专利名称：含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体及其制法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一类含有二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯的大分子配体及其顺磁性金属配合物以及它们的制法。本发明也涉及磁共振医学影像诊断技术。
背景技术：
磁共振成像是一种先进的医学影像诊断技术，它是利用体液或组织中水分子或富氢小分子的氢核的共振来成像，它取决于被检部位不同区域的氢核的浓度、含量及来源等的差别处理。这一技术是可以用来检查肿瘤、癌症和脑、肝、心脏等器官和组织的异常等。磁共振成像造影剂是磁共振成像诊断中的用于增强造影、提高影像对比度的一类化合物。现在临床常用的磁共振造影剂有Gd-DTPA(D.H.Carr et al，Lancet，1984，1，484)及非离子型造影剂Gd(DTPA-BMA)(W.P.Cacheris et al，Magn.Reson.Imag.，1990，8，467)、肝胆选择性造影剂Gd(DTPA-EOB)(H.J.Weinmann et al，Magn.Reson.Med.，1991，22，233)，上述造影剂是多氨多羧酸类造影剂。另外，大环多氨多羧酸类造影剂Gd-DOTA(M.Magerstade et al，Magn.Reson.Med.，1986，3，808)也已运用于临床。
目前，国际上磁共振成像造影剂的研究方向主要集中在器官、组织、靶向性的造影剂以及具有更高弛豫率的造影剂，从而实现对于特定的器官或组织靶向成像，提高成像对比度、清晰度，造影效果好，用药量低，毒性小。同时，改善小分子造影剂在体内存留时间单一的情况，发展在体内存留时间不同的造影剂，以满足不同诊断和手术的需要。
通过高分子化制备的大分子造影剂是将小分子磁共振成像造影剂连接到具有生物相容性的大分子载体上，如葡聚糖、聚赖氨酸，具有分子尺寸较大、通过毛细血管速率较慢、分子的旋转速率较低、弛豫率较高的特点。借助某些分子的特殊生化性质，可以使大分子造影剂富集于特定组织，从而实现靶向成像，提高成像对比度和清晰度。然而，由于大分子造影剂相对于小分子磁共振成像造影剂，在体内的存留时间很长，增加了毒性，在临床运用上受到限制。
发明内容
本发明的目的是拟根据一类生物可降解性的聚酯具有在生物体内可降解的特点，对造影剂配体进行结构改造，在配体主链中引入可降解的聚酯，以期得到具有较低毒性、非离子型分子结构、较好的弛豫性能的新一类实用磁共振成像造影剂。
为实现本发明的目的所采取的技术措施如下。
一种含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体，具有如下分子结构通式-{-R[(CH2)mCOO]xI[OCO(CH2)m]y-}n-式1其中m为1-6的自然数；x为自然数，y为0或自然数，n为自然数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k、(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数；R具有如下式2代表的化学结构式 式2其中M可以是H、氨离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；A可以是氧原子、NH、NH(CH2)kNH、NH(CH2CH2O)kNH或O(CH2)kNH。
上述的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的相对分子质量为5000～20000。
上述的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的制法是将由己内酯、丙交酯或乙交酯为原料制备的端羟基或端氨基的大分子单体在二甲基亚砜(DMSO)溶液中，在三乙胺、或三乙胺和催化量的二甲氨基吡啶存在下，与等物质量的二亚乙基三胺五乙酸双酸酐反应，得到含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式3式代表的结构式
式3其中M可以是H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数；x和n为自然数，y为0或自然数。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式4代表的结构式 式4其中M可以为H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k是1-6的自然数；x和n为自然数，y是0或自然数。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式5代表的结构式 式5其中M可以是H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；
I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数，x和n为自然数，y为0或自然数。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式6代表的结构式 式6其中M可以是H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数，x和n为自然数，y为0或自然数。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式7代表的结构式 式7其中M可以为H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数，x和n为自然数，y为0或自然数。
根据本发明的技术方案，在式1所代表的配体中，优选的配体具有式8代表的结构式
式8其中M可以为H、胺离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k或(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数，x和n为自然数，y为0或自然数。
上述的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体可以与原子序数为21～29、或57～70的过渡元素或稀土元素的二价或三价离子组成含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体的顺磁性金属配合物(以下简称为可降解大分子配体金属配合物)。其中优选的元素是Mn或Gd。
上述的大分子配体与上述的过渡元素或稀土元素的离子组成的配合物的制备方法是将上述的大分子配体与上述的过渡元素或稀土元素二价或三价离子的氧化物、碳酸盐、醋酸盐、氢氧化物或氯化物在水相或极性有机溶剂中反应，即得到大分子配体与这些金属离子组成的可降解大分子配体顺磁性金属配合物。反应温度可以根据不同反应物而改变，一般反应温度范围为20℃～120℃，优选的温度是20℃～80℃。极性有机溶剂可以是醇类，二甲基甲酰胺、二甲亚砜、吡啶。水溶性的顺磁性金属配合物通常制成浓度为0.1～0.5M，PH值为6.5～8.0的水溶液。脂溶性的顺磁性金属配合物通常将其与磷脂等生物分子配成一定浓度的脂质体。对于形成配合物总电荷数不为零的情况，可用生理相容性的阳离子特别是Na+、Ca2+、Cu2+、MH4+或有机衍生物如N-甲基葡萄胺、氨基酸、吗啉、醇胺或用生理相容性的阴离子比如氯离子、硫酸根、磷酸根或有机酸根平衡其所带电荷，调节溶液的PH值在6.5到8.0范围内。反应产物可用常规方法比如重结晶、柱色谱、离子交换色谱、透析等方法纯化。
上述的可降解大分子配体顺磁性金属配合物可以用作磁共振造影剂。
上述的磁共振造影剂可以制成肠道给药制剂或口服剂，也可以制成非肠给药制剂如注射剂。其中注射剂可用氯化钠注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液或蒸馏水或其它在《中华人民共和国药典》上规定的载体将本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物或其盐配制成浓度为0.001或5.0M的溶液(其中较适宜的浓度是0.1到0.5M)，并用生理相容性的酸(如盐酸)或生理相容性的碱(包括N-甲基葡萄糖胺、有机胺、氨基酸等有机碱或氨水、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠等无机碱)调节PH值在6.5到8.0之间。通常在制剂中添加相当于配合物量的0.1到15％的相应配体、或其他生理相容性的盐、或者钙、镁、锌的配合物或这些配合物的生理相容性盐，以保证顺磁性金属离子(如Gd3+)被配体完全配合。另外还可以添加抗氧化剂如抗坏血酸或其钠、钙盐等不影响制剂的配制、贮存和使用的添加剂。另一种适宜的方法是将有效量的本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物与适当过量(相当于所说配合物量的0.1～15％)相当配体或其盐、或者钙、镁、铜、锌配合物或这些配合物的盐及PH调节剂、抗氧剂或其它所需成份配制成干的固体剂，即粉剂或注射用粉剂，使用前用蒸馏水或氯水钠注射稀释到所需浓度。口服制剂可有许多形式，比如片剂、粉剂、胶囊剂、散剂、糖浆剂、水剂。例如将有效量的顺磁性配合物制成水剂，可添加稳定剂、缓冲剂、矫味剂、抗氧剂、表面活性剂。
本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物造影剂可按常规方法使用，这种方法包括施予诊断对象如人体或其它哺乳动物体一种上述可降解大分子配体顺磁性金属配合物，然后进行磁共振成像分析，得出增强的磁共振成像图。本发明的造影剂的给药量可因顺磁性配合物的种类和作为诊断对象的组织或器官以及诊断设备类型的不同而有很大的变化，一般，注射剂用量为诊断主体的人或其它哺乳动物体的每公斤体重0.001～5.0mmol，优选的是0.05～3.0mmol。
本发明中的可降解的大分子配体还可与重金属离子如铅、铋、金等形成金属配合物，用于超声波成像或X-射线CT，或与放射性金属离子形成放射性金属配合物用作放射治疗药或闪烁成像的造影剂。
与已有技术相比较，本发明已达到的技术效果本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物用作磁共振成像造影剂保持了相应的多氨多羧配合物的结构特点，因而具有良好的稳定性、水溶性和驰豫率；同时对靶向细胞如淋巴结内的巨噬细胞、网状内皮细胞具有较好的亲和性，能被靶向细胞选择摄取，因此本发明中这类造影剂具有较好的选择性或靶向性，对提高早期诊断水平具有较好的效果；本发明的这类造影剂是体内能生物相容的药物，生物可降解性的聚酯具有在生物体内可快速降解的特点，具有较低毒性、非离子型分子结构、较好的弛豫性能等如下特点(1)弛豫时间将含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的顺磁性金属配合物(以下简称为大分子配体顺磁性金属配合物)及Gd-DTPA分别溶于二次蒸馏水配成1～3mmol Gd/1浓度的稀溶液，调节PH为7-8，以返转恢复法在Bruker XP300 NMR谱仪(300MHZ，7T)上测定溶液中质子的自旋一晶格弛豫时间T1。并求算出相应的弛豫率R1值，可被用作评价造影剂增强效果的主要指标。与Gd-DTPA相比较，大分子配体顺磁性金属配合物的弛豫率较高。(大于5.0L×mmol-1×sec-1)(2)新西兰大耳白兔磁共振成像实验磁共振成像实验使用1.5T(Gyroscan Intera MasterT15，Philips公司，荷兰)磁共振成像仪，采用冠状位的3D梯度-回波序列，T1加权成像方式，其中TR＝6.0ms，TE＝1.65ms，flip angle＝40°，FOV＝450-500mm)。新西兰大耳白兔肌肉注射盐酸氯胺酮(20mg/kg)和氟哌利多25mg/kg)全麻后，再从白兔足部脚趾间皮下注射大分子配体顺磁性金属配合物(实施例1中用5克乙二醇制备)水溶液(0.05-2.0ml/kg)，随即进行MR扫描3D成像。对照实验使用0.1mmol/kg剂量的欧乃影(Gd-DTPA-BMA，奈科明爱尔兰有限公司生产)水溶液作造影剂。实验结果表明注射大分子配体顺磁性金属配合物的新西兰大耳白兔的淋巴结的图像信号强于注射Gd-DTPA-BMA后所得的图像信号，清晰度和对比度明显提高，淋巴结和淋巴管得以充分显示，(见图2-1至图2-7)。
(3)小白鼠体内分布实验将大分子配体顺磁性金属配合物(实施例1中用5克乙二醇制备)经尾静脉注射到小白鼠体内，每隔一定时间，处死一组小鼠(处死前迅速从眼球部位取血)，取出心脏、肺、肝脏、肾、小肠、胸腺、肿瘤、骨，试去表面血，称量湿重，定量称取部分组织，加入浓硝酸，灼烧后配置称水溶液，用ICP-AES测量顺磁性金属的含量。结果表明，本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物与现有的大分子造影剂相比，本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物能较快速通过肾脏、肝脏从体内排出，体内存留时间较短(600分钟)。
(4)本发明的可降解大分子配体顺磁性金属配合物与现有的小分子造影剂相比，有足够的在器官内存留时间，便于显影与诊断(见图2-1至图2-7)
图1为几种优选的配体的1H-NMR谱图。
图2为新西兰大耳白兔淋巴结磁共振成像图像，其中图2-1为新西兰大白兔注射0.1M商品化小分子造影剂欧乃影后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。随时间延迟，腘窝淋巴结信号强度逐步下降，所显示淋巴结逐渐减小，并于延迟扫描120分钟几乎消失。图2-2为新西兰大白兔注射0.1M poly-DTPA-PCL-diol后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。图2-3为新西兰大白兔注射0.1M poly-DTPA-PLA-diol后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。图2-4为新西兰大白兔注射0.1Mpoly-DTPA-PCL-EOEA后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。图2-5为新西兰大白兔注射0.1Mpoly-DTPA-PCL-DAB后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。图2-6为新西兰大白兔注射0.1Mpoly-DTPA-PLA-EOEA后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。图2-7为新西兰大白兔注射0.1Mpoly-DTPA-PLA-DAB后15’、30’、120’淋巴造影三维MIP图像。延迟扫描至120分钟，腘窝淋巴结信号强度及大小未见明显变化。
图3新西兰大耳白兔淋巴结磁共振成像信号强度随时间变化曲线·Gd-poly(DTPA-PCL-diol)，□Gd-poly(DTPA-PLA-DAB)，▲Gd-DTPA-BMA具体实施方式
下面结合具体的实施例，对本发明的技术方案作进一步描述实施例1.
聚己内酯-DTPA酯共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PCL-diol)a)α，ω-二羟基遥爪聚己内酯离聚物的合成1.将2g乙二醇、20gε-己内酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的平均相对分子质量为800。上述反应将乙二醇用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为360。
2.将2g己二醇、20gε-己内酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的平均相对分子质量为1500。
上述反应将己二醇用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为550。
3.将2g二(2-羟基乙基)胺、20gε-己内酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的平均相对分子质量为1200。
上述反应将二(2-羟基乙基)胺用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为370。
4.将2g聚乙二醇200、20gε-己内酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的平均相对分子质量为2500。
上述反应将聚乙二醇200用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为800。
b)聚己内酯-DTPA酯共聚物(poly-DTPA-PCL-diol)配体的合成(式3)将上述a的1、2、3和4所得的8种产物分别与等物质的量的DTPA双酸酐，三乙胺及催化剂量的二甲氨基吡啶溶于DMSO中，在90℃下反应48小时，，得到淡黄色溶液。体系中加入200ml乙酸乙酯，有粘稠胶状物析出，将上层清液倾出，并用乙酸乙酯(200ml)洗涤3次。将粗产物在室温下真空抽去溶剂1小时，溶于150ml水中，用分子量2,000以上的透析袋，在二次蒸馏水中透析。用0.45μm的滤膜过滤后将清液浓缩至原体积的一半，冷冻干燥8小时后得到8种海绵状固体产品，测定的平均相对分子质量为5000-20000。产率70-80％。其中用本实施例1.a的产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1 poly-DTPA-PCL-diol。
c)钆配合物Gd-poly-DTPA-PCL-diol的合成将上述b所得的8种产物分别溶于二次蒸馏水中，再将微过量的GdCl3水溶液滴加到反应体系中，在室温下反应30分钟。用分子量2,000以上的透析袋，在二次蒸馏水中透析，至透析外液检测不到Gd3+、Cl-。用0.45μm的滤膜过滤后将清液浓缩至原体积的一半，冷冻干燥8小时后得到海绵状固体产品，测定的分子量为5000-20000。产率80-90％。
实施例2.
聚丙交酯-DTPA共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PLA-diol)a)α，ω-二羟基遥爪聚丙交酯离聚物的合成1.2g乙二醇、20g丙交酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完成后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的分子量为800。
上述反应将乙二醇用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为360。
2.2g 己二醇、20g丙交酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的平均相对分子质量为1500。
上述反应将己二醇用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为550。
3.2g二(2-羟基乙基)胺、20g丙交酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的分子量为1200。
上述反应将二(2-羟基乙基)胺用量改成5g，得到产物的平均相对分子质量为370。
4.2g聚乙二醇200、20g丙交酯和催化剂量的辛酸亚锡于DMF中于90℃反应16小时，反应完后冷却，在0℃的乙醚中沉淀，干燥得到白色固体，测定的分子量为800-2500。
b)聚丙交酯-DTPA酯共聚物(poly-DTPA-PLA-diol)配体的合成(式4)将20mmol上述a的1、2、3和4所得的8种产物分别与等物质的量的DTPA双酸酐，三乙胺及催化剂量的二甲氨基吡啶溶于DMF中，在90℃下反应48小时，，得到淡黄色溶液。体系中加入200ml乙酸乙酯，有粘稠胶状物析出，将上层清液倾出，并用乙酸乙酯(200ml)洗涤3次。将粗产物在室温下真空抽去溶剂1小时，溶于150ml水中，用分子量2,000以上的透析袋，在二次蒸馏水中透析。用0.45μm的滤膜过滤后将清液浓缩至原体积的一半，冷冻干燥8小时后得到种海绵状固体产品，测定的分子量为5000-20000。产率70-80％。其中用本实施例2.a产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1 Gd-poly-DTPA-PLA-diol。
c)钆配合物Gd-poly-DTPA-PLA-diol的合成类似实施例1中c步骤，10mmol上述b中8种产物代表实施例1b中的8种产物参与反应，测定的平均相对分子质量为5000-20000，产率80-90％实施例3.
二(4-氨基丁基)-聚己内酯-DTPA共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PCL-DAB)a)α，ω-二羟基遥爪聚己内酯离聚物的合成同实施例1中的a步骤。
b)α，ω-二对甲苯磺酸聚己内酯的合成10mmol上述a中的8种产物和10ml三乙胺、0.1g二甲氨基吡啶，溶于50ml DMF中，将5.6g对甲苯磺酰氯的DMF溶液在室温下滴加入上述溶液中，于室温下反应16小时。过滤掉沉淀物后将反应混合物在-10℃的乙醚中沉淀，并用乙醚洗涤，过滤后收集8种产物，真空干燥24小时，产率80-90％。
c)α，ω-二氨基丁基-聚己内酯酰胺的合成分别将5ml丁二胺溶于DMF中，并缓慢滴加入10mmol上述b中的8种产物的DMF中，反应混合物在50-70℃反应16小时，冷却至室温，在-10℃的乙醚中沉淀，并用乙醚洗涤，过滤后收集8种产物，真空干燥24小时，产率80-90％。
d)α，ω-二(4-氨基丁基)聚己内酯-DTPA酰胺共聚物(poly-DTPA-PCL-DAB)配体的合成(式5，式中k＝4)分别将5mmol上述c中的8种产物溶解在100ml DMSO中，加入干燥的三乙胺和DTPA二酸酐，将此分散液在室温下搅拌48小时，得到淡黄色溶液。在体系中加入200ml乙酸乙酯，有粘稠胶状物析出，将上层清液倾出，胶状物用乙酸乙酯(200ml)洗涤3次。将上述胶状物粗产物在室温下真空抽去溶剂1小时，然后溶于150ml水中，用相对分子质量2000以上的透析袋，在二次蒸馏水中透析，产物用0.45μm的滤膜过滤后将清液浓缩至原体积的一半，冷冻干燥8小时后得到海绵状固体产品，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率70-80％。其中用本实施例3.a产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1 Gd-poly-DTPA-PCL-DAB。
e)钆配合物Gd-poly-DTPA-PCL-DAB的合成类似实施例3中f步骤，4mmol上述d中8种产物代表实施例3e中的8种产物与氧化钆在120℃反应，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率80-90％实施例4.
二(2-氨基乙基)乙二醇-聚己内酯-DTPA共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PCL-EOEA)a)α，ω-二羟基遥爪聚己内酯离聚物的合成同实施例1中a步骤。
b)α，ω-二对甲苯磺酸聚己内酯的合成同实施例3中b步骤。
c)α，ω-二氨基乙基乙二醇醚-聚己内酯酰胺的合成类似实施例3中c步骤，用二(2-氨基乙基)乙二醇醚代表实施例3b中丁二胺参与反应，产率分别为90-95％。
d)α，ω-二氨基乙基乙二醇聚己内酯-DTPA酰胺共聚物(poly-DTPA-PCL-EOEA)配体的合成(式6)类似实施例3中d步骤，5mmol上述c中8种产物代表实施例3c中的8种产物参与反应，分别测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率70-80％。其中用本实施例4.a的产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1 Gd-poly-DTPA-PCL-EOEA。
e)钆配合物Gd-poly-DTPA-PCL-BAl的合成类似实施例3中f步骤，4mmol上述d中8种产物代表实施例3e中的8种产物与醋酸钆反应，分别测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率80-90％。
实施例5.
二(4-氨基丁基)聚丙交酯-DTPA共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PLA-DAB)a)α，ω-二羟基遥爪聚丙交酯离聚物的合成同实施例2中a步骤。
b)α，ω-二对甲苯磺酸聚丙交酯的合成类似实施例3中b步骤，5mmol上述a步骤8种产物代表实施例3a中的8种产物参与反应，产率分别为90-95％。
c)α，ω-二(4-氨基丁基)-聚丙交酯酰胺的合成类似实施例3中c步骤，5mmol上述b步骤中8种产物代表实施例3b步骤中的8种产物参与反应，产率分别为70-80％。
d)α，ω-二(4-氨基丁基)聚丙交酯-DTPA酰胺共聚物(poly-DTPA-PLA-DAB)配体的合成(式7)
类似实施例3中d步骤，5mmol上述c中8种产物代表实施例3c中的8种产物参与反应，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率70-80％。其中用本实施例5.a的产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1Gd-poly-DTPA-PLA-DAB。
e)钆配合物Gd-poly-DTPA-PLA-DAB的合成类似实施例3中e步骤，4mmol上述d中8种产物代表实施例3d中的8种产物参与反应，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率80-90％。
实施例6.
二(2-氨基乙基)乙二醇-聚丙交酯-DTPA共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-PLA-EOEA)a)α，ω-二羟基遥爪聚丙交酯离聚物的合成同实施例2的a步骤。
b)α，ω-二对甲苯磺酸聚丙交酯的合成同实施例5的b步骤。
c)α，ω二氨基丁基聚丙交酯酰胺的合成类似实施例5中c步骤，用二(2-氨基乙基)乙二醇醚代表实施例5的c步骤中丁二胺参与反应，产率分别为90-95％。
d)α，ω-二(2-氨基乙基)乙二醇聚丙交酯-DTPA酰胺共聚物(poly-DTPA-PLA-EOEA)配体的合成(式8)类似实施例3中d步骤，5mmol上述c中8种产物代表实施例3中c步骤中的8产物参与反应，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率70-80％。其中用本实施例1.a的产物制备的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体的核磁共振图谱见图1 Gd-poly-DTPA-PLA-EOEA。
e)钆配合物Gd-poly-DTPA-PLA-EOEA的合成类似实施例3中e，用5mmol上述d中8种产物代表实施例3d中8种产物参与反应，测定所得产物的平均相对分子质量为5000-20000，产率80-90％。
实施例7.
将上述的实施例1～6制得的钆配合物配制成0.1M的葡萄糖注射液，给兔子注射，注射量为每kg体重0.1mmol(相当于0.2ml/kg体重)的钆配合物，进行核磁共振造影成像，其结果见图2。具体方法说明如下取标准饲料喂养的新西兰大白兔。动物用50mg氯胺酮，20mg氟哌利多肌肉注射麻醉，颈后仰卧位固定。兔双侧后肢足背部剃毛并用酒精仔细消毒，以1.0mL皮试注射针，分别沿1、2、3趾蹼处进行穿刺。穿刺深度位于皮内，必须严格控制这一穿刺深度。注射器内含有0.1M的造影剂0.2mL。采用间接淋巴管造影技术(Indirect lymphography)，在30秒内，完成注射(每足注射造影剂共0.6mL)。
核磁共振成像扫描使用标准矩形头线圈以获得最佳信噪比。梯度场20mT/m，切换率120mT/(m.ms)。采用3D小角度激发快速梯度序列冠状位扫描，TR6.0ms，TE1.65ms，翻转角40°，视野(FOV)450～500mm，矩阵512×512，层厚1.0cm，三维块内共90层。在注射造影剂前先平扫，以便与造影后图象进行对照。在注射造影剂并按摩后的5、10、20、30、60、90、120分钟分别进行扫描，所获原始图象均应用减影技术消除淋巴管周围背景，应用最大信号强度投影(MIP)进行淋巴管重建，以获得三维图象。在扫描过程中实验动物于检查床上呈仰卧位并保持位置不变。
权利要求
1.一种含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体，其特征是具有如下分子结构通式-{-R[(CH2)mCOO]xI[OCO(CH2)m]y-}n-式1其中m为1-6的自然数；x为自然数，y为0或自然数，n为自然数；I代表(CH2)k、(CH2)kNH(CH2)k、(CH2CH2O)kCH2CH2，其中k为1-6的自然数；R具有如下式2代表的化学结构式 式2其中M可以是H、氨离子或其有机衍生物或者为正1价金属离子或多价金属离子的分数；A可以是氧原子、NH、NH(CH2)kNH、NH(CH2CH2O)kNH或O(CH2)kNH。
2.根据权利要求1所述的含二亚乙基三胺五乙酸的可生物降解聚酯大分子配体，其特征是它们的相对分子质量为5000～20000，具有水溶性或脂溶性。
3.一种制备权利要求1所述的大分子配体的方法，其特征是将由己内酯、丙交酯或乙交酯为原料制备的端羟基或端氨基的遥爪离聚物在二甲基亚砜溶液中，在三乙胺、或三乙胺和催化量的二甲氨基吡啶存在下，与等物质的量的二亚乙基三胺五乙酸双酸酐反应，得到含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体。
4.根据权利要求1所述的大分子配体，其特征是它们与原子序数为21～29、或57～70的过渡元素或稀土元素的二价或三价离子组成含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体的顺磁性金属配合物。
5.根据权利要求1所述的大分子配体，其特征是它们与锰或钆的二价或三价离子组成含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体的顺磁性金属配合物。
6.根据权利要求4或5所述的大分子配体的顺磁性金属配合物，其特征是用作磁共振造影增强剂。
全文摘要
一种含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体，具有如图式1分子结构通式。R具有如图式2代表的化学结构式。上述的大分子配体可以与原子序数为21～29、或57～70的过渡元素或稀土元素的二价或三价离子组成含可生物降解聚酯的二亚乙基三胺五乙酸大分子配体的顺磁性金属配合物。它们可以用作为磁共振造影增强剂。本发明公开了其制法。
文档编号C08G63/91GK1687181SQ200510038930
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月18日 优先权日2005年4月18日
发明者蒋锡群, 郭舰, 周正扬, 杨昌正 申请人:南京大学