专利名称：一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法
技术领域：
本发明涉及一种从植物中制备植物激素的方法，属于天然产物领域，具体地说是一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法。
背景技术：
大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质，是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子，是纯天然的植物雌激素，容易被人体吸收，能迅速补充营养。在每100克大豆样品中，含异黄酮128毫克，传统方法生产的分离蛋白含异黄酮102毫克，而豆乳中含9.65毫克，因为豆乳含水93.27%，相当于干物质中每100克也含异黄酮100毫克以上。豆腐中含异黄酮27.74毫克，其干物质含异黄酮200毫克以上。异黄酮是一种弱的植物雌规划计划经济激素，大豆是人类获得异黄酮的惟一有效来源。在雌激素生理活性强的情况下，异黄酮能起抗雌激素作用，降低受雌激素激活的癌症如乳腺癌的风险，而当妇女绝经时期雌激素水平降低，异黄酮能起到替代作用，避免潮热等停经期症状发生。异黄酮的抗癌特性十分突出，能阻碍癌细胞的生长和扩散，而且只对癌细胞有作用，对正常细胞并无影响。异黄酮还是一种有效的抗氧化剂，能阻止氧自由基的生成，而氧自由基是一种强致癌因素。可见异黄酮的抗癌作用有多种方式和途径。异黄酮是黄酮类化合物中的一种，主要存在于豆科植物中，大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，因此大豆异黄酮又称植物雌激素，能够弥补30岁以后女性雌性激素分泌不足的缺陷，改善皮肤水分及弹性状况，缓解更年期综合症和改善骨质疏松，使女性再现青春魅力。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，解决了传统方法。为了实现上述目的，本发明所述的一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，其特征在于:
一、对干燥粉碎处理大豆利用溶剂提取，所述的溶剂为乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例组成，材料与提取溶剂的重量比为1:5 20，提取温度为10°C 100°C，每次提取时间为
0.5 5h，提取2 5次，提取液浓缩后得浓缩液或浸膏；
二、将浓缩液或浸膏溶于水，用弱极性或中等极性的有机溶剂作为萃取剂萃取，所述的弱极性和中等极性的有机溶剂萃取剂为石油醚、环己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯，分别浓缩回收溶剂，得到大豆异黄酮萃取浸膏。
本发明所述的一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，其特征在于:具体包括下列步骤:
I.原料选择:以大 为提取材料；2.原料处理:去除原料中杂物，通风处阴干，或100°C以下低温烘干，粉碎成粗粉，干燥保存待用；
3.大豆异黄酮的提取:取粉碎干燥的大豆原料，加入乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例组成的溶剂浸提或回流提取，材料与提取溶剂的重量比为1:5 20，提取温度为10°C 100°C，每次提取时间为0.5 5h，提取2 5次，合并提取液；
4.萃取浸膏:提取液浓缩后得浓缩液或浸膏，将浓缩液或浸膏溶于水，用弱极性或中等极性的有机萃取剂如石油醚、环己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯等萃取，得到大豆异黄酮萃取浸膏；
5.大豆异黄酮的分离和纯化:纯品大豆异黄酮可通过以下两个途径获取:
Φ纯化弱极性或中等极性的有机溶剂萃取物，分离得大豆异黄酮:取上述弱极性或
中等极性的有机溶剂如氯仿或乙酸乙酯萃取物，选择非极性或弱极性大孔树脂如HP-20、D-10U XDA-U AB-8型等树脂纯化，先用水洗柱，再用醇水体系洗脱剂洗脱，洗脱液浓缩后，经葡聚糖凝胶柱S^hadex LH-20柱纯化，氯仿一甲醇溶剂系统洗脱剂洗脱得大豆异黄酮；
f纯化醇萃取物得含大豆异黄酮的总皂苷，水解总皂苷制备大豆异黄酮洗脱液浓缩后
制备得大豆异黄酮。本发明所述的一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，其有益效果在于:本发明方法制备工艺简单，制作方便，技术易掌握，能耗小，主要以醇一水体系为溶剂，无环境污染，萃取剂和洗脱剂都可回收，循环使用，提取率高，生产成本低，生产的大豆异黄酮能够用于开发多种治疗药物及植物激素产品，也可作为化学合成的原料。
具体实施例方式以下实施例为本发明作进一步出阐述。实施例1
一、取大豆lkg，干燥，研磨成粗粉，加入4L70%乙醇(V/V)溶液室温浸提4次，每次4h，合并提取液，将滤液浓缩成浸膏，将其悬浮于水，依次用等体积的石油醚、正丁醇分别萃取5次，分别减压回收溶剂得萃取物；
二、正丁醇萃取物用去离子水溶解，按照样品与填料1:7比例在D-101型大孔树脂上纯化，先用去离子水洗脱除杂，直至a-萘酚反应检测洗脱液成阴性为止，然后用30%乙醇洗脱，收集该乙醇洗脱液，减压回收乙醇，干燥得含大豆异黄酮总皂苷2.4g ；
三、将总皂苷溶解在12mL，浓度为2mol/LHCl (MeOH =H2O=1:1)溶液中，90°C热水浴回流水解2h，反应液冷却后，减压浓缩除去甲醇，再用氯仿萃取，回收溶剂，N2干燥得大豆异黄酮1.2g，纯度97%。实施例2
一、取粉碎干燥的大豆1kg，加入5L甲醇溶剂，60°C水浴回流提取3次，每次3h，提取3次，合并提取液，将浸膏用去离子水溶解，在DIA10NHP-20大孔树脂上进行纯化，按照样品与填料1:6比例上样，装柱，70%甲醇(V/V)溶液洗脱除杂后，收集80%甲醇洗脱液，干燥得
2.8g大豆异黄酮总阜苷；二、将总皂苷溶解在15mL，浓度为Imol / L H2SO4(MeOH:H2O=I:1)溶液中，80°C热水浴回流水解lh，反应液冷却后，减压浓缩除去甲醇，再用环己烷萃取，回收溶剂，N2干燥得大豆异黄酮1.4g，纯度96.6%。实施例3
一、取粉碎干燥的大豆1kg，加入4L丙酮，65°C水浴加热回流提取3次，每次2h，共提取3次，合并提取液，减压回收丙酮，浓缩成浸膏，将浸膏用纯净水溶解，依次用等体积的石油醚、氯仿、正丁醇萃取4次，分别减压回收溶剂得萃取物；
二、氯仿萃取物经DIA10NHP-20大孔树脂纯化，先用水洗柱，收集90%甲醇溶液洗脱液，洗脱液浓缩干燥后，经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱纯化，按氯仿:甲醇=1:1配置的洗脱剂洗脱，收集洗脱液 ，干燥得拉肖皂苷元0.5g，纯度96%。
权利要求
1.一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，其特征在于: I对干燥粉碎处理大豆利用溶剂提取，所述的溶剂为乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例组成，材料与提取溶剂的重量比为1:5 20，提取温度为10°C 100°C，每次提取时间为0.5 ，提取2 5次，提取液浓缩后得浓缩液或浸膏； 2将浓缩液或浸膏溶于水，用弱极性或中等极性的有机溶剂作为萃取剂萃取，所述的弱极性和中等极性的有机溶剂萃取剂为石油醚、环己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯，分别浓缩回收溶剂，得到大豆异黄酮萃取浸膏。
2.一种从大豆中制备大豆异黄酮的步骤,其特征在于: Φ原料选择:以大 为提取材料； 原料处理:去除原料中杂物，通风处阴干，或100°C以下低温烘干，粉碎成粗粉，干燥保存待用； O大豆异黄酮的提取:取粉碎干燥的大豆原料，加入乙醇、甲醇、丙酮和水以不同比例组成的溶剂浸提或回流提取，材料与提取溶剂的重量比为1:5 20，提取温度为10°C 100°C，每次提取时间为0.5 5h，提取2 5次，合并提取液； @萃取浸膏:提取液浓缩后得浓缩液或浸膏，将浓缩液或浸膏溶于水，用弱极性或中等极性的有机萃取剂如石油醚、环己烷、正己烷、氯仿或乙酸乙酯等萃取，得到大豆异黄酮萃取浸膏； O大豆异黄酮的分离和纯化。
3.如权利要求2所述一种从大豆中制备大豆异黄酮的步骤，其特征在于:所述大豆异黄酮的分离和纯化: Φ纯化弱极性或中等极性的有机溶剂萃取物，分离得大豆异黄酮:取上述弱极性或中等极性的有机溶剂如氯仿或乙酸乙酯萃取物，选择非极性或弱极性大孔树脂如HP-20、D-10U XDA-U AB-8型等树脂纯化，先用水洗柱，再用醇水体系洗脱剂洗脱，洗脱液浓缩后，经葡聚糖凝胶柱S^ha dex LH-20柱纯化，氯仿一甲醇溶剂系统洗脱剂洗脱得大豆异黄酮；a纯化醇萃取物得含大豆异黄酮的总皂苷，水解总皂苷制备大豆异黄酮洗脱液浓缩后制备得大豆异黄酮。
全文摘要
本发明公开一种从大豆中制备大豆异黄酮的方法，涉及一种从植物中制备植物激素的方法，属于天然产物领域。其特征在于对干燥粉碎处理大豆利用溶剂提取，材料与提取溶剂的重量比为15～20，提取温度为10℃～100℃，每次提取时间为0.5～5h，提取2～5次，提取液浓缩后得浓缩液或浸膏。其有益效果在于本发明方法制备工艺简单，制作方便，技术易掌握，能耗小，主要以醇一水体系为溶剂，无环境污染，萃取剂和洗脱剂都可回收，循环使用，提取率高，生产成本低，生产的大豆异黄酮能够用于开发多种治疗药物及植物激素产品，也可作为化学合成的原料。
文档编号C07D311/36GK103145675SQ20131006074
公开日2013年6月12日 申请日期2013年2月27日 优先权日2013年2月27日
发明者何诚慧 申请人:何诚慧