一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，步骤如下：(1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1.5:500-1200Kg/ml，然后制粒；(2)将步骤(1)制备的魔芋颗粒加入超临界CO2萃取设备的萃取釜中，对萃取釜、分离釜Ⅰ、分离釜Ⅱ进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为30-70℃，分离釜Ⅰ温度为40-65℃，分离釜Ⅱ温度为30-60℃时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离釜进行加压，当萃取釜压力为20-40MPa，分离釜Ⅰ压力为6-18MPa，分离釜Ⅱ压力为4-7MPa时，关闭二氧化碳，开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜Ⅰ、Ⅱ放料，循环萃取1-2h。本发明的方法提取的C6-神经酰胺的收率高，且萃取产物品质较好。
【专利说明】一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及提取分离【技术领域】，尤其涉及一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方 法。
【背景技术】
[0002] 魔芋（konjac)属于天南星科（Araceae)魔芋属（Amorphophallus B1. ex Decne.) 草本植物的块茎，又名磨芋、鬼芋、鬼头、花莲杆、蛇六谷等，主要产于东半球热带、亚热带， 在我国有较广泛的分布。魔芋性寒、辛，有毒；可活血化瘀，解毒消肿，宽肠通便，化痰软坚； 主治降血压、降血糖、瘰疬痰核、损伤瘀肿、便秘腹痛、咽喉肿痛、牙龈肿痛等症。
[0003] 神经酰胺类化合物（Ceramide)，即N-脂酰神经鞘氨醇，是由神经鞘氨醇 (sphingosine)和长链脂肪酸缩合而成的一类化合物，是鞘脂类化合物中最重要的一种。神 经酰胺是最近几年新兴的一种活性成分，魔芋中含有比较丰富的神经酰胺，其神经酰胺的 含量高达0. 15?0.2%，是目前所采用的原料如米糠、大豆、小麦等原料的10倍。
[0004] 提取神经酰胺最常用的是有机溶剂提取，通常采用异丙醇、乙酸乙酯或氯仿提取。 刘仁萍等在探索回流提取法提取魔芋神经酰胺时，发现在相同条件下中等极性溶剂乙酸乙 酯的提取效果最理想。但是，在相同提取条件下，用95%乙醇提取后经石油醚萃取的效果 与乙酸乙酯的提取效果相差不大，并且乙酸乙酯价格较高，提取过程中挥发较大，因此，采 用95%乙醇作为提取溶剂。作者通过正交试验确定提取的最佳工艺为95%乙醇、提取温度 80°C、提取时间8h、料液比1:10,最高提取量达到4. 34mg/g。
[0005] 催韶晖等，采用95%乙醇，料液比1:7.5,水浴温度80°C?90°C，提取时间8h? l〇h，用去离子水调提取液乙醇溶度至70%，石油醚萃取，旋转蒸发仪浓缩。浓缩液以石油 醚：丙酮（7:3) 200ml进行硅胶柱层析2次分离纯化，流速为ld/s，洗脱液用旋转蒸发仪浓 缩，浓缩液进行真空冷冻干燥得到白色粗品，粗品用丙酮重结晶进行纯化，得到白色纯化的 神经酰胺样品。
[0006] 魏静等对不同提取方法进行分析测定，结果表明在相似的条件下溶剂浸提法测定 的含量为1. 93%，而超声波法测得的含量为2. 24%，后者提取效果明显优于前者。作者采 用单因素实验法对影响神经酰胺提取率的主要因素进行了分析，利用正交实验优化了提 取神经酰胺的最佳工艺条件。研究表明，超声提取魔芋神经酰胺的最佳条件为：乙醇浓度 95%，料液质量比为1:4,提取温度60°C，提取时间35min。在该条件下神经酰胺粗提物的提 取率为2. 89%。
[0007] 超临界萃取技术在魔芋提取神经酰胺中的应用虽尚未见报道，但李佳在研究微生 物发酵米糠制备神经酰胺中应用了该技术，预示着超临界萃取技术将在魔芋提取神经酰胺 得到应用。李佳利用鞘磷脂酶使米糠中游离的神经酰胺的含量提高3倍以上，并以萃取压 力为30MPa，萃取温度32°C?35°C，分离釜压力为7MPa?8MPa，温度35°C?38°C的条件进 行超临界萃取获得最佳萃取效果。
[0008] 魔芋神经酰胺为植物源神经酰胺，安全性高于动物源神经酰胺和合成神经酰胺， 含量也高于其他植物来源。从已有文献来看，对魔芋神经酰胺的研究主要集中在其药理活 性方面，而其提取分离及质量分析方面较少，且提取分离方法传统繁琐、分析方法不够系统 全面，也未见其神经酰胺的超临界co 2萃取工艺研究。
【发明内容】
[0009] 本发明提供了一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法。
[0010] 本发明采用如下技术方案：
[0011] 本发明的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法的具体步骤如下：
[0012] (1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1. 5:500-1200Kg/ml，然后制粒；
[0013] (2)将步骤（1)制备的魔芋颗粒加入超临界C02萃取设备的萃取釜中，对萃取釜、 分离釜I、分离釜II进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为30-70°C，分离釜I温 度为40-65°C，分离釜II温度为30-60°C时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离 釜进行加压，当萃取釜压力为20-40MPa，分离釜I压力为6-18MPa，分离釜II压力为4-7MPa 时，关闭二氧化碳，开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜I、II放料，循 环萃取l-2h。
[0014] 步骤（1)中，乙醇的浓度为95%，料液比优选为1. 5:1000Kg/ml。
[0015] 步骤（2)中，优选萃取釜温度为60°C，压力为35MPa。
[0016] 步骤（2)中，优选分离釜I温度为50°C，压力为15MPa。
[0017] 步骤（2)中，优选分离釜II温度为45°C，压力为6MPa。
[0018] 步骤（2)中，优选萃取时间为1. 5h。
[0019] 本发明的技术效果：
[0020] 本发明的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法与溶剂回流提取法相比较，超临界 C02萃取较回流提取的C6_神经酰胺的收率高约20 %，且超临界C02萃取产物品质较好，在 外观、C6-神经酰胺含量等方面都优于溶剂回流提取法，同时萃取工艺简单、效率高，解决了 传统回流提取法溶剂用量大、易燃易爆等问题。
【专利附图】
【附图说明】
[0021] 图1是本发明的超临界co2萃取设备流程示意图。
[0022] 图中：1_萃取釜、2-分离釜I、3_分离釜II、4_分离柱、5-换热器、6-高压泵、7_C0 2 气瓶、8-冷机储罐、9-流量计。
【具体实施方式】
[0023] 下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。
[0024] 实施例1
[0025] (1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1. 5:500Kg/ml，然后制粒；
[0026] (2)将步骤（1)制备的魔芋颗粒加入超临界C02萃取设备的萃取釜中，对萃取釜、 分离釜I、分离釜II进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为30°C，分离釜I温度 为40°C，分离釜II温度为30°C时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离釜进行加 压，当萃取釜压力为20MPa，分离釜I压力为6MPa，分离釜II压力为4MPa时，关闭二氧化碳， 开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜I、II放料，循环萃取2h。
[0027] 步骤（1)中，乙醇的浓度为95%。
[0028] 实施例2
[0029] (1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1. 5:1200Kg/ml，然后制粒；
[0030] (2)将步骤⑴制备的魔芋颗粒加入超临界C02萃取设备的萃取釜中，对萃取釜、 分离釜I、分离釜II进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为70°C，分离釜I温度 为65°C，分离釜II温度为60°C时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离釜进行加 压，当萃取釜压力为40MPa，分离釜I压力为18MPa，分离釜II压力为7MPa时，关闭二氧化 碳，开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜I、II放料，循环萃取lh。
[0031] 步骤（1)中，乙醇的浓度为95%。
[0032] 实施例3
[0033] (1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1. 5:1000Kg/ml，然后制粒；
[0034] (2)将步骤⑴制备的魔芋颗粒加入超临界C02萃取设备的萃取釜中，对萃取釜、 分离釜I、分离釜II进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为60°C，分离釜I温度 为50°C，分离釜II温度为45°C时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离釜进行加 压，当萃取釜压力为35MPa，分离釜I压力为15MPa，分离釜II压力为6MPa时，关闭二氧化 碳，开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜I、II放料，循环萃取1. 5h。
[0035] 步骤（1)中，乙醇的浓度为95%。
[0036] 对比例（传统溶剂提取）
[0037] 称取魔芋粉，放入圆底烧瓶，加入95%乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h (第一 次加入960ml95 %乙醇，第二次加入720ml95 %乙醇），过滤，合并提取液，50°C旋蒸浓缩至 无水，得棕褐色油状提取物，称重并计算收率。
[0038] 收率的计算
[0039] 收率是评价萃取效果的重要指标，收率的计算公式如下：
[0040] 粗提物收率=药材粗提物质量+药材投料量X 100%
[0041] C6-Cer收率=药材粗提物质量X粗提物中C6-Cer百分含量％ +药材投料 量 X100%。
[0042] 实施例1-3的收率如表1所示：
[0043] 表 1
[0044]
【权利要求】
1. 一种从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下： (1)将魔芋粉碎成细粉，然后加入乙醇，料液比为1. 5:500-1200Kg/ml，然后制粒； ⑵将步骤⑴制备的魔芋颗粒加入超临界C02萃取设备的萃取釜中，对萃取荃、分离 釜I、分离釜II进行加热，并对冷机及储罐制冷，当萃取釜温度为30-70°C，分离釜I温度为 40-65°C，分离釜II温度为30-60°C时，开启二氧化碳气瓶，通过高压泵对萃取釜、分离釜进 行加压，当萃取釜压力为20-40MPa，分离釜I压力为6-18MPa，分离釜II压力为4-7MPa时， 关闭二氧化碳，开启循环阀，进行萃取循环，每循环30min，分别从分离釜I、II放料，循环萃 取 l-2h。
2. 如权利要求1所述的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：步骤（1)中， 乙醇的浓度为95%，料液比为1. 5:1000Kg/ml。
3. 如权利要求1所述的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：步骤（2)中， 萃取釜温度为60°C，压力为35MPa。
4. 如权利要求1所述的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：步骤（2)中， 分离釜I温度为50°C，压力为15MPa。
5. 如权利要求1所述的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：步骤（2)中， 分离釜II温度为45°C，压力为6MPa。
6. 如权利要求1所述的从魔芋中提取魔芋神经酰胺的方法，其特征在于：步骤（2)中， 萃取时间为1. 5h。
【文档编号】C07C231/24GK104083556SQ201410336065
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月15日 优先权日:2014年7月15日
【发明者】葛发欢, 李海池, 史庆龙, 马晋芳, 张湘东 申请人:广州中大南沙科技创新产业园有限公司, 中山大学