专利名称：制备三环的3-氧代-丙腈衍生物的方法
技术领域：
本发明是关于制备三环的3-氧代-丙腈衍生物及其药用组合物的方法。
本发明的化合物是具有下面通式的化合物和其药理可接受的盐，
其中X表示氧原子或-S(O)n-基团，n为0、1或2;
R表示C1-C6烷基、吡啶基或苯基，苯基是未取代的或由一个或二个各自选自卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、硝基、氨基、甲酰氨基和C2-C8烷酰氨基的取代基所取代;
R1是ao).氢、二(C1-C6烷基)氨基或
基团，其中R′和R″相同或不同，为C1-C6烷基，或R′和R″与和它们相连的氮原子一起形成未取代的或由C1-C6烷基所取代的杂环，这些杂环选自N-吡咯烷基、N-哌嗪基、六氢吖庚因-1-基、硫代吗啉代、吗啉代和哌啶子基;
bo).CH2OH、CHO、COOH或C2-C7烷氧羰基;
co).
基团，其中Rd为氢或C1-C6烷基，以及Rc为氢、苯基或α-氨基酸的侧链;
do).
基团，其中Rc如上文定义;
eo).
，-CH2OCO(CH2)nCOORd或-NHCO(CH2)nCOORd基团，其中n和Rd如上文定义;
fo).-CH＝N-OR1′基团，其中R1′为氢或-CH2COOH基团;
go).-CH＝N-NH-R2′基团，其中R2′为氢、-CH2CH2OH、C2或C3烷氧羰基或-(CH2)p-R3′基团，p为1或2以及R3′为COOH或C2-C7烷氧羰基;
ho).
基团，其中R′和R″如上文定义;或ko).
基团，其中R′和R″如上文定义;
lo)
取代的C2-C7烷氧羰基基团，其中R′和R″如上文定义;
每个R2和R3各自是a).氢、卤素或C1-C6烷基;
b).羟基、C1-C6烷氧基或C3或C4链烯氧基;或
c).硝基、氨基、甲酰氨基或C2-C8烷酰氨基;
R4表示氢或C1-C6烷基;以及Q表示氢、羧基、C2-C7烷氧羰基或
基团，其中Ra表示氢或C1-C20烷基，以及Rb表示C1-C20烷基和
基团，其中Rc和Rd如上文定义或是-(A)m-R5基团，m是0或1，A是C1-C6亚烷基链以及R5是a′).C5-C8环烷基;
b′).吡啶基，未取代的或由一个或二个各自选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的取代基所取代;
c′).苯基，未取代的或由一个或二个各自选自卤素、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、硝基、甲酰氨基、C2-C8烷酰氨基、二(C1-C6烷基)-氨基、羟基、甲酸基和C2-C8烷酰氧基;
d′)由一个-CH2OH、COOH、C2-C7烷氧羰基或
基团(其中R′和R″如上文定义)取代，并由选自下述基团的另一取代基任意取代的苯基，这些基团是卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、硝基、甲酰氨基、C2-C8烷酰氨基、羟基、甲酸基和C2-C8烷酰氧基;或e′)2-噻吩基、2-呋喃基或1-(C1-C6烷基)-吡咯-2-基;或f′)未取代的或C1-C6烷基取代的选自2-嘧啶基、2-噻唑基、和3-异噁唑基的杂环;
以及当R1是氢时，Q只能是
基团，其中Ra如上文定义，Rb或者是
基团(其中Rc和Rd如上文定义)或者Rb是a″).-(CH2)z-R5′基团，其中z是0、1或2以及R5′如在上文d′).e′)或f′)中定义的R5，或b″).
或-A′-R5基团，其中A′是C3-C6亚烷基链，R5如上文定义。
本发明包括在该范围内所有可能的异构体，几何异构体和光学异构体它们的混合物，以及式(Ⅰ)化合物的代谢物和代谢前体或双前体。必须提到的是式(Ⅰ)化合物还可以其互变异构，被称作式(Ⅰa)的稀醇结构，来表示
其中X、R、R1、R2、R3、R4和Q如上文定义。但在本发明范围内的式(Ⅰa)化合物在本说明书中仍以式(Ⅰ)化合物描述。
优选的卤原子是氯或氟。
烷基、链烯基、烷酰氧基、烷氧基和烷酰氨基可以是支链的或直链的基团。
优选的C1-C20烷基是C1-C6烷基。
C1-C6烷基，例如是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基，更优选的是甲基、乙基或叔丁基，特别是甲基或乙基。
优选的C3或C4链烯氧基是烯丙氧基。
C1-C6烷氧基，例如是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基或叔丁氧基，优选的是甲氧基、乙氧基或丙氧基。
优选的二(C1-C6烷基)氨基是二(C1-C4烷基)氨基，特别是二(C1或C2烷基)氨基。
优选的C5-C8环烷基是环戊基或环己基。
优选的C2-C8烷酰氨基是乙酰氨基或丙酰氨基。
优选的C2-C8烷酰氧基是乙酰氧基或丙酰氧基。
优选的C2-C7烷氧羰基是C2-C5烷氧羰基，特别是C2或C3烷氧羰基。
优选的C1-C6亚烷基链是C1-C3亚烷基链，如-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、
链。
优选的C3-C6亚烷基链是C3亚烷基链，特别是-(CH2)3-或
。
在
中，Rd如上文定义，Rc如上文定义，但Rc为氢除外。-Rc和-COORd所键连的不对称碳原子可有R或S构型。具体地说α-氨基酸的侧链是从α-氨基酸上去除氨基和羧基以及和它们键连的α-碳原子后所得到的残基。优选的上述α-氨基酸的侧链是从天然存在的氨基酸得来的侧链。这些氨基酸的实例有丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯基丙氨酸、脯氨酸、羟基脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸和苯基丝氨酸。
上述氨基酸侧链的优选实例为-CH3(由丙氨酸衍生而来)、-CH2CH(CH3)2(由亮氨酸衍生而来)和-CH2C6H5(由苯基丙氨酸衍生而来)。
药理可接受盐的实例或者是与无机碱，如钠、钾、钙和铵的氢氧化物形成的盐，或是与有机碱，如赖氨酸、精氨酸、N-甲基-谷氨酰胺、三乙胺、三乙醇胺、二苄基胺、甲基苄基胺、二(2-乙基-己基)胺、哌啶、N-乙基哌啶、N，N-二乙氨基乙基胺、N-乙基-吗啉、β-苯乙胺、N-苄基-β-苯乙胺、N-苄基-N，N-二甲胺和其它可接受的有机胺，以及与无机酸，如盐酸、氢溴酸和硫酸的盐，和有机酸，如柠檬酸、酒石酸、马来酸、苹果酸、富马酸、甲磺酸和乙磺酸的盐。优选的式(Ⅰ)化合物的盐是它们的钠盐和钾盐。
如上所述，在本发明范围内还包括式(Ⅰ)化合物的药理可接受的双前体(bioprecursors)(或称为前驱药物(prodrugs))，即该化合物的分子式不同于上述分子式(Ⅰ)，但是根据引入人体的方式，它们可以在体内直接或间接地转化为式(Ⅰ)化合物。
本发明优选的化合物是下述式(Ⅰ)化合物或其药用盐，其中X为氧或-S(O)p-基团，p为0或1;
R表示未取代的吡啶基或苯基，或由一个或二个各自选自卤素、三氟甲基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基和C2-C8烷酰氨基的取代基所取代的苯基;
R1是aoo)氢、COOH、CHO、CH2OH、C2-C7烷氧羰基、或
基团，其中每个RⅢ和RⅣ分别为C1或C2烷基，或与它们相键连的氮原子一起形成N-吡咯烷基、N-哌嗪基、吗啉代或哌啶子基环，它们是未取代的或被甲基所取代;
boo)
基团，其中Rd是氢或C1-C6烷基，以及Rc是氢、苯基或上文定义的α-氨基酸的侧链;
coo)
基团，其中Rc如上文定义;
doo)-CH2OCO(CH2)nCOORd或-NHCO(CH2)nCOORd基团，其中n和Rd如上文定义;
eoo)-CH＝N-OR1′基团，其中R1′是氢或-CH2COOH基团;
foo)-CH＝N-NHR2′基团，其中R2′是氢或-CH2CH2OH;
goo)
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;
hoo)
取代的C2-C4烷氧羰基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;
R2和R3各自是氢、卤素、硝基、氨基、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基;
R4表示氢或C1-C4烷基;
Q表示氢、C2-C5烷氧羰基或-CONRa′Rb′基团，其中Ra′是氢或C1-C6烷基，以及Rb′是C1-C6烷基或
基团，其中Rg是氢或C1-C4烷基，Rc如上文定义;或Rb′是-(A″)m-R5″基团，其中m是0或1，A″是C1-C3亚烷基链和R5″是a″′)未取代的吡啶基或苯基，或由一个或二个分别选自卤素、CF3、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、硝基和二(C1-C4烷基)氨基的取代基取代的苯基;
b″′)由-CH2OH、COOH或
基取代的苯基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义，该苯基还由选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、甲酸基和C2-C6烷酰氧基的另一个取代基任意取代;或者c″′)2-噻吩基或2-呋喃基，或者d″′)2-噻唑基或3-异噁唑基，其中所说的杂环基可以是未取代或是被甲基取代的;
以及其中当R1为氢时，Q只能是
基团，其中R′a如上文定义，Rb′是(1).
，其中Rc和Rg如上文定义，(2).-(CH2)z-R5″′，其中z是0、1或2，以及R5″′是如上文b″′)、c″′)和d″′)中所定义的R5″，或(3).
，其中R5″如上文定义。
更优选的本发明化合物是下述式(Ⅰ)化合物或其药理可接受盐，其中X是氧或硫;
R是未取代的或由选自硝基、卤素、CF3、C1-C4烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代的苯基;
R1是aooo)氢、-COOH、-CHO、-CH2OH、C2-C5烷氧羰基或
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;
每个R2和R3分别是氢、卤素、硝基、氨基、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基;
booo)
基团，其中R′d是氢或C1-C4烷基，Rc如上文定义;
cooo)
基团，其中Rc如上文定义;
dooo)-CH2OCO(CH2)nCOOR′d或-NHCO(CH2)nCOOR′d基团，其中n和R′d如上文定义;
eooo)
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;
fooo)由
取代的C2-C4烷氧羰基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;
R4表示氢或甲基;
Q表示氢或-CONRa″Rb″基团，其中Ra″是氢或C1-C4烷基，以及Rb″是C1-C4烷基或
基团，其中Rc和Rg如上文定义;或者Rb″是-(CH2)z-R5Ⅳ基团，其中z是0、1或2，以及R5Ⅳ是aⅣ)未取代的吡啶基、未取代的苯基或由选自硝基、卤素、CF3、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和二(C1-C2烷基)氨基的取代基取代的苯基;
bⅣ)由-CH2OH、-COOH或
取代的苯基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义，并由另一个选自羟基或C1-C4烷氧基的取代基任意取代;或cⅣ)2-噻吩基或2-呋喃基;
dⅣ)未取代的或由甲基取代的2-噻唑基或3-异噁唑基;並且，当R1是氢时，Q是-CONRa″Rb″基团，其中Ra″如上文定义，Rb″是(1).
基团，其中Rc和Rg如上文定义;或(2).-(CH2)z-R5Ⅴ基团，其中z如上文定义，R5Ⅴ是如bⅣ)、cⅣ)或dⅣ)中所定义的R5Ⅳ。
本发明优选的化合物实例有N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲基酯;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-丙酰基〕-DL-亮氨酸甲基酯;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基丙氨酸甲基酯;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基甘氨酸甲基酯;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(2-噻吩甲基)-丙酰胺;
2-氰基-N-(2-糠基)-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-吗啉代甲基-苄基)-3-氧代-丙酰胺;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-亮氨酸;
2-氰基-3-(8-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(6-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-甘氨酸甲基酯;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-甘氨酸甲基酯;
2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-N，N-二甲氨基乙氧羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-6-N，N-二甲氨基乙氧羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
以及它们的药理可接受盐，特别是钠盐和钾盐。
式(Ⅰ)化合物及其盐可用下述方面制备，包括a)使式(Ⅱ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4如上文定义，以及Y为羧基或羧基的活性衍生物，与式(Ⅲ)化合物反应，
其中Q′如上述Q定义，但羧基除外，这样得到式(Ⅰ)化合物，其中的Q如上文定义，但羧基除外;或者
b)使式(Ⅳ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4如上文定义，与式(Ⅴ)化合物反应，其中Rb如上文定义，这样就得到了Q是-CONHRb基团的式(Ⅰ)化合物，其中Rb如上文定义;或者c)使式(Ⅵ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4的定义如上文，Z是羧基的活性衍生物，与式(Ⅶ)的化合物
反应，其中Ra和Rb如上文定义，这样就得到Q是
基团的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rb如上文定义;或者d)水解Q是C2-C7烷氧羰基或是
基团的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rc如上文定义，Rd是C1-C6烷基，这样就得到了Q是游离羧基或是
基团的相应的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rc如上文定义;并且，如果需要，可将一种式(Ⅰ)化合物转化成另一种式(Ⅰ)化合物和/或，如果需要，将式(Ⅰ)化合物转化成药理可接受的盐和/或，如果需要，将盐转化成游离化合物，和/或如果需要，将式(Ⅰ)化合物的异构体混合物分离成单个的异构体。
当Y是羧基的活性衍生物时，举例来说，它是卤代羰基，优选的是氯代羰基，或是C2-C7烷氧羰基，优选的是C2或C3烷氧羰基。
举例来说，在有缩合剂，如二乙基氰基膦酸酯，有碱，如三乙胺存在下，在惰性溶剂，如二甲基甲酰胺中，在温度变化为大约0°-大约50℃条件下，Y为羧基的式(Ⅱ)化合物与式Ⅲ化合物之间的反应可以进行。
例如，在强碱，如氢化钠、叔丁醇钾、乙醇亚铊存在下，在惰性溶剂，如1，2-二甲氧基乙烷、二噁烷、二甲基甲酰胺中，在温度变化范围大约0℃至大约100℃之间的条件下，Y为羧基的活性衍生物的式(Ⅱ)化合物与式Ⅲ化合物之间的反应可以进行。
例如，在有碱，如氢化钠或三乙胺存在下，在惰性溶剂，如甲苯、二噁烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺中，在温度变化为大约0℃至大约100℃之间的条件下，式(Ⅳ)化合物和式(Ⅴ)化合物之间的反应可以进行。
在式(Ⅵ)化合物中，举例来说Z是卤代羰基，优选的是氯代羰基，或是C2-C7烷氧羰基，优选的是C2-C3烷氧羰基。
例如，在惰性溶剂，如二氯乙烷、二噁烷、二甲基甲酰胺中，以吡啶或三乙胺作为酸接受体存在下，在温度变化为大约0℃至大约100℃之间的条件下，z为卤代羰基的式(Ⅵ)化合物和式(Ⅶ)化合物之间的反应可以进行。
z为C1-C6烷基酯的式(Ⅵ)化合物与式(Ⅶ)化合物之间的反应可以进行，例如在芳香烃，如甲苯或二甲苯中于回流温度下加热，最好是将反应中生成的游离的C1-C6链烷醇与稀释剂一起慢慢蒸出。
根据上述变化方法d)，Q是C2-C7烷氧羰基或
基团，其中Ra和Rc如上文定义，Rd是C1-C6烷基的式(Ⅰ)化合物的水解可以选择碱性水解方法进行，例如在溶剂，如在乙醇或二甲基甲酰胺中使用氢氧化钠或氢氧化钾水溶液，温度变化大约为0℃至大约80℃之间。
如上所述，用已知的方法，可以使式(Ⅰ)化合物转化成另一种式(Ⅰ)化合物;例如用浓盐酸中的氯化亚锡处理，可使式(Ⅰ)化合物上的硝基转化成氨基，必要时，还可使用诸如乙酸、二噁烷、四氢呋喃的有机共溶剂，温度变化范围在室温至大约100℃之间。再如，氨基可以转化成甲酰氨基或C2-C8烷酰氨基，如使之与甲酸或适当的C2-C8烷酰基酐反应，没有溶剂或在有机溶剂如二噁烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃中，一般在有碱，如吡啶或三乙胺存在下，在温度变化范围为大约0℃至大约100℃来完成。再如，-NH2或-CH＝N-NH2可以转化成
或
，其中R′和R″各自如上文定义，按照英国专利说明书1，293，590和USP4，447，432中所述的实验方法，使其与式(Ⅶa)的季氮化合物反应，
其中R′和R″如上文定义，反应在有机惰性溶剂如二噁烷、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、苯或甲苯中，在有叔胺如三乙胺存在下，温度变化在约-20℃至室温下进行。再如，氨基可转化成
基团，其中Rc如上文定义，使其与一经适当保护的，结构式为
的α-氨基酸进行反应，其中Rc定义如上文，E是保护基，如苄氧基羰基或叔丁氧基羰基，反应以二环己基碳化二亚胺作缩合剂，在惰性有机溶剂如二噁烷、四氢呋喃或乙腈中，在温度变化范围为大约0℃至室温之间进行，这样就得到了有保护基的
基团，其中Rc和E如上文定义，然后它再用有机化学中已知的方法脱去保护。再如，羧基可转化成
基团，其中Rc如上文定义，按照现有技术的方法，如上文的变化方法d)中所述的方法，使其与结构式为
的酯化α-氨基酸反应，其中Rd′是C1-C6烷基，Rc如上文定义，反应以二环己基碳化二亚胺作缩合剂，在惰性有机溶剂如二噁烷、四氢呋喃或乙腈中，在温度变化范围为大约0℃至室温下进行，这样就得到了酯化的
基团，其中Rc和Rd′如上文定义，然后再将其水解得到
基团，其中Rc如上文定义。再如，在温度为大约0℃至大约80℃，在诸如二噁烷、甲醇、乙醇或二甲基甲酰胺溶剂中以氢氧化钠或氢氧化钾水溶液处理，可使烷氧基羰基、
、-CH2OCO(CH2)nCOORd′或-NHCO(CH2)nCOORd′基团，(其中n和Rd′如上文定义)各自转化成相应的-COOH、
，-CH2OCO(CH2)nCOOH和-NHCO(CH2)nCOOH基团，其中n如上文定义。
羧酸酯任意转化成游离羧基衍生物以及游离羧基的任意酯化可以按照有机化学中已知的方法进行。
上面叙述的变化方法b)和c)也可以被看作使式(Ⅰ)化合物转化成另一种式(Ⅰ)化合物的实例。
式(Ⅰ)化合物任意成盐作用以及盐转化成游离化合物，和将异构体混合物分离成单一异构体也可以常规方法进行。
例如，使其与光学活性的碱或酸成盐，和使非对映体盐连续分级结晶，接着分别回收光学活性异构的酸或碱来实现分离光学异构体。
按照我们的共同待批的欧洲专利申请No.88300115.8中所述的方法可以制备Y是C2-C7烷氧羰基的式(Ⅱ)化合物，例如，使式(Ⅷ)化合物
其中X、R1、R2、R3和R4如上文定义，R6是C1-C6烷基，最好是C1-C2烷基，与式(Ⅸ)化合物反应，
其中R如上文定义。
例如，在温度为大约0℃至约150℃之间，在诸如C1-C5链烷醇、二噁烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、乙酸等溶剂中，可以进行式(Ⅷ)化合物与式(Ⅸ)化合物的反应。
按照现有技术的标准方法，如碱性水解，水解Y为C2-C7烷氧羰基的式(Ⅱ)化合物可以制备相应的、Y为羧基的式(Ⅱ)化合物。如在温度为大约0℃至大约80℃之间，在诸如水、C1-C6链烷醇、二噁烷、二甲基甲酰胺及其混合物等溶剂中，用氢氧化钠或氢氧化钾处理来完成。
例如，在温度为大约0℃至大约100℃之间，在诸如乙醚、苯、二氯乙烷、二噁烷的惰性溶剂中或没有溶剂的情况下，使Y为羧基的相应的式(Ⅱ)化合物与适当的酰基卤，如草酰氯、亚硫酰二氯、PCl3、PBr3进行反应，可以制备Y为卤代羰基，优选的是氯代羰基的式(Ⅱ)化合物。
在某些情况下，式(Ⅲ)化合物为商品化产品，或用现有技术的方法制备。例如，Q是
基团(其中Ra、Rb如上文定义)的式(Ⅲ)化合物可以在温度为大约0℃至大约50℃，在惰性有机溶剂如苯、二噁烷、乙腈中，用二环己基碳化二亚胺、1，1-羰基二咪唑等作缩合剂，使氰基乙酸与式(Ⅶ)化合物反应来制备。
式(Ⅳ)化合物是Q为氢的通式(Ⅰ)化合物，可用上述方法a)得到。例如，在温度为大约0℃至大约100℃，在有机惰性溶剂如苯、二噁烷、四氢呋喃中，在有强碱如氢化钠、叔丁醇钾存在下，使Y为C2-C7烷氧羰基的式(Ⅱ)化合物与乙腈反应制备。
Z是C2-C7烷氧羰基的式(Ⅵ)化合物是Q为C2-C7烷氧羰基的通式(Ⅰ)化合物，它可从上述方法a)，例如，用上述式(Ⅱ)化合物与式(Ⅲ)化合物反应相同的实验条件，使式(Ⅱ)化合物与式(Ⅹ)化合物，
其中R7是C1-C6烷基，进行反应得到。
举例来说，Z为卤代羰基的式(Ⅵ)化合物可以用Z为C2-C7烷氧羰基的式(Ⅵ)化合物进行碱性水解来制备，例如，用上述为了得到相应的羧基衍生物使Y为C2-C7烷氧羰基的式(Ⅱ)化合物水解的相同的实验条件，再用与制备Y为卤代羰基的式(Ⅱ)化合物的相同实验条件，使该羧基衍生物转化成式(Ⅵ)化合物，其中Z为卤代羰基，优选的是氯代羰基。
例如，制备式(Ⅷ)化合物，可使式(Ⅺ)化合物，
其中X、R1、R2、R3和R4如上文定义，与式(Ⅻ)化合物进行反应，
其中各R8和R8′相同或不同，为C1-C6烷基，优选的是甲基或乙基。
式(Ⅺ)化合物与式(Ⅻ)化合物之间的反应可以温度为大约0℃至大约100℃，在诸如C1-C6链烷醇、苯、二噁烷二甲基甲酰胺等有机溶剂中，在强碱，如甲醇钠、乙醇钠、氢化钠、叔丁醇钾的存在下进行。
式(Ⅺ)化合物可以按现有技术的合成方法制备，如可按J.A.C.S76，5065(1954)和“AdvancesinHeterocyclicChemistry”，18，59(1975)中所述方法制备。
式(Ⅴ)、(Ⅶ)、(Ⅸ)、(Ⅹ)和(Ⅻ)化合物为已知产品，可用常规方法制备，在某些情况下它们是商品化的产品。
在本发明的化合物及其中间产物中，有在使它们进行上述反应前需要进行保护的基团，如COOH、NH2、CHO和/或OH，可以按照有机化学中的已知方法在反应前使其保护，而后脱去保护。
式(Ⅰ)化合物具有免疫调节活性，并可用作免疫调节剂，例如，单独使用或与抗生素共同使用，用于治疗由细菌和病毒源引起的哺乳动物的急性和慢性感染，以及单独或与抗肿瘤剂共同使用治疗哺乳动物的赘生性疾病。
举例来说，在体外试验中本发明化合物能有效地提高巨噬细胞对肿瘤细胞的细胞毒性活性的事实证明这些化合物的免疫调节活性。
评价这种活性的实验方法如下4只小鼠为一组的数组用试验化合物腹膜内处理，然后七天后收集腹膜细胞並在37℃下涂板2小时。在这段时间以后，将器壁洗涤以除去非粘连细胞，然后加入肿瘤靶细胞，培养48小时，培养结束后用比色法评价靶细胞存活率並在570nm定量。
由于几乎可忽略的毒性，本发明化合物可安全使用于药物。
对不同的临床症状治疗的方法必须适合于所考虑到的病理类型，照例还要适合于服用的方法，化合物的服用形式以及所涉及到的受治疗者的年龄、体重和条件。
一般来说，口服方法可在任何需要这种化合物的条件使用。治疗急性感染最好是静脉注射和输注。对于维持的状态优先选用口服或肠胃外，如肌肉或皮下的给药方式。
为此目的，本发明化合物的口服给药剂量范围可从成人每天每公斤体重大约0.5-10mg。
对成人肠胃外给药使用的活性化合物剂量范围可从每公斤体重大约0.2-5mg。当然，这些剂量方案可以调整以达到最佳治疗响应。
含有本发明化合物的，与药理可接受载体或稀释剂结合的药物组合物的性质当然要依赖于所要求的服药方法。
组合物可以常规方式与常用成分配成制剂。如本发明化合物可以水或油溶剂或悬浮剂、片剂、丸剂、胶囊、糖浆、滴剂或栓剂的形式给药。
因此，含有本发明化合物的药用组合物的口服制剂优选的是含有活性物质并含有稀释剂和润滑剂的片剂、丸剂或胶囊，稀释剂如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素;润滑剂如二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁或钙，和/或聚乙二醇;或者它们还含有粘合剂，如淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素、阿拉伯胶、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮;解聚剂，如淀粉、藻朊酸、藻朊酸酯、甘醇酸淀粉钠;发泡混合物;着色剂;甜味剂;湿润剂，如卵磷脂、聚山梨酸酯、月桂基硫酸酯;以及一般说来在药物制剂中使用的非毒性和药学上非活性的物质。
所说的药物制备可以用已知的方法，例如用混合、造粒、压片、包敷糖衣、包敷薄膜的方法。
口服使用的液体分散剂可以是，例如为糖浆、乳剂和悬浮剂。
糖浆可含有诸如蔗糖或带有甘油的蔗糖和/或甘露糖醇和/或山梨糖醇作载体。
悬浮剂和乳剂可含有诸如天然胶、琼脂、藻朊酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇作载体。
肌肉注射用的悬浮液或溶液中与活性化合物一起还含有药理可接受的载体，例如无菌水、橄榄油、油酸，二醇类如丙二醇，以及如需要时包括适量的盐酸利多卡因。
用于静脉注射和输注的溶液可含有载体，如无菌水，或最好是无菌含水等渗盐溶液的形式。
栓剂中与活性化合物一起可含有药理可接受载体，如可可-奶油、聚乙烯醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯肪酸酯表面活性剂或卵磷脂。
下面的实施例说明本发明但不限定本发明实施例1将1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸(2g)与亚硫酰氯(1ml)于二噁烷(40ml)中，于回流温度下反应2小时。冷却后，将溶液于真空下蒸干，得到晶状残留物1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-碳酰氯。将粗产物溶于无水二噁烷(15ml)中并于搅拌和室温下与阴碳离子反应2小时，阴碳离子是由氰基乙酸，2-吗啉代甲基-苄基酰胺(1.95g)与50%氢化钠(0.39g)，在无水二噁烷/二甲基甲酰胺9∶1(20ml)中，于室温下处理而得到的。
然后用冰水稀释反应混合物并用柠檬酸酸化至pH3。滤出沉淀物并溶于CHCl3中，有机溶液用2%的柠檬酸溶液，然后用水洗涤。在真空下蒸发至干，得到残余物，将其在快速柱上提纯，使用氯仿/甲醇(10∶0.5)作为洗脱液。从氯仿/甲醇中最后结晶，得到1.1g2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-吗啉代甲基-苄基)-3-氧代-丙酰胺，m.p.243-245℃。
使用相似方法可制备下列化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-吗啉代甲基-苄基)-3-氧代-丙酰胺，m.p.150℃分解;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕-吡唑-3-基)-N-(3-二甲基氨基甲基-苄基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-甲氧基-3-吗啉代甲基苄基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(4-甲氧基-3-吗啉代甲基苄基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-〔2-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基-苄基〕-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-〔2-(吡咯烷-1-基)甲基-苄基〕-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-吗啉代甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-吗啉代甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-二甲基氨基甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-二甲基氨基甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-甲氧基-3-吗啉代甲基苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(2-羟基-3-吗啉代甲基苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(4-甲氧基-3-吗啉代甲基苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-羟基-4-羟基甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;和2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-羟基-4-羟基甲基-苄基)-3-氧代-丙酰胺。
实施例2用与实施例1相似的方法，通过与合适的氰基乙酰胺反应，可以制备下列化合物2-氰基-N-(2-糠基)-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺，m.p.236-238℃;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(2-噻吩甲基)-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-〔2-(1-甲基-吡咯-2-基)-乙基〕-3-氧代-丙酰胺，m.p.171-176℃;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(2-噻唑基)-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-异噁唑基)-3-氧代-丙酰胺;和2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(1-苯乙基)-丙酰胺，m.p.228-230℃。
实施例3用与实施例2相似的方法，从合适的取代的1，4-二氢-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕-吡唑-3-羧酸开始可以制备下列化合物2-氰基-3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.249-253℃;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.200-210℃分解;
2-氰基-3-(8-氟-1，4-二氢-6-二甲基氨基甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-〔8-氟-1，4-二氢-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-〔8-氟-1，4-二氢-1-苯基-6-(吡咯烷-1-基)-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-〔1，4-二氢-8-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-〔1，4-二氢-1-苯基-8-(吡咯烷-1-基)-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
N-苄基-2-氰基-3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
N-苄基-2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-N-(4-氟-苯基)-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;和N-(3-氯-苯基)-2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺。
实施例4将1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯(3.2g)与1%KOH在乙醇中的溶液(80ml)于回流温度下加热30分钟。反应混合物用冰水稀释并用37%HCl酸化至pH3。滤出沉淀，用水洗涤并于50℃于真空下干燥，得到1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸(2.6g)，将其于二噁烷中(50ml)，于回流温度下与亚硫酰氯(0.9ml)反应2小时。冷却后，将溶液于真空下蒸发至干，得到晶状残余物1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-碳酰氯。将粗产物溶于无水二噁烷(35ml)中，并于搅拌和室温下与阴碳离子反应1小时，阴碳离子是由N-氰基乙酰甘氨酸甲酯(1.44g)与50%氢化钠(0.54g)在无水二甲基甲酰胺/二噁烷1∶1(30ml)中，于室温下处理而得到的。然后用冰水稀释反应混合物，并用N HCl酸化至pH2。滤出沉淀物并溶于乙酸乙酯中，然后用N HCl洗涤有机溶液，然后用水洗涤直至成为中性。蒸发至干燥，得到残余物，将其在快速柱上提纯，使用氯仿/甲醇/30%NH4OH(80∶20∶0.5)作为洗脱液。用丙酮最终处理提纯的馏份，得到1.65g N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲酯，m.p.208-210℃，NMR(CDCl3)δppm3.81(S)(3H，-COOCH3)，4.18(d)(2H，-CONHCH2-)，4.21(S)(2H，-S-CH2-)，6.82(t)(1H，-CONHCH2)，6.85-7.7(m)(9H，苯基质子)，16.32(S)(1H，-OH)。
使用相似的方法可以制备下列化合物N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-亮氨酸甲酯，m.p.115-125℃;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基甘氨酸甲酯，m.p.180-182℃;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基丙氨酸甲酯;和N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-异亮氨酸甲酯。
同样地可以制备上述化合物的纯D和L对映体。
实施例5将N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲酯(1.9g)悬浮于1%的KOH在95%乙醇的溶液(61ml)中并于搅拌下，于回流温度下加热30分钟。冷却后，滤出沉淀物并用乙醇洗涤，然后溶于水中。用乙酸乙酯萃取此碱性水溶液，然后用2N HCl酸化至pH2。用乙酸乙酯萃取此沉淀，用N HCl洗涤，然后用水洗涤有机溶液至中性。于真空下蒸发至干，得到残余物，将其用乙醇崩解，得到1.35g N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸，m.p.224-226℃，NMR(DMSO d6)δppm3.94(S)(2H，-CONHCH2-)，4.19(S)(2H，-S-CH2)，6.8-7.7(m)(9H，苯基质子)。
使用相似的方法可以制备下述化合物N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-亮氨酸，m.p.220-222℃;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基丙氨酸;
N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-苯基甘氨酸，m.p.210-213℃;和N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-DL-异亮氨酸。
同样地可以得到上述的化合物的纯D和L对映体。
实施例6使8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯(5.6g)与乙腈(15ml)在二噁烷(15ml)中，于50%氢化钠(0.6g)存在下，于搅拌下，60℃反应30分钟。冷却后，用冰水稀释反应混合物，用柠檬酸酸化至pH3。用乙酸乙酯萃取沉淀，用水洗涤有机相至中性，然后在真空下蒸发至干。在SiO2柱上纯化残余物，用氯仿/甲醇(95∶5)作为洗脱液，得到2.4g3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙腈，m.p.187-189℃。
使用相似的方法可以制备如下化合物3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙腈，m.p.189-190℃。
实施例7使3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙腈(2.8g)与异氰酸苯酯(0.8g)于二甲基甲酰胺(20ml)中，在三乙基胺(0.7g)存在下，于25-30℃反应30分钟。用冰水稀释反应混合物，用柠檬酸酸化至pH3。滤出沉淀并溶于氯仿中，用2%柠檬酸溶液洗涤，然后用水洗涤有机溶液至中性。在真空中蒸发至干，得到残余物，将其从氯仿/乙醇中结晶，得到1.9g2-氰基-3-(8-氟-1，4-二氢-6-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺m.p.249-253℃。
使用相似的方法可以制备如下化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.200-210℃分解。
实施例8使40.5g2，3-二氢-4-氧代-4H-〔1〕-苯并噻喃-6-羧酸(m.p.223-225℃)与46.3g亚硫酰氯于无水二噁烷(810ml)中，于回流温度下反应4小时。冷却后，将溶液于真空下蒸干，将粗2，3-二氢-4-氧代-4H-〔1〕-苯并噻喃-6-碳酰氯残余物溶于无水苯(600ml)中。氮气氛下，于室温将此溶液加入搅拌过的无水叔丁醇(300ml)在苯(500ml)和吡啶(470ml)中的混合物中。于室温下使反应混合物反应20小时，然后于真空下蒸发至干。将残余物溶于乙酸乙酯中，有机溶液用5%柠檬酸溶液洗涤，然后用水洗至中性，最后在真空下蒸发至干。残余物在SiO2柱上纯化，使用己烷/乙酸乙酯(90/10)作为洗脱液。
于搅拌下将回收的产物用己烷处理，得到2，3-二氢-4-氧代-4H-〔1〕-苯并噻喃-6-羧酸叔丁酯，m.p.125-127℃(34.5g)，于搅拌和室温下，将其与草酸二乙酯(83.8g)于无水乙醇(1000ml)中，在乙醇钠(31g)存在下反应2小时。用冰水稀释反应混合物并用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀，用水洗涤，然后溶于乙酸乙酯中。在真空下将有机溶液蒸发至干，得到3-乙草酰基-2，3-二氢-4-氧代-4H-〔1〕-苯并噻喃-6-羧酸叔丁酯(45g)，将其与苯肼(16g)于乙酸(1660ml)中，于25-30℃反应90分钟。用冰水稀释反应混合物并滤出沉淀，将其溶于氯仿中并用水洗涤。在真空下蒸出溶剂后，于搅拌下用异丙醚处理来提纯残余物，得到8-叔-丁氧基羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯，m.p.146-149℃(27.5g)。于搅拌下，室温，用在95%乙醇(1200ml)中的氢氧化钾(5.3g)处理的方法将所得产物水解20小时。用冰水稀释反应混合物并用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀，用水洗涤至中性并在真空下于80℃干燥，得到8-叔-丁氧基羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸，m.p.295-297℃(23.9g)，将其溶于无水二噁烷(1000ml)中并于催化量的二甲基甲酰胺(70mg)存在下，于室温，与草酰氯(16.3g)反应4小时。在真空下将反应混合物蒸发至干，将残余物8-叔-丁氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-碳酰氯(24.8g)溶于无水二噁烷(980ml)中，并于搅拌下，于室温将其加入用无水二噁烷(1230ml)中的50%氢化钠(3.75g)处理氰基N-乙酰苯胺(10.28g)得到的悬浮液中。于搅拌和室温下将反应混合物保持1小时，然后用冰水稀释并用2NHCl酸化至pH3。滤出沉淀并溶于乙酸乙酯中，用1NHCl洗涤有机溶液，然后用水洗至中性。在真空下蒸发至干，得到的残余物于回流下用乙醇处理进行提纯。冷却后，滤出沉淀并用乙醇洗涤，得到3-(8-叔-丁氧基羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.229-230℃(12.8g)，于搅拌和室温下将其与三氟乙酸(128ml)反应1小时。用乙醇(128ml)稀释反应混合物并滤出沉淀，用乙醇洗涤，得到11.3g3-(8-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.284-287℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物3-(6-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.283-287℃;
3-(8-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和3-(6-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-N-(4-氟-苯基)-3-氧代-丙酰胺。
实施例9在无水碳酸钾(0.36g)存在下，于搅拌和室温下使溶于二甲基甲酰胺(50ml)中的3-(8-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(0.65g)与甲基碘(0.37g)反应2小时。用冰水稀释反应混合物，滤出沉淀，溶于氯仿并用1N HCl，然后用水洗涤。在真空下蒸去溶剂，得到残余物，将其从CH2Cl2/甲醇中结晶，得到0.48g2-氰基-3-(1，4-二氢-8-甲氧基羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.228-230℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(8-乙氧基羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.241-242℃;
2-氰基-3-(6-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.263-264℃;
N-(3-氯-苯基)-2-氰基-3-(6-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(6-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(4-氟-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(6-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(3-三氟甲基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-〔6-乙氧羰基-1-(4-氟-苯基)-1，4-二氢-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和2-氰基-3-(8-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例10于搅拌和室温下，使悬浮于无水乙腈(250ml)中的甘氨酸甲酯氢氯化物(0.7g)与三乙基胺(0.56g)反应。首先向悬浮液中加入3-(8-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(2.5g)，然后加入二环己基碳化二亚胺(1.25g)。于搅拌和室温下将反应混合物保持4小时，然后加入二甲氨基乙醇碱化至pH8。滤出沉淀，用乙腈洗涤然后进行分离。在真空下浓缩有机溶液至小体积，用水稀释，用1N HCl酸化至pH2，最后用1N NaOH碱化至pH8。滤出所得沉淀，用水洗涤，溶于氯仿并用1N HCl洗涤，然后用水洗至中性。在真空下将有机溶液蒸发至干，在SiO2柱上提纯残余物，使用氯仿/甲醇(90/10)作洗脱液。最后由CH2Cl2/乙酸乙酯结晶，得到1.48gN-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基-氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8基〕羰基甘氨酸甲酯，m.p.253-256℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-甘氨酸甲酯，m.p.268-273℃分解;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-L-丙氨酸甲酯;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-L-丙氨酸甲酯;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-L-亮氨酸甲酯;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-L-亮氨酸甲酯;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕-羰基-L-苯基-丙氨酸甲酯;和N-｛3-〔2-(4-氟苯基氨基甲酰基)-氰基乙酰基〕-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基｝羰基甘氨酸甲酯。
实施例11将N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-甘氨酸甲酯(0.9g)悬浮于1%KOH在95%乙醇的溶液(22.3ml)中，于搅拌和回流温度下加热30分钟。冷却后，用23%HCl将反应混合物酸化至pH2，然后用冰水稀释。滤出沉淀，用水洗涤，然后从CHCl3/乙醇中结晶，得到0.73gN-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基甘氨酸，m.p.244-250℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-甘氨酸;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-L-丙氨酸;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-L-丙氨酸;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-基〕羰基-L-亮氨酸;
N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-L-亮氨酸;和N-〔1，4-二氢-1-苯基-3-(2-苯基氨基甲酰基-氰基乙酰基)-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-6-基〕羰基-L-苯基-丙氨酸。
实施例12于回流温度及搅拌下，将溶于无水四氢呋喃(23ml)的3-(8-氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(1.1g)与琥珀酐(0.71g)反应3小时。冷却后，用冰水稀释反应混合物。滤出沉淀并用水洗涤。从CHCl3/甲醇结晶得到0.9g3-〔8-(3-羧基-丙酰基氨基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.230-233℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物
3-〔6-(3-羧基-丙酰基氨基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
3-〔8-(2-羧基-乙酰基氨基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和3-〔8-(3-羧基-丙酰基氨基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例13将3-(8-氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(1.2g)溶于含吡啶(1ml)的无水二甲基甲酰胺(70ml)中，于搅拌和室温下将其与乙基草酰氯(0.7g)反应6小时。用冰水稀释反应混合物，用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀并用水洗涤。从CHCl3/乙醇中结晶得到1.2g2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.273-277℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(6-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(4-氟-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
N-(3-氯-苯基)-2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-N-(3-硝基-苯基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-(3-三氟甲基-苯基)-丙酰胺;和2-氰基-3-〔8-乙草酰基氨基-1-(4-氟-苯基)-1，4-二氢-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例14用95%的乙醇(50ml)稀释在95%乙醇中的1%KOH溶液(28.6ml)，于搅拌和室温下处理2-氰基-3-(8-乙草酰基氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺3小时。在真空下将反应混合物浓缩至小体积，然后用冰水稀释并用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀并用水洗涤。从CHCl3/乙醇中结晶得到0.7g2-氰基-3-(1，4-二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.236-242℃，分解。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-6-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-N-(4-氟-苯基)-3-(1，4-二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
N-(3-氯-苯基)-2-氰基-3-(1，4-二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;
2-氰基-3-〔1-(4-氟-苯基)-1，4二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-丙酰胺;和2-氰基-3-(1，4-二氢-8-草酰氨基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡咯-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例15按照实施例8制备的8-叔-丁氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯(11.9g)，于搅拌、室温下与三氟乙酸(132ml)反应3小时。用冰水稀释反应混合物并滤出沉淀，用水洗涤至中性。从异丙醇中结晶得到3-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-羧酸m.p.222-225℃(9.2g)。于回流温度下，将其与亚硫酸氯(5.3ml)于无水二噁烷(90ml)中反应2小时。冷却后，在真空下将溶液蒸发至干，将残余物3-乙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-8-碳酰氯溶于无水二甘醇二甲醚(100ml)中，于惰性气氛下将其滴加入搅拌过的氢化三叔丁氧铝锂(15.4g)在无水二甘醇二甲醚(90ml)的溶液中，用这种方法保持温度在0℃-4℃。在约0℃于搅拌下使反应混合物反应1小时，然后用冰水稀释，用23%HCl酸化至pH1并用氯仿萃取。用水洗涤有机溶液，然后于真空下蒸发至干。在SiO2柱上提纯残余物，用己烷/乙酸乙酯(7/3)作为洗脱液。从CH2Cl/异丙醚中结晶，得到纯1，4-二氢-8-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯，m.p.160-162℃(4.2g)，在二异丙基乙基胺(2.96ml)存在下，于室温，将其与2-甲氧基乙氧基氯代甲烷(2.13g)在二氯甲烷(60ml)中反应20小时。在分液漏斗中先用5%Na2HPO4溶液洗涤反应混合物，然后用水洗至中性。在真空下将有机相蒸发至干，从异丙醚中结晶残余物，得到1，4-二氢-8-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸乙酯，m.p.66-68℃(5g)，于搅拌下，于45℃将其用KOH(0.4g)在95%乙醇(52ml)处理40分钟。然后用冰水稀释反应混合物并用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀，用水洗至中性并在真空下于80℃干燥，得到1，4-二氢-8-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-羧酸，m.p.136-139℃(4.26g)。将其溶于无水二噁烷(50ml)中，于室温下，在二甲基甲酰胺(11mg)存在下，将其与草酰氯(1.9ml)反应1小时。在真空下，将反应混合物蒸发至干，将残余物，粗1，4-二氢-8-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-碳酰氯，溶于无水二噁烷(50ml)中，于搅拌下，于室温将其与阴碳离子反应1小时，阴碳离子是通过用50%氢化钠(0.6g)在无水二噁烷(140ml)中处理氰基-N-乙酰苯胺(1.76g)得到的。然后用冰水稀释反应混合物并用2NHCl酸化至pH3。
滤出沉淀，用水洗涤并从CH2Cl2/异丙醇中结晶，得到2-氰基-3-〔1，4〕-二氢-8-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.150-153℃(1.6g)，于搅拌下将其悬浮于含有37%HCl(8ml)的甲醇(800ml)中并于45℃加热20小时。冷却后，在真空下浓缩反应混合物至小体积并用冰水稀释。滤出沉淀并用水洗至中性。从CH2Cl2/甲醇中结晶，得到1.1g2-氰基-3-(1，4-二氢-8-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.153-158℃分解。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-6-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并吡喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;
2-氰基-N-(4-氟苯基)-3-(1，4-二氢-8-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺;和N-(3-氯-苯基)-2-氰基-3-(1，4-二氢-8-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰胺。
实施例16将3-(8-羧基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(1.35g)溶于无水乙腈(110ml)中，于二环己基碳化二亚胺(1.12g)和4-二甲基氨基吡啶(0.265g)存在下，于搅拌和室温下将其与N，N-二甲基氨基乙醇(0.73g)反应24小时。滤去沉淀，在真空下将有机溶液浓缩至小体积。用水稀释残余物，用N HCl酸化至pH2，然后用N NaOH碱化至pH8。滤出沉淀并在SiO2柱上提纯，使用氯仿/甲醇/30%NH4OH(80/20/0.3)作为洗脱液。将回收的产品溶于二甲基甲酰胺(20ml)中，用2N HCl酸化至pH2，用水(50ml)稀释，然后用2N NaOH碱化至pH8。滤出沉淀并用水洗涤，得到0.4g2-氰基-3-(1，4-二氢-8-N，N-二甲氨基乙氧羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.217-220℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-6-N，N-二甲氨基乙氧羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.210-217℃分解;
2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代乙氧羰基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕-吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和2-氰基-3-(8-N，N-二乙氨基丙氧羰基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例17于搅拌和室温下，使溶于无水乙醚(200ml)的N-甲酰吗啉(7.58g)与草酰氯(8.02g)反应20小时。滤出沉淀，用无水乙醚洗涤并于真空下于室温干燥1小时，得到8.9g4-氯亚甲基-吗啉氯化物。将此化合物(5.47g)于-15℃分批加入搅拌过的3-(8-氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(3g)的无水四氢呋喃(130ml)溶液中，此溶液还含有三乙基胺(8.96ml)。将反应混合物于搅拌下在-15℃保持2小时，然后于约0℃再保持2小时。最后用冰水稀释，并用柠檬酸酸化至pH4。滤出沉淀，于50℃真空下干燥，然后在SiO2柱上提纯，使用氯仿/甲醇/30%NH4OH(85/12/0.5)作洗脱液。从甲醇中结晶回收的产物，得到1.4g2-氰基-3-(1，4-二氢-8-吗啉代亚甲基氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.205-210℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(1，4-二氢-6-吗啉代亚甲基氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰基;
2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-8-哌啶亚甲基氨基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和2-氰基-3-(1，4-二氢-8-二甲基氨基亚甲基氨基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例18在二环己基碳化二亚胺(0.53g)存在下，于搅拌和室温下，使溶于无水乙腈(10ml)的3-(8-氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(1g)与N-叔-丁氧基-羰基甘氨酸(0.41g)反应2小时。滤出沉淀，用乙腈洗涤，然后分离。在真空下将有机溶液蒸发至干并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取残余物。滤去不溶的残余物并在真空下将透明的有机溶液蒸发至干。在快速柱上提纯粗产物，用氯仿/甲醇/乙酸(85/15/0.5)作洗脱液。从氯仿-乙酸乙酯中结晶回收的产物，得到3-〔8-(N-叔-丁氧羰基甘氨酰)氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.190-200℃(0.36g)，将其悬浮于含气体HCl的乙酸乙酯(约2.5N溶液)中并于搅拌和室温下保持4小时。滤出沉淀，用乙酸乙酯洗涤，悬浮于水中并用15%NH4OH处理至pH8。于搅拌和室温下保持悬浮液，然后滤出沉淀并用水洗涤。于回流温度下用甲醇纯化，得到0.2g2-氰基-3-(8-甘氨酰氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺，m.p.218-221℃。
使用相似的方法可以制备下列化合物2-氰基-3-(6-甘氨酰氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺;和3-(8-L-丙氨酰氨基-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例19于搅拌下于45℃使2-氰基-3-(1，4-二氢-6-羟甲基-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-N-苯基-丙酰胺(1.2g)与琥珀酐(0.8g)在无水吡啶(40ml)中反应20小时。冷却后用冰水稀释反应混合物然后滤出沉淀并用水洗涤。从CH2Cl2/异丙醇中结晶得到0.95g3-〔6-(3-羧基-丙酰基氧甲基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
使用相似的方法可以制备下列化合物3-〔8-(3-羧基-丙酰基氧甲基)-1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基〕-2-氰基-3-氧代-N-苯基-丙酰胺。
实施例20使用化学量的乙醇中的乙醇钠处理的方法使N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲酯溶解。于真空下将溶液蒸发至干并用丙酮崩解产物。过滤，用丙酮洗涤，得到纯N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲酯的钠盐，m.p.＞260℃。
实施例21每片重150mg并含50mg活性物质的片剂可按下法制造配方(1000片)N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基)-甘氨酸甲酯500g乳糖710g玉米淀粉238g滑石粉36g硬酯酸镁16g将N-〔2-氰基-3-(1，4-二氢-1-苯基-〔1〕-苯并噻喃并〔4，3-C〕吡唑-3-基)-3-氧代-丙酰基〕-甘氨酸甲酯与一半玉米淀粉混合;然后将混合物加压通过0.5mm孔的筛。将玉米淀粉(18g)悬浮于温水(180ml)中。将所得糊状物用于使粉成颗。干燥颗粒，在筛孔为1.4mm的筛上细分，然后加入剩余量的淀粉、滑石粉和硬酯酸镁，仔细混合并使用8mm直径的模压机制成片。
权利要求
1.制备式(I)化合物或其药理可接受盐的方法，
其中X表示氧原子或-S(O)n-基团，n为0、1或2；R表示C1-C6烷基、吡啶基或苯基，苯基是未取代的或由一个或二个各自选自卤素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、硝基、氨基、甲酰氨基和C2-C3烷酰氨基的取代基所取代；R1是a°)氢、二(C1-C6烷基)氨基或
基团，其中R′和R″相同或不同，为C1-C6烷基，或R′和R″与和它们相连的氮原子一起形成未取代的或由C1-C6烷基取代的杂环，这些杂环选自N-吡咯烷基、N-哌嗪基、六氢吖庚因-1-基、硫代吗啉代、吗啉代和哌啶子基；b°)CH2OH、CHO、COOH或C2-C7烷氧羰基，c°)
基团，其中Rd为氢或C1-C6烷基，以及Rc为氢、苯基或α-氨基酸的侧链；d°)
基团，其中Rc如上文定义；e°)
、-CH2OCO(CH2)nCOORd或-NHCO(CH2)nCOORd基团，其中n和Rd如上文定义；f°)-CH=N-OR1′基团，其中R2′为氢或-CH2COOH基团；g°)-CH=N-NH-R′2基团，其中R′2为氢、-CH2CH2OH、C2或C3烷氧羰基或-(CH2)p-R3′基团，p为1或2以及R3′为COOH或C2-C7烷氧羰基；h°)
基团，其中R′和R″如上文定义；k°)
基团，其中R′和R″如上文定义；l°)
取代的C2-C7烷氧羰基，其中R′和R″如上文定义；每个R2和R3各自是a)氢、卤素或C1-C6烷基；b)羟基、C1-C6烷氧基或C3或C4链烯氧基；或C)硝基、氨基、甲酰氨基或C2-C3链烷酰氨基；R4表示氢或C1-C6烷基；以及Q表示氢、羧基、C2-C7烷氧羰基或
基团，其中Ra表示氢或C1-C20烷基，以及Rb表示C1-C20烷基、
基团，其中Rc和Rd如上文定义或是-(A)m-R5基团，m是0或1，A是C1-C6亚烷基链，且R5是a′)C5-C3环烷基；b′)吡啶基，未取代的或由一个或二个各自选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的取代基所取代；c′)苯基，未取代的或由一个或二个各自选自卤素、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、硝基、甲酰氨基、C2-C3烷酰氨基、二(C1-C6烷基)氨基、羟基、甲酸基、C2-C8烷酰氧基的取代基所取代；d′)由一个-CH2OH、COOH、C2-C7烷氧羰基或
基团(其中R′和R″如上文定义)取代，并由选自下述基团的另一取代基任意取代的苯基，这些基团是卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氨基、硝基、甲酰氨基、C2-C8烷酰氨基、羟基、甲酸基和C2-C8烷酰氧基；或e′)2-噻吩基、2-呋喃基或1-(C1-C6烷基)-吡咯-2-基；或f′)未取代的或由C1-C6烷基取代的选自2-嘧啶基、2-噻唑基和3-异噻唑基的杂环；并且当其中的R1为氢时，Q只能是
基团，其中Ra如上文定义，Rb或者理
基团，其中Rc和Rd如上文定义，或者Rb是a″-(CH2)Z-R5′基团，其中Z是0、1或2，以及R5′如上文d′)、e′)或f′)中定义的R5，或b″)
或-A′-R5基团，其中A′是C3-C6亚烷基链，R5如上文定义，该方法包括a)使式(Ⅱ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4如上文定义，以及Y为羧基或羧基的活性衍生物，与式(Ⅲ)化合物反应，
其中Q′如上述Q定义，但羧基除外，这样得到式(Ⅰ)化合物，其中的Q如上文定义，但羧基除外；或者b)使式(Ⅳ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4如上文定义，与式(Ⅴ)化合物反应，其中Rb如上文定义，这样就得到了Q为-CONHRb基团的式(Ⅰ)化合物，其中的Rb如上文定义；或者c)使式(Ⅵ)化合物
其中X、R、R1、R2、R3和R4如上文定义，以及Z是羧基的活性衍生物，与式(Ⅶ)化合物反应，
其中Ra和Rb如上文定义，这样就得到了
基团的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rb如上文定义；或者d)水解Q是C2-C7烷氧羰基或是
基团的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rc如上文定义，Rd为C1-C6烷基，这样就得到了Q是游离羧基或是
基团的相应的式(Ⅰ)化合物，其中Ra和Rc如上文定义；并且，如果需要，将一种式(Ⅰ)化合物转化成另一种式(Ⅰ)化合物和/或，如果需要，将式(Ⅰ)化合物转化成药理可接受的盐和/或，如果需要，将盐转化成游离化合物，和／或，如果需要，将式(Ⅰ)化合物的异构体混合物分离成单个的异构体。
2.根据权利要求1的方法，其中式(Ⅰ)化合物中的X是氧或-S(O)p-基团，p是0或1;R表示未取代的吡啶基或苯基，或由一个或二个各自选自卤素、三氟甲基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、氨基和C2-C8烷酰氨基的取代基取代的苯基;R1是aoo)氢、COOH、CHO、CH2OH、C2-C7烷氧羰基或
基团，其中每个RⅢ和RⅣ分别是C1或C2烷基，或者RⅢ和RⅣ与它们相连的氮原子一起形成未取代的或由甲基取代的N-吡咯烷基、N-哌嗪基、吗啉代或哌啶子基环;boo)
基团，其中Rd是氢或C1-C6烷基，以及Rc是氢、苯基或上文定义的α-氨基酸侧链;coo)
基团，其中Rc如上文定义;doo)-CH2OCO(CH2)nCOORd或-NHCO(CH2)nCOORd基团，其中n和Rd如上文定义;eoo)-CH＝N-OR′1基团，其中R′1是氢或-CH2COOH基团;foo)-CH＝N-NHR′2基团，其中R′2是氢或-CH2CH2OH;goo)
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;hoo)由
基团取代的C2-C4烷氧羰基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;R2和R3各自是氢、卤素、硝基、氨基、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基;R4表示氢或C1-C4烷基;Q表示氢、C2-C5烷氧羰基或-CONR′aR′b基团，其中R′a是氢或C1-C6烷基，R′b是C1-C6烷基或是
基团，其中Rg是氢或C1-C4烷基，Rc如上文定义;或R′b是-(A″)m-R″5基团，其中m是0或1，A″是C1-C3亚烷基链以及R″5是a″′)未取代的吡啶基或苯基，或由一个或二个分别选自卤素、CF3、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、硝基和二(C1-C4烷基)氨基的取代基所取代;b″′)由-CH2OH、COOH或
基团取代的苯基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义，该苯基还由选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、羟基、甲酸基和C2-C6烷酰氧基的另一个取代基任意取代;或c″′)2-噻吩基或2-呋喃基;或d″′)2-噻唑基或3-异噁唑基，其中所说的杂环可以是未取代的或被甲基取代;以及其中的R1为氢时，Q只能是
基团，其中R′a如上文定义，R′b是(1)
基团，其中Rc和Rg如上文定义，或(2)-(CH2)Z-R″′5基团，其中z是0、1或2以及R″′5是b″′)、c″′)和d″′)中所定义的R″5，或(3)、
基团，其中R″5如上文定义。
3.根据权利要求1的方法，其中式(Ⅰ)化合物中X是氧或硫;R是未取代的或由一个选自硝基、卤素、CF3、C1-C4烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代的苯基;R1是aooo)氢、-COOH、-CHO、-CH2OH、C2-C5烷氧羰基或
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;每个R2和R3分别是氢、卤素、硝基、氨基、羟基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基;booo)
基团，其中R′d是氢或C1-C4烷基，以及Rc如上文定义;cooo)
基团，其中Rc如上文定义;dooo)-CH2OCO(CH2)nCOOR′d或-NHCO(CH2)nCOOR′d基团，其中R′d和n如上文定义;eooo)
基团，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;fooo)由
基团取代的C2-C4烷氧羰基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义;R4表示氢或甲基;Q表示氢或-CONR″aR″b基团，其中R″a是氢或C1-C4烷基和R″b是C1-C4烷基或
基团，其中Rc和Rg如上文定义;或R″b是-(CH2)z-R5Ⅳ基团，其中z是0、1或2以及R5Ⅳ是aⅣ)未取代的吡啶基或苯基，或由一个选自硝基、卤素、CF3、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和二(C1-C2烷基)氨基的取代基取代的苯基;bⅣ)由-CH2OH、-COOH或
基团取代的苯基，其中RⅢ和RⅣ如上文定义，并由另一个选自羟基和C1-C4烷氧基的取代基取代;或cⅣ)2-噻吩基或2-呋喃基;dⅣ)未取代或甲基取代的2-噻唑基或3-异噁唑基;以及其中R1是氢时，Q是-CONR″aR″b基团，其中R″a如上文定义，R″b是(1)
基团，其中Rc和Rg如上文定义;或(2)-(CH2)z-R5Ⅴ基团，z如上文定义，R5Ⅴ如上文bⅣ)、cⅣ)或dⅣ)中定义的R5Ⅳ。
全文摘要
本发明是关于制备具有通式(I)的化合物和其药理可接受盐的方法。
文档编号C07D491/052GK1039026SQ8910628
公开日1990年1月24日 申请日期1989年6月19日 优先权日1988年6月20日
发明者吉安费得里库·道里阿, 阿拿·麦瑞·伊塞塔, 马里奥·费拉里, 多米尼高·特里茨奥 申请人:法米塔利亚·卡洛·埃巴有限责任公司