一种鸟嘌呤肽核酸单体及其合成方法
【专利摘要】本发明涉及一种鸟嘌呤肽核酸单体，所述的鸟嘌呤肽核酸单体化学结构式如下：。所述的鸟嘌呤肽核酸单体的制备方法包括以下步骤：步骤1）化合物G0在碳酸钾做碱的条件下和溴乙酸苄酯反应生成化合物Ga；步骤2）Ga先和三光气反应，然后再与二苯甲醇反应生成Gb；步骤3）Gb和氰基乙醇钠反应生成Gc；步骤4）Gc和Fmoc-氨乙基甘氨酸反应生成目标产物Ge。本发明的合成方法中使用的原料价格较低，具有非常低的成本，同时合成方法中步骤较少，操作非常简单，提取纯化工艺较为方便，并且得到的鸟嘌呤肽核酸单体的产率和纯度也较高，纯度达到了98%，产率也高于50%。克服了现有合成工艺中的缺陷。
【专利说明】一种鸟嘌呤肽核酸单体及其合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物和医学【技术领域】，涉及一种肽核酸单体及其合成方法，具体是涉 及一种鸟嘌呤肽核酸单体及其合成方法。
【背景技术】
[0002] 肽核酸（Peptide nucleic acid ;PNA)是一种与DNA和RNA相似的化学物质，可经 由人工合成制造，用来作为生物学研究或是医学治疗。
[0003] PNA的骨架是由重复排列的N-2-(氨乙基）-甘氨酸（N- (2-aminoethy 1) -glycine ) 单位，经由肽键所组合而成，且碱基与骨架之间是以亚甲羰键相连。与多肽链相似的是PNA 也有N端(氮端）与C端(碳端）的差别。
[0004] 由于PNA没有如DNA或RNA上的磷酸基团，因此PNA与DNA之间缺乏电性相斥的现 象，使两者之间的结合强度大于DNA与DNA。肽核酸基团构象不同于普通核酸，不易被蛋白 酶或者核酸酶水解，且碱基配对特异性极强，热稳定性高。在肽核酸合成中的几个单体中， 鸟嘌呤单体占着重要的作用，不可缺失。
[0005]
【发明内容】
[0006] 要解决的技术问题：常规的鸟嘌呤肽核酸单体的合成方法中工艺较为复杂，合成 采用的原料的成本也非常高昂，并且合成得到的鸟嘌呤肽核酸单体的纯度和产率也较低， 纯度不超过95%，产率也只有20%至30%。
[0007] 技术方案：针对上述问题，本发明公开了一种鸟嘌呤肽核酸单体，所述的鸟嘌呤肽 核酸单体化学结构式如下：
【权利要求】
1. 一种鸟嘌呤肽核酸单体，其特征在于所述的鸟嘌呤肽核酸单体化学结构式如下：
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2. -种鸟嘌呤肽核酸单体的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 步骤1)化合物GO在碳酸钾做碱的条件下和溴乙酸苄酯反应生成化合物Ga ; 步骤2) Ga先和三光气反应，然后再与二苯甲醇反应生成Gb ; 步骤3) Gb和氰基乙醇钠反应生成Gc ; 步骤4) Gc和Fmoc-氨乙基甘氨酸反应生成目标产物Ge ; 鸟嘌呤肽核酸单体的合成路线如下：
ο
3.根据权利要求2所述的一种鸟嘌呤肽核酸单体的制备方法，其特征在于包括以下步 骤： 步骤 1)把 GO (50g，0.295mol)和碳酸钾（61g，0.44mol)加入到 500ml 的 Ν，Ν-二甲基 甲酰胺中，加热溶液温度至84°C，直至GO全部溶解，然后冷却溶液至-5°C，滴入溴乙酸苄 酯，滴完后该温度下再搅拌3小时，室温搅拌过夜，过滤，滤液倒入1. 2L水中，加入浓盐酸调 pH为酸性，搅拌2小时后过滤产品，水洗，乙腈重结晶，拉干产品得到68g ; 步骤2)-5°C条件下，把Ga (50g，0. 158mol)加入到冰冷的500ml四氢呋喃中，搅 拌下加入三光气（160. 8g，0. 0566mol)，然后搅拌1小时，然后滴入二异丙基乙胺（44. 2g， 0. 343mol)，再搅拌30min，加入二苯甲醇（47. 4g，0. 2575mol)后室温过夜反应，然后加入乙 醇，旋干溶液，然后用二氯甲烷溶解，用10%的柠檬酸洗，然后再用5%的碳酸氢钠溶液洗，旋 出二氯甲烷，产品用甲醇重结晶后拉干得到68g产品； 步骤3)把NaH (11.36g，0. 4735mol)加入到585ml四氢呋喃中，溶液冷却到-30°C，然 后滴入3-羟基丙腈（33. 6g，0. 4735mol)，然后在0°C下搅拌2. 5小时，然后加入Gb (50g， 0. 0947mol)，反应液室温过夜，蒸去溶液，加入水中，20%的柠檬酸pPH为3-4,过滤得到粗 品，然后甲醇重结晶，拉干得到23g产品； 步骤4)把Gc(2g，4. 77mmol)溶解在无水N，N-二甲基甲酰胺（20ml)中，然后加入N-甲 基吗啉（0. 48g，4. 77mmol)，冷却至-20°C，滴入特戊酰氯（0. 6g，14. 3mmol)，反应40min，把 Fmoc-氨乙基甘氨酸悬浮在乙腈/水中，加入三乙胺，直至溶清为止，然后滴入到反应液中， TLC追S示，反应完成后20%的朽1橡酸调pH为4,过滤提纯后得到广品1. 8g。
【文档编号】C07K5/078GK104193801SQ201410392549
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月12日 优先权日:2014年8月12日
【发明者】张冬冬 申请人:苏州维泰生物技术有限公司