儿茶素和表儿茶素结合物的合成的制作方法
【专利摘要】本发明通常涉及式(I)的儿茶素和表儿茶素结合物。例如，公开了制备儿茶素和表儿茶素化合物、特别是儿茶素和表儿茶素结合物的化学合成方法。本发明的进一步的方面涉及新的和表儿茶素结合化合物。
【专利说明】儿茶素和表儿茶素结合物的合成
发明领域
[0001]本发明通常涉及儿茶素和表儿茶素结合物。例如，公开了制备儿茶素和表儿茶素化合物、特别是儿茶素和表儿茶素结合物的化学合成方法。本发明的进一步的方面涉及新的儿茶素和表」L茶素结合化合物。
[0002]发明背景
[0003]类黄酮化合物，也称为“维生素P”或柠檬素，是植物的次生代谢物。那些类黄酮的一类是黄烧_3_醇(儿茶素和原花色素)，其用2-苯基-3，4- 二氢-2H-色烯-3-醇作为它们分子结构的骨架。黄烷-3-醇是人类和动物用作食物的很多植物材料中发现的最丰富的多酚化合物，其与有益的健康效应相关。事实上，大量流行病学研究显示从例如新鲜水果、茶、可可和红酒中长期食用富含黄烷醇的食物导致动物模型中动脉粥样硬化斑块的减少，并且与冠心病、某些类型的癌症和免疫功能障碍的风险负相关。这些流行病学观察得到很多体外和离体机制研究的支持。因此，例如体外观察到癌发生的降低(Mittal，A.等人，Int.J.0ncol.2004, 24 (3)，703-710)。尽管大量的研究致力于理解黄烷醇诱导的健康促进效应，包括内皮功能、血压、血小板活性和氧化应激的减少，但是这些化合物的准确生物学靶标大都仍未知。
[0004]在本领域中有兴趣研究和理解在人和动物中黄烷醇诱导的生物学效应,包括吸收机制、体内代谢和这些化合物的分泌。目前已知儿茶素是从人肠道的肠细胞部位吸收的。然后儿茶素快速在它们的吸收部位代谢并且以结合的衍生物分布在血液中。然后儿茶素的生理学加工在肝中的肝细胞部位完成，并且它是结合的形式，排泄在尿中。在肠细胞和肝细胞中，儿茶素与亲水基团的结合被II相代谢酶催化，包括甲基-、葡糖苷酸基(glucuronyl)-和磺基转移酶。·
[0005]实际的黄烷醇代谢物和结合物可能具有与母体黄烷-3-醇不同的生物学靶标。因此，评价它们的活性是重要的，对于活性，需要足够的量，而所述的量不能通过从生物体液例如血液或尿液直接分离获得。以区域可控的方式制备多种儿茶素和表儿茶素结合物的方法将提供研究代谢物的活性和分布方式的物质基础，从而解释通常它们作为作用物在介导与摄入儿茶素和类黄酮相关的有益健康效应中的作用。
[0006]关于五羟黄酮的结合代谢物的合成和活性，已经公开了研究(YoShiZUmi，M.等人,Biochem.Biophys.Res.Commun.2002, 293(5), 1458-1465)。
[0007]然而，关于儿茶素和表儿茶素代谢物只有很少数据。根据增加方法的区域选择性，制备儿茶素和表儿茶素结合物的不同可用方法可以分别分为三类:(i)直接衍生化；(ii)半-合成或“杂交”方法，和(iii)全合成。
[0008]Gonzalez-Manzano, S.等人在 J.Agric.Food Chem.2009, 57 (4)，1231-1238 的工作例证了直接衍生化法。它涉及用过量结合试剂非选择性处理可商购获得的(-)_表儿茶素(即葡糖苷酸化(glucuronidation)、硫酸化或甲基化),随后通过(半)制备HPLC技术分级获得的区域异构的混合物。优化的方法提供制备的在3’或4’位结合的(表)儿茶素硫酸酯、葡糖苷酸(glucuronides)和甲基醚，以及通过半制备HPLC进一步分离在5或7位的硫酸酯。本方法的主要优点包括使用可商购获得的旋光纯(-)-表儿茶素作为原料，从而无需从头合成后面的分子。当使用该直接衍生化法时，结合物是以“一锅法”获得的，并且需要从复杂的异构体混合物中分离。除了非常低的结合产率之外，直接衍生化法的主要缺点是在(表)儿茶素的结合中固有缺乏区域选择性。而且，由于第一结合步骤极低的通量，获得复杂的结合物是不可能的。此外，对于所有酚羟基，缺乏4-羰基和2，3-双键导致相似的酸度，因此无法获得区域选择性结合。该技术还存在低通量的问题，因为制备少量单一所需的结合异构体需要大量(相对昂贵的)原料。而且，多种取代的(表)儿茶素代谢物相似的保留时间进一步降低分离产率，并且还影响分离的化合物的纯度。
[0009]在直接衍生化法中引入中等水平的区域选择性产生所谓的半合成或“杂交”方法。C.Rolando 等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.12002, (6)，821-830 描述了该技术，并且被同一研究组用于区域选择性制备在(+)_儿茶素的3’、4’、5和7位的四种单甲基化异构体，两种二甲基化衍生物，5，7-二甲基(+)_儿茶素和3’，4’ - 二甲基(+)_儿茶素以及在(+)_儿茶素的3’，5，7和4’，5，7位的三甲基化异构体。“杂交”法引入一些区域化学，并且这是基于在(+)_儿茶素上存在的多种酚官能团的连续且选择性保护。该半合成的关键步骤是通过永久的或暂时的二氧戊环的形成区分(+)-儿茶素的儿茶酚B环和间苯三酚A环。Rolando技术的优点是区域选择性，使用商购可获得的且旋光纯的(+)_儿茶素作为原料，以及在加工中需要很少的化学步骤。“杂交”技术的主要缺点是固有缺乏模块性。事实上，Rolando法限制于半合成“简单的”(表)儿茶素结合物，并且不能用于制备复杂的(表)儿茶素结合物。另一个缺点是在游离儿茶酚环上选择性保护(表)儿茶素(即半合成法的第一步)的低产率。
[0010]然而文献报道了数种立体选择性合成旋光(表)儿茶素和衍生物(参见，例如 Wan 等人，Bioorg.Med.Chem.2004，12(13)，3521-3527; Ding 等 A , Chin.J.Chem.2006，24(11)，1618-1624; Wan 等人，Bioorg.Med.Chem.2005，13 (6), 2177-2185; Jew等人，Tetrahedron:Asymmetry2002, 13 (7)，715-720;Anderson 等人，Tetrahedron2005,61 (32)，7703-7711;van Rensburg 等人，J.Chem.Soc.，PerkinTrans.11997，(22)，3415-3422)，据我们所知，目前还没有报道相应的代谢物(甲基醚、硫酸酯或葡糖苷酸)的合成。 特别的是，描述的合成通路没有提供区分(表)儿茶素骨架上儿茶酚B环的羟基与间苯三酚A环的羟基，从而不能以区域可控的方式在(表)儿茶素的特定部位引入结合。
[0011]因此，本领域明确需要开发化学合成多种旋光儿茶素和表儿茶素结合衍生物的方法，所述的衍生物是化学纯的并且以毫克范围的量获得，以提供体外和体内试验。
[0012]发明概述
[0013]本发明的目的是提供上述需要新的化学合成方法的方案，以及提供新的旋光儿茶素和表儿茶素结合衍生物。
[0014]本发明的目的是通过独立权利要求的主题实现的。从属权利要求进一步发展了本发明的思想。
[0015]因此，第一方面本发明提供了制备通式(I)化合物的方法
[0016]
【权利要求】
1.制备通式(I)化合物的方法
2.权利要求1的方法，其中对于式(II)化合物，R4不等于R5。
3.权利要求1或2的方法，其还包括在步骤a)后并且在步骤b)前的Sharpless二羟基化反应步骤。
4.以上权利要求之一的方法,其还包括步骤b)的环化产物的C3位上的构型转换的步骤。
5.以上权利要求之一的方法，其中反式环化反应步骤b)首先在原乙酸三乙酯的存在下进行，随后在还原条件下在C3位脱乙酰化反应。
6.以上权利要求之一的方法，其中式(II)和/或(III)化合物的保护基选自苄基和TBDMS。
7.以上权利要求之一的方法，其还包括步骤b)的环化产物或所述的在权利要求4的构型转换后的产物与硫酸酯供体、葡糖醛酸供体和/或葡萄糖供体结合的反应步骤。
8.权利要求7的方法，其中硫酸酯供体选自新戊基氯硫酸酯或三氯乙基氯硫酸酯；葡糖醛酸供体选自2，3，4-三-O-乙酰基-a-D-甲基吡喃葡糖醛酸基_1_(N-苯基)-2，2，2-三氟乙酰亚氨酸酯、2，3，4-三-O-乙酰基-a -D-甲基吡喃葡萄糖基-1- (Ν-4-甲氧基苯基)-2，2，2-三氟乙酰亚氨酸酯、2，3，4-三-O-乙酰基-a -D-甲基吡喃葡糖醛酸基-1-0-(2, 2，2-三氯乙酰亚氨酸酯)或乙酰溴-a -D-葡糖醛酸甲酯，并且葡萄糖供体选自2，3，4，6-四-O-乙酰基-a -D-吡喃葡萄糖基-1- (N-苯基)_2，2，2-三氟乙酰亚氨酸酯、2，3, 4, 6-四-O-乙酰基-a -D-glucuropyranosyl-l-O-(2，2, 2_三氯乙酰亚氨酸酯)或α-乙酰溴葡萄糖。
9.通式⑴的化合物
10.权利要求9的化合物，其中R1不等于R2。
11.权利要求9或10的化合物，其中当R2是磺酰基时，R1不是葡糖苷酸基或葡糖苷，反之亦然。
12.权利要求9至11的化合物，其中化合物选自4’-0_甲基表儿茶素-3’-硫酸酯；3’-0_甲基表儿茶素-4’-硫酸酯；4’-0_甲基表儿茶素_3’-O-β-D-葡糖苷酸；3’ -O-甲基表儿茶素_4’ -O-β-D-葡糖苷酸；3’ -O-甲基表儿茶素-4’ -O-β-D-糖苷；和4’ -O-甲基表儿茶素_3’ -O-β-D-糖苷。
13.包含权利要求9至12的化合物的食物产品。
14.权利要求13的食物产品，其中化合物是以占总食物产品的至少0.01mg/g wt%、优选至少0.lmg/g wt%、更优选至少lmg/g wt%、甚至更优选10mg/g wt%或更高的浓度存在。
【文档编号】C07D311/62GK103857665SQ201280049362
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2012年8月7日 优先权日:2011年8月9日
【发明者】L·阿克蒂斯高列达, F·维顿, D·M·巴伦, F·迪欧尼斯 申请人:雀巢产品技术援助有限公司