新的凝血酶抑制剂及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：新的凝血酶抑制剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的凝血酶抑制剂及其制备方法和用于控制疾病的用途。
凝血酶属于丝氨酸蛋白酶类，它作为端基转移酶在血凝链中起主要作用。内源性和外源性血凝链都由凝血酶原经数步放大产生凝血酶。凝血酶将血纤维蛋白原催化裂解为血纤维蛋白，引发血液凝固和血小板凝集，这本身又通过血小板因子3与凝结因子XIII及所有高活性介质的结合促进了凝血酶的形成。
凝血酶的形成和作用是产生白色动脉血栓和红色静脉血栓的关键所在，因而是药物进攻的高效位点。与肝素相比，凝血酶抑制剂不依靠辅助因子，就可同时完全抑制凝血酶在血凝链中的作用和对血小板的作用。它们可预防经皮穿刺冠状动脉腔内成形术后的急性血栓栓塞并使其溶解，并且可作为体外循环(心肺机，血液透析)的抗凝剂。一般说来，它们还可预防血栓形成，如术后血栓形成。
已知合成的精氨酸衍生物通过与蛋白酶的活泼丝氨酸残基作用影响凝血酶活性。已经证实其中N-端基氨基酸是D构型的基于Phe-Pro-Arg的肽尤其有效。据记载，D-Phe-Pro-Arg异丙酯是一种竞争性凝血酶抑制剂(C.Mattson等，Folia Haematol.109(1982)43-51)。
C-端基精氨酸衍生成醛可促进该抑制作用。因此，已公开了大量可与“活泼”丝氨酸的羟基结合生成半缩醛的精氨酸(arginals)(EP 185390，479489，526877，542525；WO 9315756，9318060)。
肽酮、氟化烷基酮的凝血酶抑制活性及酮酯、硼酸衍生物，磷酸酯和α-酮羧酰胺的凝血酶抑制活性也可通过该丝氨酸的相互作用得到解释(EP118280，195212，362002，364344，410411，471651，589741，293881，503203，504064，530167；WO 9207869，9408941)。
DE 3108810和WO 9311152公开了ω-氨基烷基胍二肽。
J.Oleksyszyn等在<药物化学杂志>，37(1994)226-231中叙述了肽4-脒基苯基甘氨酸膦酸二苯酯是不可逆凝血酶抑制剂，但对其它丝氨酸蛋白酶的选择性不够充分。
未公开的EP 601459和WO 94/29336记载了凝血酶抑制剂肽。
本发明涉及式I的化合物及其与生理可耐受酸的盐和其立体异构体
其中的取代基具有下述含义
(a＝2，3，4，5或6，CH2基可被O、S、NH、NC1-4-烷基代替)
(X2＝O，NX1，S；b＝0.1)，
(X3＝H，C1-4-烷基，F，Cl，OH，OCH3)，
(X4＝H，F，Cl，CF3，Br，C1-4-烷基，苯基，苄基，OH，C1-4-烷氧基苯氧基，苯基-C1-4-烷氧基，NO2，-COOH，-COOC1-4-烷基；X5＝H，F，Cl，Br，C1-4-烷基，苯基，苄基，OH，C1-4-烷氧基，苯氧基，苯基-C1-4-烷氧基，-COOH，-COOC1-4-烷基，X6＝H，F，Cl，Br，C1-4-烷基，OH，C1-4-烷氧基，X7＝H，F，Cl，X8＝H，F，Cl，X9＝NH2，OH)，
(X10＝H，C1-4-烷基，OH，OCH3(X11＝H，C1-4-烷基，OH，OCH3)， ，X13-SO2-CH2-CH2-CHNH2-CO-，H2N-CH2-CO-，H2N-CHX13-CO--其中在所有上述A基团中，α-NH或α-NH2基可以是被C1-12烷基，苯基-C1-4-亚烷基，X12OC-C1-6-亚烷基，X12OC-C1-6-烷基羰基，-α-或β-萘基-C1-4-亚烷基，C1-12-烷基羰基，苯基-C1-4-烷基羰基，C1-7-烷氧羰基，苯基-C1-5-烷氧羰基，-α-或β-萘基-C1-4-烷基羰基-，C1-6-烷基氨基羰基或苯基-C1-4-烷基氨基羰基-单取代或双取代的基团以及AX1-NH-CH2-CH2-CO-，X1-NH-CH2-CH2-CH2-CO-X15-(CH2)f-SO2-(f＝0，1，2，3，4，X15＝未取代或被1-3个CH3和/或CH3O基团取代的苯基或者α-或β-萘基，或者是下述基团之一
和A
(X16＝H，F，Cl，Br，CF3，OH，C1-8-烷基，C1-4-烷氧基，X17＝H，OH，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基g＝1，2，3，4，5，6，7，8)
X18-O-CO-C1-4-亚烷基-CO-(X18＝H，C1-4-烷基)，C1-12-烷基-CO-，C1-10-烷基-NH-CO-苯基-C1-4-亚烷基-NH-CO-，α-或β-萘基-CO-或
(h＝2，3或4，CH2基团可被CHOH、NX1、SO基团或者O或S原子替代)
(X18＝H或C1-4-烷基，X19＝H，C1-6-烷基，苯基，苄基，环己基或环己基甲基)R1H或C1-4-烷基R2H或C1-4-烷基R3H，C1-8-烷基，苯基，苯基-C1-4-亚烷基，CH2OH，-CO-X20，-CO-CO-X20，(X20＝H，C1-4-烷氧基，C1-4-烷基，苯基，苯基-C1-4-亚烷基，苯基-C1-4-烷氧基，CF3，C2F5，N-端基连接的天然氨基酸，CH2OH，-CH2-O-C1-4-烷基，NH-(C1-4-亚烷基)-苯基或NH-C1-6-烷基)，m0，1，2或3D在其间位或对位相连有(CH2)m和(NH)n的亚苯基，在其(CH2)m的邻位可被F，Cl，Br，HO-CH2-，OH，NH2，NO2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基或COX21(X21＝H，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，OH，NH2，NH-C1-4-烷基)-O-(CH2)1-3-CO-X21或者-(CH2)1-3-CO-X21取代，在其间位或对位相连有(CH2)m和(NH)n的亚吡啶基，亚嘧啶基，亚吡嗪基或亚哒嗪基，其(CH2)m的邻位可被F，Cl，Br，OH，NH2，C1-4-烷氧基或C1-4-烷基取代，1，4-或1，3-亚环己基，在(CH2)m邻位的一个CH2基可被NH，O，S或SO代替，或者亚哌啶基，其在相对于氮原子的3或4位上连接(CH2)m，并且其中氮原子自身携带C(＝NH)NHR4基团，n0或1，R4H，-CO-C1-20-烷基，-CO-O-C1-20-烷基，OH或NH2。
存在于式I中的烷基基团可以是直链或支链的。
优选的式I化合物其取代基有如下含义
(Y＝H，C1-6-烷基，苯基-C1-4-亚烷基，-α-或β-萘基-CH2-，3，4，-二甲氧基-苯基-CH2-，X12-CO-C1-4-亚烷基，[X12＝OH，C1-4-烷氧基，NH2，C1-4-烷基-NH-，苯基-C1-4-亚烷基-NH-，NX13X14(X13＝C1-6-烷基，X14＝C1-4-烷基或X13＋X14＝-(CH2)d-(d＝4，5，6))]，X12-CO-C1-4-亚烷基-CO-，CH3-CO-，C1-6-烷氧基-CO-，苯基-C1-3-烷氧基-CO-，C1-6-烷基-NH-CO-，
(X4＝H，F，Cl，Br，CF3，C1-4-烷基，OH，OCH3，NO2，苯基，优选H，F，Cl，Br，CH3，叔丁基，OH，OCH3，NO2，X5＝H，F，Cl，Br，CH3，OH，OCH3，苯基，优选H，F，OH，OCH3，苯基，X6＝H，F，Cl，Br，CH3，OH，OCH3，优选H，F，OH，OCH3，X7＝H，F，X8＝H，F)，
(X13＝-CH(CH3)2，-CH2-CH(CH3)2，CH2-C(CH3)3，-C(CH3)3，-CHCH3-CH2-CH3)
R1H，CH3R2HR3H，CH3，CHO，COCF3，COC2F5，CO-CH2OH，CO-CH3，CO-CH2-苯基，CH2OH，R4H，OH，NH2，m0，1，优选的D基团的链段是
在式I中-(CH2)m-D-(NH)n-的优选链段是对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，n＝0而言，
X22＝H，F，Cl，Br，CH2-OH，OH，NH2，NO2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基，X21-CO-，(X21＝OH，NH2，C1-4-烷基-NH-，C1-4-烷氧基)，X21-CO-C1-3-烷氧基，对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，1，n＝0，1而言，
对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，n＝0，1而言，
X23＝H，F，Cl，OH，NH2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基，
其中X23和X24彼此独立且分别是H，F，Cl，OH，NH2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基，
对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，1，n＝0而言，
对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，n＝0而言，
特别优选的式I化合物中取代基有如下含义
Y＝H，C1-4-烷基或X12-CO-C1-2-亚烷基(X12＝OH，NH2，C1-4-烷氧基)X4＝H，F，Cl，CH3，CF3，OCH3，或Br，X5＝H，Cl，CH3或OCH3，OC2H5，X6＝H或OCH3，
R1＝H，R2，R3＝H，对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，n＝0而言，
X22＝H，Cl，Br，OH，NH2，NO2，或C1-4-烷氧基，
X23＝H，Cl，OH，NH2，C1-4-烷氧基或C1-6-烷基，
其中X23，X24彼此独立且分别是H，F，Cl，OH，NH2，C1-4-烷氧基或C1-6-烷基，
对-(CH2)m-D-(NH)n-中m＝0，n＝1而言，
R4H，OH。
在特别优选的化合物中，应当强调如下结合，其中A和B有如上述含义时特别优选
其中，X23和X24各自为H，OH，Cl，NH2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基
例如可举出下列物质1.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-苯乙基2.H-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-苯乙基3.Boc-Phe-Pro-NH-pAmb4.H-Phe-Pro-NH-pAmb5.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb6.Ac-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb7.H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb8.H-(D)-Phe-Pro-N(Me)-pAmb9.Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb10.Z-Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb11.HOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb12.MeOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb13.t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb14.EtOOC-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb15.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb16.H-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb17.Z-(D)-Phe-Pro-(D，L)(4-Am)-PhgOH18.Z-(D)-Phe-Pro-(D，L)(4-Am)-PhgOMe19.H-(D)-Phe-Pro-(D，L)(4-Am)-Phg-OH20.Boc-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-PhgCH2Ph21.H-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-PhgCH2Ph22.H-(D)-Phe-Pro-NH-pAm-[(D，L)-α-Me]-苄基23.Me-(D)-Phe-Pro-(D or L)(4-Am)-Phgψ[CH2-OH]/a24.Me-(D)-Phe-Pro-(D or L)(4-Am)-Phgψ[CH2-OH]/b25.Boc-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb26.H-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb27.Boc-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb28.H-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb29.Boc-(D，L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb30.H-(D，L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb31.H-(D)-Phe(4-OH)-Pro-NH-pAmb32.Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb33.H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb34.Boc-(D，L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb35.H-(D，L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb36.Boc-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb37.H-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb38.Boc-(D，L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb39.H-(D，L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb40.Boc-(D，L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb41.H-(D，L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb42.Z-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb43.H-(D)-Phe(4-tBuO)-Pro-NH-pAmb44.Boc-(D，L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb45.H-(D，L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb46.H-(D，L)-Phe(4-Ph)-Pro-NH-pAmb47.Boc-(D，L)-Phe(4-n-Bu)-Pro-NH-pAmb48.H-(D，L)-Phe(4-n-Bu)-Pro-NH-pAmb49.Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb50.H-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb51.H-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb52.Boc-(D，L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb53.H-(D，L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb54.Boc-(D，L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb55.H-(D，L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb56.H-(D，L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb57.Boc-(D，L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb58.H-(D，L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb59.Boc-(D，L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb60.H-(D，L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb61.Boc-(D，L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb62.H-(D，L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb63.H-(D，L)-Phe(3-Ph)-Pro-NH-pAmb64.Boc-(D，L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb65.H-(D，L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb66.Boc-(D，L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb67.H-(D，L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb68.Boc-(D，L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb69.H-(D，L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb70.Boc-(D，L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb71.H-(D，L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb72.Boc-(D，L)-Phe(2-Meo)-Pro-NH-pAmb73.H-(D，L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb74.Boc-(D，L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb75.H-(D，L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb76.Boc-(D，L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb77.H-(D，L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb78.Boc-(D，L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb79.H-(D，L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb80.Boc-(D，L)-Phe(3，4-(F)2)-Pro-NH-pAmb81.H-(D，L)-Phe(3，4-(F)2)-Pro-NH-pAmb82.Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb83.H-(D，L)-Phe(3，4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb84.Boc-(D，L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb85.H-(D，L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb86.Boc-(D，L)-Phe(3-Cl-4-EtO)-Pro-NH-pAmb87.H-(D，L)-Phe(3-Cl-4-EtO)-Pro-NH-pAmb88.H-(D，L)-Phe(3，4-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb89.Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb90.H-(D，L)-Phe(3，4-(Me)2)-pro-NH-pAmb91.Boc-(D，L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb92.H-(D，L)-Phe(3-Me-4-ipr)-Pro-NH-pAmb93.Boc-(D，L)-Phe(2，3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb94.H-(D，L)-Phe(2，3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb95.Boc-(D，L)-Phe(2，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb96.H-(D，L)-Phe(2，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb97.Boc-(D，L)-Phe(3，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb98.H-(D，L)-Phe(3，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb99.Boc-(D，L)-Phe(3，4，5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb100.H-(D，L)-Phe(3，4，5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb101.Boc-(D，L)-Phe(2，4，6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb102.H-(D，L)-Phe(2，4，6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb103.Boc-(D)-αNal-Pro-NH-pAmb104.H-(D)-αNal-Pro-NH-pAmb105.H-(D)-βNal-Pro-NH-pAmb106.Boc-(D，L)-αNgl-Pro-NH-pAmb107.H-(D，L)-αNgl-Pro-NH-pAmb108.Boc-(D，L)-βNgl-Pro-NH-pAmb109.H-(D，L)-βNgl-Pro-NH-pAmb110.H-(D，L)-1-Tic-Pro-NH-pAmb111.Boc-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmbl12.H-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmb113.1-Icc-Pro-NH-pAmb114.Boc-(D，L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb115.H-(D，L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb116.Boc-(D，L)-2-Tal-Pro-NH-pAmb117.H-(D，L)-2-Tal-Pro-NH-pAmb118.Boc-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb119.H-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb120.Boc-(D，L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb121.H-(D，L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb122.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb123.H-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb124.EtOOC-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb125.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb126.tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb127.Boc-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb128.Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb129.Me-(Z)-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb130.N，N-Me2-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb131.Boc-(D)-Trp(Boc)-Pro-NH-pAmb132.H-(D)-Trp-Pro-NH-pAmb133.Boc-(D，L)-Dpa-Pro-NH-pAmb134.H-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a135.H-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b136.EtOOC-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a137.EtOOC-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b138.HOOC-CH2-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a139.HOOC-CH2-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b14O.Boc-(D or L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a141.Boc-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b142.H-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a143.H-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b144.EtOOC-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a145.EtOOC-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b146.HOOC-CH2-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a147.HOOC-CH2-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b148.H-(D或L)-Dch-Pro-NH-pAmb/a149.H-(D或L)-Dch-Pro-NH-pAmb/b150.Boc-(D)-Val-Pro-NH-pAmb151.H-(D)-Val-Pro-NH-pAmb152.Boc-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb153.H-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb154.Boc-(D)-Gly(α-tBu)-Pro-NH-pAmb155.H-(D)-Gly(α-tBu)-Pro-NH-pAmb156.Boc-(D)-Ala(β-tBu)-Pro-NH-pAmb157.H-(D)-Ala(β-tBu)-Pro-NH-pAmb158.H-(D或L)-Msu-Pro-NH-pAmb/a159.H-(D或L)-Msu-Pro-NH-pAmb/b160.Boc-(环)Leu-Pto-NH-pAmb161.H-(环)Leu-Pro-NH-pAmb162.Boc-Gly-Pro-NH-pAmb163.H-Gly-Pro-NH-pAmbl64.Ph-CH2-CO-Gly-Pro-NH-pAmb165.Ph-CH2-CH2-CO-Gly-Pro-NH-pAmb166.Ph-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb167.β-萘基-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb168.[3，4-(MeO)2-phenyl]-Ch2-Gly-Pro-NH-pAmb169.Ph-CH2-CO-Pro-NH-pAmb170.Ph-CH2-CH2-CO-Pro-NH-pAmb171.Ph-CH2-CH2-CH2-CO-Pro-NH-pAmb172.α-萘基-CO-Pro-NH-pAmb173.β-萘基-CO-Pro-NH-pAmb174.(α-萘基-CH2-CO-Pro-NH-pAmb175.β-萘基-CH2-CO-Pro-NH-pAmb176.β-萘基-SO2-Pro-NH-pAmb177.p-Tol-SO2-Pro-NH-pAmb178.Ph-CH2-CH2-SO2-Pro-NH-pAmb179.H-Asp-Pro-NH-pAmb180.Boc-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb181.H-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb182.Ph-CH2-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb183.Ph-CH2-CH2-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb184.(n-Pr)2CH-CO-Asp-Pro-NH-pAmb185.H-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb186.(n-Pr)2CH-CO-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb187.Ph-CH2-CO-Asp-Pro-NH-pAmb188.Ph-CH2-CH2-CO-Asp-Pro-NH-pAmb189.(n-Pr)2CH-CO-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb190.Z-(D)-Asp(OMe)-Pro-NH-pAmb191.H-(D)-Asp-Pro-NH-pAmb192.Z-(D)-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb193.H-(D)-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb194.Boc-(D)-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb195.H-(D)-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb196.Z-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb197.H-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb198.H-(D)-Glu-Pro-NH-pAmb199.(D)-Ph-CH2-CHOH-CO-Pro-NH-pAmb200.(D)-Man-Pro-NH-pAmb201.Boc-(D)-Phe-Aze-NH-pAmb202.H-(D)-Phe-Aze-NH-pAmb203.Boc-(D)-Phe-(D，L)-Pic-NH-pAmb204.H-(D)-Phe-(D或L)-Pic-NH-pAmb/a205.H-(D)-Phe-(D或L)-Pic-NH-pAmb/b206.Boc-(D)-Phe-(D，L/反式)-Pic(4-Me)-NH-pAmb207.H-(D)-Phe-(D，L/反式)-Pic(4-Me)-NH-pAmb208.Boc-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb209.H-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb210.Boc-(D)-Phe-Hyp(O-tBu)-NH-pAmb211.H-(D)-Phe-Hyp-NH-pAmb212.Boc-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb213.H-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb214.Boc-(D)-Phe-Val-NH-pAmb215.H-(D)-Phe-Val-NH-pAmb216.Boc-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb217.H-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb218.H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-am)-pico219.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico220.H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico221.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico222.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-Am)-pico223.HOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-pico224.HOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico225.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico226.H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico227.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico228.H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico229.tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico230.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico231.MeOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico232.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico233.H-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico234.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico235.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym236.(D)-Man-Pro-NH-4-(1-Am)-pip237.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pHamb238.H-(D)-Phe-Pro-NH-pHamb239.Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb240.H-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb241.Boc-(D)-Phe(4-Meo)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb242.H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb243.HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb244.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb245.H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb246.HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb247.Boc-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb248.H-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb249.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPrO)-pAmb250.H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPrO)-pAmb251.Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb252.H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb253.H-(D)-Phe-Pro-(D，L)(4-Am)-PhgOMe254.Boc-(D，L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb255.BOC-(D，L)-1-Tic-Pro-NH-pAmb256.H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico式I化合物可以以其自身或其与生理学可接受的酸形成的盐形式存在。这些酸的实例是盐酸，柠檬酸，酒石酸，乳酸，磷酸，甲磺酸，乙酸，甲酸，马来酸，富马酸，丙二酸，琥珀酸，羟基琥珀酸，硫酸，戊二酸，天冬氨酸，丙酮酸，苯甲酸，糖醛酸，草酸，抗坏血酸和N-乙酰甘氨酸。
这些新化合物可用于治疗和预防凝血酶起作用的所有疾病。特别是以下疾病血栓栓塞疾病诸如心肌梗塞，外周动脉栓塞疾病，深度静脉栓塞，肺栓塞和中风。它们另外可用来预防动脉被机械方法切开后或病后的再闭塞。
而且这些物质还适合通过直接抑制血管舒缓素而防止形成凝血酶。
它们的特殊优点是口服给药后也有作用。
本发明还涉及下式II的物质，它是用于制备式I化合物有用的中间体
其中R1，R2和R3具有通式I中规定的含义，并且R5是H、C1-4-烷氧基-CO-或苯基-C1-3-烷氧基-CO-，R6是在C(R2，R3)间位或对位的氰基、脒基或胍基，和p是1、2或3。
在说明书和实施例中所用的缩写具有下列含义Ala＝丙氨酸Am＝脒基(m或p)Amb＝(间位或对位)脒基苄基Asp＝天冬氨酸Aze＝铃兰氨酸Boc＝叔丁基氧基羰基Bzl＝苄基Cbz＝苄氧基羰基Cha＝环己基丙氨酸Chg＝环己基甘氨酸DCC＝二环己基碳化二亚胺Dch＝二环己基丙氨酸DCM＝二氯甲烷DIPEA＝二异丙基乙胺DMF＝二甲基甲酰胺Dpa＝二苯基丙氨酸Dpg＝二苯基甘氨酸EDC＝N’-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳化二亚胺Glu＝谷氨酸Gly＝甘氨酸pHamb＝对-羟基脒基苄基；(Ham＝羟基脒基)HOBT＝羟基苯并三唑HoSu＝羟基琥珀酰亚胺Hyp＝羟基脯氨酸Icc＝异喹啉羧酸iPr＝异丙基Leu＝亮氨酸Man＝扁桃酸(Me)Val＝N-甲基颉氨酸Msu＝蛋氨酸砜(α或β)Nal＝(α-或β-)萘基丙氨酸NBS＝N-溴代丁二酰亚胺Ngl＝萘基甘氨酸Ph＝苯基Phe＝苯基丙氨酸Phg＝苯基甘氨酸2-Phi＝2-全氢化吲哚羧酸Pic＝2-哌啶酸(哌啶-2-羧酸)pico＝吡啶甲基[例如3-pico
pip哌啶基甲基[例如4-pip
pro＝脯氨酸pym嘧啶基-甲基[例如5-pym
PyBrop＝溴-三-吡咯基-磷鎓六氟磷酸盐Pyr＝3，4-吡咯啉-2-羧酸RT＝室温Tal＝噻吩基丙氨酸TBAB＝溴化四丁基铵tBu＝叔丁基TEA＝三乙基胺TEACl＝氯化四乙基铵TFA＝三氟乙酸Tgl＝噻吩基甘氨酸Tia＝噻唑烷-4-羧酸Tic＝四氢异喹啉羧酸Tol＝甲苯基Trp＝色氨酸Val＝缬 氨酸Z＝苄氧基羰基(＝Cbz)实施例A.一般步骤A.I.去除和加入保护基团A.I.a.保护基团通过Gross和Meienhofer描述的方法(E.Gross，J.
Meienhofer“The Peptides；Analysis，Synthesis，Biology”；第1版，第3卷，Academic Press，New York(1981))消除。A.I.b.通过在标准条件下氢解或采用HF通过在Stewart，J.M.和Young，J.D.
在《固相多肽合成》“Solid Phase Peptide Synthesis”，第2版；PierceChemical Company 1984)描述的方法消除Cbz保护基团。A.I.c.如果被保护的分子只含有Boc保护基团，它们用HCl/二恶烷或HCl/二氯甲烷或CF3COOH/二氯甲烷在标准条件下消除(参见Bodansky，M和Bodansky，A.《多肽合成实践》“The Practice ofPeptide Synthesis”，Springer-Verlag，1984).A.II.酯基水解的一般方法A.II.a.在0℃将1毫摩尔酯加入到THF(4毫升/毫摩尔)中。再加入1.2当量的LiOH(1M溶液)，并将混合物在室温下搅拌一夜。水合作用产生相应的酸。A.II.b.在0℃将1毫摩尔酯加入到MeOH(4毫升/毫摩尔)中。再加入1.2当量的LiOH(1M溶液)，并将混合物在室温下搅拌一夜。水合作用产生相应的酸。A.II.c.将1毫摩尔酯在2毫升2N HCl中在室温下搅拌一夜。将产物进行水合作用。A.III.酰胺化的一般方法A.III.1.通过如下衍生于Vieweg等(H.Vieweg等人的Pharmazie39(1984)226)的方法由腈制备脒、N-羟基脒和N-氨基脒将1当量的腈溶解在吡啶/三乙基胺(10/1；约20-30ml/g物质)中。再将溶液用H2S气体饱和，在室温下于密闭容器中放置一夜。接着将混合物搅拌入含有氢氯酸的冰水中，吸滤出生成的沉淀，用大量的水洗涤并干燥。
将此物质溶解在丙酮(约20-30ml/g物质)中。加入MeI(1ml/g物质)并将溶液放置一夜。通过加入二乙基醚沉淀出S-甲基硫代亚酰胺氢碘化物，并用MeOH/二乙基醚再沉淀来纯化。
将此盐加入无水MeOH(约30ml/g物质)中。加入乙酸铵(用羟基乙酸铵或氯化物合成N-羟基脒，采用乙酸_或氯化_合成N-氨基脒)，将混合物在室温下搅拌一夜。过滤悬浮液，再在减压下去除部分溶剂，通过加入醚沉淀出脒氢碘化物，并进行吸滤。通过RP-HPLC纯化粗产物。A.III.2酰胺化也可通过Pinner反应进行(D.Neilson在Patai，《脒和亚氨化物化学》“The Chemistry of Amidines and Imidates”385-489，John Wiley&Sons，New York，1975；R.Roger，D.NeilsonChem.Rev.61(1961)179；还可参见实施例2)A.III.3另一种可能进行的酰胺化包括采用羟胺盐酸盐将腈基团转变成羟基脒基团，并且进一步用H2/阮内镍(或H2/Pd-C)氢化生成脒。
将10毫摩尔腈衍生物溶解在100毫升MeOH中，加入3当量的羟胺盐酸盐和4.5当量的TEA之后，在室温下搅拌直至转变完全。接着将反应混合物浓缩，并溶解在DCM中。用水洗涤有机相(pH5-6)，用Na2SO4干燥并浓缩。
将残余物溶解在100毫升5％浓度的HOAc的甲醇溶液中，加入阮内镍(也可是Pd/C10％)之后，在氢气气氛中氢化。前体转变完全之后，滤出催化剂，并浓缩滤液。按照需要通过在硅胶上的柱色谱或反相HPLC来纯化产物。A.IV.胺的胍化的一般方法A.IV.1.游离胍基化合物的制备游离的胍基化合物是由相应的胺作为前体通过Miller等或Mosher等的方法(A.E.Miller，J.J.Bischoff，《合成》Synthesis(1986)777；K.Kim，Y.T.Lin，H.S.Mosher，《四面体通讯》Tetrahedron Letters29(1988)3183)合成。A.Iv.1.a.将1当量的K2CO3和1当量的胺溶解在10毫升水中。分份加入1当量的氨基亚胺基甲磺酸同时剧烈搅拌。将混合物搅拌24小时并过滤。滤出的固体是胍。A.Iv.1.b.将等摩尔量的胺和氨基亚胺基甲磺酸在室温下在无水MeOH(1ml/mmol)中搅拌直至形成澄清溶液。将溶剂在减压下去除，粗产物用RP-HPLC纯化。A.IV.2.烷氧基羰基胍的制备生成烷氧基羰基胍的反应通过下列文献记载的方法进行1.R.J.Bergeron，J.S.McManis，《有机化学杂志》J.Org.Chem.52(1987)17002.R.Dubey，S.Abuzar，S.Sharma，R.K.Chatterjee，《药物化学杂志》J.Med.Chem.28(1985)17483.S.Shawkat，S.Sharma，《合成》Synthesis(1992)6644.A.S.Vendrini，P.Lucietto，G.Fossati，C.Giordani，《四面体通讯》Tatrahedron Lett.33(1992)65415.Z.P.Tian，P.Edwards，R.W.Roeske《肽蛋白研究国际杂志》Int.J.Pept.
Prot.Res.40(1192)119A.V.酯化反应一般方法A.V.1.将1当量的羧酸在室温下与1.1当量N’-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳化二亚胺盐酸盐、2当量醇和催化量的二甲氨基吡啶在二氯甲烷中一起搅拌一夜。再将此溶液用二氯甲烷稀释，用20％NaHSO4溶液提取，干燥和在减压下浓缩。A.V.2.将1当量的羧酸与适量的醇和催化量的对-甲苯磺酸在氯仿(或甲苯)中共沸。转变完全(TLC检测)后，将此溶液用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤、干燥并蒸发。B.一般合成途径这些化合物可以有几种途径制备。
1.由被适当保护的A衍生物W-A-OH开始，可以通过已知方法依次偶连处于适当的被保护形式的链段H-B-COOW’(W’＝烷基)和H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4(参见方案I)。按照肽化学中通常方式，在单个偶连步骤之间消除用于依次偶连的反应中心上的保护基团。所有链段可以买到或通过在文献中公开的方法或类似方法合成。
2.这种合成也可以以相反的顺序通过将H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4(R4是合适的保护基团)与被适当保护的W-B-COOH衍生物，再与A衍生物W-A-OH偶连进行(参见方案II)。
3.将胍、脒、N-羟基脒和N-氨基脒官能团引入活性物中的方法包括与链段H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4一起与被保护的形式(被质子化的或提供适当保护基团)参与活性物质的制备和随后消除保护，或者在链段偶连之后，在W-A-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-NH2阶段通过胍化或在W-A-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN阶段通过酰胺化、N-羟基酰胺化或N-氨基酰胺化反应制备。
方案II
W是常规N-端基保护基团(优选Boc或Cbz)或羟基保护基团之一，并且W’是甲基、乙基、叔丁基或苄基。E是-CN或-(NH)n-C(NH)NHR4，其中R4是保护基团。对合成胍(n＝1)来说，E也可以是-NH-R4或NH2。对合成N-脒基哌啶(n＝0)来说，E也可以是R4或H。
关于肽化学的文献1.E.Gross，J.Meienhofer，《多肽分析、合成和生物》“The Peptides；Analysis，Synthesis，Biology”；第1版Vol.1；Academic Press，New York19792.E.Gross，J.Meienhofer，《多肽分析、合成和生物》第1版Vol.2；Academic Press，New York 19803.E.Gross，J.Meienhofer，《多肽分析、合成和生物》第1版Vol.3；Academic Press，New York 19814.M.Deffer，E.Jaeger，P.Stelzel，P.Thamm，G.Wendenberg，E.Wunsch inHouben-Weyl，《化学方法》“Methoden der[lacuna]Chemie”，第4版，Vol.XV/1，E.Wunsch编辑，Georg Thieme Verlag Stuttgart，1974
5.M.Deffer，E.Jaeger，P.Stelzel，P.Thamm，G.Wendenberg，E.Wunsch inHouben-Weyl，《化学方法》第4版，Vol.XV/2，E.Wunsch编辑，GeorgThieme Verlag Stuttgart，19746.Bodansky，M.&Bodansky，A.《多肽合成实践》“The Practice of PeptideSynthesis”，Springer-Verlag，1984B.I.根据式(I)的链段(W-)A-OH和H-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN(R1、R2、R3＝H、烷基)的键合和方案II盐酸盐HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4或HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN最初是在标准肽偶连条件下(参见Bodansky，M.&Bodansky，A.《多肽合成实践》“The Practice of PeptideSynthesis”，Springer-Verlag，1984)由W-B-CO-OH(W＝保护基团，优选Boc或Cbz)和胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)n-C(NH)NHR4或N-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN、随后消除保护基团制备。此盐酸盐再转变成下列物质(与通式相应)B.I.a.W-A-OH＝被保护的氨基酸(与通式相应)1当量的被保护的氨基酸W-A-OH和1.1当量的盐酸盐HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN(与通式I相应)通过标准肽偶连方法反应生成所需产物。如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。存在的保护基团接着通过常规方法消除。B.I.b.A-OH＝N-酰基-AA(AA是在通式I中时在A中所提及的氨基酸，酰基＝HOOC-C1-6-烷基羰基、C1-12-烷基羰基、苯基-C1-4-烷基羰基、α-或β-萘基-C1-4-烷基羰基)B.I.b.1.最初，被保护的氨基酸W-A-OH如B.I.a.所述被偶连到所述的盐酸盐上(R4必须是常规保护基团)。在氨基酸上的N-端基保护基团被去除(其必须能够消除与R4正交的保护基团)，并且氨基酸与羧酸酰基OH(与通式相应)在标准肽偶连条件下反应生成所需产物。为了释放脒、N-氨基脒、N-羟基脒或胍基团，后者(如果需要)在标准条件下(参见A.I.)消除。如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。B.I.b.2.最初，N-端基氨基酸H-A-OCH3在N-端基与羧酸酰基OH(与通式I相应)在标准肽偶连条件下反应生成N-酰化氨基酸酯，接着水解酯基团。接着将酰化的氨基酸如B.I.b.1所述与盐酸盐HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN在标准条件下偶连。如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。最后，消除保护基团。B.I.c.A-OH＝N-酰基-AA(AA是在通式I中在A中所提及的氨基酸，烷基＝C1-12-烷基、苯基-C1-4-亚烷基、HOOC-C1-6-亚烷基、α-或β-萘基-C1-4-亚烷基)一个合成途径(合成途径1)是采用烷基化链段A-OH(或A-B-CO-OH)，随后依次偶连链段H-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4(或H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4)或H-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN(或H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN)。另一个途径(合成途径2)是合成链段H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN，随后进行N-端基烷基化。有必要对存在的脒或胍基进行适当的保护。
如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。合成途径2B.I.c.1将1毫摩尔H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN溶解在MeOH(10毫升)中。加入TEACl(1毫摩尔)、NaBH3CN(0.7毫摩尔)和RCHO(1.05毫摩尔)之后，将混合物搅拌一夜。在减压下去除溶剂，将残余物溶解在乙酸乙酯中。用水(2次)和盐水(1次)洗涤有机相，并用Na2SO4干燥。将除去了溶剂后的粗产物用RP-HPLC进行纯化。
如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。B.I.c.2将1毫摩尔的H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-AA-B-CO(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN连同K2CO3(2.5当量)一起加入到乙腈中。
加入烷基化试剂之后，将混合物在60℃搅拌直至前体完成转变。冷却和水合作用之后，通过RP-HPLC纯化产物。
如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。合成途径1通过G.Iwasaki等的方法(G.Iwasaki等人，《药物化学通讯》Chem.Pharm.Bull37(1989)280和《化学通报》Chem.Lett.(1988)1691)制备烷基化的链段A-OH(A＝N-烷基-AA)。下述方法基于此文献方法B.I.c.3.1.5当量的H-AA-OCH3或H-AA-B-COOCH3与1当量的烷基化试剂和2当量的碳酸铵一起在硝基甲烷/水中在60℃搅拌4天。将混合物进行水合作用，产物用色谱纯化。N-烷基氨基用适当的保护基团保护，再将酯官能团水解，将该产物如上所述进行B.I.a.反应。B.I.c.4.N-烷基-AA-OCH3或者N-烷基-AA-B-COOCH3链段也可由H-AA-OCH3或H-AA-B-COOCH3和醛类通过还原胺化反应制备。B.I.d.A-OH＝N-取代的氨基羰基-AA(AA为在通式中在A中所述的氨基酸；取代的氨基羰基＝C1-6-烷基氨基羰基、苯基-C1-4-烷基氨基羰基)1当量的H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-AA-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN与各种异氰酸酯在标准条件下(Arnold等人.Chem.Rev.57(1957)47)反应生成相应的脲衍生物。
如果E＝CN，腈官能团根据A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。B.I.e.A＝X15-(CH2)f-SO2(X15和f是通式I中在A的情况下所述的符号)将1.1当量的盐酸盐HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或HClxH-B-CO-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN连同1.5当量的二异丙基乙胺、催化量的二甲氨基吡啶和1当量的取代的磺酰氯在二氯甲烷中反应。在水合作用之后，通过RP-HPLC纯化粗产物。
如果E＝CN，腈官能团按照A.III.1-3转变成脒或羟基脒基团。B.II.胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN与链段A-B-CO-OH的键合(与通式I和方案I相应)。
链段A-B-CO-OH是通过在B.I.中的一般方法合成。胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4再与链段A-B-CO-OH如下所述进行偶连B.II.a.R1＝H，R2、R3＝H、C1-4-烷基、苯基、苯基-C1-4-亚烷基，n＝0B.II.a.1.链段A-B-CO-OH(如果需要可被保护)在标准肽偶连条件下与胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC (NH)NHR4(R4＝-CO-C1-20-烷基、-CO-O-C1-20
-烷基)反应。水合作用后，通过RP-HPLC纯化粗产物。R4＝H的物质可以通过常规的去保护方法制得。B.II.a.2.链段A-B-COOH(如果需要可被保护)在标准肽偶连条件下与胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-CN(R1、R2、R3、D、m与通式相应)反应。水合作用后，通过RP-HPLC纯化粗产物。将生成的腈如A.III.所述转变为脒(R4＝H)、N-羟基脒(R4＝OH)或N-氨基脒(R4＝NH2)。B.II.b.R1＝H；R2＝H、C1-4-烷基，R3＝H、C1-4-烷基、苯基、苯基-C1-4-亚烷基，n＝1B.II.b.1链段A-B-CO-OH(如果需要可被保护)在标准肽偶连条件下与胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4(R4＝-CO-C1-20-烷基、-CO-O-C1-20-烷基)反应。水合作用后，通过RP-HPLC纯化粗产物。R4＝H的物质可以通过常规的去保护方法制得。B.II.b.2链段A-B-COOH(如果需要可被保护)在标准肽偶连条件下与胺H-N(R1)-C(R2R3)-(CH2)m-D-NHW(W是与已存在的保护基团正交的保护基团)反应。水合作用后，通过RP-HPLC纯化粗产物。生成的被保护的胺通过常规去保护方法去保护，并如A.IV.所述转变成胍(R4＝H)。B.II.c.R1＝C1-4-烷基这些物质如B.II.b.所述制备。采用偶连试剂新戊酰氯，PyBrop(Castro等人，《四面体通讯》Tetrahedron Lett.31(1990)669；Castro etal.Tetrahedron Lett.32(1991)1967；E.Frerot等人，《四面体通讯》.Tetrahedron 47(1990)259)或者BOPCl(M.J.O.Anteunis《肽蛋白研究国际杂志》Int.J.Pept.Prot.Res.29(1987)574)进行偶连反应。B.II.d.R3＝-CO-X20或-CO-CO-X20(与通式相应)。B.II.d.1 R3＝-CO-X20(X20＝OH、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基)链段A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4或A-B-CO-N(R1)-C(R2(COOH)-CH2)m-D-CN通过标准肽偶连方法合成(参照B.II.a.1.)。对于X20＝烷氧基、芳氧基或芳烷氧基的产品，C-端基酸通过标准酯化反应转变成相应的酯(参见A.VI.)。如果D仍是腈官能团，按照AIII1-3其就转变成脒基或羟基脒基基团。B.II.d.2.R3＝-CO-X20(X20＝烷基、芳基、芳烷基、CF3、C2F5)链段A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4如B.II.d.1.所述进行制备。接着在Dakin-West反应中在标准条件下(W.Steglich，G.Hofle Angew.Chem.internat.Ed.8(1969)981；W.Steglich，G.Hofle Chem.Ber.102(1969)883)制备COX20官能团。对这个反应来说，R4必须是烷氧基羰基(优选Boc或Cbz)。此外，A-B-CO-N(R1)-CR2-COOH-(CH2)m-D-CN也可用于Dakin-West反应。在这种情况下，腈官能团接着按照A.III.1-3转变成脒基或羟基脒基基团。
Dakin-West反应一般的试验方法如下1当量的N-端基被保护的三肽与2.5当量的三乙基胺、5当量的酐([X20-C(O)-O-(O)C-X20]，与通式I相应)和0.1当量的二甲氨基吡啶在50-60℃一同搅拌直至观察不到CO2放出。再将混合物与饱和Na2CO3溶液在60℃搅拌2小时。混合物在乙酸乙酯和饱和NaHCO溶液之间分配，并且将有机相用饱和NaHCO3溶液(2次)和20％NaHSO4溶液提取，用Na2SO4干燥并蒸发。粗产物用RP-HPLC纯化。B.II.d.3.R3＝-CO-X20(X20＝天然氨基酸)链段A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4如B.II.d.1.所述进行制备。对于接下来的反应R4必须是烷氧基羰基(优选Boc或Cbz)。此外，A-B-CO-N(R1)-CR2(COOH)-(CH2)m-D-CN也可用于下面的反应。这些链段接着在标准肽偶连条件下与C-端基被保护的氨基酸反应。再通过去除保护基团释放所需的产物(如在A.I.和A.II.)，并且腈官能团按照A.III.1-3转变成脒基或羟基脒基基团。B.II.d.4.R3＝-CO-CO-X20
连接这些物质的步骤如PCT申请WO94/08941所述。按照这种方法，开始，链段W-N(R1)-CR2(CO-CO-X20)-D-(NH)n-C(NH)NHR4(W是合适的保护基团，并且必须与R4正交)如下进行合成N-端基被保护的氨基酸W-NH-CR2(COOH)-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4(R4必须是与W正交的保护基团)开始转变成氰醇W-NH-C(U)(R2)-CH(OH)-CN(其中U＝-(CH2)m-D-(NH)nC(NH)NHR4)。
接着腈官能团转变成羧基，在适当条件下将羧基酯化(参见A.V.)，N-端基氨基保护基团W被消除，并且生成的胺被偶连到链段A-B-CO-OH上。a.为了制备X20＝C1-4-烷氧基或苯基-C1-4-烷氧基的产物，通过酯转移反应加上基团X20。b.为了制备X20＝氨基酸的产物，进行C-端基酯的水解和氨基酸的偶连。c.为了制备X20＝H、C1-4-烷基、苯基、苯基-C1-4-亚烷基、-CF3或-C2F5的产物，C-端基酯最初的水解之后接着就转变成Weinreb酰胺，再与相应于X20的亲核试剂反应。
产生的链段A-B-CO-NR1-C(U)(R2)-CH(OH)-C(O)-X20在Swern条件下被氧化成酮酰胺。最后仍存在的保护基团在标准条件下被消除。C.前体的制备C.1.Boc-(D)PheOSu的制备1当量的Boc-(D)Phe-OH与1.05当量的羟基丁二酰亚胺和1.05当量的二环己基碳化二亚胺在乙腈(2.5毫升/毫摩尔)中在室温下搅拌一夜。过滤悬浮液，滤液在旋转式蒸发器中浓缩。残余物中含有几乎达理论产率的产物。C.2.Boc-(D，L)Dpa-OH的制备
Boc-(D，L)Dpa-OH是通过Kakkar等的方法(L.Cheng，C.A.Goodwin，M.F.Schully，V.V.Kakkar，《药物化学杂志》J.Med.Chem.35(1992)3364)制备。C.3.Boc-(D，L)Dch-OH的制备Boc-(D，L)Dpa-OH(1毫摩尔)在12毫升MeOH连同催化量的5％Rh/Al2O3在5巴压力下一起被氢化。过滤并在减压下去除溶剂可制得理论产率的产物。C.4.Boc-1-(D，L)Tic-OH的制备Boc-1(D，L)Tic-OH通过R.T.Shuman等的方法(R.T.Shuman，《药物化学杂志》J.Med.Chem.36(1993)314)制备。C.5.Cbz-(D)PhePro-OSu的制备i.将30g的Cbz-(D)PheOH、11.54g羟基丁二酰亚胺、20.68g的二环己基碳化二亚胺和300毫升二甲氧基乙烷在室温下搅拌一夜。过滤悬浮液，浓缩滤液，残余物溶解在200毫升的乙腈中。滤出沉淀出来的二环己基脲，浓缩滤液。剩余40g丁二酰亚胺酯(白色固体)。ii.将40g Cbz-(D)PheOSu、17.31g脯氨酸、12.63gNaHCO3、225ml水和225ml二甲氧基乙烷在室温下搅拌一夜(放出气体)。接着在减压下去除二甲氧基乙烷并用1N HCl将剩余的水溶液调节到pH2。用二氯甲烷提取分离的油。合并的二氯甲烷提取液用饱和盐水洗涤。用Na2SO4干燥并蒸发。剩余39.7g Cbz-(D)PheProOH(白色固体)。iii.将39.7g Cbz-(D)PheProOH、11.53g羟基丁二酰亚胺、20.66g二环己基碳化二亚胺和400ml二甲氧基乙烷在室温下搅拌一夜。第二天，滤出二环己基脲，浓缩滤液，将残余物溶解在300ml乙腈中。滤出进一步沉淀的二环己基脲，减压下浓缩滤液。剩余48.92g羟基丁二酰亚胺酯。C.6 Boc-保护的苯基丙氨酸衍生物的制备当买不到氨基酸H-A-OH和Boc-A-OH时，它们可以采用与已知文献方法近似的方法制备(参考Houben-Weyl，volume E 16d/part 1 pages406 et seq.)。
经常用于丙氨酸衍生物的前体是二苯甲酮亚胺乙酸乙酯、乙酰氨基丙二酸二乙酯和异腈乙酸乙酯。例如可采用下列方法1当量的二苯基甘氨亚胺、3当量的K2CO3和适量的苄基溴化物(或氯化物或碘化物)在乙腈中沸腾一夜。冷却后，过滤混合物并浓缩滤液。将残余物在1N HCl中搅拌直至亚胺裂解完全。接着，用乙酸乙酯提取水相，用Na2CO3碱化，并用乙酸乙酯提取。合并的有机提取物用Na2SO4干燥并蒸发。在标准条件下使残余物、即合适的苄基丙氨酸衍生物带上N-端基保护基团(优选Boc或Cbz)。C.7 Boc-保护的甘氨酸衍生物的制备各种甘氨酸的衍生物例如是由异腈乙酸乙酯和合适的酮制备的(参见H.-J.Pr_torius，J.Flossdorf，M.-R.Kula Chem.Ber.195，108，3079)。
Boc-环庚基甘氨酸以与文献类似的途径合成(O.P.Godl等人，《四面体通讯》Tetrahedron Lett.1993，34，953)。
Boc-(3-Ph)-Pro-OH通过与J.Y.L.Chung等(J.Y.L.Chunget al.J.Org.Chem.1990，55，270.)类似的方法合成。
1，2，3，4-四氢化萘基甘氨酸由1，2-二氢萘制备，1，2-二氢萘最初用HBr转变成1-四氢萘基溴化物(与《药物化学杂志》J.Med.Chem.1994，37，1586的途径类似)。此溴化物接着与乙酰氨基丙二酸二乙酯反应并且通过水解裂解，产生的α-氨基酸在标准条件下转变成Boc-保护形式。C.8 Boc-(D)-(α-甲基)-Cha-OH的制备Boc-(D)-(α-甲基)-Cha-OH是通过(D)-(α-甲基)-Phe-OH的氢化、并且接着加入Boc保护基团制备。合成α-取代的氨基酸的其它可能途径是由酮开始的Bucherer合成和α-氨基酸的α-烷基化反应。C.9.羟基乙酸衍生物的制备羟基乙酸衍生物是通过类似于S.Bajusz(WO93/18060)的方法或者由相应的乙酸甲酯衍生物采用Davis’试剂通过α-羟基化反应(F.A.Davis，L.C.Vishwakarma，J.M.Billmers《有机化学杂志》J.Org.Chem.1984，49，3241)制备。C.10.p-(2-氨基乙基)苄腈如EP 445796所述制备C.11.对-氰基苄基胺C.11.a.将200g4-氰基苄基溴化物(1.02摩尔)、700ml甲苯、200g叠氮化钠(3.07摩尔)、32.9gTBAB和700ml水在室温下搅拌一夜，分离两相，再次用水洗涤甲苯相。将溶剂的体积在减压下减至1/5。C.11.b.将267.6g三苯基膦(1.02摩尔)加入到10℃的500ml四氢呋喃中。
将溶解在165ml四氢呋喃中的叠氮化物缓慢滴加到此溶液中(放出氮气)。加入完成后，缓慢加入27.6ml水(1.53摩尔)，将反应混合物在室温下搅拌48小时。将溶液在旋转式蒸发器中浓缩，并将残余物溶解在冷的3N HCl(11)中。将沉淀的固体吸滤出来，用甲苯洗涤滤液直至完全去除三苯基膦氧化物。酸性水相用Na2CO3(固体)调节到pH＝9，滤出沉淀的固体，用二乙基醚提取滤液。将固体溶解在二乙基醚中，并连同醚提取物一起干燥。
将醚的体积减小，通过通入气态HCl沉淀出盐酸盐。滤出盐，用二乙基醚洗涤，并在空气中干燥(盐在高真空下升华)。产率137.6gC.11.c.对-氰基苄基胺的制备也可以由对-氰基苄基溴化物经过邻苯二甲酰亚胺、随后用水合肼裂解以良好的产率制备。
经过乌洛托品盐的合成同样是适用的(W.Walter etal.，Ann.1962，660，60)。C.12.间-氰基苄基胺如文献中所记载制备(《药物》Pharmazie 1978，33，15)C.13.(D，L)-1-(4-氰基苯基)-乙胺C.13.a.N-(对-氰基苄基)二苯甲酮亚胺将270g(2.0摩尔)无水K2CO3加入到150g(0.8摩尔)的97％纯二苯甲酮亚胺和144.8g(0.74摩尔)的对-氰基苄基溴化物在450ml乙腈的溶液中，将混合物在室温下搅拌6小时。将无机盐吸滤出来后，通过蒸馏基本上除去溶剂，残余物中加入300ml水，用乙酸乙酯数次提取混合物。用水洗涤有机相(两次)，用Na2SO4干燥，蒸发至干。用醚浸提产生180g的白色固体，熔点为101-102℃。C.13.b.1-(4-氰基苯基)乙胺将20.7g(0.07摩尔)的N-(对-氰基苄基)二苯甲酮亚胺滴加入到-70℃的由8.15g(0.08摩尔)二异丙基胺和48.3ml(0.08摩尔)浓度为15％的丁基锂己烷溶液制备的二异丙基胺化锂在100ml无水四氢呋喃中的溶液中，将混合物搅拌15分钟。接着滴加9.94g(0.07摩尔)的甲基碘，将反应混合物的温度升至室温。加入100ml水之后，用醚数次提取混合物，醚相用浓度为5％的柠檬酸溶液、浓度为5％的NaHCO3溶液和水洗涤，用Na2SO4干燥，并将醚蒸出。残余物溶解在150ml四氢呋喃中，加入100ml 1N的HCl，将混合物在室温下搅拌一夜。将四氢呋喃在减压下从混合物中蒸出，剩下的酸相用醚提取数次以去除二苯甲酮，接着用K2CO3水溶液使酸相变成碱性，同时在冰中冷却，用二氯甲烷提取油相。提取物用K2CO3干燥。
将二氯甲烷汽提之后，剩余9.7g(95％)的黄色油，其无需纯化用于下面的步骤。C.14.4-氨基甲基-3-甲氧基苄腈C.14.a.3-硝基-4-甲基苄腈399g(2.56摩尔)的p-苄基腈在90分钟之间加入到升-10℃的发烟硝酸中。加入1小时之后，将混合物倾入2.5l的冰/水中，这样就生成固体沉淀，从吸滤漏斗上取出，用水洗涤直至pH为中性。产物的产率是363g(88％)。1H-NMR(CDCl3；δ以ppm计)8.3(d，1H)；7.8(dd，1H)；7.5(dd，1H)；2.7(s，3H)C.14.b.3-氨基-4-甲基苄腈将120g 3-硝基-4-甲基苄腈悬浮在1.2升EtOH中，在存在7gPd/C(10％)的情况下用50l氢在室温下氢化。在Celite上除去催化剂之后，汽提溶剂生成95g的纯产物(97％)。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.1(dd，1H)；6.90(d，1H)；6.85(dd，1H)；5.35(s，2H，NH2)；2.15(s，3H)C.14.c.3-羟基-4-甲基苄腈将49.2g(0.72摩尔)的NaNO2在217ml水中的溶液在30分钟之间滴加到在0-5℃的1.8升6N HCl中的85g(0.72摩尔)3-氨基-4-甲基苄腈中。将混合物继续在0-5℃再搅拌30分钟，再在沸点搅拌1小时。溶液冷却之后，可以用乙酸乙酯提取产物，并用冰冷的5NNaOH使其成为酚盐的形式。水相用6N HCl酸化到pH3，用乙酸乙酯提取产物。制得41g(43％)的酚。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)10.3(s，OH)；7.25(dd，1H)；7.15(d，1H)；7.1(dd，1H)；2.20(s，3H)C.14.d.3-甲氧基-4-甲基苄腈将溶解在30ml DMF中的15g(0.11摩尔)3-羟基-4-甲基苄腈滴加到0.11摩尔的NaH和30ml的DMF的悬浮液中，并搅拌到没有氢气放出为止。再滴加10.6ml(0.17摩尔)的甲基碘，在室温下搅拌混合物1小时。将此溶液倾入冰水中，用7∶1醚/乙酸乙酯提取产物。
汽提溶剂之后，产品开始缓慢结晶。制得产物14.8g(89％)。1H-NMR(CDCl3；δ以ppm计)7.2(m，2H)；7.02(s，1H)；3.85(s，3H)；2.25(s，3H)C.14.e.4-溴甲基-3-甲氧基苄腈将14.7g(0.1摩尔)的3-甲氧基-4-甲基苄腈溶解在210ml的1，2-二氯乙烷中，将其中的19.1g(0.11摩尔)在1小时之间在82℃存在催化量AIBN情况下用NBS溴化，并且在加入完全之后，在82℃再搅拌30分钟。加入正庚烷之后，取出沉淀的丁二酰亚胺，汽提溶剂。
产物除了含有少量的前体之外，还含有痕量相应的亚苄基二溴。1H
-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.60(dd，1H)；7.50(d，1H)；7.40(dd，1H)；4.68(s，2H)；3.96(s，3H)C.14.f.4-邻苯二甲酰亚氨甲基-3-甲氧基苄腈将溶解在125ml DMF中的24.4g(108摩尔)4-溴甲基-3-甲氧基苄腈和20.0g邻苯二甲酰亚胺钾在室温下搅拌24小时，再在50℃搅拌1小时。将混合物倾入水中，这样产物以固体形式沉淀。制得产物21.5g(68％)。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.9(m，4H)；7.5(d，1H)；7.35-7.25(m，2H)；7.78(s，2H)；3.92(s，3H)C.14.g.4-氨基甲基-3-甲氧基苄腈将溶解在290ml THF中的21.2g(73毫摩尔)4-邻苯二甲酰亚氨甲基-3-甲氧基苄腈加入到10.6ml水合肼中，在室温下搅拌20小时。再滴加180ml 2N的HCl，并且在1.5小时转化，将溶剂全部汽提。
残余物溶解在MTBE中，用1N HCl提取，用2N NaOH将pH调节到9-10并用DCM提取。制得产物8.0g(68％)。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.55(dd，1H)；7.40(dd，1H)；7.37(d，1H)；3.85(s，3H)；3.70(s，2H)；2.5-1.6(NH2)。C.15.4-氨基甲基-3-异丙氧基苄腈C.15.a.3-异丙氧基-4-甲基-苄腈将7.0g 3-羟基-4-甲基苄腈(52.6毫摩尔)用57.8mol的NaH在100ml DMF中去质子化，并在0℃加入7.4ml2-溴丙烷。45分钟之后，将温度升至50℃，并连续搅拌5小时。将反应混合物倾入水中，用醚提取产物。产物采用硅胶柱色谱法纯化(流动相二氯甲烷/10％庚烷)。制得6.3g(68％)产物；熔点60-61℃。C.15.b.4-溴甲基-3-异丙氧基苄腈将6.1g 3-异丙氧基-4-甲基-苄腈(33.4毫摩尔)用如在实施例(C.14.e.)中的NBS和AIBN溴化。以几乎理论产率制得产物。
1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.65-7.30(3H，芳香H)；4.85(1H，CH)；4.63(2H，CH2)；1.40-1.25(6H，2xCH3)C.15.c.4-氨基甲基-3-异丙氧基苄腈(盐酸盐)
将8.8g溴化物(i)(33.4毫摩尔)溶解在100ml MeOH中，并在40℃缓慢滴加到150ml的被氨饱和的MeOH中。将溶剂汽提，产物溶解在二氯甲烷中，用1N氢氧化钠溶液洗涤，用HCl的醚溶液使其以盐酸盐的形式沉淀。制得2.6g产物。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)8.6(3H，NH3+)；7.65-7.40(3H，芳香H)，4.80(1H，CH)；4.00(2H，CH2)；1.4-1.3(6H，2xCH3)C.16.4-氨基甲基-3-氯苄腈C.16.a.4-溴甲基-3-氯苄腈如在实施例(C.14.e.)中用NBS和AIBN溴化3-氯-4-甲基苄腈。
1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)8.10和7.85(3H，芳香H)，4.80(2H，CH2)C.16.b.4-氨基甲基-3-氯苄腈将10.0g溴化物如在实施例(C.14.f.)中与邻苯二甲酰亚胺钾反应。制得9.6g邻苯二甲酰亚氨甲基-3-氯苄腈，如在实施例(C.14.g.)中用水合肼裂解。通过用二氯甲烷从用氢氧化钠溶液将pH调节到9-19的水相中提取，得到游离胺(4.0g)。
1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)7.95-7.78(3H，芳香H)，3.85(2H，CH2)，2.1(宽谱，2H，NH2)D.实施例实施例1Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-苯乙基将10毫摩尔氯甲酸异丁基酯在2分钟过程中加入到10毫摩尔Boc-(D)-Phe-OH和11毫摩尔的N-甲基吗啉在-15℃10ml DMF中的溶液中，接着搅拌10分钟后，加入10毫摩尔对-氰基苄胺和11毫摩尔N-甲基吗啉在3ml DMF中的溶液。在-15℃搅拌3小时之后，TLC检测(DCM/MeOH，9/1)表明没有检测出起始化合物。
为了分离，将反应混合物倾入200ml水中，这样就分离出了油，稍后被固化，压碎后吸滤出来。将仍然潮湿的残余物溶解在250ml乙酸乙酯和50ml醚的混合物中，依次用5％浓度的柠檬酸水溶液、碳酸氢盐和饱和盐水溶液洗涤。用Na2SO4干燥后通过减压蒸馏去除溶剂，将残余物与正己烷混合，接着进行吸滤。从50ml醚乙酸酯中的再结晶，得到7.4毫摩尔TLC-纯产物，将其通过如在A.III.1的H2S方法转变成脒氢碘化物。
制得黄色结晶；熔点158-165℃，FAB-MS508(M+H+)。实施例2H-(D)-Phe-Pro-NH-(4-Am)-2-苯乙基如A.I.c.将由实施例1制备的Boc基团消除。在这种情况下采用的溶剂混合物是1∶1二氯甲烷/乙酸乙酯。制得白色晶体形式的二盐酸盐；熔点203-206℃(分解)；FAB-MS408(M+H+)。实施例3Boc-(L)-Phe-Pro-NH-pAmb如B.I.由Boc-(L)-Phe-OH和H-Pro-对-氰基苄酰胺xHCl制备此化合物，如A.III.1再将这种腈转变成脒。用这种途径制得的脒氢碘化物在乙酸酯离子交换器(IRA 420)上转变成脒的乙酸盐。1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)8.4(m，1H，NH)；7.75(d，2H，Ar-H)；7.45(d，2H，Ar-H)；7.2(m，5H，Ar-H)；7.18/7.02(2d，1H，NH)；4.48-4.18(m，4H，CH/2-α-H)；3.6(m，2H，Pro)；3.0-2.7(m，2H，CH-Ph)；2.18-1.8(m，4H，Pro)；1.3-1.2(2s，9H，Boc)MS494(M+H+)；394(-Boc)；mp142℃实施例4H-(L)-Phe-Pro-NH-pAmb如在A.I.c.通过消去实施例3的Boc制备此化合物。制得的二盐酸盐通过往在柱色谱的硅胶上加入乙酸转变成二乙酸盐；熔点为69℃；FAB-MS394(M+H+)实施例5Boc-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
在2分钟内将2.0g(14.6毫摩尔)的氯甲酸异丁基酯加入到5.1g(14.2毫摩尔)的Boc-D-Phe-Pro-OH和1.53g(15.2毫摩尔)的N-甲基吗啉在-15℃15ml DMF中的溶液中，再将混合物搅拌10分钟，接着加入1.9g(14.2毫摩尔)的对-氰基苄基胺和1.53g的N-甲基吗啉在3ml DMF中的溶液。混合物在-15℃搅拌3小时后，TLC检测(CH2Cl2/MeOH，9/1)表明检测不到起始化合物。
为了分离，将反应混合物倾入200ml水中，这样就分离出了油，稍后固化，压碎后吸滤。将仍然潮湿的残余物溶解在250ml乙酸乙酯和50ml醚的混合物中，依次用5％浓度的柠檬酸水溶液、碳酸氢盐和饱和盐水溶液洗涤。用Na2SO4干燥后通过减压蒸馏去除溶剂，将残余物与正己烷混合，接着吸滤。从50ml乙酸乙酯中重结晶，生成5.6gTLC-纯Boc-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄基酰胺；熔点156-157℃。
制备硫代酰胺将4.1g上述化合物和4ml三乙基胺溶解在40ml在0℃被H2S饱和的吡啶中，置于室温一夜。TLC检测(CH2Cl2/MeOH，9/1)表明向硫代酰胺的转变完全。为了分离，在减压下将绝大部分吡啶蒸出，残余物溶解在250ml乙酸乙酯中，溶液用盐水、5％浓度的柠檬酸和NaHCO3溶液洗涤。干燥并蒸馏去除溶剂，制得4.1g纯结晶状硫代酰胺。
制备脒将硫代酰胺溶解在150ml丙酮中，加入7ml甲基碘之后，置于室温一夜。将溶剂汽提，接着将无定型残余物与无水醚搅拌，接着干燥。将S-甲基硫代酰胺的甲基酯氢碘化物溶解在50ml乙醇中，加入15ml 10％浓度的乙酸铵溶液，并将混合物在60℃加热3小时。为了分离，将溶剂汽提，将残余物溶解在100mlCH2Cl2中，滤去不溶物，接着将CH2Cl2蒸出。用乙酸乙酯/二乙基醚混合物浸提去除溶解在其中的杂质。残留混合的碘化物/乙酸盐溶解在丙酮/水(3/2)中，采用IRA乙酸酯离子交换器转变成纯的乙酸盐。将溶液蒸发至干，并将残余物冻干。3.8gTLC-纯(CH2Cl2/MeOH/50％冰醋酸，20/5/1)Boc-D-Phe-Pro-NH-pAmb以乙酸盐的形式分离，熔点195-200℃(分解)。实施例6Ac-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb
10.4g(0.05摩尔)Ac-D-Phe-OH、6.3g(0.055摩尔)N-羟基丁二酰亚胺和11.4g(0.055摩尔)二环己基碳化二亚胺溶解在150ml乙腈中，在室温下搅拌一夜。将形成的沉淀滤出，蒸出溶剂，在减压下干燥残余物，并且其无需纯化可用于下面的反应。
13.3g(0.05摩尔)的(4-氰基苄基)脯氨酰胺盐酸盐(参见实施例10)溶解在100ml二氯甲烷中，并且在0℃依次加入15ml三乙基胺和上述Ac-D-Phe-O-丁二酰亚胺在70ml二氯甲烷中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌一夜，依次用水、5％浓度的柠檬酸、5％浓度的NaHCO3和氯化钠溶液洗涤。干燥并通过蒸馏去除溶剂之后，将残余物在硅胶酸(洗脱液CH2Cl2/MeOH，50/2)上纯化，随后如在实施例5中转变成脒。
乙酸盐熔点220-224℃(分解)，FAB-MS436(M+H+)实施例7H-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb4.9g(10毫摩尔)根据实施例5制备的化合物溶解在100ml氯仿和100ml乙酸乙酯混合物中，并在-15℃用HCl气体饱和，并排除湿气。1小时后，TLC(CH2Cl2/MeOH/50％冰醋酸，20/5/1)表明检不出Boc化合物。
绝大多数的过量HCl气体通过在-15℃通入氮气去除，在此过程中分离出微细结晶二盐酸盐。在为使沉淀完全加入50ml醚之后，吸滤出沉淀，并用(1/1)乙酸乙酯/醚混合物洗涤。将残余物溶解在水中，用活性炭处理并冻干。制得白色晶体3.7g(理论值的95％)的二盐酸盐，熔点为215℃(分解)；FAB-MS394(MH+)。实施例8H-(D)-Phe-Pro-N(Me)-pAmb如实施例5通过Boc-(D)-Phe-Pro-OH和N-甲基-4-氰基苄基胺反应制备此化合物。如在A.I.c.中所述Boc基团最后被消除。制得无定型固体形式的二盐酸盐；FAB-MS408(M+H+)实施例9Me-(D)-Phe-Pro-N(Me)-pAmb
将4.0g下述化合物(实施例10的)溶解在25ml的EtOH中，加入1.55g 32％浓度的HCl和0.6g 10％Pd/C，并将混合物氢化。1小时后反应完全(根据TLC二氯甲烷/MeOH/50％浓度的HOAc；35/15/5)。通过吸滤取出催化剂之后，蒸发溶剂，残余物用100ml乙酸乙酯转变成白色粉末，溶解于水之后，冻干。分离出3.1g二盐酸盐，它在100℃熔化，在215℃以上分解。实施例10Z-Me-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb(4-氰基苄基)-脯氨酰基酰胺盐酸盐将276g BocPro-O丁二酰亚胺(0.88摩尔)在0℃加入到的2l二氯甲烷中。往此溶液中依次加入163.9g 4-氰基苄基胺盐酸盐(0.97摩尔)和230ml二异丙基乙胺(1.34摩尔)。将此悬浮液在融冰浴中搅拌48小时，然后过滤。将滤液用20％浓度的NaSO4溶液(4次)、饱和Na2HCO3溶液(3次)和饱和盐水(2次)提取，干燥并在旋转式蒸发器中浓缩。剩余299g产物，在从甲基叔丁基醚中重结晶之后，其在124-125℃熔化。
将299g Boc-保护的化合物溶解在1升二乙基醚中。加入HCl的醚溶液(HCl过量)，将混合物搅拌一夜。滤出沉淀的盐，用二乙基醚洗涤，并在减压下干燥。粗产物用EtOH重结晶。产率200g；熔点209-213℃(分解)。Z-Me-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺3.1g(0.01摩尔)Z-Me-(D)-Phe-OH和1.49g(0.011摩尔)羟基苯并三唑溶解在50ml DMF中，并在0℃加入2.1g(0.01摩尔)二环己基碳化二亚胺。30分钟之后，加入2.7g(0.01摩尔) (4-氰基苄基)脯氨酰基酰胺盐酸盐和2.2ml N-甲基吗啉。将反应混合物在室温下搅拌一夜，滤出沉淀的脲，将溶剂在减压下蒸出。将残余物溶解在100ml乙酸乙酯中，并依次用水、5％浓度的柠檬酸溶液、5％浓度的NaHCO3溶液和盐水溶液洗涤。干燥并通过蒸馏去除溶剂之后，剩余4.7g(理论值的90％)粘性油，并可用于下面的反应。通过Pinner反应的酰胺化将12.3g乙酰氯滴加到0℃的8.9g无水EtOH在25ml二氯甲烷中的溶液中，并将混合物搅拌40分钟。接着在0℃，滴加4.7g上述物质在30ml无水二氯甲烷中的溶液。将反应混合物在0℃放置4天。将溶液在减压下浓缩，残余物用100ml二氯甲烷稀释，将此溶液在冰冷15％浓度的K2CO3溶液中振荡。干燥并通过蒸馏除去溶剂，产生粗亚胺醚碱，将其溶解在30mlMeOH中并加入0.8g乙酸铵。将溶液在室温放置2天。
通过过滤除去溶剂之后，将残余物在硅胶柱(二氯甲烷/MeOH/50％浓度的HOAc；40/10/2.5)上纯化。蒸发后的洗脱液溶解在甲苯中，并在旋转式蒸发器中再次浓缩。将残余物溶解在水中，用活性炭处理，最后冻干。剩余4.1g(理论值的76％)的白色晶体，其在83℃熔结，熔点为178-184℃。实施例11HOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb将2.4g的t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb乙酸盐(由实施例13制备)在80ml无水DCM和15ml醚的HCl溶液中搅拌一夜。将溶剂在减压下汽提，将残余物通过与2∶1 DCM/丙酮搅拌而提取，并且滤出。制得1.6g以盐酸盐或二盐酸盐或这两种盐混合物形式的白色固体状产物。熔点210-220℃。实施例12MeOOC-CH2-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb将由实施例11制备的化合物0.5g与2ml醚中的HCl、3ml DCM和3ml甲醇在室温下搅拌30小时。浓缩溶剂，将残余物通过与醚一同搅拌几次来提取。制得以盐酸盐或二盐酸盐或这两种盐混合物形式的产物0.5g。熔点104-120℃。实施例13t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmba)H-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺将5.6g Boc-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺(由实施例5制备)如A.I.c.进行裂解。制得4.6g(95％)白色晶体状的产物盐酸盐。b)t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺将6.19g H-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺(15毫摩尔)与0.98g溴乙酸叔丁基酯(5毫摩尔)和0.63g碳酸铵一起在35ml水和8ml硝基甲烷的混合物中在50℃加热2小时。再将混合物用乙酸乙酯提取，有机相用0.1N氢氯酸洗涤几次，水相用DCM提取，合并的有机相用MgSO4干燥。溶剂被汽提之后，用醚中的HCl将产物以盐酸盐形式沉淀。制得2.6g(98％)的盐酸盐。过量的H-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺通过用DCM在pH10提取水相来回收。c)t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-对-氰基苄酰胺将2.6g上述盐酸盐(4.9毫摩尔)与1.2g(Boc)2O(5.5毫摩尔)和1.87mlDIPEA(11毫摩尔)在95ml的无水DCM中在室温下搅拌一夜。浓缩溶剂，将残余物溶解在醚中，并先用0.1N氢氯酸、再用水洗涤，溶剂用MgSO4干燥，再在减压下汽提。在通过将残余物与己烷一起搅拌提取之后，制得2.8g白色固体产物。d)t-BuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Phe-Pro-NH-pAmb如A.III.1.将腈官能团转变成脒官能团，总产率为96％。
采用IRA乙酸盐离子交换器将氢碘化物转变成乙酸盐；熔点116-121℃。实施例14EtOOC-(D)-Pbe-Pro-NH-pAmb此化合物通过N-(乙氧基羰基)-(D)-苯基丙氨酸(有机化学杂志，1980，45，4519)与(4-氰基苄基)脯氨酰基酰胺盐酸盐(由实施例10制备)反应，再形成脒(如在实施例5)来制备。制得乙酸盐白色晶体；熔点105-107℃；FAB-MS466(M+H+)。实施例15Boc-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb此化合物从Boc-(D)-Phe-Pro-OH用间-氰基苄基胺制备(如实施例5)。制得白色晶体形式的乙酸盐；熔点130-133℃。实施例16H-(D)-Phe-Pro-NH-mAmb
如A.I.c.从实施例15中消除Boc基团。二盐酸盐的白色晶体在155-160℃熔化；FAB-MS394(M+H+)。实施例17Z-(D)-Phe-Pro-(D，L)-(4-Am)-PhgOHa)将39.7g(100.1毫摩尔)Z-(D)-Phe-Pro-OH、11.53g(100.1毫摩尔)HOSu和20.66g(100.1毫摩尔)DCC在400ml二甲氧基乙烷中室温下搅拌18小时。接着将固体滤出，浓缩滤液，将残余物溶解在乙腈中。
将再沉淀的固体滤出，将有机相在减压下蒸发至干。粗产率48.9g Z-(D)-Phe-Pro-O丁二酰亚胺。b)将24.53g H-Phg(4-CN)-OEtxHCl、34.9ml DIPEA和41.9g Z-(D)-Phe-Pro-O丁二酰亚胺溶解在200ml DMF中，并在室温下搅拌18小时。在减压下除去DMF，将剩余的残余物溶解在DCM中。用1N HCl提取有机相，用NaSO4干燥，在减压下浓缩。剩余54.04g的Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OEt。c)将54.04g的Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OEt溶解在340ml的THF/EtOH/水(3∶1∶1)中，加入3.05g LiOH之后，在室温下搅拌18小时。接着将反应混合物在减压下浓缩，将剩余的水溶液酸化至pH2，并用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取物用饱和的NaCl溶液洗涤，用NaSO4干燥，在旋转式蒸发器中蒸发至干。粗产率40.94g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH。d)将2.78g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH、18.9ml吡啶和8.7mlTEA在反应烧瓶中混合，并用H2S气体饱和。将此溶液在室温放置18小时。接着将反应混合物倾入2l冰水中，并将水相用1N HCl调节到pH为3。滤出沉淀的产物，并溶解在乙酸乙酯中，用NaSO4干燥溶液。在减压下除去乙酸乙酯后，将残余物与20ml丙酮和3.5mlMel混合，并在室温下搅拌18小时。在减压下去除挥发成分，将粗硫代甲基亚胺氢碘化物在8ml MeOH和8ml甲醇中的乙酸铵溶液(10％浓度)搅拌18小时。接着浓缩反应混合物，将残余物溶解在DCM中，滤出沉淀的固体。浓缩滤液生成3.75g粗产物。其通过反相HPLC色谱法纯化。产率1.5g。1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)8.4-8.0(2m，1H，NH)；7.7-7.4(m，4H，Ar-H)；7.3-7.1(m，10H，Ar-H)；7.0(sb，1H，NH)；5.2-4.8(m，3H，OCH2/α-Phg)；4.6-4.2(m，2H，α-Pro/α-Phe)；3.6-3.2(2H，δ-Pro)；3.0-2.6(m，2H，CH2-Ph)；2.2-1.6(m，4H，α/β-Pro)FAB-MS572(M+H+)；熔点155-158℃实施例18z-(D)-Phe-Pro-(D，L)-(4-Am)-Phg-Omea)将5.14g无水MeOH和6.16ml乙酰氯加入到0℃的14ml DCM中。接着往此溶液中加入在10ml DCM中的2.78g Z-(D)-Phe-Pro-NH-Phg(4-CN)-OH，并将其置于室温48小时。将反应混合物浓缩，将残余物溶解在乙酸乙酯中，并用冷的K2CO3溶液(5％浓度)洗涤。有机相用NaSO4干燥之后，将溶剂在旋转式蒸发器中去除，将粗亚胺甲基醚置于6.6ml MeOH和6.5ml甲醇中的乙酸铵溶液(10％浓度)18小时。
溶液浓缩生成2.4g粗产物。其通过反相HPLC色谱法纯化。
1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)9.6-9.2(b，N-H)；8.75/8.5(2d，1H，NH)；7.8(m，2H，Ar-H)；7.6(m，2H，Ar-H)；7.35-7.2(m，10H，Ar-H)；7.05(sb，1H，NH)；5.6(2d，2H，OCH2)；5.0-4.2(3m，4H，α-Pro/α-Phe/α-Phg)；3.6(2s，3H，OCH3)；3.5-3.2(2H，δ-Pro)；3.0-2.6(m，2H，CH2-Ph)；2.2-1.6(m，4H，β/γ-Pro)FAB-MS586(M+H+)；熔点129-131℃(盐酸盐)。实施例19H-(D)-Phe-Pro-(D，L)-(4-Am)-Phg-OH通过从实施例17中消除Cbz制备此化合物。
1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)9.0(b，NH)；8.7/8.4/8.05(3d，1H，NH)；7.8-7.0(m，9H，Ar-H)；5.1/4.9(d，1H，α-Phg)；4.45-4.0(m，2H，α-Pro/α-Phe)；3.8-3.0(m，2H，δ-Pro)；3.0-2.7(m，2H，CH2-Ph)；2.2-1.4(m，4H，β/γ-Pro)FAB-MS438(M+H+)；熔点149-150℃(二盐酸盐)。实施例20Boc-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-Phg-CH2Pha)N-(二苯基亚甲基)-4-氰基苄基胺在室温将33.73g(0.2摩尔)4-氰基苄基胺和36.25g(0.2摩尔)二苯甲酮亚胺溶解在540ml DCM中，并搅拌一夜。接着将反应混合物用2x90ml水洗涤，用Na2SO4干燥，在旋转式蒸发器中去除溶剂。剩余55.59g(93.7％)粗产物。从550ml异丙醇中重结晶，得到97.67g(80.4％)纯产物。1H-NMR(CDCl3；δ以ppm计)7.7-7.15(m，9H，Ar-H)；4.65(s，2H，CH2-N)b)N-(二苯基亚甲基)-α-(β-苯基乙酰基)-4-氰基苄基胺将63.3毫摩尔LDA加入-30℃的45ml THF中。接着缓慢滴加在75mlTHF中的15g(50.61毫摩尔)N-(二苯基亚甲基)-4-氰基苄基胺溶液。在-30℃另外搅拌10分钟之后，在-78℃缓慢加入8.6g(55.7毫摩尔)酰氯(溶解在7.5ml的THF中)。在将反应混合物搅拌18小时(反应物温度可以升至室温一夜)之后，将其冷却至-20℃，加入3.6mlHOAc和17.25ml水。反应混合物到达室温后，在减压下去除THF，将残余物溶解在醚中，用饱和的NaCl溶液洗涤有机相并干燥，醚在旋转式蒸发器中去除。剩余26.18g粗产物，其无需进一步纯化用于下面的步骤。c)α-(β-苯基乙酰基)-4-氰基苄基胺将26.18g合成的粗酮在250ml 0.25N的HCl中室温下搅拌一夜。接着将反应混合物用DCM提取，将水相冻干。经过反相HPLC分离之后，剩余2.52g α-(β-苯基乙酰基)-4-氰基苄基胺。1H-NMR(DMSO-d6；δ以ppm计)9.0(s，3H，NH3)；8.0/7.75(2d，4H)；7.25(m，3H)；7.0(dd，2H)；5.7(s，1H，NCH)；3.9/3.6(2d，Ph-CH2-)；FAB-MS(M+)250d)2.51g(6.92毫摩尔)Boc-D-Phe-Pro-OH加入-20℃的40ml无水DCM中。
接着将0.80ml N-甲基吗啉和0.90ml(6.92毫摩尔)氯甲酸异丁基酯加入到此溶液中，并将其在-20℃搅拌20分钟。另外加入0.80ml甲基吗啉和2.52g(6.92毫摩尔)α，(β-苯基乙酰基)-4-氰基苄基胺之后，将反应混合物另外搅拌1小时。将反应混合物用50ml DCM稀释，并用1N HCl(3x40ml)、5％浓度的NaHCO3溶液(2x40ml)和饱和NaCl溶液(1x40ml)洗涤有机溶液。将此溶液干燥和浓缩之后，剩余3.97g粗产物。其通过柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化。产率3.43g。e)将3.43g(5.77毫摩尔)Boc-(D)-Phe-Pro-Phg(4-CN)-CH2-PhxHOAc溶解在21.9ml吡啶和9.85ml TEA中。将此溶液用H2S在室温下饱和并搅拌一夜。接着用氮气尽量除去H2S，并将此溶液倾入5％浓度的柠檬酸中。用乙酸乙酯几次提取水相。合并的有机相用饱和NaCl溶液洗涤，用Na2SO4干燥之后，在旋转式蒸发器中浓缩。粗产率4.13g。f)将4.13g粗硫代酰胺与23.3ml丙酮和4.05ml Mel一同搅拌18小时。将反应物溶液在旋转式蒸发器中浓缩。将残余物溶解在9.1ml无水MeOH和9.1ml无水NH4OAc溶液(在MeOH中浓度10％)中，并搅拌18小时。
之后，将反应混合物蒸发至干，将残余物通过反相HPLC色谱(乙腈/水)纯化。产率680mg(乙酸盐)。
1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)9.4/9.2/8.8/8.6(4d，1H，N-H)；7.9-7.5(m，4H，Ar-H)；7.3-7.0(m，11H，Ar-H/NH)；6.0/5.7(2m，1H，α-Phg)；4.4-2.6(m，8H)；2.2-1.6(m，4H，β/γ-Pro)；1.3-1.2(2sb，9H，Boc)MS612(M+H+)，512(-Boc)，365，161，120实施例21H-(D)-Phe-Pro-(4-Am)-Phg-CH2Ph通过从实施例20中消除Boc(HCl/二噁烷)制备此化合物。1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)9.5/9.4(2d，1H，NH)；9.4/9.2(2sb，3H，N-H)；7.8(d，2H，ar-H)；7.6(d，2H，Ar-H)；7.4-7.0(m，10H，Ar-H)；5.8/5.6(2d，1H，α-Phg)；4.35(m，2H，α-Phe/α-Pro)；4.1/3.9(4d，2H，CH2-Ph)；3.7(m，2H，CH2)；3.2/3.0(2m，2H，CH2)；1.8-1.6(2m，4H，β/γ-Pro)MS512(M+H+)，393，252，161(二盐酸盐)实施例22H-(D)-Phe-Pro-NH-pAm-[(D，L)-α-Me]-苄基(a)N-(对-氰基苄基)二苯甲酮亚胺将270g(2.0摩尔)无水K2CO3加入到150g(0.8摩尔)97％纯二苯甲酮亚胺和144.8g(0.74摩尔)对-氰基苄基溴化物在450ml乙腈的溶液中，并将混合物在室温下搅拌6小时。通过吸滤去除有机盐之后，通过蒸馏将溶剂基本上完全去除，将残余物与300ml水混合，并用乙酸乙酯几次提取。有机相用水洗涤两次，用Na2SO4干，并蒸发至干燥。用醚浸提产生180g白色晶体，熔点101-102℃。(b)1-(4-氰基苯基)乙胺将20.7g(0.07毫摩尔)N-(对-氰基苄基)二苯甲酮亚胺滴加到-70℃的由8.15g(0.08摩尔)二异丙基胺和48.3ml(0.08摩尔)15％浓度的丁基锂的己烷溶液制备的二异丙基胺基锂在100ml无水四氢呋喃中的溶液中，并将混合物搅拌15分钟。再滴加9.94g(0.07摩尔)甲基碘，反应混合物的温度升至室温。加入100ml水并用醚提取几次之后，醚相用5％浓度的柠檬酸溶液、5％浓度的NaHCO3溶液和水洗涤，用Na2SO4干燥，并将醚蒸出。将残余物溶解在150ml四氢呋喃中，加入100ml 1N的HCl，将混合物在室温下搅拌一夜。四氢呋喃在减压下从溶液中蒸出，剩余的酸相用醚提取几次以除去二苯甲酮，再在用冰冷却的同时用K2CO3水溶液将酸相调为碱性，油性物用二氯甲烷提取。提取物用K2CO3干燥，将二氯甲烷汽提之后，剩余9.7g(95％)黄色油，无需进一步纯化用在下一个步骤。(c)Boc-D-苯基丙酰胺-脯氨酸(D，L)-α-甲基-4-氰基苄酰胺将16.2g二异丙基胺和22ml(30毫摩尔)的丙烷膦酸酐(在乙酸乙酯中浓度为50％的溶液)滴加到3.65g(25毫摩尔)1-(4-氰基苯基)乙胺和9.1g(25毫摩尔)的Boc-D-Phe-Pro-OH在150ml-5℃的二氯甲烷中的溶液中。将混合物搅拌2小时，此间温度从-5℃升至20℃。用水、5％浓度的碳酸氢钠和5％浓度的柠檬酸溶液洗涤有机相，用Na2SO4干，蒸发至干。制得浅黄色晶状残余物，无需纯化用在下一步。(d)(D)-苯基丙酰胺-脯氨酸(D，L)-α-甲基-4-脒基苄酰胺
将4.1g上述化合物和4ml三乙基胺溶解在40ml在0℃被H2S饱和的吡啶中，并将其置于室温下一夜。TLC检测(CH2Cl2/MeOH，9/1)表明转变成硫代酰胺完全。为了分离，通过在减压下蒸馏基本上去除吡啶，将残余物溶解在250ml乙酸乙酯中，用盐水、5％浓度的柠檬酸和NaHCO3溶液洗涤。干燥和通过蒸馏去除溶剂，生成4.1g纯晶状硫代酰胺。
将硫代酰胺溶解在150ml丙酮中，加入7ml甲基碘之后，在室温下放置6小时。将溶剂汽提之后，通过与无水醚一同搅拌提取无定型残余物，接着干燥。将S-甲基硫代亚胺甲基酯氢碘化物溶解在50ml乙醇中，加入15ml 10％浓度的乙酸铵溶液，将混合物在60℃加热3小时。为了分离，将溶剂汽提，残余物溶解在100ml CH2Cl2中，滤出不溶成分，接着将CH2Cl2蒸出。用乙酸乙酯/二乙基醚混合物的浸提去除可溶杂质。将剩余的混合的碘化物/乙酸盐溶解在丙酮/水(3/2)中，通过IRA乙酸盐离子交换器转变成纯的乙酸盐，接着冻干。分离白色粉末，熔点为110-115℃；FAB-MS508(M+H+)(e)H-(D)-Phe-Pro-NH-pAm-[(D，L)-α-Me]-苄基将上述化合物溶解在70ml CH2Cl2中，加入80ml用HCl饱和的乙酸乙酯。稍后，分离沉淀，并加入醚使之完全。将沉淀吸滤出来，用醚洗涤直至无HCl，并在减压下干燥。制得白色晶体，熔点190-195℃(二盐酸盐)，FAB-MS407(M+)。实施例23Me-(D)-Phe-Pro-(D或L)(4 Am)-Phφ[CH2OH]/aN-(对-氰基苄基)-二苯甲酮亚胺在乙腈中用无水碳酸钾、碘化四丁基铵和仲甲醛进行羟甲基化。白色晶体熔点115-117℃。接着用叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物对醇进行酯化，用0.1N甲磺酸在THF中进行裂解，生成被保护的(D，L)-α-羟甲基-对-氰基苄基胺。这种胺在标准条件下与Z-Me-(D)-Phe-Pro-OH偶连，并用H2S转变成硫代酰胺，其通过柱色谱分离成非对应异构体。纯的非对应异构体a被酰胺化，接着用酸催化并通过氢解消除保护基团。冻干后制得白色晶体，熔点为175-180℃，FAB-MS438(M+H+)。实施例24Me-(D)-Phe-Pro-(D或L)(4Am)-Ph中[CH2OH]/b从非对应异构的纯硫代酰胺b通过酰胺化反应并且消除保护基团来制备无定型白色晶体，FAB-MS438(M+H+)。实施例25Boc-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb通过Boc-(D)-Phe(4-F)-OH与N-(4-氰基苄基)-脯氨酰胺反应并随后酰胺化制备。白色晶体，熔点184-187℃(乙酸盐)。实施例26H-(D)-Phe(4-F)-Pro-NH-pAmb在标准条件下从化合物25消除Boc基团。二盐酸盐白色晶体，熔点225-230℃，FAB-MS412(M+H+)。实施例27Boc-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb此化合物按实施例3的方法由Boc-(D)-Phe(4-Cl)-OH制备；熔点124-137℃(乙酸盐)实施例28H-(D)-Phe(4-Cl)-Pro-NH-pAmb如在A.I.c.中所述，从实施例27中消除Boc基团。此化合物制成二盐酸盐；熔点221-234℃。实施例29Boc-(D，L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb如实施例3由Boc-(D，L)-Phe(4-Br)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺xHCl制备此化合物。1H-NMR(D6-DMSO；δ以ppm计)8.4/8.1(t，1H，NH)；7.78(2d，2H，Ar-H)；7.2(m，2H，Ar-H)；7.0(2d，1H，NH)；4.5-4.2(m，4H，CH2/2α-H)；3.6(m，2H，Pro)；3.0-2.6(m，2H，CH2-Ph)；2.15-1.7(m，4H，β/γ-Pro)；1.3/1.2(2d，9H，Boc)FAB-MS575/574(M+H+)；熔点171℃(分解)(乙酸盐)实施例30H-(D，L)-Phe(4-Br)-Pro-NH-pAmb从实施例29中消除Boc制备此化合物。1H-NMR(d6-DMSO；δ以ppm计)9.2(b，4H)；8.6/8.5(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.4(m，4H，Ar-H)；7.2(m，2H，Ar-H)；7.2(b，3H，NH)；4.38(2dd，3H，CH2/α-H)；4.2(m，1H，α-H)；3.8-3.6(m，2H，Pro)；3.1-2.8(m，2H，CH2)；2.2-1.7(m，4H，Pro)；FAB-MS474(M+H+)；熔点56℃(分解)(乙酸盐)实施例31H-(D)-Phe(4-OH)-Pro-NH-pAmb采用类似于常规Z保护基团裂解(A.I.b.)的方法，从实施例37用Pd/C通过氢解消除苄基制备此化合物。过滤去除催化剂和汽提溶剂，采用醚中的HCl沉淀生成二盐酸盐。熔点129-140℃。实施例32Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb如在实施例3中从Boc-(D)-Phe(4-MeO)OH进行制备；熔点67-83℃(乙酸盐)。实施例33H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例32脱除Boc基团。
熔点215-227℃(二盐酸盐)实施例34BOC-(D，L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(4-EtO)OH进行制备；熔点115-145℃(乙酸盐)实施例35H-(D，L)-Phe(4-EtO)-Pro-NH-pAmb
按照A.I.c.从实施例34脱除Boc基团。
熔点218-230℃(二盐酸盐)实施例36Boc-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D)-Phe(4-BzlO)OH进行制备；熔点111-125℃(乙酸盐)实施例37H-(D)-Phe(4-BzlO)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例36脱除Boc基团。
熔点201-210℃(二盐酸盐)实施例38Boc-(D，L)-Phe(4-Et)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(4-Et)OH进行制备，得到产物-乙酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.25(2H，脒)，8.85(2H，脒)，8.42和8.09(合为1H 1H，NH)，7.80-6.95(9H，芳香H和NH)，4.45-4.20(4H，2xCH和1xCH2)，3.75-ca.45 3.0(2H，CH2)，3.0-2.6(2H，CH2)，2.6-ca.2.5(2H，CH2)，2.3-1.5(4H，2xCH2，1.3-ca.1.2(9H，Boc)，ca.1.2-1.05(3H，CH3)实施例39H-(D，L)-Phe(4-Et)-PrO-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例38脱除Boc基团得到二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.55-9.40(2H，脒)，9.32-9.20(2H，脒)，8.90和8.70(合为1H，NH)，8.85-8.75和8.40-8.30(合为3H，NH3+)，7.90-7.05(8H，芳香H)，4.50-4.10(4H，1xCH2和2xCH)，2.6-ca.2.5(2H，CH2)，1.9-1.3(4H，2xCH2)，1.2/1.1(3H，CH3)实施例40Boc-(D，L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb将Boc-(D，L)-Phe(4-iPr)OH按照实施例3进行反应制得乙酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.25(2H，脒)，8.50(2H，脒)，8.43和8.09(合为1H，NH)，7.80-6.95(9H，芳香H和NH)，4.45-4.20(4H，2xCH和1xCH2)，3.7-ca.3.2(2H，CH2)，3.0-2.6(3H，CH2和CH)，2.2-1.5(4H，2xCH2)，1.3-ca.1.2(9H，Boc)，ca.1.2-1.05(6H，2xCH3)实施例41H-(D，L)-Phe(4-iPr)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例40脱除Boc基团得到二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.50-9.40(2H，脒)，9.30-9.20(2H，脒)，8.90和8.70(合为1H，NH)，8.75和8.30(合为3H，NH3+)，7.85-7.10(8H，芳香H)，4.50-4.10(4H，1xCH2和2xCH)，ca.3.8-3.3(2H，CH2)，3.3-2.8(3H，CH2和CH)，2.4-1.3(4H，2xCH2)，1.20(6H，2xCH3)实施例42Z-(D)-Phe(4-tBuo)-Pro-NH-pAmb将Z-(D)-Phe(4-tBuo)OH按照实施例3进行反应制得乙酸盐。
熔点92-104℃实施例43H-(D)-Phe(4-tBuo)-Pro-NH-pAmb按照A.I.b.用Pd/C进行氢解将Z保护基从实施例40脱除。得到的产物为二盐酸盐。
熔点94-102℃实施例44Boc-(D，L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb将Boc-(D，L)-Phe(4-tBu)OH按照实施例3进行反应制得乙酸盐。
熔点151-158℃实施例45H-(D，L)-Phe(4-tBu)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例44脱除Boc基团得到盐酸盐。
熔点96-110℃实施例46H-(D，L)-Phe(4-Ph)-Pro-NH-pAmb按照实施例3将Boc-(D，L)-Phe(4-Ph)OH转变成Boc-(D，L)-Phe(4-Ph)-Pro-NH-pAmb乙酸盐，随后按照A.I.c.脱除Boc基团。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.50-9.40(2H，脒)，9.30-9.20(2H，脒)，8.90和8.70(合为1H，NH)，8.80和8.35(合为3H，NH3+)，7.85-7.25(13H，芳香H)，4.50-4.15(4H，1xCH2和2xCH)，ca.3.8-3.2(2H，CH2)，3.10-2.95(2H，CH2)，2.6-1.3(4H，2xCH2)实施例47Boc-(D，L)-Phe(4-nBu)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(4-nBu)OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成化合物47。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)10.0-9.2(b，NH)；8.4/8.0(2t，1H，NH)；7.78(2d，2H，Ar-H)；7.42(m，3H，Ar-H)；7.25-7.0(m，4H，Ar-H/NH)；4.4-4.2(m，4H，CH2/α-Phe/α-Pro)；3.7-3.0(m，2H，δ-Pro/CH2)；3.0-2.6(m，4H，2CH2-Ph)；2.2-1.7(m，5H，β/γ-Pro)；a，5(m，3H，β/γ-Pro/CH2)；1.25(m，9H，Boc)；0.95(t，3H，CH3)-(乙酸盐)MS550(M+H+)；4，50(-Boc)；247，185，134实施例48H-(D，L)-Phe(4-nBu)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例47脱除Boc进行制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4(d，2H，NH)；9.2(d，2H，NH)；8.9/8.6(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(d，2H，Ar-H)；7.23(d，1H，NH)；7.15(m，4H，Ar-H)；4.4-4.2(3m，4H，CH2/2α-H)；3.6(m，2H，γ-Pro/CH2)；3.1/2.9(2m，2H，CH2-Ph)；2.56/2.4(2m，2H，CH2)；2.1/1.9/1.6/1.3(4m，11H，β/γ-Pro/CH2)；0.95(2t，3H，CH3)MS450(M+H+)；247，176；实施例48为二乙酸盐的形式。实施例49Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmba)Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-对-氰基苄基按照实施例3将12.5g Boc-(D)-Tyr(Bzl)OH转变为18.9g Boc-
(D)-Tyr(Bzl)-Pro-对-氰基苄基酰胺，将其溶于780ml MeOH中，并用Pd/C在室温下进行氢化。6小时后，滤除催化剂并蒸除溶剂。以定量的收率得到Boc-(D)-Tyr-Pro-对-氰基苄基酰胺。
将12.5g该化合物溶于50ml吡啶中，并与4.7ml三氟甲磺酸酐一起在0℃下搅拌1小时。在室温下继续搅拌一小时后，将混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机层用水洗，Na2SO4干燥。得到14gBoc-(D)-Tyr(SO2CF3)-Pro-对-氰基苄基酰胺。将4g该三氟甲磺酸酯加入到1.93ml TEA、134mg二(二苯基膦基)丙烷、73mg Pd-II乙酸盐、1ml MeOH和40ml DMF中，在60-70℃下通入一氧化碳至气体不再被吸收。将混合物倒入饱和盐水中，用乙酸乙酯萃取。将有机层用10％的棕檬酸溶液洗涤、Na2SO4干燥并蒸除溶剂，得到3.3gBoc-(D)-Tyr(4-COOMe)-Pro-对-氰基苄基酰胺。b) Boc-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb按照实施例3将1.7g上述的腈转变成脒的氢碘酸盐。经硅胶柱色谱纯化后得到650mg。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.4-8.7(4H，脒)，8.9/8.1(1H，NH(2旋转异构体))，7.9-7.2(9H，芳香H和NH)，3.85(3H，COOMe)，1.3-1.2(9H，Boc)实施例50H-(D)-Phe(4-COOMe)-Pro-NH-pAmb将1.3g实施例49的化合物在乙酸离子交换剂上转变成脒乙酸盐，然后按照A.I.c.脱除Boc基团。得到1.0g二盐酸盐产物；熔点204-207℃(分解)实施例51H-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmba) Boc-脯氨酸(对-脒基苄基)酰胺将Boc-脯氨酸(对-氰基苄基)酰胺(制备参见实施例5)按照A.III.1的方法用H2S转变成硫代酰胺并随后将其转变成脒。以白色结晶的形式得到脒，熔点237-239℃。
FAB-MS(M+H+)＝347。b) N-(对-脒基苄基)脯氨酰胺二盐酸盐按照A.I.c.从上述化合物脱除Boc保护基。分离出极易吸湿的粉末状二盐酸盐，熔点130-140℃。
FAB-MS(M+H+)＝247。c) Boc-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb向3.9g(12.6mmol)Boc-(D)-Phe(4-NO2)OH在40ml THF的溶液中加入1.9g(12.6mmol)1-羟基苯并三唑和3.3g(25mmol)二环己基碳二亚胺，然后在室温下搅拌4小时。将沉淀脲进行抽滤并用少量THF洗涤。
将4.1g(12.6mmol)N-(对-脒基苄基)脯氨酰胺二盐酸盐和1.6g碳酸氢钠在6ml水中的溶液于5℃下加入到该滤液中。在室温下搅拌48小时后，蒸除溶剂，将残余物溶于乙醇中，滤除不溶物，将溶液再次进行浓缩。
将残余物用CH2Cl2/MeOH/50％的乙酸混合物(45/5/1.5)在硅胶柱上进行纯化。蒸除纯净馏分的洗脱液，在接近蒸干时加入甲苯，残余物用加有少量水的50ml丙酮重结晶。分离得到3.3g(48％理论产量)白色结晶状的脒乙酸盐，熔点162-165℃。
FAB-MS＝539.5(M+H+)。d) H-(D)-Phe(4-NO2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.将Boc基团脱除。二盐酸盐白色结晶，熔点218-225℃(分解)，FAB-MS439(M+H+)。实施例52Boc-(D，L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-F)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4-9.0(b，N-H)；8.9/8.4/8.15(3t，1H，NH)；7.8(sb，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.35-6.9(2m，5H，Ar-H/NH)；4.5-4.2(m，4H，NCH2/α-Phe/α-Pro)；3.7/3.5/3.2(3m，2H，δ-Pro)；3.0-2.7(2m，2H，Ar-CH2)；2.2-1.7(3m，4H，β/γ-Pro)；1.25(2s，9H，Boc)FAB-MS511(M+H+)实施例53H-(D，L)-Phe(3-F)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例52脱除Boc进行制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4/9.2(2d，4H，N-H)；8.9/8.55(1H，NH)；8.75/8.3(2sb，3H，NH3)；7.8(sb，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.4-7.05(m，4H，Ar-H)；4.45-4.2(m，4H，NCH2/α-Phe/α-Pro)；3.9-3.3(2H，δ-Pro)；3.2-2.8(m，2H，Ar-CH2)；2.2-1.8(4H，β/γ-Pro)FAB-MS411(M+H+)-(二盐酸盐)实施例54Boc-(D，L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-Cl)OH制得乙酸盐；1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4-8.6(4H，脒)，8.45/8.15(1H，NH)，7.8-7.0(9H，芳香H和NH)，1.3-1.2(9H，Boc)实施例55H-(D，L)-Phe(3-Cl)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从54脱除Boc基团。以二盐酸盐的形式得到产物。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.95(1H，NH)，8.8/8.4(3H，NH3+)，7.9-7.2(8H，芳香H)，4.50-4.15(4H，CH2和2xCH)，3.8-ca.3.3(2H，CH2)，3.25-2.95(2H，CH2)，2.2-1.5(4H，2xCH2)实施例56H-(D，L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从Boc-(D，L)-Phe(3-OH)-Pro-NH-pAmb脱除Boc进行制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.6/9.0(mb/N-H)；8.8/8.5(2t，1H，NH)；8.2(sb，N-H)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，2H，Ar-H)；7.1(m，1H，Ar-H)；6.8-6.6(m，3H，Ar-H)，4.4-4.1(m，4H，CH2/2α-H)；3.8-3.6(m，2H，Pro)；3.0/2.8(2m，2H，CH2)；2.1-1.5(m，4H，β/γ-Pro)FAB-MS410(M+H+)；mp168℃(分解)-(二乙酸盐)实施例57Boc-(D，L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-MeO)OH制得乙酸盐；1H-NMR(d6-DMSO，δppm):9.4-8.7(4H，脒)，8.4/8.1(1H，NH)，7.8-6.7(9H，芳香H和NH)，3.7(3H，OCH3，1.3-1.2(9H，Boc)实施例58H-(D，L)-Phe(3-MeO)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从57脱除Boc基团。以二盐酸盐的形式得到产物。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.55-9.15(4H，脒)，8.9/8.7(1H，NH)，8.75/8.30(3H，NH3+)，7.9-6.7(8H，芳香H)，4.5-4.1(4N，CH2和2xCH)，3.75/3.72(3H，OCH3)，3.3-2.9(2H，CH2)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例59Boc-(D，L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb该化合物从Boc-(D，L)-Phe(3-PhO)OH制备。按实施例3制得脒的乙酸盐。实施例60H-(D，L)-Phe(3-PhO)-Pro-NH-pAmb通过从实施例59脱除Boc制得二盐酸盐。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.9/-8.2(1H，NH)，8.75/8.35(3H，NH3+)，7.85-6.80(8H，芳香H)，4.50-4.10(4H，CH2和2xCH)，3.8-2.9(4H，2xCH2)，2.8-1.5(4H，CH2)实施例61Boc-(D，L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-Me)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)8/8.4/8.05(3t，1H，NH)；7.74(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.2-6.9(m，5H，Ar-H/NH)；4.4-4.2(m，4H，NCH2/α-Pro/α-Phe)；3.7-3.1(2m，2H，δ-Pro)；2.9-2.7(2H，Ar-CH2)；2.5(2s，3H，CH3)；2.1-1.6(m，4H，β/γ-Pro)；1.25(2s，9H，Boc)
MS508(M+H+)，408(-Boc)，277，247-(乙酸盐)实施例62H-(D，L)-Phe(3-Me)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例61脱除Boc制得。
MS408(M+H+)，247，185，134，93-(二乙酸盐)实施例63H-(D，L)-Phe(3-Ph)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-Ph)OH制得相应的Boc-保护的化合物并随后按照A.I.c.解离成二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.9/ca.8.7(1H，NH)，8.8/8.35(3H，NH3+)，7.85-7.25(13H，芳香H)，4.5-4.15(4H，CH2和2xCH)，3.2-3.00(2H，CH2)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例64Boc-(D，L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-CF3)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))10.0-9.2(b，NH)；8.9/8.4/8.15(3t，1H，NH)；7.8-7.4(8H，Ar-H)；7.22/7.05(2d，1H，NH)；4.6-4.2(4H，N-CH2/α-Pro/α-H)；3.8-3.4(2H，δ-Pro)；3.1/2.8(2H，Ar-CH2)；2.1-1.6(4H，β/γ-Pro)；1.2(2s，9H，Boc)MS562(M+H+)，462(-Boc)，247，188，134-(乙酸盐)实施例65H-(D，L)-Phe(3-CF3)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例64脱除Boc制得。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4(2s，2H，NH)；9.2(2s，2H，NH)；8.9/8.8(2t，1H，NH)；8.8/8.6/8.4(3sb，3H，NH3)；7.8-7.4(8H，Ar-H)；4.42-4.1(4H，N-CH2/α-Pro/α-H)；3.8(m1H，δ-Pro/Ar-CH2)；2.2-1.5(4H，β/γ-Pro)熔点195-7℃-(二乙酸盐)实施例66Boc-(D，L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-F)-OH和H-Pro-pCNb×HCl开始制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.8-9.2(b，N-H)；8.5/8.2(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.4-7.0(m，5H，Ar-H/NH)；4.6-4.2(m，4H，NCH2/α-Phe/α-Pro)；3.6-3.0(4m，2H，δ-Pro)；2.9-2.7(2m，2H，Ar-CH2)；2.2-1.7(3m，4H，β/γ-Pro)；1.2(2s，9H，Boc)MS512(M+H+)，412(-Boc)，247，134-(乙酸盐)实施例67H-(D，L)-Phe(2-F)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例66脱除Boc制得。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4(2s，2H，N-H)；9.15(2s，2H，N-H)，8.9/8.6(2sb，3H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.4-7.1(m，4H，Ar-H)；4.5-4.2(3m，4H，NCH2/α-Phe/α-Pro)；3.6-3.2(2m，2H，δ-Pro)；3.0/2.7(2m，2H，Ar-CH2)；2.2-1.5(5m，4H，β/γ-Pro)
MS412(M+H+)，247，134-(二盐酸盐)实施例68Boc-(D，L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-Cl)-OH制得乙酸盐。实施例69H-(D，L)-Phe(2-Cl)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例68制得二盐酸盐。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.9/8.7(1H，NH)；8.85/8.45(3H，NH3+)，7.9-7.2(8H，芳香H)，4.5-4.1(4H，CH2和2xCH)，3.8-3.0(4H，2xCH2)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例70Boc-(D，L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-OH)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)8.4/8.0(2t，1H，NH)；7.7(2d，2H，Ar-H)；7.4(2d，2H，Ar-H)；7.2/7.15(2d，1H，NH)；7.0-6.6(4H，Ar-H)；4.45-4.2(m，4H，H-CH2/α-Pro/α-H)；3.8-3.2(2H，δ-Pro)；3.0/2.8(2m，2H，Ar-CH2)；2.1-1.6(4H，β/γ-Pro)；1.2(2s，9H，Boc)MS510(M+H+)，410(-Boc)，247，134-(乙酸盐)实施例71H-(D，L)-Phe(2-OH)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例70脱除Boc制得。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4-9.0(b，NH)；8.85/8.5(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，2H，Ar-H)；7.2-6.7(4H，Ar-H)；4.4-3.7(m，4H，N-CH2/α-Pro/α-H)；3.4-3.2(2H，δ-Pro)；3.1-2.75(2H，Ar-CH2)；2.1-1.4(4H，β/γ-Pro)MS410(M+H+)，369，277，247-(二乙酸盐)实施例72Boc-(D，L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-MeO)OH制得乙酸盐。实施例73H-(D，L)-Phe(2-MeO)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例72制得二盐酸盐。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.55-9.25(4H，脒)，8.90/8.65(1H，NH)；8.7/8.2(3H，NH3+)，7.9-6.8(8H，芳香H)，4.5-4.1(4H，CH2和2xCH)，3.80(3H，OCH3)，-3.8-3.3(2H，CH2)，3.2-2.6(2H，CH2)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例74Boc-(D，L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-Me)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)8.4/8.05(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.4(2d，2H，Ar-H)；7.2-7.0(m，5H，Ar-H)/NH)；4.6-4.2(m，4H，CH2/2α-H)；3.7-3.55(2m，2H，δ-Pro)；3.0-2.6(m，2H，CH2)；2.3(2s，3H，CH3)；2.2-1.6(m，4H，β/γ-Pro)；1.35-1.2(1s，9H，Boc)FAB-MS508(M+H+)-(乙酸盐)实施例75H-(D，L)-Phe(2-Me)-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例74脱除Boc制得。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.35(s，2H，N-H)；9.05(s，2H，N-H)；8.8/8.5(2t，1H，NH)；7.8/7.75(2d，2H，Ar-H)；7.5/7.45(2d，2H，Ar-H)；7.2-7.0(m，4H，Ar-H)；4.4-4.2(3m，4H，CH2/2α-H)；3.6/.3[sic](2m，2H，δ-Pro)；3.1/3.0(2m，2H，CH2)；2.38(m，3H，CH3)；2.2-1.3(4H，β/γ-Pro)MS408(M+H+)，247，185，134-(二盐酸盐)实施例76Boc-(D，L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-iPr)OH制得乙酸盐。实施例77H-(D，L)-Phe(2-iPr)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例76制得二盐酸盐。熔点220-221℃实施例78Boc-(D，L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2-Ph)OH制得乙酸盐。实施例79H-(D，L)-Phe(2-Ph)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.从实施例78获得二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.85/8.67(1H，NH)，8.6/8.2(3H，NH3+)，7.85-7.15(13H，芳香H)，4.4-3.0(8H，3xCH2和2xCH)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例80Boc-(D，L)-Phe(3，4-(F)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3，4-(F)2)OH制备乙酸盐(《药物化学杂志)》1967，10，64)；白色晶体；熔点110-114℃；FAB-MS530(M+H+)实施例81H-(D，L)-Phe(3，4-(F)2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例80制备二盐酸盐；白色晶体；熔点190-195℃(分解)；FAB-MS430(M+H+)实施例82Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3通过反应Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Cl)2)OH而获得乙酸盐(《肽蛋白研究国际杂志)》1987，30，13)；白色晶体；熔点135-138℃；FAB-MS562(M+H+)实施例83H-(D，L)-Phe(3，4-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb
按照A.I.c.通过消除Boc从实施例82制备二盐酸盐；白色晶体；熔点208-212℃(分解)；FAB-MS462(M+H+)实施例84Boc-(D，L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-Cl-4-MeO)OH制备乙酸盐。实施例85H-(D，L)-Phe(3-Cl-4-MeO)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例84获得二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.58-9.30(4H，脒)，8.98/8.85(1H，NH)，8.8/8.35(3H，NH3+)，7.9-7.0(7H，芳香H)，4.50-4.20(4H，CH2和2xCH)，3.85/3.82(3H，OCH3)，3.2-2.9(2H，CH2)，2.2-1.5(4H，2xCH2)实施例86Boc-(D，L)-Phe(3-Cl，4-OEt)-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D，L)-Phe(3-Cl，4-OEt)-OH和H-Pro-对氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物的乙酸盐。FAB-MS573(M+H+)实施例87H-(D，L)-Phe(3-Cl，4-OEt)-Pro-NH-pAmb通过消除实施例86中的Boc制备该化合物的二盐酸盐。1H-NMR(d6-DMSO，δin ppm)9.4 (d，2H，NH)；9.2(d，2H，NH)；8.9/8.7(2t，1H，NH)；8.4-8.2(b，3H，NH3)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.3(m，1H，Ar-H)；7.2/7.0(2H，Ar-H)；4.5-4.2(4H，N-CH2/α-Pro/α-Phe)；4.1(m，2H，OCH2)；3.7-3.1(m，2H，δ-Pro)；3.1-2.7(m，H，Ar-CH2)；2.2-1.6(m，4H，β/γ-Pro)；1.35(q，3H，CH3)MS472(M+H+)，247，134；70实施例88H-(D，L)-Phe(3，4-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3，4-(MeO)2)OH制备相应的Boc-保护的化合物，然后按照A.I.c.分解而得二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.55-9.25(4H，脒)，8.95/ca.8.8(1H，NH)，8.8/8.35(3H，NH3+)7.9-6.7(7H，芳香H)，4.50-4.15(4H，CH2和2xCH)，3.75-3.68(6H，2xOCH3)，3.2-2.8(2H，CH2，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例89Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3，4-(Me)2)OH制备乙酸盐；白色晶体；熔点108-112℃；FAB-MS522(M+H+)实施例90H-(D，L)-Phe(3，4-(Me)2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例89获得二盐酸盐；白色晶体；熔点195-200℃；FAB-MS422(M+H+)实施例91Boc-(D，L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3-Me-4-iPr)OH制备乙酸盐。实施例92H-(D，L)-Phe(3-Me-4-iPr)-Pro-NH-pAmb
按照A.I.c.通过消除Boc从实施例91制备二盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.9/9.6(1H，NH)，8.85/8.40(3H，NH3+)，7.9-6.85(7H，芳香H)，4.5-4.0(4H，CH2和2xCH)，3.2-2.9(2H，CH2)，2.32/2.30(3H，CH3)，2.2-1.4(4H，2xCH2)，1.2-1.1(6H，2xCH3)实施例93Boc-(D，L)-Phe(2，3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2，3-(MeO)2)OH制备乙酸盐。实施例94H-(D，L)-Phe(2，3-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例93制备二盐酸盐。
1.3∶1的非对映体混合物的熔点范围为138-140℃(分解)。实施例95Boc-(D，L)-Phe(2，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2，5-(MeO)2)OH制备乙酸盐。实施例96H-(D，L)-Phe(2，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例95制备二盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.55-9.25(4H，脒)，8.95/ca.8.7(1H，NH)，8.7/8.2(3H，NH3+)，7.9-7.4 and 7.0-6.7(7H，芳香H)，4.50-4.1(4H，CH2和2xCH)，3.8/3.7(6H，2xOCH3)，3.25-2.65(2H，CH2)，2.2-1.5(4H，2xCH2)实施例97Boc-(D，L)-Phe(3，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(3，5-(MeO)2)OH制备乙酸盐。实施例98H-(D，L)-Phe(3，5-(MeO)2)-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.通过消除Boc从实施例97制备二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.5-9.2(4H，脒)，8.95/ca.8.7(1H，NH)，8.7/8.3(3H，NH3+)，7.85-7.40和6.60-6.35(7H，芳香H)，4.50-4.15(4H，CH2and 2xCH)，3.75/3.72(6H，2xOCH3)，3.2-2.8(2H，CH2)，2.2-1.4(4H，2xCH2)实施例99Boc-(D，L)-Phe(3，4，5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb按照实施例3进行制备，通过将二苯酮亚胺甘氨酸酯用三甲氧基苄基氯烷基化，然后引入Boc-保护基并水解酯而制备前体Boc-((D，L)-Phe(3，4，5-(MeO)3)OH。熔点109-121℃(二乙酸盐)。实施例100H-(D，L)-Phe(3，4，5-(MeO)3)-Pro-NH-pAmb从实施例99制备。熔点180-239℃(二盐酸盐)。实施例101Boc-(D，L)-Phe(2，4，6-(Me)3)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phe(2，4，6-(Me)3)OH制备乙酸盐。实施例102H-(D，L)-Phe(2，4，6-(Me)3)-Pro-NH-Amb按照A.I.c.通过消除BOc从实施例101制备二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.5-9.15(4H，脒)，8.85/ca.8.7(1H，NH)，8.8/8.5(3H，NH3+)，7.9-7.4和6.9-6.75(6H，芳香H)，4.5-4.0(4H，CH2和2xCH)，ca.3.7-3.3(2H，CH2)，3.2-3.0(2H，CH2)，2.25-2.10(6H，3xCH3)，ca.2.1-1.4(4H，2xCH2)实施例103Boc-(D)-α-Nal-Pro-NH-pAmb按照实施例3进行制备。熔点136-178℃(乙酸盐)。实施例104H-(D)-α-Nal-Pro-NH-pAmb从实施例103制备。熔点228-234℃(二盐酸盐)。实施例105H-(D)-β-Nal-Pro-NH-pAmb通过消除Boc-(D)-β-Nal-Pro-NH-pAmb中的Boc而制备；熔点223-229℃(二盐酸盐)。实施例106Boc-(D，L)-α-Ngl-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D，L)-α-Ngl-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)10.0(b，NH)；8.7/8.5(2t，1H，NH)；8.3-7.3(12H，Ar-H/NH)；6.2/6.1(2d，1H，α-Ngl)；4.4(3H，N-CH2/α-Pro)；3.8-2.8(2H，δ-Pro)；2.2-1.7(4H，β/γ-Pro)；1.3(2s，9H，Boc)MS530(M+H+)，430(-Boc)，247，134；熔点183-5℃(分解)(乙酸盐)。实施例107H-(D，L)-α-Ngl-Pro-NH-pAmb通过消除实施例106中的Boc而制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.5/9.3(2d，4H，NH)；9.0/8.8(2t，1H，NH)；8.7(b，3H，NH3)；8.4(m，1H，Ar-H)；8.1(2d，2H，Ar-H)；7.9(2d，2H，Ar-H)；7.7-7.7(6H，Ar-H)；6.25/6.18(2s，1H，α-Ngl)；4.6-4.35(m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.85/3.6/3.4(3m，2H，δ-Pro)；2.2-1.6(4H，β/γ-Pro)MS430(M+H+)，3.69，277-(二盐酸盐)。实施例108Boc-(D，L)-β-Ngl-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D，L)-β-Ngl-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.8-9.2(b，NH)；8.6/8.4(2sb，1H，NH)；8.0-7.75(6H，Ar-H)；7.6-7.5(5H，Ar-H)；7.35/7.18(2sb，1H，NH)；5.6/5.45/5.35(3sb，1H，α-Ngl)；4.4(3H，N-CH2/α-Pro)；3.9/3.7(2sb，1H，δ-Pro)；3.2(sb，1H，δ-Pro)；2.2-1.85(4H，β/γ-Pro)；1.4(2s，9H，Boc)MS530(M+H+)，430(-Boc)，2.47，185，134；熔点183-5℃(分解)-(乙酸盐)。实施例109H-(D，L)-β-Ngl-Pro-NH-pAmb通过消除实施例108中的Boc而以二乙酸盐的形式制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.6-9.0(b，NH)；8.75/8.62t，1H，NH)；8.0-7.8(6H，Ar-H)；7.6-7.4(m，5H，Ar-H)；5.2(s，1H，α-Ngl)；4.5-4.3(m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.9-3.0(2H，δ-Pro)；2.2-1.7(4H，β/γ-Pro)MS430(M+H+)，247实施例110H-(D，L)-l-Tic-Pro-NH-pAmb通过消除实施例225中的Boc制备该化合物的二乙酸盐。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4/9.0(2sb，4H，NH)；8.7(b，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.4-6.8(4H，Ar-H)；5.2(2s，1H，α-Tic)；4.8-4.4(3H，N-CH2/α-Pro)；3.6-3.2(4H，Ar-CH2/δ-Pro)；3.0-2.7(2H，N-CH2)；2.2-1.8(4H，β/γ-Pro)实施例111Boc-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D)-3-Tic-PH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.44/8.2(2sb，1H，NH)；7.8/7.65(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，2H，Ar-H)；7.4/7.2(m，4H，Ar-H)；4.8-4.6(m，2H，CH2)；4.4-4.2(m，4H，CH2/2α-H)；3.62(m，2H，Pro)；3.1-2.6(m，2H，CH2-Ph)；2.2-1.75(m，4H，Pro)；1.3(2s，9H，Boc)MS506(M+H+)；406(-Boc)；熔点143℃-(乙酸盐)。实施例112H-(D)-3-Tic-Pro-NH-pAmb通过消除实施例111中的Boc而制备该化合物。FAB-MS406(M+H+)；熔点204℃-(二乙酸盐)。实施例1131-Icc-Pro-NH-pAmb按照实施例3以1-Icc-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。FAB-MS402(M+H+)实施例114Boc-(D，L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D，L)-2-Tgl-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物的乙酸盐。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.6(8.4(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45-6.9(6H，Ar-H)；5.7-5.4(1H，α-Tgl)；4.4(m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.8-3.2(2H，δ-Pro)；2.1-1.7(4H，β/γ-Pro)；1.35(2s，9H，Boc)MS486(M+H+)，386(-Boc)，247，185，134实施例115H-(D，L)-2-Tgl-Pro-NH-pAmb通过消除实施例114中的Boc而制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4/9.2(2sb，4H，NH)；8.9/8.75(2t，1H，NH)；(sb，3H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.62(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，2H，Ar-H)；7.4，sb，1H，Ar-H；7.1(m，1H，Ar-H)；5.65/5.6(2s，1H，α-Tgl)；4.5-4.4(m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.95-3.75(2m，1H，δ-Pro)；3.2/3.0(2dd，1H，δ-Pro)；2.2-2.0(1H，β-Pro)；1.9-1.7(3H，β/γ-Pro)FAB-MS386(M+H+)-(二乙酸盐)。实施例116Boc-(D)-2-Tal-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D)-2-Tal-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)8.85/8.15(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.35(d，1H，Ar-H)；7.25(sb，1H，Ar-H)；7.0-6.7(2H，Ar-H)；4.82-4.3(4H，N-CH2/α-Pro/α-Tal)；4.05/3.6(2m，1H，δ-Pro)；3.5-2.9(m，3H，Ar-CH2/δ-Pro)；2.2-1.7(4H，β/γ-Pro)；1.25(2s，9H，Boc)MS500(M+H+)，400(-Boc)，247，134-(乙酸盐)。实施例117H-(D-)-2-Tal-Pro-NH-pAmb通过消除实施例116中的Boc而制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.4-9.0(4H，NH)；8.85(b，3H，NH3)；7.8(d，2H，Ar-H)；7.5(d，2H，Ar-H)；7.45(d，1H，Ar-H)；7.0(dd(s，2H，Ar-H)；4.4-4.15(4H，N-CH2//α-Pro/α-Tal)；3.8-2.9(3H，Ar-CH/δ-Pro)；2.8(dd，Ar-H)；1.8(m，2H，β-Pro)；1.75-1.55FAB-MS400(M+H+)-(二乙酸盐)。实施例118Boc-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D)-Phg-OH制备乙酸盐。实施例119H-(D)-Phg-Pro-NH-pAmb从实施例118获得二盐酸盐。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.6-9.3(4H，脒)；9.1-8.7(4H，NH NH2+)；8.0-7.3(9H，ar芳香；icH)；5.4(1H，CH)；4.6-4.3(3H，CH2和CH)；3.1-2.7(2H，CH2)；2.2-1.6(4H，2xCH2)实施例120Boc-(D，L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb按照实施例3从Boc-(D，L)-Phg(4-MeO)-OH制备乙酸盐。实施例121H-(D，L)-Phg(4-MeO)-Pro-NH-pAmb从实施例120获得二盐酸盐。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.6-9.3(4H，脒)，9.0(8.9(1H，NH)；8.8/8.6 (3H，NH3+)；7.9-7.8和7.55-7.45 and 7.05-6.90(8H，芳香H)；5.3(1H，CH)；4.5-4.3(3H，CH2和CH)；3.75实施例122Boc(D)-Chg-Pro-NH-pAmba)在0℃，在烧瓶中将8克(31.1毫摩尔)的Boc(D)-Chg-OH、9.88克(37.3毫摩尔)H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl、32毫升(186.54毫摩尔)DIPEA和108毫升PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)混合，于0℃-室温搅拌18小时。然后将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用20％浓度的NaHSO4溶液(5×)、5％浓度的NaHCO4溶液和饱和盐水提取。干燥并浓缩有机溶液后，得到13.8克纯净的Boc(D)-Chg-Pro-对-氰基苄基酰胺。b)将13.8克Boc(D)-Chg-Pro-对-氰基苄基酰胺溶于113毫升吡啶和53毫升TEA中。用H2S气体饱和该溶液，室温放置过夜。首先将反应混合物用氮气冲洗，然后倒入1升5％浓度的柠檬酸溶液中。滤掉沉淀物，滤液用乙酸乙酯提取(3×)。然后将沉淀物溶于乙酸乙酯中并与有机提取物合并。合并相用5％浓度的柠檬酸洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。粗产物不必进一步纯化而直接用于下一反应。c)将粗硫代酰胺溶于120毫升丙酮和21毫升Mel中，室温搅拌过夜。然后在减压下将反应混合物蒸发至干，将残余物溶于48毫升甲醇中。加入48毫升甲醇中的醋酸铵溶液(10％浓度)，然后将该溶液于室温搅拌18小时。为了提取脒，于旋转蒸发仪中除去溶剂，在DCM中回收残余物，抽滤掉沉淀物，减压浓缩滤液。得到24.6克粗产物，将其用反相HPLC色谱纯化。得到7克-(乙酸盐)。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9.6-9.2(b，N-H)；8.7/8.1(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.0/6.9(2d，1H，NH)；4.4(m，3H，CH2/α-Pro)；4.0(t，1H，α-Chg)；3.6-3.0(2H，γ-Pro)；2.1-1.5(m，11H，β，γ-Pro/Ch2)；1.4/1.3(2s，9H，Boc)；1.1-0.9(m，4H)MS486(M+H+)，386(-Boc)，247，134实施例123H-(D-)-Chg-Pro-NH-pAmb通过消除实施例122中的Boc而制备该化合物。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4-9.0(b，NH)；8.9(t，1H，NH)；8.4(b，NH)；7.8(d，2H，Ar-H)；7.5(d，2H，Ar-H)；4.4(m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.9-3.6(2m，2H，α-Pro)；3.8(d，1H，α-Pro)；2.0-1.5(m，10H，Ch/β/γ-Pro)；1.2-1.0(m，4H，Ch)MS386(M+H+)，247，185；熔点133℃-(二盐酸盐)。实施例124EtOOC-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb首先，按照实施例3从Boc-(D)-Chg-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl制备H-(D)-Chg-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl。然后于室温顺序将2.5克(6.17毫摩尔)H-(D)-Chg-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl、2.33毫升(13.58毫摩尔)DIPEA、0.075克(0.617毫摩尔)DMAP和0.652毫升氯代甲酸乙酯加到25毫升DCM中，将该反应溶液于室温搅拌18小时。然后用DCM稀释反应混合物，用20％浓度的NaHSO4溶液洗涤，干燥并浓缩。EtOOC-H-(D)-Chg-Pro-对-氰基苄基酰胺的粗产率为2.51克。将以此方式获得的中间体按照A.III.I.转化为相应的脒。通过反相HPLC色谱(乙腈/水)将粗产物纯化。产率0.483克。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.7/8.1(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.4(2d，2H，Ar-H)；7.4(2d，2H，Ar-H)；7.39/7.3(2d，1H，NH)；4.9/4.4(2m，3H，CH2/α-Pro)；4.0(2t，1H，α-Chg)；3.8(t，2H，OCH2)；3.7-3.3(3m，2H，δ-Pro)；2.1(m，1H，β-Pro)；1.9-1.5(m，11H，CH2/β/γ-Pro)；1.2-0.9(m，9H，CH2/CH3)MS458(M+H+)，247，134，70-(乙酸盐)。实施例125HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb从实施例126除去叔丁基酯而制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.5/8.3(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.6/7.45(2d，2H，Ar-H)；4.4-4.2(m，3H，N-CH2/α-Pro)；4.1(m，1H，α-Chg)；3.8-3.2(4H，HOOCCH2/δ-Pro)；2.1-1.4(m，11H)；1.2-0.9(m，4H)MS444(M+H+)，368，247-(盐酸盐)。实施例126tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-pAmb
按照实施例246叔丁基酯前体的类似方式制备该化合物。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.4(t，1H，NH)；7.75(d，2H，Ar-H)；7.4(d，2H，Ar-H)；4.4(m，4H，N-CH2/α-Pro/α-Chg)；3.8-2.9(4H，HOOCCH2/δ-Pro)；2.1-0.9(m，15H)；1.3(s，9H，tBu)MS500(M+H+)，444，247，170-(乙酸盐)。实施例127Boc-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb按照实施例3合成化合物127。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4(b，4H，NH)；8.8/8.15(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.05(d，1H，NH)；4.8/4.35(d/m，3H，N-CH2/α-Pro/α-Chg)；3.75/3.5-3.2(2H，α-Pro)；2.1-1.85(4H，β/γ-Pro)；1.7-1.3(m，6H)；1.3(2d，9H，Boc)；1.4-0.9(m，7H)MS500(M+H+)，400(-Boc)，247，134；熔点125-7℃-(乙酸盐)。实施例128Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb通过消除实施例129中的Cbz合成该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.3/8.9(2s，4H，NH)；8.85/8.8(2sb，2H，NH)；8.7(t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，2H，Ar-H)；4.4(m，3H，N-CH2/α-Pro)；4.25(db，1H；α-Chg)；3.9/3.4(2m，2H，δ-Pro)；2.5(s，3H，NCH3)；2.2(m，1H，β-Pro)；2.5(s，3H，NCH3)；2.2(m，1H，β-Pro)；2.0-1.8(m，4H)；1.8-1.5(m，6H)；1.4-0.9(6H)MS414(M+H+)，247，140-(乙酸盐)。实施例129Me-(Z)-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Me-(Z)-(D)-Cha-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.8-9.2(b，4H，NH)；8.8/8.5(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.5(2d，Ar-H)；7.4(m，5H，Ph-H)；5.2-5.0(2H，OCH2)；4.95-4.5(1H，α-Pro)；4.4(m，3H，N-CH2/α-Cha)；3.6-3.0(2H，δ-Pro)；2.82/2.75/2.7(3s，3H，NCH3)；2.1(m，1H，β-Pro)；1.9-1.4(m，11H，β/γ-Pro/CH2)；1.2-0.8(m，5H)FAB-MS548(M+H+)-(乙酸盐)。实施例130N，N-Me-(D)-Cha-Pro-NH-pAmb按照实施例3以N，N-二甲基环己基丙氨酸和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.8/8.4(2t，1H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；4.45-4.3(d/m，3H，N-CH2/α-Pro)；3.9(m，1H，α-Cha)；3.6-3.2(2H，δ-Pro)；2.2(2s，6H，NCH3)；2.1-1.5(m，13H)；1.3-0.8(m，4H)FAB-MS428(M+H+)-(乙酸盐)。实施例131Boc-(D)-Trp(Boc)-Pro-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D)-Trp(Boc)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.8-9.2(b，N-H)；8.8-8.5(2sb，1H，NH)；8.25(8.0/7.8-7.2(m，10H，Ar-H/NH)；4.85/4.5-4.2(d/m，4H，CH2-H)；3.6/3.5(2m，2H，CH2，Pro)；3.1-2.8(m，2H，CH2)；2.2-1.6(m，4H，Pro)，1.3(2s，18H，Boc)FAB-MS633(M+H+)-(乙酸盐)。实施例132H-(D)-Trp-Pro-NH-pAmb通过消除实施例131中的Boc制备该化合物。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))11.1(s，1H，NH)；9.4/9.15(2s，4H，N-H)；8.8(t，1H，NZ)；8.6(s，3H，N-H)；7.75(d，2H，Ar-H)；7.45(d，3H，Ar-H)；7.35(d，1H，Ar-H)；7.25(s，1H，Ar-H)；7.0(2t，2H，Ar-H)；4.3(m，2H，CH2)，4.18(sb，1H，α-H)；3.5(m，2H，CH2，Pro)；3.3-3.1(m，2H，CH2)，2.15(dd，1H，Pro)；1.6/1.4(2m，3H，β/γ-Pro)FAB-MS433(M+H+)-(二盐酸盐)。实施例133Boc-(D，L)-Dpa-Pro-NH-pAmb该化合物按照实施例3从Boc-(D)-Dpa-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.6/8.1(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45-7.0(m，13H，Ar-H/NH)；5.25/5.1(2t，1H，α-Dpa)；4.4-4.1(3H，N-CH2/α-Pro)；3.75(m，1H，CH)；3.6-2.95(2H，δ-Pro)；2.0-1.5(4H，β/γ-Pro)；1.2(2ds，9H，Boc)MS570(M+H+)，470(-Boc)，247，196，134，熔点156℃-(乙酸盐)实施例134H-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a化合物134通过从实施例133脱除Boc并随后用反相HPLC进行分离来合成。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.3(2s，4H，NH)；8.9/8.2(2t，1H，NH)；8.4(b，3H，NH)；7.8(2d，2H，Ar-H)；7.6(2d，2H，Ar-H)；7.5-7.1(10H，Ar-H)；5.1/4.6(2d，1H，α-Dpa)；4.4-4.1(4FN-CH2/α-Pro/CH)；3.8-3.0(2H，δ-Pro)；2.1-1.1(4H，β/γ-Pr
FAB-MS470(M+H+)-(二乙酸盐)实施例135H-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.3/9.2(2s，4H，NH)；8.4(t，1H，NH)；8.35(sb，3H，NH)；7.8/7.65(2d，4H，Ar-H)；7.4-7.1(10H，Ar-H)；5.0(d，1H，α-Dpa)；4.4/3.9(M，4H，n-CH2/α-Pro/CH)；3.6/2.9(2m，2H，δ-Pro)；1.7-1.3(4H，β/γ-Pro)FAB-MS470(M+H+)-(二乙酸盐)实施例136EtOOC-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a为制备上述化合物，首先将Boc-(D，L)-Dpa-Pro-对-氰基苄基酰胺(合成实施例133的中间体)用二氧六环/HCl转变成相应的盐酸盐H-(D，L)-Dpa-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl。随后按照实施例124将该盐转变成产物的非对映体对。通过反相HPLC色谱(乙腈/水)将两个非对映体彼此分离。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.6/6.6(2t，1H，NH)；7.8-7.0(m，15H，Ar-H，NH)；5.3/5.1(2t，1H，α-Dpa)；4.4(2d，1H，α-Pro)；4.3/4.1(2t，2H，CH2)；4.0(m，1H，CH)；3.85(t，2H，OCH2)；3.6/3.3/3.0(3m，2H，δ-Pro)；2.0-1.4(m，4H，β/γ-Pro)；1.0(m，3H，CH3)MS542(M+H+)，268，134，70-(乙酸盐)实施例137EtOOC-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/b该化合物按照实施例3制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.2(2t，1H，NH)；7.75(d，2H，Ar-H)；7.6(d，2H，Ar-H)；7.4-7.2(m，12H，Ar-H)；5.15(m，1H，α-Dpa)；4.4(m，3H，NCH2/α-Pro)；3.95(m，1H，CH)；3.8/3.1(2m，2H，δ-Pro)；3.7(m，2H，OCH2)；1.8-1.4(m，4H，β/γ-Pro)；1.0(m，3H，CH3)MS542(M+H+)，268，134，70-(乙酸盐)实施例138HOOC-CH2-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/a首先，用二氧六环/HCl将Boc基团从Boc-(D，L)-Dpa-Pro-对-氰基苄基酰胺(实施例133的合成中间体)脱除。将用该方法得到的3.42g(7mmol)盐酸盐溶于20ml MeOH中，加入0.6g(6.65mmol)二羟乙酸和1.75g(28mmol)NaCNBH3后搅拌过夜。为了收集产品，将反应混合物浓缩，残余物溶于DCM中，将得到的有机溶液用水萃取。将有机相干燥和浓缩后得到的残余物溶于5ml MeOH中，通过滴加入二异丙基醚中使所需产物沉淀。粗品产量3.7g。产物粗品不经纯化，按照实施例A.III.1将其转变成相应的脒。通过反相HPLC(乙腈/水)将非对映体混合物分离。
MS528(M+H+)，254-(乙酸盐)实施例139HOOC-CH2-(D或L)-Dpa-Pro-NH-pAmb/bMS528(M+H+)，254，134，83-(乙酸盐)实施例140Boc(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-ProNH-pAmb/a该化合物按照实施例3从Boc(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl制备。合成的一对非对映体通过反相HPLC色谱分离。
MS638(M+H+)，538(-Boc)，303，277，247-(乙酸盐)实施例141Boc(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/bMS638(M+H+)，538(-Boc)，303，247，134，70-(乙酸盐)实施例142H-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a该化合物通过从实施例140脱除Boc进行制备。
MS538(M+H+)，303，247，134，70-(乙酸盐)实施例143H-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b该化合物通过从实施例141脱除Boc进行制备。
MS538(M+H+)，303，264，247，134，70-(乙酸盐)实施例144EtOOC-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a为制备上述化合物，首先将Boc-(D，L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-对-氰基苄基酰胺(合成实施例141的中间体)用二氧六环/HCl转变成相应的盐酸盐H-(D，L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl。随后按照实施例124将该盐转变成非对映体产物的混合物。通过反相HPLC色谱(乙腈/水)将两个非对映体彼此分离。1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.6(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.6-7.1(11H，Ar-H/NH)；5.2/5.0(2t，1H，α-Dpa )；4.4/4.38(2d，1H，CH)；4.3(m，1H，α-Pro)；4.0(m，2H，NCH2)；3.75(m，2H，OCH2)；3.7-3.3(2H，δ-Pro)；2.0(m，1H，β-Pro)；1.95-1.4(m，4H，β/γ-Pro)；1.0(2t，3H，CH3)
MS610(M+H+)，247，134，70-(乙酸盐)实施例145EtOOC-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/b1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))8.2(2t，1H，NH)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.6-7.1(11H，Ar-H/NH)；5.1(2t，1H，α-Dpa)；4.4(2d，1H，CH)；4.3(m，2H，NCH2)；4.0/4.39(m，1H，α-Pro)；3.85(m，2H，OCH2)；3.7(2H，δ-Pro)；1.9-1.5(4H，β/γ-Pro)；1.0(2t，3H，CH3)MS610(M+H+)，247，185，134，93-(乙酸盐)实施例146HOOC-CH2-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/a首先，用二氧六环/HCl将Boc基团从Boc-(D，L)-Dpa(4，4’-Cl)-Pro-对-氰基苄基酰胺(实施例140的合成中间体)脱除。随后按照实施例138制备所需产物。1H-NMR(d6-DMSO，δppm)11.2(b，COOH)；8.9/8.6(2sb，1H，NH)；7.8-7.2(14H，Ar-H/NH)；4.4-4.0(5H，CH7 N-CH2/α-Dpa/α-Pro)；3.8-3.0(2H，δ-Pro)；2.8(2d，2H，HOOC-CH2)；2.0-1.4(4H，β/γ-Pro)MS596(M+H+)，247，134，93，70-(乙酸盐)实施例147HOOC-CH2-(D或L)-Dpa(4，4’-(Cl)2)-Pro-NH-pAmb/bFAB-MS596(M+H+)实施例148H-(D或L)-Dch-Pro-NH-pAmb/a化合物148按照实施例3从Boc-(D，L)-Dch-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl制备。合成的-对非对映体通过反相HPLC色谱分离。1H-NMR(d6-DMSO，δin ppm)9.3-9.0(b，NH)；8.9/8.5(2t，1H，NH)；7.75/7.5(2d，4H，Ar-H)；4.5-4.0(4H，N-CH2/α-Pro/α-Dch)；3.7-3.0(2H，δ-Pro)；2.2-1.0(4H，β/γ-Pro)FAB-MS481(M+H+)；mp127℃-(二乙酸盐)实施例149H-(D或L)-Dch-Pro-NH-pAmb/bFAB-MS481(M+H+)；mp127℃-(二乙酸盐)实施例150Boc-(D)-Val-Pro-NH-pAmb按照实施例3制备。
熔点132-145℃-(乙酸盐)实施例151H-(D)-Val-Pro-NH-pAmb从实施例150制备。
熔点60-80℃-(二盐酸盐)实施例152Boc-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb按照实施例3制备。
熔点68-82℃-(乙酸盐)实施例153H-(D)-Leu-Pro-NH-pAmb从实施例152制备。
熔点228-233℃-(二盐酸盐)实施例154Boc-(D)-Gly(α-tBu)-Pro-NH-pAmb按照实施例3制备。
熔点211-220℃-(乙酸盐)实施例155H-(D)-Gly(α-tBu)-Pro-NH-pAmb从实施例154制备。
熔点236-239℃-(二盐酸盐)实施例156Boc-(D)-Ala(β-tBu)-Pro-NH-pAmb按照实施例3制备。
熔点185-192℃-(乙酸盐)实施例157H-(D)-Ala(β-tBu)-Pro-NH-pAmb从实施例156制备。
熔点225-231℃-(二盐酸盐)实施例158H-(D或L)-Msu-Pro-NH-pAmb/a按照实施例3从Boc-(D，L)-Msu-OH制备二盐酸盐，然后按照A.I.c.将Boc基团脱除。通过HPLC将非对映体分离。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.40/9.20(4H，脒)，8.9(1H，NH)，8.55(3H，NH3+)，7.85/7.50(4H，芳香H)，4.50-4.35(4H，CH2和2xCH)，3.85-ca.3.3(4H，2xCH2)，2.95(3H，CH3)，2.3-1.8(6H，3xCH2)实施例159H-(D或L)-Msu-Pro-NH-pAmb/b(二盐酸盐)；1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.45/9.30(4，脒)，8.95(1H，NH)，8.85(3H，NH3+)，7.80/7.45(4H，芳香H)，4.4-4.2(4H，CH2和2xCH)，3.85-ca.3.3(4H，2xCH2)，3.00(3H，CH3)，2.3-1.7(6H，3xCH2)实施例160Boc-(环)Leu-Pro-NH-pAmb化合物160按照实施例3从Boc-(环)Leu-OH和H-Pro-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成MS472(M+H+)，372(-Boc)，247，185，140-(乙酸盐)实施例161H-(环)Leu-Pro-NH-pAmb该化合物通过从实施例160脱除Boc进行合成。
MS372(M+H+)-(二乙酸盐)实施例163H-Gly-Pro-NH-pAmb通过从Boc-Gly-Pro-NH-pAmb(按照实施例3从Boc-Gly-OH开始制备)脱除Boc制得二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δin ppm)9.50/9.25(4H，脒)，8.85(1H，NH)，8.30(3H，(NH3+)，7.80/7.45(4H，芳香H)，4.5-4.2(3H，CH2和CH)，3.9-ca.3.3(4H，2xCH2)，2.2-1.7(4H，2xCH2)实施例166Ph-CH2-Gly-Pro-NH-pAmb通过从Ph-CH2-(Boc)Gly-Pro-NH-pAmb乙酸盐脱除Boc制得二盐酸盐。1H-NMR (DMSO-d6，δin ppm)9.6(2H，NH2+)，9.4/9.2(4H，脒)，8.80(1H，NH)，7，.80[sic]-7.35(9H，芳香H)，4.40-4.25(3H，CH2和CH)，4.10(2H，CH2)，3.95(2H，CH2)，3.6-3.4(2H，CH2，2.2-1.8(4H，2xCH2)实施例176β-萘基-SO2-Pro-NH-pAmb通过将β-萘基-SO2Cl与H-Pro-OCH3偶联，随后将酯水解，再与对-氰基苄基酰胺偶联并将腈功能基转变成脒基制得。
熔点66-72℃(乙酸盐)实施例177p-Tol-SO2-Pro-NH-pAmb按照实施例176制备。
熔点89-95℃(乙酸盐)实施例178Ph-CH2-CH2-SO2-Pro-NH-pAmb按照实施例176制备。
熔点61-69℃(乙酸盐)实施例179H-Asp-Pro-NH-pAmb按照A.I.c.将Boc基团从Boc-Asp(OBzl)-Pro-NH-pAmb脱除，随后用Pd/C将苄酯氢化成酸。用HCl的醚溶液处理制得二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.4/9.2(4H，脒)，8.6(1H，NH)，8.45(3N，NH3+)，7.80/7.45(4H，芳香H)，4.45-4.30(4H，CH2和2xCH)，3.8-ca.3.5(2H，CH2)，3.2-ca.2.6(2H，CH2)，2.2-1.7(4H，2xCH2)实施例191H-(D)-Asp-Pro-NH-pAmb按照实施例179制备二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δin ppm)9.45/9.30(4H，脒)，9.05(1H，NH)，8.9(3H，NH3+)，7.80/7.45(4H，芳香H)，4.45-4.15(4H，CH2，和2xCH)，2.2-1.7(4H，2xCH2)；FAB-MS362(M+H+)实施例193H-(D)-Asp(OtBu)-Pro-NH-pAmb该二盐酸盐通过在Pd/C上的氢化反应从Z-(D)-Glu(OtBu)-Pro-NH-pAmb制备。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.3(4H，脒)，8.5(1H，NH)，8.3(3H，NH3+)，7.75/7.25(4H，芳香H)，4.4-4.3(4H，CH2和2xCH)，2.9-2.6(2H，CH2，2.2-1.8(4H，2xCH2)，1.4(9H，tBu)；FAB-MS418(M+H+)实施例199(D)-Ph-CH2-CHOH-CO-Pro-pAmb(a)3-苯基-D-乳酰基-脯氨酸(对-氰基苄基)酰胺将5.5克(20.4毫摩尔)O-四氢吡喃基-3-苯基-D-乳酸(WO93/18060)溶于30毫升DMF中，顺序加入5.4克(20.4毫摩尔)N-(对-氰基苄基)脯氨酸酰胺、3.3克(20.4毫摩尔)N-羟基苯并三唑、3.0克DIPEA和4.33克(20.6毫摩尔)二环己基碳化二亚胺。将混合物于室温搅拌48小时。抽吸滤除沉淀下来的脲，然后减压除去溶剂，残余物与50毫升水混合并用乙酸乙酯提取。用水、碳酸氢钠溶液洗涤并用硫酸钠干燥后，蒸馏掉乙酸乙酯，将残留的油状残余物溶于甲醇中，用对甲苯磺酸将pH值调节至2。将该溶液于室温放置6小时。然后蒸馏掉甲醇，用乙酸乙酯回收残余物，用水、5％浓度的柠檬酸和碳酸氢钠溶液洗涤。将用硫酸钠干燥并通过蒸馏除去溶剂后得到的残余物通过柱色谱纯化(洗脱液二氯甲烷/丙酮/甲醇，45/5/2)。得到2.5克白色晶体，该晶体从乙醚/己烷混合物中结晶后于108-110℃熔化。(b)3-苄基-D-乳酰基-脯氨酸(对脒基苄基)酰胺乙酸盐将2.0克上述化合物和3毫升三乙胺溶于30毫升吡啶中，于0℃用H2S饱和并于室温放置过夜。TLC检测(二氯甲烷/甲醇，9/1)表明完全转化为硫代酰胺。为了分离，于减压下通过蒸馏除去吡啶，将残余物回收在250毫升乙酸乙酯中，用盐水、5％浓度的柠檬酸和碳酸氢钠溶液洗涤。干燥并通过蒸馏除去溶剂后得到2.3克无定形硫代酰胺。
将硫代酰胺在40毫升丙酮中蒸馏，加入4毫升碘甲烷后，室温放置6小时。蒸除溶剂，然后将无定形残余物与无水乙醚搅拌，干燥。将S-甲基硫代亚胺酸甲酯氢碘化物溶于50毫升乙醇中，加入15毫升10％浓度的乙酸铵溶液，于60℃加热混合物3小时。为了分离，蒸除溶剂，将残余物溶于100毫升二氯甲烷中，滤除不溶成分，然后蒸馏掉二氯甲烷。用乙酸乙酯和乙醚混合物处理除去其中的可溶性不纯物。将残留的碘化物/乙酸盐混合物溶于丙酮/水(3/2)中，用IRA乙酸盐离子交换器转化为纯乙酸盐，然后用柱色谱纯化(洗脱液二氯甲烷/甲醇/50％浓度乙酸40/10/1.5)。除去洗脱液后将纯净部分冷冻干燥。得到1.1克白色粉末，熔点185℃-187℃，FAB-MS395(M+H+)。实施例200(D)-Man-Pro-NH-pAmb按照实施例199以O-四氢吡喃基-(D)-苯乙醇酸(WO93/18060)开始制备乙酸盐；白色晶体；熔点211-213℃；FAB-MS381(M+H+)。实施例202H-(D)-Phe-Aze-NH-pAmb按照实施例3将Boc-(D)-Phe-OH和H-Aze-对-氰基苄基酰胺反应直至形成脒并除去Boc而制备氢碘化物/盐酸盐的混合物。1H-NMR-(DMSO-d6，δppm)9.3/9.1(4H，脒)，9.0(1H，NH，8.7(3H，NH3+)，7.8-7.2(9H，芳香H，4.5-ca.3.3(6H，2xCH2和2xCH)，3.2-2.8(2H，CH2)，2.2-1.8(2H，CH2)实施例204和实施例205H-(D)-Phe-(D或L)-Pic-NH-pAmb/a和H-(D)-Phe-(D或L)-Pic-NH-pAmb/b按照实施例3从Boc-(D)-Phe-OH和H-(D，L)-Pic-对-氰基苄基酰胺和脒制备这对非对映体的二盐酸盐。然后消除Boc基团。
1H-NMR-(DMSO-d6，δppm)9.6-9.3(4H，脒)，9.1-8.7(4H，NH和NH3+)，7.8-7.2(9H，芳香H)，4.6-4.3(4H，CH2和2xCH)，3.3-2.8(2H，CH2)，2.3-0.9(6H，3xCH2)；FAB-MS408(M+H+)然后通过HPLC色谱将这对非对映体分离成实施例204和205。实施例207H-(D)-Phe-(D，L/反式)-Pic(4-Me)-NH-pAmb按照实施例204/205以Boc-(D)-Phe-OH和H-(D，L/反式)-Pic(4-Me)-对-氰基苄基酰胺开始合成二盐酸盐；熔点160-170℃。实施例208Boc-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D)-Phe-OH和H-Pyr-对-氰基苄基酰胺×HCl开始合成化合物160。MS492.5(M+H+)，392，245，133实施例209H-(D)-Phe-Pyr-NH-pAmb消除实施例208中的Boc而合成该化合物。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))9.4-9.2(b，N-H)；8.8-8.2(b，N-H)；8.6(2t，1H，NH)；7.75(2d)，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H；7.35-7.1(m，5H，Ar-H)；6.15/6.0/5.85/5.75(4sb，2H，CH＝CH)；5.5/4.9(sb，1H，α-Pyr)；4.4-4.2(m，4H，CH2/α-Phe/δ-Pyr)；3.6(d，1H，δ-Pyr)；3.1-3.0 (m，2H，CH2-Ph)FAB-MS392(M+H+)实施例210Boc-(D)-Phe-Hyp(OtBu)-NH-pAmb按照实施例1以Boc-(D)-Phe-Hyp(OtBu)-OH和对-氰基苄胺×HCl开始合成该化合物。MS；566(M+H+)，466(-Boc)，319(466-Phe)实施例211H-(D)-Phe-Hyp-NH-pAMb通过消除实施例210中的Boc和叔丁基而合成该化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，δ(ppm))9.35(s，2H，N-H)；9.1(s，2H，N-H)；8.8(t，1H，NH)；8.5(sb，3H，N-H)；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，2H，Ar-H)；7.35-7.2(m，5H，Ar-H)；4.4-4.2(m，5H，CH2/2 α-H/CHOH；3.8(m，1H，Pro)；3.0(m，2H，CH2)；2.75(m，1H，Pro)；1.95(m，1H，Pro)；1.8(m，3H，Pro)FAB-MS410(M+H+)实施例213H-(D)-Phe-(Me)Val-NH-pAmb按照实施例3以Boc-(D)-Phe-OH和H-(Me)Val-对-氰基苄基酰胺开始合成二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.45/9.25(4H，脒)，8.8(1H，NH)，8.6(3H，NH3+)，7.8/7.5/7.3(9H，芳香H)，4.65(1H，CH)，4.60(2H，CH2)，4.45-4.20(2H，CH2)，3.20-2，95(2H，CH2)，2.85(3H，N-CH3)，2.0(1H，CH)，0.8/0.45(6H，2xCH3)实施例216Boc-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb按照实施例1以Boc-(D)-Phe-Tia-OH和对-氰基苄胺盐酸盐开始合成该化合物。MS512(M+H+)，412(-Boc)，265，204，133实施例217H-(D)-Phe-Tia-NH-pAmb通过消除实施例216中的Boc合成该化合物。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.4/9.2(2sb，4H，N-H)；9.0(t，1H，NH；7.75(2d，2H，Ar-H)；7.45(2d，3H，Ar-H)；7.4-7.2(m，5H，Ar-H)；4.8(d，1H，α-Tia)；4.7/3.7(2d，2H，NCH2S)；4.4-4.2(m，3H，CH2/α-Phe)；3.2/3.1(2m，2H，SCH2)；3.0/2.7(m，3H，CH2-Ph)FAB-MS412(M+H+)实施例218H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-am)-picoa)2-氰基-5-(叠氮甲基)吡啶将溶于20毫升二氯甲烷中的14.5克(0.07摩尔)三氟乙酸酐于室温滴加到8.8克(0.07毫摩尔)2-氰基-5-(羟甲基)-吡啶(WO83/01446)和6.9克三乙胺的200毫升二氯甲烷溶液中，然后搅拌2小时。蒸馏除去二氯甲烷后，将残余物溶于50毫升甲苯和50毫升二甲基亚砜的混合物中，加入11.2克(0.17摩尔)叠氮化钠和0.7克溴化四丁铵，将混合物于室温搅拌过夜。
将反应混合物倒入300毫升水中，用乙醚提取数次。用硫酸钠干燥并蒸馏除去乙醚后，得到6.8克淡黄色晶体(熔点62-64℃)，不必进一步纯化而将其用于混合反应中。b)2-氰基-5-(氨基甲基)吡啶将a)获得的化合物溶于45毫升四氢呋喃和1.2毫升水中，搅拌下分批加入11.2克三苯膦。将反应混合物于室温放置过夜。
将蒸馏除去溶剂后的残余物回收到100毫升乙醚中，抽吸滤除沉淀下来的氧化三苯膦，用醚中的盐酸将滤液的pH值调节至2。抽吸滤除沉淀下来的盐酸盐，用乙醚洗涤，顺序用甲苯和热异丙醇处理。分离4.7克(40％)盐酸盐，熔点253-256℃(分解)。c)Boc-D-苯基丙氨酰脯氨酸(6-氰基-3-吡啶甲基)酰胺在-5℃，将8.12克二异丙基乙胺和11毫升(15毫摩尔)丙烷膦酸酐(50％浓度的乙酸乙酯溶液)依次滴加到2.11克(12.5毫摩尔)2-氰基-5-(氨基甲基)吡啶和4.5克(12.5毫摩尔)Boc-D-Phe-Pro-OH的70毫升二氯甲烷溶液中。然后将混合物搅拌2小时，期间将温度由-5℃升温至20℃。有机相用水、5％浓度的碳酸氢钠和5％浓度的柠檬酸溶液洗涤，以硫酸钠干燥并蒸发至干。得到淡黄色晶状残余物，熔点167-170℃，不必进一步纯化而将其用于下一反应。d)Boc-D-苯基丙氨酰脯氨酸(6-脒基-3-吡啶甲基)酰胺将1.15克(16.5毫摩尔)羟基胺盐酸盐悬浮于5毫升乙醇中，加入1.2克25％浓度的氨水溶液，将混合物搅拌10分钟。加入45毫升乙醇后，抽吸滤除沉淀下来的盐，将3.14克(6.6毫摩尔)的上述化合物(步骤c)加到溶液中。将少顷并搅拌30分钟后分离出的羟基脒化合物抽吸滤除，用少量冷水和乙醇洗涤。将用乙醇润湿的残余物溶于40毫升乙醇中，加入8毫升冰醋酸和250毫克10％Pd/C，于约50℃进行氢化反应。5小时后，TLC(二氯甲烷/甲醇/50％浓度的乙酸，20/5/1)表明没有可检测出的起始物。
通过一层硅藻土抽吸滤除催化剂后，蒸馏除去溶剂，接近完成时加入甲苯。加入50毫升丙酮后，滤除结晶出的醋酸脒。白色晶体，熔点130-4℃，FAB-MS495(M+H+)。e)H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(6-am)-pico标准条件下消除化合物d)的Boc基团。二盐酸盐白色晶体，熔点235-240℃。FAB-MS395(M+H+)。实施例219Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-picoa)Boc-D-环己基甘氨酰-脯氨酸将29克(0.113摩尔)Boc-(D)-环己基甘氨酸和18.7克(0.113摩尔)脯氨酸甲酯盐酸盐悬浮在300毫升二氯甲烷中，滴加入58.3克(0.45摩尔)二异丙基乙胺溶解。冷却至-15℃后，滴加入113毫升(0.147摩尔)丙烷膦酸酐(50％浓度的乙酸乙酯溶液)，将混合物搅拌1小时。
加入200毫升水后，分离出有机相，用碳酸钾水溶液、0.5N盐酸和5％浓度的碳酸氢盐溶液洗涤。用硫酸钠干燥后，溶解掉溶剂，油状残余物(41克)溶于400毫升乙醇中，加入120毫升1N的NaOH，将混合物于室温搅拌2小时。蒸馏除去乙醇后，水相用水稀释并用甲基叔丁醚提取数次。水相用硫酸氢钾溶液酸化，用二氯甲烷提取3次。干燥并通过蒸馏除去二氯甲烷后的油状残余物从二异丙醚/正己烷(1/3)中结晶出。分离到28克白色晶体，熔点145-148℃。b)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-氰基-3-吡啶甲基)酰胺将26.6克(0.075摩尔)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸和12.7克(0.075摩尔)6-氰基-3-吡啶甲胺盐酸盐悬浮在300毫升二氯甲烷中，加入47克(0.364摩尔)二异丙基乙胺。然后，于-10℃滴加入66毫升丙烷膦酸酐(50％浓度的乙酸乙酯溶液)，于0℃搅拌1小时后，加入200毫升水，分离出二氯甲烷相。有机相用0.1N的氢氧化钠溶液和水洗涤，然后干燥，蒸馏掉溶剂。将残余物回收在100毫升乙酸乙酯中，同时立即开始结晶，加入150毫升正己烷终止。抽吸过滤并干燥而分离得31.4克(89％理论值)白色晶体，熔点150-151℃。c)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-脒基-3-吡啶甲基)酰胺按照实施例218，步骤d形成脒。乙酸盐白色晶体，熔点160-8℃(分解)；FAB-MS487(M+H+)实施例220H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-pico标准条件下将上述步骤c化合物的Boc基团消除。二盐酸盐白色晶体，熔点235-238℃(分解)；FAB-MS；387(M+H+)实施例221HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-picoa)H-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-氰基-3-吡啶甲基)酰胺将46.9克(0.1摩尔)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-氰基-3-吡啶甲基)酰胺(化合物219，步骤b)悬浮在300毫升乙醚中，搅拌下于室温加入600毫升HCl饱和的乙醚，将混合物搅拌过夜。搅拌下并于冰冷却下将悬浮液加到1.5升15％浓度的氢氧化钠溶液中。加入80毫升CH2CH2后，分离掉有机相，碱相用乙醚/CH2CH2混合物(7/3)提取6次。合并的有机相用硫酸钠干燥并蒸发至干。残留27.2克无定形白色粉末，TLC(二氯甲烷/甲醇4/1)表明仍含有约5-10％的酰胺化合物(由水解氰基产生)。b)N-(叔丁氧羰基甲基)-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-氰基-3-吡啶甲基)酰胺
室温搅拌下，将14克(0.072摩尔)溴乙酸叔丁酯滴加到27.2克(0.074毫摩尔)上述化合物(步骤a)和28.6克(0.22摩尔)二异丙基乙胺的150毫升二氯甲烷溶液中，将该混合物搅拌过夜。
用水洗涤反应溶液，用硫酸钠干燥，将蒸馏除去溶剂后的残余物在硅胶柱上进行层析，二氯甲烷/丙酮/甲醇(45/5/1)作为洗脱液。分离得28.6克(80％理论值)无定形白色粉末。加入少量醚后从二异丙醚中结晶出样品，于89-91℃熔化。c)N-叔丁氧羰基甲基-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-脒基-3-吡啶甲基)酰胺按照实施例218步骤d)将上述化合物转化为脒。乙酸盐白色，无定形粉末，FAB-MS501(M+H+)d)N-(羧甲基)-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-脒基-3-吡啶甲基)酰胺将2.4克上述醋酸脒溶于50毫升二氯甲烷/三氟乙酸混合物(1/1)中，于室温放置过夜。
减压浓缩溶液，将残余物回收到二氯甲烷中，再加入甲苯蒸馏掉，然后在硅胶柱上进行层析，用甲醇/25％浓度的氨水(50/2)作洗脱液。蒸馏除去洗脱液后，将产物回收到水中，用活性炭处理后，冻干。冻干物(1.45克)的熔点为202-205℃，FAB-MS445(M+H+)实施例222HOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-Am)-picoa)在0℃将5.2克(14.75毫摩尔)Boc-(D)-Chg-Pyr-OH、2.88克(17毫摩尔)6-氰基-3-氨基甲基吡啶、12.2毫升DIPEA和17毫升PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)混合在50毫升DCM中。然后搅拌1.5小时使反应混合物升温至室温。将该溶液用250毫升乙酸乙酯稀释，用饱和氯化钠溶液(3×)、20％浓度的硫酸氢钠(3×)和饱和氯化钠溶液(1×)洗涤。用硫酸镁干燥该溶液，然后在旋转蒸发仪上除去乙酸乙酯。粗产率7.8克。不必进一步纯化将粗产物直接用于下一反应。b)将Boc-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-pico加到10毫升DCM中。将溶液冷却至0℃后，加入20毫升TFA(50％浓度的DCM溶液)。然后经3小时使反应混合物升温至室温，在旋转蒸发仪上浓缩溶液。将残余物回收到甲苯中，减压下再次浓缩溶液。再重复该步骤一次。粗产率13.5克。c)将13.5克H-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-pico×TFA加到100毫升乙腈中。加入2.69克KI、6.11克碳酸钾和2.87克溴乙酸叔丁酯后，将悬浮液于室温搅拌5小时。然后过滤除去碳酸钾和KI，于旋转蒸发仪中减压除去乙腈，将残余物回收在乙酸乙酯中。用水(2×)和饱和氯化钠溶液(1×)洗涤溶液，以硫酸钠干燥并浓缩。粗产率6.4克。d)将6克tBuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CN)-pico溶于42毫升吡啶和19.4毫升TEA中，用H2S气体饱和。将该溶液于室温放置18小时后，用氮气冲洗，然后倒入2升冰水中。用乙酸乙酯将水溶液提取6次，合并的有机提取物用5％浓度的硫酸氢钠溶液洗涤。干燥并浓缩后，得到6.1克tBuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSNH2)-pico粗产物。e)将6.1克tBuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSNH2)-pico粗品溶于7.4毫升甲基碘和70毫升丙酮中，于室温搅拌4.5小时。然后浓缩溶液，回收到甲苯中，于旋转蒸发仪中蒸发至干。粗产物6.1克。f)将6.1克tBuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-CSMe＝NH)-pico与30毫升甲醇和30毫升甲醇中的乙酸铵溶液(20％浓度)在单颈烧瓶中混合，室温下放置18小时。浓缩溶液，残余物回收到DCM中。有机溶液用水洗涤(3×20毫升)，以硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。将粗产物从乙酸乙酯/二异丙醚中再次沉淀后，得到2.7克粗产物。通过反相HPLC色谱纯化粗产物。产率0.364克。g)将0.28克tBuOOCCH2-(D)-Chg-Pyr-NH-3-(6-am)-pico于0℃加到5毫升二噁烷中，加入5毫升二噁烷/HCl后，于室温搅拌48小时。将溶液浓缩后通过柱色谱纯化粗产物(甲醇/3％浓度的NH3溶液)。产率180毫克。FAB-MS443(M+H+)实施例223HOOCCH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-pico按照实施例222以Boc-(D)-Chg-2-Phi-OH和3-氨基甲基-6-氰基吡啶开始制备tBuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-CN)-pico。如下将该中间体转化为实施例223a)将8克(14.9毫摩尔)tBuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-CN)-pico与8毫升TEA、2.58克羟基胺盐酸盐和90毫升乙醇于70℃一起搅拌18小时。然后，浓缩悬浮液，将残余物溶于DCM中，将该溶液每次用5毫升乙酸(30％浓度)洗涤3次。用硫酸钠干燥后，于旋转蒸发仪中除去DCM。该N-羟基脒不必进一步纯化而用于下一反应。b)将5克N-羟基脒与6克Raney镍、40毫升乙醇和9毫升乙酸一起混合在反应烧瓶中，于60℃在氢气中氢化。通过反相HPLC色谱法分离粗产物(乙腈/水)。产率0.7克。c)按照实施例222将0.7克tBuOOC-CH2-(D)-Chg-2-Phi-NH-3-(6-Am)-pico转化为游离酸。FAB-MS499(M+H+)实施例224HOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-Am)-picoa)在50℃将7.4克(15.22毫摩尔)H-(D)-Chg-pro-NH-3-(6-CN)-pico×TFA、6.3克碳酸钾和3.69克2-溴丙酸苄酯在100毫升乙腈中搅拌12小时。当前体完全转化后，滤除固体，浓缩滤液。然后，将残余物溶于乙酸乙酯中并用水洗涤2次。干燥有机溶液后，在旋转蒸发仪中除去乙酸乙酯。粗产率5克。在硅胶上进行柱色谱提纯后剩余3克产物。b)按照实施例223将3克BzlOOC-CH(Me)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(6-CN)-pico转化为相应的脒。产率0.8克。c)标准条件下将苄基酯氢化后得到游离酸。通过反相HPLC色谱纯化粗产物。产率0.4克。FAB-MS 459(M+H+)实施例225Boc-(D)-Phe-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico按照实施例227制备；熔点130-140℃；(乙酸盐)实施例226H-(D)-Phe-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico按照实施例228制备；(二盐酸盐)13CNMR d6-DMSOδ(ppm)170.79，167.62，161.85，156.34，140.72，138.41，135.87，134.53，129.30，128.49，127.29，120.70，60.23，52.18，46.61，39.1，36.48，29.22，23.33，21.72实施例227Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-picoa)Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico的制备将6.4g Boc-(D)-Chg-Pro-OH(18.05mmol)与4.0g 2-甲基-3-吡啶甲基胺〔20.5mmol制备参见Arch.Pharm 308(1975)969-76〕和14mlDIPEA(81.8mmol)一起加入到200ml DCM中并冷却至5℃，在此温度下，滴加18.8ml 50％的丙基膦酸酐的乙酸乙酯溶液(23.92mmol)。
升至室温后继续反应1小时，随后将混合物减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯中，乙酸乙酯层用水萃取大约10次，用硫酸镁干燥，在旋转蒸发仪上浓缩。将残余物与二异丙基醚一起搅拌进行萃取，得到7.2g(87％)白色固体状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico。b)Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-氧代)-pico的制备将5.3g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico(11.58mmol)与3.1g纯度为98％的间氯过苯甲酸(18.14mmol)一起在150ml DCM中于室温下搅拌2小时。随后，通入氨气至饱和，将混合物在室温下搅拌1小时，将沉淀抽滤并用DCM洗涤，滤液再次用氨气饱和。然后将DCM相用水洗涤3次，用硫酸镁干燥并减压浓缩。得到5.5g白色固体状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-氧代)-pico。c)Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico的制备将3.6g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-氧代)-pico(7.58mmol)溶于10ml DCM中，加入2.0ml硫酸二甲酯(21.1mmol)的20ml DCM溶液，混合物在室温下搅拌过夜，将溶液减压浓缩并将残余物与醚一起搅拌3次进行萃取。
得到4.55g(100％)白色固体状的Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico_CH3OSO3_，其不经纯化直接用于下一步反应。d)Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-pico的制备将4.55g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico_CH3OSO3_(7.58mmol)溶于10ml DMF中，在室温下滴加30mlDMF中的0.5g氰化钠(10.02mmol)(轻微放热的反应)。在室温下搅拌一小时后减压蒸除DMF(1毫巴)，将残余物溶于1M的硫酸氢钾溶液并用醚萃取，有机相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。得到2.8g(76％)白色泡沫状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-pico。e) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico的制备将3.63g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-pico(7.51mmol)与1.9g氯化羟胺(18.76mmol)和6.4ml DIPEA(37.525mmol)一起在50mlDCM中在室温下搅拌4小时，然后在旋转蒸发仪上减压浓缩，残余物溶于乙酸乙酯并用稀盐酸(pH4)洗6次，将有机相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。
得到3.8g(98％)白色固体状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico。f) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico的制备将3.8g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico(7.35mmol)用两小勺10％的Pd/C在80ml乙醇和15ml乙酸中，在60℃和轻微增加的压力下氢化8小时，用玻璃纤维漏斗滤除催化剂并用乙醇洗，将滤液减压浓缩(1毫巴)。残余物通过与醚一起搅拌萃取两次后，得到4.0g(97％)白色固体状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico。熔点144-153；(乙酸盐)实施例228H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico室温下，将2.8g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×CH3COOH(4.99mmol)与25ml盐酸的醚溶液(＞3M)一起在1Oml DCM和15ml甲醇中搅拌4小时。将溶液减压浓缩并与DCM、甲醇一起共馏数次，残余物通过与醚/DCM和醚/甲醇一起搅拌进行萃取。得到2.5g白色固体状H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×2HCl。熔点128-135℃；(二盐酸盐)13C-NMR d6-DMSO，δ(ppm)170.96，167.72，161.86，156.30，140.76，138.53，135.85，120.72，60.56，55.17，47.43，39.20，38.78，29.66，27.75，25.40，25.31，25.20，23.71，21.76实施例229tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-picoa) H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico的制备室温下，将7.8g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico(17.0mmol)在35ml DCM和35ml盐酸醚溶液(＞3M)中搅拌2小时，溶液在旋转蒸发仪上减压浓缩，与甲醇/DCM一起共馏数次，残余物通过与醚一起搅拌进行萃取。得到7.3g(100％)白色固体状H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico×2HCl。b) tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico的制备室温下，将9.4g H-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico×2HCl(21.79mmol)与11.26g(14.9ml)DIPEA(81.16mmol)和4.89g(3.69ml)溴乙酸叔丁酯(25.0mmol)一起在150ml DCM(分子筛干燥)中搅拌16小时。
由于TLC显示仍有原料存在，加入另外0.4ml溴乙酸叔丁酯和1.5mDIEPA并继续在室温下搅拌3小时。随后将反应混合液首先在水泵真空下浓缩，然后在1毫巴及40℃以下浓缩。通过与醚一起搅拌对残余物进行萃取，过滤并用醚洗。将晶体溶于水，然后在pH7.5用乙酸乙酯萃取多次，将这些乙酸乙酯萃取液与上述醚的滤液合并，干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。将残余物溶于醚，然后加入盐酸的醚溶液至pH3，将沉淀抽滤，用醚充分洗并通过与醚一起搅拌萃取两次。得到9.1g(82％)白色固体状tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico×HCl。c) tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico的制备将9.5g的tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico×HCl(18.66mmol)与18.66g的(Boc)2O(18.66mmol)一起加入到160ml
的DCM中，然后在5分钟内加入5.3g(7.03ml)DIPEA(41.05mmol)，将混合物在室温下搅拌过夜。在加入另外的DCM后，将溶液用0.5M的HCl溶液洗至DCM中不再含有DIPEA(TLC检测)，然后用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。用DCM和0-5％的甲醇进行硅胶柱色谱分离，得到5.8g(54％)白色固体状tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico。d) tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-氧代)-pico的制备室温下，将5.8克tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico(10.12mmol)与9.99克纯度为70％的间氯过苯甲酸(40.5mmol)一起在200ml的DCM中搅拌2小时。随后通入氨气至饱和，将混合物在室温下搅拌1小时，将沉淀抽滤并用DCM洗，滤液再次用氨气饱和。然后将DCM相用水洗3次，用硫酸镁干燥并减压浓缩。
得到5.95g(100％)。e) tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico_·CH3OSO3_的制备将5.95g的tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-氧代)-pico(10.12mmol)溶于25ml的DCM中，加入28m的15％的硫酸二甲酯的DCM溶液。在40℃下搅拌5小时后将其在室温下放置过夜，将混合物用100ml的DCM稀释，用水迅速洗3次，用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。在下一步反应中直接使用得到的tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico_·CH3OSO3_粗品。f) tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-pico的制备将上述反应得到的tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-1-MeO)-pico_·CH3OSO3_粗品在20分钟内滴加到1.1g氰化钠(21.3mmol)在50ml DMF的溶液中，通过冷却维持温度在23-25℃。
又经过20分钟后，减压蒸除DMF(1毫巴)，将残余物溶于醚并用水、KHSO4溶液(pH2)、水和饱和盐水充分洗涤，然后将醚相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。
通过硅胶柱色谱进行纯化(洗脱剂为加有0-2％MeOH的DCM)得到4.1g固体物质，将其与醚一起搅拌进行萃取。
产量4.0g(66％)tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-picog) tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico的制备将3.95g tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-CN)-pico(6.6mmol)与1.15g盐酸羟胺(16.52mmol)和5.12g(6.78ml)DIPEA(39.6mmol)一起在75ml DCM(经分子筛干燥)中在回流下加热2小时，随后在室温下搅拌过夜。在加入另外的DCM后将混合物用稀盐酸(pH4)洗，有机相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。得到的4.2g tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico产物粗品在下一步反应中以粗品的形式使用。h) tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico的制备将4.2g tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Ham)-pico产物粗品在15ml乙酸和80ml乙醇的混合物中用Pd/C(10％)和氢气在50℃下氢化5小时。随后滤除催化剂并用乙醇洗，滤液在旋转蒸发仪上减压浓缩(1毫巴)，残余物与甲苯/DCM一起共馏数次，溶于100ml醚中并用水洗3次，每次4ml。将合并的水相在旋转蒸发仪上减压浓缩(1毫巴)，最高温度为35-40℃，残余物与乙醇一起共馏。得到4.2g近乎纯净的白色固体状tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×CH3COOH(两步的总收率为94％)。i) tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico的制备
在室温下，将2.0g tBuOOC-CH2-(Boc)(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×CH3COOH(2.96mmol)与10ml盐酸的醚溶液(用HCl饱和的醚)一起在10ml DCM中搅拌1小时20分钟，随后在旋转蒸发仪上减压浓缩，将残余物溶于水中并用乙酸乙酯萃取数次。将水相在旋转蒸发仪上减压浓缩(1毫巴，最高温度为35-40℃)并与丙酮一起共馏数次。将得到的混合物通过硅胶柱色谱分离(洗脱剂DCM/甲醇/乙酸100/10/2→100/20/5)，得到0.7g白色固体状tguOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×(HX)1.2(X_＝Cl和/或CH3CO2_)，在205℃熔化并分解。实施例230HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico室温下，将2.2g的tBuOOC-CH2-(Boc)-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico×CH3COOH(3.25mmol)与15ml盐酸的醚溶液一起在30mlDCM中搅拌数小时，在此期间缓慢析出固体沉淀。将固体抽滤，通过与热的DCM一起搅拌萃取多次，随后在硅胶上进行色谱分离(洗脱剂比例为95/5的甲醇/25％氨水)。得到1.3g(94％)白色固体状HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico，在210℃熔化并分解。实施例231MeOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico将0.45g HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico(0.1mmol)加入到30ml甲醇(经分子筛干燥)中，滴加1ml亚硫酰氯，然后将混合物在回流下搅拌2小时。加入另外0.3ml亚硫酰氯并在回流下搅拌1小时后，将溶液在旋转蒸发仪上减压浓缩并与甲醇/DCM一起共馏数次，残余物通过硅胶柱色谱纯化(洗脱剂DCM/甲醇/乙酸100/20/5)。与甲苯一起共馏数次后得到0.38g白色固体状MeOOC-CH2-(D)-Chg-NH-3-(2-Me-6-Am)-pico·(HX)1.2(X_＝Cl和/或CH3COO_)，在155-160℃熔化。实施例232Boc-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-picoa) 5-羧酰胺基-2-吡啶甲基胺将3g阮内镍加入到3.5g(24mmol)2-氰基-5-羧酰胺基吡啶在80ml甲醇和20ml浓氨水的溶液中，在室温下进行氢化。在大约7小时后完成氢气的摄取。
通过抽滤除去催化剂后，将滤液浓缩并将残余物溶于20ml 2N的盐酸和20ml甲醇中。加入150ml乙酸乙酯使盐酸盐分离出来，将其抽滤并干燥(3.7g)。游离碱在198-202℃熔化。b) 5-氰基-2-吡啶甲基胺将41g(0.2 mmol)5-羧酰胺基-2-吡啶甲基胺悬浮于150ml甲醇和300ml二氯甲烷中，冷却至10℃并加入150ml三乙胺使之溶解。随后滴加47.6g(0.22mmol)的(Boc)2O的溶液。将混合物在室温下搅拌4小时。
蒸除溶剂后，将残余物与饱和K2CO3溶液混合并用二氯甲烷萃取5次。将合并的萃取液干燥并蒸除溶剂，在接近结束时加入甲苯。
将5.4g残余物悬浮于40ml二氧六环和15ml二氯甲烷中，加入4.3g吡啶，然后在0℃下滴加5.2g三氟乙酸酐，得到澄清透明溶液。
加入100ml水，用乙酸乙酯萃取，然后将有机相用稀的柠檬酸溶液、NaHCO3溶液和水洗。干燥并蒸除溶剂后留下黄色的油(约5g)，将其溶于15ml异丙醇和30ml乙酸乙酯中，加入35ml盐酸的醚溶液。
放置过夜后，将沉淀出来的盐酸盐抽滤并干燥。分离得到4g白色结晶。
熔点230-234℃。c) Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(5-氰基-2-吡啶甲基)酰胺按照实施例219步骤b)，通过将Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸与5-氰基-2-吡啶甲基胺偶联进行制备。
白色结晶，熔点128-129℃d) Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(6-脒基-2-吡啶甲基)酰胺按照实施例218步骤b)，将上一个化合物进行酰胺化。
乙酸盐白色结晶，熔点98-100℃(分解)；FAB-MS487(M+H+)实施例233H-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico在标准条件下将化合物233，步骤b)脱保护。
二盐酸盐白色结晶，熔点233-235℃(分解)FAB-MS386(MH+)实施例234HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-2-(5-Am)-pico按照实施例221步骤a)、b)、c)和d)，通过将Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(5-氰基-2-吡啶甲基)酰胺脱除Boc基团、不形成酰胺、用溴乙酸叔丁酯进行N-烷基化、成脒以及将叔丁酯酸水解得到标题化合物。
白色结晶，熔点162-4℃(分解)FAB-MS445(MH+)实施例235HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pyma) 2-硫代甲基-5-氨甲基嘧啶盐酸盐将28.1g(182.2mmol)2-硫代甲基-5-甲酰基嘧啶(Z.Arnold等，《杂环化学杂志)》J.Heterocyclic Chem.1991，28，1281)在-23℃下加入到880ml MeOH/THF(1∶1)中。加入12.8g(34.3mmol)CeCl3×7H2O，随后分批加入5.19g(137.2mmol)硼氢化钠。反应1.5小时后，向反应液中加入1.5l饱和NaCl溶液，将混合物用DCM(4×130ml)
萃取。将合并的有机相干燥并减压浓缩。产量26.9g。
将26.89g(172.14mmol)2-硫代甲基-5-羟甲基嘧啶溶于390mlDCM(无水)中，在加入1滴DMF和27ml(370.37mmol)SOCl2后，在0℃下搅拌45分钟。为了分离产品，将反应液蒸发至干。
将得到的2-硫代甲基-5-氯甲基嘧啶与16.79g(258.2mmol)NaN3一起在84ml DMSO中于室温下搅拌过夜。由于转变不完全，另外加入4.2gNaN3。继续反应2小时后，氯化的衍生物完全反应掉。为了分离产品，将反应混合物倒入300ml水中，用Et2O(5×100ml)萃取水相。
将合并的有机萃取液用水洗(3×25ml)，干燥，随后减压蒸除乙醚至近干。
将浓缩的2-硫代甲基-5-叠氮甲基嘧啶的醚溶液溶于28ml THF中，将其在冰浴冷却下小心地加入到45.15g(172.1mmol)Ph3P在84mlTHF的溶液中。15分钟后，撤走冰浴，将4.65ml水加入到反应混合物中，将反应液在室温下搅拌18小时。为了分离产品，将反应混合物减压蒸发至干，得到的残余物溶于70ml 3N HCl中。水溶液用乙酸乙酯/Et2O(1/1；4×50ml)洗。随后用Na2CO3将溶液调至pH9，并用DCM(12×50ml)萃取。将合并的有机相干燥并浓缩。残余物溶于DCM/乙酸乙酯中，用二氧六环/HCl处理时游离胺以盐酸盐的形式沉淀出来。产量30.48g。
1H-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))2.55(s，3H，CH3)；4.1(q，2H，N-CH2)；8.8(s，2H，Ar-H)；10.8(sb，NH)b)Boc-Pro-NH-5-(2-SMe)-pym将12.9g(60mmol)Boc-Pro-OH与15g(65.8mmol)2-硫代甲基-5-氨甲基嘧啶盐酸盐和61.4ml(359mmol)DIPEA一起在0℃下加入到150ml DCM中。加入63.4ml PPA(50％的乙酸乙酯溶液)后，将反应混合物在0℃-室温下搅拌6小时。在Boc-Pro-OH完全反应后(TLC检测DCM/MeOH 95∶5)，将反应混合物溶于300ml乙酸乙酯中。有机相用20％的硫酸氢钠溶液(2x)、水(2x)和饱和NaCl溶液洗。有机相用硫酸钠干燥，然后减压蒸除乙酸乙酯，得到16.7克所需产物。c)Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-Pym将20.5克(58.1毫摩尔)Boc-Pro-NH-5-(2-SMe)-Pym于室温加到700毫升DCM中。然后经30分钟分批加入42.94克(174毫摩尔)m-CPBA。反应2小时后，将反应混合物用20％浓度的硫酸氢钠(2×)、5％浓度的碳酸氢钠溶液(6×)和20％浓度的硫代硫酸钠溶液(3×)提取。将溶液干燥后，除去DCM，得到21.7克砜Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-Pym。d)Boc-Pro-NH-5-(2-CN)-pym将21.7克(56.4毫摩尔)Boc-Pro-NH-5-(2-SO2Me)-Pym溶于30毫升DMSO中，加入2.84克NaCN后，于室温搅拌过夜。然后将溶液倒入150毫升水中，水溶液用DCM提取(5×100毫升)。合并的有机相用饱和氯化钠溶液(5×)和水(2×)洗涤。干燥并浓缩有机溶液后，得到15.3克所需氰化物。e)H-Pro-NH-5-(2-CN)-pym×3TFA将13.98克(42.1毫摩尔)Boc-Pro-NH-5-(2-CN)-pym加到DCM中。加入13毫升(170毫摩尔)TFA后，将此溶液于室温搅拌直至前体反应完全(TLC检测)。减压浓缩溶液后残余所需盐，不必进一步纯化而将其用于下一反应。f)H-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym×3TFA于0℃加入10毫摩尔H-Pro-NH-5-(2-CN)-pym×3TFA、2.44克(9.5毫摩尔)Boc-D-Chg-OH和9.8毫升(57毫摩尔)DIPEA。加入10.1毫升PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)，将反应混合物搅拌6小时而升温至室温。将其用30毫升乙酸乙酯稀释，有机相用20％浓度的硫酸氢钠溶液(2×)、水(2×)和饱和氯化钠溶液洗涤。用硫酸钠干燥有机相，然后减压除去乙酸乙酯。残余4.74克所需产物。将按此方式得到的粗产物如上转化为相应的三氟乙酸盐。g)tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym将4.1克(11.07毫摩尔)H-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-CN)-pym×3TFA与1.68克(12.17毫摩尔)碳酸钾和1.63毫升(11.07毫摩尔)溴代乙酸叔丁酯于室温下一起搅拌。反应完全后，滤除碳酸钾，在旋转蒸发仪中浓缩滤液。将残余物溶于乙酸乙酯中，有机溶液用碳酸氢钠溶液(5％浓度)和饱和氯化钠溶液洗涤。然后减压除去溶剂(粗产率3.66克)。通过柱色谱纯化粗产物(DCM/甲醇98/2+0.5％浓度的氨水溶液)。得到1.3克纯净产物。h)tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym将1.3克(2.68毫摩尔)tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-SMe)-pym溶于15毫升乙醇中，加入0.5克(6.71毫摩尔)羟基氯化铵和2.5毫升DIPEA后，于60℃搅拌4小时。在旋转蒸发仪中浓缩反应混合物，于DCM中回收。用少许水洗涤有机溶液后，干燥并浓缩，将粗产物再溶于乙醇中，加入Raney镍后，于氢气下60℃氢化4小时。过滤除去Raney镍后，浓缩乙醇中的溶液，在硅胶上通过柱分离纯化粗产物(DCM/甲醇/50％乙酸40/10/2)。产率250毫克。i)HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym用TFA/DCM将250毫克tBuOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-5-(2-Am)-pym分解成酸，通过柱色谱纯化粗产物(甲醇/3％浓度的氨水)。产率108毫克。MS446(M+H+)，369实施例236(D)-Man-Pro-NH-4-(1-Am)-pip室温下加入1.9克(12.6毫摩尔)1-羟基-苯并三唑和3.3克(25毫摩尔)二环己基碳化二亚胺后，将4.2克(12.6毫摩尔)O-四氢吡喃基-(D)-2-苯基-2-羟基乙酰基-(L)-脯氨酸(WO93/18060)的40毫升THF溶液搅拌4小时。抽吸滤除沉淀下来的脲，用少许THF洗涤。在此滤液中于5℃加入2.9(12.6毫摩尔)1-脒基-4-氨基甲基哌啶二盐酸盐和1.6克碳酸氢钠的6毫升水溶液。室温下搅拌48小时后，蒸馏除去溶剂，将残余物回收到乙醇中，滤除不溶物，再次浓缩溶液。
在硅胶柱上纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇/50％浓度乙酸的混合物(45/5/1.5)洗脱。蒸馏掉纯净级分的洗脱液，近完时加入甲苯，加入少许水将残余物从50毫升丙酮中重结晶。分离出3.5克白色晶状乙酸盐，熔点199-202℃(分解)；FAB-MS388(M+H+)。实施例239Boc-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmba)Boc-Prp-(4-氰基-2-甲氧基)苄酰胺将溶于80毫升THF中的16.0克Boc-脯氨酸(50毫摩尔)与5.7克羟基琥珀酰亚胺和10.2克DCC于0℃搅拌30分钟。然后于0℃滴加入溶于50毫升THF中的4-氨基甲基-3-甲氧基苄腈，将混合物于室温搅拌20小时。滤除固体，将滤液与相同体积的乙酸乙酯混合，用5％浓度的冷硫酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤。得到11.5克(65％)产物。
1H-NMR(DMSO-d6；δ(ppm))8.38(m，NH)；7.50-7.35(m，3H)；4.40-4.05(m，3H，N-CH2-Ar/N-CH-CO)；3.87(s，OCH3)；3.50-3.25(m，2H，N-CH2)；2.2.5[sic]-2.00(m，1H)；1.90-1.65(m，3H)；1.40 and 1.30(2s；9H)b)H-Pro-(4-氰基-2-甲氧基)苄酰胺将11.4克(31.7毫摩尔)Boc-脯氨酸(2-甲氧基-4-氰基)-苄酰胺溶于130毫升DCM中，用HCl气体于0-5℃饱和。2小时后，Boc基团完全被消除。减压除去溶剂，不必进一步纯化而将产物用于下一反应。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)10.25(s，1H)；8.60(s，1H)；7.50(d，1H)；7.42(dd，1H)；7.39(d，1H)；4.40-4.20(m，3H)；3.88(s，3H)；3.20(m，2H)；2.35(m，1H)；2.00-1.80(m，3H)c)Boc-(D)-Phe-Pro-(4-氰基-2-甲氧基)苄酰胺将3.54克(13.35毫摩尔)Boc-(D)-Phe-Pro-OH、9.9毫升DIPEA和4.80克(13.35毫摩尔)H-Pro-(4-氰基-2-甲氧基)苄酰胺盐酸盐于-5℃与11.1毫升(15.0毫摩尔)PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)在100毫升DCM中混合并于0℃搅拌2小时。顺序用1N氢氧化钠、1N盐酸和饱和盐水洗涤反应混合物，用硫酸钠干燥。气提溶剂后得到6.5克(96％)产物。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)8.75/7.88(1H，NH(2旋转体))，7.5-7.1(9H，芳香H和NH)，4.4-4.1(4H，CH2和2xCH)，3.85(3H，OCH3)，3.7-3.4(2H，CH2)，3.0-2.7(2H，CH2)，2.3-1.5(4H，2xCH2)，1.3-1.1(9H，Boc)d)Boc-(D)-Phe-Pro-(4-脒基-2-甲氧基)苄酰胺按照A.III.I将前一步骤的腈转化为4.6克脒氢碘化物。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.25/8.85(4H，脒)，8.75/7.95(1H，NH(2旋转体))，7.4-7.1(9H，芳香H和NH)，4.45-4.10(4H，CH2和2xCH)，3.90(3H，OCH3)，3.65-ca.3.4(2H，CH2)，3.0-2.7(2H，CH2)，1.95-1.55(4H，2xCH2，1.3-1.2(9H，Boc)实施例240H-(D)-Phe-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb在乙酸盐离子交换器(IRA 420)上将脒氢碘化物(实施例239)转化为脒乙酸盐，然后溶于50毫升DCM中，于0℃用HCl气体饱和。1小时后，蒸除溶剂。得到3.0克脒的二盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.50/9.27(4H，脒)，8.80(3H，NH3+)，8.75(1H，NH)，7.50-7.20(8H，芳香H)，4.35-4.10(4H，CH2和2xCH)，3.90(3H，OCH3)，ca.1.9-1.35(4H，2xCH2)实施例241Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmba)Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-(4-氰基-2-甲氧基)苄酰胺
将1.55克(5.25毫摩尔)Boc-(D)-Phe(4-MeO)-OH、3.9毫升DIPEA和1.55克(5.25毫摩尔)脯氨酸(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺盐酸盐于-5℃与4.4毫升(5.9毫摩尔)PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)在35毫升DCM中混合并于0℃搅拌1小时。顺序用1N氢氧化钠、1N盐酸和饱和盐水洗涤反应混合物，用硫酸钠干燥。气提溶剂后得到2.4克固体。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)8.72和7.87(t，2H)；7.42(1H)；7.35(m，3H)；7.15(d，2H)；6.85(d，2H)；7.00/6.70(2d，1H(2旋转体))1H；4.40-4.10(m，4H)；3.85(s，3H)；3.70(s，3H)；3.05-2.55(m，2H)；1.95-1.55(m，4H)；1.2(s，9H)b)Boc-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb按照A.III.I将2.4克腈(实施例241/a)转化，在硅胶上通过柱色谱纯化(流动相DCM/甲醇9/1)后，得到1.7克脒氢碘化物。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.25/8.85(4H，脒)，7.95(1H，NH)，7.4-6.8(8H，芳香H and NH)，4.4-4.1(4H，CH2和2xCH)，3.90/3.70(6H，2xOCH3)，ca.3.7-2.9(2H，CH2)，3.0-2.6(2H，CH2)，1.9-1.5(4H，2xCH2)，1.3-1.2(9H，Boc)实施例242H-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb在乙酸盐离子交换器(IRA 420)上将1.7克脒氢碘化物(实施例241)转化为乙酸盐，然后按照实施例240除去Boc基团。得到1.0克二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.50/0.25(4H，脒)，8m85-8.65(4H，NH和NH2+)，7.50-7.30和7.15/6.90(7H，芳香H)，4.28-4.05(4H，CH2和2xCH)，3.90/3.75(6H，2xOCH3)，3.20-2.85(2H，CH2)，1.95-1.40(4H，2xCH2)；FAB-MS454(M+H+)实施例243HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb
按照实施例240将实施例241a)中的化合物的Boc基团分解。将3.5克这种分解后的产物溶于80毫升DCM中，与4.45毫升DIPEA和1.09毫升溴代乙酸叔丁酯在室温下搅拌3天。按照实施例246a)收集产物。按照实施例246b)使3.0克所得化合物tBuOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺与羟基胺盐酸盐反应，将3.1克所得羟基脒用185毫克Raney镍在65毫升甲醇中氢化，于50℃向其中加入0.31毫升冰醋酸而得脒乙酸盐。滤除催化剂，将tBuOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-(2-MeO)-pAmb乙酸盐在硅胶上通过柱色谱纯化(流动相DCM+10％甲醇+2％(50％浓度)乙酸)。得到1.3克叔丁酯(FAB-MS568(M+H+))，按照实施例246d)将1.15克转化为850毫克HOOC-CH2-(D)-Phe(4-MeO)-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.9-9.7和9.2-9.0(2H，NH2+)，9.60/9.35(4H，脒)，7.50-6.73(5H，芳香H)，4.50-3.45(8H，3xCH2和2xCH)，3.90(3H，OCH3)，3.73(3H，OCH3)，3.40-3.27和3.06-2.87(2H，CH2)，2.43-1.25(4H，2xCH2)实施例244Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmba)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺于-5℃将20.8毫升DIPEA(121毫摩尔)、4.58克(28.2毫摩尔)2-甲氧基-4-氰基苄酰胺和25毫升PPA(50％浓度的乙酸乙酯溶液)加到10.0克(28.2毫摩尔)Boc-(D)-Chg-Pro-OH的70毫升无水二氯甲烷溶液中，于0℃搅拌2小时。
将该溶液顺序用0.5N氢氧化钠溶液、1N盐酸和饱和盐水洗涤，以硫酸钠干燥，减压彻底蒸除溶剂。不必进一步纯化而将定量产出的产物在下一步骤中反应。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)7.9(1H，NH)，7.45和7.35(3H，芳香H)，7.1(1H，NH)，4.45-3.50(6H，2xCH2和2xCH)，3.86(3H，OCH3)，2.2-1.0(24H，环己基+2xCH2+Boc)b)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-羟基-脒基)苄酰胺按照实施例246b)使12.0克(24毫摩尔)氰基前体(a)与羟基胺盐酸盐反应。产物定量以沉淀物形式沉淀出。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.7-9.5(1H，OH)，5.8(2H，NH2)c)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-脒基)苄酰胺按照实施例243将羟基脒基化合物(b)用Raney镍氢化。将产物在硅胶上通过柱色谱纯化(流动相二氯甲烷/10％-20％甲醇/2％(50％浓度)乙酸)。得到10.5克脒的乙酸盐(产率75％-以腈(a)开始)；1H-NMR(DMSO-d6，δppm)以乙酸盐形式存在的脒基在约10-8ppm表现出极宽的信号； ；7.95(1H，NH)，7.4-7.3(3H，芳香H)，7.05(1H，NH)，4.4-3.4(6H，2xCH2和2xCH)，3.89(3H，OCH3)，2.2-1.0(24H，环己基+2xCH2+Boc)实施例245H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb将10.5克Boc-(D)-Chg-Pro-(2-甲氧基-4-脒基)苄酰胺溶于200毫升/10毫升无水二氯甲烷/甲醇中，于0-5℃通入Hcl 1小时。于0℃再搅拌1小时后，减压彻底蒸除溶剂后得到7.6克(86％)产物的二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.60 and 9.33(4H，脒)，8.87(1H，NH)，8.62(3H，NH3+)，7.5-7.3(3H，芳香H)，4.45-4.15(4H，CH2和2xCH)，3.95(3H，OCH3)，3.95-3.82(1H，CH2)，3.65-3.55(1H，CH2)，2.2-1.0(15H，环己基and 2xCH2)实施例246HOOC-CH2-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pAmb(a)N-叔丁氧羰基甲基-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺将0.72克(1.65毫摩尔)H-(D)-Chg-Pro-(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺盐酸盐加到30毫升无水二氯甲烷中。加入1毫升(5.8毫摩尔)DIPEA，然后在40分钟内滴加入1.65毫摩尔溴代乙酸叔丁酯和15毫升二氯甲烷的溶液。将反应混合物于室温搅拌3天，然后顺序用0.5N氢氧化钠溶液、0.5N NHCl和饱和盐水洗涤。干燥而得0.7克粗产物，不必进一步纯化而将其用于下一步骤。(b)N-叔丁氧羰基甲基-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-羟基脒基)苄酰胺将1.45克(2.8毫摩尔)2-甲氧基-4-氰基苄酰胺(a)溶于20毫升1∶1的二氯甲烷/甲醇中，与0.49克(7.1毫摩尔)羟基胺盐酸盐和2.8毫升DIPEA一起于室温搅拌20小时。蒸除溶剂后，将产物回收到二氯甲烷中，用水和饱和盐水洗涤并干燥。得到1.2粗产物，即可进一步使用。(c)N-叔丁氧羰基甲基-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-脒基)苄酰胺按照实施例243将羟基脒基化合物(b)用Raney镍氢化。将产物在硅胶上通过柱色谱纯化(流动相二氯甲烷/10％-20％甲醇/2％(50％浓度)乙酸)，得到0.5克产物的乙酸盐。(d)N-羟基羰基甲基-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-甲氧基-4-脒基)苄酰胺将0.5克(0.85毫摩尔)乙酸脒(c)溶于25毫升无水二氯甲烷中。于0-5℃通入HCl气体直至溶剂饱和。40分钟后，继续于室温搅拌1小时。减压蒸除溶剂后，得到370毫克纯净产物的二盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δin ppm)9.57和9.33(4H，脒)；9.8-9.1(2H，NH2+)，7.6-7.3(3H，芳香H)；4.5-4.1(4H，1xCH2和2xCH)；3.93(3H，OCH3)，3.9-3.4(4H，2xCH2)，2.3-1.0(15H，环己基和2xCH2)实施例247Boc-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmba)Boc-(L)-氮杂环丁烷-2-羧酸(2-甲氧基-4-氰基)-苄酰胺将1.22克(10.5毫摩尔)羟基琥珀酰亚胺和2.18克(10.5毫摩尔)DCC于0-5℃加到2.12克Boc-(L)-氮杂环丁烷-2-羧酸(10.5毫摩尔)的50毫升THF溶液中，搅拌混合物30分钟。然后在0-5℃加入2.10克(10.5毫摩尔)2-甲氧基-4-氰基苄胺盐酸盐和1.48毫升三乙胺。将反应混合物于室温搅拌过夜。在吸滤漏斗上除去沉淀下来的脲，将滤液回收到乙酸乙酯中，顺序用0.5N盐酸、0.5N氢氧化钠溶液和饱和盐水洗涤。用硫酸钠干燥溶剂，然后减压彻底蒸除溶剂。得到3.1克(85％)产物，不必进一步纯化而使用。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)8.5(1H，NH)；7.48和7.40-7.25(3H，芳香H)；4.55(dd，1H，CH)；4.45-4.15(2H，CH2)，3.88(3H，OCH3)，3.9-3.7(2H，CH2)，2.5-2.3(1H，CH2)；2.15-1.95(1H，CH2)；1.35(9H，Boc)(b)(L)-氮杂环丁烷-2-羧酸(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺按照实施例239(b)将3.0克(8.7毫摩尔)Boc-Aze-(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺几乎定量转化为所需产物(b)。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)10.O-9.85(1H，NH2+)，7.50和7.45-7.35(3H，芳香H)；5.10-4.95(1H，CH)；4.35(d，2H，CH2)；4.05-3.65(2H，CH2)；3.89(3H，OCH3)；2.8-2.6(1H，CH2)；2.5-2.3(1H，CH2)(c)Boc-(D)-环己基甘氨酰-(L)-氮杂环丁烷-2-羧酸(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺按照实施例241(a)将2.2克Boc-(D)-Chg-OH与2.4克H-Aze-(2-甲氧基-4-氰基)苄酰胺盐酸盐反应。得到3.5克。(d)Boc-(D)-环己基甘氨酰-(L)-氮杂环丁烷-2-羧酸(2-甲氧基-4-脒基)苄酰胺按照实施例246(b)将3.4克腈(c)与羟基胺盐酸盐反应，将所得羟基脒按照实施例243用Raney镍氢化。得到3.1克脒的乙酸盐。实施例248H-(D)-Chg-Aze-NH-(2-MeO)-pAmb
按照实施例245将3.1克Boc化合物(实施例247)分解成二盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.45/9.20(4H，脒)；9.0(1H，NH)；8.55(3H，NH3+)；7.45/7.40(3H，芳香H)；4.75-4.10(4H，CH2和2xCH)；3.90(3H，OCH3)，2.7-1.0(13H，环己基和CH2)实施例249Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPro)-pAmb按照实施例239(a)将4.1克(11.5毫摩尔)Boc-(D)-Chg-Pro-OH与一当量的羟基琥珀酰亚胺、DCC、4-氨基甲基-3-异丙氧基-苄腈盐酸盐和三乙胺反应。得到5.7克(94％)粗产物，不必进一步纯化而将其用于以下步骤。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)7.85(1H，NH)；7.43和7.30(3H，芳香H)；7.08(1H，NH)；4.80-3.50(7H，2xCH2，3xCH)；2.2-1.0(30H，Boc+环己基 +2xCH3+2xCH2)实施例250H-(D)-Chg-Pro-NH-(2-iPro)-pAmb按照实施例246(b)将5.7克Boc化合物(实施例249)与羟基胺盐酸盐反应，将所得羟基脒按照实施例243用Raney镍氢化。按照实施例245将所得脒乙酸盐分解。得到3.1克产物的二盐酸盐。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.40/9.15(4H，脒)；8.75(1H，NH)；8.55(3H，NH3+)；7.40-7.25(3H，al芳香，ic H)；4.80(1H，CH)；4.4-3.5(6H，2xCH2和2xCH)；2.3-1.0(15H，环己基和2xCH2)，1.3(6H，2xCH3)实施例251Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-Cl)-pAmb(a)Boc-脯氨酸(2-氯-4-氰基)苄酰胺按照实施例244(a)将5.4克(24毫摩尔)Boc-Pro-OH与20毫升PPA、17.9毫升DIPEA和4.0克(24毫摩尔)2-氯-4-氰基苄酰胺反应而得Boc-Pro-(2-氯-4-氰基)苄酰胺。得到7.0克(80％)产物。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)8.57(1H，NH)；8.05-7.45(3H，芳香H)；4.50-4.10(3H，CH2和CH)；3.4-3.2(2H，CH2)；2.25-1.70(4H，2xCH2)；1.4-1.3(9H，Boc)(b)脯氨酸(2-氯-4-氰基)苄酰胺盐酸盐按照实施例239(b)消除Boc基团。得到5.6克(97％)盐酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)10.2和8.6(NH2+)，9.45(1H，NH)；8.05-7.50(3H，芳香H)；4.45(d，2H，CH2)；4.28(1H，CH)；3.20(2H，CH2)，2.40-1.80(4H，2xCH2)(c)Boc-(D)-环己基甘氨酰-脯氨酸(2-氯-4-氰基)苄酰胺按照实施例241(a)将4.76克(18.7毫摩尔)Boc-(D)-环己基甘氨酸与15.5毫升PPA、14毫升DIPEA和5.6克(18.7毫摩尔)盐酸盐(b)反应而得Boc-(D)-Chg-Pro-(2-氯-4-氰基)苄酰胺。得到8.7克(92％)产物。(d)Boc-(D)-环己基甘氨酰脯氨酸(2-氯-4-羟基脒基)苄酰胺按照实施例246(b)将物质(c)中的氰基与羟基胺反应而得定量产率的Boc-(D)-Chg-Pro-(2-氯-4-羟基脒基)苄酰胺。得到4.6克产物。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.75(1H，OH)；5.90(2H，NH2)(e)Boc-(D)-环己基脯氨酸(2-氯-4-脒基)苄酰胺按照实施例243将4.6克羟基脒(d)用Raney镍氢化成脒。在硅胶上通过柱色谱纯化(流动相二氯甲烷/15％甲醇/2％(50％浓度)乙酸)，得到5.4克脒的乙酸盐。
1H-NMR(DMSO-d6，δppm)乙酸盐形式的脒的信号因为太宽无法定位；8.15(1H，NH)，7.9-7.5(3H，芳香H)，7.05(1H，NH)，4.5-3.4(6H，2×CH2和2×CH)，2.2-1.0(24，环己基+2×CH2+Boc)实施例252H-(D)-Chg-Pro-NH-2(Cl)-pAmb按照实施例245将Boc从实施例251脱除。以二盐酸盐的形式得到3.0g(65％)产物。1H-NMR(DMSO-d6，δppm)9.55和9.34(4H，脒)，9.05(1H，NH)，8.60(3H，NH3+)，7.95-7.48(3H，芳香H)，4.5-3.5(6H，2xCH2，2xCH)，2.25-1.0(15H，环己基+2xCH2)实施例253H-(D)-Phe-Pro-(D，L)(4-Am)-PhgOMe该化合物通过从实施例18脱除Cbz进行制备。
1H-NMR(d6-DMSO，δppm)9/9.2/8.85/8.8(4d，1H，NH)；7.8(m，2H，Ar-H)；7.6(m，2H，Ar-H)；7.3-7.0(m 5H，Ar-H)；5.7/5.6(2d，1H，α-H)；4.8/4.4(2dd，1H，α-Phe)；3.9(m 1H，α-Pro)；3.75(2s，3H，OCH3)；3.6(2H，δ-Pro)；3.0-2.6(m，2H，CH2-Ph)；2.2-1.6(m，4H，β/γ-Pro)MS452(M+H+)，305，192；熔点71-73℃(二乙酸盐)实施例256H-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-picoa) 2-甲氧基-3-吡啶甲基醇·HCl将20.0g 2-甲氧基烟酸(130.59mmol)与28.7ml N-甲基吗啉(261.18mmol)一起在-10℃下加入到THF中，然后迅速滴加25.4ml氯甲酸异丁酯(195.89mmol)在50ml THF中的溶液，在此过程中析出沉淀。在0℃搅拌一小时后，分批加入16.3g硼氢化钠(430.95mmol)，随后缓慢滴加250ml甲醇(剧烈地放出气体并且放热的反应)。抽滤除去沉淀后，将滤液在旋转蒸发仪上减压浓缩，残余物溶于乙酸乙酯中，用水、稀盐酸(pH＝2)、饱和盐水洗涤(保持水相的量在很少)，用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上浓缩。将残余物溶于醚中，加入盐酸的醚溶液，抽滤沉淀并用醚通过搅拌进行萃取。得到16.3g白色的(71
％)2-甲氧基-3-吡啶甲基醇盐酸盐。b) 2-甲氧基-3-吡啶甲基氯化物·HCl将51ml亚硫酰氯(696.67mmol)滴加到17g的2-甲氧基-3-吡啶甲基醇·HCl(96.76mmol)在60ml DCM的悬浮液中，将该溶液在室温下搅拌1小时，减压蒸除溶剂及过量的亚硫酰氯，残余物与甲醇一起在减压下共馏4次，随后用醚通过搅拌进行萃取。得到15.2g(81％)白色结晶状2-甲氧基-3-吡啶甲基氯化物盐酸盐。c) 2-甲氧基-3-吡啶甲基胺·2HCl在35℃及持续通入氨气下，将15.1g 2-甲氧基-3-吡啶甲基氯化物盐酸盐(77.76mmol)缓慢滴加到600ml 30％的氨水和250ml甲醇的混合物中。溶液在35℃搅拌1小时后，将其在旋转蒸发仪上减压浓缩，残余物用20％的NaOH溶液调至碱性(水相保持在很少)并用DCM萃取多次，将有机相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。将残余物溶于醚中，并在加入盐酸的醚溶液后进行抽滤，用醚洗涤沉淀，得到11.0g(67％)白色结晶状2-甲氧基-3-吡啶甲基胺·2HCl。d) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO)-pico按照Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-Me)-pico(实施例227)进行制备。收率92％。e) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-1-氧代)-pico将4.9g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-(2-MeO)-pico(10.32mmol)溶于100ml DCM中，加入3.6g间氯过苯甲酸(20.64mmol)并将混合物在室温下搅拌数日(TLC显示仅有部分转变)。随后将溶液用DCM稀释，硫酸镁干燥并通入氨气至饱和，滤除沉淀，将滤液减压浓缩。将产物混合物溶于醚中，并用1M硫酸氢钾溶液(pH2)萃取，水相用碳酸钾调至碱性，用DCM萃取多次，硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。
得到1.6g固体泡沫状Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-1-氧代)-pico。
可以从酸性的醚萃取液中回收到3.1g前体，可再次用于N-氧化物的制备。重复数次后得到总量为4.2g的产物。f) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-pico将4.2g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-pico(8.56mmol)与16ml三甲基硅基氰、5ml1，2-二氯乙烷和10ml二甲基氨基甲酰氯一起使用，迅速加热至70℃并在该温度下搅拌10分钟。减压浓缩后将产物用硅胶柱色谱分离(洗脱剂DCM+0.5→1.5％MeOH)(2个主要成分，TLCRf＝0.46和0.26，洗脱剂DCM/MeOH＝95/5)。
第一个主要级分含有1.17g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-pico。g) Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-pico的制备室温下，将1.17g Boc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-CN)-pico(2.34mmol)与0.41g氯化羟铵和2ml DIPEA(11.7mmol)一起在10ml DCM中搅拌4小时，然后在旋转蒸发仪上减压浓缩，残余物溶于乙酸乙酯中，并用稀盐酸(pH4)洗涤数次，将有机相用硫酸镁干燥并在旋转蒸发仪上减压浓缩。得到的产物混合物(2个成分，TLCRf＝0.54和0.42，洗脱剂DCM/MeOH＝9/1)通过硅胶柱色谱进行分离(洗脱剂DCM+0.5→1.5％MeOH)。第一个主要级分含有300mgBoc-(D)-Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-pico。
13C-NMR(d6-DMSO，δ(ppm))171.16，170.46，159.13，155.69，148.89，145.44，135.84，120.76，111.53，77.80，59.55，56.66，52.84，46.56，38.4，36.32，28.87，28.38，28.17，27.72，27.57，25.37，25.29，25.09，23.65.h) Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico
60℃下，将300mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Ham)-pico(0.56mmol)在10ml乙醇和2ml乙酸中在Pd/C(10％)上氢化4小时。滤除催化剂并将反应液减压浓缩，得到260mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico粗品，不经纯化将其直接用于随后的反应中。i) H-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico室温下，将260mg Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico粗品与5ml盐酸的醚溶液一起在5ml DCM和5ml甲醇中搅拌过夜，将反应混合物减压浓缩，残余物与甲苯/甲醇一起共馏数次，随后与醚一起搅拌进行萃取。得到210mg白色结晶状Boc-(D)Chg-Pro-NH-3-(2-MeO-6-Am)-pico·(HCl)1.2。熔点205-212℃FAB-MS(M+H)+＝41权利要求
1.一种通式I的化合物及其与生理可耐受酸的盐和其立体异构体
其中的取代基具有下述含义
(a＝2，3，4，5或6，CH2基团可以被O、S、NH、NC1-4-烷基替代)
(X2＝O，NX1，S；b＝0，1)，
(X3＝H，C1-4-烷基，F，Cl，OH，OCH3)，
(X4＝H，F，Cl，CF3，Br，C1-4-烷基，苯基，苄基，OH，C1-4-烷氧基，苯氧基，苯基-C1-4-烷氧基，NO2，-COOH，-COOC1-4-烷基；X5＝H，F，Cl，Br，C1-4-烷基，苯基，苄基，OH，C1-4-烷氧基，苯氧基，苯基-C1-4-烷氧基，-COOH，-COOC1-4-烷基，X6＝H，F，Cl，Br，C1-4-烷基，OH，C1-4-烷氧基，X7＝H，F，Cl，X8＝H，F，Cl，X9＝NH2，OH)，
(X10＝H，C1-4-烷基，OH，OCH3(X11＝H，C1-4-烷基，OH，OCH3)，
[c＝1，2；X12＝OH，C1-4-烷氧基，苯基-C1-4-烷氧基，NH2，NH-C1-4-烷基，-NX13X14，(X13＝C1-8-烷基，X14＝C1-4-烷基或X13+X14＝-(CH2)d-(d＝3，4，5，6，7)]，X13-SO2-CH2-CH2-CHNH2-CO-，H2N-CH2-CO-，H2N-CHX13-CO--其中在所有上述A基团中，α-NH或α-NH2基可以被C1-12烷基、苯基-C1-4-亚烷基、X12OC-C1-6-亚烷基、X12OC-C1-6-烷基羰基、-α-或β-萘基-C1-4-亚烷基、C1-12-烷基羰基、苯基-C1-4-烷基羰基、C1-7-烷氧羰基、苯基-C1-5-烷氧羰基、-α-或β-萘基-C1-4-烷基羰基-、C1-6-烷基氨基羰基或苯基-C1-4-烷基氨基羰基-单取代或双取代以及AX1-NH-CH2-CH2-CO-，X1-NH-CH2-CH2-CH2-CO-X15-(CH2)f-SO2-(f＝0，1，2，3，4，X15＝未取代或被1-3个CH3和/或CH3O基团取代的苯基或者α-或β-萘基，或者是下述基团之一
以及A
(X16＝H，F，Cl，Br，CF3，OH，C1-8-烷基，C1-4-烷氧基，X17＝H，OH，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，g＝1，2，3，4，5，6，7，8)
X18-O-CO-C1-4-亚烷基-CO-(X18＝H，C1-4-烷基)，C1-12-烷基-CO-，C1-10-烷基-NH-CO-，苯基-C1-4-亚烷基-NH-CO-，α-或β-萘基-CO-或者C3-7-环烷基-CO-，
(h＝2，3或4，CH2基团可被CHOH、NX1、SO基团或者O或S原子替代)
(X18＝H或C1-4-烷基，X19＝H，C1-6-烷基，苯基，苄基，环己基或环己基甲基)R1H或C1-4-烷基R2H或C1-4-烷基R3H，C1-8-烷基，苯基，苯基-C1-4-亚烷基，CH2OH，-CO-X20，-CO-CO-X20(X20＝H，C1-4-烷氧基，C1-4-烷基，苯基，苯基-C1-4-亚烷基，苯基-C1-4-烷氧基，CF3，C2F5，N-端基连接的天然氨基酸，CH2OH，-CH2-O-C1-4-烷基，NH-(C1-4-亚烷基)-苯基或NH-C1-6-烷基)，m0，1，2或3D在其间位或对位相连有(CH2)m和(NH)n的亚苯基，其(CH2)m的邻位可被F，Cl，Br，HO-CH2-，OH，NH2，NO2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基或COX21(X21＝H，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，OH，NH2，NH-C1-4-烷基)-O-(CH2)1-3-CO-X21或者-(CH2)1-3-CO-X21取代，在其间位或对位相连有(CH2)m和(NH)n的亚吡啶基、亚嘧啶基、亚吡嗪基或亚哒嗪基，其(CH2)m的邻位可被F，Cl，Br，HO-CH2-，OH，NH2，NO2，C1-4-烷氧基，C1-6-烷基或COX21(X21＝H，C1-4-烷基，C1-4-烷氧基，OH，NH2，NH-C1-4-烷基)-O-(CH2)1-3-CO-X21或-(CH2)1-3-CO-X21取代，1，4-或1，3-亚环己基，其(CH2)m邻位的一个CH2可被NH，O，S或SO取代，或者亚哌啶基，其在相对于氮原子的3或4位上连接(CH2)m，而氮原子自身携带C(＝NH)NHR4基团，n0或1，R4H，-CO-C1-20-烷基，-CO-O-C1-20-烷基，OH或NH2。
2.用于控制疾病的权利要求1的通式I的化合物。
3.通式II的化合物
其中R1，R2，R3和D具有通式I规定的含义，并且R5是H、C1-4-烷氧基-CO-或苯基-C1-3-烷氧基-CO-，R6是在C(R2，R3)间位或对位的氰基、脒基或胍基和p是1、2或3。
全文摘要
本发明描述了通式I的化合物及其与生理可耐受酸的盐和其立体异构体其中取代基具有在说明书中记载的含义。本发明还公开了用于其制备的中间体。此化合物适用于控制疾病。
文档编号C07D207/06GK1154114SQ95194212
公开日1997年7月9日 申请日期1995年6月6日 优先权日1994年6月17日
发明者H·J·博姆, S·科瑟尔, H·马克, T·普费夫尔, W·塞兹, H·W·霍夫肯, W·霍恩伯格 申请人:巴斯福股份公司