专利名称：用海产品及其废弃物制备表皮生长因子的方法
一种用海产品及其废弃物制备表皮生长因子的方法，属于生物化学领域。
表皮生长因子(EGF)是生物活性物质，是重要的细胞生长调解因子，具有广泛的应用领域。在生物学、医学科学的研究上可作为有丝分裂原、配基-受体模型、无血清培养基成分；在临床医学上，可用于促进上皮增生、治疗眼角膜损伤、角膜移植、烧伤、外伤、溃疡，或用于抑制神经胶质瘤、鳞状上皮癌；近年来在化妆品方面用于促进上皮脱落、促进透明质酸和糖蛋白的合成、刺激细胞再生、组织的修复及嫩肤、抗皱、防晒等方面。由于其广泛的用途和巨大的经济效益，国内外对其需求及开发已成热点。
目前主要是从小白鼠颌下腺中提取表皮生长因子(EGF)，虽然小白鼠颌下腺表皮生长因子(EGF)含量较多，但要达到一定规模的产量实为困难。从人尿中提取表皮生长因子(EGF)也是一种办法，但人尿中其含量甚低，在实际操作上有相当难度。最近用转基因的办法以大肠杆菌为载体，制备表皮生长因子(EGF)，但由于操作技术复杂、投资大、技术条件要求高，使其制造成本昂贵。
本发明提供一种工艺技术简单、成品率高的制备表皮生长因子(EGF)的原料及方法。
本发明的主要特征是以海产品及其废弃物为原料，从中分离纯化表皮生长因子(EGF)和副产物壳聚糖等生物活性物质。
方法是将海产品绞碎、匀浆，冻融两次，离心。收集沉淀另用；将上清液调PH值至7，放置数分钟再离心，取上清液入透析袋，浓缩5～8倍，再离心；上清液DEAE-52柱，以PH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱，目的物在0.09～0.11M区间。收集目的物，透析、除盐、除菌，冻干保存。
将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥即可提取副产物壳聚糖。
本发明制备的表皮生长因子(EGF)，原料来源丰富、工艺流程简单、低成本高产率，其目的物表皮生长因子(EGF)达到电泳纯，社会效益和经济效益相当可观，副产物壳聚糖系天然高分子多糖，药用价值很高，具有预防病毒感染、降低血清和肝脏中胆固醇的作用，并具有防腐和抗癌等作用，在食品业上有广泛的应用价值。
本发明以虾头、虾壳体为制备原料叙述如下将虾头、虾壳体绞碎，加两倍体积抽提缓冲液进行匀浆，冻融两次，离心。收集沉淀另用；将上清液调PH值至7，放置10分钟再离心，取上清液入透析袋，浓缩5～8倍，再离心；上清液DEAE-52柱，以PH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱，缓冲液浓度0.1M。收集目的物，透析、除盐、除菌，冻干保存。
(EGF)得率为0.1mg/以上。
将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥，即可提取副产物壳聚糖。
权利要求
1.一种用海产品及其废弃物制备表皮生长因子(EGF)的方法，其特征在于将海产品及其废弃物绞碎、匀浆，冻融，离心，收集沉淀另用；将上清液调PH值至7，放置数分钟再离心，取上清液入透析袋，浓缩5～8倍，再离心；上清液DEAE-52柱，以PH5.6的醋酸缓冲液作梯度洗脱，目的物在0.09～0.11M区间。收集目的物，透析、除盐、除菌，冻干保存。
2.根据权利要求1所速的一种用海产品及其废弃物制备表皮生长因子(EGF)的方法，其特征在于将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥即可提取副产物壳聚糖。
全文摘要
一种用海产品及废弃物制备表皮生长因子的方法,属于生物化学领域,方法是将海产品绞碎、匀浆,冻融,离心,收集沉淀另用;上清液调pH值至7,放置数分钟再离心,取上清液入透析袋浓缩,再离心;上清液再以醋酸缓冲液作梯度洗脱,收集目的物透析、除盐、除菌,冻干保存,将收集的沉淀消化、清洗、脱钙、漂白、粉碎、干燥即可提取副产物壳聚糖,本发明原料丰富、工艺简单、低成本高产率,其目的物达到电泳纯,社会效益和经济效益极为可观。
文档编号C07K14/435GK1222526SQ9811370
公开日1999年7月14日 申请日期1998年1月4日 优先权日1998年1月4日
发明者刘荣秀, 刘加利, 周东雨 申请人:刘荣秀