专利名称：草莓多酚的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种草莓多酚的制备方法，属于植物提取技术领域。
背景技术：
草莓是对蔷薇科草莓属植 物的通称，属多年生草本植物，是世界十大水果之一，在世界各类浆果中栽培面积和产量仅次于葡萄，位于第二位。在我国各地广有栽培，种植面积达150万亩，年产草莓约为150万吨，种植面积和产量均居世界第一位。目前对草莓中活性物质的研究主要集中在抗坏血酸、花青素等成分，实际上草莓中的多酚含量也非常高，用福林酚测定法证明，草莓中的总多酚含量可达到干重的25 mg/g，这在果蔬原料中多酚的含量是非常高的。研究表明草莓中的多酚主要包括花青素、槲皮素、异槲皮素、儿茶酚、香豆酸、糅花酸、酚酸、堪非醇及其衍生物等。Link (2010)等研究认为多酚可预防癌症的发生。Leifert (2008)等研究认为多酚可降低低密度脂蛋白胆固醇的氧化及血小板的凝集，预防心血管疾病，包括抗动脉粥硬化、心率失调等作用，具有很强的抗氧化活性。多酚是植物体内复杂的酚类次生代谢产物，具有多元酚结构，主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。多酚类物质作为人类“第七类营养素”逐渐受到重视，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抑菌等多种活性。目前已经公开有从苹果提取苹果多酚、从茶叶中提取茶多酚的方法；但是由于各种植物、水果中所含的多酚的化学成分并不完全相同，因此从不同植物中提取多酚的方法不能一概而论。但是没有公开从草莓中提取草莓多酚的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种草莓多酚的制备方法。一种草莓多酚的制备方法，包括以下步骤
(1)将草莓打成浆，冷冻干燥成粉状，得草莓粉；
(2)向草莓粉中加水溶解，然后加入纤维素酶，在300-400HZ的超声波作用下使草莓粉充分酶解，过滤得草莓残渣；每克草莓粉需加入5-10mg纤维素酶；
(3)超声萃取向草莓残渣中加入10 30倍其体积的、质量浓度为50-80%的乙醇溶液，在20 50°C条件下，以300 600Hz超声萃取30_60min，然后过滤得萃取液；超声萃取2-3次，合并萃取液、过滤，浓缩到原体积的1/10 1/5，得草莓多酚粗体液；
(4)用质量浓度10%的甲醇溶液将草莓多酚粗体液的浓度调节为2 4mg/ml;然后用HP-20大孔吸附树脂层析柱对其进行层析，流速为5ml/3min ;然后使用浓度为50 90%的乙醇溶剂，以5ml/3min的流速进行洗脱，取洗脱液；
(5)将洗脱液浓缩到原体积的1/5 1/2，冷冻干燥后得到草莓多酚粉末。在上述草莓多酚的制备方法中，为了使草莓粉中的纤维素被纤维素酶充分酶解；优选的，步骤(2)中，草莓粉酶解的时间为10-20min。更优选的，每克草莓粉加水10/3g、加纤维素酶5mg，超声频率为400Hz，酶解时间为20min。
在上述草莓多酚的制备方法中，为了提高萃取效果，步骤(3)中优选的超声萃取条件为，乙醇溶液的浓度为50%，其用量为15倍草莓残渣的体积；温度为25°C，超声频率400Hz，超声萃取时间为60min ;重复萃取2次；萃取液浓缩后的体积为原体积的1/5。在上述草莓多酚的制备方法中，为了提高层析效果，步骤(4)中，所述草莓多酚粗体液的浓度优选为2mg/ml ;层析时，层析柱中草莓多酚粗提液的体积优选为层析柱树脂层的3-5倍；洗脱时，乙醇溶液的体积优选为3 5倍的层析柱树脂层体积。有益效果
本发明将草莓中的多酚通过超声萃取、超滤、大孔树脂纯化等多部工艺进行纯化可使多酚的纯度到达75%以上，具有提取时间短、温度低、提取率高，安全、无污染等优点。
具体实施例方式下面结合实例，对本发明做进一步的描述。 实施例I
将新鲜的草莓打碎成浆，然后冷冻干燥成粉状，既得草莓粉；
取3g草莓粉，用IOml的水溶解，然后加入15mg纤维素酶，以400Hz的超声频率超声20min，然后过滤得草莓残渣；
超声萃取向草莓残渣中加入10倍草莓残渣体积的、质量浓度为50%乙醇溶液，常温条件下，以400Hz的超声频率超声萃取Ih后取萃取液；
超声萃取两次；合并萃取液，过滤，浓缩到原体积的1/5，得到草莓多酚粗提液；
用HP-20大孔树脂吸附层析柱纯化草莓多酚粗提液向草莓多酚粗提液中加入质量浓度为10%的甲醇溶液，将草莓多酚粗提液的浓度调节为2mg/ml ;将草莓多酚的甲醇溶液加入层析柱，使其体积为3倍树脂层的体积，以5ml/3min的流速过柱；然后进行洗脱，选择质量浓度为80%的乙醇溶液作为洗脱剂加入层析柱，使乙醇溶液的体积为3倍树脂层的体积，乙醇溶液以5ml/3min的洗脱速度过柱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩到原体积的1/3，然后冷冻干燥得到草莓多酚粉末。实施例2
将新鲜的草莓打碎成浆，然后冷冻干燥成粉状，既得草莓粉；
取3g草莓粉，用IOml的水溶解，然后加入30mg纤维素酶，以300Hz的超声频率超声lOmin，然后过滤得草莓残渣；
超声萃取向草莓残渣中加入20倍草莓残渣体积的、质量浓度为80%乙醇溶液，常温条件下，以600Hz的超声频率超声萃取45min后取萃取液；
超声萃取两次；合并萃取液，过滤，浓缩到原体积的1/7，得到草莓多酚粗提液；
用HP-20大孔树脂吸附层析柱纯化草莓多酚粗提液向草莓多酚粗提液中加入质量浓度为10%的甲醇溶液，将草莓多酚粗提液的浓度调节为3mg/ml ;将草莓多酚的甲醇溶液加入层析柱，使其体积为5倍树脂层的体积，以5ml/3min的流速过柱；然后进行洗脱，选择质量浓度为55%的乙醇溶液作为洗脱剂加入层析柱，使乙醇溶液的体积为5倍树脂层的体积，乙醇溶液以5ml/3min的洗脱速度过柱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩到原体积的1/5，然后冷冻干燥得到草莓多酚粉末。实施例3将新鲜的草莓打碎成浆，然后冷冻干燥成粉状，既得草莓粉；
取3g草莓粉，用IOml的水溶解，然后加入20mg纤维素酶，以400Hz的超声频率超声15min，然后过滤得草莓残渣；
超声萃取向草莓残渣中加入30倍草莓残渣体积的、质量浓度为60%乙醇溶液，50°C条件下，以500Hz的超声频率超声萃取35min后取萃取液；
超声萃取两次；合并萃取液，过滤，浓缩到原体积的1/10，得到草莓多酚粗提液；
用HP-20大孔树脂吸附层析柱纯化草莓多酚粗提液向草莓多酚粗提液中加入质量浓度为10%的甲醇溶液，将草莓多酚粗提液的浓度调节为3mg/ml ;将草莓多酚的甲醇溶液加入层析柱，使其体积为4倍树脂层的体积，以5ml/3min的流速过柱；然后进行洗脱，选择质量浓度为85%的乙醇溶液作为洗脱剂加入层析柱，使乙醇溶液的体积为5倍树脂层的体积，乙醇溶液以5ml/3min的洗脱速度过柱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩到原体积的1/5，然 后冷冻干燥得到草莓多酚粉末。
权利要求
1.一种草莓多酚的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)将草莓打成浆，冷冻干燥成粉状，得草莓粉； (2)向草莓粉中加水溶解，然后加入纤维素酶，在300-400HZ的超声波作用下使草莓粉充分酶解，过滤得草莓残渣；每克草莓粉加入5-10mg纤维素酶； (3)超声萃取向草莓残渣中加入10 30倍其体积的、质量浓度为50-80%的乙醇溶液，在20 50°C条件下，以300 600Hz超声萃取30_60min，过滤得萃取液；超声萃取2_3次，合并萃取液、过滤，浓缩到原体积的1/10 1/5，得草莓多酚粗体液； (4)用质量浓度10%的甲醇溶液将草莓多酚粗体液的浓度调节为2 4mg/ml;然后用HP-20大孔吸附树脂层析柱对其进行层析，流速为5ml/3min ;然后使用浓度为50 90%的乙醇溶剂，以5ml/3min的流速进行洗脱，取洗脱液； (5)将洗脱液浓缩到原体积的1/5 1/2，冷冻干燥后得草莓多酚粉末。
2.根据权利要求I所述的草莓多酚的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，草莓粉酶解时间为10-20min。
3.根据权利要求I或2所述的草莓多酚的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，每克草莓粉加水10/3g、加纤维素酶5mg，超声频率为400Hz，酶解时间为20min。
4.根据权利要求3所述的草莓多酚的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，乙醇溶液的浓度为50%，其用量为15倍草莓残渣的体积；温度为25°C，超声频率400Hz，超声萃取时间为60min ;重复萃取2次；萃取液浓缩后的体积为原体积的1/5。
5.根据权利要求4所述的草莓多酚的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述草莓多酚粗体液的浓度为2mg/ml ;层析柱中草莓多酚粗提液的体积为层析柱树脂层的3-5倍；层析柱中乙醇溶液的体积为3 5倍的层析柱树脂层体积。
全文摘要
本发明涉及一种草莓多酚的制备方法，属于植物提取技术领域。先将草莓打浆，冷冻干燥成粉；然后加水溶解，在超声波作用下纤维素酶解；过滤后将草莓残渣用乙醇溶解，超声萃取2-3次，浓缩得草莓多酚粗体液；然后用大孔吸附树脂层析柱对其进行层析，冷冻干燥后得到草莓多酚粉末。本发明将草莓中的多酚通过超声萃取、超滤、大孔树脂纯化等多部工艺进行纯化可使多酚的纯度到达75%以上，具有提取时间短、温度低、提取率高，安全、无污染等优点。
文档编号C07G99/00GK102924536SQ20121043737
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月6日 优先权日2012年11月6日
发明者程安玮, 陈相艳, 王文亮, 弓志青, 柳尧波, 石贤权 申请人:山东省农业科学院农产品研究所