓度65~99%的乙醇、30~50%的石油醚、33~65%的醋酸乙酯、65~90%的正丁醇进行逐级提取分离。
2.根据权利要求1的要求，斜生孔菌的功效成分ssl的具体提取方法如下: 1)向粉碎后过40~80目筛的斜生孔菌中加入其I~5倍重量0.5~2%的盐酸溶液浸泡10~24h脱去天然斜生孔菌中所含有的大量盐分，脱盐处理后向其中加入氨水溶液中和所加入的盐酸，使斜生孔菌保持中性。 2)向I得到的斜生孔菌中加入3~8倍量的浓度为65~99%的乙醇溶液提取4~8h，过滤后弃滤渣，加压回收加入的乙醇得到固体提取物。 3)将2得到的固体提取物溶解在3~8倍的水中，充分搅拌使固体提取物混悬于水中，制得悬浊液。 4)向3中加入3~5倍量的30~50%石油醚溶剂萃取溶液分层后，分离水层回收石油醚。 5)向4获得的水层中加入3~5倍量的33~65%的醋酸乙酯溶剂萃取，分离水层，醋酸乙酯回收。 6)向5水层中加入3~5倍量的65~90%正丁醇溶液萃取3~5次，溶液分层后分离取正丁醇层得固体白色结晶物即为斜生孔菌的功效成分ssl。
【文档编号】C07C67/58GK103467295SQ201210185063
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2012年6月7日 优先权日:2012年6月7日
【发明者】马宏达, 康可新 申请人:马宏达