专利名称：一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法
技术领域：
本发明涉及一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法，具体而言是涉及一种采用高速逆流色谱仪分离纯化桥环黄皮酰胺的方法。
背景技术：
桥环黄皮酰胺(Cycloclausenamide),分子式为C18H17NO2,分子量为279.34。为无色棒状结晶(甲醇)，mp. 164-166°C。主要来源于芸香科植物黄皮lansium (Lour.)Skeels的叶中，是一种吡咯生物碱。药理研究表明桥环黄皮酰胺具有保肝作用，对CCl4中毒的小鼠有降谷丙转氨酶作用。目前桥环黄皮酰胺多为通过化学合成制备而得，生物活性受到限制，副产物较多，因此提供一种从植物提取纯化桥环黄皮酰胺的方法具有一定的意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法，该法采用高速逆流色谱分离制备桥环黄皮酰胺，产品收率高、纯度高。为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的
一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法，其特征在于包括以下步骤取黄皮叶粉碎，加适量氨水拌匀氨化4-15小时，再加3-6倍量65-90%甲醇溶液于30_50°C条件下恒温浸泡2-3次，每次12-48小时，浸提液过滤，浓缩成浸膏，加氯仿溶液超声溶解，收集氯仿层，回收氯仿，固体物以氯仿-甲醇-0. 5%盐酸为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离纯化，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥即得桥环黄皮酰胺纯品。所述的氨水为2-10%氨水，用量为药材量的20-30%。所述氯仿用量为浸膏量的0.5-2倍。所述的高速逆流色谱条件为溶剂系统为氯仿-甲醇-0.5%盐酸，体积比为2:2: 3，以上相为固定相，下相为流动相。本发明优势在于工艺采用一定温度浸泡，提高了药材有效成分的浸出率；高速逆流分配色谱分离是一种无样品损失的高效的分离方法，制备周期短，制备量大。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取黄皮叶粉碎，称量2000g，加460ml的5%氨水拌匀氨化10小时后，加7L85%甲醇溶液于45°C条件下恒温浸泡12小时，滤过，再加6L85%甲醇浸泡2次，合并提取液滤过，减压浓缩至小体积，加0. 5倍量的氯仿溶液超声溶解，静置分层后，收集氯仿层，回收氯仿，得固形物。取氯仿、甲醇、0.5%盐酸，按2:2:3比例混合，取上相做固定相注入高速逆流色谱仪，转速800r/min,下相为流动相,流速2ml/min,甲醇溶解样品,进样分离样品，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥，得桥环黄皮酰胺，含量经高效液相色谱检测为88. 5%。实施例2:
取黄皮叶粉碎，称量2000g，加600ml的6%氨水拌匀氨化4小时后，加10L90%甲醇溶液于50°C条件下恒温浸泡48小时，滤过，再加8L90%甲醇浸泡I次，合并提取液滤过，减压浓缩至小体积，加I. 5倍量的氯仿溶液超声溶解，静置分层后，收集氯仿层，回收氯仿，得固形物。取氯仿、甲醇、0.5%盐酸，按2:2:3比例混合，取上相做固定相注入高速逆流色谱仪，转速820r/min,下相为流动相,流速2. 5ml/min,甲醇溶解样品,进样分离样品，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥，得桥环黄皮酰胺，含量经高效液相色谱检测为86. 3%。实施例3:
取黄皮叶粉碎，称量2000g，加400ml的2%氨水拌匀氨化8小时后，加12L70%甲醇溶液于45°C条件下恒温浸泡36小时，滤过，再加10L70%甲醇浸泡I次，合并提取液滤过，减压 浓缩至小体积，加等倍量的氯仿溶液超声溶解，静置分层后，收集氯仿层，回收氯仿，得固形物。取氯仿、甲醇、0.5%盐酸，按2:2:3比例混合，取上相做固定相注入高速逆流色谱仪，转速850r/min,下相为流动相,流速3ml/min,甲醇溶解样品,进样分离样品，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥，得桥环黄皮酰胺，含量经高效液相色谱检测为92. 6%。实施例4:
取黄皮叶粉碎，称量2000g，加500ml的10%氨水拌匀氨化15小时后，加6L65%甲醇溶液于45°C条件下恒温浸泡24小时，滤过，再加5L65%甲醇浸泡2次，合并提取液滤过，减压浓缩至小体积，加2倍量的氯仿溶液超声溶解，静置分层后，收集氯仿层，回收氯仿，得固形物。取氯仿、甲醇、0.5%盐酸，按2:2:3比例混合，取上相做固定相注入高速逆流色谱仪，转速800r/min,下相为流动相,流速4ml/min,甲醇溶解样品,进样分离样品，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥，得桥环黄皮酰胺，含量经高效液相色谱检测为90. 4%。
权利要求
1.一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法，其特征在于包括以下步骤取黄皮叶粉碎，加适量氨水拌匀氨化4-15小时，再加3-6倍量65-90%甲醇溶液于30_50°C条件下恒温浸泡2-3次，每次12-48小时，浸提液过滤，浓缩成浸膏，加氯仿溶液超声溶解，收集氯仿层，回收氯仿，固体物以氯仿-甲醇-O. 5%盐酸为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离纯化，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥即得桥环黄皮酰胺纯品。
2.按照权利要求I所述桥环黄皮酰胺的制备方法，其特征在于步骤所述的氨水为2-10%氨水，用量为药材量的20-30%。
3.根据权利要求I所述桥环黄皮酰胺的制备方法，其特征在于步骤所述氯仿用量为浸膏量的O. 5-2倍。
4.根据权利要求I所述桥环黄皮酰胺的制备方法，其特征在于步骤所述的高速逆流色谱条件为溶剂系统为氯仿-甲醇-O. 5%盐酸，体积比为2:2:3，以上相为固定相，下相为流动相。
全文摘要
本发明提供一种从黄皮中提取纯化桥环黄皮酰胺的方法。该方法以黄皮叶为原料，粉碎，加适量氨水拌匀氨化4-15小时，再加3-6倍量65-90%甲醇溶液浸泡2-3次，浸泡液滤过，浓缩成浸膏，加氯仿溶液超声溶解，收集氯仿层，回收氯仿，固体物以氯仿-甲醇-0.5%盐酸为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离纯化，收集桥环黄皮酰胺流分，回收试剂，低温真空干燥即得桥环黄皮酰胺纯品。该方法适合高纯度的桥环黄皮酰胺的制备。
文档编号C07D491/08GK102827173SQ201210373268
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司