一种从毛喉鞘蕊花中提取和分离弗斯可林的方法
【专利摘要】本发明提供一种从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，主要解决了现有方法工艺复杂、收率低、成本高、不适合工业化生产的问题。该从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法通过1]提取；2]浓缩；3]柱分离；4]结晶，4个步骤获得含量为98%以上的弗斯可林，产品收率大于0.3%。该从毛喉鞘蕊花中提取和分离弗斯可林的方法工艺简单，收率高，成本低，适合工业化生产。
【专利说明】一种从毛喉鞘蕊花中提取和分离弗斯可林的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种萜类化合物的提取分离技术，具体涉及一种从毛喉鞘蕊花根中提取分离弗斯可林的方法。
【背景技术】
[0002]毛喉鞘蕊花系唇形科鞘蕊花属植物，主要分布在尼泊尔、不丹、印度、斯里兰卡等地。1989年齐国云南省东北部发现了该中稀有植物，并对其进行引种。现以在云南和湖北栽培成功。古印度将毛喉鞘蕊花称为万灵药，民间主要用于治疗感冒，咳嗽等疾病。现多作为治疗肿瘤、心血管病、艾滋病和老年痴呆症的天然药物，药理实验表明其对肠癌、胃癌、鼻咽癌、白血病和老年常患疾病有显著疗效。
[0003]目前国内对国产原料毛喉鞘蕊花全草研究的比较多，主要集中于异弗斯可林的分离，而对印度产毛喉鞘蕊花根中弗斯可林的分离研究的报道的很少。
[0004]申请号为201110458818.4的发明专利，公开了一种提取毛喉鞘蕊花有效成分的方法，该方法是将毛喉鞘蕊花全草或根粉碎后，以含水乙醇提取，大孔树脂柱层析、十八烷基键合硅胶柱层析、重结晶等方法进行纯化，制得纯度大于90%的异佛司可林。
[0005]申请号为200410084646.9的发明专利，公开了一种毛喉鞘蕊花提取物及其制备方法和用途，该方法是将毛喉鞘蕊花全草或根粉碎后，用含水乙醇提取，提取液采用大孔树脂提纯后得提取物，其主要活性成分异弗斯可林的含量为8%以上，经动物实验，该发明的毛喉鞘蕊花提取物能显著抑制组胺有道立体豚鼠气管条的收缩，适用于制备放置哮喘和支气管炎的药物。
[0006]申请号为2 00610124900.2的发明专利，公开了一种毛喉鞘蕊花提取物主要成分及提取方法，该方法时先通过乙醇提取，再通过硅胶柱进行两次分离，并进行TOyOpearlHW-40F多次分离纯化得到鞘蕊花酸，鞘蕊酸和鞘蕊山酮三个抗肿瘤中药制剂的原料药。
[0007]申请号为201110369171.8的发明专利，公开了一种测定毛喉鞘蕊花中半日花烷型二萜的方法。该发明属天然药物质量分析领域，涉及毛喉鞘蕊花中半日花烷型二萜的测定方法，具体涉及一种采用基质固相分散技术检测毛喉鞘蕊花中半日花烷型二萜的方法。
[0008]上述发明专利申请公开的提取分离方法均为利用国产原料提取异弗斯可林，未公开任何弗斯可林分离方法；而公开的部分方法大多工艺复杂、收率低、成本高、不适合工业化生产。
【发明内容】
[0009]本发明提供一种从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，主要解决了现有方法工艺复杂、收率低、成本高、不适合工业化生产的问题。
[0010]本发明的具体技术解决方案如下:
[0011]该从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，包括以下步骤:[0012]I]提取
[0013]1.1]取印度毛喉鞘蕊花根作为原料，将其粉碎至20-80目，再用水、1%_10%质量浓度的石灰水或1%_10%质量浓度的酸水润湿，放置IOmin~2h ；
[0014]1.2]采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的任意一种或者两种试剂的混合溶剂，对步骤1.1处理所得的物质进行I~3次的提取，得到提取液，提取温度为10~80°C，每次 0.5-3h ；
[0015]2]浓缩
[0016]将步骤1.2所得的提取液混合再浓缩至浸膏，浓缩温度为40~80°C ；
[0017]3]柱分离 [0018]3.1]将步骤2处理所得的浸膏用硅胶拌样后上硅胶和氧化铝的混合柱处理，混合柱中硅胶和氧化铝的质量比为0.1~10，浸膏与混合柱中填料的质量比为10:1~1:1 ;
[0019]3.2]采用石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮中的任意两种试剂，以任意比例混合后对混合柱进行洗脱，分段收集洗脱液；
[0020]4]结晶
[0021]对步骤3.2处理所得的洗脱液进行合并后浓缩结晶，再对该结晶用I~10倍结晶重量的石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇溶解；溶解后加0.1-20倍结晶重量的石油醚、正己烷、乙酸乙酯、水进行搅拌，搅拌后放置结晶8-24h，所得结晶的含量为98%以上的弗斯可林，产品收率大于0.3%。
[0022]上述步骤1.1中，将印度毛喉鞘蕊花根粉碎至60目，再5%浓度的石灰水润湿，放置 IOmin ；
[0023]上述步骤1.2中，提取溶剂为丙酮，提取次数为3次，提取温度为50°C，每次提取时间为1.5h。
[0024]上述步骤2中浓缩温度为60°C。
[0025]上述步骤3.1中硅胶和氧化铝的质量比为1:1.2，浸膏与混合柱中填料的质量比为2:1.3，步骤3.2中的洗脱溶剂为正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂，洗脱溶剂的质量比为10:0.8。
[0026]上述步骤4中所用的第一次溶解的溶剂为乙酸乙酯，3倍于结晶的重量，第二次加入的溶剂为石油醚，1.5倍于结晶的重量，搅拌后放置结晶时间为10h。
[0027]本发明的优点在于:
[0028]该从毛喉鞘蕊花中提取和分离弗斯可林的方法工艺简单，收率高，成本低，适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0029]实施例1
[0030]I]提取:印度毛喉鞘蕊花根原料，粉碎，目数为60目，用水润湿，放置Ih后采用丙酮进行提取，提取温度控制为50°C，提取3次，每次1.5h ；
[0031]2]浓缩:将步骤I中3次的提取液合并浓缩至浸膏，浓缩温度为60°C ；
[0032]3]柱分离:将上述浸膏用硅胶拌样，上硅胶和氧化铝的混合柱，其中硅胶和氧化铝的质量比为1:1.2，原料和混合填料的质量比为2:1.3，正己烷和乙酸乙酯的洗脱比例为10:0.8 ；
[0033]4]结晶:将上述分段收集浓缩所得的结晶，用3倍重量的乙酸乙酯溶解，待溶解后加1.5倍结晶重量的石油醚，经搅拌后，放置结晶10h。所得结晶的含量为98.0%的弗斯可林，产品收率为0.49%。
[0034]实施例2
[0035]I]提取:印度毛喉鞘蕊花根原料，粉碎，目数为20目，用5%质量浓度的石灰水润湿，放置IOmin后采用乙酸乙酯进行提取，提取温度控制为10°C，提取I次，每次3h ；
[0036]2]浓缩:将步骤I得到的提取液浓缩至浸膏，浓缩温度为40°C ；
[0037]3]柱分离:将上述浸膏用硅胶拌样，上硅胶和氧化铝的混合柱，其中硅胶和氧化铝的质量比为1:10，原料和混合填料的质量比为10:1，石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂进行洗脱，分段收集洗脱液；石油醚和乙酸乙酯的比例为10:1;
[0038]4]结晶:将上述分段收集浓缩所得的结晶，用I倍重量的95%乙醇溶解，待溶解的弗斯可林，产品收率为0.42%。
[0039]实施例3
[0040]I]提取:印度毛喉鞘蕊花根原料，粉碎，目数为80目，用质量浓度的3%酸水润湿，放置2h后采用甲醇进行提取，提取温度控制为80°C，提取2次，每次0.5h ;
[0041]2]浓缩:将步骤I得到的提取液浓缩至浸膏，浓缩温度为80°C ；
[0042]3]柱分离:将上述浸膏用硅胶拌样，上硅胶和氧化铝的混合柱，其中硅胶和氧化铝的质量比为1:20，原料和混合填料的质量比为1:1，乙酸乙酯和丙酮的混合溶剂进行洗脱，分段收集洗脱液；其比例为10:2 ；
[0043]4]结晶:将上述分段收集浓缩所得的结晶，用10倍重量的乙醇溶解，待溶解后加
0.1倍重量的正己烷，经搅拌后，放置结晶24h。所得结晶的含量为98.6%的弗斯可林，产品收率为0.35%。
【权利要求】
1.一种从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于，包括以下步骤: 1]提取 1.1]取印度毛喉鞘蕊花根作为原料，将其粉碎至20-80目，再用水、1%_10%质量浓度的石灰水或1%_10%质量浓度的酸水润湿，放置IOmin~2h ； 1.2]采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇中的任意一种或者两种试剂的混合溶剂，对步骤1.1处理所得的物质进行I~3次的提取，得到提取液，提取温度为10~80°C，每次0.5-3h ； 2]浓缩 将步骤1.2所得的提取液混合再浓缩至浸膏，浓缩温度为40~80°C ； 3]柱分离 3.1]将步骤2处理所得的浸膏用硅胶拌样后上硅胶和氧化铝的混合柱处理，混合柱中硅胶和氧化铝的质量比为0.1~10，浸膏与混合柱中填料的质量比为10:1~1:1 ; 3.2]采用石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮中的任意两种试剂，以任意比例混合后对混合柱进行洗脱，分段收集洗脱液； 4]结晶 对步骤3.2处理所得的洗脱液进行合并后浓缩结晶，再对该结晶用I~10倍结晶重量的石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇溶解；溶解后加0.1-20倍结晶重量的石油醚、正己烷、乙酸乙酯、水进行搅拌，搅拌后放置结晶8-24h，所得结晶的含量为98%以上的弗斯可林，产品收率大于0.3%。
2.根据权利要求1所述的从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于:所述步骤1.1中，将印度毛 喉鞘蕊花根粉碎至60目，再5%浓度的石灰水润湿，放置IOmin0
3.根据权利要求1所述的从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于:所述步骤1.2中，提取溶剂为丙酮，提取次数为3次，提取温度为50°C，每次提取时间为1.5h。
4.根据权利要求1所述的从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于:所述步骤2中浓缩温度为60°C。
5.根据权利要求1所述的从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于:所述步骤3.1中硅胶和氧化铝的质量比为1: 1.2，浸膏与混合柱中填料的质量比为2:1.3，步骤3.2中的洗脱溶剂为正己烷和乙酸乙酯的混合溶剂，洗脱溶剂的质量比为10:0.8。
6.根据权利要求1所述的从毛喉鞘蕊花根中提取和分离弗斯可林的方法，其特征在于:所述步骤4中所用的第一次溶解的溶剂为乙酸乙酯，3倍于结晶的重量，第二次加入的溶剂为石油醚，1.5倍于结晶的重量，搅拌后放置结晶时间为10h。
【文档编号】C07D311/92GK103588745SQ201310617281
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月26日 优先权日:2013年11月26日
【发明者】肖红, 惠战锋, 王晓莹, 张瑜 申请人:陕西嘉禾植物化工有限责任公司