专利名称：一种制备中、低分子量硫酸软骨素的方法及所得产物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中、低分子量硫酸软骨素的制备方法及所得产物，具体地讲，本发明涉及一种分子量在2,000-30,000道尔顿之间的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法及所得产物。
背景技术：
硫酸软骨素是一种以猪、牛、羊等动物的软骨组织和鲨鱼等水产品的软骨为原材料，利用生化提取工艺技术制得的大分子的酸性粘多糖类。硫酸软骨素的钠盐、钾盐、钙盐、锌盐等广泛应用于医药、保健产品、食品、化妆品、宠物饲料等，例如硫酸软骨素可以作为降血脂药，用于临床治疗高血脂症，而硫酸软骨素A钠注射液则具有降低血脂、抗动脉粥样斑块形成、抗凝以及降低机体耗氧量的作用，可以用于治疗动脉粥样硬化疾病、心绞痛、高血脂症等。硫酸软骨素具有多种生理功能，在维持组织和免疫机能上起着重要作用，可以用于防治冠心病、治疗偏头痛等神经性疼痛、改善老年性关节功能退化等。
现在市售的硫酸软骨素药品主要有口服固体剂型(片剂、胶囊剂)、注射剂、滴眼剂等药品。所有药品采用的原料药，均为分子量波动范围较大的硫酸软骨素A与硫酸软骨素C的水溶性聚合体，或者为硫酸软骨素A、硫酸软骨素C的钠盐。
硫酸软骨素产品通常是以一种平均分子量约40,000-50,000道尔顿的水溶性聚合物形式存在。其中，硫酸以醚键连接在重复结合起来的二糖上。硫酸软骨素产品通常为硫酸软骨素A和硫酸软骨素C这两种主要构型的混合物。
硫酸软骨素的生产方法主要有三种酸降解、碱降解、酶解法，以其钠盐较为常见，还可根据需要，生产硫酸软骨素钾盐、钙盐或锌盐，如CN 99112553.3和CN 99112554.1中公开了硫酸软骨素及其生产方法。不同工艺方法生产的硫酸软骨素分子量不同，一般在20,000-50,000道尔顿之间。普通硫酸软骨素药品存在分子量波动大、口服吸收差、生物利用度低、疗效不稳定等缺点。但迄今为止，对于硫酸软骨素药品的分子量范围，仍没有明确的国家药品标准要求。
一般来说，低分子量硫酸软骨素是指平均分子量小于10,000道尔顿的硫酸软骨素；中分子量硫酸软骨素则是指平均分子量在10,000-30,000道尔顿范围的硫酸软骨素；普通分子量硫酸软骨素产品的平均分子量均大于30,000道尔顿。表1给出了各种市售硫酸软骨素原料的平均分子量。最近，我们用GPC法(中国药典2000年版二部附录VH)检测了国内不同公司生产的普通分子量硫酸软骨素产品十四份，包括牛、猪、鲨鱼硫酸软骨素，平均分子量在47,500-85,000道尔顿之间，我们很容易得出这样的结论目前我国生产并主要出口国际市场的普通硫分子量酸软骨素产品，普遍存在分子量波动大、口服吸收差、生物利用度低、疗效不稳定等缺点。
表1市售硫酸软骨素原料的平均分子量样品编号 软骨来源及纯度 平均分子量1牛，90％ 69,4002鲨鱼，90％85,7003牛，90％ 57,6004牛，90％ 59,9005牛，90％ 54,8006鲨鱼，90％83,4007牛，90％ 59,9008牛，90％ 62,5009牛，85％ 45,70010 牛，90％ 51,10011 牛，90％ 73,60012 牛，95％ 51,10013 鲨鱼，90％47,50014 牛，90％ 62,400药用硫酸软骨素原料的生产工艺和技术，通常必须得到国家药品行政管理部门的正式批准，所生产的硫酸软骨素药用注射原料的平均分子量在5,000-50,000道尔顿之间，硫酸软骨素A的平均分子量为50,000道尔顿，硫酸软骨素C的平均分子量为25,000道尔顿。现有的硫酸软骨素A钠注射剂等药品仍然由分子量波动范围较大的硫酸软骨素原料药制备而得。
硫酸软骨素的生物活性随分子量不同而各异，其药理活性与分子量有着密切的关系。美国专利US3,405,120已证明，中、低分子量的硫酸软骨素的药理活性较普通分子量的软骨素强，对防治动脉粥样硬化、风湿性炎症和伤口愈合等具有更好的疗效。国外已经有低分子量硫酸软骨素的制备方法，包括酸水解法(美国专利US3,405,120)、离子交换树脂法(日本特许70-04734、74-30817)和酶解法(日本专利申请平8-518573)等。例如，美国专利US3,405,120中公开的酸水解法可以用于制备低分子量的硫酸软骨素，该方法通过对酸水解过程中的水解温度、水解时间、酸的浓度、水解的pH值等条件进行控制，而得到低分子量的硫酸软骨素。但是，一方面，该专利并未公开中分子量的硫酸软骨素制备过程中所需的酸水解条件；另一方面，在该专利所公开的方法步骤中，进行结晶沉淀之前没有脱除杂蛋白的步骤，而且其分子量的控制完全是由反应条件所决定的，实际上任何反应条件下都不能保证不生成其它分子量的硫酸软骨素，所以该专利所制备的产品纯度不够。
现代医学实验已经证实，分子量较小的硫酸软骨素比分子量较大的硫酸软骨素，更易被人体吸收，如口服给药后，分子量较小的硫酸软骨素较容易被胃肠吸收。美国马里兰大学以Caco-2细胞为吸收模型，对本班牙Bioiberica公司生产的平均分子量为16,900、8,000、4,000道尔顿的原料样品进行了实验研究(Spring 2000，Vol.3，No.1JANA)。代表胃肠吸收率的细胞膜渗透系数(PermeabilityCoefficient)分另为10.1×106cm/sec、12.5×10-6cm/sec和16.2×10-6cm/sec。而目前市售的几种普通分子量硫酸软骨素原料的细胞膜渗透系数则分别为0.00、1.03、3.63×10-6cm/sec。这种实验的结果表明，中、低分子量硫酸软骨素产品的体内吸收均明显优于普通分子量的产品，分子量越小吸收率越高。
迄今为止，尚没有一种既可以随心所欲地调节分子量大小、又能充分保证质量纯度的、适于制备中、低分子量硫酸软骨素的方法。
发明内容
本发明目的之一是提供一种制备中、低分子量硫酸软骨素的方法，该方法可以制备生物利用度高、纯度高的低分子量的硫酸软骨素或其盐，而且所得产品的分子量大小可以根据需要进行相对精确地调节。
在本发明中，制备中、低分子量硫酸软骨素的方法包括如下步骤(2)将普通分子量的硫酸软骨素进行酸水解；(3)上述酸水解后的产物进行碱中和，调节至pH＝8-11的碱性条件下，然后进行离心分离，除去杂蛋白的沉淀；(4)将上述步骤(2)所得的上清液调pH至中性，然后采用超滤膜进行单级超滤或多级超滤，截留除去大分子量的硫酸软骨素和杂质；(5)将步骤(3)所得的滤液用纳滤膜进行纳滤浓缩，截留脱除平均分子量小于2,000道尔顿的硫酸软骨素和杂质；(6)将步骤(4)所得的浓缩液进行喷雾干燥或者加入乙醇进行结晶沉淀，得到中、低分子量硫酸软骨素；本发明中，所说的硫酸软骨素可以是选自于硫酸软骨素A、硫酸软骨素A的钠盐、硫酸软骨素A的钾盐、硫酸软骨素A的钙盐、硫酸软骨素A的锌盐、硫酸软骨素A的铁盐、硫酸软骨素A的镁盐、硫酸软骨素A的铝盐、硫酸软骨素B、硫酸软骨素C、硫酸软骨素C的钠盐、硫酸软骨素C的钾盐、硫酸软骨素C的钙盐、硫酸软骨素C的锌盐、硫酸软骨素C的铁盐、硫酸软骨素C的镁盐和硫酸软骨素C中的一种或其中几种的混合物，优选是选自于硫酸软骨素A、硫酸软骨素A的钠盐、硫酸软骨素A的钾盐、硫酸软骨素A的钙盐、硫酸软骨素C、硫酸软骨素C的钠盐、硫酸软骨素C的钾盐和硫酸软骨素C的钙盐中的一种或其中几种的混合物。
上述方法中，步骤(1)中的普通分子量的硫酸软骨素可以是市售的硫酸软骨素。如果采用的是市售的硫酸软骨素粗品，则可以直接进行酸水解。当然，也可以直接由动物软骨组织进行制备，先通过碱液提取、酶解等方法得到硫酸软骨素粗品，再进行酸水解。这样，在酸水解之前可以包括碱液提取和/或酶解等步骤，但这些步骤不是必需的。
上述步骤(1)中酸水解所使用的酸可以是选自于盐酸、硫酸、硝酸和草酸中的一种，而且最好选用酸度较高的水解条件，例如选用浓度为0.1-5N的酸。酸水解的作用是得到中、低分子量的硫酸软骨素。如果用市售硫酸软骨素进行酸水解，则酸水解温度可以控制在40-90℃范围内，优选为50-80℃。水解时间一般可以控制在1-28小时内，优选为2-8小时。温度太高时水解反应的速度过快，不利于中分子量硫酸软骨素的生成。因此，如果目的产物是中分子量硫酸软骨素，则应选择相对较低的水解温度和相对较短的反应时间；如果目的产物是低分子量硫酸软骨素，则应选择相对较高的水解温度和相对较长的反应时间。
实际上，步骤(1)除了采用酸水解法以外，还可以采用其他方法，例如离子交换树脂法、酶解法等。
上述步骤(2)中，先用碱性物质将步骤(1)酸水解产物的pH值调至弱酸性范围可以终止酸水解反应，所用的碱性物质可以是氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钙、碳酸氢钠等，优选为碳酸氢钠、碳酸钠等弱碱；然后，继续调节至pH＝8-11，保温放置1-2小时，待碱性蛋白沉淀析出后，然后进行离心分离，除去杂蛋白的沉淀，尤其是除去碱性杂蛋白的沉淀。离心分离时，优选使用连续流离心机进行杂蛋白的分离。与传统的滤布、马槽过滤法相比，这种分离方式的效果好、损耗低、生产效率高。
上述步骤(3)中，超滤的作用是除去低分子量硫酸软骨素中的大分子杂质，例如蛋白质、多糖等，并截留分子量不合要求的硫酸软骨素。所谓的超滤(简称UF)是指以压力为推动力，利用超滤膜的不同孔径对液体进行分离的物理筛分过程。超滤的截留分子量(CWCO)一般为6,000到50万。实际上，超滤和纳滤(NF)都属于膜分离技术，即利用分离膜对混合物中各组分的选择渗透作用性能的差异，以外界能量或化学位差为推动力对双组分或多组分混合的气体或液体进行分离、分级、提纯和富集的方法。超滤使用的滤膜能截留不同分子量大小的杂质，截留的平均分子量范围在3,000-50,000道尔顿左右。由于中、低分子量硫酸软骨素的黏度相对较大，对超滤膜的污染较为严重。因此，优选采用聚丙烯腈膜、硫化聚砜膜等。
上述步骤(3)中的超滤可以是单级超滤或者多级超滤。优选采用多级超滤，如三级超滤，因为多级超滤可以更有效地起到除杂和截留大分子量硫酸软骨素的作用。
步骤(3)中所述的超滤膜可以选择截留分子量在2,000-30,000道尔顿之间的超滤膜。
如果目的产物是中分子量硫酸软骨素，则步骤(3)中应选择截留分子量在10,000-30,000道尔顿之间的超滤膜。例如，生产20,000-30,000道尔顿之间的硫酸软骨素时，可以选则截留分子量为20,000道尔顿的超滤膜和截留分子量为30,000道尔顿的超滤膜，分别进行超滤，使得经过步骤(3)之后，滤液中的硫酸软骨素基本上为20,000-30,000道尔顿的中分子量硫酸软骨素。
如果目的产物是低分子量硫酸软骨素，则步骤(3)中应选择截留分子量在2,000-10,000道尔顿之间的超滤膜。例如，生产3,000-6,000道尔顿之间的硫酸软骨素时，可以选则截留分子量为3,000道尔顿的超滤膜和截留分子量为6,000道尔顿的超滤膜，分别进行超滤，使得经过步骤(3)之后，滤液中的硫酸软骨素基本上为3,000-6,000道尔顿的中分子量硫酸软骨素。
所以，只要能够得到各种截留分子量的超滤膜，那么就可以精确地制备各种分子量范围的中、低分子量的硫酸软骨素。利用截留分子量不同的超滤膜，可以分离出不同分子量范围的中、低分子量的硫酸软骨素产品，例如可以制备分子量分别为2,000-4,000、5,000-7,000、10,000-14,000、18,000-20,000、24,000-26,000道尔顿的硫酸软骨素。
上述步骤(4)中的纳滤可以起到浓缩、除去小分子杂质如盐类的作用。所谓纳滤(简称NF)是指分离膜的孔径处于纳米级，适宜于分离分子量在200～2,000、分子尺寸约为1nm的溶解组分的膜工艺。NF膜分离需要的跨膜压差一般为0.5～2.0MPa，比用反渗透膜达到同样的渗透能量所必需施加的压差低0.5～3MPa。根据操作压力和分离界限，可以定性地将NF排在反渗透和超滤之间，也有人把NF称为″低压反渗透″或″疏松反渗透″。NF技术发展很快，NF膜组件于80年代中期已经商品化。纳滤的截留能力大于超滤，能截留平均分子量在200-2,000道尔顿左右的物质。与超滤和反渗透相比，纳滤的优点是既能截留透过超滤膜的那部分小分子量的有机物，又能透析反渗透膜所截留的无机盐——即浓缩与脱盐同步进行；而且在同等的外加压力下，纳滤的通量要比反渗透大得多；当通量一定时，纳滤所需的压力要比反渗透的低得多。所以用纳滤方法替代反渗透方法，“浓缩”过程可更有效、快速地进行，并达到较大的“浓缩”倍数。单纯采用超滤，即使是多级超滤也只能起到浓缩的作用而达不到除盐的目的，并且浓缩的效率低。因此，本发明采用纳滤的方法进行浓缩、除盐，要比超滤更为有效、简便、快捷，大大提高了工业化生产的效率。
优选地，上述步骤(4)中的纳滤浓缩是截留脱除平均分子量小于2,000道尔顿的硫酸软骨素和杂质，尤其是除去无机盐和水分。
上述步骤(5)中，通过纳滤得到的低分子量硫酸软骨素浓缩液，可以直接干燥，如采用喷雾法进行干燥；也可以在浓缩液中添加乙醇(2-8倍)等有机溶剂进行结晶沉淀，然后进行干燥。如果选用乙醇法进行沉淀，则乙醇的浓度优选为95％。干燥时优选采用真空干燥。与传统的乙醇沉淀、结晶、干燥工序相比，喷雾干燥法具有生产效率高、损耗低、产品无乙醇残留、水分易于控制、便于工业化生产、便于进行制剂半成品的深加工等优点。
本发明的另一个目的是提供一种平均分子量在10,000-30,000道尔顿之间的中分子量的硫酸软骨素产品，该产品采用以上所述的方法进行制备，可以用于制备各种中分子量硫酸软骨素的口服剂型，例如片剂、胶囊、口服液和颗粒剂。该口服剂型应该包含中分子量硫酸软骨素、中分子量硫酸软骨素的盐、药物中可以接受的辅料的一种或几种，还可以与其它无配伍禁忌的药物制成复方制剂。
本发明的又一个目的是提供一种平均分子量在2,000-10,000道尔顿之间的低分子量的硫酸软骨素产品，该产品采用以上所述的方法进行制备。更优选地，本发明可以采用以上所述的方法制备平均分子量在2,000-8,000道尔顿之间的低分子量的硫酸软骨素产品。本发明所得的低分子量硫酸软骨素纯度高、分子量分布窄，不仅可以用于制备各种口服剂型，也可以用于制备各种注射剂型。
本发明的方法采用超滤膜、纳滤膜法分级纯化硫酸软骨素，具有高效、节能、无污染等特点，所得产品纯度高，而且可以随意控制产品的分子量分布。
以下结合实施例，来进一步说明本发明，但本发明不局限于这些实施例，任何在本发明基本精神上的改进或替代，仍属于本发明权利要求书中所要求保护的范围。
具体实施例方式
实施例1中分子量硫酸软骨素的制备将4.5升去离子水置于玻璃烧杯中，水浴加热至70℃，加入250克市售硫酸软骨素(平均分子量48,000道尔顿)，搅拌溶解，溶液加入36％盐酸145亳升，加入去离子水至5升，使溶液的盐酸度约为0.3N。保温并搅拌反应6小时后，迅速冷却，加入10％氢氧化钠水溶液，使溶液的pH在10.5左右，然后用离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用截留分子量10,000道尔顿的超滤元件(聚砜中空纤维超滤膜，上海一鸣过滤技术有限公司)进行三级超滤，然后用纳滤元件(国家海洋局杭州水处理技术开发中心)进行浓缩，浓缩液加入95％乙醇结晶，60℃真空干燥，得到215.6克白色分子量硫酸软骨素(平均分子量11,200)。
实施例2中分子量硫酸软骨素的制备将4.5升去离子水置于玻璃杯中，水浴加热至80℃，加入300克市售硫酸软骨素(平均分子量48,000道尔顿)粗品，搅拌溶解，溶液加入45克草酸，加入去离子水至5升，使溶液的草酸浓度约为0.1N。保温并搅拌反应8小时后，迅速冷却，加入50克碳酸钙，使溶液的pH在9.5左右，然后用离心机除去杂蛋白的沉淀和草酸钙沉淀。所得的上清液，用截留分子量20,000道尔顿的超滤膜过滤，纳滤膜进行浓缩，浓缩液加入95％乙醇结晶，60℃真空干燥，得到276.8克白色分子量硫酸软骨素(平均分子量16,300)。
实施例3中分子量硫酸软骨素的制备将650升去离子水置于还夹层反应罐内，加热到73℃，加入40公斤市售普通分子量硫酸软骨素(平均分子量48,000道尔顿)粗品，搅拌溶解，溶液加入36％盐酸11.2升，使溶液的盐酸浓度约为0.2N。保温并搅拌反应4小时后，迅速冷却，加入7.0公斤碳酸钠，使溶液的pH在10.5左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用截留分子量20,000道尔顿的超滤膜过滤，纳滤膜进行浓缩，浓缩液进行喷雾干燥，得到37公斤白色中分子量硫酸软骨素(平均分子量19,400)实施例4中分子量硫酸软骨素的制备将经粉碎的新鲜动物软骨(牛气管)40公斤置夹层反应锅内，加入100升20％氢氧化钠溶液，40℃搅拌提取4小时后过滤，残渣用适量的碱液再次提取，合并两次滤液。用HCl调节pH至8.0-9.0，加入0.5％胰酶，45-48℃水解4-6小时，HCl调节pH至6.5-7.0，加热至70-80℃，加入白陶土或滑石粉、活性炭搅拌吸附30分钟，过滤。将上述滤液用纳滤设备浓缩，使硫酸软骨素的浓度为5％左右，加入适量浓盐酸，使水解液的酸度为0.3N，在75℃条件下，搅拌水解5小时，用碳酸钠调节pH至10.0左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用截留分子量为20,000的超滤装置进行三级超滤，纳滤浓缩、除盐，进行喷雾干燥，得到平均分子量为13,500道尔顿中分子量硫酸软骨素产品1.05公斤。
实施例5低分子量硫酸软骨素的制备将1,300升去离子水置于夹层反应罐内，加热至65℃，加入30公斤市售硫酸软骨素(平均分子量59,000道尔顿)粗品，搅拌溶解，溶液加入36％盐酸26升，加入去离子水至1500升，使溶液的盐酸浓度约为0.2N。保温并搅拌反应10小时后，迅速冷却，加入4％氢氧化钠水溶液，使溶液的pH值在9.0左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用超滤膜进行过滤，再用纳滤膜进行浓缩，浓缩液进行喷雾干燥，得到27.6公斤白色低分子量硫酸软骨素(平均分子量3700道尔顿)。
实施例5低分子量硫酸软骨素的制备将1,300升去离子水置于夹层反应罐内，加热至80℃，加入30公斤市售硫酸软骨素(平均分子量51,000道尔顿)粗品，搅拌溶解，溶液加入13.5公斤草酸，加入去离子水至1500升，使溶液的盐酸浓度约为0.1N。保温并搅拌反应12小时后，迅速冷却，加入16公斤碳酸钙，分离草酸钙沉淀后，使溶液的pH值在9.5左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用超滤膜过滤，纳滤膜进行浓缩，浓缩液加入3倍量的95％乙醇，结晶，干燥，得到22.8公斤白色低分子量硫酸软骨素(平均分子量6300道尔顿)。
实施例7低分子量硫酸软骨素的制备将650升去离子水置于夹层反应罐内，加热至73℃，加入40公斤市售硫酸软骨素(平均分子量51,000道尔顿)粗品，搅拌溶解，溶液加入36％盐酸11.2升，加入去离子水至1,500升，使溶液的盐酸浓度约为0.2N。保温并搅拌反应8.5小时后，迅速冷却，加入6.8公斤碳酸钠，使溶液的pH值在10.0左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液用超滤膜过滤，纳滤膜进行浓缩，浓缩液进行喷雾干燥，得到37公斤白色低分子量硫酸软骨素(平均分子量4400道尔顿)。
实施例8低分子量硫酸软骨素的制备按常规方法由粉碎的动物软骨，经碱提取、酸中和、酶水解后，加入36％的盐酸，使溶液的酸度在0.1-5N，在35-95℃的条件下，酸水解3-12小时，加碱使溶液的pH值在10.5左右，然后用连续流离心机除去杂蛋白的沉淀。所得的上清液进行超滤，除去大分子杂质，再进行纳滤浓缩后，最后进行喷雾干燥，得到平均分子量小于10,000道尔顿的低分子量硫酸软骨素产品。
权利要求
1.一种中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，所说的中、低分子量硫酸软骨素是平均分子量在2,000-30,000道尔顿范围内的硫酸软骨素，所说的方法包括如下步骤(1)将普通分子量的硫酸软骨素进行酸水解；(2)将上述酸水解后的产物进行碱中和，调节至pH＝8-11的碱性条件下，然后进行离心分离，除去杂蛋白的沉淀；(3)将上述步骤(2)所得的上清液调pH至中性，然后采用超滤膜进行单级超滤或多级超滤，截留除去大分子量的硫酸软骨素和杂质；(1)将步骤(3)所得的滤液用纳滤膜进行纳滤浓缩，截留截留脱除平均分子量小于2,000道尔顿的硫酸软骨素和杂质；(4)将步骤(4)所得的浓缩液进行喷雾干燥或者加入乙醇进行结晶沉淀，得到中、低分子量的硫酸软骨素。
2.如权利要求1所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的普通分子量的硫酸软骨素是市售的硫酸软骨素或者是直接由动物软骨组织制得的。
3.如权利要求1或2所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(1)中酸水解所使用的酸是选自于盐酸、硫酸、硝酸和草酸中的一种，其浓度为0.1-5N，酸水解的温度控制在40-90℃的范围内。
4.如权利要求1或2所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的离心分离是在连续流离心机中进行的。
5.如权利要求1或2所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所速的超滤是采用超滤膜进行三级超滤。
6.如权利要求1或2所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的超滤膜的截留的分子量在2,000-30,000道尔顿之间。
7.如权利要求1或2所述的中、低分子量硫酸软骨素的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述的纳滤浓缩是采用纳滤膜截留脱除平均分子量小于1,500道尔顿的硫酸软骨素和杂质；
8.一种按照权利要求1-7之一所述方法制得的中分子量硫酸软骨素，该中分子量硫酸软骨素的平均分子量在10,000-30,000道尔顿之间。
9.一种按照权利要求1-7之一所述方法制得的低分子量硫酸软骨素，该低分子量硫酸软骨素的平均分子量在2,000-10,000道尔顿之间。
10.如权利要求9所述的低分子量硫酸软骨素，其特征在于，所述低分子量硫酸软骨素的平均分子量在2,000-8,000道尔顿之间。
全文摘要
本发明公开了一种中、低分子量硫酸软骨素的制备方法及所制得的硫酸软骨素。本发明的制备方法主要包括以下步骤酸水解、碱中和、分离、超滤、纳滤、喷雾干燥或者加入乙醇进行结晶沉淀。本发明采用超滤和纳滤的方法，基本上可以随心所欲地制备2,000－30,000道尔顿范围内的、任何分子量分布的中、低分子量硫酸软骨素；而且本发明的连续流分离技术和喷雾干燥技术具有高效、节能、无污染等特点，所得的产品纯度高，而且便于人体的吸收和利用。
文档编号C08B37/00GK1513883SQ20031011930
公开日2004年7月21日 申请日期2003年12月3日 优先权日2003年5月7日
发明者汤毅, 汤 毅 申请人:汤毅, 汤 毅