专利名称：用以生产微胶囊的生物可降解复合材料的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种生物可降解聚合复合材料，用以生产能装诸如食品、药物和免疫原等任何物质或能装油类、色料、酶等工程技术材料的微胶囊。
背景技术：
为了使液体或固体物质免受外部影响，采用微粒或胶囊形式加以保护，对于各种不同的应用领域，例如食品工业、药剂学和工程技术，都具有重要意义。微粒的物理、化学和生物特性取决于●生产工艺(干燥喷雾法，凝聚层形成法(koazeivation)，挤出法(Extrusion)，封闭法(乳化剂法和分散剂法)，共聚合法，通过超临界气体超微粉化)，●所使用的基质、包皮/胶囊材料(不同化合和混合比的单、二和多糖，蛋白质(Proteine)，聚氨基酸(Polyaminosaeuren)，聚羧酸(Polycarbonsaeuren)，聚(丙交酯共乙交酯)(poly(lactid-co-glycolid))，丙烯酸酯(Acrylate)，多元醇及其共聚物，脂质体，硅酸酯(Silikat)等。
●可能的表面改性(免疫球蛋白(Immunglobuline)，植物血凝素(Lektine)，聚(乙二醇)(Poly(ethylenglycol))，GM1神经节苷脂(Gangliosid)，药理学有效化合物)。
当今的技术发展趋势一方面是生产小型胶囊和微粒的工艺，另一方面是为不断扩大的应用领域寻找新的胶囊材料。
特别是，为了指向目标把药物释放出来，正在寻找这样的解决办法，即既能可靠地保护有效物质不受外界的影响，又能作为运输工具把有效物质输送到预定的作用区域，然后在目的地把有效物质释放出来。
根据美国专利US-A5,700,486了解到，构成胶囊的制药学成份中的生物可降解聚合物或二元共聚物可用来控制药理学有效物质的释放。其中，被引用的成份完全是均聚物和二元共聚物的物理混合物，其混合含量在胶囊配制过程之前是可变的。这种生物可降解聚合物的缺点是，物质既不能指向目标释放，也不能通过规定的酶的作用释放。
美国专利US-A5,686,113描述了在水溶液中微胶囊的形成。所采用的生物可降解胶囊材料是阴离子聚合物或其盐类与一种氨基官能化单体的混合物，其中，在配制微胶囊过程中形成反应生成物。这种混合物的缺点在于，微胶囊的生成反应不能同时在含水和不含水的系统中完成。利用所述表面改性，微粒虽然可以有选择地与一定的配体结合，但胶囊壁不可能在结合部位发生特效溶解。
发明内容
本发明的任务在于，找到适当的生物可降解成份，技术上能用简单的方法生产并能装任何物质的微胶囊，而且，既能使诸如油类、色料、酶、药物、免疫原、核酸等各种物质暂时与周围环境分离，又能适合于指向目标输送和有控制地释放药理学有效物质。
有一种聚合物复合材料令人惊异地适合于作为胶囊壁材料，它是一种均匀的反应生成物，并能支配亚结构之间的共价结合，同时所采用的成份中至少有一种成份具有亲水性。这种复合材料允许用固体的或溶解的材料在含水和不含水的系统中形成微胶囊。
根据本发明的生物可降解聚合物只与规定的配体结合，并且仅在已知因素的影响下分解为亚单元。新型的聚合物可用于各种不同的应用场合。
可以生产这样的胶囊材料，这种材料根据使用的目的与靶细胞特效结合，能被靶细胞吸收，或者能在细胞表面或细胞内部溶解。不可降解或难降解物质与通过特定的酶特效裂解的材料(复合材料)发生化合的这一基本概念可以用于极端不同的生物和工程技术领域，将创造新型的药物运载体系。有目的地表面改性和选择只要通过适合本体的和病原体的酶才裂解的分割部位，就可能在病理学反应标本的位点上达到特别高的有效物质浓度。通过-使用这种新型材料，-微粒度的变化(nm-μm)，-在应用不同复合材料条件下形成多层胶囊壁结构，-通过“配制芯层-壳层胶囊”或共聚合反应采用不同的微胶囊生产工艺，可采用下列一般化学式的复合材料R1n-P1-(Q-P2)1-R2m式中相同或不同高分子结构的P1和P2，最好由聚酯、聚酰胺或多糖类构成。
R1和R2相当于相同或不同的端基或保护基，或者更准确地说，受体分子或基因。
i，n和m在自然数范围内，个别情况下可取0或1。
Q相当于一个具有亲水特性的至少是双官能的结构，由多元醇、聚酰胺和聚酯类得出，作为胶囊壁材料使用，为了裂解亚结构R、P之间和/或Q内部的结合，它有一个酶识别和/或分割部位。
对于P1和P2而言，特别优先考虑使用带有羟基羧酸及其盐或酯的结构要素的聚合物。最为重要的是聚酯，例如聚乙醇酸交酯，聚交酯，聚(羟基奶油酸)或由此产生的(二元)共聚物，多糖，如聚半乳糖醛酸或藻酸。端基或保护基R1和/或R2是酰基、烷基或烷氧基羰基。在另一实施变型中，R1和/或R2是标志基因、受体分子或另外一种与结构特效结合的分子，最好由低肽物类、蛋白质、糖蛋白和低核苷酸构成。一般可取的受体分子是外源凝集素，受体配体或抗体。
特别适合于作为结构要素Q的是由单糖、二糖和多糖得出的化合物和在一定情况下支配氨基或羰基的化合物，或适合于由二肽、低聚肽或多肽得出的化合物。结构要素Q最好具有酶识别和分割部位，它最好还有二糖或多糖，或带有特定蛋白酶分割部位的低聚肽。
特别可取的是，由复合材料构成的混合物用作为配制胶囊的材料，其中i＝0或i＝1。
根据本发明，采用符合本发明的复合材料，并使物质，例如矿物油之类的有害物质，与周围环境暂时分离，生产出微胶囊。
使用符合本发明的带有不同标志基因或受体分子R1和/或R2的复合材料，其优点在于用它们识别细胞内和细胞外结构。由于使用复合材料以及由于经过分子识别而系住了一个标志基因，因而可以实现目标定向运载，并实现有目的地释放物质，把在免疫学上和/或药理学/毒性上有效的物质释放到作用部位。
利用符合本发明的复合材料，在有机溶剂或含水乳状液中，根据已知的工艺，例如通过配制芯层-壳层胶囊的工艺，可以生产能装任何物质，例如能装食品类、药剂调制或技术产品或添加剂的微胶囊。可采用的复合材料可以取自下面的表1。
表1符合本发明的复合材料R1n-P1-(Q-P2)1-R2m)2(实施例1-11)实施 R1R2P1)1P2)1Q)1n i m例号1 OAc OAcPLA2000PLA2000 Lys-Lys 1 1 12 OAc OAcPLA2000PLA2000 His-His 1 1 13 COOH COOH PLA17000 PLA PLA170001 1 117000 |H-Lys-Cys-Thr-Cys-Cys-Ala-OH4 COOH COOH PGUS PGUS Lys-Lys 1 1 15 COOH COOH PGUS PGUS His-His 1 1 16 NH2 COOH PGlu PGlu His-His 1 1 -7 OAc OAcPLA2000PLA2000 Lactose(乳糖) 1 1 18 OAc OAc PLA17000 PLA Lactose(乳糖) 1 1 1170009 OHOHPLA2000 PLA2000 Dextran(葡聚糖)1 1 110Lektin)1Lektin)1MS-PLA2000 - - 1 0 111BAS)1BAS)1MS-PLA2000 - - 1 0 11)在给出的结构要素中没有考虑形式上被替代的氢原子或终端基。2)一般的化学式不反映同分异构区的存在。
图1是根据实施例12添加和不添加酶(β半乳糖苷酶)时微胶囊中兔免疫球蛋白G的释放情况。
图2是根据实施例12微胶囊中兔免疫球蛋白G的释放与用PLA17000构成的模拟微胶囊的比较。
图3是根据实施例16添加和不添加酶(β半乳糖苷酶)时微胶囊中苋菜红的释放情况。
具体实施例方式
实施例1由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和双赖氨酸(Dilysin)构成的复合材料一次将EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(2ml乙腈中122mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。反应混合物常温下在超声浴器中活化30分钟。将H-Lys-Lys-OH·2HCl溶液(2ml水中80.3mg)添加到活化的混合物，并在50℃的温度下将整个沉积物搅拌2小时。然后，将反应混合物在真空中浓缩到约10ml。接下来用30ml的乙醇/水(v/v50/50)洗涤残留的油。将形成的固体物进行离心分离(5000转/分，5分钟)，用20ml的水洗涤，再次进行离心分离，并在真空中干燥。
红外光谱3342，3335(NH)，1759(酯)，1647(酰胺)1H-NMRδ＝1.4-1.61(m，CH3)，2.58-3.27(m，CH2)，5.08-5.15(m，CH)，6.58-6.61(m，NH)，8.15-8.17(m，NH)；13C-NMRδ＝14.6，15.5，16 5，17.6，20.4，20.5(CH3，PLA)，25.6，34.9，35.5，36.7(CH2)，39.5，40.9，43.1(CH)，55.6(CH2)，68.9(CH，PLA)，106.5，143.6(CH)，169.5，169.6，169.8，170.3(CO，PLA)，175.0(COOH，PLA)，175.8(COOH)实施例2由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和双组氨酸(Dihistidin)构成的复合材料一次将EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(2ml乙腈中122mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。反应混合物常温下在超声浴器中活化30分钟。将H-His-His-OH·三氟乙酸溶液(2ml水中101.6mg)添加到活化的混合物，并在50℃的温度下将整个沉积物搅拌2小时。然后，将反应混合物在真空中浓缩到约10ml。接下来用30ml的乙醇/水(50/50)洗涤残留的油。将形成的固体物进行离心分离(5000转/分，5分钟)，用20ml的水洗涤，再次进行离心分离，并在真空中干燥。
红外光谱3504，3496(NH)，1759(酯)，1648(酰胺)实施例3由O型氯乙酰基聚交酯(O-Chloracety-polylactid)17000和富含半胱氨酸的肽(cysteinreichen Peptid)构成的复合材料将一H-Lys-Cys-Thr-Cys-Cys-Ala-OH·三氟乙酸溶液(1ml水中25mg)和DBU(20μl)添加到ClAc-PLA17000溶液(50ml乙腈z中1.73g)，并全部在50℃的温度下搅拌3小时。然后，将反应混合物在真空中浓缩到约10ml。再用40ml的乙醇/水(50/50)洗涤残留的油，并小心地将溶液倾析。用30ml的乙醇重复上述过程，并让产品在真空中干燥。
元素分析ber.N0.19；gef.N0.25红外光谱3504(NH)，1751(酯)，1648(酰胺)实施例4由聚半乳糖醛酸(Polygalacturonsaeure)和双赖氨酸(Dilysin)构成的复合材料将BrCN-溶液(35μl，c＝0.1g/l在乙腈中)放在10ml水中稀释，并滴入Na2CO3-缓冲液(100ml)中形成聚半乳糖醛酸(1.25g)溶液。搅拌15分钟后，添加H-Lys-Lys-OH·2HCl(5.335mg)在水(5ml)中的溶液，并在常温下将反应混合物搅拌过夜。用乙醇将制成品析出，进行离心分离(4000转/分，5分钟)，然后冻干。
红外光谱3600-3100(OH，NH)，1606(bs sh，COOH COO-，酰胺)，1098(C-O-C)实施例5由聚半乳糖醛酸(Polygalacturonsaeure)和双组氨酸(Dihistidin)构成的复合材料将BrCN-溶液(35μl，c＝0.1g/l在乙腈中)放在10ml水中稀释，并滴入Na2CO3-缓冲液(100ml)中形成聚半乳糖醛酸(1.25g)溶液。搅拌15分钟后，添加H-His-His-OH·三氟乙酸(6.24mg)在水(5ml)中的溶液，并在常温下将反应混合物搅拌过夜。用乙醇将制成品析出，进行离心分离(4000转/分，5分钟)，然后冻干。
红外光谱3600-3100(OH，NH)，1608(bs sh，COOH COO-，酰胺)，1098(C-O-C)实施例6由聚谷氨酸(Polyglutaminsaeure)和双组氨酸(Dihistidin)构成的复合材料让聚谷氨酸(100mg)混悬在乙腈(10ml)中。添加EDC溶液(1ml水中2.24mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中2.144mg)。混合物在30℃的温度下在超声浴器中活化30分钟。然后添加H-His-His-OH·三氟乙酸(2.4mg)在水(1ml)中的溶液，并在50℃的温度下搅拌2小时。然后进行离心分离(4000转/分，5分钟)出固体物，用5ml的乙醇/水(50/50)洗涤，并重新进行离心分离。用5ml的水重复上述过程。最后将制成品冻干。
红外光谱3342，3287(NH)，1733(CO)，1645(酰胺)实施例7由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和乳糖(Lactose)构成的复合材料一次将EDC溶液(5ml水中960mg)和DMAP溶液(10ml乙腈中610mg)添加到Ac-PLA2000(10g)在乙腈(150ml)中的溶液。反应混合物常温下在超声浴器中活化30分钟。将乳糖溶液(25ml水中1.8g)添加到活化的混合物，并在50℃的温度下搅拌2小时。然后，将反应混合物在真空中浓缩到约20ml。接下来用100ml的水洗涤剩下的残留物，进行离心分离(3500转/分，10分钟)，并在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.13-1.35(m，CH3)，1.45-1.62(m，CH3，PLA)，2.10(s，CH3)，2.57-2.71(m，CH)，3.17(s，CH)，4.30-4.37(m，CH)，5.10-5.19(CH，PLA)；13C-NMRδ＝14.6，16.6，16.7，17.4，20.5(CH3)，39.8，42.77，42.81，43.0(CH)，66.6，68.2，68.5，68.7，68.8，68.9，69.1，69.4(CH)，169.16，169.2，169.3，169.6，169.7，170.3，170.4(C＝O)，175.2(COOH)实施例8由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)17000和乳糖(Lactose)构成的复合材料一次将EDC溶液(1ml水中96mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中61mg)添加到Ac-PLA17000(8.5g)在乙腈(100ml)中的溶液。反应混合物常温下在超声浴器中活化30分钟。将乳糖溶液(5ml水中90mg)添加到活化的混合物，并在50℃的温度下搅拌2小时。然后，将反应混合物在真空中浓缩到约20ml。接下来用100ml的乙醇/水(50/50)洗涤剩下的残留物，并小心地将溶液倾析。用100ml的乙醇/水(50/50)和50ml的乙醇重复以上过程。最后让产品在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.18-1.26(m，CH3)，1.41-1.56(m，CH3，PLA)，1.98(s，CH3)，2.70(s，CH)，3.12(s，CH)，3.68(dd，CH)，4.13-4.21(m，CH)，4.29-4.37(m，CH)，5.06-5.23(CH，PLA)；13C-NMRδ＝14.0，16.6，16.7，18.4，20.5(CH3)，58.3，61.5(CH2)，66.57，66.63，68.9，69.1，69.2，69.4(CH)，169.1，169.2，169.3，169.4，169.5(C＝O)MALDI-TOF-MS证实了结构AcO-PLA-Lactose-PLA-OAc实施例9由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和葡聚糖(Dextran)6000构成的复合材料一次将EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中61mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。将葡聚糖6000(3g)在水中的溶液添加到混合物，并在50℃的温度下将整个沉积物搅拌2小时。然后析出白色的沉淀物，进行离心分离(3000转/分，10分钟)，并用40ml的水洗涤。然后重新离心分离，并让固体物在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.44，1.46(CH3，PLA)，3.04-3.71(m，CH，CH2，葡聚糖)4.66(bd)，5.15-5.22(m，CH，PLA)；13C-NMRδ＝16.7(CH3)，66.2(CH2)，68.9，70.3，70.6，72.0，72.7，73.5，98.4(CH)，169.4(C＝O)实施例10由O型马来酰基聚交酯2000(O-Maleoyl-polylactid)和外源凝集素(Lektin)UEA I构成的复合材料让MS-PLA2000(0.736mg)和EDC(0.269mg)混悬在0.1M MES缓冲溶液(1ml)中，并在常温下在超声浴器中活化30分钟。添加外源凝集素UEAI(10mg)，并将混合物在常温下摇荡2小时。然后将固体物进行离心分离(3000转/分，10分钟)，在水中洗涤两次，并冻干。
实施例11由O型马来酰基聚交酯2000(O-Maleoyl-polylactid)和白蛋白(BSA)(Albumin)构成的复合材料让MS-PLA2000(0.736mg)和EDC(0.269mg)混悬在0.1M MES缓冲溶液(1ml)中，并在常温下在超声浴器中活化30分钟。添加BSA(20mg)，并将混合物在常温下摇荡2小时。然后将固体物进行离心分离(3000转/分，10分钟)，在水中洗涤两次，并冻干。
实施例12根据实施例8的复合材料配制兔免疫球蛋白(Rabbit)G微胶囊通过摇荡让1g冻干的兔免疫球蛋白G制剂(颗粒度1到5μm)混悬在100ml的石油醚(80-100℃)中。在5小时的时间内分10次滴入1g由实施例8的复合材料构成的溶液和5ml丙酮。继续搅拌1小时。沉淀后，过滤混悬液，用20ml的石油醚洗涤，然后吹干。
为了对酶分割部位的作用原理作对比研究，使用聚交酯17000和根据实施例8的相应的复合材料作外壳材料，并作模拟处理。
37℃时在孵化搅拌器中对在PH为7.3的PBS缓冲液中的释放情况进行观测研究。让200mg的微粒混悬在10ml的PBS缓冲液中。为了观测研究酶对微粒外壳稳定性的影响，在加入微粒之前，投入β半乳糖苷酶(20单位)。在30分钟的时间间隔内取出500μl溶液，以5000l/min离心分离5分钟，利用ELISA对浮在表面上的兔免疫球蛋白G含量进行分析。
结果汇集在图1和2中。
实施例13根据实施例7的复合材料配制白蛋白(Albumin)(BSA)微胶囊将1g根据例7的复合材料溶解在10ml的二氯甲烷中。然后将20mg的BSA分散投入500μl的水中。然后以500l/min向乳状液滴入1％的聚乙烯醇溶液300ml。再搅拌30分钟，以1800l/min离心分离5分钟。浮在上面的溶液被分离。微粒与少量的水再次混悬，重新离心分离，然后在真空中干燥。
实施例14借助干燥喷雾法根据实施例7的复合材料配制白蛋白(BSA)微胶囊将400mg的BSA溶解在200ml的水中。其中有20g根据例7的复合材料是这样分散在100ml的二氯甲烷中，即二氯甲烷几乎完全被蒸发，并产生一种稳定的乳状液。然后将乳状液喷雾干燥。
设备条件进口温度93℃，出口温度63-66℃，抽吸器98％，泵10％
实施例15根据实施例7的复合材料配制兔免疫球蛋白(Rabbit)G/PLA17000内核(Kernen)的芯层-壳层胶囊(Core-Shell-Verkapselung)将1g兔免疫球蛋白G/PLA17000内核(模拟实施例12制成，d＝1-10μm)经搅拌混悬在50ml的石油醚(80-100℃)中。再滴入0.05g根据例实施10的复合材料和0.05g的PLA17000热解在2ml丙酮中的溶液。然后继续搅拌1小时。沉淀后，过滤混悬液，用20ml的石油醚洗涤，然后吹干。
再混悬的微粒与有抗乌乐涂层的荧光硅酸酯(Silikat)微粒(d＝800nm)定量粘接。
实施例16根据实施例7的复合材料配制硅酸酯(Silkatpartibeln)微粒(用苋菜红浸染)微胶囊合成硅酸酯(Silikat)微粒(d＝800nm)被作为内核材料使用。将2g硅酸酯(Silikat)微粒放在苋菜红的水溶液(50mg/50ml水)中搅拌10分钟，进行离心分离和干燥。让1g的这种微粒混悬在100ml的石油醚(80-110℃)中。在5小时内分10次滴入1g根据实施例7的复合材料和5ml的丙酮进行。继续搅拌1小时。沉淀后，过滤混悬液，用20ml的石油醚洗涤，然后吹干。
37℃时在孵化搅拌器中对在Ph为7.3的PBS缓冲液中的释放情况进行观测研究。让200mg的微粒混悬在10ml的PBS缓冲液中。为了观测研究酶对微粒外壳稳定性的影响，在加入微粒之前，投入β半乳糖苷酶(20单位)。在30分钟的时间间隔内取出500μl溶液，在波长为520nm时用分光光度计对苋菜红的含量进行分析。
结果汇集在图3中。
权利要求
1.用以生产微胶囊的生物可降解聚合复合材料由固体或溶解物质构成，或由有机溶剂中的添加物或含水乳状液构成，其特征在于，它具有下列一般化学式的聚合成份R1n-P1-(Q-P2)1-R2m式中P1和P2代表相同或不同的高分子结构，R1和R2相当于相同或不同的端基或保护基，或者相当于受体分子或标志基因，i，n和m在自然数范围内，个别情况下可取0或1，以及Q相当于一个具有亲水特性的至少是双官能的结构，由多元醇、聚酰胺和聚酯类得出，同时，为了裂解亚结构R、P之间和/或Q内部的结合，它具有一个酶识别和/或分割部位。
2.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于，P1和P2是具有由聚酯类、聚酰胺/多胺或多糖构成或由羟基羧酸及其盐或酯构成的结构要素的聚合物。
3.根据权利要求2所述的复合材料，其特征在于，聚酯是聚乙醇酸交酯、聚交酯、聚(羟基羧酸)或由此产生的(二元)共聚物。
4.根据权利要求2所述的复合材料，其特征在于，多糖是聚半乳糖醛酸或藻酸。
5.根据权利要求1到5所述的复合材料，其特征在于，端基或保护基R1和/或R2是酰基羰基、烷基羰基或烷氧基羰基。
6.根据权利要求1到5所述的复合材料，其特征在于，R1和/或R2代表标志基因、受体分子或另外一种与结构特效结合的分子，最好由低肽物类、蛋白质、糖蛋白和低核苷酸等物类构成。
7.根据权利要求1到6所述的复合材料，其特征在于，结构要素Q代表一种由单、双和多糖或在一定情况下支配氨基或羰基导出的化合物，或者，Q代表由二肽、低聚肽或多肽导出的化合物。
8.根据权利要求1到7所述的复合材料，其特征在于，结构要素Q是一种可以由酶裂解的分子。
9.根据权利要求8所述的复合材料，其特征在于，结构要素Q含有一个二糖或多糖。
10.根据权利要求8所述复合材料，其特征在于，结构要素Q含有一个带有特定蛋白酶分割部位的低聚肽。
11.根据权利要求1到10所述的复合材料，其特征在于，采用一般化学式的化合物，其中i＝0或i＝1。
12.应用根据权利要求1到11所述的聚合复合材料暂时与周围环境的物质分离。
13.根据权利要求12所述的应用被运用在具有不用酶识别和分割部位的多层壳中。
14.根据权利要求12和13所述的应用是利用不同的标志基因分子或受体分子R1和/或R2。
15.根据权利要求14所述的应用是利用能识别细胞内和/或细胞外结构的不同标志基因分子或受体分子R1和/或R2。
16.根据权利要求12和15所述的对复合材料的应用是为了目标定向运载和释放在免疫学上和/或药理学/毒性上有效的物质。
17.用固体或溶解物质或添加物生产微胶囊的方法，其特征在于，把按照 1到11所述的复合材料放在有机溶剂中溶解，或由此制成含水的乳状液，并按照已知的技术配制胶囊。
全文摘要
本发明涉及一种生物可降解聚合复合材料,用以生产能装诸如食品、药物和免疫原等任何物质或能装油类、色料、酶等工程技术材料的微胶囊。根据本发明,可降解复合材料具有一般化学式R
文档编号C08G69/00GK1339964SQ0080389
公开日2002年3月13日 申请日期2000年2月20日 优先权日1999年2月19日
发明者M·泰勒, H·W·海里西, J·泰勒, U·迈尔 申请人:生化研究股份公司