来自野野村菌的环肽、其制备方法以及含有该环肽的用于预防或治疗分支杆菌相关疾病 ...的制作方法
【专利摘要】本发明涉及来自野野村菌MJM5123的新型抗TB环肽，一种生产该抗结核病肽的方法以及用于预防和治疗分支杆菌感染的包含该环肽的药物组合物。本发明的组合物对复制/非复制结核分支杆菌包括MDR和XDR菌株有很高的活性，因此其能有效地用作结核病的治疗剂。
【专利说明】来自野野村菌的环肽、其制备方法以及含有该环肽的用于 预防或治疗分支杆菌相关疾病的药物组合物
【技术领域】
[0001] 本申请要求于2011年4月18日提交的申请号为US61/476, 473和2011年7月29 日提交的申请号为US61/513,403和2011年11月3日提交的申请号为US61/555,257以及 2012年3月7日提交的申请号为US61/607, 934的美国临时专利申请的权益，其全部公开内 容通过引用并入到本文中。
[0002] 本发明涉及新的抗分支杆菌肽，其对复制/非复制结核分支杆菌（Mycobacterium tuberculosis)和包括多重耐药（MDR)和广泛耐药（XDR)结核病的耐药结核分支杆菌 (M. tuberculosis)在内的各种耐药结核分支杆菌菌株具有高活性。本发明还涉及一种培养 野野村菌（Nonomuraea sp. )MJM5123菌株以制备抗分支杆菌肽的发酵方法，以及生产抗分 支杆菌肽的方法和用于预防和/或治疗结核病的含有本发明的抗分支杆菌肽的药物组合 物。
【背景技术】
[0003] 结核分支杆菌是一种大的复杂的引起人类和其他哺乳动物结核病（TB)病的细菌。 TB是一种通过呼吸途径在人与人之间传播的高传染性疾病。
[0004] 在2009年，有940万新的TB病例，包括110万携带HIV的病例和30万MDR-TB [WHO Actions For Life-Towards a world free of tuberculosis;World Health Organizati on:Geneva, Switzerland, 2006 (世界卫生组织呼吁为生命的行动一迈向无结核病世界）]。 MDR-TB需要的治疗时间从6个月延长到至少2年。世界各地的MDR结核分支杆菌菌株中的 广泛耐药TB(XDR-TB)的流行率估计有6. 6%[WH0Actions For Life-Towards a world free of tuberculosis;World Health Organization:Geneva, Switzerland, 2006 (世界卫生组 织呼吁为生命的行动一迈向无结核病世界）]。
[0005] 尽管对该传染病已有深刻的认识，但MDR-TB以及XDR-TB的流行率继续增长[WHO Anti-tuberculosis drug resistance in the world_Report#4· 2008 (世界卫生组织全球 抗结核病药耐药性报道)]。现有的化学疗法很难或者几乎不能医治快速出现的MDR和XDR 结核病菌株。这些菌株对全球造成重大的健康威胁，特别是在发展中国家和HIV/AIDS流行 率日渐增长的国家[Koenig, R. Drug-resistant tuberculosis. In South Africa, XDR TB and HIV prove a deadly combination. Science2008, 319, 894-897 (耐药结核病）]。
[0006] 感染有潜伏TB感染（LTBI)的大部分人能够遏制该杆菌引发症状，并且没有感 染其他人的风险。除了明显的药物或疾病介导的免疫抑制以外，对于什么引发LTBI发 展成活跃的ΤΒ疾病知之甚少，而一旦ΤΒ能避开免疫防护，则认为已发展成活跃的ΤΒ疾 病。营养不良和/或有营养缺陷的孩子和成年人有更高的疾病进展风险。2008年，ΤΒ夺 去了 182万人的生命，其中50万发生在感染HIV的人中间，这成为感染HIV人群的主要 死因 [World Health Organization. Global tuberculosis control: a short update to the2009report. Geneva, Switzerland:World Health Organization, 2009 (全球结核病控 制）]。
[0007] 因此，迫切需要研发新的抗TB药物，优选具有新的作用机制的抗TB药物。
【发明内容】
[0008] 技术问题
[0009] 本发明的一个目的是，提供对复制/非复制结核分支杆菌和许多耐药结核分支杆 菌具有活性的新型抗TB肽。
[0010] 本发明的另一个目的是，提供一种生产该抗结核病肽的方法和该抗TB肽在预防 和/或治疗各种分支杆菌感染的药物组合物中的用途。技术方案 [0011] 为了实现以上目的，本发明提供了从野野村菌MJM5123菌株分离的环肽。在本发 明的优选实施方案中，本发明的环肽具有以下化学式1或者化学式2 :
[0012] 化学式 1 :H-14
[0013]
【权利要求】
1. 从野野村菌MJM5123菌株(保藏号：KCTC12178BP)分离的具有化学式1或化学式2 的环肽： 化学式1 :H-14
2. 用于预防或治疗分支杆菌（Mycobacterium spp.)相关疾病的药物组合物，包含作 为活性成分的具有化学式1和/或化学式2的化合物， 化学式1 :H-14
化学式2 :H-16
3. 如权利要求2所述的药物组合物，其中所述分支杆菌相关疾病是结核病。
4. 如权利要求3所述的药物组合物，其中所述结核病是MDR结核病或者XDR结核病。
5. 如权利要求2-4中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物还包含一种或多 种抗分支杆菌剂。
6. 如权利要求4所述的药物组合物，其中所述抗分支杆菌剂选自由以下各项组成的 组：一线口服抗结核病剂、可注射抗结核病剂、氟喹诺酮、二线口服抗结核病剂、其他抗TB 剂和目前用于结核病临床试验中的化合物； 其中，所述一线口服抗结核病剂选自由以下各项组成的组：异烟肼、利福平、乙胺丁醇 片和吡嗪酰胺；可注射抗TB剂选自由以下各项组成的组：链霉素、阿米卡星、卷曲霉素和卡 那霉素；所述氟喹诺酮选自由以下各项组成的组：环丙沙星、氧氟沙星、加替沙星和莫西沙 星；二线口服抗TB剂选自由以下各项组成的组：利福布汀、丙硫异烟胺、乙硫异烟胺、环丝 氨酸、PAS和胺苯硫脲；所述其他抗TB剂选自由以下各项组成的组：利奈唑胺、氯苯吩嗪、 阿莫西林/克拉维酸、克拉霉素和二氨基二苯砜的衍生物；以及目前用于结核病临床试验 中的所述化合物选自由以下各项组成的组：贝达喹啉（Bedaquiline)、PA-824、Dalamanid、 SQ-109、Sutezolid、利福喷汀和临床前研发的化合物，具体是AZD5847、BTZ043、TBA-354、 CPZEN-45、SQ-641、SQ-609、DC-159a、Q201、THPP、氯苯吩嗪的氯法齐明类似物和含硼 LeuRS 抑制剂。
7. 如权利要求5或6所述的药物组合物，其中具有通式1或者2的所述化合物和至少 一个另外的化合物适于同时、顺序或者单独施用。
8. -种制造权利要求1所述的化学式1或者化学式2的抗TB环肽的方法，包括：在好 氧条件下，在含水培养基中培养野野村菌MJM5123菌株的产抗分支杆菌肽的微生物；以及 从菌丝中分离权利要求1所述的抗TB环肽。
9. 如权利要求8所述的方法，其中分离抗结核病环肽的步骤包括使用甲醇和氯仿作为 洗脱液对野野村菌MJM5123菌丝的甲醇提取物进行真空液相色谱（VLC);使用甲醇作为洗 脱液进行Sephadex LH-20开口柱色谱法；以及使用HEMWat+2作为溶剂进行高速逆流色谱 (HSCCC)。
10. 如权利要求8所述的方法，其中分离抗结核病环肽的步骤包括用甲醇作为溶剂提 取野野村菌MJM5123菌丝；加水直至甲醇的30%，以制得含水甲醇；用己烷对甲醇提取物进 行脱脂；分离水层，并且调节至65%含水甲醇；用氯仿提取所述水层；浓缩，并且用甲醇溶解 氯仿提取物；使用甲醇作为洗脱液进行S印hadex LH-20开口柱色谱法；以及进行高效液相 色谱（HPLC)，其配置了填有反相凝胶（RP-18)的柱。
【文档编号】C07K7/64GK104144940SQ201280028784
【公开日】2014年11月12日 申请日期:2012年4月18日 优先权日:2011年4月18日
【发明者】金钟宇, 李常旭, 朴相珍, 徐胄源, 李仁爱, 尹泰美, 崔钟根, 李知彦, 金晋龙, 金英宇, 斯科特·弗兰兹伯劳, 曺尚铉, 高薇, 吉多·保利, 詹姆斯·麦克阿尔潘, 约瑟·纳波利塔诺, 波吉特·杰希, 布伦特·弗里森, 玛利亚·弗洛伦西亚·罗德里格斯·布拉斯科, 大卫·兰金 申请人:明知大学工业和学术合作基金会, 伊利诺斯大学董事会