从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法
【专利摘要】从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，包括以下步骤：（1）原料准备：将普通油茶叶洗净、除杂、风干，粉碎；（2）提取：将普通油茶叶粉用乙醇溶液加热浸提，过滤，浓缩，得浓缩液；（3）分离纯化：将浓缩液过大孔树脂，然后用蒸馏水及乙醇溶液依次洗脱，分别收集、合并洗脱液，得洗脱液混合物；（4）硅胶分离：将洗脱液混合物浓缩后进行硅胶层析，然后用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶液进行洗脱，分别收集目标馏分段；（5）液相制备：分别将目标馏分段浓缩后溶解，用液相半制备收集，即成。经过鉴定确认了两种目标产物成分，其得率可达37mg/kg和200mg/kg，纯度＞90%；本发明方法制备工艺简便，适于工业生产。
【专利说明】从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种分离联苄类化合物的方法，具体涉及一种从普通油茶叶中分离出 两种联苄类化合物的方法。
【背景技术】
[0002] 我国生长的油茶主要有以下几种：普通油茶（Camellia oleifera Abel)约占总面 积的98 %，其次为浙江省的浙江红花油茶、云南省的腾冲红花油茶、广东省和广西的南山茶 等。油茶研宄大多着眼于油茶果或其种质资源，每年四五月间打叶产生的大批落叶造成了 很大的资源浪费。
[0003] 研宄表明，油茶叶成分组成复杂，含有脂肪、还原糖、蛋白质、氨基酸、酸、灰分、叶 绿素、茶皂素和黄酮类物质等成分，其活性成分具有抗氧化、抗自由基、抑菌保鲜，及抗癌、 防癌等功效。近年来，油茶活性成分的研宄瓶颈在于提取方法及分离纯化技术的落后，不能 很好的实现油茶中活性成分的高效提取或分离。
[0004] 3,5,4'-三羟基联苄又名二氢白藜芦醇，0八5#58436-28-5，分子式为（：14!1 1403，分子 量为230,其结构式如下所示：
【权利要求】
1. 一种从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在于：包括以下步 骤： (1) 原料准备：将普通油茶叶洗净并去除杂质，自然风干，粉碎得普通油茶叶粉备用； (2) 提取：将普通油茶叶粉用体积分数20?80%的乙醇溶液进行加热浸提，过滤得提 取液，将提取液浓缩至体积为浓缩前的30?50%，得浓缩液； (3) 分离纯化：将步骤（2)所得浓缩液的2. 0?3. 5BV过大孔树脂，吸附完成后，用2? 6 BV蒸馈水，1?8 BV体积分数15?25%的乙醇溶液，0. 5?6 BV体积分数45?55%的 乙醇溶液，0. 5?6 BV体积分数75?85%的乙醇溶液依次洗脱，分别收集洗脱液，将体积分 数45?55%和75?85%的乙醇溶液洗脱液合并，得洗脱液混合物； (4) 硅胶分离：将步骤（3)所得洗脱液混合物浓缩后进行硅胶层析，然后选用二氯 甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度递减的混合溶液作为洗脱剂先后进行洗脱，分 段收集洗脱液，经过液相色谱检测，合并含有3, 5, 4' -三羟基联苄的馏分段，命名为第 一顺序组分；合并含有1_(3'，5' -二甲氧基）苯基-2 _[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基 (6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的馏分段，命名为第二顺序组分； (5) 液相制备：将步骤（4)所得第一顺序组分浓缩后用氮吹仪吹干，用相当于其1?2 倍量mL/g的二甲基亚砜溶解，进行液相色谱检测，采用液相半制备收集3, 5, 4' -三羟基联 苄的馏分，干燥得3, 5, 4' -三羟基联苄。
2. 根据权利要求1所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在 于：将步骤（4)所得第二顺序组分浓缩后用氮吹仪吹干，用相当于其1?2倍量mL/g的 二甲基亚砜溶解，进行液相色谱检测，采用液相半制备收集1-(3'，5' -二甲氧基）苯 基-2-[4' ' -0-0 -D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的馏分，干燥 得1-(3'，5' -二甲氧基）苯基-2-[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a-L-吡喃鼠 李糖基]苯乙烷。
3. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征 在于：步骤（2)中，所述加热浸提中每克普通油茶叶粉加入1. 5?6mL体积分数20?80% 的乙醇溶液，浸提温度为50?80°C，浸提多1次，每次1?3h。
4. 根据权利要求3所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征在 于：步骤（2)中，所述加热浸提中每克普通油茶叶粉加入2?3mL体积分数45?65%的乙 醇溶液，浸提温度为60?70°C，浸提2?4次，每次2h。
5. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特 征在于：步骤（2)中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为40?50°C，真空度为0. 08? 0. 09MPa ;步骤（4)中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为35?45°C，真空度为0. 08? 0. 09MPa，浓缩后浓缩液中固含量为34?36% ;步骤（5)中，所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温 度为30?40°C，真空度为0. 08?0. 09MPa，浓缩至溶剂完全蒸发。
6. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征 在于：步骤（3)中，用3?4 BV蒸馏水，4?6 BV体积分数15?25%的乙醇溶液，1?2 BV 体积分数45?55%的乙醇溶液、1?2 BV体积分数75?85%的乙醇溶液依次洗脱。
7. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征 在于：步骤（4)中，所述二氯甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度递减的混合溶液中体积 配比依次为7?9:1:0. 1、6?8:1:0. 1、4?6:1:0. 1，洗脱体积分别为0.8?1.2BV、2.5? 3. 5BV、1. 5 ?2. 5BV。
8. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征 在于：步骤（3)、（4)中，所述洗脱的流速为0. 5?1. 5BV/h。
9. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特征 在于：步骤（3)中，所述大孔树脂为D-101型大孔树脂。
10. 根据权利要求1或2所述从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法，其特 征在于：步骤（3)中，所述大孔树脂的用量为9?11L，大孔树脂填充的径高比为1:4. 5? 5. 5 ;步骤（4)中，所述硅胶的用量为0. 8?1. 2L，硅胶填充的径高比为1:4?5。
【文档编号】C07C39/16GK104496762SQ201510013675
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2015年1月12日 优先权日:2015年1月12日
【发明者】曹清明, 邬靖宇, 钟海雁 申请人:中南林业科技大学