专利名称：卤代的蛋白激酶c抑制剂的制作方法
蛋白激酶C(PKC)由起丝氨酸/苏氨酸激酶作用的密切相关的酶家族组成。蛋白激酶C在细胞-细胞信号、基因表达和细胞分化和生长的控制中起着重要的作用。目前，已知至少存在十种PKC的同功酶，它们具有不同的组织分布、酶特异性和调节性(Nishizuka Y.Annu.Rev.Biochem.58:31-44(1989)；Nishizuka Y.Science 258:607-614(1992))。
蛋白激酶C同功酶为单多肽链，链长为592-737个氨基酸。所述同功酶含有由连接肽连接的调节域和催化域。所述调节和催化域可以进一步分为恒定区和可变区。蛋白激酶C的催化域与其它的蛋白激酶中所见的非常相似，而PKC同功酶的调节域是独一无二的。已经证明所述组中PKC同功酶的氨基酸水平具有40-80％的同源性。然而，不同种属之间的单一的同功酶的同源性一般大于97％。
蛋白激酶C为与膜有关的酶，它可以受多种因素变构调节，这些因素包括膜磷脂、钙和某些膜脂质例如响应于磷脂酶的活性所释放的二酰基甘油(Bell,R.M.和Bums,D.J.,J.Biol.Chem.266:4661-4664(1991)；Nishizuka,Y.Science 258:607-614(1992))。蛋白激酶C同功酶α、β-1、β-2和γ的完全激活需要膜磷脂、钙和二酰基甘油/佛波醇酯。PKC的δ、ε、η和θ形式在它们的激活模式中是钙依赖性的。PKC的ξ和λ形式既不依赖于钙又不依赖于二酰基甘油，据信它们的激活仅仅需要膜磷脂。
在某一疾病状态可能仅仅涉及到一种或两种蛋白激酶C同功酶。例如，糖尿病的升高的血糖水平仅导致血管组织中β-2同功酶的特异性同功酶升高(Inoguchi等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:11059-11065(1992))。与糖尿病相关的人血小板β同功酶的升高与它们改变的对激动剂的反应有关(Bastyr Ⅲ,E.J.和Lu,J.Diabetes 42:(Suppl.1)97A(1993))。已经表明人维生素D受体可以被蛋白激酶Cβ选择性磷酸化。该磷酸化与该受体的功能的改变有关(Hsieh等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:9315-9319(1991)；Hsieh等，J.Biol.Chem.268:15118-15126(1993))。此外，最近的研究表明β-2同功酶负责红白血病细胞的增殖，而α同功酶与这些细胞的巨核细胞分化有关(Murray等，J.Biol.Chem.268:15874-15853(1993))。
蛋白激酶C同功酶的普遍存在的性质及其它们在生理上的重要作用激励人们生产高选择性的PKC抑制剂。考虑到某些同功酶与疾病有关，因此人们有理由假定可以选择性抑制一种或两种蛋白激酶C同功酶而不抑制其它的PKC同功酶和其它的蛋白激酶的抑制性化合物是优异的治疗药物。根据此类化合物的特异性，这些化合物应该具有更大的效力和更低的毒性。
星状孢子因(staurosporine)，一种微生物产生的吲哚并咔唑为蛋白激酶C的有效的抑制剂，它可以与所述酶的催化域相互作用(Tamaoki等，Biochem.Biophys.Res.Commun.135:397-402(1986)；Gross等，Biochem.Pharmacol.40:343-350(1990))。然而，该分子和密切相关的化合物的治疗用途受到限制，因为对于蛋白激酶C与其它的蛋白激酶缺乏特异性(Ruegg,U.T.和Burgess,GM.,Trends Pharmacol.Sci.10:218-220(1989))。该选择性的缺乏导致该类分子的不能令人接受的毒性。
与星状孢子因有关的另一类化合物双吲哚马来酰亚胺成为最近研究的焦点(Davis等，FEBS Lett 259:61-63(1989)；Twoemy等，Biochem.Biophys.Res.Commun.171:1087-1092(1990)；Toullec等，J.Biol.Chem.266:15771-15781(1991)；Davis等，J.Med.Chem.35:994-1001(1992)；Bitetal,J.Med.Chem.36:21-29(1993))。已经证明部分此类化合物选择性作用于蛋白激酶C而不是其它的蛋白激酶。
尽管已经发现显示对蛋白激酶C特异性的化合物，但是已知很少具有同功酶选择性。例如，对星状孢子因同功酶选择性的分析表明几乎无同功酶选择性，而相对于其它的同功酶仅仅对ξ同功酶具有很弱的抑制(50 McGlynn等，J.Cell.Biochem.49:239-250(1992)；Ward,N.E.和O’Brian,C.A.,Malec.Pharmacol.41:387-392(1992))。对于PKC-选择性化合物3-[1-(3-二甲基氨基丙基)-吲哚-3-基]-4-(1H-吲哚-3-基)-1H-吡咯-2,5-二酮的研究表明它对钙依赖性同功酶具有微弱的选择性(Toullec等，J.Biol.Chem.266:15771-15781(1991))。对于该化合物的随后的研究没有观察到区别或可能的对于α的选择性微微大于对β-1和β-2同功酶的选择性(Martiny-Baron等，J.Biol.Chem.268:9194-9197(1993)；Wilkinson等，Biochem.J.294:335-337(1993))。因此，尽管对于抑制蛋白激酶C而不抑制其它的蛋白激酶的各类化合物的多年的研究和鉴定，但是仍然需要治疗有效的同功酶的选择性抑制剂。同功酶选择性抑制剂在治疗与糖尿病及其并发症有关的疾病中具有实用性，此外可以治疗局部缺血、炎症、中枢神经系统疾病、心血管疾病、皮肤疾病和癌症。
本发明的一个实施方案为式Ⅰ的PKC抑制剂Ⅰ
其中R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4亚烷基；
W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；J为
或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；R1为氢或C1-C4烷基；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；
其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或一起形成选自式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团，或T和W都为亚甲基。
根据本发明的另一个实施方案也提供式Ⅱ新的中间体Ⅱ
其中R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；V为氧或
T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；
J为
或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或一起形成选自式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团，或T和W都为亚甲基。
本发明的一个方面为制备式Ⅰ化合物的方法，该方法包括将约0.001摩尔-约1.5摩尔浓度的下式的化合物
其中V为氧或NCH3；R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；和以约0.001摩尔-约1.5摩尔浓度的下式的烷基化试剂
其中L为离去基团；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；
J为
或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；
R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或一起形成选自式-CR7R8-的二价基团，其中R7为氢或甲基和R8为C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环，和约0.5-约10当量的Cs2CO3，以在极性非质子溶剂中为约0.1ml/小时-约2.0ml/小时的速率结合的步骤。
根据本发明的一个实施方案，提供式Ⅲ化合物，Ⅲ
其中R1为C1-C4烷基或氢；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C2-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的亚乙基；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)或一起形成选自式-CR7R8-的二价基团，其中R7为氢或甲基和R8为C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团。
本发明的另一个实施方案提供式Ⅳ化合物Ⅳ
其中J选自
和其中R1为烷基或氢；n和m独立为1或2；且R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环。
根据本发明的一个实施方案，提供抑制PKC活性的方法。该方法包括给予需要此治疗的哺乳动物药用有效量的式Ⅰ化合物。本发明也涉及选择性地抑制β-1和β-2蛋白激酶C同功酶的方法，该方法包括给予需要此治疗的哺乳动物药用有效量的式Ⅰ化合物。
本发明也提供治疗下列疾病的方法，其中证明蛋白激酶C在病理中起作用，所述疾病例如局部缺血、炎症、中枢神经系统疾病、心血管疾病、皮肤疾病和癌症。该方法包括给予需要此治疗的哺乳动物药用有效量的式Ⅰ化合物。
本发明特别用于治疗糖尿病并发症。因此，本发明进一步提供治疗糖尿病的方法，该方法包括给予需要此治疗的哺乳动物药用有效量的式Ⅰ化合物。
本发明的另一个方面为含有式Ⅰ化合物及一种或多种药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂的药用制剂。
本发明的详述如上所述，本发明提供式Ⅰ化合物，它可以选择性地抑制蛋白激酶C。本发明优选的化合物为其中所述部分-T-J-W-含有4-8个原子的式Ⅰ化合物，它们可以为未取代的或取代的(由卤素或烷基取代)。更优选，所述部分-T-J-W-含有6个原子。本发明其它的优选化合物为其中R1为氢，J为
的化合物。
优选的一组化合物为式Ⅴ化合物Ⅴ
其中R1为C1-C4烷基或氢；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C2-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的亚烷基；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；
M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；且R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)或一起形成选自式-CR7R8-的二价基团，其中R7为氢或甲基和R8为C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；且其中至少Y、R2、Z、M、T或W之一为卤素或卤代基团，更优选为氟或氟代基团。
优选的式Ⅴ化合物包括其中X为氧，R1为氢，T为任选被取代的C2-C3亚烷基，W为任选取代的亚乙基的化合物。优选T和/或W被一个或多个氟基团取代。
在本发明的另一个实施方案中提供式Ⅵ化合物Ⅵ
其中J选自
和其中R1为烷基或氢；n和m独立为1或2；且R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环。
术语“卤素”代表氟、氯、溴或碘。
术语“C1-C4烷基”指具有一个至四个碳原子的环状、直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。同样，“C2-C4烷基”代表具有二个至四个碳原子的环状、直链或支链烷基。卤代烷基为由一个或多个卤原子，优选一个至三个卤原子取代的烷基。卤代烷基的一个实例为三氟甲基。C1-C4烷氧基是通过-O-键共价连接的C1-C4烷基。
术语“C1-C4亚烷基”为式-(CH2)r-的直链亚烷基部分，其中r为1-4。C1-C4亚烷基的实例包括亚甲基、亚乙基、1,3-亚丙基、四亚甲基等。同样“C2-C4亚烷基”代表两个至四个碳原子的直链亚烷基。
术语“C1-C4亚链烯基”代表含有一个或多个双键，一般为一个或两个双键的一个至四个碳原子的直链烃。C1-C4亚链烯基的实例包括亚乙烯基、亚丙烯基和1,3-丁二烯基。
术语“C1-C4链烷酰基”为C1-C4羧酸的酰基残基。C1-C4链烷酰基的实例包括乙酰基、丙酰基、丁酰基等。卤代链烷酰基为被一个或多个卤原子一般为一个至三个卤原子取代的链烷酰基。卤代链烷酰基的实例为三氟乙酰基。
本领域的技术人员可以理解在说明书中使用的术语“离去基团”。一般而言，离去基团为可以增加其所连接原子的亲电性以便于取代的任何基团或原子。优选的离去基团为三氟甲磺酸酯、甲磺酸酯、对甲苯磺酸酯、亚氨酸酯、氯化物、溴化物和碘化物。
在说明书中使用的术语“羧基保护基团”(P)指在所述化合物的另外的官能团上进行反应时，通常用于封闭或保护羧酸基团的该羧酸基团的一个酯类衍生物。使用的羧基保护基团的种类不是关键，只要衍生的羧酸对于随后的反应条件是稳定的且可以在适当的时候去除而不破坏分子的其余的部分即可(T.W.Greene和P.Wuts,Protective Groupsin Organic Synthesis,John Wiley和Sons，纽约，N.Y.,1991，第5章，提供通常使用的保护基团名单。亦见E.Haslam,Protective Groups inOrganic Chemistry,J.G.W.McOmie,Ed.,Plenum Press,纽约，N.Y.,1973)。相关的术语“保护的羧基”指用羧基保护基团保护的羧基。
在说明书中使用的术语“羟基保护基团”(P)指在所述化合物的另外的官能团上进行反应时，通常用于封闭或保护羟基的该羟基的一个醚或酯类衍生物。使用的羟基保护基团的种类不是关键，只要衍生的羟基对于随后的反应条件是稳定的且可以在适当的时候去除而不破坏分子的其余的部分即可(T.W.Greene和P.Wuts,Protective Groups inOrganic Synthesis,John Wiley和Sons，纽约，N.Y.,1991，提供通常使用的保护基团名单)。优选的羟基保护基团为叔丁基二苯基甲硅烷基氧基(TBDPS)、叔丁基二甲基甲硅烷基氧基(TBDMS)、三苯基甲基(三苯基甲游基)、甲氧基三苯基甲游基或烷基或芳基酯。相关的术语“保护的羟基”指用羟基保护基团保护的羟基。
在说明书中使用的术语“氨基保护基团”(P)指在所述化合物的另外官能团上进行反应时，通常用于封闭或保护氨基官能度的该氨基的取代基。使用的氨基保护基团的种类不是关键，只要衍生的氨基对于随后的反应条件是稳定的且可以在适当的时候去除而不破坏分子的其余的部分即可(T.W.Greene和P.Wuts,Protective Groups in OrganicSynthesis，第7章，提供通常使用的保护基团名单。亦见J.W.Barton,Protective Groups in Organic Chemistry，第2章)。优选的氨基保护基团为叔丁氧基羰基、邻羟甲基苯甲酸内酯(pthalide)、环烷基和苄氧基羰基。相关的术语“保护的氨基”定义为用所定义的氨基保护基团取代的氨基。
在说明书中使用的术语“-NH保护基团”指在所述化合物的另外的官能团上进行反应时，通常用于封闭或保护-NH官能度的该亚氨基的保护基团。使用的保护基团的种类不是关键，只要衍生的氨基对于随后的反应条件是稳定的且可以在适当的时候去除而不破坏分子的其余的部分即可(T.W.Greene和P.Wuts,Protective Groups in OrganicSynthesis，第7章，第362-385页，提供通常使用的保护基团名单)。优选的-NH保护基团为氨基甲酸酯、酰胺、烷基或芳基磺酰胺。相关的术语“保护的-NH”定义为用所定义的-NH保护基团取代的基团。
在此所用术语“药用有效量”代表能够抑制哺乳动物PKC活性的本发明化合物的量。当然，所给予的本发明化合物的特定的剂量根据病人的具体情况决定，包括给予的化合物、给药途径、治疗的特定的疾病等及相似的考虑因素。可以以各种途径给予所述化合物，包括经口、直肠、透皮、皮下、局部、静脉、肌内或鼻内等途径。对于所有的适应症而言，一般的日剂量为含有约0.01mg/kg-约20mg/kg本发明的活性化合物。优选的日剂量为约0.05-约10mg/kg，理想的日剂量为约0.1-约5mg/kg。然而，对于局部给药而言，一般剂量为每cm2感染的组织约1-约500μg化合物。优选使用的化合物的量为约30-约300μg/cm2，更优选约50-约200μg/cm2，最优选约60-约100μg/cm2。
在此所用术语“治疗”描述以抵抗疾病、紊乱或障碍为目的，对病人进行的治疗和护理，包括给予本发明的化合物以阻止症状或并发症的出现，缓解所述症状或并发症或消除所述疾病、紊乱或障碍。
术语“同功酶选择性”指对于一种蛋白激酶C同功酶(或其亚组)的抑制优于对其它同功酶的抑制。例如，化合物可以优于蛋白激酶C同功酶α、γ、δ、ε、ξ和η而选择性地抑制β-1或β-2同功酶。一般而言，在PKC测定中，同功酶选择性的化合物显示抑制一种亚型所需的剂量与获得不同亚型的相等的抑制所需的剂量相比至少为8倍差异(优选为10倍差异)(例如，与α蛋白激酶C同功酶相比，对于PKCβ-1或β-2同功酶的抑制)。多种化合物在抑制范围内显示这种差别，如在IC50时，即50％的抑制时的情况。因此，例如β-1和β-2同功酶选择性化合物可以在低得多的浓度下抑制蛋白激酶C的β-1和β-2同功酶，并由于对于其它的PKC同功酶的极小的抑制而具有较低的毒性。
式Ⅰ化合物具有碱性部分，如NR3R4，因此也可以为它们的药学上可接受的酸加成盐的形式。通常使用的形成此类盐的酸包括无机酸，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸或磷酸以及有机酸，例如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴代苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸以及相关的无机和有机酸。因此此类药学上可接受的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、2-丁炔-1,4-二酸盐、3-己炔-2,5-二酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、二甲苯磺酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、马尿酸盐、β-羟基丁酸盐、羟基乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。
除药学上可接受的盐外，根据本发明也可以使用其它的盐。可以将它们用作所述化合物纯化、其它盐的制备或所述化合物或中间体的鉴定中的中间体。
式Ⅰ化合物的药学上可接受的盐也可以以各种溶剂化物存在，例如与水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯等。也可以制备此类溶剂化物的混合物。此类溶剂化物的来源可以是从溶剂中结晶的、在制备或结晶的溶剂中固有的或与此类溶剂偶然产生的。此类溶剂化物也在本发明的范围内。
可以存在式Ⅰ化合物的各种立体异构体形式，例如，T或W可以在取代的亚烷基部分包括手性碳原子。一般制备式Ⅰ化合物的外消旋物，并且可以方便地使用，但是如果需要可以用常规的技术分离或合成单独的对映体。此类外消旋物和单独的对映体以及它们的混合物形成本发明的一部分。
本发明也包括式Ⅰ化合物的药学上可接受的前体药物。前体药物为经过化学修饰并且可以是生物非活性的(在酶作用位点)，但是可以被一种或多种酶或其它体内过程降解或修饰产生母体生物活性形式的药物。优选所述前体药物与母体药物相比具有不同的药代动力学模式，使药物更容易透过粘膜上皮吸收、具有更好地成盐性或溶解性和/或具有改善的体系的稳定性(例如血浆半衰期增加)。描述用于选择和制备适当的前体药物衍生物的常规的方法(或例如在H,Bundgaard的Design of Prodrugs中所介绍的，1985)。一般而言，此类化学修饰包括下列内容1)酯酶或脂酶可以裂解的酯或酰胺衍生物；2)可以被特异性的或非特异性的蛋白酶识别的肽；或3)通过前体药物形式的膜选择在作用位点蓄积的衍生物；或修饰的前体药物形式或以上1-3项的组合。
部分双-吲哚-N-马来酰亚胺衍生物的合成见述于Davis等的美国专利5057614中，在此引入其公开的内容作参考。一般而言，可以根据下述制备本发明的化合物流程1
根据流程1，卤代基团优选为氟、氯、溴或碘。化合物1优选为2,3-二氯N-甲基马来酰亚胺。化合物1与吲哚即化合物2之间的反应一般称为为Grignard反应。所述反应在室温至所述反应混合物的回流温度之间、在惰性有机溶剂例如甲苯中进行。最显著地是，流程1所描述的反应不依赖于溶剂条件。当在甲苯∶THF∶乙醚体系中进行时，该反应以大于80％的产率和大于95％的纯度得到化合物3。用氯化铵(NH4Cl)使产物从该反应混合物中沉淀出来。可以用标准的技术分离产生的中间体化合物3。
然后根据本领域已知的和Brenner等(Tetrahedron 44:2887-2892(1988))所述的技术，通过碱水解将双-3,4(3’-吲哚基)-1N-甲基-吡咯-2,5-二酮(化合物3)转化为式4的相应的酸酐。优选，在温度25℃至回流温度范围内，使化合物3与5N KOH在乙醇中反应得到式4化合物
式3化合物一般比式4化合物更稳定。因此，优选根据流程2使化合物3反应产生式Ⅰ化合物。然而，本领域技术人员应该认识到式4化合物也可以根据流程2反应。
流程2
T、J和W与前述定义的相同。L为良好的离去基团，如氯、溴、碘、甲磺酰基、对甲苯磺酰基等。L也可以为用本领域熟知的技术容易地转化为良好的离去基团的羟基或其它的前体。例如通过使羟基与甲磺酰氯反应可以容易地将羟基转化为磺酸酯(例如甲磺酰基)产生甲磺酸酯离去基团。
由流程2代表的反应可以由制备N-取代的吲哚的任何已知的方法完成。尽管也使用其它的比例特别是其中烷基化试剂过量，但是该反应一般使用约等摩尔量的两种试剂。所述反应最好在极性非质子溶剂中，用碱金属盐或其它的本领域接受的烷基化条件进行。当离去基团为溴或氯时，可以加入催化量的碘化物盐例如碘化钾以加速该反应。反应条件包括在二甲基甲酰胺或四氢呋喃中使用六甲基二硅烷基叠氮化钾，在二甲基甲酰胺中使用氢化钠。
优选所述反应在乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)或四氢呋喃(THF)中，在缓慢逆流加入(slow reverse addition)碳酸铯进行。优选该反应的温度为约室温至约所述反应混合物的回流温度。
本领域的技术人员应该认识到流程2中所述的反应可以用化合物L-T’和L-W’进行，其中T’和W’为保护的羧基、保护的羟基或保护的胺。经流程2的烷基化后，将T’和W’转化为能够偶合形成J的部分。T’和W’偶合形成各种醚或硫醚衍生物是本领域已知的并见述于例如Ito等的Chem.Pharm.Bull.(41(6):1066-1073(1993))、Kato等的J.Chem.Pharm.Bull.(34:486(1986))、Goodrow等的Synthesis 1981:457、Harpp等的J.Am Chem.Soc.(93:2437(1971))和Evans等的J.Org.Chem.50:1830(1985))。
本领域的技术人员也可以认识到可以如流程3所述将化合物3分两个步骤转化为式Ⅰ化合物。流程3
T、J、W、V和L与前述定义的相同。L2为保护的羟基或用本领域已知的技术可以容易地转化为良好的离去基团的其它基团。化合物3或4与化合物6之间的偶合为前述讨论的烷基化。将一烷基化的中间体7去保护，并将L2转化为离去基团。例如，如果所述羟基是用叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)保护的，那么用酸性的甲醇可以选择性地去除TBDMS。然后，将产生的游离的羟基转化为离去基团，例如烷基卤，优选烷基碘或烷基溴(在三苯基膦中的CBr4)或磺酸酯(在三乙胺中的甲磺酰氯)。然后在室温至回流温度下，在极性非质子溶剂例如乙腈、DMF、THF中，通过缓慢逆流加至碱溶液，例如六甲基二硅烷基叠氮化钾或氢化钠，但优选碳酸铯中经烷基化形成大环内酯。
当所述烷基化反应在极性非质子溶剂中，通过缓慢逆流加至碳酸铯中而进行时，可以以相当高的产率制备式Ⅰ化合物。缓慢逆流加入包括将化合物和烷基化试剂的混合物(流程2)或化合物(流程3)与所述碱以约0.1ml/小时至约2.0ml/小时的速率混合。混合物中各种试剂的浓度为约1.5摩尔至约0.001摩尔。当用一烷基化的化合物(流程3)进行反应时，浓度为约3摩尔至约0.001摩尔。缓慢加入得到在反应器中反应剂的浓度为约0.01摩尔至1.5摩尔。本领域技术人员应该认识到在以较高的速率加入时，在所述反应中可以使用较低的反应剂的浓度。同样，在以较低的速率加入时，在所述反应中可以使用较高的反应剂的浓度。优选，以约0.14ml/小时的速率加入化合物，以约0.37摩尔加入烷基化试剂。优选加入过量的碳酸铯，最优选碳酸铯与烷基化试剂的比例为4∶1。优选的极性非质子溶剂为乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、丙酮、二甲基亚砜(DMSO)、二氧六环、二甘醇二甲醚、四氢呋喃(THF)或其它所述反应剂可在其中溶解的极性非质子溶剂。所述反应在约0℃至回流温度范围内进行。本领域的技术人员应该认识到所述化合物和烷基化试剂的比例不是关键。然而，优选以0.5至3当量的各种物质的比例进行所述反应剂的混合。最优选以1∶1的比例混合所述反应剂。
当V为N-CH3时，通过碱水解将化合物Ⅱ转化为相应的酸酐(V为O)。碱水解包括在约25℃至优选约回流温度下，在C1-C4醇(优选乙醇)、DMSO/水、二氧六环/水或乙腈/水中，使所述化合物与碱(例如氢氧化钠或氢氧化钾)反应。所述反应物的浓度不是关键。
通过氨解可以将所述酸酐(V为O)转化为式Ⅰ的马来酰亚胺。氨解包括在室温下，在极性非质子溶剂例如DMF中，使所述酸酐与过量的六甲基二硅胺烷或铵盐(乙酸铵、溴化铵或氯化铵)以及C1-C4醇(优选甲醇)反应。优选六甲基二硅胺烷或铵盐以大于约5∶1当量的酸酐的比例反应。
流程4描述用于制备其中X为O的本发明的式Ⅲ化合物的中间体的制备。
流程4
提供下列实施例和制备仅仅为进一步说明本发明而不是用于限制本发明。
实施例1双氟代六原子桥接的双吲哚马来酰亚胺的合成如下制备式Ⅶ化合物
用流程4所示步骤将化合物8a转化为式Ⅶ化合物。
根据下述制备式Ⅷ化合物Ⅷ
根据流程4所示的步骤将该化合物转化为式Ⅷ化合物。
根据下述制备式Ⅸ化合物Ⅸ
根据流程4所示的步骤将其中R’为H或F的化合物转化为式Ⅸ化合物。
实施例2C2-一氟代的七原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式Ⅹ化合物Ⅹ
用流程4所示步骤将该化合物转化为式Ⅹ化合物。
实施例3C6-一氟代的七原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式Ⅺ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式Ⅺ化合物。
实施例4C6-二氟代的七原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式Ⅻ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式Ⅻ化合物。
实施例5氟代的六原子硫-桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式ⅩⅢ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅢ化合物。
实施例6氟代的六原子桥接双吲哚马来酰亚胺C4-侧链衍生物的合成根据下述制备式ⅩⅣ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅣ化合物。
实施例7氟代烯烃六原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式ⅩⅤ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅤ化合物。
实施例8氟代烯烃七原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式ⅩⅥ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅥ化合物。
根据下述制备式ⅩⅦ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅦ化合物。
根据下述制备式ⅩⅧ化合物
用流程4所示步骤将该化合物转化为式ⅩⅧ化合物。
实施例9C2-甲基化的氟代六原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成根据下述制备式ⅩⅨ化合物
实施例10C3-衍生化的氟代六原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成
实施例11C3-衍生化的氟代六原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成
实施例12C3-衍生化的氟代六原子桥接双吲哚马来酰亚胺的合成
在下列实施例和制备中，熔点、核磁共振光谱、质谱、高压液相层析(硅胶)、N,N-二甲基甲酰胺、钯炭、四氢呋喃和乙酸乙酯分别缩写为M.Pt、NMR、MS、HPLC、DMF、Pd/C、THF和EtOAc。术语“NMR”和“MS”表明光谱与所需结构相符。
实施例13下式的双吲哚马来酰亚胺的制备
(3S,4R)-2-氟代-3-羟基-4,5-O-异亚丙基戊酸乙酯于0℃，向含有50ml无水THF和6.1ml(0.03mol)六甲基二硅胺烷(HMDS)的圆底烧瓶的搅拌溶液中加入12ml(0.03mol)的2.5M丁基锂的己烷溶液。使产生的混合物升至室温并搅拌10分钟。然后降低温度至-85℃。在不使温度升至-85℃以上的同时，尽快滴加1.80g(0.01mol)六甲基磷酰胺(HMPA)和1.00ml(0.010mol)的氟代乙酸乙酯的混合物。再过5分钟后，加入880mg(0.00677mol)2,3-O-亚异丙基D-甘油醛(8)。将该混合物搅拌10分钟，然后于-85℃用5ml饱和的氯化铵骤冷。加热至室温后，用80ml二氯甲烷稀释该混合物，用水(60ml×3)洗涤。分离二氯甲烷层，经硫酸钠干燥。真空蒸发挥发物后，将残留物上于短的硅胶柱上。用二氯甲烷洗涤后，用30％乙腈/四氯化碳(或乙酸乙酯)洗脱得到粗品产物。
将该粗品产物经硅胶柱层析，用15％(v/v)乙腈/四氯化碳作为洗脱剂，得到含有部分分离的两个非对映体的两个组分组分1,177mg,(9a,34％,9b,66％基于1H NMR)组分2,377mg(9a,62％,9b,38％)。总产率34.7％，其中9a为52.7％,9b为47.3％。
(3S,4R)3-烯丙氧基-2-氟代-4,5-O-亚异丙基戊酸乙酯将醇9,327mg(1.39mmol，为9a(62％)和9b(38％)的混合物)与甲苯一起蒸发，将327mg(1.39mmol)溶于6ml环己烷中。于氮气环境、搅拌下，加入烯丙基三氯乙酰亚胺酸酯(423μL,561mg,2.78mmol)，接着用20分钟逐份(5μL)加入三氟甲磺酸(20μL)。深棕色油状沉淀立即开始形成。于室温下将该反应混合物搅拌60小时。形成白色沉淀，过滤沉淀，用环己烷洗涤两次。蒸发滤液为油状的液体。经硅胶柱层析，用10％(v/v)乙酸乙酯-己烷作为洗脱剂得到两个组分。第一个组分主要含有10a，第二个组分含有10b。将所述组分经硅胶柱纯化，用25％(v/v)己烷/二氯甲烷作为洗脱剂，得到10a,133mg(34.8％)和10b,83mg(21.7％)。总产率为56.5％。
(3S,4R)3-烯丙氧基-2-氟代-4,5-O-亚异丙基戊醇(11)将酯10a,60mg(0.217mmol)与甲苯一起蒸发两次。将其溶于3.0ml无水THF中并冷却至-75℃。于氮气环境、搅拌下，用20分钟滴加DIBAL-H甲苯溶液0.68ml(1.29M,0.877mmol)。于-75℃，将产生的溶液再搅拌1.5小时。然后加热至-5℃，用4ml乙酸乙酯骤冷。搅拌10分钟后，加入湿的硫酸钠(2g)。于-5℃，将该混合物搅拌2小时。过滤固体，用乙酸乙酯洗涤两次。减压浓缩滤液。残留物经硅胶柱层析纯化，用30％(v/v)乙酸乙酯-己烷作为洗脱剂得到纯的11a,32mg(63.4％)。以相同的方法，由10b得到11b。
将化合物11(11a和11b的混合物)，23mg(0.099mmol)溶于3ml甲醇和1ml二氯甲烷中。于-78℃，通入O3至该溶液变为亮蓝色。然后向该溶液中通入氩气5分钟。加入一滴甲硫醚，将该混合物搅拌10分钟。加入硼氢化钠30mg(0.794mmol,8eq)，搅拌5分钟。使该反应混合物升至室温，再搅拌1小时。加入3滴饱和的氯化铵水溶液后，将该混合物再搅拌1小时。真空去除挥发物。将残留物溶于甲醇中，加入乙酸乙酯并通过共蒸发置换甲醇。过滤白色沉淀，蒸发滤液。残留物经硅胶柱层析，用乙酸乙酯洗脱。去除微量未知成分后，得到13mg(55.3％)的12a和7mg(29.8％)的12b。
甲磺酰化和偶合反应
将二醇(12a),12mg(0.050mmol)溶于5ml无水乙醚中，于氮气环境下冷却至0℃。于搅拌下，加入35μL(0.250mmol,5eq)的Et3N，接着加入20μL(0.25mmol,5eq)的甲磺酰氯。于0℃，将产生的混合物搅拌5小时。过滤沉淀，用乙醚洗涤。用水(2x)和盐水(2x)洗涤滤液，经硫酸钠干燥。真空蒸发溶剂后，得到微黄色油状物13a,9mg(43.3％)。
将所述沉淀溶于水中，用乙酸乙酯萃取。用碳酸氢钠水溶液将乙酸乙酯层洗涤两次，经硫酸钠干燥。真空蒸发溶剂后，得到11mg(55.3％)的13a。共获得20mg的13a，产率100％。
将二甲磺酸酯13a,20mg(0.0507mmol)和双吲哚基-马来酰亚胺17.3mg(0.0507mmol)合并并溶于2.5ml无水DMF(经分子筛干燥)中，于50℃、氮气环境下，用40小时通过注射泵加至碳酸铯(66mg,0.203mmol)的3ml无水DMF悬浮液中。于50℃，将该反应混合物再搅拌10小时。真空蒸发去除挥发物。将残留物溶于氯仿中，用饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。分离氯仿层，经硫酸钠干燥。蒸发后，将红色的固体残留物经硅胶柱层析纯化，用10％(v/v)丙酮/氯仿洗脱。首先洗脱出所需的化合物14a,7mg(25.4％)，接着洗脱出一种原料双吲哚基-马来酰亚胺13mg(75％)。
实施例14下式的双吲哚基马来酰亚胺的制备
化合物21a和21b为立体异构体，21a为2R构象，21b为2S构象。当将所述酯还原为醇(即化合物24a变为2S型)时，手性中心的命名发生变化。
于氮气环境下，向含有40ml无水THF和5.0ml(0.0255mol)六甲基二硅胺烷的圆底烧瓶的搅拌溶液中加入9.0ml(0.0225mol)的2.5M丁基锂的己烷溶液，并于冰浴上反应。于室温下搅拌10分钟后，冷却至-78℃，用5分钟滴加3.6g(0.020mol)的HMPA和2.0ml(0.020mol)氟代乙酸乙酯。再搅拌5分钟后，快速加入760mg(4.46mmol)亚环己基-甘油醛(21，根据JOC,1992,57，第648页和JOC,1995,60，第585-587页制备，于60℃/0.5mmHg下蒸馏)。将该混合物再搅拌10分钟，然后于-78℃用5ml饱和的氯化铵骤冷。加热至室温后，用60ml己烷稀释该混合物。分离己烷层。用30ml己烷萃取残留层。合并己烷溶液，用饱和的氯化铵(100ml×3)洗涤，经硫酸钠干燥。减压蒸发后，将残留物经硅胶柱层析，用30％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到主要产物22’740mg(47.6％)，为主要异构体22’a(74％)和次要异构体22’b(26％)的混合物，基于1HNMR。用氯仿萃取水洗涤液。蒸发并层析后，由氯仿层得到92mg(7.5％)的21，也为两种异构体的混合物。经硅胶柱层析，用氯仿洗脱由混合物22’中获得纯的异构体22’a。
将原料22’,740mg(2.1mmol)溶于60ml甲醇中。加入1.2g柠檬酸。于室温下，将该混合物搅拌4小时。在旋转蒸发仪上去除溶剂。将残留物溶于乙酸乙酯(100ml)中，用饱和的碳酸氢钠水溶液(100ml×2)和水洗涤。经硫酸钠干燥乙酸乙酯层，蒸发得到22，为600mg(100％)，为异构体22a(69％)和22b(31％)的混合物，基于1HNMR。在相同的条件下，水解22’a得到纯的22a，产率为100％。
将醇22，为655mg(2.37mmol，为异构体21a(69％)和21b(31％)的混合物)溶于30ml环己烷中，加入1.50ml(9.8mmol)烯丙基三氯乙酰亚胺酸酯。用30分钟，滴加100μL CF3SO3H。于室温、氮气环境下，将该反应混合物搅拌46小时。TLC表明还有约20％的原料。再加入60μL CF3SO3H，将该反应混合物再搅拌24小时。过滤沉淀，用环己烷洗涤。蒸发滤液，残留物经硅胶柱层析，用10％乙酸乙酯-己烷作为洗脱剂，得到23a,511mg(68.1％)和23b,160mg(21.3％)。
用与上述相同的条件由纯的21a也获得23a作为比较。
将酯23a,635mg(2.00mmol)与甲苯一起蒸发两次，溶于10ml无水THF中。于-78℃、氮气环境、搅拌下，将其滴加至200mg(5.27mmol,2.5eq)氢化铝锂的40ml无水THF悬浮液中。加入样品后，将该反应混合物搅拌20分钟。加热至0℃，于0℃搅拌20分钟。然后加入5ml乙酸乙酯。搅拌5分钟后，加入4g湿的硫酸钠。将该混合物搅拌30分钟。过滤固体，用乙酸乙酯洗涤两次。在旋转蒸发仪上蒸发滤液。残留物经硅胶柱层析，用30％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂。去除部分原料23a,19mg后，主要的产物被洗脱出来，为24a,413mg(75.0％)，接着洗脱出部分24b,30mg(5.5％)。
用与上述相似的步骤，在THF中经DIBAL-H还原23b(112mg)得到化合物24b(44mg)，产率为45％。
将醇24a,295mg(1.08mmol)溶于20ml甲醇和二氯甲烷(1∶1)的混合液中。将其冷却至-78℃。通入臭氧至出现蓝色。然后通入氩气以排除过量的臭氧。加入数滴甲硫醚，将该溶液搅拌5分钟。然后于-78℃加入245mg (6.48mmol)硼氢化钠。搅拌5分钟后，使该反应混合物升至室温并搅拌1小时。真空除去挥发物。残留物经硅胶柱层析，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到25a,232mg(77.5％)。
根据与上述相同的方法获得二醇25b。用230mg的24b开始反应，得到158mg的25b，产率为67.7％。
将二醇25a,195mg(0.70mmol)溶于50ml乙醚中。加入三乙胺583μL(4.2mmol)，接着加入342μL(4.2mmol)甲磺酰氯。于室温、氮气环境下，将该混合物搅拌3小时。加入50ml水以溶解沉淀。分离醚层，用水(50ml×2)洗涤。经无水硫酸钠干燥后，减压蒸发得到微黄色液体26a,308mg(100％)。
于50℃、氮气环境下，用48小时，通过注射泵向含有768mg(2.36mmol)碳酸铯的40ml无水DMF溶液的100ml圆底烧瓶中滴加含有26a,257mg(0.59mmol)和双吲哚基马来酰亚胺202mg(0.59mmol)的10ml的DMF溶液。于50℃再搅拌24小时后，用100ml氯仿稀释该反应混合物，顺序用盐水(50ml×2)和水(50ml×2)洗涤。经无水硫酸钠干燥氯仿层，减压蒸发。将残留物溶于氯仿中，经硅胶柱层析，用5％丙酮/氯仿作为洗脱剂。首先洗脱出来的组分为所需的产物27a,185mg。使其从氯仿/甲醇中重结晶得到130mg(37.7％)和滤液。
用与上述相同的方法获得化合物27b，但是通过注射泵加入甲磺酸酯和双吲哚基马来酰亚胺的时间为80小时。用97mg的二醇25b开始反应，得到64mg的27b，总产率为26.1％。
将原料27a,50mg(0.099mmol)溶于50ml甲醇中。向其中加入1ml水和200mg对甲苯磺酸一水化物(1.05mmol)。于50℃，将该反应混合物搅拌4小时。在旋转蒸发仪上蒸发，残留物经硅胶柱层析，用5％甲醇/氯仿作为洗脱剂。使主要的组分28a从丙酮/甲醇中重结晶得到结晶的28a,23mg和含有18mg的28a的滤液(95.0％)。
将二醇28a,55mg(0.109mmol)溶于20ml丙酮-HOAc混合液(1∶1)中。向该溶液中加入100mg的NaIO4.3H2O(0.373mmol)的2.5ml水溶液。于室温下，将该混合物搅拌2.5小时。在旋转蒸发仪上蒸发以减少溶液的体积至一半，然后用30ml二氯甲烷稀释。然后用水洗涤该混合物两次，再用碳酸氢钠水溶液和水洗涤。分离二氯甲烷层，经硫酸钠干燥，蒸发至干，得到粗品醛29a。
将粗品醛29a溶于14ml二氯甲烷中，冷却至-78℃。将硼氢化钠30mg(0.79mmol)溶于6ml SP试剂醇中并加至所述溶液中。于氮气环境下搅拌该混合物40分钟。用500μL CH3CHO骤冷，然后加热至室温。将该混合物蒸发以减少溶液的体积至一半，然后与10ml乙醇混合，用2ml酒石酸钾钠饱和该水溶液。将该混合物搅拌5小时。蒸发并溶于30ml二氯甲烷中。分离二氯甲烷层，用水洗涤三次，用硫酸钠干燥。蒸发后，残留物经硅胶柱层析，用10％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱，得到化合物30a’,7mg(14.1％)。用乙酸乙酯洗脱主要的组分得到所需的产物30a,41mg(79.3％)。
根据上述相同的方法，但是裂解所述二醇的溶剂为乙腈-水(2∶1)的混合物，由相应的二醇28b得到化合物30b(产率为63.4％)。
将所述醇30a,16mg(0.0338mmol)溶于10ml二氯甲烷中。向其中加入70μL(0.52mmol)的三乙胺和28μL(0.34mmol)的甲磺酰氯。于室温、氮气环境下，将该反应混合物搅拌3小时。将其转移至分料漏斗中，用水洗涤三次。蒸发后，得到粗品31a,23mg。TLC显示仅有一个点。
将粗品甲磺酸酯31a,23mg(约0.0338mmol)置于25ml圆底烧瓶中，加入12ml乙醇。用干冰/丙酮浴将该烧瓶冷却。通过导管向其中加入1.2gHN(CH3)2和3ml水。然后用聚四氟乙烯塞子密封烧瓶，用铜线捆住。于100℃搅拌8小时。将烧瓶冷却至室温后，在旋转蒸发仪上去除挥发物。将残留物溶于20ml乙酸乙酯中，用碳酸氢钠水溶液(20ml×2)、水(20ml×2)洗涤。去除溶剂后，得到24mg粗品产物32a，使其从甲醇中重结晶得到纯的32a。
将亚酰胺32a,24mg(0.048mmol)溶于3ml乙醇和3ml5N KOH的混合物中。于80℃搅拌24小时。在旋转蒸发仪上去除乙醇，将含水悬浮液冷却至0℃并用5N HCl酸化。出现紫色沉淀。搅拌10分钟后，用稀KOH中和混合物水溶液，用乙酸乙酯萃取。用碳酸氢钠水溶液洗涤乙酸乙酯层两次，用水洗涤。经碳酸钾干燥并蒸发后，得到24mg粗品33a。
将所述酸酐33a,24mg溶于5ml无水DMF中。向其中加入250μL(1.19mmol)1,1,1,3,3,3-六甲基二硅胺烷，接着加入25μL甲醇(0.62mmol)。于室温、氮气环境下，将产生的混合物搅拌38小时。真空去除挥发物。将残留物溶于6ml乙腈-1N HCl(2∶1)的混合溶液中，于室温下搅拌1小时。去除有机溶剂，用1N KOH中和含水悬浮液，用乙酸乙酯萃取。用0.1N KOH和水洗涤乙酸乙酯层两次，蒸发至干。经硅胶柱层析分离残留物，用乙酸乙酯洗脱。洗脱的第二条色带为所需的产物14a，使其从二氯甲烷-己烷中重结晶，得到5mg(由30a的总产率为20％)。
实施例15由化合物30(a和b)生产化合物34(a和b)的另外的流程。
将醇30a,50mg(0.106mmol)与20ml乙醇-5N KOH(1∶1)混合。于70℃、氮气环境下搅拌20小时。然后冷却至0，用5N HCl酸化。立即出现红色沉淀。加入二氯甲烷40ml。分离有机层，用水(30ml×4)洗涤，经硫酸钠干燥。蒸发后，将残留物经硅胶柱层析，用5％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱，得到35a,33mg(68％)。
将酸酐35a,54mg(0.117mmol)溶于5ml无水DMF中。加入500μL(2.36mmol)HMDS(1,1,1,3,3,3-六甲基二硅胺烷)和甲醇48μL(2.36mmol)。于室温、氮气环境下，将该混合物搅拌36小时。真空去除挥发物，将残留物与10ml乙腈和5ml 1N HCl一起搅拌1小时。然后浓缩，用二氯甲烷萃取。用水和盐水洗涤二氯甲烷层，经硫酸钠干燥并蒸发。残留物经硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-乙腈(9∶1)洗脱，得到第一组分，为原料(20mg,37.0％)，然后为所需的产物36a,31mg(57.4％)。
根据上述相同的方法，但是使用与36a相比远远过量的HMDS(250μL,1.18mmol)和甲醇(24μL,1.18mmol)，由相应的醇30b,9mg(0.019mmol)得到化合物36b,3.4mg(39％)。氨化将化合物36a,31mg(0.068mmol)溶于15ml无水THF中。于氮气环境下，向其中加入240μL(1.56mmol)三乙胺和84μL(1.02mmol)甲磺酰氯。于室温下，将该混合物搅拌3小时。真空去除挥发物。将残留物溶于30ml二氯甲烷中，用1N HCl洗涤，用盐水洗涤两次，经硫酸钠干燥并蒸发。将残留物溶于6ml蒸馏的THF和1ml 40％的二甲胺的水溶液中。用聚四氟乙烯塞子密封烧瓶并于50℃搅拌24小时。将该混合物冷却至0℃并蒸发去除挥发物。残留物经硅胶柱层析纯化，用0-10％Et3N的乙酸乙酯溶液洗脱，得到所需的化合物34a,13.2mg(40.2％)。
用与34a相同的方法，由36b(3.4mg)获得化合物34b(1.9mg)，产率52％。
实施例16二硫代氨基甲酸酯衍生物的合成
将20mg化合物38(0.04mmol,1eq)转移至配有搅拌子、隔片和氮气气囊的干燥箱干燥的25ml的圆底烧瓶中。通过导管加入10μLTHF，接着加入4.45mg三乙胺(0.044mmol,1.1eq)，然后通过注射器加入3.8mg二硫化碳(0.05mmol,1.2eq)。将该红色溶液搅拌约15分钟，然后通过注射器加入7.1mg甲基碘(0.05mmol,1.2eq)。于室温下，将该反应物搅拌过夜。
约2小时后，该澄清的红色溶液变浑浊。TLC(10％甲醇的二氯甲烷溶液)显示原料完全消失。用乙酸乙酯将该反应物转移至分料漏斗中，用40ml水，接着用40ml盐水洗涤。收集有机层，并通过在烧结的玻璃漏斗中的硫酸镁干燥。去除溶剂得到红紫色固体(化合物39)。经IS/MS分析样品。IS/MS于559处检测到MH+峰，总产量为23mg。
二硫代氨基甲酸酯向三氟甲基基团的转化
将23mg(0.041mmol,1eq)二硫代氨基甲酸酯39溶于配有搅拌子、隔片和氮气气囊的25ml干燥圆底烧瓶中的无水二氯甲烷中。于冰浴上将该溶液冷却约15分钟。然后快速加入固体的1,3-二溴代5,5-二甲基乙内酰脲0.047g(0.164mmol,4eq)，接着通过注射器加入0.06g二氢三氟化四丁基铵(0.205mmol,5eq)。(该溶液由红/紫色变为橙/棕色)。
于0℃，将该反应物搅拌1.5小时。然后将其倾至装有30ml水的分液漏斗中。用25ml水将二氯甲烷层再洗涤一次，收集，经硫酸镁干燥。除去溶剂得到暗棕/橙色油。用硅胶纯化产物，开始用二氯甲烷作为流动相，逐渐加入甲醇。得到三个独立的点，收集第三个样品，去除溶剂得到16.5mg(75％)产物40。
实施例17化合物A的胺的酰化
将7mg(0.0154mmol)化合物A溶于1ml无水二氯甲烷中。于氮气环境下，冷却至0℃，搅拌，同时加入3.7μL(0.046mmol,3eq)吡啶，接着加入2.06μL(0.018mmol,1.2eq)三氟乙酸酐(Aldrich)。于0℃，将该反应混合物从2∶17p.m.搅拌至4∶20p.m.(TLC1)并继续搅拌至7∶00p.m.(TLC2)。反应不再继续进行。加入另一部分3.7μL吡啶和2.6μL三氟乙酸酐。搅拌4小时后，TLC显示反应无显著进展。将该反应混合物加热至室温，搅拌3小时。TLC又一次显示反应无显著进展。第三次加入3.7μL吡啶和2.0ml三氟乙酸酐，将该混合物搅拌2小时，TLC显示转化率提高。
停止反应，减压去除挥发物。将残留物溶于氯仿中，用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，用水洗涤两次，蒸发氯仿层。残留物经硅胶柱层析，用10％丙酮-氯仿(v/v)洗脱得到两个纯的组分，208.1和208.2。用含有2％Et3N的10％甲醇-氯仿洗脱残留于柱上的原料，标记为208.3208.1～1mgRf=0.67208.2～3mgRf=0.45208.3～4mgRf=01HNMR于CDCL3中208.2信息GZW.013(Dept.3):-N-CH3,δ3.10ppm.208.3信息GZW.014(Dept.3):-N-CH3,δ2.40ppm.
在CDCl3中，甲基基团的信号显示明显向低场移动，由δ2.40ppm至δ3.10ppm。因此所需的产物为产物2(化合物41)。
根据下述重复该试验将收集的回收的原料208.1，约5mg(0.011mmol)与甲苯一起共蒸发两次，溶于2ml无水二氯甲烷(经分子筛干燥)中。于0℃加入40μL吡啶(0.497mmol,45eq)，接着加入10μL(0.071mmol,6.5eq)的(CF3CO)2O)。于氮气环境下将该混合物搅拌2小时，TLC1显示反应完成。真空去除挥发物，残留物经小的硅胶柱，用10％丙酮-氯仿作为洗脱剂，得到5mg标记为209-2的产物。
实施例18下式的双吲哚基马来酰亚胺的制备
将化合物24a，140mg(0.511mmol)与甲苯一起蒸发两次，并溶于5.0ml新蒸馏的无水THF中。冷却(冰浴)至O℃，于氮气环境下搅拌。通过注射器向其中加入5.0ml(5.0mmol)1.0MBH3.THF的THF溶液。将产生的混合物缓慢温热至室温，于氮气环境下搅拌15小时。用冰浴冷却，然后加入10ml10％氢氧化钠，接着加入10ml 50％过氧化氢。于室温下，将产生的白色浑浊混合物搅拌5小时。在旋转蒸发仪上蒸发去除THF，用50ml水稀释残留物。用乙酸乙酯(40ml×3)萃取。用盐水(50ml)洗涤乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥。蒸发后，将残留物经硅胶柱(1cm×12.5cm，快速层析)分离，用甲苯(20ml)、30％-100％乙酸乙酯的己烷溶液(145ml)洗脱。鉴定第四个组分为所需的产物42a，69mg(46％)。
用下列步骤和与实施例14所详细讨论的相同的方法合成化合物49。
实施例19蛋白激酶C抑制的体外测定反应混合物10μL Ca2++(9.4mM储备液)55μL脂质(PS 5μg/孔，DG 0.6μg/孔)或HEPES5μL化合物或DMSO(受试化合物起始浓度为5000nM10μL髓鞘碱性蛋白(Myelin Basal Protein)(MBP)底物(MBP 3mg/ml，批号451-026)10μL ATP(300μM ATP，0.25μCi/孔 AT32p和10mM氯化镁)10μL酶(PKCα1∶80在HEPES中，βII1∶30在HEPES中)HEPES缓冲储备液为100mM，pH 7.5。
总反应混合物为100μL，于30℃孵育10分钟。通过加入100μL25％TCA终止反应。加入25μL的1mg/ml BSA溶液，将200μL该反应混合物转移至96-孔玻璃纤维过滤培养板上(Millipore Cat#MAFCNOB50)。过滤上清液并用10％TCA洗涤三次。去除过滤培养板的底部和安装的托架。加入100μL Microscint-20(Packard Cat.#6013621)，将样品上样于Packard顶部计数器(topcounter)上。
脂质制备将脂质(Avanti Polar Lipids)加至硼硅玻璃培养管(25×150mm)中。于氮气下干燥该脂质至氯仿被蒸发。将所述脂质悬浮于HEPES缓冲液中，超声约30秒，然后旋转混匀。将脂质保持在湿的冰上至加至测定物中。
结果用上述的体外测定法测定下列每个化合物的IC50值。对于PKCα和PKCβII，每一化合物测定五个浓度。受试化合物的浓度为5000nM、500nM、50nM、5nM、1nM和0(无化合物，仅有DMSO)。在测定中，用不加任何化合物的样品测定100％的PKC酶活性。用这些浓度的抑制曲线估计IC50值。
作为蛋白激酶C的抑制剂，在此公开的化合物可以用于治疗其中蛋白激酶C在病理中起作用的疾病。本领域认识到的疾病包括糖尿病及其并发症、局部缺血、炎症、中枢神经系统疾病、心血管疾病、Alzheimer氏病、皮肤疾病和癌症。
已经表明蛋白激酶C抑制剂可以阻断炎症反应，例如嗜中性白细胞氧化大量增加(neutrophil oxidative burst)、T-淋巴细胞CD3的负调节和佛波醇诱导的爪水肿(Twoemy,B.等，Biochem.Biophys.Res.Commun.171:1087-1092(1990)；Mulqueen,M.J.等，Agents Actions 37:85-89(1992))。因此，作为PKC抑制剂，本发明的化合物可以用于治疗炎症。
蛋白激酶C活性在中枢神经系统的功能中起关键作用(Huang,K.P.Trends Neurosci.12:425-432(1989))。此外，已经证明蛋白激酶C抑制剂可以预防在病灶和中心缺血脑损伤和脑水肿部位的损害(Hara,H.等，J.Cereb.Blood Flow Metab.10:646-653(1990)；Shibata,S.等，Brain Res.594:290-294(1992))。最近研究表明蛋白激酶C与Alzheimer氏病有关(Shimohama,S.等，Neurology 43:1407-1413(1993))。因此，本发明的化合物可以用于治疗Alzheimer氏病和局部缺血的脑损害。
蛋白激酶C活性与细胞生长、肿瘤诱发和癌症有关(Rotenberg,S.A.和Weinstein,I.B.Biochem.Mol.Aspects Se.Cancer 1:25-73(1991)；Ahmad等，Molecular Pharmacology:43 858-862(1993))。已知蛋白激酶C抑制剂可以有效地预防动物肿瘤的生长(Meyer,T.等，Int.J.Cancer43:851-856(1989)；Akinagaka,S等，Cancer Res.51:4888-4892(1991))。当与其它的化疗药物联合给药时，本发明的化合物也可以作为多药物逆转(MDR)剂使它们成为有效的化合物。
蛋白激酶C活性在心血管疾病中也起重要作用。已经表明脉管系统蛋白激酶C活性增加引起血管收缩增加和高血压。已知的蛋白激酶C抑制剂可以预防此类增加(Bilder,G.E.等，J.Pharmacal.Ep.Ther.252:526-530(1990))。因为蛋白激酶C抑制剂抑制嗜中性白细胞氧化大量增加，因此，蛋白激酶C抑制剂也可以用于治疗心血管局部缺血并改善局部缺血后的心脏的功能(Muid,R.E.等，FEBS Lett.293:169-172(1990)；Sonoki,H.等，Kokyu-To Junkan 37:669-674(1989))。也研究了蛋白激酶C在血小板功能中的作用，并表明蛋白激酶C水平的增加与对激动剂应答的增加有关(Bastyr Ⅲ,E.J.和Lu,J.Diabetes 42:(Suppl.1)97A(1993))。PKC也与微血管渗透性的血小板活性因子的调节中的生化通路有关(Kobayashi等，Amer.Phys.Soc.H1214-H1220(1994))。已经证明有效的蛋白激酶C抑制剂可以影响激动剂诱导的血小板中的聚集(Toullec,D.等，J.Biol.Chem.266:15771-15781(1991))。蛋白激酶C抑制剂也可以阻断激动剂诱导的平滑肌细胞的增殖(Matsumoto,H.和Sasaki,Y.Biochem.Biophys.Res.Commun 158:105-109(1989))。因此，本发明的化合物可以用于治疗心血管疾病、动脉粥样硬化症和再狭窄。
异常的蛋白激酶C活性也与皮肤疾病例如牛皮癣有关(Hom,F.等，J.Invest Dermatol.88:220-222(1987)；Raynaud,F.和Evain-Brion,D.Br.J.Dermatol.124:542-546(1991))。牛皮癣的特征为角质化细胞的异常增殖。已经表明已知的蛋白激酶C抑制剂可以以作为PKC抑制剂平行于其效力的方式抑制角质化细胞的增殖(Hegemann,L.等，Arch.Dermatol.Res.283:456-460(1991)；Bollag,W.B.等，J.Invest.Dermatol.100:240-246(1993))。因此，本发明的化合物作为PKC抑制剂可以用于治疗牛皮癣。
蛋白激酶C也与数种不同的糖尿病的方面有关。蛋白激酶C的过量的活性与胰岛素信号缺陷有关，因此与在Ⅱ型糖尿病中观察到的胰岛素耐受性有关(Karasik,A.等，J.Biol.Chem.265:10226-10231(1990)；Chen,K.S.等，Trans.Assoc.Am.Physicians 104:206-212(1991)；Chin,J.E.等，J.Biol.Chem.268:6338-6347(1993))。此外，许多研究表明在高血糖的情况下，蛋白激酶C活性在已知对糖尿病并发症敏感的组织中显著增加(Lee,T.S.等，J.Clin.Invest.83:90-94(1989)；Lee,T,S.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:5141-5145(1989)；Craven,P.A.和DeRubertis,F.R.J.Clin.Invest.83:1667-1675(1989)；Wolf,B.A.等，J.Clin.Invest.87:31-38(1991)；Tesfamariam,B.等，J.Clin.Invest.87:1643-1648(1991))。
优选在给药前将式Ⅰ化合物制成制剂。因此，本发明的另一个实施方案为药用制剂，该制剂包含式Ⅰ化合物和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
用熟知的和很容易得到的成分，按已知方法可以制备本发明的药用制剂。在制备本发明的组合物时，通常将活性成分与载体混合、或用载体稀释、或包封于胶囊、药囊、纸或其它的容器内。当所述载体用作稀释剂时，它可以为固体、半固体或液体物质，它们可以作为活性成分的溶媒、赋形剂或介质。因此，所述组合物可以为片剂、丸剂、粉剂、锭剂、小药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂(于固体或液体介质中)、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射液和无菌包装粉剂。
适当的载体、赋形剂和稀释剂的部分实例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、含水糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯和丙酯、滑石粉、硬脂酸镁和矿物油。该制剂另外可以包含润滑剂、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂、甜味剂或矫味剂。本发明的组合物可以制成制剂以在给病人用药后可以提供快速、持续或延缓的活性成分的释放。优选将所述组合物制成单位剂型，每种剂型含有约1-约500mg，更优选为约5-约300mg的活性成分。然而，可以理解给予的治疗剂量由医师根据相关的因素决定，这些因素包括治疗的疾病、给予的化合物和给药途径的选择。因此，上述剂量范围不用于限制本发明的范围。术语“单位剂型”指物理上独立的适合给予人和其它的哺乳动物的单一的剂型，每一单位含有预先计算的产生所需的治疗作用的活性成分的量以及适当的药用载体。
除上述制剂外，本发明的化合物也可以局部给予。局部给药的制剂为膏剂、乳油和凝胶剂。膏剂一般用下列物质制备(1)油性基质，即一种含有固定油或烃的基质，如白几士林或矿物油，或(2)吸附性基质，即一种含有无水物质或可以吸附水的基质，例如无水羊毛脂。通常在形成基质后，无论是油性的还是吸附性的，均将活性成分(化合物)加至一定量以得到所需的浓度。
乳油为油/水型乳剂。它们含有油相(内相)，一般含有固定油、烃等，例如蜡、凡士林、矿物油等；水相(连续相)，一般含有水和任何水-可溶性物质，例如加入的盐。通过使用乳化剂例如，表面活性剂像十二烷基硫酸钠可以使两相稳定；亲水胶体，例如阿拉伯胶胶态粘土、铝硅酸镁盐等。在乳剂形成后，通常将活性成分(化合物)加至一定量以获得所需的浓度。
凝胶剂包含选自油脂基质、水或乳剂-悬浮液基质。向该基质中加入胶凝剂，它可以在基质中形成基体，因此增加其粘度。胶凝剂的实例为羟丙基纤维素、丙烯酸聚合物等。通常将活性成分(化合物)在加入胶凝剂前某一时刻以一定的浓度加至制剂中。
加入到局部用制剂中的化合物的量不是关键；其浓度应在一定的范围，以使制剂以足以释放所需的化合物的量用于感染的组织。
通常用于感染组织的局部用制剂的量取决于感染组织的大小和制剂中化合物的浓度。一般而言，以提供每平方厘米感染组织约1-500μg化合物的量将所述制剂用于受影响的组织。优选，使用的化合物的量为约30-约300μg/cm2，更优选，约50-约200μg/cm2，最优选约60-约100μg/cm2。
下列制剂实施例仅仅用于说明而不用于限制本发明的范围。
制剂1
用下列成分制备硬明胶胶囊
将上述成分混合并以460mg的量装填入硬明胶胶囊。
制剂2用下列成分制备片剂
将上述成分混合并压制形成片剂，每片重665mg。
制剂3制备含有下列成分的气雾剂溶液
将活性化合物与乙醇混合。将该混合物加至一部分抛射剂22中，冷却至-30℃并转移至装填设备中。然后将所需的量送入不锈钢容器内并用其余的抛射剂稀释。然后给所述容器配上阀装置。
制剂4
根据下列成分制备每片含有60mg活性成分的片剂
将活性成分、淀粉和纤维素过U.S.第45目筛并混匀。将聚乙烯吡咯烷酮溶液与产生的粉末混合，过U.S.第14目筛。于50℃干燥如此产生的颗粒并过U.S.第18目筛。然后将预先过U.S.第60目筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉加至上述颗粒中，混匀后在压片机上压制成每片重150mg的片剂。
制剂5根据下列成分制备每粒胶囊含有80mg药物的胶囊
将上述活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，过U.S.第45目筛，以200mg的量装填入硬明胶胶囊中。
制剂6根据下列成分制备每粒栓剂含有225mg活性成分的栓剂<
>将上述活性成分过U.S.第60目筛并悬浮于预先用最少量的热量融化的饱和脂肪酸甘油酯中。将该混合物倾至标准2g容量的栓剂模中，使其冷却。
制剂7根据下列成分制备每5ml剂量含有50mg药物的悬浮液
将上述药物过U.S.第45目筛，与羧甲基纤维素钠和糖浆混合形成均一的糊状物。用部分水稀释苯甲酸溶液、矫味剂和着色剂，并在搅拌下加入。然后加入足量的水至所需的体积。
制剂8根据下列成分制备静脉制剂<
治疗时，将上述成分的溶液以1ml/min的速率静脉给予患者。
权利要求
1．具有下式的化合物
其中R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；V为-O-、-NH-或-NC1-C4烷基；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；J为
或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或一起形成式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团，或T和W都为亚甲基。
2．权利要求1的化合物，其中至少Y、S、T或W之一为氟或氟代基团。
3．具有下式的化合物
其中R1为C1-C4烷基或氢；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C2-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的亚乙基；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)或一起形成式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团。
4．权利要求3的化合物，其中至少Y、S、T或W之一为氟或氟代基团。
5．权利要求3的化合物，其中W为氟取代的亚乙基。
6．权利要求3的化合物，其中T为氟取代的亚乙基。
7．权利要求3的化合物，其中T为氟取代的1,3-亚丙基。
8．权利要求3的化合物，其中R1和Y为氢，X为氧。
9．权利要求5的化合物，其中R1和Y为氢，X为氧，S为
10．权利要求9的化合物，其中T为亚乙基。
11．具有下式的化合物
其中J选自
和其中R1为C1-C4烷基或氢；n和m独立为1或2；和R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环。
12．权利要求9的化合物，其中R1为氢。
13．权利要求9的化合物，其中J的卤代基团为氟。
14．药用组合物，包含下式的化合物和药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂
其中R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；R1为C1-C4烷基或氢；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；J为
，或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)或一起形成式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团，或T和W都为亚甲基。
15．权利要求14的药用组合物，其中J为
16．权利要求15的药用组合物，其中S为
X为氧；和R1为氢。
17．权利要求16的药用组合物，其中至少Y、S、T或W之一为氟或氟代基团。
18．权利要求14的药用组合物，其中T和W为亚甲基，所述卤代基团为氟。
19．治疗哺乳动物的与异常蛋白激酶C活性有关的疾病或紊乱的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物药用有效量的下式的化合物和药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂
其中R’独立为氢、卤素、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NR3R4或-NHCO(C1-C4烷基)；R1为C1-C4烷基或氢；T为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C4亚烷基；W为任选由卤素或C1-C4烷基取代的C1-C2亚烷基；J为
，或当T和W都为亚甲基时，J选自
和其中n和m独立为1或2；X为氧、硫或由X连接的两个碳原子之间的键；Y为卤素、C1-C4烷基或氢；S为-CHO或下式基团
其中M为氢、-CH2OR5、-CH2NR3R4或-NR3R4；R2为氢或卤素；和Z为氢或-OR6；其中R3和R4独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)，或R3和R4与它们所连接的N原子一起形成5或6-元环；和R5和R6独立为氢、C1-C4烷基、卤代(C1-C4烷基)、C1-C4链烷酰基、卤代(C1-C4链烷酰基)或一起形成式-CR7R8-的二价基团，其中R7和R8独立为氢、C1-C4烷基或卤代(C1-C4烷基)，或R7和R8与它们所连接的C原子一起形成5或6-元环；条件为至少Y、S、T或W之一为卤素或卤代基团，或T和W都为亚甲基。
20．权利要求19的方法，其中J为
21．权利要求20的方法，其中S为
X为氧；和R1为氢。
22．权利要求20的方法，其中至少Y、S、T或W之一为氟或氟代基团。
23．权利要求19的方法，其中T和W为亚甲基，所述卤代基团为氟。
24．权利要求19的方法，其中W为氟代的亚乙基。
25．权利要求19的方法，其中T为氟代的亚乙基。
26．权利要求19的方法，其中T为氟代的1,3-亚丙基。
全文摘要
本发明涉及式(Ⅰ)的新的卤代双－吲哚马来酰亚胺化合物。本发明也提供制备所公开的化合物的方法以及用于抑制哺乳动物蛋白激酶C的药用组合物的制备。
文档编号C07D498/00GK1223658SQ97195948
公开日1999年7月21日 申请日期1997年4月30日 优先权日1997年4月30日
发明者M·R·吉罗瑟克, P·G·戈克吉安, G·Z·吴 申请人:伊莱利利公司, 密西西比州州立大学