苯并硫氮杂衍生物的制作方法

专利名称：苯并硫氮杂衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的硫氮杂
衍生物。特别是本发明涉及用作Ca-拮抗剂以及冠状血管舒张药的5-(哌啶基烷基或哌嗪基烷基)苯并硫氮杂
衍生物。
美国专利3，562，257公开了用作冠状血管舒张药的苯并硫氮杂
衍生物。虽然在美国专利4，584，131和日本专利公开(未审查)号292271/1989中公开了另一些苯并硫氮杂
衍生物，例如硫氮
酮衍生物，但并没有报道可用作冠状血管舒张药并也可用作Ca-拮抗剂，即心肌保护剂的特定的一组苯并硫氮杂
衍生物，即本发明的5-(哌啶基烷基或哌嗪基烷基)苯并硫氮杂。
众所周知，心肌或血管平滑肌的收缩与钙离子穿透到细胞内有关，因之，给患者施用Ca-拮抗剂能抑制心脏收缩和使冠状血管舒张。因此，Ca-拮抗剂可用作如心胶痛，心肌梗塞和心律失常的心脏疾病，高血压和脑血管挛缩的治疗剂。硫氮
酮已广泛地用于心胶痛和原发性高血压的治疗，但由硫氮
酮引起的心脏收缩抑制的反弹作用过于剧烈。因此，长期以来一直需要一种无此反弹作用的新的药物。
本发明发现，当使用培养的心肌细胞时，式(1)的苯并硫氮杂
衍生物
其中X是＝N-A-R1或＝C(R1)R2;A是单键，多亚甲基或-CO-;R1和R2分别是氢、C1-C6烷基，C3-C7环烷基，未取代或取代的苯基、任意取代的二苯甲基或任意取代的5至6元杂环基;Y是氢、卤素、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C1-C6烷氧基、任意取代的苯氧基，任意取代的苄氧基或任意取代的苄基;z是氢或酰基;n是2-6的整数，及其药学上可接受的盐对分离的血管显示出显著的血管舒张作用并对局部缺血的心肌显示出很强的保护作用。发明人还发现式(1)化合物仅对心脏功能有轻微的抑制作用。并且本发明化合物可用于短暂的局部缺血疾病如冠状动脉血栓形成、脑血栓等以及原发性高血压的治疗或预防。上述限定的本发明式(1)化合物包括旋光异构体和外消旋物。
此外所用的术语“多亚甲基”意思是指具有一个或多个碳原子的亚烷基，包括亚甲基、1，2-亚乙基、1，3-亚丙基和1，4-亚丁基。
术语“C1-C6烷基”意思是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、2-甲基丁基、正己基和异己基。
术语“C3-C7环烷基”意思是指具有3-7个碳原子的环烷基，包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
术语“5-6元杂环基”意思是指环中含一个或多个氮原子并任意地含有一个或多个氧原子和/或硫原子的饱和或未饱和的5-6元杂环基。此杂环基具体的例子是吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、异噁唑基、噁唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基，1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、异噻唑基、噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、呋喃基、噻吩基等。其中优选的是吡啶基。
“卤素”意思是指氟、氯、溴或碘，优选是的氟和氯。
术语“C1-C6烷氧基”意思是指其中烷基部分可以是直链或支链的烷氧基，包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、仲戊氧基、叔戊氧基、正己氧基、新己氧基、异己氧基、仲己氧基、叔己氧基等。
苯基、二苯甲基、5-6元杂环基、苯氧基或苄氧基环上可以具有的一个或多个取代基选自上述定义的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素和亚烷基二氧基。
术语“酰基”意思是指具有2-7个碳原子的脂族酰基如乙酰基，丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基和己酰基，具有4-7个碳原子的环烷基羰基如环丙羰基，环丁羰基、环戊羰基和环己羰基，以及具有7-11个碳原子的芳基羰基如苯甲酰基、对甲基苯甲酰基和萘酰基，优选的酰基基团是如乙酰基和丙酰基的脂族酰基、环丙羰基、环丁羰基和苯甲酰基，最优选的是乙酰基和丙酰基。
式(Ⅰ)表示的本发明化合物可根据下列反应路线制备。
原料化合物(Ⅳ)可以根据日本专利公开(未审查)号43785/1971，Chem.Pham Bull，18 2028，1970，及2192，1973等中公开的方法制备。上述反应路线详述如下。
步聚1令原料化合物(Ⅳ)与化合物(Ⅴ)反应得到化合物(Ⅲ)。反应所用溶剂为醇类如甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇，腈类如乙腈和丙腈，烃类如苯和甲苯，醚类如四氢呋喃和二噁烷，酮类如丙酮和甲乙酮，酰胺类如N，N-二甲基甲酰胺和N-甲基-2-吡啶酮、亚砜类如二甲亚砜。优选的溶剂是醇类、醚类、酰胺类和腈类，最优选的是异丙醇和乙腈。
反应中所用的碱可以选自金属碳酸盐如碳酸钠和碳酸钾，金属碳酸氢盐如碳酸氢钠和碳酸氢钾，碱金属氢化物如氢化钠和氢化锂，有机碱如1，5-二氮杂双环[4，3，0]壬-5-烯和1.8-二氮杂双环[5，4，0]十-碳-7-烯，优选的碱是金属碳酸盐如碳酸钠和碳酸钾，碱金属氢化物如氢化钠。反应温度和反应时间根据所用的特定的碱和溶剂而不同，但是，反应通常是在0-120℃，优选地是在0-80℃下进行一小时-四天。当反应中使用无机碱时，可加入催化量的吡啶如4-二甲氨基吡啶或冠醚如18-冠-6以加速反应。通过用有机溶剂萃取，用水洗涤萃取液，用无水硫酸镁干燥萃取液并蒸发溶剂可以得到目的产物。如果需要，可以通过常规方法如重结晶，柱层析等将产物进一步纯化。
步骤2令化合物(Ⅲ)与化合物(Ⅵ)反应得化合物(Ⅱ)。反应所用溶剂为醇类如甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇，腈类如乙腈和丙腈，烃类如苯和甲苯，醚类如四氢呋喃和二噁烷，酮类如丙酮和甲乙酮，酰胺类如N，N-二甲基甲酰胺和N-甲基-2-吡啶酮，亚砜类如二甲亚砜。优选的溶剂是醇类如甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇，以及腈类如乙腈和丙腈，最优选的是乙醇，异丙醇和乙腈。
反应所用的碱可以选自金属碳酸盐如碳酸钠和碳酸钾，金属碳酸氢盐如碳酸氢钠和碳酸氢钾，碱金属氢化物如氢化钠和氢化锂，有机碱如1，5-二氮杂双环[4，3，0]壬-5-烯和1.8-二氮杂双环[5，4，0]十-碳-7-烯。优选的碱是金属碳酸盐如碳酸钠和碳酸钾，碱金属氢化物如氢化钠。反应温度和反应时间根据所用的特定的碱和溶剂而不同。但是，反应通常是在0-120℃，优选地是在0-80℃下进行一小时-四天。当反应中使用无机碱时，可以加入催化量的吡啶如4-二甲氨基吡啶或冠醚如18-冠-6以加速反应。通过用有机溶剂萃取，用水洗涤萃取液，用无水硫酸镁干燥萃取液并蒸发溶剂可得到目的产物。如果需要，可以通过常规方法如重结晶、柱层析将产物进一步纯化。
步骤3令化合物(Ⅱ)与化合物(Ⅶ)反应得到化合物(Ⅰ)。只要不影响反应的任何溶剂都可用于本反应中，例如可以使用烃类如己烷、苯、甲苯、二甲苯和环己烷，卤代烃类如二氯甲烷、氯仿和1，2-二氯乙烷，醚类如乙醚和四氢呋喃，酯类如乙酸乙酯。优选的溶剂是卤代烃类，最优选的是二氯甲烷。
反应所用的碱包括有机碱如三乙胺、吡啶、二甲氨基吡啶和N-甲基吗啉。如同溶剂一样，反应中也可以使用过量较多的碱。
反应温度可以在0℃-80℃，优选地是在0℃-50℃的范围内，反应时间依反应温度而不同，但反应应在1-24小时，优选地是在3-20小时内完成。通过用如乙酸乙酯这样的有机溶剂萃取产物，用水洗涤萃取液，用无水硫酸镁干燥洗过的萃取液并由干燥的萃取液中蒸发溶剂可得到目的产物。通过常规方法如重结晶、柱层析等可以将产物进一步纯化。
本发明化合物(Ⅰ)及其药学上可接受的盐可以用作治疗循环疾病的治疗剂。此化合物及其盐可以在药理上可接受的载体、赋形剂和稀释剂的辅助下配制成粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊，注射剂等等，并且可以通过口服或非肠道将它们施用给患者。剂量依特定的患者的情况及施药途径而不同。但通常当口服时，日剂量在1mg至1000mg，优选的是在1mg至100mg内变化，而当静脉内给药时，日剂量在0.1-100mg，优选的是在0.5-30mg内变化。根据患者的情况，此剂量可以以一次或分为两次给药。
下列给出的详述实施例意在说明本发明的某些具体实施方案。
实施例13-乙酰氧基-5[3-(4-苯基-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-1)(1)将8.395g(25.0mmol)的2-(4-甲氧苯基)-3-羟基-8-氯-2，3-二氢-1，5苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅳ-1)、4.723g(30.0mmol)的1-溴-3-氯丙烷(Ⅴ-1)和4.146g(30.0mmol)的K2CO3溶于168ml丙酮中，并将混合物回流20小时。减压下将反应混合物蒸发得一残余物，将其于硅胶上进行层析，由二氯甲烷馏份中得10.96g的顺-2-(4-甲氧苯基)-3-羟基-5-(3-氯丙基)-8-氯-2，3-二氢-1，5苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅲ-1)，将获得的化合物于乙酸乙酯中重结晶得9.146g无色棱晶，产率88.7%。
Mp.103-106℃元素分析(%)C19H19NO3SCl2计算值C，55.35;H，4.64;N，3.40实测值C，55.31;H，4.70;N，3.38IR γmax(石蜡)3452，1652cm-1NMR(CDCl3)δ2.19(2H，m)，2.84(OH)，3.69(3H，m)，4.63(1H，m)，3.82(3H，s)，4.31(1H，d，d)，4.93(1H，d)，6.90-7.75(7H，m)(2)将412mg(1mmol)得到的化合物(Ⅲ-1)和324mg(2mmol)的4-苯基哌嗪(Ⅵ-1)溶于4ml乙腈中，向混合物中加入166ml(1mmol)碘化钾催化剂，并将混合物回流16小时，减压下将反应混合物蒸发得一残余物，将其于硅胶上进行层析，由乙酸乙酯馏份中得440mg顺-2-(4-甲氧苯基)-3-羟基-5-[3-(4-苯基哌嗪基)丙基]-8-氯-2，3-二氢-1，5-苯并硫氮杂 -4(5H)-酮(Ⅱ-1)。将如此获得的化合物(Ⅱ-1)于正己烷中重结晶，得400mg无色棱晶，产率74.3%。
Mp.70-71℃元素分析(%)C29H32ClN3O3S计算值C，64.74;H，6.00;N，7.81实测值C，64.51;H，6.04;N，7.77IR γmax(石蜡)3460，1661，1251，1093cm-1NMR(CDCl3)δ1.95(2H，m)，2.54(6H，m)，2.88(1H，d)，3.16(4H，m)，3.64(1H，m)，3.82(3H，s)，4.31(1H，d，d)，4.52(1H，m)，4.93(1H，d)，6.88(4H，m)，7.35(7H，m)，7.73(1H，d)。
(3)向5ml乙酸酐中加入800mg(1.5mmol)获得的化合物(Ⅱ-1)并将混合物于100℃加热3小时，减压下将反应混合物蒸发得一残余物，将其溶于10ml二氯甲烷中并用碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷层用硫酸钠干燥，有机层于硅胶上进行层析，由乙酸乙酯馏份中得850mg目的化合物(Ⅰ-1)。将如此获得的化合物(Ⅰ-1)的盐酸化物于丙酮中重结晶，得600mg元色粒状结晶，产率61.3%。
Mp.143-146℃元素分析(%)C31H36Cl3N3O4S计算值C，56.97;H，5.51;N，6.43实测值C，57.31;H，5.66;N，6.80IR γmax(石蜡)3420，1750，1684，1250，1180cm-1NMR(CDCl3)δ1.91(3H，s)，2.4(2H，m)，3.34(4H，m)，3.5(6H，m)3.83(3H，s)，4.13(2H，m)，5.05(1H，d)，5.12(1H，d)，6.93(2H，d)，7.4(9H，m)，7.76(1H，d)。
实施例2-16按照实际上与实施例1相同的方法，制得下列化合物Ⅰ-2-Ⅰ-16。
(2)3-乙酰氧基-5-[3-(4-甲基-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂 -4(5H)-酮(Ⅰ-2)(3)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂 -4(5H)-酮(Ⅰ-3)(4)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-1，5-苯并硫氮杂 -4(5H)-酮(Ⅰ-4)(5)3-乙酰氧基-5-[3-(4-胡椒基)-1-派嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-5)(6)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(3，4-亚甲基二氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-6)(7)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-糠酰基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氧-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-7)(8)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-8)(9)3-乙酰氧基-5-[2-(4-苯基-1-哌嗪基)乙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-9)(10)3-乙酰氧基-5-[2-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)乙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-10)(11)3-乙酰氧基-5-[2-(4-苯基-1-哌嗪基)乙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-11)(12)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-12)(13)3-乙酰氧基-5-[2-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)乙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-13)(14)3-乙酰氧基-5-[3-(4，4-二苯基-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-14)(15)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4，4-二氟二苯甲基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-15)(16)3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-氯二苯甲基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-16)实施例17(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-17)
(1)按照实际上与实施例1(1)相同的方法处理原料(2S-顺)-2-(4-甲氧苯基)-3-羟基-8-氯-2，3-二氢-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮。
(2)按照实际上与实施例1步骤2和步骤3相同的方法处理4-(2-甲氧苯基)哌嗪，得无色棱晶状目的化合物(Ⅰ-17)，产率97.0%。
MP109-111℃(于乙酸乙酯中重结晶)元素分析(%)C32H36ClN3O5S计算值C，62.99;H，5.95;N，6.89实测值C，63.09;H，6.00;N，6.77IR γmax(石蜡)1746，1678cm-1NMR(CDCl3)δ1.90(2H，m)，1.91(3H，s)，2.77(10H，m)，3.63(1H，m)，4.47(1H，m)，3.83(3H，s)3.85(3H，s)，5.03(1H，d)，5.15(1H，d)，7.28(11H，m)旋光率 [α]D+109.3±1.5(25℃，C＝1.007，MeOH)实施例18-39按照实际上与实施例17相同的方法，制得下列化合物Ⅰ-18-Ⅰ-39。
(18)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮盐酸化物(Ⅰ-18)(19)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮磷酸盐(Ⅰ-19)(20)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮柠檬酸盐(Ⅰ-20)(21)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮富马酸盐(Ⅰ-21)(22)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-氯二苯甲基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-22)(23)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(二苯甲基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-23)(24)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4，4′-二氯二苯甲基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-24)(25)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-25)(26)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-甲基苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-26)(27)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(环己基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-27)(28)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲基苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-28)(29)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(4-甲氧苯基)-1-派嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-29)(30)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2，4-二甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-30)(31)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(3，4-二甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-31)(32)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(3，4，5-三甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-32)(33)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[4-(4-(2-甲氧苯基-1-哌嗪基)丁基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-33)(34)(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[5-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)戊基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮(Ⅰ-34)
利用光栅将衬底台面遮住避开装有8″×4″Pt靶的一个平面型磁控管源，将124W的直流功率提供给该溅射源数分钟，以便清洁溅射靶及建立工作的稳定状态(“靶的预整备步骤”)。
然后在六次连续的通过中利用Pt溅射源沉积Pt中间层，建立的全部厚度约为50
。提供给溅射电极的功率为124W，电极的偏压相对地电位为-414V。衬底处于相对地电位约15V的负电位上。衬底与靶隔开11cm，并且台面以6rpm速度转动(“中间层沉积”)。
随后将射频功率(13.56MHz)提供给衬底台面对Pt中间层的表面作过热处理。200W的射频功率被施加了5分钟的时间，建立的台面对地的偏压为-100V，衬底台面以6rpm速度转动(“过热处理S2”)。
用于产生所需多层结构的Co通量源由位于Pt源直接对面的且面对着它的一个射频平面型磁控管来提供。来自每个源的通量被放置在它们中间的衬底台面挡住。使用一个薄的钴靶(8″×4″×1mm)来增强磁控管的溅射效果。利用将衬底遮住避开两个溅射源，将功率提供给每个源，其功率值是用于制造多层结构的Pt<p>表1实施例号 1)X:=N-A-R1z n Y 产率(%) 产率(%)2)X:=C-(R1)R2I II2 1)A:单键 g 3 Cl 86.6a 未分离R1: 甲基3 1)A:单键 g 3 Cl 80.5f 90.2R1: 2-吡啶基4 1)A:单键 g 3 H 81.0a 89.8R1: 邻甲氧苯基5 1)A:-CH2- g 3 Cl 98.3f 77.1R1: 3,4-亚甲二氧基苯基6 1)A:-CH2- g 3 Cl 96.0a 41.9R1: 3,4-亚甲二氧基苯基7 1)A:-CO- g 3 Cl 64.5f 98.0R1: 2-呋喃基8 1)A:单键 g 3 Cl 99.3f 84.5R1: 邻甲氧苯基9 1)A:单键 g 2 Cl 20.3a 未分离R1: 苯基10 1)A:单键 g 2 Cl 21.3a 未分离R1: 邻甲氧苯基11 2)A:苯基 g 2 Cl 21.1f 未分离R2:H12 1)A:单键 g 3 Cl 96.3a 81.1R1:对氟苯基13 1)A:单键 g 2 Cl 22.3a 未分离R1:对氟苯基14 2)R1:苯基 g 3 Cl 99.0a 87.4R2:苯基15 1)A:单键 g 3 Cl 85.3a 91.4R1:4,4'-二氟二苯甲基16 1)A:单键 g 3 Cl 99.0a 77.1R1:4-氯二苯甲基18 1)A:单键 g 3 Cl 46.2a 92.7R1:邻甲氧苯基
19 1)A:单键 g 3 Cl 82.2b 92.7R1:邻甲氧苯基20 1)A:单键 g 3 Cl 81.5c 92.7R1:邻甲氧苯基21 1)A:单键 g 3 Cl 84.7d 92.7R1:邻甲氧苯基22 1)A:单键 g 3 Cl 74.5e 73.0R1:4-氯二苯甲基23 1)A:单键 g 3 Cl 59.8a 68.8R1:二苯甲基24 1)A:单键 g 3 Cl 85.1a 71.9R1:4,4'-二氯二苯甲基25 1)A:单键 g 3 Cl 78.6e 65.7R1:4-氯苯基26 1)A:单键 g 3 Cl 65.7d 94.7R1:4-甲苯基27 1)A:单键 g 3 Cl 71.1e 98.2R1:环己基28 1)A:单键 g 3 Cl 58.0 79.0R1:邻甲苯基29 1)A:单键 g 3 Cl 80.0c 79.0R1:对甲氧苯基30 1)A:单键 g 3 Cl 77.0f 未分离R1:2,4-二甲氧苯基31 1)A:单键 g 3 Cl 64.0 未分离R1:3,4-二甲氧苯基32 1)A:单键 g 3 Cl 55.0 未分离R1:3,4,5-三甲氧苯基33 1)A:单键 g 4 Cl 75.2 84.6R1:邻甲氧苯基34 1)A:单键 g 5 Cl 92.1a 91.9R1:邻甲氧苯基
35 1)A:单键 g 3 CH3O- 88.0a 85.0R1:邻甲氧苯基36 1)A:单键 g 3 CH3- 93.0a 94.0R1:邻甲氧苯基37 1)A:单键 h 3 Cl --- 85.5aR1:邻甲氧苯基38 1)A:单键 g 3 Cl 69.8 84.7R1:邻甲氧苯基39 1)A:单键 g 3 Cl 47.0c 未分离R1:邻甲氧苯基a:盐酸化物 b:磷酸盐 c:柠檬酸盐d:富马酸盐 e:马来酸盐 f:草酸盐g:乙酰基 h:氢表2
表2(续)步骤3实施例号 Ac2O 反应温度反应时间碱原料化合物mg(mmol) (ml) mg化合物(II) (℃) (小时) (mmol)2 280(0.58) 5 110 33 486(0.90) 4.9 100 34 342(0.64) 3.4 100 35 400(0.67) 3 100 36 792(1.36) 8 100 37 878(1.58) 8.8 100 38 400(0.71) 10 100 39 619(1.18) 6.2 100 310 159(0.29) 1.6 100 311 283(0.54) 2.3 100 312 800(1.44) 10 110 413 163(0.3) 1.6 100 314 361(0.6) 3.6 100 315 456(0.69) 4.5 100 2.516 480(0.72) 6 100 418 400(0.71) 10 100 319 400(0.71) 10 100 320 400(0.71) 10 100 321 400(0.71) 10 100 322 483(0.73) 4.8 100 423 432(0.69) 4.3 100 324 501(0.72) 5 100 325 376(0.66) 2 30 2126 523(0.95) 2.7 30 1327 534(0.98) 5 30 1428 2040(3.7) 10 30 15 m 22(0.18)29 1640(2.66) 5 30 15 m 20(0.17)30 1500(2.5) 5 30 48 m 20(0.17)
31 2030(3.39) 7 30 2 m 30(0.24)32 3140(5.0) 8 30 2 m 23(0.18)33 708(1.22) 7 30 4 m 7.5(0.06)34 799(1.34) 8 30 4 m 7.5(0.06)35 570(1.01) 5.7 40 16 p 100(1.26)36 330(0.6) 3.3 30 1 m 20(0.06)37 --- -- -- -- ----38 1307(2.3) 6.5 30 16.5 m 14.1(0.12)39 1245(2.2) 6.2 30 16 m 13.4(0.11)m:二甲氨基吡啶 p:吡啶表3实施例号表观重结晶溶剂 MP(℃) 旋光率 IR(νcm-1max)[α]25DMeOH 石蜡2-Ia CP 甲醇 250-252(d) 1746,16562-IIb CG 丙酮 230-231 1724,16643-Ib CP 丙酮 142-145 1759,16843-II oil - -4-Ia CP 丙酮 138-140 1732,16874-II CG 己烷 75-76 16625-Ib YG 甲醇 212-214(d) 1745,16855-II oil - 16616-Ia CP 丙酮 160-162 1737,16776-II oil - -7-Ib CP 丙酮 196-197 1738,16887-II oil - -8-Ib CG 丙酮 183-185 1749,16868-II CP 己烷 75-76 16629-Ib CP 丙酮 154-156 1742,16839-II - - -10-Ia YP 丙酮 153-157 1742,165510-II - - -11-Ib CP 丙酮 141-144 1748,170511-II - - -12-Ia CN 乙醇 144-145 1738,1675乙醚12-II CP 己烷 70-71 166413-Ia CP 丙酮 153-155 1753,167913-II - - -14-Ia CP 丙酮 225-230 1746,167814-II oil - -15-Ia CP 丙酮 157-159 1748,167115-II oil - -16-Ia CP 丙酮 149-152 1750,167316-II CP 己烷 108-109 -18-Ia CP 丙酮 147-150 +67.9±1.1(c=1.012) 3374,2282,1745,167718-II oil - - -19-Ic CP 甲醇 140-143 +69.9±1.1(c=1.005) 2350,1742,168020-Id CP 甲醇 187-189 +65.0±1.0(c=1.007) 3430,2620,1737,167421-Ie CP 乙醇 115-117 +69.6±1.1(c=1.003) 3276,2506,1741,167222-If CA 乙醚 - +56.2±1.0(c=1.015) 3324,2394,1744,167822-II oil - - -23-Ia CA - +64.1±1.0(c=1.005) *3410,2392,
167623-II CA - - - -24-Ia CA - - +54.5±0.9(c=1.003) *3488,166124-II oil - - - -25-If CA - - +65.3±1.0(c=1.014) *3500,2394,1744,167825-II oil - - - -26-Ie CA - - +73.8±1.1(c=1.009) 3428,2606,1743,167726-II oil - - - -27-If CP 乙醇 195-202 +73.9±1.1(c=1.013) 3260,2348,1752,168527-II oil - - -28-I CP 乙醇 187-188 +110.8±1.5(c=1.006) -28-II oil - - -29-Id CP 乙醇 197-198 +58.8±1.0(c=1.004) -29-II oil - - -30-Ib CP 乙醇 175-176 +66.8±1.1(c=1.01) -30-II oil - - -31-I CP 乙醇 170-171 +101.8±1.4(c=1.011) -31-II oil - - -32-I CP 乙醇 162-163 +93.9±1.3(c=1.016) -32-II oil - - -33-I CP 己烷 139-140 +90.9±1.3(c=1.013) 1743,167633-II oil - - -34-Ia CA - +76.2±1.2(c=1.008) *3486,2390,1739,167634-II CA - - -35-Ia CA - +70.1±1.1(c=1.003) -35-II oil - - -36-Ia CA - +80.5±1.2(c=1.005) -36-II oil - - -37-IIa CP 丙酮 135-137 +83.8±1.2(c=1.007) 3380,2360,166038-I CP 己烷 109-111 -110.1±1.5(c=1.018) 1746,167838-II CN 己烷 175-178 - -39-Id CP 甲醇 191-192 +275.8±3.1(c=1.018) 3446,2542,1736,164039-II oil - - -a:盐酸化物 b:草酸盐 c:磷酸盐d:柠檬酸盐 e:富马酸盐 f:马来酸盐*:在二氯甲烷中CP:无色棱晶 YG:黄色粒状结晶YP:黄色棱晶 CN:无色针状结晶CA:无色无定形物以下进行本发明化合物(Ⅰ)的药理试验。
试验1钙离子通道拮抗剂和α-阻滞作用(对分离血管的松弛作用)通过静脉注射巴比妥(50mg/kg)将体重2-3kg的雄兔(Ra-biton日本albino种)麻醉，并通过割开腋窝动脉放血处死。分出股动脉，除去动脉周围的连接组织，并制成螺旋形标本。将标本悬浮于装有37℃Krebs-Henseleit营养溶液并吹入95%O2+5%CO2混合气体的容器(20cc)中，令股动脉承受1.5g静止张力，通过F-D传感器(Nippon Koden)(TB-611T)和前置放大器(Nippon Koden)于热敏记录仪(Nippon koden WT-685G)上记录标本张力的等量变化。通过观察化合物的累积加入量对由用50mM KCl引起的收缩的松弛作用来评价试验化合物的Ca-拮抗作用。相似地，通过观察对由1μM去甲肾上腺素(NE)引起的收缩的这种松弛作用来评价α-阻滞作用。将使用0.1mM罂粟碱时所观察到的血管松弛反应定义成血管的最大松弛能力，利用上述系统，测定获得50%最大松弛时所需化合物的浓度(IC50)。结果如表4所示。
表4血管的松弛作用IC50(×0.1μM)化合物号50mM-KCl 1μM-NEⅠ-5 2.5Ⅰ-8 2.8 0.6Ⅰ-11 2.0Ⅰ-14 1.0Ⅰ-15 0.57 6.0Ⅰ-16 2.4Ⅰ-18 2.5 0.37Ⅰ-22 3.4Ⅰ-35 1.2 0.3Ⅰ-36 1.4 0.2硫氮
酮 4.2 133试验2对培养的心肌细胞的抗缺氧作用通过它们对心肌细胞保护作用的研究来研究本发明化合物的抗缺氧作用。
由新生的Crj-SD鼠(2-3天龄)制得心肌细胞的最初培养物并用于本试验。根据Jones R.L.等于Am.J.Pathol，135，54-556(1989)中描述的方法制得最初培养物。用胶原酶和胰酶由心室肌中分离心肌细胞，然后通过Percoll密度-梯度离心法将心肌细胞与细胞碎片、红细胞和纤维细胞分开并纯化。将细以2-3×105细胞/3.5cm皿的比率散布于培养皿上，并将细胞于含10%牛胎血清(FBS)的Dulbecco改进的Eagle培养基(DMEM)(Dulbeccos Modified Eagles Medium)中于37℃恒温箱(5%CO2/95%空气)中培养两天。当生长出足够的心肌细胞后，将培养基换成不含有FBS的DMEM，并再继续培养一天。将如此获得的细胞用于本试验。
利用Gas PakTM厌氧房(BBL)(Gas PakTMAraerobic Chamber)产生缺氧，此厌氧房是通过捕捉剩余的O2并利用H2/CO2生成袋和催化剂的作用将其转变成H2O而产生缺氧。将其中培养基已经变成不含FBS和葡萄糖的DMEM的心肌细胞培养皿置于厌氧房中，并将此厌氧房置于恒温箱中，通过测定释放到培养基中的肌酸磷酸激酶活性的抑制率测定试验化合物的抗缺氧活性。
用HCO-50作促溶剂将试验化合物全部溶于DMSO中(DMSOHCO-50＝9∶1)，并直接放到培养皿中。分别将在培养基中的DMSO和HCO-50的最终浓度调至0.09%和0.01%。通过由Oliver法改进的比色法(Wako kit)测定CPK活性。试验结果总结于表5中。
表5抗缺氧活性(%)化合物号1μM 10μMⅠ-1 - 66Ⅰ-3 34Ⅰ-5 - 66Ⅰ-7 36Ⅰ-8 17 70Ⅰ-12 10 87Ⅰ-13 15 61Ⅰ-14 - 83.6Ⅰ-15 - 76Ⅰ-16 18.4 57Ⅰ-18 23.7 73.9Ⅰ-22 25.7 73.6Ⅰ-23 36.4 87Ⅰ-24 14.1 88Ⅰ-25 25.2 89Ⅰ-29 30
Ⅰ-32 - 66.1Ⅰ-33 36.9 87Ⅰ-34 - 80.0硫氮 酮 10 29用当CPK释放量为负对照(未加入试验化合物)时测定的试验化合物对CPK释放的抑制率(%)定义为100%，表中数值表明了试验化合物的心肌细胞保护活性。表5明显地表明本发明化合物较正对照(硫氮 酮)具有较高的保护活性。
试验3本发明化合物对未麻醉下自生高血压鼠(SHR)的血压和心率的作用。
将日本Charles-River雄性SHR(13-17周龄)用于本试验(S.Matsuda，J.Pharmacol.Method 17 361，1987)。用药前和用药后2和4小时，未侵害下(间接地)用尾动脉压血压测量表(6管型)测量动物的收缩压(SBP)和心率，试验化合物溶于DMSO(100%)并口服给药。服药后2和4小时测量的SBP和心率与服药前测量比较，其减少量以百分比(%)的形式列于下表。
表6化合物号 抗高血压活性(%) 心率的减低(%)(30mg/kg PO)Ⅰ-8 15 3.2Ⅰ-14 14 9.8Ⅰ-15 17 6.5Ⅰ-16 19 15Ⅰ-8 18 7.0Ⅰ-22 18 9.4Ⅰ-23 16 12硫氮
酮 11 15a60mg/kg po试验4抗坏死活性将体重200-250g雄性Slc Wistar鼠用乌拉坦(1g/kg)麻醉，并将在冠状血管下行支结扎20分钟，然后按照Hock等(Hock C.E.Ribeiro，L.G.，Tand Lefer，A.M.Am，Heart J.，109 222，1985)描述的方法再灌注。将试验化合物溶于生理盐水，或者首先溶于DMSO/HCO-50(9∶1)混合液中，然后用生理盐水或0.25M蔗糖水溶液稀释，并于结扎前以0.15ml/kg/min的速率向右颈静脉内灌注10分钟。再灌注后3小时，将鼠于热垫上进行热隔离。120分钟后，分离出心脏，并将游离的左心室壁冰冻并贮存直至测定CPK活性。
CPK活性是根据经很小的改进后的Bernauer W.的方法(Arch.int.Pharmacodyn.，231 90，1978)测定。将分离的组织于含1mM巯基乙醇的10倍体积0.1M Tris/HCl(pH7.5)中搅匀，并于20，000g下离心分离20分钟。上清液用于测定CPK活性，其可以用商用急救箱处理(CPK-Test，Wako)。用血清CPK作标准测定CPK并用“u/mg蛋白”表示。
将施用试验化合物时获得的由于局部缺血引起的心肌损伤抑制作用与施用活性对照(硫氮 酮)时获得抑制作用相比较。根据左心室所保留的CPK活性测定抑制程度，试验结果列于表7，其中每一剂量的保留百分比(%)根据下式计算。
保留值(%)＝[(施用试验化合物时保留的CPK活性)-(只施用介质时保留的CPK活性)]/[(完整的动物具有的CPK活性)-(只施用介质时保留的CPK活性)]
表7保留值(%)(抗坏死活性)化合物号 mg/kg(iv)0.1 0.3 1Ⅰ-8 29Ⅰ-12 23Ⅰ-18 30 42Ⅰ-22 45Ⅰ-23 45Ⅰ-24 35Ⅰ-35 37Ⅰ-36 30硫氧
酮 1权利要求
1.下列化合物及其药学上可接受的盐
其中X是=N-A-R1或=C(R1)R2；A是单键、多亚甲基或-CO-；R1和R2分别是氢、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、未取代或取代的苯基、任意取代的二苯甲基或任意取代的5至6元杂环基，Y是氢，卤素，C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C1-C6烷氧基、任意取代的苯氧基、任意取代的苄氧基或任意取代的苄基；Z是氢或酰基；n是2-6的整数。
2.权利要求1的化合物，其中n是3。
3.权利要求1的化合物，其中R1是未取代或取代的苯基。
4.权利要求1的化合物，即(2S-顺)-3-乙酰氧基-5-[3-(4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基)丙基]-2，3-二氢-2-(4-甲氧苯基)-8-氯-1，5-苯并硫氮杂
-4(5H)-酮。
5.一种药物组合物，其包括作为基本组分的权利要求1的化合物。
6.权利要求5的组合物，其可用作抗高血压剂。
7.权利要求5的组合物，其可用于治疗心脏病。
全文摘要
式(I)化合物及其药学上可接受的盐，其中X是＝N-A-R
文档编号C07D417/12GK1073168SQ92113330
公开日1993年6月16日 申请日期1992年10月21日 优先权日1991年10月21日
发明者山守照雄, 原田纮, 酒井克则, 岩木一己, 松永和树 申请人:盐野义制药株式会社