专利名称：亚磺酰氨基杂环的凝血酶抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明是1993年8月26日申请的编号为112153的部分继续申请，而该申请是1992年12月2日申请的编号为984640的部分继续申请。
本发明涉及亚磺酰氨基杂环化合物，它们是凝血酶抑制剂，因而可用于抑制血栓的形成。
本发明的亚磺酰氨基杂环的凝血酶抑制剂具式Ⅰ结构并包括其所有的立体异构体及其所有药学上可接受的盐 式中G是下式所示的酰氨基基团
R是氢、羟基烷基、氨基烷基、酰氨基烷基、烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、链烯基、链炔基、芳基烷氧基烷基，或者是保护的或未保护的氨基酸侧链;
R1和R2独立地为氢、低级烷基、环烷基、芳基、羟基、烷氧基、酮基、酮缩硫醇、烷硫基、芳硫基、氨基或烷基氨基，或者R1及R2和与其相连的碳一起形成环烷基、芳基或杂芳基环;及R3是低级烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、喹啉基或四氢喹啉基;
n是0、1或2;
m是0、1、2或3;
Y是NH或S;
p是0、1或2;
Q是单键或 A是芳基或环烷基，或者是环上有4至8个碳的氮杂环烷基A或环上有4至8个碳的氮杂杂环烷基AA
式中X是CH2、O、S或NH;
若X是CH2，q是0、1、2、3或4;
若X是O、S或NH，q是2、3或4;
Y1和Y2独立地为H、低级烷基、卤素或酮基;及R4是胍、脒或氨甲基;
当A是芳基或环烷基时，R4是胍、脒或氨甲基;
当A是氮杂环烷基或氮杂杂环烷基时，R4是脒基;
若X是杂原子(即A是氮杂杂环烷基)，则在X与环A中或环A外的任何一个N原子之间一定至少有个2-碳链;
及若G是G1，则当R3是烷基时，该烷基一定含至少3个碳。
此外可用的A环(氮杂环烷基或氮杂杂环烷基)的例子包括下列基团等
本文所用的术语“低级烷基”或“烷基”本身或作为另一基团的一部分，包括不超过18个碳、优选1至8个碳的直链和支链基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基，其各种支链异构体等，以及包括1、2或3个卤素取代基的这类基团(例如形成CF3或CF3CH2)和/或包括1或2个下列取代基的这类基团芳基取代基(例如形成苄基或苯乙基)、烷基芳基取代基、卤代芳基取代基、环烷基取代基、烷基环烷基取代基，链烯基取代基、链炔基取代基、羟基或羧基取代基。应当懂得，上述“烷基”基团可以被任何一个或多个以上取代基取代。
术语“环烷基”本身或作为另一基团的一部分，包括含3至12个碳、优选3至8个碳的饱和环烃基，包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、和环十二烷基，任何一个所述基团均可被取代基诸如卤素、低级烷基、烷氧基和/或羟基取代。
本文中所用的术语“芳基”或“Ar”本身或作为另一基团的一部分，均指在环部分含6至10个碳的一环的或二环的芳基，例如苯基或萘基。芳基(或Ar)、苯基或萘基可以包括在Ar、苯基或萘基上可以包含1或2个取代基的取代的芳基、取代的苯基或取代的萘基，所述的取代基包括例如低级烷基、氰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、硝基、羧基、烷氧羰基、三氟甲基、卤素(Cl、Br、I或F)、低级烷氧基、芳基烷氧基、羟基、烷硫基、烷基亚磺酰基、烷基磺酰基、芳硫基、芳基亚磺酰基和/或芳基磺酰基。
本文所用的术语“芳烷基”、“芳基烷基”或“芳基低级烷基”本身或作为另一基团的一部分，均指具有芳基取代基的如上所述的低级烷基，例如苄基。
术语“低级烷氧基”、“烷氧基”或“芳烷氧基”包括上述任何一个与氧原子相连的低级烷基、烷基或芳烷基。
本文中所用的术语“卤素”或“卤代”本身或作为另一基团的一部分，均指氯、溴、氟或碘，优选氯。
本文中所用的术语“低级链烯基”或“链烯基”本身或作为另一基团的一部分，包括含一个双键的不超过16个碳、优选3至10个碳的碳链，所述双键借助于至少一个饱和碳链例如-(CH2)q-(式中q可以是1至14)与“N”隔开，例如2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、4-戊烯基等，并且可以包括卤素取代基如I、Cl或F。
本文中所用的术语“低级链炔基”或“链炔基”本身或作为另一基团的一部分，包括含一个叁键的不超过16个碳、优选3-10个碳的碳链，所述叁键借助于至少一个饱和碳链如-(CH2)q＇-(其中q′可以是1至14)与“N”隔开，例如2-丙炔基、2-丁炔基、3-丁炔基等。
术语“杂芳基”本身或作为另一基团的一部分，均指包含1或2个杂原子如氮、氧或硫的5元或6元芳环，例如下列基团等
所述杂芳基环可与前面定义的芳基环稠合。所述杂芳基环可以包含1或2个取代基例如卤素(Cl、Br、F或CF3)、低级烷基、低级烷氧基、羧基、氨基、低级烷基氨基和/或二低级烷基氨基。
术语“氨基酸侧链”指任何已知的α-氨基酸，例如精氨酸、组氨酸、丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、缬氨酸、丝氨酸、高丝氨酸、别苏氨酸、萘基丙氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等。
优选式中取代基为如下定义的式(Ⅰ)化合物G为下式结构 式中Q是单键，A是氮杂环烷基
其中q是0或1，及R4是脒基;
R3是低级烷基或芳基;
R是芳烷基或羟基烷基;
R1和R2各自为H;
n是0或1。
本发明的杂环的凝血酶抑制剂的更优选的实例具有结构ⅠA 式中R是芳烷基(优选苄基)、芳基(优选苯基)或芳基烷氧基烷基(优选苄氧基甲基)且烷基优选甲基、乙基或丙基;包括其所有的立体异构体。
另一类优选的式Ⅰ化合物是式中取代基为如下定义的式Ⅰ化合物G是G1，n是0或1，m是2，R3是芳基或烷基，R是芳基烷基或羟基烷基如羟甲基，R1是氢或低级烷基如甲基或乙基，R2是H，及Y是-NH-;以及式ⅠB化合物 式中G为下式结构且Y是NH的本发明的式Ⅰ化合物可以按以下反应程序Ⅰ来制备。G结构如下
反应程序Ⅰ
式中G为下式结构且Y是NH的本发明的式Ⅰ化合物也可按以下反应程序Ⅱ来制备。G结构如下
由上述反应程序Ⅰ可以看出，式中Y是-NH-的式Ⅰ化合物按如下所述来制备。在盐酸乙基3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺(WSC)或二环己基碳化二亚胺(DCC)，和1-羟基苯并三唑-水合物(HOBT)，和N-甲基吗啉(NMM)存在下，并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下，使酯Ⅱ与保护的氨基酸Ⅲ进行碳化二亚胺偶合反应，生成酰胺Ⅳ。将酰胺Ⅳ在有或没有无水惰性有机溶剂如二氯甲烷、氯仿或THF存在下，在约-15℃至约20℃的温度范围内通过用三氟乙酸处理来去保护。加入磺酰氯V，然后加入有机碱如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺，生成磺酰胺Ⅵ。将磺酰胺Ⅵ在醇溶剂如甲醇或乙醇存在下通过用碱金属碱如NaOH或LiOH处理来水解。将反应混合物用HCl、KHSO4或H2SO4酸化，生成酸Ⅶ。然后使酸Ⅶ进行碳化二亚胺偶联反应，其中，将Ⅶ在WSC或DCC，和HOBT，和NMM存在下并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下用保护的胺Ⅷ处理，生成磺酰胺Ⅸ。然后将磺酰胺Ⅸ溶于已加了HCl的醇溶剂如乙醇或甲醇中，并且若p1是苄氧羰基，将混合物用Pd-C或Pd(OH)2-C氢化。将粗产物用常规方法分离，并将所需异构体在醇溶剂如乙醇存在下用脒磺酸X处理，生成本发明的化合物ⅠB。
按上述反应程序Ⅱ，式中Y是-NH-的式Ⅰ化合物按如下所述来制备。在盐酸乙基3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺(WSC)或二环己基碳化二亚胺(DCC)，和1-羟基苯并三唑-水合物(HOBT)，和N-甲基吗啉(NMM)存在下，并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下，使保护的酸ⅡA与保护的氨基酸Ⅷ进行碳化二亚胺偶联反应，生成酰胺ⅠXA。将酰胺ⅠXA在有或没有无水惰性有机溶剂如二氯甲烷、氯仿或THF存在下，在约-15℃至约20℃的温度范围内通过用三氟乙酸(TFA)[当p是叔丁氧羰基(BOC)时]或H2-Pd/C[当p是苄氧羰基(CBZ)时]处理去保护，生成酰胺ⅠXB。然后使酰胺ⅠXB进行碳化二亚胺偶联反应，其中，将ⅠXB在WSC或DCC，和HOBT，和NMM存在下并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下用保护的胺Ⅲ处理，生成酰胺ⅠXC。然后将酰胺ⅠXC溶于已加了HCl的醇溶剂如乙醇或甲醇中，并进行下述处理若p1是CBZ，将混合物用Pd-C或Pd(OH)2-C氢化;或者若p1是BOC，将混合物用三氟乙酸处理。将粗产物用常规方法分离，并将所需异构体在醇溶剂如乙醇存在下用脒磺酸X处理，生成ⅠXD。然后将化合物ⅠXD如上述通过用TFA(当p是BOC时)或H2-Pd/C(当p是CBZ时)处理来去保护，加入磺酰氯V，随后加入有机碱如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺，生成磺酰胺ⅠB。
式中G为下式结构且Y是S的本发明的式Ⅰ化合物可按以下反应程序Ⅲ来制备。G结构如下
反应程序Ⅲ
参照上述反应程序Ⅲ，式中Y为S的式Ⅰ化合物可按如下所述来制备。在WSC或DCC、HOBT和NMM存在下以及惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下，用氨基醇Ⅺ处理酸Ⅶ，而使酸Ⅶ进行碳化二亚胺偶联反应，生成磺酰胺醇Ⅻ。使磺酰胺醇Ⅻ在吡啶中与对甲苯磺酰氯(TsCl)反应或在溶剂如二氯甲烷或氯仿中同N，N-二甲氨基吡啶与对甲苯磺酰氯反应，得到对甲苯磺酸酯ⅩⅢ。将ⅩⅢ在溶剂如DMF或DMSO中在约25至100℃的温度范围内用硫脲处理，制得化合物ⅠC(Y＝S)。
式中G为下式结构的式Ⅰ和式ⅠA化合物可按如下所示的反应程序Ⅳ来制备。G结构如下
式中A是氮杂环烷基或氮杂杂环烷基，及R4是脒。
反应程序Ⅳ
按以上反应程序Ⅳ，式中G为下式结构的式Ⅰ化合物按如下所述来制备 式中A是氮杂环烷基或氮杂杂环烷基。
在盐酸乙基3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺(WSC)或二环己基碳化二亚胺(DCC)，和1-羟基苯并三唑-水合物(HOBT)，和N-甲基吗啉(NMM)存在下，并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下，使保护的酸ⅩⅤ与胺ⅩⅥ进行碳化二亚胺偶联反应，生成酰胺ⅩⅦ。将酰胺ⅩⅦ通过用例如H2/Pd-C(当p1是CBZ时)处理来去保护，生成胺ⅩⅧ。将胺ⅩⅧ在醇溶剂如乙醇存在下用脒磺酸X处理，生成胺ⅪⅩ。将胺ⅪⅩ在有或没有无水惰性有机溶剂如二氯甲烷、氯仿或THF存在下在约-15℃至约20℃的温度范围内通过用三氟乙酸(若p＝BOC)处理去保护。加入磺酰氯Ⅴ，然后加入有机碱如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺，生成本发明的磺酰胺ⅠD。
式ⅩⅥ原料是本领域已知的，或可用本领域技术人员使用的常规技术来制备。
式中G为下式结构的式Ⅰ和式ⅠA化合物可按以下反应程序Ⅴ来制备。G结构如下
式中A是芳基或环烷基，及R4是脒或胍。
反应程序Ⅴ
如反应程序Ⅴ所示，式中G为下式结构的式Ⅰ和式ⅠA化合物按如下所述来制备 使保护的酸ⅩⅤ进行碳化二亚胺偶联反应，其中，将ⅩⅤ在WSC或DCC，和HOBT，和NMM存在下，并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下用保护的胺ⅩⅥA处理，生成酰胺ⅩⅦA。然后将酰胺ⅩⅧA溶于已加了HCl的醇溶剂如乙醇或甲醇中，并且若p是苄氧羰基，将混合物用Pd-C或Pd(OH)2-C氢化。将酰胺ⅩⅧA用磺酰氯Ⅴ处理，随后用碱处理，生成本发明的化合物ⅠE。
起始化合物ⅩⅥA是本领域已知的，或可以用常规方法来制备。
式中G为下式结构的式Ⅰ和式ⅠA化合物可按以下反应程序Ⅵ来制备。G结构如下 式中A是芳基或环烷基(即A1)，及R4是氨甲基(即R4′)。
反应程序Ⅵ
如以上反应程序Ⅵ所示，式中G为下式结构的式Ⅰ和式ⅠA化合物按如下所述来制备 在盐酸乙基3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺(WSC)或二环己基碳化二亚胺(DCC)，和1-羟基苯并三唑-水合物(HOBT)，和N-甲基吗啉(NMM)存在下，并在惰性有机溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)、THF或N-甲基吡咯烷酮存在下，使保护的酸ⅩⅤ与保护的氨基酸ⅩⅥB进行碳化二亚胺偶联反应，生成酰胺ⅩⅦB。将酰胺ⅩⅦB在有或没有无水惰性有机溶剂如二氯甲烷、氯仿或THF存在下，在约-15℃至约20℃的温度范围内通过用三氟乙酸(TFA)[当p是叔丁氧羰基(BOC)时]或H2-Pd/C[当p是苄氧羰基(CBZ)时]处理来去保护，生成酰胺ⅩⅧB。然后使酰胺ⅩⅧB进行磺化反应，其中，将酰胺ⅩⅧB在有机碱如三乙胺、吡啶或N，N-二异丙基乙胺存在下与磺酰氯Ⅴ反应，生成本发明的磺酰胺ⅠF。
起始化合物ⅩⅥB是本领域已知的，或可用常规方法来制备。
起始酸ⅩⅤ可由酯Ⅳ按下述方法制备将酯Ⅳ通过用碱如NaOH、KOH或LiOH处理水解，然后用强酸如HCl或草酸中和得到的碱金属盐。
本发明式Ⅰ化合物可以通过使游离碱与酸反应而以药学上可接受的酸加成盐形式制得，所述酸包括例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、马来酸、琥珀酸、乳酸、酒石酸、葡糖酸、苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等。
本发明化合物是丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是可抑制凝血酶、因子Xa和/或胰蛋白酶。本发明化合物可用于治疗或预防涉及凝血酶的产生和/或作用的病变。这包括一些凝固级联(coagulation cascade)被激活的血栓形成的和血栓形成前的(prothrombotic)状态，包括深静脉血栓形成(DVT)、扩散性血管内凝血病(DIC)、Kasabach-Merritt综合症、肺栓塞、心肌梗塞、中风、外科(例如髋部置换和动脉内膜切除术)的血栓栓塞并发症和外周动脉闭塞，但不限于这些。除其对凝固过程的作用外，凝血酶已被证明能激活大量的细胞(例如中性白细胞、成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞)。因此，本发明化合物也可用于治疗或预防成人呼吸窘迫综合症，脓毒性休克，败血症，炎性反应，包括但不限于水肿，急性或慢性动脉粥样硬化和再灌注损伤。
本发明化合物也可用于治疗瘤形成/转移(特别是利用纤维蛋白的那些)和神经变性疾病，例如阿耳茨海默氏病和巴金森氏病。此外，本发明化合物可用于预防由内原情况(动脉粥样硬化斑块破裂)或外原情况(侵入性心脏病学手术(invasive cardiological procedure)所致动脉损伤后的再狭窄。
本发明化合物也可用作体外血液循环的抗凝剂，例如在透析和外科手术(例如冠状动脉分流术外科手术)中所需的抗凝剂。
本发明化合物也可与血栓溶解剂配合使用。所述血栓溶解剂包括例如组织纤维蛋白溶酶原激活剂(天然的或重组体的)、链激酶、尿激酶、尿激酶原(prourokinase)、未分离的(anisolated)链激酶纤维蛋白溶酶原激活剂复合体(ASPAC)、动物唾液腺纤维蛋白溶酶原激活剂，等。本发明化合物可以协同的方式作用，以预防成功的血栓溶解治疗后的再闭塞和/或减少再灌注的时间。本发明化合物也可使所用的血栓溶解剂的剂量降低，因而使可能的出血性的副作用减到最小。
本发明化合物也可与其它抗血栓形成的或抗凝血的药物如血栓烷受体拮抗剂、拟前列环素(prostacyclin mimetics)、磷酸二酯酶抑制剂、纤维蛋白原拮抗剂等组合使用。
抑制胰蛋白酶的本发明化合物也可用于治疗胰腺炎。
本发明化合物可以有效量经口或肠道外途经给已知患有这类疾病的哺乳动物类例如人、猫、狗等使用，所述有效量在约0.1-100mg/Kg的剂量范围内，优选约0.2-50mg/kg，更优选约0.5-25mg/kg(或约1-2500mg，优选约5-2000mg)，服用方式为日剂量一次服用或分为2-4次服用。
活性物质可用在组合物如片剂、胶囊剂、溶液剂或悬浮剂中，所述组合物每单位剂量含约5-500mg式Ⅰ的化合物或式Ⅰ化合物的混合物。它们可按常规方式与生理上可接受的被公认的制药实践所需的媒介物或载体、赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、芳香剂等混合。
下列实施例代表本发明的优选的实施方案。除另有说明外，所有的温度均以摄氏度来表示。
实施例1[1(S)，2α、4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐。
A.(2R-反式)-1-[(苯基甲氧基)羰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯A(1).4-甲基-2-哌啶腈将33.6g(340mmol，Aldrich)4-甲基哌啶用40分钟滴加至在冰浴中冷却的500g次氯酸钠液(5%Cl，Aldrich)中。将反应混合物搅拌20分钟，然后倒入分液漏斗中，并用乙醚提取两次，每次400ml。将提取液合并，干燥(硫酸钠)并真空浓缩，得到约44g N-氯代中间体，为黄色液体。
将上面得到的N-氯代哌啶粗品的95%乙醇(20ml)溶液用40分钟滴加至加热到80℃的氢氧化钾(19.1g，340mmol)的95%乙醇(140ml)溶液中。该滴加过程中适度放热，并生成沉淀。将反应混合物搅拌10分钟，冷却至室温，真空浓缩，然后将85ml2N NaOH水溶液加至残留物中，将得到的混合物用乙醚提取3次，每次75ml。将乙醚提取液合并，干燥(硫酸钠)并真空浓缩，得到粗亚胺，为粘性黄色油状物。
用约一小时时间向在冰浴中冷却的氰化钾(110g，1.7mol，Mallinckrodt)的水(400ml)溶液中加入183ml(2.20mol)浓HCl，随后加入上面得到的粗亚胺。将反应混合物在10-20℃之间搅拌4小时，然后在冰浴中冷却，并通过加入约80g氢氧化钾片将混合物碱化至pH12。将得到的溶液倒入分液漏斗中并用乙醚提取3次，每次300ml。将乙醚层合并，干燥(硫酸钠)并真空浓缩，得黄色油状物。将粗产物经简单的减压蒸馏纯化，得13.2g(106mmol，31%)标题腈，为透明液体，bp72-74℃(3mm)。
A(2).4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯将13.0g(105mmol)A(1)项的腈于室温加至250ml 6N HCl水溶液中。将反应混合物加热回流(浴温145℃)6小时，然后冷却至室温并真空浓缩，得酸的盐酸盐粗品，为固体。
将40ml(550mmol)亚硫酰氯用30分钟滴加至在冰浴中冷却的250ml无水乙醇中。将溶液再搅拌15分钟，然后加至上面得到的酸的盐酸盐粗品中。将得到的浆液加热回流4小时，然后冷却至室温并滤除固体。将滤液真空浓缩，得到粗的酯胺盐酸盐，为棕色油状物。将该油状物在150ml饱和碳酸钾水溶液和150ml氯仿之间进行分配。分出水层，并用氯仿提取2次，每次100ml。将有机提取液合并，干燥(硫酸钠)并浓缩，得标题酯粗品，为棕色油状物。将粗产物通过-10cm填充柱(玻璃单环填充物，3mm)减压蒸馏纯化，得11.0g(64.3mmol，61%)标题胺，为无色液体，bp37-38℃(0.4mm)。反式/顺式比率经270MHz1HNMR测定，为约6∶1。
A(3).(2R-反式)-1-[(苯基甲氧基)羰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯将9.8ml(70mmol，蒸馏自氢化钙)三乙胺一次加至冷却至0℃的10.0g(58.5mmol)A(2)项的胺的二氯甲烷(100ml)溶液中，然后用20分钟滴加11.9g(70mmol，Aldrich)氯甲酸苄酯。将反应混合物搅拌30分钟，然后用100ml 1N HCl水溶液、100ml饱和碳酸氢钠水溶液、50ml盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，然后真空浓缩，得油状物。将该粗油状物用闪层析(Merck二氧化硅，30×10cm，600g，1∶9乙酸乙酯/己烷)纯化，得12.7g(41.6mmol，71%)标题化合物(反式异构体)，为无色油状物。还得到2.95g(9.67mmol，17%)反式/顺式异构体(约1∶1)的混合物，为无色油状物。
B.(2R-反式)-4-甲基哌啶羧酸乙酯将A项外消旋的CBZ酯(2.36g，7.73mmol)溶于无水乙醇(50ml)中，并用Pd-C(10%，250mg)于室温(RT)和1个大气压下氢化。6小时后再加入催化剂(50mg)。使反应继续进行2小时。过滤并真空蒸发，得标题游离胺(1.22g，7.13mmol，92%)。
C.(2R-反式)-1-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-0-(苯基甲基)-L-丝氨酰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯将B项的2-哌啶酸酯(1.22g，7.13mmol)和BOC-Ser(OBn)-OH(2.36g，8.0mmol)于RT溶于DMF(15ml)中，加入HOBT(1.08g，8.0mmol)、WSC(1.54g，8.0mmol)和N-甲基吗啉(NMM)(0.88ml，8.0mmol)。pH为约8.5。将反应混合物搅拌90分钟，分配于乙酸乙酯和10%KHSO4之间，将水层反萃取，并将有机层合并。将合并的有机层用饱和NaHCO3(2X)、饱和NaCl洗涤，硫酸镁干燥并真空汽提，得到标题酯，为油状物(2.99g，6.67mmol，93%)。
D.(2R-反式)-1-[N-(2-萘磺酰基)-0-(苯基甲基)-L-丝氨酰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯将C项的BOC-Ser-2-哌啶酸酯(2.80g，6.25mmol)于0℃溶于三氟乙酸(TFA)中，并用60分钟使其升温至RT。将TFA真空蒸发2小时，得到TFA盐，为油状物(4.2g)。将TFA盐粗品溶于二氯甲烷(15ml)中，加入2-萘磺酰氯(Aldrich，1.58g，7.0mmol)，随后加入三乙胺(3.5ml，25mmol)，剧烈放热。将反应混合物置冰浴中10分钟，然后升温至RT。6小时后蒸发二氯甲烷，并将反应混合物分配于乙酸乙酯和10%KHSO4之间(2X)，用饱和NaHCO3洗涤(2X)，硫酸镁干燥并蒸发，得标题酯粗品(3.18g)。对粗产物进行硅胶层析(1∶3 ()/() 1∶2乙酸乙酯(EtOAc)∶己烷)，得两个油状非对映体[2.29g，4.25mmol，68%(二步)]。
E.(2R-反式)-1-[N-(2-萘磺酰基)-0-(苯基甲基)-L-丝氨酰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸将D项的酯溶于甲醇(MeOH)(30ml)中，并用1N NaOH(10ml，10mmol)处理。搅拌12小时，再加入NaOH(5ml)。24小时后，将反应混合物用HCl(50ml，1N)酸化，用乙酸乙酯(2X)提取并真空干燥，得标题游离酸(1.99g，3.90mmol，99%)。
F.(4-氨基丁基)氨基甲酸苯基甲酯将1，4-丁二胺二盐酸盐(5.96g，37mmol)溶于水(15ml)中，并加入DMF(50ml)。在快速搅拌下，用2分钟滴加CBZ-Cl(1.0ml，7.0mmol)。该浑浊溶液的pH约为2.8。将pH用5N NaOH调至9.0(澄清溶液)并搅拌2小时。将反应混合物酸化至pH＝1.25，用乙醚提取(2X)，用5N NaOH使成碱性(pH＞10)并用二氯甲烷提取(2X)。将二氯甲烷部分合并，用水洗涤(2X)，干燥并真空蒸发，得到单一CBZ胺粗品(0.72g，3.24mmol，46%)，将其用于下一步。
G.(2R-反式)-1-[N-(2-萘磺酰基)-0-(苯基甲基)-L-丝氨酰基]-N-[4-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丁基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺将HOBT(170mg，1.25mmol)、WSC(0.25g，1.3mmol)和NMM(138μl，1.3mmol)加至E项的单-CBZ胺(400mg，1.8mmol)和E项的酸(640mg，1.25mmol)在DMF(5ml)中的溶液中，pH约为8.5。将反应混合物搅拌2小时(用HPLC鉴定反应完全)，分配于乙酸乙酯和10%KHSO4之间，反萃取，并将合并的有机层用10%KHSO4、饱和NaHCO3(2X)、饱和NaCl洗涤，并蒸发，以定量收率得到粗产物。将粗产物进行硅胶层析(2∶1;EtOAc己烷)，得标题的两个非对映体的混合物(671mg，0.94mmol，75%)。
H.[1(S)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将G项的0-苄基CBZ衍生物溶于已加有乙酰氯(0.71ml，10mmol，得0.5M HCl的溶液)的乙醇(20ml)中。将该混合物于1个大气压及回流温度下用Pd-C(10%，150mg)氢化。5小时后，将反应混合物过滤，汽提，并加入新鲜乙醇和催化剂。再过2小时后，测定反应完成约80%，这时将其过滤并汽提，得粗胺(412mg)。将粗产物用制备HPLC(80∶20 ()/() 50∶50)纯化，得到去苄基、去CBZ的非对映体(281mg，0.57mmol，71%)和0-苄基、去CBZ化合物(69mg，0.12mmol，15%)。
将上述去苄基、去CBZ产物(208mg，0.46mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入脒磺酸(78mg，0.65mmol)和三乙胺(176μl，1.26mmol)。20小时后，将溶剂蒸发，产物用制备HPLC(80∶20 ()/() 50∶50)纯化。将含两个主要成分的部分合并，冻干，得标题化合物，为异构体A∶B为40∶60的混合物(255mg，78%)，纯度≥98%。D(c＝1.0，MeOH)＝-11.7°.
计算值，对于1.30 TFA+ 0.80 H2Oc，47.68;H，5.64;N，12.09;F，10.66.
实测值c，47.68;H，5.34;N，11.97;F，10.83.
实施例2[1(S)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代-3-(苯基甲氧基)丙基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将实施例1H项所述的O-苄基、去CBZ化合物(69mg，0.099mmol)溶于乙醇(2ml)中，加入按Synthesis((1986)777-779)中所述制备的脒磺酸(22mg，0.18mmol)和三乙胺(50μl，0.36mmol)。20小时后，将溶剂蒸发，产物用制备HPLC纯比(80∶20 ()/() 50∶50)。将含两个主要成分的部分合并，冻干，得标题化合物，为异构体A∶B的1∶3混合物(76mg，100%)，纯度≥98%。D(c＝1.0，MeOH)＝-5.6°.
计算值，对于1.10TFA+0.30H2Oc，54.51;H，5.84;N，11.15;F，8.32.
实测值c，54.19;H，5.84;，N，11.04;F，8.29.
实施例3[2R-[1(S＊)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将实施例1化合物(约220mg)溶于水(15ml)中并用YMC S-1020mm×500mm ODS柱层析，用80∶20 ()/() 50∶50梯度洗脱。冻干后，洗脱液的第一峰(异构体A)有95mg。立体化学(2R，4R)通过与由非外消旋的原料制备的样品相比较来确定。D(c＝1.00，MeOH)+11.0°.
计算值，对于1.16 H2O+1.07 TFAc，48.25;H，5.88;N，12.44;F，9.03;S，4.75.
实测值c，48.25;H，5.61;N，12.25;F，9.25;S，5.19.
实施例4[2S-[1(R＊)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将实施例1化合物(约220mg)溶于水(15ml)中并用YMC S-1020mm×500mm ODS柱层析，用80∶20 ()/() 50∶50(乙腈∶水)梯度洗脱。冻干后，洗脱液的第二峰(异构体B)有103mg。立体化学(2S，4S)通过将这两个异构体相比较来确定。D(c＝1.00，MeOH)-29.0°.
计算值，对于1.39 H2O+1.17 TFAc，47.52;H，5.83;N，12.16;F，9.65;S，4.64.
实测值c，47.52;H，5.49;N，11.96;F，9.60;S，5.25.
离分辨MS表明 (M+H)+＝533.2546(C25H37O5N6S).
实施例5(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[[(1，2，3，4-四氢-3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸盐A.[2S-反式)-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯在室温向无水乙醇(65ml)和乙酰氯(6.52ml，于0℃滴加)的溶液中加入(2S，4S)-4-甲基-2-哌啶酸(2.8g，19.6mmol)。将反应混合物于室温搅拌16小时，然后真空浓缩，得标题化合物(3.01g，90%)。
B.(2S-反式)-1-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯将WSC(0.44g，2.25mmol)和A项的乙酯(0.35g，2.04mmol)加至L-Boc-甘氨酸(0.4g，2.25mmol)和HOBT(0.31g，2.25mmol)的DMF(7ml)溶液中，随后加入NMM(240μl，2.25mmol)，以调节溶液的pH至8。将反应混合物于室温搅拌16小时，并通过用饱和NaHCO3溶液、饱和KHSO4溶液、盐水洗涤来处理，用Na2SO4干燥并蒸发，得标题化合物(0.60g，89%)。
(M+H)+＠329C.(2S-反式)-1-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰基]-4-甲基-2-哌啶羧酸在0℃将1N NaOH(6.5ml)加至B项化合物(560mg，1.71mmol)的乙醇(6.5ml)溶液中。将反应混合物于室温搅拌16小时并真空浓缩。将反应混合物用1N HCl酸化至pH2，并用EtOAc提取。将EtOAc提取液用饱和KHSO4溶液、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得标题化合物(512mg，定量)。
(M+H)+＠301D.(4-氨基丁基)氨基甲酸苯基甲酯将5N NaOH加至1，4-二氨基戊烷(25g，155mmol)的DMF/H2O(1∶1)(100)溶液中，以调节pH至9。将CBZ-Cl(3.7ml，26mmol)一次加至其中，并于室温搅拌16小时。将反应混合物酸化至pH1.25，并用乙醚洗涤。然后将反应混合物的pH调至9.5，并用EtOAc提取。将有机层用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发，得标题化合物(1.57g，30%)。
E.(2S-反式)-1-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰基]-4-甲基-N-[4-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丁基]-2-哌啶甲酰胺将WSC(363mg，1.89mmol)和D项的CBZ胺(381mg，1.72mmol)加至C项的化合物(516mg，1.72mmol)和HOBT(256mg，1.89mmol)的DMF(10ml)溶液中，随后加入NMM(198μl，1.89mmol)，以调节溶液的pH至8。将反应混合物于室温搅拌16小时。通过将反应混合物倒入饱和NaHCO3溶液中并用EtOAc提取对反应混合物进行处理。将EtOAc层用饱和KHSO4溶液、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得标题化合物(900mg，定量)。
F.(2S-反式)-1-(氨基乙酰基)-4-甲基-N-[4-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丁基]-2-哌啶甲酰胺盐酸盐将4.5ml 4N HCl/二噁烷于0℃加至E项的化合物(0.76g，1.51mmol)的甲醇(5ml)溶液中，于室温2小时后，将反应混合物通过加入乙醚进行处理，沉淀标题化合物(0.70g，定量)。
G.(2S-反式)-4-甲基-1-[[[(3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-N-[4-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丁基]-2-哌啶甲酰胺将三乙胺(475ml，3.39mmol)于0℃加至F项的化合物(500mg，1.13mmol)的氯仿(11ml)溶液中。5分钟后，加入6-甲基-8-喹啉磺酰氯(273mg，1.13mmol)。将反应混合物于0℃再搅拌5分钟，然后于室温搅拌3小时。将反应混合物用饱和NaHCO3溶液、饱和KHSO4溶液、盐水洗涤，用硫酸钠干燥并蒸发，得粗产物。将其用硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷甲醇作洗脱剂，得标题化合物(150mg，22%)。
H.(2S-反式)-N-(4-氨基丁基)-4-甲基-1-[[[(1，2，3，4-四氢-3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺盐酸盐将G项的化合物(140mg，0.23mmol)和230μl 1N HCl在5ml乙醇中的溶液在1个大气压下用10% Pd/C(40mg)氢化。16小时后，将悬浮液用硅藻土过滤并真空浓缩，得标题游离胺(130mg，定量)。
I.(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[[(1，2，3，4-四氢-3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺将三乙胺(60ml，0.43mmol)加至H项的化合物(80mg，0.145mmol)的乙醇(0.8ml)溶液中，然后加入脒磺酸(27mg，0.22mmol)。于室温16小时后，将反应混合物真空浓缩，并进行制备HPLC纯化，用80∶20至50∶50梯度(H2O∶CH3CN)，历时50分钟，得标题化合物(40mg，50%)。
(M+H)+＠522计算值，对于C24H39N7O4S·1.2TFA·1.1 H2c，43.54;H，6.04;N，13.46;F，9.39实测值c，43.87;H，5.72;N，13.09;F，9.33.D＝-6.7(c＝0.51，甲醇)实施例6反式-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐A.顺-4-羟基-1-[(苯基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸甲酯将N-CBZ-L-酮基脯氨酸溶于甲醇(150ml)中，冷却至0-5℃，滴加NaBH4(2.875g)的水(10ml)溶液。将混合物维持在0-5℃19小时。真空除去甲醇。残留物用75ml 3N NaOH处理，并于室温搅拌40分钟。在冰浴中冷却后，将混合物用浓HCl酸化。将产物提取至乙酸乙酯(3×50ml)中。将合并的提取液用盐水(2×40ml)洗涤，干燥(硫酸镁)并真空除去溶剂，得顺式-羟基酸。用下述方法将其转化成甲酯将其溶于甲醇(75ml)中，用乙酰氯(7.5ml)处理，并于室温搅拌过夜。除去溶剂，将残留物溶于乙酸乙酯(75ml)中，用碳酸氢钠溶液(2×25ml)洗涤，干燥(硫酸镁)，并真空除去溶剂，得标题化合物，为粘性油状物(4.315g，81%)。
B.顺-4-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-1-[(苯基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸甲酯将A项的醇(4.315g，16.84mmol)溶于无水吡啶(23ml)中，将其在冰浴中冷却并用甲苯磺酰氯(6.8g)处理。将混合物缓慢升至室温，并搅拌60小时。冷却后，加入冷的2N HCl，并将混合物于0-5℃放置4小时。过滤收集固体并将其溶于二氯甲烷中。将该溶液用1N HCl溶液和盐水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空除去溶剂，得标题化合物，为结晶状物。
C.4-(甲硫基)-1-[(苯基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸甲酯将B项的甲苯磺酸酯(2.09g，4.8mmol)在氩气气氛下溶于无水乙醇(20ml)和丙酮(20ml)中，并用甲硫醇钠(1.39g，19.9mmol)处理。将混合物加热回流1小时，冷却并真空除去大部分溶剂。将残留物分配于1N HCl和乙酸乙酯之间。将乙酸乙酯层用水洗涤，干燥(硫酸镁)并真空除去溶剂。NMR和TLC表明该物主要为游离酸。将其用以下方法转化成甲酯将其溶于甲醇(20ml)中，加入乙酰氯(2ml)并于室温搅拌2小时。除去溶剂后，将产物用硅胶层析纯化，用乙酸乙酯己烷(1∶2)洗脱，得标题甲硫基化合物(1.364g，99%)。
D.4-(甲硫基)-L-脯氨酸甲酯氢溴酸盐将C项的化合物(945mg，3.3mmol)用30%HBr的乙酸(8ml)液处理1小时，然后真空浓缩。将残留物用乙醚研制，产生固体，过滤收集该固体并用更多的乙醚洗涤，得到标题去保护的胺(749mg，89%)。
E.反式-1-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙酰基]-4-(甲硫基)-L-脯氨酸甲酯以及F.顺式-1-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甘氨酰基]-4-(甲硫基)-L-脯氨酸甲酯将D项的L-脯氨酸衍生物(1.012g，3.95mmol)和BOC-甘氨酸(900mg，5.1mmol)于RT溶于DMF(20ml)中，加入HOBT(688mg，5.1mmol)、WSC(974mg，5.1mmol)和NMM(1.0ml，9.1mmol)。将反应混合物搅拌16小时，在乙酸乙酯(50ml)和10%KHSO4(100ml)之间进行分配。水层用乙酸乙酯(2×50ml)提取，并将有机层合并，将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液、饱和NaCl溶液洗涤，硫酸镁干燥并真空浓缩，得到油状物。TLC表明其为两个主要产物。将该产物粗品用硅胶层析纯化，用乙酸乙酯己烷(1∶2，随后1∶1)洗脱，得主产物(初步确定为反式构型的标题化合物，603mg，46%)和次要产物(初步确定为顺式构型的标题化合物，204mg，16%)以及一些混合级分(438mg，33%)。
G.反式-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酸甲酯将E项的BOC衍生物(600mg，1.8mmol)溶于三氟乙酸(TFA)(15ml)中，并于RT搅拌1小时。将TFA通过减压蒸馏和与甲苯共蒸发除去。将TFA盐粗品溶于二氯甲烷(20ml)中，在冰浴中冷却，并加入2-萘磺酰氯(Aldrich，450mg，2.0mmol)，随后加入三乙胺(1.5ml)。将该溶液升温至RT并搅拌1.5小时后用二氯甲烷(75ml)稀释。将该溶液用硫酸氢钾溶液(2×40ml)和饱和NaHCO3溶液(2×40ml)洗涤，硫酸镁干燥并蒸发，得粗的标题化合物。对粗产物进行硅胶层析，用50%的EtOAc己烷液洗脱，得标题磺酰胺，为泡沫状物(700mg，两步总计92%)。
H.反式-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酸将G项的甲酯(700mg，1.65mmol)的甲醇(20ml)溶液用1N NaOH溶液(8ml)处理，并于室温搅拌3小时。用1N HCl溶液酸化后，将产物提取至二氯甲烷(2×50ml)中，用硫酸镁干燥并真空除去溶剂，得到标题化合物，为白色泡沫状物(687mg，100%)。
I.反式-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-N-[4-[[(苯基甲氧基)羰基]氨基]丁基]-L-脯氨酰胺将HOBT(230mg，1.7mmol)、WSC(325mg，1.7mmol)和NMM(373μl，3.4mmol)加至单-CBZ丁基二胺(484mg，2.18mmol)和H项的酸(687mg，1.65mmol)在DMF(25ml)中的溶液中。将反应混合物于RT搅拌20小时，将其分配于乙酸乙酯(50ml)和KHSO4溶液(50ml)之间，并用乙酸乙酯(2×50ml)反萃。将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩。对粗产物进行硅胶层析，用50-67%的EtOAc己烷液洗脱，然后用EtOAc洗脱，得标题化合物(577mg，58%)。
J.反式-N-(4-氨基丁基)-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酰胺氢溴酸盐将CBZ基团经用30% HBr的HOAc(10ml)液处理1.5小时而从Ⅰ项化合物(577mg，0.96mmol)中去除，然后真空浓缩。将残留物用乙醚研制，得到固体。过滤收集固体并用较多的乙醚洗涤，得标题去保护的胺(100%)。
K.反式-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐将J项化合物(0.96mmol)溶于乙醇(20ml)中，加入脒磺酸(173mg，1.4mmol)和三乙胺(375μl，2.7mmol)。4小时后，将混合物用硅藻土垫过滤，用乙醇洗涤，将滤液浓缩至干。将粗产物经制备HPLC纯化(YMC S-10 ODS 50×500mm柱，用含0.1%TFA的54%的甲醇水溶液洗脱)。将含纯标题化合物的级分合并并冻干，得到白色固体(279mg，44%)，纯度≥98%。D＝-12.7°，(c＝0.7，MeOH).
计算值，对于1.10 TFA+0.90 H2Oc，45.70;H，5.31;N，12.69;F，9.68;S，9.47.
实测值c，45.65;H，5.09;N，12.51;F，9.74;S，9.37.
实施例7N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐半水合物A.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-L-脯氨酰胺盐酸盐A(1).(4-氨基丁基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯将二碳酸二叔丁酯(15.7g，71.9mmol)的二噁烷(195ml)溶液用3.5小时于室温及氩气条件下滴加至搅拌的1，4-二氨基丁烷(50g，567mmol)的二噁烷(195ml)溶液中。在滴加过程中出现一些白色沉淀。将混合物于室温搅拌22小时，真空浓缩。将残留物用320ml水稀释并滤除沉淀。将水性滤液用二氯甲烷(3×300ml)提取。将合并的二氯甲烷提取液用水(2×200ml)和盐水(1×200ml)洗涤。将有机层干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到9.79g(72%)标题单-BOC·胺。
TLC硅胶，2% NH4OH的10%CH3OH/CH2Cl2液，Rf0.30，水合茚三酮A(2).N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-1-[(苯基甲氧基)羰基]-L-脯氨酰胺将4-甲基吗啉(11.2ml，102mmol)和乙基-3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(9.76g，50.9mmol)在搅拌下依次加至N-CBZ-L-脯氨酸(12.7g，50.9mmol)、1-羟基苯并三唑-水合物(6.49g，50.9mmol)和A(1)项的BOC胺(9.57g，50.9mmol)的DMF(250ml)溶液中。将反应溶液于室温搅拌22小时，在泵真空下于50℃浓缩。残留物用600ml EtOAc稀释，并用1N HCl溶液(2×250ml)、饱和NaHCO3溶液(2×250ml)和盐水(1×250ml)洗涤。将EtOAc层干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到20.7g(97%)标题CBZ胺。
TLC硅胶 4%CH3OH/CH2Cl2，Rf0.44，UV，Ce(SO4)2A(3).N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-L-脯氨酰胺盐酸盐将20%Pd(OH)2/C[4.04g，20%(基于A(2)项化合物的重量)]在氩气下加至搅拌的A(2)项的CBZ胺(20.2g，48.2mmol)的甲醇(250ml)溶液中。将气氛用若干次真空填充循环(vaccum-fillcycles)用氢气置换。将反应混合物于室温搅拌21小时。将催化剂用4μm聚碳酸酯膜滤出，并用甲醇(3×50ml)漂洗。将滤液真空浓缩。将油状残留物溶于200ml乙醚中并用1N HCl溶液在乙醚(53.0ml，53.0mmol)中处理。将溶液真空浓缩。将残留物与200ml甲苯和30ml甲醇混合并真空浓缩，以定量收率(15.5g)得到标题胺盐酸盐，为油状物。
B.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将搅拌的N-α-CBZ-D-苯丙氨酸(0.56g，1.9mmol)的DMF(6.5ml)溶液于室温、氩气下用1-羟基苯并三唑(0.29g，1.9mmol)和乙基-3-(3-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(0.36g，1.9mmol)处理。20分钟后，加入A项的化合物(0.50g，1.6mmol)并搅拌16小时。通过加入75ml 0.25M KHSO4溶液将反应终止。将该悬浮液用EtOAc(2×40ml)洗涤，将合并的EtOAc层用0.25M KHSO4溶液(2×40ml)、饱和KHCO3水溶液(2×40ml)、盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并浓缩，得1.07g白色太妃糖状物，经TLC分析表明，它含未反应的N-α-CBZ-D-苯丙氨酸。将粗产物再溶于60ml EtOAc中，用饱和KHCO3水溶液(3×40ml)、盐水洗涤、干燥(硫酸钠)，浓缩，与乙醚和己烷共蒸发几次，并用50ml己烷研制，得标题化合物(0.78g，88%)，为白色固体。
C.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]丁基]-1-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺将含有0.12g Pd(OH)2/C的B项化合物(0.58g，1.0mmol)在5.0ml甲醇中的溶液在1个大气压下氢化3.75小时。将催化剂用多孔膜(Whatman 0.2μ Nylon Autovial)滤除，并将滤液浓缩，得标题化合物(0.39g，88%)，为白色吸湿性固体。
D.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将三乙胺(0.25ml，1.8mmol)滴加至在0℃搅拌的C项化合物(0.39g，0.90mmol)和2-萘磺酰氯(0.21g，0.95mmol)的二氯甲烷(7.0ml)溶液中。将该反应于室温进行45分钟。真空去除二氯甲烷。将残留物分配于EtOAc(50ml)和0.25M KHSO4水溶液(15ml)之间。将乙酸乙酯层用0.25M KHSO4溶液(3×15ml)、盐水洗涤，干燥(硫酸钠)并浓缩，得到0.61g无色玻璃状物，用50ml己烷研制，得标题化合物(0.52g，93%)，为白色固体。
E.N-(4-氨基丁基)-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐将三氟乙酸(5.0ml)加至冰冷却的D项化合物(0.48g，0.77mmol)中。将该反应溶液于室温搅拌45分钟。将三氟乙酸在真空下去除并与乙醚及己烷共蒸发若干次。直至得到白色固态标题化合物，(0.51g，约100%)。
F.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐半水合物将E项化合物(0.49g，0.77mmol)的无水乙醇(6.0ml)溶液用脒磺酸(0.14g，1.2mmol)处理，然后用三乙胺(3.2ml，2.3mmol)处理。在几分钟的反应时间内出现沉淀。反应5小时后，反应混合物的TLC分析(二氧化硅，3∶1∶1正丁醇∶乙酸∶H2O)表明尚有少量未消耗掉的E项化合物。再加入一些脒磺酸(0.05g)和三乙胺(0.53ml)，并使反应继续进行16小时。按上述进行的TLC分析表明E项化合物已全部消耗掉。将反应混合物浓缩，溶于25ml甲醇中，并用多孔膜(Gelman Acrodisc CR PFTE，0.45μ)过滤。将滤液进行制备HPLC(25%B至100%B，30分钟梯度)纯化，然后将合并的级分冻干，得到标题化合物(258mg，48%)，为无色固体，mp100-120℃发泡。D＝+19.4°(c＝0.5，CH3OH).
TLCRf＝0.70(二氧化硅3∶1∶1nBuOH;HOAc;H2O).
计算值，对于C31H37N6O6F3S·1.1 C2HF3O2·0.50H2Oc，53.60;H，5.49;N，12.02;F，8.97;S，4.59实测值C，53.61;H，5.50;N，11.81;F，9.03;S，4.36实施例8N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺A.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺将4-甲基吗啉(0.57ml，5.23mmol)和乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(0.33g，1.74mmol)依次加至搅拌着的实施例7A项的胺盐酸盐(0.56g，1.74mmol)、1-羟基苯并三唑-水合物(0.29g，1.74mmol)和N-CBZ-D-谷氨酰胺(0.49g，1.74mmol)的DMF(15ml)溶液中。将该溶液于室温搅拌19小时，并于45℃在泵真空下浓缩。将油状残留物用160ml EtOAc稀释，并用1N HCl溶液(2×60ml)饱和的NaHCO3溶液(2×60ml)和盐水(1×60ml)洗涤。将EtOAc层干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到0.75g(77%)标题CBZ胺。
TLC硅胶，6%CH3OH/CH2Cl2，Rf0.22，Ce(SO4)2B.N-[4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺将Pd(OH)2/C[146mg，20%(基于A项化合物的重量)]在氩气下加至搅拌的A项的CBZ胺(0.73g，1.33mmol)的甲醇(12ml)溶液中。将气氛用若干次真空填充循环用氢气置换。将反应溶液于室温搅拌22小时，用4μm聚碳酸酯膜滤除催化剂。将该固体用甲醇(2×20ml)漂洗。将滤液真空浓缩，得到0.54g中间体胺。将三乙胺(0.33ml，2.34mmol)加至于0℃氩气下搅拌的所述胺(0.44g，1.07mmol)和2-萘磺酰氯(0.27g，1.18mmol)的无水二氯甲烷(10ml)溶液中。将反应溶液于室温搅拌2小时，用180mlEtOAc稀释。将该溶液用1NHCl溶液(2×60ml)、饱和NaHCO3溶液(1×60ml)和盐水(1×60ml)洗涤。将有机层干燥(硫酸镁)，过滤真空浓缩。用30gMerck硅胶60进行闪层析纯化，用240ml4%CH3OH/CH2Cl2和480ml 6%CH3OH/CH2Cl2作洗脱剂，得到纯的标题磺酰胺(310mg，48%)。
TLC硅胶，4%CH3OH/CH2Cl2，Rf 0.20，UV，I2.
C.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺将0℃的4N HCl的二噁烷液(6.00ml，24.0mmol)加至搅拌的B项磺酰胺(310mg，0.51mmol)的无水二氯甲烷(5ml)溶液中。将该溶液于室温搅拌2小时，用120ml乙醚稀释。滤出固体，并用乙醚(2×30ml)漂洗。将固体溶于60ml甲醇中并真空浓缩，得到中间体胺盐酸盐。将氨基亚氨基甲磺酸(204mg，1.64mmol)加至在氩气下搅拌的所述胺盐酸盐、三乙胺(0.39ml，2.31mmol)和5ml无水乙醇的混合物中，将混合物于室温搅拌5小时并真空浓缩。将反应混合物用制备HPLC纯化，用37%的含0.2%H3PO4的水甲醇(90∶10和10∶90)的组合物洗脱。将级份真空浓缩并冻干，得到260mg(93%)的标题化合物。
m.p.72-74℃[α]D＝+5.80(c＝0.69，甲醇)，计算值，对于C25H35N7O5S·1.60TFA·1.0 H2Oc，45.40;H，5.21;N，13.14;S，4.30;F，12.22实测值c，45.45;H，4.98;N，12.95;S，4.32;F，11.90按照实施例1至8和上述的方法，还可制得以下各例化合物(并列出可以得到的熔点℃、旋光度和/或元素分析值)。
9.[2R-[1(S＊)，2α，4β)]-N-[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丙基]-1-[4-羟基-3-[(2-萘磺酰基)氨基]-1，2-二氧代丁基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝+11.0(c＝1.09MeOH)计算值，对于C24H34N6O5S·1.1TFA·1.34 H2Oc，47.10;H，5.70;N，12.58;S，4.80;F，9.38实测值c，47.39;H，5.41;N，12.29;S，5.21;F，9.5610.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺[α]D＝-70.2(c＝0.5，MeOH)
计算值，对于C23H32N6O5S·1.15TFA·0.5 H2Oc，47.13;H，5.34;N，13.03;S，4.97;F，10.17实测值C，46.83;H，5.28;N，12.84;S，5.14;F，10.4311.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-D-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-14.8(c＝0.5，MeOH)计算值，对于C23H32N6O5S·1.15TFA·1.6 H2Oc，45.73;H，5.51;N，12.65;S，4.82;F，9.86实测值C，45.58;N，5.19;N，12.41;S，5.14;F，10.0112.(2R-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸盐水合物[α]D＝+33.0(c＝1.08MeOH)计算值，对于C24H34N6O4S·1.35TFA·0.85 H2Oc，47.73;H，5.56;N，12.51;S，4.77;F，11.45实测值C，47.73;H，5.51;N，12.13;S，4.95;F，11.4213.[2R-[1(S＊)，2α，4β]]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸盐水合物D＝+18.8(c＝1.06MeOH)计算值，对于C26H38N6O5S·1.36TFA·1.00 H2Oc，47.93;H，5.79;N，11.68;S，4.45;F，10.77实测值c，47.92;H，5.66;N，11.53;S，4.89;F，10.7514.[1(S)]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1，2，3，4-四氢-2-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-3-异喹啉甲酰胺，异构体A，三氟乙酸盐水合物[α]D＝-30.9(c＝0.5，MeOH)计算值，对于C28H34N6O5S·1.25TFA·1.0H2Oc，50.37;H，5.16;N，11.56;S，4.41;F，9.80实测值c，50.31;H，5.05;N，11.58;S，4.44;F，9.6515.[1(S)]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1，2，3，4-四氢-2-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-3-异喹啉甲酰胺，异构体B，三氟乙酸盐水合物[α]D＝-22.8(c＝0.6，MeOH)计算值，对于C28H34N6O5S·1.25TFA·1.0 H2Oc，50.15;H，5.13;N，11.47;S，4.37;F，10.11实测值c，50.04;H，4.95;N，11.36;S，4.51;F，10.17
16.(4S＊)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-羟基-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-29.0(c＝0.6，MeOH)计算值，对于C23H32N6O6S·1.15 TFA·1.0 H2Oc，45.25;H，5.31;N，12.51;S，4.77;F，9.76实测值c，45.28;H，4.98;N，12.52;S，4.86;F，9.8617.(4S＊)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲氧基-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-24.5(c＝0.6，MeOH)计算值，对于C24H34N6O6S·1.15 TFA·1.0 H2Oc，46.04;H，5.56;N，12.30;S，4.69;F，9.17实测值c，46.04;H，5.48;N，12.16;S，4.78;F，9.2218.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐m.p.172-178℃发泡[α]D＝-27.0(c＝0.5，CH3OH)
计算值，对于C31H37N6O6F3S·1.2 C2HF3O2·0.80 H2Oc，52.68;H，5.46;N，11.74;F，9.55;S，4.48实测值c，52.71;H，5.35;N，11.50;F，9.33;S，4.2619.(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺[α]D＝-36.4(c＝0.98，MeOH)计算值，对于C26H35N6O6S·0.25TFA·1.20 H2Oc，47.74;H，5.69;N，12.60;F，10.68;S，4.81实测值c，47.75;H，5.51;N，12.62;F，10.86;S，4.9520.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-48.1(c＝0.68，甲醇)计算值，对于C25H35N7O5S·1.27 TFA·1.57 H2Oc，46.02;H，5.53;N，13.64;S，4.46;F，10.07实测值c，46.02;H，5.18;N，13.33;S，4.86;F，10.0621.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-苏氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐m.p.68-78℃[α]D＝-72.6(c＝0.69，甲醇)
计算值，对于C24H34N6O5S·1.25 TFA·1.20 H2Oc，46.62;H，5.56;N，12.31;S，4.70;F，10.43实测值c，46.75;H，5.50;N，12.08;S，4.82;F，10.4022.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-别苏氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐m.p.85-96℃[α]D＝-70.8(c＝0.76，甲醇)计算值，对于C24H34N6O5S·1.16 TFA·0.97 H2OC，47.30;H，5.59;N，12.57;S，4.80;F，9.89实测值c，47.30;H，5.16;N，12.39;S，5.19;F，9.4823.(S)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[N-(2-萘磺酰基)甘氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝+13.4(c＝0.6，MeOH)计算值，对于C23H32N6O5S2·1.10 TFA·1.0 H2Oc，45.58;H，5.33;N，12.65;S，9.44;F，9.66实测值c，45.52;H，5.11;N，12.46;S，9.49;F，9.6524.(R)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[N-(2-萘磺酰基)甘氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐D＝-12.7 (c＝0.7，MeOH)计算值，对于C23H32N6O4S2·1.10 TFA·0.9 H2OC，45.70;H，5.31;N，12.69;S，9.47;F，9.68实测值C，45.65;H，5.09;N，12.51;S，9.37;F，9.7425.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺高分辨质谱(M+H)+＝489.228726.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-色氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐m.p.100-160℃泡沫/分解[α]D＝+44.4(c＝0.5，CH3OH)计算值，对于C31H37N7O4S·1.06 C2HF3O2·1.35 H2Oc，53.12;H，5.49;N，13.09;F，8.07;S，4.28实测值c，53.51;H，5.35;N，12.73;F，8.10;S，4.2827.(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[[(3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸盐[α]D＝-24.1(c＝0.99MeOH)
计算值，对于C24H35N7O4S·1.37TFA·1.00 H2OC，46.42;H，5.59;N，14.17;F，11.29;S，4.63实测值C，46.51;H，5.32;N，14.06;F，11.28;S，4.5528.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[[(8-喹啉基磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺三氟乙酸盐计算值，对于C22H31N7O6S·2C2HF3O2·2.20 H2OC，41.21;H，5.04;N，12.84;F，14.93;S，4.20实测值C，41.34;H，4.69;N，12.39;F，14.91;S，4.5529.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-α-谷氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝(c＝0.60，甲醇)计算值，对于C25H34N6O6S·1.35 TFA·1.13 H2OC，46.42;H，5.31;N，12.16;S，4.35;F，10.43实测值C，46.42;H，5.33;N，11.84;S，4.66;F，10.50实施例29N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐
A.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐A(1).N-[4-(氨基丁基)]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐将实施例7B项的标题化合物(0.78g，1.38mmol)溶于三氟乙酸(3.2ml)中。3小时后将溶剂蒸发，然后与己烷/乙醚共蒸发5次并真空干燥16小时，得无色太妃糖状物。将其用于下一步反应。
A(2).N-[4-(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐将A(1)项化合物(0.80g，1.38mmol)溶于无水乙醇(10.9ml)中，并依次用脒磺酸(0.26g，1.5当量)和三乙胺(0.58ml，3当量)处理。搅拌2小时后蒸发溶剂。将粗产物用反相HPLC纯化，得到无色固体(414mg，45%)。
A(3).N-[4-[氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺三氟乙酸盐将A(2)项的标题化合物(0.20g，0.30mmol)溶于甲醇(1.5ml)中，并在1个大气压和室温下用Pd(OH)2(40mg的20%催化剂)氢化3小时。将催化剂滤除，并汽提溶剂，得到油状物。将其溶于甲醇中，用三氟乙酸(0.2ml)酸化并蒸发至干，然后溶于水中并冻干，得到标题化合物(152mg)。
旋光度＝-75.8°(c＝0.5，CH3OH).
计算值，对于C19H30N6O2·2.07 C2HF3O2·0.90 H2O)C，44.35;H，5.45;N，13.41;F，18.82实测值C，44.52;H，5.01;N，13.26;F，18.52.
B.N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将三乙胺(Et3N)(0.44ml，3.20mmol)和甲磺酰氯(68.0μl，0.88mmol)在氩气下依次加至搅拌的A项的胺(550mg，0.80mmol)在15ml无水二氯甲烷和15ml无水THF中的溶液中。将此混浊的混合物于室温搅拌3小时，并用0.50ml水稀释。将该混合物于室温搅拌10分钟并真空浓缩。将残留物用30ml甲醇稀释，真空浓缩并用制备HPLC纯化。将所需级分真空浓缩并冻干，得到300mg(75%)标题化合物。
旋光度[α]D＝-68.7°(C＝1.00，甲醇).
元素分析(%)计算值C，43.59;H，5.31;N，13.09;S，4.99;F，14.65实测值C，43.59;H，5.33;N，13.08;S，4.80;F，14.69实施例30
N-[[(1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺A.4-(氨基甲基)-N，N′-双[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-1-哌啶甲脒(carboximidamide)将苯甲醛(0.78ml，6.94mmol)加至搅拌的4-氨基甲基哌啶(0.72g，6.31mmol)的甲苯(40ml)溶液中。将反应溶液回流18小时，用Dean Stark分水器除去水。将反应液冷却至室温时加入双-Boc脒基吡唑(1.96g，6.31mmol)。将反应液于室温搅拌48小时并真空浓缩。将油状残留物用15ml 1M(水)KHSO4溶液稀释，并于室温搅拌5小时。将该水溶液用乙醚(2×20ml)洗涤，并通过加入1N NaOH溶液碱化至pH12。然后将该碱性溶液用NaCl饱和，并用二氯甲烷(3×60ml)提取。将合并的二氯甲烷提取液干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到2.10g(93%)标题胺，无需进一步纯化，将其用于下一步变换。
B.(S＊)-N-[[1-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基][[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]亚氨基]甲基]-4-哌啶基]甲基]-1-[1-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-苯基乙基]-L-脯氨酰胺将4-甲基吗啉(0.66ml，6.05mmol)和乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(0.39g，2.02mmol)依次加至搅拌的N-Boc-D-Phe-L-Pro-OH(0.73g，2.02mmol)、A项的胺(0.72g，2.02mmol)和1-羟基苯并三唑-水合物(0.34，2.02mmol)的DMF(30ml)溶液中。将反应溶液于室温搅拌19小时，并在泵真空下于45℃浓缩。将残留物用100ml饱和NaHCO3溶液稀释，并用二氯甲烷(4×100ml)提取。将合并的二氯甲烷提取液干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，进行硅胶层析，得到0.70g(50%)标题双-Boc胍。
C.N-[[(1-氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺将三氟乙酸(TFA)(6.00ml，77.9mmol)加至搅拌的B项双-Boc胍(0.68g，0.97mmol)的二氯甲烷(6.0ml)溶液中。将反应液于室温搅拌3小时并真空浓缩。将其用制备HPLC纯化，得到310mg(45%)标题化合物。
D.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将三乙胺(0.38ml，2.74mmol)和甲磺酰氯(69μl)在氩气及0℃下依次加至搅拌的C项胍(275mg，0.68mmol)的二氯甲烷(4.0ml)和THF(2.0ml)溶液中。将反应混合物于室温搅拌2.5小时，并用2.0ml水稀释。将混合物真空浓缩，并用制备HPLC纯化，得到160mg(37%)标题化合物。
实施例31N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-3-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺
A.N-Boc-3-羟甲基哌啶将二碳酸二叔丁酯(31.5g，144mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液用1小时时间滴加至搅拌的3-羟甲基哌啶(15.1g，131mmol)和三乙胺(21.9ml，158mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液中。将反应混合物于室温搅拌18小时，然后用200ml二氯甲烷稀释。将得到的溶液用1N HCl溶液(3×100ml)、饱和NaHCO3溶液(2×100ml)和盐水(1×100ml)洗涤。将有机层干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，得到N-Boc-3-羟甲基哌啶(27.0g，96%)。
B.3-(叠氮基甲基)-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯将三乙胺(22.7ml，163mmol)和甲磺酰氯(11.7ml，151mmol)在氩气及0℃下依次加至搅拌的A项N-Boc-3-羟甲基哌啶(27.0g，126mmol)的无水二氯甲烷(150ml)溶液中。将反应混合物于室温搅拌1.5小时，用450ml二氯甲烷稀释。将反应混合物用0℃ 1N HCl溶液(2×100ml)和盐水(1×100ml)洗涤。将二氯甲烷层干燥(硫酸钠)，过滤并真空浓缩。将残留物溶于200ml DMF中并与叠氮化钠(24.5g，377mmol)混合。将混合物于室温搅拌33小时，滤除固体。将滤液在泵真空下于45℃浓缩。将残留物分配于400ml乙酸乙酯和10%硫代硫酸钠溶液(2×100ml)和盐水(1×100ml)之间。将乙酸乙酯层干燥(硫酸镁)，过滤并真空浓缩，硅胶闪柱层析纯化，得到19.5g(65%)标题叠氮化物。
C.3-(氨基甲基)-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯将10% Pd/C[3.80g，20%(基于B项叠氮化物重量)]在氩气下加至搅拌的B项叠氮化物(19.0g，79.2mmol)的甲醇(250ml)溶液中。将所述气氛经若干次真空填充循环用氢置换。将该混合物于室温搅拌15小时。将催化剂用4μm聚碳酸酯膜滤出，并用甲醇(4×30ml)漂洗。将滤液真空浓缩，得到16.3g(96%)标题胺。
D.N-[[1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-3-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(1.79g，9.35mmol)加至搅拌的C项胺(2.00g，9.35mmol)、N-Cbz-D-Phe-L-Pro(3.70g，9.35mmol)、1-羟基苯并三唑-水合物(1.58g，9.35mmol)和4-甲基吗啉(3.07ml，28.0mmol)的溶液中。将反应溶液于室温搅拌17小时并在泵真空下于45℃浓缩。将残留物溶于360ml乙酸乙酯中，并用1N HCl溶液(2×120ml)、饱和NaHCO3溶液(1×120ml)和盐水(1×120ml)洗涤。将乙酸乙酯层干燥(硫酸镁)，过滤，真空浓缩，并进行硅胶层析，得到1.30g(23%)标题氨基甲酸酯。
E.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-3-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将0℃ 4N HCl二噁烷液(15.0ml，60.0mmol)加至搅拌的D项氨基甲酸酯(2.30g，3.89mmol)的无水二氯甲烷(10ml)溶液中。将该溶液于室温搅拌3小时，用300ml乙醚稀释，滤出沉淀并用乙醚(3×30ml)漂洗。将沉淀在泵真空下于室温干燥，并用制备HPLC纯化，。得到1.39g(59%)中间体胺TFA盐。将1H-吡唑-1-甲脒(133mg，0.91mmol)加至搅拌的所述中间体胺TFA盐(500mg，0.83mmol)和二异丙基乙基胺(0.35ml，1.98mmol)的DMF(2.0ml)溶液中。将该反应溶液于室温搅拌6小时，用100ml乙醚稀释。将所需的油状沉淀物由该乙醚溶液中分出并用制备HPLC纯化，得到250mg(47%)标题Cbz-氨基甲酸酯。
F.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-3-哌啶基]甲基]-1-D-苯丙氨酰基-L-脯氨酰胺将20% Pd(OH)2/C[48mg，20%(基于E项Cbz-氨基甲酸酯的重量)]在氩气下加至搅拌的E项Cbz-氨基甲酸酯(240mg，0.37mmol)的甲醇(10ml)溶液中。将该气氛经若干次真空填充循环用氢气置换。将反应混合物于室温搅拌24小时。将催化剂滤出，并用甲醇(4×20ml)漂洗。将滤液真空浓缩。将残留物溶于50ml 0.1% TFA的水溶液中并冻干，得到220mg(82%)标题化合物。
G.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-3-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺按照实施例30D项的方法，所不同的是，用F项的脒代替实施例30C项的脒，得到标题化合物。
实施例32N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐A.N-[[(苯基甲氧基)羰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将L-脯氨酸甲酯HCl(24.6g，0.149mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(22.2g，0.164mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺·HCl(31.4g，0.164mmol)和4-甲基吗啉(22.6g，0.224mmol)加至0℃的N-CBZ-D-丙氨酸(28.1g，0.149mmol)的DMF(250ml)溶液中。将反应混合物加热至室温，同时搅拌12小时。将反应混合物倒入水(750ml)中并用乙酸乙酯(2×150ml)提取。将合并的有机提取液用KHSO4(0.25M，2×50ml)、水(1×50ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×50ml)和饱和NaCl(1×50ml)洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤，真空除去溶剂，得到标题化合物，41.16g(92%)，为油状物。MS(M+H)+＝301+。
B.N-[[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将A项化合物(1.56g，5.2mmol)的三氟乙酸(3ml)溶液于0℃搅拌1.5小时并真空浓缩，得到相应的TFA盐。将该盐溶于氯仿(10ml)中，并于0℃向其中加入三乙胺(2.2ml，15.6mmol)和苄磺酰氯(1.48，7.8mmol)。将反应混合物搅拌至室温过夜。25小时后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(50ml)中，依次用0.25M KHSO4水溶液(2×20ml)、水(1×20ml)饱和NaHCO3水溶液(2×20ml)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发，得到标题化合物，为油状物(1.56g，85%)∶MS(M+H)+＝355+。
C.N-[[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酸将NaOH水溶液(1.0N，9.5ml)于0℃加至B项化合物(1.33g，3.75mmol)的THF(10ml)溶液中，30分钟后将反应混合物加热至室温，并再继续搅拌4小时。真空除去有机溶剂。将水层酸化至pH2-3，并用乙酸乙酯(3×10ml)提取。将合并的提取液用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，1.21g(94%)，为白色固体。MS(M+H)+＝341+。
D.N-[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺于0℃向C项化合物(1.09g，3.2mmol)的DMF(15ml)溶液中加入N-1，1-[(二甲基乙氧基)羰基]-4-甲基氨基哌啶(实施例33A项中制备的)(0.685g，3.2mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(0.476g，3.5mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺.HCl(0.675g，3.5mmol)和4-甲基吗啉，直至pH试纸显碱性。将反应混合物搅拌12小时，同时将其加热至室温。将反应混合物倒入0.25M KHSO4水溶液(50ml)中并用乙酸乙酯(2×20ml)提取。将有机层合并并用0.25M KHSO4水溶液(1×30ml)、水(1×25ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×25ml)和水(1×20ml)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，1.67g(9%)，为油状物。MS(M+H)+＝537+。
E.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将D项化合物(1.17g，2.2mmol)的三氟乙酸(10.0ml)溶液于0℃搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩，得到相应的TFA盐。向该盐(2.2mmol)的溶液中加入在DMF(3.0ml)中的1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.474g，3.3mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(1.1ml，6.5mmol)并搅拌3天。将反应混合物真空浓缩并用制备HPLC纯化(CH3CN/H2O，含有TFA缓冲剂，用C-18硅胶柱)。将合适的流份合并，真空浓缩，溶于水中并冻干，得到标题化合物(0.486g，38%)，为白色固体。D＝+1.4(c 1.0，MeOH)MS(M+H)+＝479+计算值，对于C22H34N6O4S·1.3 TFA·0.7 H2OC，46.21;H，5.78;N，13.14;S，5.01;F，11.59实测值C，46.42;H，5.83;N，12.88;S，4.97;F，11.82实施例33N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(2，2，2-三氟乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐
A.N-1，1-[(二甲基乙氧基)羰基]-4-甲基氨基哌啶将苯甲醛(14.6g，0.138mmol)、4-(氨基甲基)哌啶(14.29g，0.125mmol)和甲苯(250ml)混合并加热回流4.5小时，同时除水。将反应混合物冷却至-25℃，并加入二碳酸二叔丁酯(28.7g，0.131)。将反应混合物加热至室温并再搅拌8小时。向该反应混合物中加入KHSO4水溶液(1.0M，120ml)并搅拌3小时。分出有机层，剩下的水层用乙醚(3×75ml)提取。通过加入NaOH水溶液(1.0M，130ml)使水层成碱性，并用乙醚(3×75ml)提取。将合并的有机提取液用硫酸钠干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，24.4g(9%)，为白色固体。
B.N-[[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将L-脯氨酸甲酯HCl(25.0g，0.151mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(20.28g，0.166mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(31.8g，0.166mmol)和4-甲基吗啉(16.0g，0.159mmol)于0℃加至N-CBZ-D-苯丙氨酸(47.3g，0.158mmol)的DMF(300ml)溶液中。将反应混合物搅拌8小时，同时将反应混合物加热至室温。将反应混合物倒入水(1.2L)中并用乙酸乙酯(3×300ml)提取。将合并的有机提取液用KHSO4(0.25M，2×200ml)、水(1×200ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×200ml)和饱和NaCl(1×200ml)洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，60.9g(98%)，为油状物。MS(M+H)+＝411+。
C.N-[[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酸将NaOH水溶液(1.0N，183ml)于0℃加至B项化合物(57.8g，0.141mol)的MeOH(180ml)溶液中。30分钟后，将反应混合物加热至室温，并再继续搅拌4小时。加入HCl水溶液(1.0N，42ml)，并真空除去有机溶剂。将得到的水层酸化至pH2-3，并用乙酸乙酯(2×300ml)提取。将合并的提取液用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，45.53g(97%)，为白色固体。MS(M+H)+＝397+。
D.N-[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将A项化合物(9.98g，46.57mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(6.26g，51.23mmol)和乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(9.82g，51.23mmol)于0℃加至C项化合物(19.39g，48.90mmol)的DMF(120ml)溶液中。将反应混合物搅拌12小时，同时使反应温度升至室温。将反应混合物倒入水(500ml)中并用乙酸乙酯(3×100ml)提取。将合并的有机提取液用KHSO4(0.25M，2×50ml)、水(1×75ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×75ml)和饱和NaCl(1×50ml)洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，23.4g(85%)，为油状物。MS(M+H)+＝593+。
E.N-[[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将Pd/C(1.50g)加至搅拌的D项化合物(15.00g，25.3mmol)的MeOH(150ml)溶液中，并将反应混合物置于1个大气压的氢气下。搅拌2小时后再加入Pd/C(2.5g)。搅拌8个多小时后反应完毕。将反应混合物过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物，11.41g(91%)，为白色固体。MS(M+H)+＝459+。
F.N-[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(2，2，2-三氟乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺将三氟乙基磺酰氯(0.5ml，4.5mmol)于0℃在氩气下加至E项化合物(1.71g，3.5mmol)和三乙胺(2.5ml，17.9mmol)的氯仿(10ml)溶液中。24小时后，于0℃加入三乙胺(2.0ml，14.3mmol)和三氟乙基磺酰氯(0.5ml，4.5mmol)。除去冰浴，并将反应混合物搅拌6小时。将混合物用0.25M KHSO4水溶液和乙酸乙酯稀释。将两层分开后，有机层依次用0.25M KHSO4水溶液、水、饱和NaHCO3水溶液和水洗涤，硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(1.60g，75%)∶MS(M+H)+＝605+。
G.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(2，2，2-三氟乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将三氟乙酸(3.0ml，38.9mmol)于0℃在氩气下加至F项化合物(1.60g，2.6mmol)的二氯甲烷(4.4ml)溶液中。5.5小时后，将反应混合物真空浓缩，得到相应的TFA盐。将N，N-二异丙基乙胺(0.7ml，4.0mmol)在氩气下加至所述盐(1.3mmol)和1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.311g，2.1mmol)的DMF(1.3ml)溶液中。2天后，加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.150g，1.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.5ml，2.9mmol)。1天后，加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.150g，1.0mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.5ml，2.9mmol)。2天后，将反应混合物真空浓缩并用制备HPLC纯化(CH3CN/H2O，含有TFA缓冲剂，用C-18硅胶柱)。将合适的流份合并，真空浓缩，溶于水中并冻干，得到标题化合物(0.256g，29%)，为白色固体。D＝-56.0(c 0.50，MeOH)MS(M+H)+＝547+计算值，对于C23H33N6O4SF3·1.22 TFA·1.14 H2OC，43.26;H，5.21;N，11.90;S，4.54;F，17.92实测值C，42.82;H，4.87;N，11.48;S，4.98;F，17.52实施例34N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐A.N-[[(叔丁氧基)羰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将脯氨酸甲酯HCl(150mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(22.2g，0.164mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(31.4g，0.164mmol)和4-甲基吗啉(22.6g，0.224mmol)于0℃加至N-BOC-L-丙氨酸(150mmol)的DMF(250ml)溶液中。将反应混合物搅拌12小时，同时将反应温度升至室温。将反应混合物倒入水(750ml)中，并用乙酸乙酯(2×150ml)提取。将合并的有机提取液用KHSO4(0.25M，2×50ml)、水(1×50ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×50ml)和饱和NaCl(1×50ml)洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
B.N-[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将A项化合物(5.2mmol)的三氟乙酸(3ml)溶液于0℃搅拌1.5小时并真空浓缩，得到相应的TFA盐。将该盐溶于氯仿(10ml)中，并于0℃向其中加入三乙胺(2.2ml，15.6mmol)和苄磺酰氯(1.48，7.8mmol)。将反应混合物搅拌至室温过夜。25小时后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(50ml)中，依次用0.25M KHSO4水溶液(2×20ml)、水(1×20ml)饱和NaHCO3水溶液(2×20ml)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发，得到标题化合物。
C.N-[[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酸将NaOH水溶液(1.0N，9.5ml)于0℃加至B项化合物(3.75mmol)的THF(10ml)溶液中，30分钟后将反应混合物加热至室温，并再继续搅拌4小时。真空除去有机溶剂。将水层酸化至pH2-3，并用乙酸乙酯(3×10ml)提取。将合并的提取液用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
D.N-[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺于0℃向C项化合物(3.2mmol)的DMF(15ml)溶液中加入N1-BOC-4-甲基氨基哌啶(3.2mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(0.476g，3.5mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(0.675g，3.5mmol)和4-甲基吗啉直至pH试纸显碱性。将反应混合物搅拌12小时，同时将其加热至室温。将反应混合物倒入0.25M KHSO4水溶液(50ml)中并用乙酸乙酯(2×20ml)提取。将有机层合并并用0.25M KHSO4水溶液(1×30ml)、水(1×25ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×25ml)和水(1×20ml)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
E.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将D项化合物(2.2mmol)的三氟乙酸(10.0ml)溶液于0℃搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩，得到相应的TFA盐。向该盐(2.2mmol)的溶液中加入在DMF(3.0ml)中的1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.474g，3.3mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(1.1ml，6.5mmol)并搅拌3天。将反应混合物真空浓缩并用制备HPLC纯化(CH3CN/H2O，含有TFA缓冲剂，用C-18硅胶柱)。将合适的流份合并，真空浓缩，溶于水中并冻干，得到标题化合物。
实施例35N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐A.N-[[(叔丁氧基)羰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将脯氨酸甲酯HCl(150mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(22.2g，0.164mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(31.4g，0.164mmol)和4-甲基吗啉(22.6g，0.224mmol)于0℃加至N-BOC-甘氨酸(150mmol)的DMF(250ml)溶液中。将反应混合物搅拌12小时，同时将反应温度升至室温。将反应混合物倒入水(750ml)中，并用乙酸乙酯(2×150ml)提取。将合并的有机提取液用KHSO4(0.25M，2×50ml)、水(1×50ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×50ml)和饱和NaCl(1×50ml)洗涤。将有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
B.N-[[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酸甲酯将A项化合物(5.2mmol)的三氟乙酸(3ml)溶液于0℃搅拌1.5小时并真空浓缩，得到相应的TFA盐。将该盐溶于氯仿(10ml)中，并于0℃向其中加入三乙胺(2.2ml，15.6mmol)和苄磺酰氯(1.48，7.8mmol)。将反应混合物搅拌至室温过夜。25小时后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(50ml)中，依次用0.25M KHSO4水溶液(2×20ml)、水(1×20ml)饱和NaHCO3水溶液(2×20ml)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物。
C.N-[[[(苯基甲基)磺酰基]羰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酸将NaOH水溶液(1.0N，9.5ml)于0℃加至B项化合物(3.75mmol)的THF(10ml)溶液中，30分钟后将反应混合物加热至室温，并再继续搅拌4小时。真空除去有机溶剂。将水层酸化至pH2-3，并用乙酸乙酯(3×10ml)提取。将合并的提取液用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
D.N-[[[1-(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酰胺于0℃向C项化合物(3.2mmol)的DMF(15ml)溶液中加入N1-BOC-4-甲基氨基哌啶(3.2mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(0.476g，3.5mmol)、乙基-3-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺HCl(0.675g，3.5mmol)和4-甲基吗啉直至pH试纸显碱性。将反应混合物搅拌12小时，同时将其加热至室温。将反应混合物倒入0.25M KHSO4水溶液(50ml)中并用乙酸乙酯(2×20ml)提取。将有机层合并并用0.25M KHSO4水溶液(1×30ml)、水(1×25ml)、饱和NaHCO3水溶液(2×25ml)和水(1×20ml)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空除去溶剂，得到标题化合物。
E.N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐将D项化合物(2.2mmol)的三氟乙酸(10.0ml)溶液于0℃搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩，得到相应的TFA盐。向该盐(2.2mmol)的溶液中加入在DMF(3.0ml)中的1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(0.474g，3.3mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(1.1ml，6.5mmol)并搅拌3天。将反应混合物真空浓缩并用制备HPLC纯化(CH3CN/H2O，含有TFA缓冲剂，用C-18硅胶柱)。将合适的流份合并，真空浓缩，溶于水中并冻干，得到标题化合物。
按照实施例30至33的方法，可以制得以下各例化合物。
实施例49N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(乙磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-49.2(c 1.08，MeOH)MS(M+H)+＝493+计算值，对于C23H36N6O4S·1.4 TFA·1.0 H2OC，46.23;H，5.92;N，12.54;S，4.78;F，11.90实测值C，46.23;H，6.08;N，12.39;S，4.71;F，11.98实施例50N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(丙磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-47.0(c 1.02，MeOH)MS(M+H)+＝507+计算值，对于C24H38N6O4S·1.15 TFA·1.2 H2OC，47.91;H，6.35;N，12.74;S，4.86;F，9.94实测值C，47.90;H，6.21;N，12.50;S，4.82;F，10.06实施例51
N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝-44.6(c 0.8，MeOH)MS(M+H)+＝555+计算值，对于C28H38N6O4S·1.55 TFA·0.67 H2OC，50.31;H，5.42;N，11.32;S，4.32;F，11.90实测值C，50.31;H，5.69;N，11.24;S，4.26;F，11.97实施例52N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(苯磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(1∶1)盐[α]D＝+10.1(c 1.0，MeOH)MS(M+H)+＝541+计算值，对于C27H36N6O4S·1.3 TFA·0.83 H2OC，50.51;H，5.58;N，11.94;S，4.55;F，10.53实测值C，50.51;H，5.47;N，11.83;S，4.71;F，10.52实施例53N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(1-甲基乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺三氟乙酸(2∶3)盐[α]D＝-43.1(c 1.10，MeOH)MS(M+H)+＝507+计算值，对于C24H38N6O4S·1.5 TFA·1.35 H2OC，46.20;H，6.06;N，11.97;S，4.57;F，12.18实测值C，46.61;H，5.86;N，11.95;S，4.44;F，12.0权利要求
1.具有下式结构的化合物，包括所有的立体异构体，包括它们的药学上可接受的盐 式中n是0、1或2；G是包含环的酰氨基基团；R是氢、羟基烷基、氨基烷基、烷基、环烷基、芳基烷基、链烯基、链炔基、酰氨基烷基、芳基烷氧基烷基，或者是保护的或未保护的氨基酸侧链；R1和R2独立地为氢、低级烷基、环烷基、芳基、羟基、烷氧基、酮基、酮缩硫醇、烷硫基、芳硫基、氨基或烷基氨基，或者R1及R2和与其相连的碳一起形成环烷基、芳基或杂芳基环；R3是烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、喹啉基或四氢喹啉基。
2.如权利要求1中定义的化合物，其中G为下式结构 式中P是0、1或2;Q是单键或 A是芳基或环烷基，或者是环上有4至8个碳的氮杂环烷基或环上有4至8个碳的氮杂杂环烷基，所述环的结构如下 式中X是CH2、O、S或NH;q是0、1、2、3或4，但条件是若X是CH2，则q是0、1、2、3或4;若X是O、S或NH，则q是2，3或4;Y1和Y2独立地为H、低级烷基、卤素或酮基;R4是胍基、脒基或氨甲基，但条件是当A是芳基或环烷基时，R4是胍基、脒基或氨甲基;当A是氮杂环烷基或氮杂杂环烷基时，R4是脒基;若A是氮杂杂环烷基，则在X与在所述环中或所述环外的任何一个N原子之间一定至少有个2-碳链。
3.按权利要求1所定义的化合物，其中A是芳基或环烷基，Q是单键及q是0或1。
4.按权利要求1所定义的化合物，其中A是
5.按权利要求4所定义的化合物，其中X是CH2或NH，且Y1和Y2各自是H。
6.按权利要求4所定义的化合物，其中，G为下式结构 X是CH2;q是0或1;R1和R2各自为H;R3是烷基、芳基烷基或芳基;n是0或1及R是芳烷基或羟基烷基。
7.按权利要求1所定义的化合物，它们是N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺或其盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-3-哌啶基]甲基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺或其盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(2，2，2-三氟乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰基]-4-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-甘氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(乙磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(丙磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(苯基甲基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-(苯磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[[1-(氨基亚氨基甲基)-4-哌啶基]甲基]-1-[N-[(1-甲基乙基)磺酰基]-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(2∶3)盐。
8.具有下式结构的化合物，包括所有的立体异构体，并包括其药学上可接受的盐 式中n是0、1或2;G是下式所示的酰氨基基团 式中m是0、1、2或3，及Y是NH或S;R是氢、羟基烷基、氨基烷基、烷基、环烷基、芳基烷基、链烯基、链炔基、酰氨基烷基、芳基烷氧基烷基，或者是保护的或未保护的氨基酸侧链;R1和R2独立地为氢、低级烷基、环烷基、芳基、羟基、烷氧基、酮基、酮缩硫醇、烷硫基、芳硫基、氨基或烷基氨基，或者R1及R2和与其相连的碳一起形成环烷基、芳基或杂芳基环;及R3是烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、喹啉基或四氢喹啉基;但若R3是烷基，则该烷基具有至少3个碳。
9.具如下结构的按权利要求8所定义的化合物
10.按权利要求9定义的化合物，其中n是1及m是2;R3是2-萘基，具至少3个碳的低级烷基，或苄基;R是羟基烷基或芳烷基;R1是H或烷基;R2是H及Y是-NH-。
11.具如下结构的按权利要求9所定义的化合物
12.按权利要求9所定义的化合物，它们是[1(S)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;[1(S)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[2-[(2-苯磺酰基)氨基]-1-氧代-3-(苯基甲氧基)丙基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;[2R-[1(S＊)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;[2S-[1(R＊)，2α，4β]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[[(1，2，3，4-四氢-3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐;反式-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐半水合物;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐;[2R-[1(S＊)，2α，4β)]-N-[3-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丙基]-1-[4-羟基-3-[(2-萘磺酰基)氨基]-1，2-二氧代丁基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺或其盐，或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-D-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(2R-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐水合物;[2R-[1(S＊)2α，4β]]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-4-甲基-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐水合物;[1(S)]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1，2，3，4-四氢-2-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-3-异喹啉甲酰胺，异构体A，或其盐或其三氟乙酸盐，水合物;[1(S)]-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1，2，3，4-四氢-2-[3-羟基-2-[(2-萘磺酰基)氨基]-1-氧代丙基]-3-异喹啉甲酰胺，异构体B，或其盐或其三氟乙酸盐，水合物;(4S＊)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-羟基-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(4S＊)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲氧基-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-丝氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-谷氨酰胺酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-苏氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-L-别苏氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(S)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[N-(2-萘磺酰基)甘氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(R)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-(甲硫基)-1-[N-(2-萘磺酰基)甘氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[[(2-萘磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-色氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;(2S-反式)-N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-4-甲基-1-[[[(3-甲基-8-喹啉基)磺酰基]氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[[(8-喹啉基磺酰基)氨基]乙酰基]-2-哌啶甲酰胺，或其盐或其三氟乙酸盐;N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(2-萘磺酰基)-D-α-谷氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐;或N-[4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]丁基]-1-[N-(甲磺酰基)-D-苯丙氨酰基]-L-脯氨酰胺，或其盐或其三氟乙酸(1∶1)盐。
13.抑制或预防血栓形成的方法，它包括对需要治疗的病人给予治疗有效量的按权利要求1所定义的化合物。
14.亚磺酰氨基杂环化合物或含亚磺酰氨基杂环化合物的药用组合物在抑制或预防血栓方面的用途，它包括使用按权利要求1或权利要求8所定义的化合物。
全文摘要
本发明提供具有如下所示结构的亚磺酰氨基杂环的凝血酶抑制剂，包括其所有的立体异构体及其盐，式中n、G、R、R
文档编号C07K5/00GK1109468SQ9410373
公开日1995年10月4日 申请日期1994年3月31日 优先权日1994年3月31日
发明者S·D·金波尔, J·达斯, W·F·刘 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司