专利名称：一种墨西菊宁Ⅰ的制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种制备墨西菊宁I的方法。
背景技术：
墨西菊宁I (Mexieanin I ),分子式为C15H18O4,分子量为262. 31,是一种倍半職内酯类化合物，CAS登录号为5945-41-5。呈棱晶状(氯仿-甲醇)，mp. 257_260°C。在天然植物中普遍存在，主要分布于菊科多种植物中，如墨西哥山萝卜天人菊、苦味堆心菊、墨西哥堆心菊、鸦葱叶堆心菊、柔毛粗花葶膜质菊等植物。药理研究发现墨西菊宁I具有抗溃疡作用，另外还具有一定的细胞毒活性。经检索，尚未见大量制备墨西菊宁I的方法的文献和专利报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种墨西菊宁I的制备方法，其技术方案是
一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于所述方法由下列步骤组成
(1)取富含墨西菊宁I的植物干燥地上部分粉碎成粗粉，室温下用丙酮溶液组织破碎提取3-4次，每次10-20分钟，合并提取液，减压浓缩至浸膏；
(2)将浸膏用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行10-15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，得萃取物；
(3)将萃取物加水分散，通过大孔吸附树脂柱，乙醇水溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩得粗
品;
(4)将粗品用甲醇溶解，上样至硅胶目数为200-300的中压层析柱，用混合有机溶剂梯度洗脱，收集目标洗脱液，减压浓缩，低温干燥即得到墨西菊宁I。步骤(I)所述组织破碎提取用丙酮的浓度为50-80%，用量为原料质量的5-10倍量。步骤(3)所述乙醇水溶液梯度洗脱是依次采用体积百分比浓度为15-20%和60-80%乙醇水溶液进行梯度洗脱。步骤(4)所述中压柱柱压为O. 5-2. 4MPa，柱内径为80_180mm，层析柱径高比为1:10-20。步骤(4)所述混合有机溶剂为石油醚-乙酸乙酯(体积比为9:1-1:9)或正己烷-丙酮(体积比为9:1-1:9)。本发明的有益效果是
1、本发明采用多级逆流萃取，实现了溶剂与原料液的逆流接触，浓度梯度大，提取推动力大，萃取效率高，易于规模化生产；
2、本发明的层析柱上样量大，生产周期短，分离度好，产品纯度高。
具体实施例方式 本发明内容通过以下的实施例作进一步的阐述，但并不限制本发明的范围。
实施例I :
将墨西哥山罗比天人菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用5倍量50%的丙酮溶液提取3次，每次lOmin，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为15%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为75%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集75%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径80mm，径高比1:20的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集正己烷-丙酮体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体6. 7g，经HPLC检测，含量为91.8%。实施例2:
将墨西哥山罗比天人菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用8倍量65%的丙酮溶液提取4次，每次20min，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲 醇混合溶液进行进行10级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为15%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为80%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集80%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径100mm，径高比1:15的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集正己烷-丙酮体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体5. Sg,经HPLC检测，含量为96. 2%。实施例3:
将鸦葱叶堆心菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用5倍量70%的丙酮溶液提取3次，每次15min，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行12级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为15%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为65%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集65%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径150mm，径高比1:20的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集正己烷-丙酮体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体3. 9g，经HPLC检测，含量为95. 3%。实施例4:
将墨西哥山罗比天人菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用10倍量50%的丙酮溶液提取4次，每次20min，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行14级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为15%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为60%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集60%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径180mm，径高比I 20的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集正己烷-丙酮体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体5. 9g，经HPLC检测，含量为95. 8%。实施例5:
将墨西哥山罗比天人菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用6倍量60%的丙酮溶液提取3次，每次20min，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为20%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为60%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集60%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径120mm，径高比1:12的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体6. 2g，经HPLC检测，含量为92. 7%。 实施例6:
将柔毛粗花葶膜质菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用10倍量80%的丙酮溶液提取3次，每次15min，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行12级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为20%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为70%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集70%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径100mm，径高比1:14的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体5. Sg，经HPLC检测，含量为93. 6%。实施例7:
将柔毛粗花葶膜质菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用8倍量75%的丙酮溶液提取4次，每次lOmin，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行13级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为20%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为80%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集80%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径80mm，径高比1:10的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体5. 4g，经HPLC检测，含量为95. 5%。实施例8:
将墨西哥山罗比天人菊干燥地上部分IOkg室温下在闪式提取器中用5倍量80%的丙酮溶液提取4次，每次lOmin，合并提取液，减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行进行15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，所得萃取物加水分散，通过预处理过的大孔吸附树脂柱吸附，先用体积百分比浓度为20%的乙醇溶液洗脱，至流出液无色，再用体积百分比浓度为75%的乙醇溶液洗脱至流出液无色，收集75%乙醇洗脱液减压回收乙醇，浓缩干燥得样品。称取200-300目经活化的硅胶加入到内径180mm，径高比1:10的不锈钢层析柱中，上述粗品加入甲醇超声使全部溶解，用泵进样，用正己烷-丙酮混合溶液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比9:1-1:9的洗脱流分，GC-MS跟踪监测，合并墨西菊宁I洗脱液，减压浓缩，低温干燥得到墨西菊宁I晶体6. 2g，经HPLC检测，含量为94. 2%。 ·
权利要求
1.一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于所述方法由下列步骤组成 (1)取富含墨西菊宁I的植物干燥地上部分粉碎成粗粉，室温下用丙酮溶液组织破碎提取3-4次，每次10-20分钟，合并提取液，减压浓缩至浸膏； (2)将浸膏用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶液进行10-15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，得萃取物； (3)将萃取物加水分散，通过大孔吸附树脂柱，乙醇水溶液梯度洗脱，洗脱液浓缩得粗品; (4)将粗品用甲醇溶解，上样至硅胶目数为200-300的中压层析柱，用混合有机溶剂梯度洗脱，收集目标洗脱液，减压浓缩，低温干燥即得到墨西菊宁I。
2.根据权利要求I所述的一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于步骤(I)所述组织破碎提取用丙酮的浓度为50-80%，用量为原料质量的5-10倍量。
3.根据权利要求I所述的一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于步骤(3)所述乙醇水溶液梯度洗脱是依次采用体积百分比浓度为15-20%和60-80%乙醇水溶液进行梯度洗脱。
4.根据权利要求I所述的一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于步骤(4)所述中压柱柱压为O. 5-2. 4MPa，柱内径为80_180mm，层析柱径高比为1:10-20。
5.根据权利要求I所述的一种墨西菊宁I的制备方法，其特征在于步骤(4)所述混合有机溶剂为石油醚-乙酸乙酯(体积比为9:1-1:9)或正己烷-丙酮(体积比为9:1-1:9)。
全文摘要
本发明涉及一种墨西菊宁Ⅰ的制备方法。工艺步骤为取富含墨西菊宁Ⅰ的植物地上部分用丙酮组织破碎提取，提取液减压浓缩至浸膏，用比例为8:2的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂进行多级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，通过大孔吸附树脂柱，洗脱液浓缩得粗品，上样至硅胶为200-300目的中压层析柱，用混合有机溶剂梯度洗脱，收集墨西菊宁Ⅰ流分，减压浓缩，低温干燥即得到墨西菊宁Ⅰ。采用本发明制备墨西菊宁Ⅰ，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D307/93GK102863416SQ20121036282
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月26日 优先权日2012年9月26日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司